KR102098264B1 - 노근 및 율초 추출물을 유효성분으로 하는 지방간, 고지혈증 및 변비 예방, 개선 또는 치료용 조성물 - Google Patents

노근 및 율초 추출물을 유효성분으로 하는 지방간, 고지혈증 및 변비 예방, 개선 또는 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 노근 및 율초 추출물을 유효성분으로 하는 지방간 질환 및 변비 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 노근 추출물 및 율초 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간, 고지혈증 및 변비로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물 또는 지방간, 고지혈증 및 변비로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 노근 및 율초 추출물 또는 노근, 율초 및 목과 혼합물을 포함하는 조성물을 이용하여 지방간, 고지혈증을 예방 또는 치료하거나, 변비를 예방 또는 치료하는 데에 유용하게 이용될 수 있다.

Description

노근 및 율초 추출물을 유효성분으로 하는 지방간, 고지혈증 및 변비 예방, 개선 또는 치료용 조성물{Composition for preventing, improving or treating fatty liver diseases, hyperlipidemia and constipation comprising Phragmitis Rhizoma and Humulus japonicus extract}
본 발명은 노근 및 율초 추출물을 유효성분으로 하는 지방간 고지혈증 및 변비 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 노근 추출물 및 율초 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간, 고지혈증 및 변비로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물 또는 지방간, 고지혈증 및 변비로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
지방간은 간 세포 속에 지방이 축적된 상태를 의미하며, 의학적으로 지방이 전체 간 무게의 5% 이상을 초과하는 병적 상태를 의미하는데, 이를 포함하는 간질환은 선진국 40-50대 성인 인구의 사망 원인에서 암 다음으로 심각한 질환으로 인정된다. 선진국을 포함한 주요 국가의 인구 중 30%는 지방간 증상을 보이고 있으며, 이들 중 20%는 간경변증으로 진행하게 되며, 간경변증 환자의 약 절반은 진단 후 10년 이내에 간질환으로 사망한다.
지방간은 크게 과음으로 인한 알코올성 지방간 질환(alcoholic fatty liver disease)과 비만, 당뇨병, 고지혈증, 약물 등으로 인한 비알코올성 지방간 질환(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)으로 나눌 수 있다.
비알코올성 지방간 질환은 과량의 알코올을 섭취하지 않은 환자에게서 나타나는 염증 반응을 동반하지 않는 단순 지방간, 및 이에 의해 진전되며, 간세포의 염증반응, 간섬유화 및 간경화를 포함하는 넓은 범위의 질환을 의미한다. 비알코올성 지방간 질환은 원인에 따라 원발성과 속발성으로 나뉘는데 원발성은 대사 증후군의 특징인 고지혈, 당뇨, 또는 비만 등에 의해 발생하며, 속발성은 영양적 원인(급격한 체중 감소, 기아, 장 우회술), 다양한 약물, 독성 물질(독버섯, 세균 독소), 대사성 원인 및 기타 요인에 의해 발생하는 것으로 알려져 있다. 원발성 요인인 대사증후군의 중요한 특징인 당뇨 및 비만과 관련된 비알코올성 지방간 질환의 발생률은 당뇨 환자의 약 50%, 비만 환자의 약 76%, 비만한 당뇨 환자의 거의 대부분에서 발생하는 것으로 알려져있다(Gupte P et al., 2004). 또한 알라닌 아미노트랜스퍼라제(Alanine aminotransferase, ALT)의 수준이 증가된 당뇨 및 비만환자에서 생검을 실시한 결과 지방간염의 발생률이 18-36%로 나타났다(Braillon A et al., 1985).
현재까지 비알코올성 지방간 질환에 대한 확립된 치료법은 없는데 이는 비알코올성 지방간 질환이 당뇨병, 비만, 관상동맥 질환, 생활 습관 등의 다양한 요소와 연관되어 나타나기 때문이다. 몇 가지 당뇨 또는 비만 치료 약제 투여에 의한 지방간 질환에 대한 효과가 보고되었는데 경구용 비만치료제로 사용되고 있는 올리스탓(Orlistat)의 경우 지방간염 환자에서 간의 조직학적 향상을 유도했다는 보고(Hussein et al., 2007)가 있으며, 메트포민(Metformin)이 당뇨를 동반하지 않는 비알코올성 지방간 환자에서 혈중 간 효소 수치, 간의 괴사성 염증 및 섬유화를 감소시켰다는 보고가 있다(Bugianesi et al., 2005). 또한 PPAR(peroxisome proliferatoractivated receptor)의 작용물질(agonist)인 티아졸리딘디온(Thiazolidinedione, TZD) 계열의 약물은 간과 근육에서의 지방 축적을 억제하고, 비알코올성 지방간 질환의 동물 모델에서 간에 대해 직접적인 항 섬유화 작용을 나타내는 것으로 보고된 바 있다(Galli A et al., 2002). 그러나 현재 지방간을 약물학적으로 치료하는데 유용한 약제는 거의 없는 상태이며 운동과 식이요법만이 권장되고 있기 때문에 신규한 지방간 치료제의 개발이 요구된다.
한편, 변비는 건강할 때에 비하여 변이 굳고 건조하며, 배변의 횟수와 변의 양이 상당히 감소되어 배변시 불쾌감이나 생리적 장애를 수반하는 증상이 있는 경우를 말한다. 이러한 변비증상을 개선하고 치료하기 위하여 섬유질이 많은 식품, 예를 들면 고구마, 녹황색 채소류, 곤약, 과일류 및 육류 등의 섭취가 권장되고 있으나, 식사주기가 일정치 않은 현대인들, 특히 다이어트가 잦아 식사횟수가 적은 젊은 여성들이 이러한 식품을 섭취하기는 매우 어려운 현실이다. 이에, 변비치료 효과가 뛰어난 한약제 및 생약제를 사용함으로써 부작용이 없고 손쉽게 음용할 수 있는 차 및 음료에 대한 요구가 증가되어 왔다.
이에 본 발명자들은 지방간, 고지혈증 및 변비에 대한 예방 또는 치료 효과가 높으며, 부작용이 적은 새로운 물질을 개발하기 위하여 다양한 천연재료를 이용한 연구를 수행한 결과, 노근 및 율초를 혼합하여 제조한 추출물이 지방간, 고지혈증 및 변비에 치료 효과가 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
따라서 본 발명의 목적은 노근 추출물 및 율초 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간, 고지혈증 및 변비로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 노근 추출물 및 율초 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간, 고지혈증 및 변비로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 노근 추출물 및 율초 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간, 고지혈증 및 변비로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 노근 추출물 및 율초 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간, 고지혈증 및 변비로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
이하 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 노근 추출물 및 율초 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간, 고지혈증 및 변비로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 ‘노근(蘆根)’은 아직 이삭이 피지 않은 시기의 갈대로서, 성질은 차고 맛은 달다. 노근은 폐열을 내려 가슴이 답답하고 편안치 않고 열이 나며 진액이 말라 갈증이 나고 입안이 타는 증상을 치료하며, 위열을 내려 구역질, 메스꺼움, 구토를 멎게 하는 효능이 있고, 폐열로 인하 해수, 가래, 폐결핵, 폐농양에 쓰며 생선독을 해독시키는 효능이 있다. 또한 약리작용으로 이뇨작용, 해열작용, 간보호작용, 조혈기능 강화작용 등이 있다고 보고된 바 있다.
본 발명의 ‘율초’는 한삼덩굴 Humulus japonicus Siebold et Zuccarini(뽕나무과 Moraceae)의 지상부로, 주로 잎이 달린 덩굴성 줄기로 되어 있고 열매가 달려 있는 것도 있다. 율초는 각지의 개울가와 길옆, 산기슭에서 자라며, 여름철 잎이 무성할 때 전초를 베어 그늘에서 말려 사용한다. 맛은 달고 쓰며 찬 성질을 가지고 있다. 율초는 혈압 강하 작용, 이뇨 작용, 그람양성균에 대한 항균 작용이 있다고 밝혀졌으며, 예로부터, 열이 나고 가슴이 답답하며 갈증이 나는 데, 학질, 폐결핵으로 열이 나는 데, 소화 장애, 급성 위장염, 부종, 설사, 이질, 방광염, 요도염, 임증(淋證), 요로결석, 고혈압, 부스럼, 헌데 등에 사용한다.
본 발명의 ‘지방간(fatty liver) 질환’은 정상 간에 비해 많은 지방이 축적된 상태를 의미한다. 지방간은 크게 과음으로 인한 알코올성 지방간과 비만, 당뇨병, 고지혈증, 약물 등으로 인한 비알코올성 지방간으로 나눌 수 있다. 알코올성 지방간은 알코올을 많이 섭취하게 되면 간에서 지방 합성이 촉진되고 정상적인 에너지 대사가 이루어지지 않아 발생하게 된다. 비알코올성 지방간은 비만, 성인형 당뇨병, 고지혈증 등의 대사증후군과 연관되어 나타나는데 과도한 열량을 계속 섭취하게 되면 체내 지방세포 및 간에 지방이 축적되고 증가된 지방에서 간에 해로운 여러 가지 물질(사이토카인)이 분비되어 발생하게 되며, 가벼운 지방간에서부터 만성 간염, 간경변증에 이르는 다양한 병을 포함한다. 바람직하게는 비알코올성 지방간 질환 또는 단순성 지방간인 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 ‘고지혈증(hyperlipidemia)’은 지질대사의 이상으로 혈청 내 콜레스테롤(cholesterol)과 중성지방을 운반하는 지방단백이 증가하여 주요 지질(cholesterol, triglyceride, phospholipid, free fatty acid)의 혈관 내 함량이 현저하게 증가된 상태를 말하는 것으로 총 cholesterol 수치가 240 mg/dl 이상, triglyceride 치가 200 mg/dl 이상인 경우 고지혈증으로 진단한다. 고지혈증의 원인으로는, 유전적인 요인으로 혈액 내에 특정 지질이 증가하여 고지혈증이 발생하는 경우가 많지만, 비만, 당뇨병, 술, 스트레스, 흡연 등과 같은 환경적인 요인에 의해서도 발생할 수 있다.
본 발명의 ‘변비(constipation)’는 배변 시 무리한 힘이 필요하거나 대변이 과도하게 딱딱하게 굳은 경우, 불완전 배변감(후중감) 또는 항문직장의 폐쇄감이 있는 경우, 일주일에 배변 횟수가 3번 미만인 경우 등을 말하며, 변비의 원인으로는 이차성 원인인 기질적 국소성 질환, 전신적 질환, 약제 사용과 원발성 원인인 대장의 운동기능 이상이나 항문직장의 기능 이상이 있다. 변비의 90% 이상이 이차성 원인이 밝혀지지 않는 원발성 원인에 의한 변비이며, 이를 기능성 또는 특발성 변비라고 한다.
본 발명은 상기 조성물의 노근 및 율초의 중량비율이 1:0.5~5인 것을 특징으로 하는 지방간, 고지혈증 및 변비로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다. 보다 바람직하게는 노근 및 율초의 중량비율이 1:1~3일 수 있으며, 가장 바람직하게는 노근 및 율초의 중량비율이 1:1일 수 있다.
본 발명의 실시예에서 노근 및 율초 추출물은 1:1-3의 중량비율로 혼합하였고, 총량이 500mg/kg이 되도록 제조하여 사용하였다.
본 발명은 상기 조성물에 목과 추출물을 추가로 더 포함하는 것을 특징으로 하는 지방간, 고지혈증 및 변비로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다. 보다 바람직하게는 노근, 율초 및 목과의 중량비율이 1:1:1일 수 있다.
본 발명의 ‘목과(木瓜)’는 장미과의 모과나무(Chaenomeles sinensis(Thouin) Koehne)의 익은 열매로 만든 약재로서, 성질은 따뜻하고 맛은 약간 시다. 목과는 풍습성 사지마비동통, 근육이 굴신이 되지 않을 때, 하체마비경련, 근육이 땅겨서 목이 돌아가지 않을 때, 각기병, 토사곽란, 소화불량 등에 사용한다. 또한 약리작용으로 단백성관절염부종억제작용, 복수암억제작용, 추간판탈출증완화작용 등의 효과가 있다고 보고된 바 있다.
본 발명의 추출물의 추출용매로는 예를 들어, 물, 에탄올, 메탄올, 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol)과 같은 탄소수 1 내지 6개의 알코올, 아세톤, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 메틸렌클로라이드, 헥산, 시클로헥산, 석유에테르(petrolem ether), 디에틸에테르, 벤젠과 같은 유기용매로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 용매를 이용하여 추출할 수 있다. 본 발명의 노근 및 율초 추출물은 바람직하게는 물, 에탄올, 클로로포름, 에틸아세테이트, 1-부탄올로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 용매를 사용하여 추출할 수 있으며, 가장 바람직하게는 물을 용매로 이용하여 추출될 수 있다.
본 발명에 따른 노근 및 율초 추출물 또는 노근, 율초 및 목과 혼합물을 이용한 식품용 조성물은 기능성 식품(functional food), 영양보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food) 및 식품첨가제(food additives) 등의 모든 형태를 포함한다. 상기 유형들은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다.링크의 형태로 제조하여 음용하도록 하거나, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한 본 발명의 식품용 조성물은 지방간 질환의 예방, 개선 또는 치료 효과가 있다고 알려진 공지의 물질 또는 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다.
예를 들면, 건강식품으로는 본 발명의 식품용 조성물 자체를 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용하도록 하거나, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한 본 발명의 식품용 조성물은 체지방 감소, 콜레스테롤 개선, 혈압강하의 효과가 있다고 알려진 공지의 물질 또는 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다.
또한 기능성 식품으로는 음료(알코올성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예를 들어 과일 통조림, 병조림, 잼, 마아말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예를 들어 햄, 소시지콘비이프 등), 빵류 및 면류(예를 들어 우동, 메밀국수, 라면, 스파게티, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예를 들어 버터, 치이즈 등), 식용식물유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예를 들어 된장, 간장, 소스 등) 등에 본 발명의 식품용 조성물을 첨가하여 제조할 수 있다.
본 발명에 따른 식품용 조성물의 바람직한 함유량으로는 이에 한정되지 않지만 바람직하게는 최종적으로 제조된 식품 총 중량 중 0.01 내지 50중량% 이다. 본 발명의 식품용 조성물을 식품첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다.
본 발명은 노근 추출물 및 율초 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간, 고지혈증 및 변비로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명은 상기 조성물에 목과 추출물을 추가로 더 포함하는 것을 특징으로 하는 지방간, 고지혈증 및 변비로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 약학적 조성물은 노근 및 율초 추출물 또는 노근, 율초 및 목과 혼합물을 단독으로 함유하거나 약학적으로 허용되는 담체와 함께 적합한 형태로 제형화될 수 있으며, 부형제 또는 희석제를 추가로 함유할 수 있다. 상기에서 '약학적으로 허용되는'이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 위장 장애, 현기증 등과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 비독성의 조성물을 말한다.
약학적으로 허용되는 담체로는 예컨대, 경구 투여용 담체 또는 비경구 투여용 담체를 추가로 포함할 수 있다. 경구 투여용 담체는 락토스, 전분, 셀룰로스 유도체, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 등을 포함할 수 있다. 아울러, 펩티드 제제에 대한 경구투여용으로 사용되는 다양한 약물전달물질을 포함할 수 있다. 또한, 비경구 투여용 담체는 물, 적합한 오일, 식염수, 수성 글루코오스 및 글리콜 등을 포함할 수 있으며, 안정화제 및 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 안정화제로는 아황산수소나트륨, 아황산나트륨 또는 아스코르브산과 같은 항산화제가 있다. 적합한 보존제로는 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸-또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올이 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현택제 등을 추가로 포함할 수 있다. 그 밖의 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 다음의 문헌에 기재되어 있는 것을 참고로 할 수 있다(Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995).
본 발명의 조성물은 인간을 비롯한 포유동물에 어떠한 방법으로도 투여할 수 있다. 예를 들면, 경구 또는 비경구적으로 투여할 수 있다. 비경구적인 투여방법으로는 이에 한정되지는 않으나, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장내 투여일 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 상술한 바와 같은 투여 경로에 따라 경구 투여용 또는 비경구 투여용 제제로 제형화 할 수 있다.
경구 투여용 제제의 경우에 본 발명의 조성물은 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 슬러리제, 현탁액 등으로 당업계에 공지된 방법을 이용하여 제형화될 수 있다. 예를 들어, 경구용 제제는 활성성분을 고체 부형제와 배합한 다음 이를 분쇄하고 적합한 보조제를 첨가한 후 과립 혼합물로 가공함으로써 정제 또는 당의정제를 수득할 수 있다. 적합한 부형제의 예로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨 및 말티톨 등을 포함하는 당류와 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분 및 감자 전분 등을 포함하는 전분류, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오즈 및 하이드록시프로필메틸-셀룰로즈 등을 포함하는 셀룰로즈류, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈 등과 같은 충전제가 포함될 수 있다. 또한, 경우에 따라 가교결합 폴리비닐피롤리돈, 한천, 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등을 붕해제로 첨가할 수 있다. 나아가, 본 발명의 약학적 조성물은 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
비경구 투여용 제제의 경우에는 주사제, 크림제, 로션제, 외용연고제, 오일제, 보습제, 겔제, 에어로졸 및 비강 흡입제의 형태로 당업계에 공지된 방법으로 제형화할 수 있다. 이들 제형은 모든 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌(Remington's Pharmaceutical Science, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA,1995)에 기재되어 있다.
본 발명의 조성물의 총 유효량은 단일 투여량(single dose)으로 환자에게 투여될 수 있으며, 다중 투여량(multiple dose)으로 장기간 투여되는 분할 치료 방법(fractionated treatment protocol)에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 질환의 정도에 따라 유효성분의 함량을 달리할 수 있다. 바람직하게 본 발명의 약학적 조성물의 바람직한 전체 용량은 1일당 환자 체중 1㎏ 당 약 0.01㎍ 내지 10,000mg, 바람직하게는 0.1㎍ 내지 500mg, 가장 바람직하게는 100mg 내지 500mg일 수 있다. 그러나 상기 약학적 조성물의 용량은 제제화 방법, 투여 경로 및 치료 횟수뿐만 아니라 환자의 연령, 체중, 건강 상태, 성별, 질환의 중증도, 식이 및 배설율 등 다양한 요인들을 고려하여 환자에 대한 유효 투여량이 결정되는 것이므로, 이러한 점을 고려할 때 당 분야의 통상적인 지식을 가진 자라면 본 발명의 조성물의 적절한 유효 투여량을 결정할 수 있을 것이다. 본 발명에 따른 약학적 조성물은 본 발명의 효과를 보이는 한 그 제형, 투여 경로 및 투여 방법에 특별히 제한되지 아니한다.
본 발명의 실시예에서는 마우스에 고지방 식이를 실시하여 지방간 질환을 유발하였고, 노근 추출물, 율초 추출물, 목과 추출물, 노근 추출물+율초 추출물, 노근 추출물+목과 추출물, 목과 추출물+율초 추출물의 조합으로 경구투여 하였고, 노근 및 율초 추출물을 3:1, 2:1, 1:1, 1:2, 1:3의 중량비율로 제조하여 경구투여하였다. 마우스에서 간 조직을 추출하였고, 간에서 추출한 세포를 배양한 뒤 oil red o 염색법을 실시한 결과, 정상식이(ND)를 실시한 경우보다 고지방 식이(HFD)를 실시한 경우에 지방량이 증가한 것으로 나타났고, 각 추출물을 처리한 경우에 지방량이 감소하는 것으로 나타났다. 또한 노근, 율초 또는 목과 추출물을 단독으로 처리한 군에 비해, 각각의 혼합물을 처리한 경우에 지방량이 감소하는 것을 확인할 수 있었다(도 1 참조).
본 발명의 또 다른 실시예에서는 지방간을 유발한 마우스에 상기와 같이, 노근, 율초 또는 목과 추출물을 단독 혹은 혼합하여 경구투여하였다. 마우스에서 간 조직을 추출하고 분쇄한 뒤 키트를 사용하여 중성지질을 정량한 결과, 각 추출물을 처리하였을 때 중성지질이 감소하는 것을 확인하였고, 단독으로 처리한 경우보다 노근+목과, 노근+율초, 율초+목과를 혼합한 경우에 중성지질이 더 감소하는 것을 확인할 수 있었으며, 노근과 율초를 1:1의 중량비로 혼합한 경우에 중성지질의 양이 가장 적은 것을 확인할 수 있었다(도 2 참조).
본 발명의 또 다른 실시예에서는 지방간을 유발한 마우스에 상기와 같이, 노근, 율초 또는 목과 추출물을 단독 혹은 혼합하여 경구투여하였다. 마우스에서 간 조직을 추출한 뒤 mRNA를 추출하여 RT-PCR 방법으로 FAS(fatty acid synthase) 및 SCD1(Stearoy-CoA desaturase-1)의 발현량을 측정한 결과, 각 추출물을 처리하였을 때 FAS 및 SCD1의 발현량이 감소하는 것을 확인하였고, 단독으로 처리한 경우보다 노근+목과, 노근+율초, 율초+목과를 혼합한 경우에 FAS 및 SCD1의 발현량이 더 감소하는 것을 확인할 수 있었으며, 노근과 율초를 1:1의 중량비로 혼합한 경우에 FAS 및 SCD1의 발현량이 가장 적은 것을 확인할 수 있었다(도 3 및 도 4 참조).
본 발명의 또 다른 실시예에서는 지방간을 유발한 마우스에 상기와 같이, 노근, 율초 또는 목과 추출물을 단독 혹은 혼합하여 경구투여한 다음 혈액을 추출하였고, ELISA 키트를 사용하여 TNF-α 및 아디포넥틴(adiponectin)의 양을 측정한 결과, 각 추출물을 처리하였을 때 TNF-α의 농도가 감소하고, 아디포넥틴이 증가하는 것을 확인하였고, 단독으로 처리한 경우보다 노근+목과, 노근+율초, 율초+목과를 혼합한 경우에 TNF-α의 농도가 더 감소하고 아디포넥틴이 더 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 또한 노근과 율초를 2:1의 중량비로 혼합한 경우에 TNF-α의 농도가 가장 적은 것을 확인할 수 있었으며, 1:1의 중량비로 혼합한 경우에 아디포넥틴의 농도가 가장 높은 것을 확인할 수 있었다(도 5 및 도 6 참조).
따라서, 본 발명은 노근 및 율초 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간, 고지혈증 및 변비 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공한다. 본 발명의 방법은 노근 및 율초 추출물 또는 노근, 율초 및 목과 혼합물을 포함하는 조성물을 이용하여 지방간, 고지혈증을 예방 또는 치료하거나, 변비를 예방 또는 개선하는 데에 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 간에서 추출한 세포를 배양하여 Oil red o 용액으로 염색한 결과를 나타낸 것이다(ND: Normal diet(정상식이), HFD: High fat diet(고지방식이), 1: 노근, 2: 목과, 3: 율초).
도 2A는 노근, 목과, 율초의 단독 추출물과 혼합물을 투여한 마우스의 간에서 중성지질을 정량한 것을 그래프로 나타낸 것이다(HFD: High fat diet(고지방식이), 1: 노근, 2: 목과, 3: 율초).
도 2B는 노근 및 율초의 단독 추출물과 중량비를 다르게 한 혼합물을 투여한 마우스의 간에서 중성지질을 정량한 것을 그래프로 나타낸 것이다(HFD: High fat diet(고지방식이), 1: 노근, 3: 율초)
도 3A는 노근, 목과, 율초의 단독 추출물과 혼합물을 투여한 마우스의 간에서 mRNA를 추출하여 RT-PCR 법으로 FAS(fatty acid synthase)의 발현량을 측정한 것을 그래프로 나타낸 것이다(HFD: High fat diet(고지방식이), 1: 노근, 2: 목과, 3: 율초).
도 3B는 노근 및 율초의 단독 추출물과 중량비를 다르게 한 혼합물을 투여한 마우스의 간에서 mRNA를 추출하여 RT-PCR 법으로 FAS(fatty acid synthase)의 발현량을 측정한 것을 그래프로 나타낸 것이다(HFD: High fat diet(고지방식이), 1: 노근, 3: 율초).
도 4A는 노근, 목과, 율초의 단독 추출물과 혼합물을 투여한 마우스의 간에서 mRNA를 추출하여 RT-PCR 법으로 SCD1 (Stearoyl-CoA desaturase-1)의 발현량을 측정한 것을 그래프로 나타낸 것이다(HFD: High fat diet(고지방식이), 1: 노근, 2: 목과, 3: 율초).
도 4B는 노근 및 율초의 단독 추출물과 중량비를 다르게 한 혼합물을 투여한 마우스의 간에서 mRNA를 추출하여 RT-PCR 법으로 SCD1 (Stearoyl-CoA desaturase-1)의 발현량을 측정한 것을 그래프로 나타낸 것이다(HFD: High fat diet(고지방식이), 1: 노근, 3: 율초).
도 5A는 노근, 목과, 율초의 단독 추출물과 혼합물을 투여한 마우스의 혈액에서 ELISA 법으로 혈액 내 TNF-α의 농도를 측정한 것을 그래프로 나타낸 것이다(HFD: High fat diet(고지방식이), 1: 노근, 2: 목과, 3: 율초).
도 5B는 노근 및 율초의 단독 추출물과 중량비를 다르게 한 혼합물을 투여한 마우스의 혈액에서 ELISA 법으로 혈액내 TNF-α의 농도를 측정한 것을 그래프로 나타낸 것이다(HFD: High fat diet(고지방식이), 1: 노근, 3: 율초,)
도 6A는 노근, 목과, 율초의 단독 추출물과 혼합물을 투여한 마우스의 혈액에서 ELISA 법으로 혈액내 아디포넥틴(adiponectin)의 농도를 측정한 것을 그래프로 나타낸 것이다(HFD: High fat diet(고지방식이), 1: 노근, 2: 목과, 3: 율초).
도 6B는 노근 및 율초의 단독 추출물과 중량비를 다르게 한 혼합물을 투여한 마우스의 혈액에서 ELISA 법으로 혈액내 아디포넥틴(adiponectin)의 농도를 측정한 것을 그래프로 나타낸 것이다(HFD: High fat diet(고지방식이), 1: 노근, 3: 율초).
이하 본 발명을 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실험방법>
노근, 율초 및 목과 추출물의 제조.
노근(Phragmitis Rhizoma), 율초 및 목과를 분쇄하여 각각의 중량의 10배의 물을 넣고 90~100℃에서 5~15시간 동안 가열하여 추출하였다. 추출액은 25 마이크론 필터를 이용하여 여과하였고, 여과된 추출액은 농축온도 70~75℃에서 26bx까지 농축하였다. 농축된 원료는 스프레이 건조기를 이용하여 건조하였다. 그 다음, 노근:율초=1:1~3의 중량비율로 혼합하여 혼합물을 제조하였고, 노근:율초:목과를 1:1:1의 중량비율로 혼합하여 혼합물을 제조하였다.
동물실험
6주령의 C57BL/6 mouse를 구입하여 사용하였다. 일반사료와 물을 충분히 공급하고 실온 22 ± 2℃, 습도 50~70%, 조명시간 12시간(08:00∼20:00), 조도 150∼300 Lux로 설정하여 1주일간 실험실 환경에 적응시킨 후 실험에 사용하였다.
비알코올성 지방간을 유벌하기 위하여 고지방 식이(High Fat Diet, HFD)용 사료를 중앙실험동물에서 공급받아 8주 동안 자유롭게 섭취하도록 하였다. 이 때, 사료조성에서 실험 결과에 영향을 줄만한 요인을 배제 하였다. 그 다음 노근 추출물, 율초 추출물, 목과 추출물, 노근 추출물+율초 추출물, 노근 추출물+목과 추출물, 목과 추출물+율초 추출물의 조합으로 총량이 500 mg/kg이 되도록 하여 경구투여를 실시하였다.
<실시예 1>
노근 및 율초 혼합물이 간에 미치는 영향
노근 및 율초 추출물이 간에 미치는 영향을 알아보기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다.
상기 실험방법에 따라 고지방식이(HFD)를 한 마우스에 노근 추출물(1), 목과 추출물(2), 율초 추출물(3), 노근 추출물+목과 추출물(1+2), 노근 추출물+율초 추출물(1+3), 목과 추출물+율초 추출물(2+3)을 투여한 마우스로부터 얻은 간 조직을 추출하였다. 마우스로부터 얻은 간 조직으로 동결절편을 만든 뒤, 0.5% oil red o 시약(Sigma)으로 첨가하여 상온에 방치하여, 염색을 시행하였다. 그 다음 PBS로 5회 세척 후 현미경(Axiostarplus; Carl Zeiss, Germany)을 이용하여 관찰하였다.
그 결과 도 1에서 나타난 바와 같이, 정상식이(ND)를 실시한 경우보다 고지방 식이(HFD)를 실시한 경우에 지방량이 증가한 것으로 나타났고, 각 추출물을 처리한 경우에 지방량이 감소하는 것으로 나타났다. 또한 노근, 율초 또는 목과 추출물을 단독으로 처리한 군에 비해, 각각의 혼합물을 처리한 경우에 지방량이 더 적은 것으로 나타났다. 또한 각 추출물을 단독으로 처리한 경우보다 혼합물(1+2, 1+3, 2+3)을 처리한 경우에 더 지방량이 적은 것으로 나타났다.
<실시예２>
노근 및 율초 혼합물이 중성지질(triglyceride)의 양에 미치는 영향
노근 및 율초 추출물이 간에서 중성지질의 양에 미치는 영향을 알아보기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다.
상기 실험방법에 따라 고지방식이(HFD)를 한 마우스에 노근 추출물(1), 목과 추출물(2), 율초 추출물(3), 노근 추출물+목과 추출물(1+2), 노근 추출물+율초 추출물(1+3), 목과 추출물+율초 추출물(2+3)을 투여한 마우스로부터 얻은 간 조직을 추출하였다. 그 다음, 0.5g의 간 조직을 PBS에 넣은 뒤 분쇄한 뒤, 원심분리하여 상층액을 수득하여 샘플을 준비하였다. 제조사의 지침에 따라 Triglyceride assay kit(Abcam)을 사용하여 샘플에 혼입되어 있는 중성지질 정량을 실시하였다.
그 결과는 도 2에서 나타내었다.
정상식이를 한 대조군에 비해 고지방식이를 한 경우에 중성지질이 증가하는 것으로 나타났고, 각 추출물을 처리하였을 때 중성지질이 감소하는 것으로 나타났다. 또한 각 추출물을 단독으로 처리한 경우보다 노근+목과, 노근+율초, 율초+목과를 혼합한 경우에 중성지질이 더 감소하는 것으로 나타났다(도 2A).
또한, 노근 및 율초 추출물을 각각 다른 비율(노근:율초= 3:1, 2:1, 1:1, 1:2, 1:3의 중량비)으로 혼합하여 처리하였을 때, 노근과 율초를 1:1의 중량비로 혼합한 경우에 중성지질의 양이 가장 적은 것으로 나타났다.
이를 통해, 노근, 율초 및 목과 추출물을 각기 단독으로 처리하는 경우보다 혼합물을 처리하는 경우가 중성지방 침착을 억제하는 효과가 좋은 것을 확인할 수 있었고, 노근 및 율초를 1:1의 중량비로 혼합한 혼합물의 경우에 중성지방 침착을 억제하는 효과가 가장 좋은 것을 확인할 수 있었다.
<실시예 3>
노근 및 율초 혼합물이 중성지질(triglyceride)의 생성에 미치는 영향
노근 및 율초 추출물이 간에서 중성지질의 생성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다.
상기 실험방법에 따라 고지방식이(HFD)를 한 마우스에 노근 추출물(1), 목과 추출물(2), 율초 추출물(3), 노근 추출물+목과 추출물(1+2), 노근 추출물+율초 추출물(1+3), 목과 추출물+율초 추출물(2+3)을 투여한 마우스로부터 간을 추출하였고, 추출한 간의 일부를 사용하였다. 간 조직에 TRIaol(Invitrogen)을 처리하고, 균질화(homogenization)하였다. 그 다음 당업계에 알려진 방법에 따라 RNA를 추출하여, cDNA로 합성하였다. 그 다음 real-time RT-PCR 방법을 이용하여 FAS(fatty acid synthase) 및 SCD1(Stearoy-CoA desaturase-1)의 발현량을 측정하였다. 상기 real-time RT-PCR에서 사용한 프라이머는 하기 표 1에 기재되어 있다.
프라이머 정보
명칭 서열 서열번호
FAS forward tgatagccgg tatgtcgggg 1
FAS reverse agaccgcttg ggtaatccat 2
SCD1 forward gcacctccct ccggaaatga 3
SCD1 reverse tactccagct tgggcggggg 4
β-actin forwrad tatcgctgcg ctggtcgtcg 5
β-actin reverse ccttctgacc cattcccacc 6
그 결과를 도 3 및 도 4에 나타냈다.
대조군에 비해 고지방식이를 한 경우에 FAS 및 SCD1의 발현량이 높은 것으로 나타났고, 각 추출물을 단독으로 처리한 경우보다 노근+목과, 노근+율초, 율초+목과를 혼합한 경우에 FAS 및 SCD1의 발현량이 더 적은 것으로 나타났다(도 3A, 도 4A).
상기 혼합물 중에서 노근 및 율초 추출물을 각각 다른 비율(노근:율초= 3:1, 2:1, 1:1, 1:2, 1:3의 중량비)으로 혼합하여 처리하였을 때, 노근과 율초를 1:1의 중량비로 혼합한 경우에 FAS와 SCD1의 발현량이 가장 적은 것으로 나타났다(도 3B, 도 4B).
이를 통해, 노근, 율초 및 목과 추출물을 단독으로 처리하는 경우보다 혼합물을 처리하는 경우에 지질 신생합성과 관련된 유전자인 FAS와 SCD1의 발현량이 감소하는 것을 확인할 수 있었으며, 특히 노근 및 율초를 1:1의 중량비로 혼합한 경우에 FAS와 SCD1의 발현량이 현저하게 감소하는 것을 확인할 수 있었다.
<실시예 4>
노근 및 율초 혼합물이 중성지질(triglyceride)의 생성에 미치는 영향
노근 및 율초 추출물이 체내에서 항염증 활성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다.
상기 실험방법에 따라 고지방식이(HFD)를 한 마우스에 노근 추출물(1), 목과 추출물(2), 율초 추출물(3), 노근 추출물+목과 추출물(1+2), 노근 추출물+율초 추출물(1+3), 목과 추출물+율초 추출물(2+3)을 투여한 마우스로부터 혈액을 추출하였다. 제조사의 지침에 따라 ELISA kit(R&D systems)를 사용하여 염증성 사이토카인인 TNF-α와 항염증 아디포카인인 아디포넥틴(adiponectin)의 양을 측정하였다.
그 결과 도 5에 나타난 바와 같이, 대조군에 비해 고지방식이를 한 경우에 TNF-α의 농도가 높은 것으로 나타났고, 각 추출물을 단독으로 처리한 경우보다 노근+목과, 노근+율초, 율초+목과를 혼합한 경우에 TNF-α의 농도가 감소하는 것으로 나타났다(도 5A). 또한, 상기 혼합물 중에서 노근 및 율초 추출물을 각각 다른 비율(노근:율초= 3:1, 2:1, 1:1, 1:2, 1:3의 중량비)로 혼합하여 처리하였을 때, 노근과 율초를 2:1의 중량비로 혼합한 경우에 TNF-α의 농도가 가장 적은 것으로 나타났다(도 5B).
또한 도 6에 나타난 바와 같이, 대조군에 비해 고지방식이를 한 경우 아디포넥틴(adiponectin)이 감소하는 것으로 나타났고, 각 추출물을 단독으로 처리한 경우보다 노근+목과, 노근+율초, 율초+목과를 혼합한 경우에 아디포넥틴이 증가하는 것으로 나타났다. 이중 노근과 율초의 혼합물을 다른 비율(노근:율초= 3:1, 2:1, 1:1, 1:2, 1:3의 중량비)로 혼합하여 처리하였을 때, 노근과 율초를 1:1의 중량비로 혼합한 경우에 아디포넥틴의 농도가 가장 높은 것으로 나타났다.
이를 통해, 노근, 율초 및 목과 추출물을 단독으로 처리하는 경우보다 혼합물을 처리하는 경우에 고지방 식이에 의한 TNF-α를 감소시키고 아디포넥틴을 증가시키는 것을 확인하였으며, 특히 노근 및 율초를 1:1의 중량비로 혼합한 경우에 현저한 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
이상 살펴본 바와 같이 본 발명의 방법은 노근 및 율초 추출물 또는 노근, 율초 및 목과 혼합물을 포함하는 조성물을 이용하여 지방간, 고지혈증을 예방 또는 치료하거나, 변비를 예방 또는 치료하는 데에 유용하게 이용될 수 있다.
<110> SUN, YUAN LU JEONG, JI HOON <120> Composition for preventing, improving or treating fatty liver diseases, hyperlipidemia and constipation comprising Phragmitis Rhizoma and Humulus japonicus extract <130> NP17-0015 <160> 6 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> FAS forward <400> 1 tgatagccgg tatgtcgggg 20 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> FAS reverse <400> 2 agaccgcttg ggtaatccat 20 <210> 3 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> SCD1 forward <400> 3 gcacctccct ccggaaatga 20 <210> 4 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> SCD1 reverse <400> 4 tactccagct tgggcggggg 20 <210> 5 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> beta-actin forwrad <400> 5 tatcgctgcg ctggtcgtcg 20 <210> 6 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> beta-actin reverse <400> 6 ccttctgacc cattcccacc 20

Claims (7)

  1. 노근 물 추출물 및 율초 물 추출물을 유효성분으로 포함하며 노근 및 율초의 중량비율이 1:1인 것을 특징으로 하는, 지방간 또는 고지혈증의 예방 또는 개선용 식품 조성물.

  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서, 상기 조성물에 목과 추출물을 추가로 더 포함하는 것을 특징으로 하는 지방간 또는 고지혈증의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 지방간은 비알코올성 지방간 또는 단순성 지방간인 것을 특징으로 하는 지방간 또는 고지혈증의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  5. 노근 물 추출물 및 율초 물 추출물을 유효성분으로 포함하며 노근 및 율초의 중량비율이 1:1인 것을 특징으로 하는, 지방간 및 고지혈증으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  6. 제5항에 있어서, 상기 조성물에 목과 추출물을 추가로 더 포함하는 것을 특징으로 하는 지방간 및 고지혈증으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  7. 제5항에 있어서, 상기 지방간 질환은 비알코올성 지방간 질환 또는 단순성 지방간인 것을 특징으로 하는 지방간 및 고지혈증으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
KR1020170043805A 2017-04-04 2017-04-04 노근 및 율초 추출물을 유효성분으로 하는 지방간, 고지혈증 및 변비 예방, 개선 또는 치료용 조성물 KR102098264B1 (ko)

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