KR102064769B1 - 다공성 필름과 미세인공혈관 채널이 구비된 세포배양 플레이트, 이를 포함하는 세포배양 장치 및 세포배양 장치를 이용한 세포배양방법 - Google Patents

다공성 필름과 미세인공혈관 채널이 구비된 세포배양 플레이트, 이를 포함하는 세포배양 장치 및 세포배양 장치를 이용한 세포배양방법 Download PDF

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Abstract

본 발명의 실시예에 따른 세포배양 플레이트는 플레이트, 상기 플레이트의 내부에 형성되며, 배양액이 수용되는 공간을 형성하는 배양액 수용부 및 상기 플레이트의 일면에 구비되며, 상기 배양액 수용부에 수용된 배양액을 외부로 투과시키는 필름부를 포함한다.

Description

다공성 필름과 미세인공혈관 채널이 구비된 세포배양 플레이트, 이를 포함하는 세포배양 장치 및 세포배양 장치를 이용한 세포배양방법{A CELL CULTURE PLATE EQUIPPED WITH A POROUS FILM AND A MICRO-ARTIFICIAL BLOOD VESSEL CHANNEL, A CELL CULTURE APPARATUS INCLUDING THE SAME AND A CELL CULTURE METHOD USING THE CELL CULTURE APPARATUS}
본 발명은 세포배양 플레이트, 이를 포함하는 세포배양 장치 및 세포배양 장치를 이용한 세포배양방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 배양하려는 세포에 배양액을 균일하고 지속적으로 공급하여 세포 배양속도 및 성장 효과를 높일 수 있는 세포배양 플레이트, 이를 포함하는 세포배양 장치 및 세포배양 장치를 이용한 세포배양방법에 관한 것이다.
최근 바이오 산업분야의 핵심연구 분야 중 하나는 인체의 종양을 억제하고 괴사시킬 수 있는 약물에 관한 개발이다.
이 때, 개발된 신약에 대한 테스트를 위해 인공적으로 종양을 배양하는 것이 필수적이며, 이러한 종양 세포는 실험용 쥐를 이용하여 배양되거나 세포배양 플레이트에 의하여 배양될 수 있다.
이 중 세포배양 플레이트를 이용한 세포배양에 대하여 살펴보면, 플레이트는 세포에 영양을 공급할 수 있는 배양액이 공급되며, 플레이트에서 세포에 배양액이 공급되어 세포가 배양될 수 있다.
다만, 현재 사용중인 플레이트는 배양액을 지속적으로 공급하기 어려운 구조로 형성되어 세포배양 속도가 느리고, 배양액 분포가 균일하지 않으며, 세포가 일정 크기로 배양되면 더 이상 성장하지 않는다는 문제점이 있다.
종래 세포 배양과 관련한 다양한 장치는 주로 플레이트에 배양액이 순환 공급되도록 하는 발명일 뿐 플레이트에 공급된 배양액이 세포에 균일하게 공급되는지에 점에서는 여전히 의문이다.
본 발명은 배양액을 원활하게 순환시킴과 동시에 세포에 배양액을 균일하게 투과시켜 세포배양 속도 및 성장을 늘릴 수 있는 세포배양 플레이트의 필요성을 충족시키기 위한 발명일 수 있다.
대한민국 등록특허: 제10-1835422호
본 발명은 상기 문제점을 해결하기 위한 것으로, 배양액을 세포에 균일하게 공급하여 세포배양 속도 및 성장을 늘릴 수 있는 세포배양 플레이트, 이를 포함하는 세포배양 장치 및 세포배양 장치를 이용한 세포배양방법을 제공하고자 한다.
본 발명의 과제는 이상에서 언급한 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않는 또 다른 과제는 아래의 기재로부터 통상의 기술자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본 발명의 일측면에 따르면 플레이트, 상기 플레이트의 내부에 형성되며, 배양액이 수용되는 공간을 형성하는 배양액 수용부 및 상기 플레이트의 일면에 구비되며, 상기 배양액 수용부에 수용된 배양액을 외부로 투과시키는 필름부를 포함하는 세포배양 플레이트가 제공된다.
또한, 본 발명의 일측면에 따른 세포배양 플레이트는 상기 배양액 수용부는 배양액이 유입되는 유입부와 배양액이 배출되는 배출부 및 상기 유입부와 상기 배출부를 연결하며 배양액의 흐름을 안내하는 채널부를 포함할 수 있다.
또한, 상기 채널부는 상기 필름부가 결합되는 상기 플레이트의 일면에 대응되는 면이 개방될 수 있다.
또한, 상기 채널부는 상기 플레이트의 일면에 복수 개가 이격 배치될 수 있다.
또한, 상기 채널부는 높이에 비해 폭이 큰 것을 특징으로 할 수 있다.
또한, 상기 필름부는 상기 배양액 수용부와 연통되도록 복수개의 투과홀이 관통 형성될 수 있다.
또한, 상기 투과홀은 0.5 내지 20㎛ 크기인 것을 특징으로 할 수 있다.
또한, 상기 필름부는 투명재질로 형성될 수 있다.
또한, 상기 플레이트는 투명재질로 형성될 수 있다.
본 발명의 다른 측면에 따르면 상기 배양액 수용부와 연통되는 순환라인 및 상기 순환라인에 결합되어 배양액을 순환 이동시키는 펌프를 포함하는 세포배양 플레이트를 포함하는 세포배양 장치가 제공된다.
또한, 본 발명의 또 다른 측면에 따르면 상기 세포배양 플레이트를 바닥에 안착시키는 안착단계, 상기 세포배양 플레이트의 상기 필름부의 상측에 세포를 배치하는 세포배치단계, 상기 배양액 수용부와 상기 순환라인을 연결하는 순환라인연결단계 및 상기 펌프를 구동하여 상기 배양액 수용부에 배양액을 순환 공급하여 상기 세포를 배양하는 새포배양단계를 포함하는 세포배양 방법이 제공된다.
또한, 본 발명의 또 다른 측면에 따르면 상기 세포배양 플레이트를 바닥에 안착시키는 제1 안착단계, 바닥에 배치된 상기 세포배양 플레이트의 상기 필름부의 상부에 세포를 배치하는 세포배치단계, 세포의 상측에 다른 하나의 상기 세포배양 플레이트를 안착시키는 제2 안착단계, 세포의 상하측에 각각 배치된 상기 세포배양 플레이트의 상기 배양액 수용부와 상기 순환라인을 연결하는 순환라인연결단계 및 상기 펌프를 구동하여 상기 배양액 수용부에 배양액을 순환 공급하여 상기 세포를 배양하는 새포배양단계를 포함하는 세포배양 방법이 제공된다.
본 발명의 실시예에 따른 세포배양 플레이트, 이를 포함하는 세포배양 장치 및 세포배양 장치를 이용한 세포배양방법은 아래와 같은 효과가 있다.
첫째, 복수 개의 채널부에 의해 배양액의 유동 면적이 넓어져 세포배양면적을 늘릴 수 있어 세포 성장에 유리할 수 있다.
둘째, 배양액을 투과시킬 수 있는 필름부를 이용하여 세포에 배양액이 지속적이고 균일하게 공급될 수 있어 세포배양 속도 및 성장을 늘릴 수 있다.
셋째, 경유부 및 수집부를 포함하여 배양액을 임시 저장한 후 채널부에 공급함으로써 채널부에 배양액이 균일하게 공급되어 세포에도 배양액이 균일하게 투과되어 세포 배양속도 및 성장을 늘릴 수 있다.
본 발명의 실시예의 효과는 이상에서 언급한 효과로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 효과들은 청구범위의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 세포배양 플레이트를 나타내는 사시도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 세포배양 플레이트를 나타내는 단면도이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 세포배양 플레이트의 배양액 수용부를 나타내는 평면도이다.
도 4 및 도 5는 본 발명의 다른 실시예에 따른 세포배양 장치 및 이를 이용한 세포배양 방법을 설명하기 위한 도면이다. 그리고,
도 6 및 도 7은 본 발명의 또 다른 실시예에 따른 세포배양 장치 및 이를 이용한 세포배양 방법을 설명하기 위한 도면이다.
이하 본 발명의 실시예에 대하여 첨부한 도면을 참조하여 상세하게 설명하기로 한다. 다만, 첨부된 도면은 본 발명의 내용을 보다 쉽게 개시하기 위하여 설명되는 것일 뿐, 본 발명의 범위가 첨부된 도면의 범위로 한정되는 것이 아님은 이 기술분야의 통상의 지식을 가진 자라면 용이하게 알 수 있을 것이다.
도 1 내지 도 3을 참조하여 본 발명의 일 실시예에 따른 세포배양 플레이트를 설명하고, 도 5 및 도 7을 참조하여 세포배양 플레이트를 포함하는 세포배양 장치에 대하여 설명하며, 도 4 내지 도 7을 참조하여 세포배양방법에 대하여 설명한다.
우선, 도 1 내지 도 3을 참조하여 보면, 본 발명의 일 실시예에 따른 세포배양 플레이트는 플레이트(100), 배양액 수용부(200) 및 필름부(300)를 포함한다.
플레이트(100)는 세포(20)가 안착될 수 있도록 평면 형상으로 형성될 수 있으며, 내부에 배양액이 공급되는 공간이 형성되도록 두께가 있는 형상으로 형성될 수 있다.
배양액 수용부(200)는 플레이트(100)의 내부에 형성되며, 배양액이 수용되는 공간을 형성할 수 있다. 배양액 수용부(200)는 세포(20)에 배양액을 균일하게 공급하기 위한 구성으로 이후 도 2 및 도 3을 참조하여 구체적으로 설명한다.
필름부(300)는 플레이트(100)의 일면(100a)에 구비되며, 배양액 수용부(200)에 수용된 배양액을 외부로 투과시킬 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 세포배양 플레이트는 배양액 수용부(200)에 배양액이 균일하고 지속적으로 공급될 수 있으며, 필름부(300)에 의하여 배양액 수용부(200)에 공급되는 배양액이 세포(20)에 균일하고 지속적으로 공급될 수 있어 세포배양 속도를 높이며 세포성장을 늘릴 수 있다.
구체적으로, 배양액 수용부(200)는 유입부(210), 배출부(220) 및 채널부(230)를 포함할 수 있다.
유입부(210)와 배출부(220)는 각각 배양액이 유입되고 배출되는 부분이다. 유입부(210)와 배출부(220)는 각각 플레이트(100)의 일측면과 타측면을 관통하여 형성될 수 있으며, 외부의 배양액을 공급하는 라인(미도시)과 연결될 수 있다.
채널부(230)는 유입부(210)와 배출부(220)를 연결하며 배양액의 흐름을 안내할 수 있다.
즉, 채널부(230)는 유입부(210)를 통해 배양액 수용부(200)로 유입된 배양액을 배출부(220)로 안내하며, 이 과정에서 배양액 수용부(200)의 상측에 안착된 필름부(300)를 통해 필름부(300) 상에 놓인 세포(20)에 배양액을 공급할 수 있다.
또한, 채널부(230)는 필름부(300)가 결합되는 플레이트(100)의 일면(100a)에 대응되는 면이 개방될 수 있다.
따라서, 채널부(230)로 유입된 배양액은 필름부(300)의 저면에 직접 닿아 필름부(300)를 통해 필름부(300)의 상측에 놓인 세포(20)로 투과되어 공급될 수 있다.
또한, 채널부(230)는 플레이트(100)의 일면(100a)에 복수 개가 이격 배치될 수 있다. 즉, 유입부(210)과 배출부(220) 사이에 복수 개의 채널부(230)가 형성될 수 있으며, 복수 개의 채널부(230)에 의하여 배양액이 공급되는 면적이 증가할 수 있다. 따라서, 세포의 배양속도 및 성장을 증가하는 효과가 있을 수 있다.
한편, 채널부(230)는 높이(H)에 비해 폭(W)이 큰 것을 특징으로 한다. 이 때, 높이(H)와 폭(W)의 비율은 최소 1:2 이상인 것이 적합하며, 바람직하게는 비율이 1:6 ~ 1:10 되도록 형성될 수 있다.
즉, 채널부(230)는 높이(H)에 비해 폭(W)을 늘림으로써 필름부(300)와 배양액의 접촉면적을 늘려 세포(20)에 최대한 많은 양의 배양액이 공급되도록 할 수 있다. 따라서, 세포(20)의 배양속도 및 성장을 늘릴 수 있다.
한편, 배양액 수용부(200)는 경유부(250)과 수집부(260)를 더 포함할 수 있다.
수집부(250)는 유입부(210)와 채널부(230) 사이에 형성되며, 유입부(210)를 통해 유입된 배양액이 임시 저장되는 공간을 제공하고, 수집부(260)는 배출부(220)와 채널부(230) 사이에 형성되며, 채널부(230)를 통해 배출되는 배양액을 임시 저장하는 공간을 제공할 수 있다.
여기서, 경유부(250)는 유입부(210)를 통해 유입되는 배양액을 임시 저장하는 구성으로, 배양액을 수용하는 공간이 유입부(210)나 채널부(230)에 비해 크게 형성될 수 있다.
또한, 도 2에서 확인할 수 있듯이 경유부(250)는 경유부(250)의 높이가 유입부(210) 와 채널부(230)의 형성되는 높이보다 높게 형성되도록 구비될 수 있다.
즉, 경유부(250)가 유입부(210)와 채널부(230)보다 깊게 형성됨으로써, 배양액은 이격되어 구비되는 복수개의 채널부(230)에 골고루 유입될 수 있어 본 발명의 세포배양 플레이트 및 장치는 각 채널부(230)에 놓여지는 세포에 대하여 훨씬 효율적으로 배양 할 수 있다.
구체적으로는, 유입부를 통해 유입된 배양액이 곧바로 채널부로 향하게 되면 배양액의 속도나 양이 일정 시간이 지나기 전에는 각 채널부마다 다르게 된다.
그리고 위와 같은 상황에 따라 세포 배양이 달라질 수 있어 이는 세포 배양에 큰 변수로 작용할 수 있는 문제점이 있다.
그러나, 본 발명의 실시예에 따르면 유입부(210)를 통해 유입된 배양액은 경유부(250)에서 경유하여 점차 차올라 채널부(230)에 공급되므로 각 채널부(230)에 배양액이 동일한 속도와 양으로 공급될 수 있다.
따라서, 배양액이 경유부(250)를 통해 채널부(230)로 공급됨으로써 복수 개의 채널부(230)에 배양액이 균일하게 공급되어 세포(20)에 배양액이 골고루 공급될 수 있다. 이에 따라, 세포 배양속도나 성장을 늘리는 효과가 있을 수 있다.
수집부(260) 경유부(250)와 마찬가지로 채널부(230)에 배양액이 균일하게 수용되게 하기 위한 구성으로 도 1 내지 도 3에 도시된 경유부(250)와 수집부(260)의 형상은 일 실시예이므로, 경유부(250)와 수집부(260)의 형상은 이에 한정되지 않는다.
한편, 필름부(300)는 배양액 수용부(200)와 연통되도록 복수개의 투과홀(300a)이 관통 형성될 수 있다.
이 때, 필름부(300)는 배양액의 투과효과를 높이기 위하여 두께가 50㎛ 이고, 투과홀(300a)은 0.5 내지 20㎛ 크기인 것이 바람직하다.
또한, 배양액 공급효과 및 세포배양 과정을 살필 수 있도록 필름부(300)는 투명재질로 형성될 수 있으며, 플레이트(100) 역시 투명재질로 형성될 수 있다.
이 때, 필름부(300)는 투과율이 높은 필름(flim)이 사용될 수 있으며, 플레이트(100)는 가공하기 쉬운 투명 고분자 소재 중 경도가 우수한 폴리카보네이트(PC), 폴리나프탈레이트(PEN) 또는 아크릴수지(PMMA) 혹은 바이오용 실험도구 제작에 많이 사용되는 폴리스티렌(PS), 폴리프로필렌(PP), 폴리에틸렌(PE), 테플론(PTFE) 등의 열가소성 수지가 사용될 수 있다.
또는, 폴리디메틸실록산(PDMS) 혹은 고강성변성(high modulus reprographic PDMS) 등의 열경화성 수지가 적용될 수도 있다.
이와 같이, 본 발명의 일 실시예에 따른 세포배양 플레이트는 채널부(230)를 이용하여 배양액이 공급되는 면적을 늘릴 수 있으며, 채널부(230)에 배양액이 균일하게 공급되게 함과 동시에 필름부(300)를 이용하여 세포(20)에 배양액이 균일하게 공급되게 함으로써 세포 배양속도 및 성장을 늘릴 수 있는 효과가 있을 수 있다.
이어서, 도 5 및 도 7을 참조하여 본 발명의 다른 실시예에 따른 세포배양 플레이트를 포함하는 세포배양장치를 살펴보면, 본 발명의 다른 실시예에 따른 세포배양장치는 앞서 도 1 내지 도 3을 참조하여 설명한 세포배양 플레이트를 포함하며, 순환라인(400)과 펌프(450)를 포함할 수 있다.
순환라인(400)은 배양액 수용부(200)와 연통되며, 배양액 수용부(200)의 유입부(210)와 배출부(220)와 각각 연결되어 배양액이 순환 이동되는 통로를 제공할 수 있다.
펌프(450)는 순환라인(400)에 결합되어 배양액을 순환 이동시킬 수 있다.
이 때, 세포배양 플레이트(50,51)는 세포배양에 적합한 온도 및 습도가 유지될 수 있는 챔버(10) 내부에 배치될 수 있으며, 순환라인(400)이나 펌프(450)는 챔버(10)의 외부에 배치되어 챔버(10) 내부에 배치된 세포배양 플레이트(50, 51)와 결합될 수 있다.
이와 같이, 세포배양장치는 순환라인(400)과 펌프(450)를 포함하여 세포배양 플레이트(50, 51)에 배양액을 지속적으로 순환 공급할 수 있어, 세포배양 플레이트(50, 51)를 통해 세포(20)에 배양액을 지속적이고 균일하게 공급함으로써 세포(20) 배양속도 및 성장을 늘릴 수 있다.
이어서, 이러한 세포배양장치를 이용하여 세포를 배양하는 세포배양방법에 대하여 살펴본다.
도 4 및 도 5를 참조하여 보면, 세포배양방법은 안착단계(S100), 세포배치단계(S200), 순환라인연결단계(S300) 및 세포배양단계(S400)를 포함할 수 있다.
우선, 세포배양 플레이트(50)를 바닥에 안착시킬 수 있다(S100). 이 때 세포배양 플레이트(50)는 앞서 설명한 내용과 같이 챔버(10) 내부에 안착될 수 있다.
이어서, 세포배양 플레이트(50)의 필름부(300)의 상측에 세포(20)를 배치할 수 있다(S200). 또한, 배양액 수용부(200)와 순환라인(400)을 연결할 수 있다(S300).
이어서, 펌프(450)를 구동하여 배양액 수용부(200)에 배양액을 순환 공급하여 세포(20)를 배양할 수 있다.
이와 같이, 세포배양장치를 통해 세포(20)에 배양액이 지속적이고 균일하게 공급될 수 있어, 세포성장 효과를 높일 수 있다.
한편, 도 6 및 도 7을 참조하여 보면, 세포배양방법은 제1 안착단계(SS100), 세포배치단계(SS200), 순환라인연결단계(SS300), 제2 안착단계(SS400) 및 세포배양단계(SS500)를 포함할 수 있다.
우선, 세포배양 플레이트(50)를 바닥에 안착시킬 수 있다(SS100). 이이서, 바닥에 배치된 세포배양 플레이트(50)의 필름부(300)의 상부에 세포(20)를 배치할 수 있다(SS200)
다음으로, 세포(20)의 상측에 다른 하나의 세포배양 플레이트(51)를 안착시킬 수 있다(SS400). 이 때, 다른 하나의 세포배양 플레이트(51)는 제1 안착단계(SS100)에서 배치한 세포배양 플레이트(50)와 대향되게 배치될 수 있다.
즉, 두 개의 세포배양 플레이트(50, 51)는 필름부(300)가 세포(20)의 상하면에 각각 접촉하도록 배치될 수 있다.
이어서, 세포(20)의 상하측에 각각 배치된 세포배양 플레이트(50, 51)의 배양액 수용부(200)와 순환라인(400)을 각각 연결하며(SS300) 펌프(450)를 구동하여 배양액 수용부(200)에 배양액을 순환 공급하여 세포(20)를 배양할 수 있다(SS500).
이와 같이, 본 발명은 세포배양 플레이트 및 이를 포함하는 세포배양 장치를 이용하여 세포에 배양액을 균일하고 지속적으로 공급할 수 있어 세포 배양속도 및 성장을 늘릴 수 있는 효과가 있을 수 있다.
이상과 같이 본 발명에 따른 실시예를 살펴보았으며, 앞서 설명된 실시예 이외에도 본 발명이 그 취지나 범주에서 벗어남이 없이 다른 특정 형태로 구체화 될 수 있다는 사실은 해당 기술에 통상의 지식을 가진 이들에게는 자명한 것이다. 그러므로, 상술된 실시예는 제한적인 것이 아니라 예시적인 것으로 여겨져야 하고, 이에 따라 본 발명은 상술한 설명에 한정되지 않고 첨부된 청구항의 범주 및 그 동등 범위 내에서 변경될 수도 있다.
10: 챔버 20: 세포
50, 51: 세포배양 플레이트
100: 플레이트 100a: 일면
200: 배양액 수용부
210: 유입부 220: 배출부
230: 채널부 250: 경유부
260: 수집부
300: 필름부 300a: 투과홀
400: 순환라인 450: 펌프
H: 높이 W: 폭
S100: 안착단계
S200: 세포배치단계
S300: 순환라인연결단계
S400: 세포배양단계
SS100: 제1 안착단계
SS200: 세포배치단계
SS300: 제2 안착단계
SS400: 순환라인연결단계
SS500: 세포배양단계

Claims (10)

  1. 플레이트;
    상기 플레이트의 내부에 형성되며, 배양액이 수용되는 공간을 형성하는 배양액 수용부; 및
    상기 플레이트의 일면에 구비되며, 상기 배양액 수용부에 수용된 배양액을 외부로 투과시키는 필름부;
    를 포함하고,
    상기 배양액 수용부는,
    상기 배양액이 유입되는 유입부;
    상기 배양액이 배출되는 배출부;
    상기 플레이트의 일면에 복수 개가 이격 배치되고, 상기 유입부와 상기 배출부를 연결하며 상기 배양액의 흐름을 안내하는 채널부;
    상기 유입부와 상기 채널부 사이에 형성되어 상기 유입부를 통해 유입된 배양액이 임시 저장되는 경유부; 및
    상기 채널부와 상기 배출부 사이에 형성되어 상기 채널부를 경유한 배양액이 임시 저장되는 수집부;
    를 포함하고,
    상기 경유부는, 상기 유입부를 통해 유입된 배양액이 상기 복수 개의 채널부에 일정량이 일정 속도로 유입될 수 있도록 상기 채널부보다 깊게 형성되고,
    상기 수집부는, 상기 배출부보다 깊게 형성되어 상기 채널부를 경유한 배양액이 상기 배출부에 일정 농도로 배출되는 것을 특징으로 하는 세포배양 플레이트.
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서,
    상기 채널부는,
    상기 필름부가 결합되는 상기 플레이트의 일면에 대응되는 면이 개방되는 세포배양 플레이트.
  4. 삭제
  5. 제1항에 있어서,
    상기 채널부는,
    높이에 비해 폭이 큰 것을 특징으로 하는 세포배양 플레이트.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 필름부는,
    상기 배양액 수용부와 연통되도록 복수개의 투과홀이 관통 형성되는 세포배양 플레이트.
  7. 제6항에 있어서,
    상기 투과홀은 0.5 내지 20㎛ 크기인 것을 특징으로 하는 세포배양 플레이트.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 플레이트는 투명재질로 형성되는 세포배양 플레이트.
  9. 제1항, 제3항 및 제5항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 세포배양 플레이트를 포함하는 세포배양 장치에 있어서,
    상기 배양액 수용부와 연통되는 순환라인; 및
    상기 순환라인에 결합되어 배양액을 순환 이동시키는 펌프;
    를 포함하는 세포배양 플레이트를 포함하는 세포배양 장치.
  10. 제9항에 따른 세포배양 장치를 이용한 세포배양 방법에 있어서,
    상기 세포배양 플레이트를 바닥에 안착시키는 안착단계;
    상기 세포배양 플레이트의 상기 필름부의 상측에 세포를 배치하는 세포배치단계;
    상기 배양액 수용부와 상기 순환라인을 연결하는 순환라인연결단계; 및
    상기 펌프를 구동하여 상기 배양액 수용부에 배양액을 순환 공급하여 상기 세포를 배양하는 새포배양단계;
    를 포함하는 세포배양 방법.
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