KR102048877B1 - Method and kit for determining damage of skin barrier - Google Patents

Method and kit for determining damage of skin barrier Download PDF

Info

Publication number
KR102048877B1
KR102048877B1 KR1020120137790A KR20120137790A KR102048877B1 KR 102048877 B1 KR102048877 B1 KR 102048877B1 KR 1020120137790 A KR1020120137790 A KR 1020120137790A KR 20120137790 A KR20120137790 A KR 20120137790A KR 102048877 B1 KR102048877 B1 KR 102048877B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
skin barrier
skin
barrier damage
sebum
protein
Prior art date
Application number
KR1020120137790A
Other languages
Korean (ko)
Other versions
KR20140069917A (en
Inventor
손의동
김형준
박태훈
조은경
이태룡
Original Assignee
(주)아모레퍼시픽
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by (주)아모레퍼시픽 filed Critical (주)아모레퍼시픽
Priority to KR1020120137790A priority Critical patent/KR102048877B1/en
Publication of KR20140069917A publication Critical patent/KR20140069917A/en
Application granted granted Critical
Publication of KR102048877B1 publication Critical patent/KR102048877B1/en

Links

Images

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/531Production of immunochemical test materials
    • G01N33/532Production of labelled immunochemicals
    • G01N33/533Production of labelled immunochemicals with fluorescent label
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61BDIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B10/00Other methods or instruments for diagnosis, e.g. instruments for taking a cell sample, for biopsy, for vaccination diagnosis; Sex determination; Ovulation-period determination; Throat striking implements
    • A61B10/02Instruments for taking cell samples or for biopsy
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/531Production of immunochemical test materials
    • G01N33/532Production of labelled immunochemicals
    • G01N33/535Production of labelled immunochemicals with enzyme label or co-enzymes, co-factors, enzyme inhibitors or enzyme substrates
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/536Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
    • G01N33/537Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody
    • G01N33/539Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody involving precipitating reagent, e.g. ammonium sulfate
    • G01N33/541Double or second antibody, i.e. precipitating antibody
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/20Dermatological disorders

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)

Abstract

본 발명은 바이오마커를 이용한 피부 장벽 손상 평가 방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 각질 또는 피지를 채취하여 이로부터 바이오마커를 측정하는 것을 포함하는 피부 장벽 손상 평가 방법에 관한 것이다. 또한 본 발명은 각질 또는 피지를 채취하여 이로부터 바이오마커를 측정하는 피부 장벽 손상 평가 키트에 관한 것이다. 상기 피부 장벽 손상 평가 방법 및 키트를 이용하여 피부 장벽 손상을 쉽고 빠르게 평가할 수 있으며, 이를 통해 아토피, 건선 등의 피부질환 또는 박테리아 감염 여부를 신속하고 간편하게 평가하여 피부상태를 진단할 수 있는 효과를 나타낼 수 있다.The present invention relates to a method for evaluating skin barrier damage using a biomarker, and more particularly, to a method for evaluating skin barrier damage including collecting keratin or sebum and measuring the biomarker therefrom. The present invention also relates to a skin barrier damage assessment kit for collecting keratin or sebum and measuring biomarkers therefrom. The skin barrier damage evaluation method and kit can be used to quickly and easily evaluate the skin barrier damage, thereby quickly and easily evaluating a skin disease or bacterial infection such as atopic dermatitis, psoriasis, etc. Can be.

Description

피부 장벽 손상 평가 방법 및 키트{Method and kit for determining damage of skin barrier}Method and kit for determining damage of skin barrier

본 발명은 바이오마커를 이용한 피부 장벽 손상 평가 방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 피부 또는 피지를 채취하여 이로부터 바이오마커를 측정하는 것을 포함하는 피부 장벽 손상 평가 방법에 관한 것이다. 또한 본 발명은 피부 또는 피지를 채취하여 이로부터 바이오마커를 측정하는 피부 장벽 손상 평가 키트에 관한 것이다. 상기 피부 장벽 손상 평가 방법 및 키트를 이용하여 피부 장벽 손상을 쉽고 빠르게 평가할 수 있으며, 이를 통해 아토피, 건선 등의 피부질환 또는 박테리아 감염 여부를 신속하고 간편하게 평가하여 피부상태를 진단할 수 있는 효과를 나타낼 수 있다.
The present invention relates to a method for evaluating skin barrier damage using a biomarker, and more particularly, to a method for evaluating skin barrier damage including collecting skin or sebum and measuring a biomarker therefrom. The present invention also relates to a skin barrier damage assessment kit for taking skin or sebum and measuring biomarkers therefrom. The skin barrier damage evaluation method and kit can be used to quickly and easily assess the skin barrier damage, and thereby to quickly and easily evaluate the skin disease or bacterial infection such as atopy, psoriasis, and the like to have an effect of diagnosing a skin condition. Can be.

피부 장벽 손상의 원인은 다양하며, 예를 들어 환경적인 자극, 유해균 또는 자극 물질과 같은 외부적인 요인, 아토피, 건선 등의 피부 질환 등의 다양한 원인에 의하여 피부 장벽이 손상되는 점이 알려져 있다.The causes of skin barrier damage are various, for example, it is known that the skin barrier is damaged by various causes, such as external factors such as environmental irritation, harmful bacteria or irritants, skin diseases such as atopy and psoriasis.

이러한 피부 장벽 손상은 피부 관리 또는 치료 시에 피부 상태의 진단을 할 수 있는 중요한 지표로 이용되며, 따라서 이러한 피부 장벽 손상 정도의 객관적이고 정확한 평가 방법에 대한 필요성이 높아지고 있다.Such skin barrier damage is used as an important index for diagnosing a skin condition in skin care or treatment, and thus there is a growing need for an objective and accurate evaluation method of the degree of skin barrier damage.

종래 피부 장벽 손상에 대한 평가 모델로서 기기적 평가(표피 수분양 손실: TEWL) 등이 활용되고 있으나, 보다 단순하며 신속한 피부 장벽 손상 평가 방법이 필요한 실정이다.
Although a mechanical evaluation (epidermal moisture loss: TEWL) is used as an evaluation model for skin barrier damage, a simpler and faster method for evaluating skin barrier damage is required.

이에, 본 발명자들은 다양한 원인에 의한 피부 장벽 손상에 대한 바이오마커로서 S100A7을 사용하는 경우 단순하고 신속하고 정확한 피부 장벽 손상 정도를 평가할 수 있음을 발견하여 본 발명을 완성하였다.Thus, the present inventors have found that when using S100A7 as a biomarker for skin barrier damage caused by various causes, it was possible to evaluate a simple, quick and accurate degree of skin barrier damage, and completed the present invention.

따라서 본 발명의 목적은 각질 또는 피지를 채취하여 이로부터 S100A7을 측정하는 것을 포함하는 피부 장벽 손상 평가 방법 및 키트를 제공하는 것이다.
It is therefore an object of the present invention to provide a method and kit for evaluating skin barrier damage comprising the collection of keratin or sebum and measuring S100A7 therefrom.

본 발명은 표피를 채취하여 이로부터 S100A7을 측정하는 것을 포함하는 피부 장벽 손상 평가 방법 및 키트를 제공한다.The present invention provides a method and kit for assessing skin barrier damage comprising removing the epidermis and measuring S100A7 therefrom.

보다 구체적으로 본 발명은 표피를 채취하는 단계; 및 상기 채취된 표피로부터 S100A7을 측정하는 단계를 포함하는 피부 장벽 손상 평가 방법을 제공한다.More specifically, the present invention comprises the steps of collecting the epidermis; And it provides a skin barrier damage evaluation method comprising the step of measuring S100A7 from the collected epidermis.

또한 본 발명은 표피 채취부 및 채취된 표피의 S100A7 측정부를 포함하는 피부 장벽 손상 평가 키트를 제공한다.
In another aspect, the present invention provides a skin barrier damage evaluation kit comprising an epidermal collection unit and the S100A7 measurement unit of the collected epidermis.

본 발명에 따른 피부 장벽 손상 평가 방법 및 키트는 표피상태의 변화를 측정하는 기기 분석(Tewameter)에 의존하지 않고, 바이오마커를 이용하여 간편하고 신속하게 피부 장벽 손상 정도를 평가할 수 있다. 따라서 상기 방법 및 키트에 의하여 미용적인 피부 관리뿐만 아니라 피부 치료에 있어서도 평가 대상자에게 신속하게 피부 상태를 진단하여 결과를 제시할 수 있으며 이를 피부 관리 또는 치료 등에 반영하여 각자의 피부 상태에 적합한 관리나 치료 등을 제공하는 데에 도움이 될 수 있다.
The method and kit for assessing skin barrier damage according to the present invention can easily and quickly assess the extent of skin barrier damage using a biomarker, without relying on a instrument (Tewameter) to measure changes in epidermal state. Therefore, according to the above method and kit, not only cosmetic skin care but also skin treatment can be quickly diagnosed to the subjects of evaluation and present the results, and this is reflected in the skin care or treatment and appropriate management or treatment for each skin condition. It can help to provide such.

도 1은 본 발명의 일실시예에 따른 형광 발색법에 의한 피부 장벽 손상 평가방법을 도식화 한 것이다.
도 2는 본 발명의 일실시예에에 따른 ELISA 또는 단백질 칩에 의한 피부 장벽 손상 평가 방법의 예를 도식화 한 것이다.
도 3은 본 발명의 일실시예에 따른 웨스턴블랏에 의한 피부 장벽 손상 평가방법의 예를 도식화 한 것이다.
1 is a schematic diagram illustrating a method for evaluating skin barrier damage by fluorescence coloring according to an embodiment of the present invention.
Figure 2 illustrates an example of a skin barrier damage evaluation method by ELISA or protein chip according to an embodiment of the present invention.
Figure 3 illustrates an example of a skin barrier damage evaluation method by Western blot according to an embodiment of the present invention.

이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 발명은 표피를 채취하는 단계; 및 상기 채취된 표피로부터 S100A7을 측정하는 단계를 포함하는 피부 장벽 손상 평가 방법에 관한 것이다.The present invention comprises the steps of collecting the epidermis; And it relates to a skin barrier damage evaluation method comprising the step of measuring S100A7 from the collected epidermis.

상기 표피는 표피의 각질세포(corneocyte), 피부 분비물인 피지 등을 포함할 수 있다. S.aureus, E-coli 등의 유해균 또는 자극 물질과 같은 외부적인 요인, 아토피, 건선 등의 피부 질환뿐 아니라 테이프 스트리핑을 통한 피부 장벽 손상시 항균 물질로서 defensins, psoriasin(S100A7) 등이 피부로부터 분비되며, 특히 S100A7가 각질층에서 빠르게 증가되기 때문에 상기 각질세포 및 피지에 포함된 S100A7을 양적으로 측정하기 위한 것이다.The epidermis may include corneocytes of the epidermis, sebum that is a skin secretion, and the like. Defensins, psoriasin (S100A7), etc. are secreted from the skin when the skin barrier is damaged through tape stripping as well as skin diseases such as atopy and psoriasis such as harmful bacteria or stimulants such as S. aureus and E-coli. In particular, since S100A7 is rapidly increased in the stratum corneum, it is for quantitatively measuring S100A7 contained in the keratinocytes and sebum.

상기 표피의 채취는 테이프 스트리핑, 피지를 흡착할 수 있는 종이 또는 필름으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 이상의 방법에 의할 수 있다. 보다 구체적으로는 상기 채취는 스트리핑 테이프, 피지를 흡착할 수 있는 종이 또는 필름 등을 피부에 일정 시간 부착한 후 피부로부터 떼어내어 수행할 수 있다. 상기 테이프 스트리핑에는 예를 들어 원형의 D-squme(CuDerm사 제조) 등을 사용할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 부착 시간은 상기 표피의 각질, 피지 등의 채취에 충분한 시간이라면 특별히 한정되지 않는다.The skin may be collected by at least one method selected from the group consisting of tape stripping, paper or film capable of adsorbing sebum. More specifically, the sampling may be performed by attaching stripping tape, paper or film capable of adsorbing sebum to the skin for a predetermined time, and then removing the skin from the skin. For example, a circular D-squme (manufactured by CuDerm) may be used for the tape stripping, but is not limited thereto. The adhesion time is not particularly limited as long as it is a time sufficient for collecting keratin, sebum, and the like of the epidermis.

상기 채취된 표피로부터 S100A7을 측정하는 단계는 형광 발색법, 효소 결합 면역 흡수 분석법, 단백질 칩 및 웨스턴블랏으로 이루어진 군에서 선택되는 방법에 의할 수 있다.The step of measuring S100A7 from the collected epidermis may be by a method selected from the group consisting of fluorescence coloration, enzyme-linked immunosorbent assay, protein chip and Western blot.

본 발명의 일실시예에서 상기 형광 발색법은 상기 채취된 표피에 형광 또는 발색단이 결합된 S100A7 항체를 포함하는 시약을 처리하는 단계; 및 상기 처리 후 형광 또는 발색을 형광분석기 또는 육안으로 확인하는 단계를 포함할 수 있다.In one embodiment of the present invention, the fluorescence method may include: treating a reagent comprising an S100A7 antibody conjugated with fluorescence or chromophore to the collected epidermis; And identifying the fluorescence or color after the treatment with a fluorometer or the naked eye.

본 발명의 일실시예에서 상기 효소 결합 면역 흡수 분석법(ELISA; enzyme-linked immunosorbent assay)은 통상적인 ELISA 방법에 따라 수행할 수 있으며, 예를 들어 상기 채취된 각질층의 각질세포(corneocyte), 피지 등을 상기 스트리핑 테이프, 종이, 필름 등으로부터 분리하여 분리된 각질세포로부터 S100A7의 양을 정량할 수 있다. 상기 채취된 표피의 분리는 소니케이션(sonication) 등을 이용할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.In one embodiment of the present invention, the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA; enzyme-linked immunosorbent assay) may be performed according to a conventional ELISA method, for example, corneocytes (corneocytes), sebum, etc. of the collected stratum corneum. The amount of S100A7 can be quantified from the separated keratinocytes by separating from the stripping tape, paper, film, and the like. Separation of the collected epidermis may use sonication, but is not limited thereto.

바람직하게는, 상기 S100A7의 정량은 상기 분리된 각질층의 각질층의 각질세포(corneocyte), 피지 등으로부터 단백질을 분리하여 상용화된 ELISA kit를 사용하여 S100A7의 양을 정량할 수 있다. 상기 단백질의 분리는 예를 들어 하기와 같은 과정에 의할 수 있다.Preferably, the quantification of S100A7 can be used to quantify the amount of S100A7 using a commercially available ELISA kit by separating proteins from corneocytes (corneocytes), sebum, etc. of the stratum corneum of the separated stratum corneum. Separation of the protein may be, for example, by the following procedure.

스트리핑 테이프, 종이, 필름 등을 이용하여 상기 각질세포 또는 피지를 채취한 후, 상기 스트리핑 테이프, 종이, 필름 등을 완충액에 담근 후 소니케이션을 통해 각질세포 또는 피지를 상기 스트리핑 테이프, 종이, 필름 등으로부터 분리한다. 분리된 각질세포 또는 피지를 함유하는 완충액을 원심분리하여 완충액 상등액을 버리고 각질세포 또는 피지만을 얻는다. 얻어진 각질층의 각질세포(corneocyte), 피지 등에 용해액(lysis buffer)을 첨가하여 세포 등을 파괴시킨 후 원심분리하여 상등액에 남아있는 가용성 단백질을 수득한다. 상기 완충액으로는 예를 들어 PBS(Phosphate Buffered Saline) buffer를 사용할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. After collecting the keratinocytes or sebum using stripping tape, paper, film, etc., soaking the stripping tape, paper, film, etc. in a buffer solution and then keratinocytes or sebum through the sonication of the stripping tape, paper, film, etc. To separate from. Centrifugation of the separated keratinocytes or sebum-containing buffer is discarded to discard the buffer supernatant to obtain only keratinocytes or sebum. A lysis buffer is added to corneocytes, sebum, etc. of the obtained stratum corneum to destroy cells and the like, followed by centrifugation to obtain soluble proteins remaining in the supernatant. As the buffer, for example, PBS (Phosphate Buffered Saline) buffer may be used, but is not limited thereto.

상기와 같이 각질세포 자체를 수득하여 이로부터 단백질을 얻는 것은 S100A7은 피부세포에서 분비되기 때문에 각질층의 최외각 세포인 각질세포(corneocyte) 자체를 수득하여 이를 용해시켜 단백질을 분리함으로써 검출에 충분한 단백질을 확보할 수 있기 때문에다. 따라서 S100A7의 검출이 보다 용이해지며, 또한 검출 이전에 S100A7이 외부 요인에 노출되어 변형이 일어나거나 노출된 S100A7이 외부 용매 등에 쉽게 떨어지는 것을 방지할 수 있다.
Obtaining a protein from the keratinocytes as described above, because S100A7 is secreted from the skin cells to obtain a corneocyte itself, which is the outermost cell of the stratum corneum and lysate it to separate the protein to detect a sufficient protein Because I can secure it. Therefore, the detection of S100A7 becomes easier, and it is possible to prevent S100A7 from being exposed to an external factor prior to detection, causing deformation or exposing the exposed S100A7 to an external solvent.

본 발명의 일실시예에서 상기 단백질 칩은 당업계에서 통상적으로 이용되는 방법에 따라 수행될 수 있으며, 예를 들어 상기 채취된 표피를 상기 스트리핑 테이프, 종이, 필름, 등으로부터 분리하고, 상기 분리된 표피로부터 각질세포(corneocyte) 단백질을 분리하여 상용화된 단백질 키트를 사용하여 S100A7의 양을 정량화 할 수 있다. 상기 채취된 표피의 분리는 소니케이션(sonication) 등을 이용할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.In one embodiment of the present invention, the protein chip may be performed according to a method commonly used in the art, for example, the collected epidermis is separated from the stripping tape, paper, film, and the like, and the separated Corneocyte proteins are separated from the epidermis and the commercialized protein kit can be used to quantify the amount of S100A7. Separation of the collected epidermis may use sonication, but is not limited thereto.

본 발명의 일실시예에서 상기 웨스턴블랏은 당업계에서 통상적으로 이용되는 방법에 따라 수행될 수 있으며, 상기 스트리핑 테이프, 종이, 필름, 등으로부터 분리하고, 상기 분리된 표피로부터 각질세포(corneocyte) 단백질을 분리하여 웨스턴블랏을 수행하여 S100A7의 양을 정량화 할 수 있다.In one embodiment of the present invention, the western blot may be performed according to a method commonly used in the art, and separated from the stripping tape, paper, film, and the like, and corneocyte protein from the separated epidermis (corneocyte) protein. By separating the western blot can be performed to quantify the amount of S100A7.

본 발명은 표피 채취부 및 채취된 표피의 S100A7 측정부를 포함하는 피부 장벽 손상 평가 키트를 제공한다.The present invention provides a skin barrier damage evaluation kit comprising an epidermal harvesting unit and an S100A7 measuring unit of the collected epidermis.

상기 표피는 표피의 각질세포(corneocyte), 피부 분비물인 피지 등을 포함할 수 있다. S.aureus, E-coli 등의 유해균 또는 자극 물질과 같은 외부적인 요인, 아토피, 건선 등의 피부 질환뿐 아니라 테이프 스트리핑을 통한 피부 장벽 손상시 항균 물질로서 defensins, psoriasin(S100A7) 등이 피부로부터 분비되며, 특히 S100A7가 각질층에서 빠르게 증가되기 때문에 상기 각질세포 및 피지에 포함된 S100A7을 양적으로 측정하기 위한 것이다.The epidermis may include corneocytes of the epidermis, sebum that is a skin secretion, and the like. Defensins, psoriasin (S100A7), etc. are released from the skin as an antibacterial agent for skin barrier damage through tape stripping, as well as external diseases such as harmful bacteria or stimulants such as S.aureus and E-coli In particular, since S100A7 is rapidly increased in the stratum corneum, it is for quantitatively measuring S100A7 contained in the keratinocytes and sebum.

상기 표피 채취부는 스트리핑 테이프, 피지를 흡착할 수 있는 종이 및 필름으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 이상을 포함할 수 있다.The epidermal harvesting unit may include one or more selected from the group consisting of stripping tape, paper capable of adsorbing sebum, and film.

피부 장벽 손상 평가 키트에 있어서, 상기 측정부는 상기 채취부를 포함하는 일체화된 형태일 수 있으며, 상기 채취부와 상기 측정부는 분리되어 존재할 수도 있다.In the skin barrier damage evaluation kit, the measuring part may be an integrated form including the collecting part, and the collecting part and the measuring part may exist separately.

본 발명의 일실시예에서 상기 측정부는 형광 또는 발색단과 결합된 S100A7의 항체를 포함할 수 있다. 본 발명의 다른 일실시예에서 상기 채취부와 상기 측정부는 일체화 되어 있으며, 상기 형광 또는 발색단과 결합된 S100A7의 항체를 포함할 수 있다.In one embodiment of the present invention, the measurement unit may include an antibody of S100A7 coupled with fluorescence or chromophores. In another embodiment of the present invention, the collecting unit and the measuring unit are integrated, and may include an antibody of S100A7 coupled with the fluorescence or chromophore.

본 발명의 일실시예에서 상기 측정부는 1차 항체 및 효소가 결합된 2차 항체를 포함할 수 있다. 상기 측정부는 ELISA를 수행하기 위한 S100A7의 1차항체 및 효소가 결합된 2차 항체를 포함하는 ELISA 키트일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the measuring unit may include a secondary antibody to which a primary antibody and an enzyme are bound. The measuring unit may be an ELISA kit including a primary antibody of S100A7 and a secondary antibody bound to an enzyme for performing ELISA.

본 발명의 일실시예에서 상기 측정부는 S100A7와 특이적으로 반응하는 항체, 수용기 및 효소로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함할 수 있다. 상기 측정부는 S100A7의 검출을 위한 단백질 키트일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the measuring unit may include one or more selected from the group consisting of antibodies, receptors and enzymes that specifically react with S100A7. The measurement unit may be a protein kit for detection of S100A7.

Claims (11)

피부 장벽 손상 평가방법으로서,
a) 채취기구를 사용하여 표피를 채취하는 단계;
b) 상기 채취한 표피로부터 각질세포 및 피지를 분리하는 단계;
c) 상기 분리한 각질세포 및 피지의 가용성 단백질들을 수득하는 단계; 및
d) 상기 수득한 가용성 단백질들 중에서 S100A7 단백질의 발현수준을 확인하는 단계;를 포함하고,
상기 b) 단계에서 채취한 표피로부터 각질세포 및 피지의 분리는 각질세포 및 피지가 흡착된 채취기구를 PBS(Phosphate Buffered Saline)에 담근 후 소니케이션(sonication)을 통해 채취기구로부터 각질세포 및 피지를 분리하는 것이고,
상기 c) 단계에서 가용성 단백질의 수득은 분리한 각질세포 및 피지에 용해액인 2% SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)가 함유된 pH 6.8의 62mM Tris-HCl 용액을 첨가하여 가용성 단백질을 수득하는 것을 특징으로 하는, 피부 장벽 손상 평가방법.
As a method for evaluating skin barrier damage,
a) harvesting the epidermis using a harvesting instrument;
b) separating keratinocytes and sebum from the collected epidermis;
c) obtaining the isolated keratinocytes and sebum soluble proteins; And
d) checking the expression level of the S100A7 protein among the obtained soluble proteins; and
Separation of keratinocytes and sebum from the epidermis collected in step b) is carried out by soaking the harvesting apparatus to which the keratinocytes and sebum are adsorbed in PBS (Phosphate Buffered Saline) and then collecting the keratinocytes and sebum from the collection apparatus through sonication. To separate,
Obtaining the soluble protein in the step c) is characterized in that to obtain a soluble protein by adding a 62 mM Tris-HCl solution of pH 6.8 containing 2% SDS (Sodium Dodecyl Sulfate) as a lysate in the keratinocytes and sebum isolated Skin barrier damage evaluation method.
삭제delete 제1항에 있어서,
상기 a) 단계에서 표피의 채취는 테이프 스트리핑, 종이 및 필름으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 채취기구를 피부에 부착한 후 피부로부터 떼어내어 수행되는 것임을 특징으로 하는, 피부 장벽 손상 평가방법.
The method of claim 1,
In the step a), the collection of the epidermis is characterized in that the skin stripping, paper and film, at least one of the collection device is selected from the group consisting of peeling off from the skin, characterized in that the skin barrier damage evaluation method.
제1항에 있어서,
상기 d) 단계에서 S100A7 단백질의 발현수준의 확인은 상기 수득한 가용성 단백질들에 S100A7 단백질과 특이적으로 반응하는 항체, 수용기 및 효소로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 처리한 다음, 형광 발색법, 효소 결합 면역 흡수 분석법, 단백질 칩 및 웨스턴블랏으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법으로 분석되어 이루어지는 것임을 특징으로 하는, 피부 장벽 손상 평가방법.
The method of claim 1,
Determination of the expression level of the S100A7 protein in step d) is treated with one or more selected from the group consisting of antibodies, receptors and enzymes specifically reacting with the S100A7 protein to the obtained soluble proteins, followed by fluorescence , Enzyme-linked immunosorbent assay, protein chip and Western blot characterized in that it is analyzed by one or more methods selected from the group consisting of, skin barrier damage evaluation method.
제1항에 있어서,
상기 피부 장벽 손상의 원인은 유해균, 피부질환 및 물리적 자극으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 피부 장벽 손상 평가방법.
The method of claim 1,
The cause of the skin barrier damage is characterized in that at least one selected from the group consisting of harmful bacteria, skin diseases and physical stimulation, skin barrier damage evaluation method.
제5항에 있어서,
상기 유해균은 황색포도상구균(S. aureus) 또는 대장균(E. coli)인 것을 특징으로 하는, 피부 장벽 손상 평가방법.
The method of claim 5,
The harmful bacteria are Staphylococcus aureus ( S. aureus ) or E. coli ( E. coli ), characterized in that the skin barrier damage evaluation method.
제5항에 있어서,
상기 피부질환은 아토피성 피부질환 또는 건선인 것을 특징으로 하는, 피부 장벽 손상 평가방법.
The method of claim 5,
The skin disease is atopic skin disease or psoriasis, characterized in that the skin barrier damage evaluation method.
삭제delete 제4항에 있어서,
상기 항체는 형광 또는 발색단과 결합된 S100A7 단백질 특이적 항체인 것을 특징으로 하는, 피부 장벽 손상 평가방법.
The method of claim 4, wherein
The antibody is characterized in that the S100A7 protein specific antibody combined with fluorescence or chromophore, skin barrier damage evaluation method.
삭제delete 삭제delete
KR1020120137790A 2012-11-30 2012-11-30 Method and kit for determining damage of skin barrier KR102048877B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020120137790A KR102048877B1 (en) 2012-11-30 2012-11-30 Method and kit for determining damage of skin barrier

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020120137790A KR102048877B1 (en) 2012-11-30 2012-11-30 Method and kit for determining damage of skin barrier

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20140069917A KR20140069917A (en) 2014-06-10
KR102048877B1 true KR102048877B1 (en) 2019-11-26

Family

ID=51124927

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020120137790A KR102048877B1 (en) 2012-11-30 2012-11-30 Method and kit for determining damage of skin barrier

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102048877B1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220015130A (en) * 2020-07-30 2022-02-08 주식회사 인코스팜 Method for measuring skin DNA damage using stratum corneum and use thereof

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101629439B1 (en) * 2014-06-26 2016-06-10 을지대학교 산학협력단 Skin Barrier Protein ELISA Kit of Atopic Dermatitis Patient Using Non-invasive Sample Extraction Method
MY193460A (en) * 2015-04-06 2022-10-14 Amorepacific Corp Composition for diagnosing skin damage caused by fine dust, and composition comprising galangin as active ingredient
US11976332B2 (en) 2018-02-14 2024-05-07 Dermtech, Inc. Gene classifiers and uses thereof in non-melanoma skin cancers
EP3813678A4 (en) * 2018-05-09 2022-06-08 Dermtech, Inc. Novel gene classifiers and uses thereof in autoimmune diseases

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100055694A1 (en) * 2008-07-22 2010-03-04 L'oreal Molecular signature representative of dysfunctions in epidermal homeostasis

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012008747A2 (en) * 2010-07-13 2012-01-19 (주)아모레퍼시픽 Skin diagnosis method and kit

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100055694A1 (en) * 2008-07-22 2010-03-04 L'oreal Molecular signature representative of dysfunctions in epidermal homeostasis

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Regine Glaser et al., 'The Antimicrobial Protein Psoriasin (S100A7) Is Upregulated in Atopic Dermatitis and after Experimental Skin Barrier Disruption', Journal of Investigative Dermatology, 2009, Vo*

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220015130A (en) * 2020-07-30 2022-02-08 주식회사 인코스팜 Method for measuring skin DNA damage using stratum corneum and use thereof
KR102378081B1 (en) * 2020-07-30 2022-03-25 주식회사 인코스팜 Method for measuring skin DNA damage using stratum corneum and use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
KR20140069917A (en) 2014-06-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102048877B1 (en) Method and kit for determining damage of skin barrier
JP6022260B2 (en) Evaluation method of skin condition
JP6219978B2 (en) Non-invasive measurement method of metabolites for skin health
TWI666446B (en) Skin viscoelasticity marker and utilization of the same
JP6419654B2 (en) Evaluation of hair growth and scalp compressive stress
JP5065237B2 (en) Noninvasive evaluation method of local pathology of atopic dermatitis
JP4469762B2 (en) Sensitive skin evaluation method and evaluation kit
TWI595235B (en) Method for evaluating rough skin
Carvalho et al. Comet assay in neonatal sepsis
Steyrer et al. Markers of inflammation in free‐living African elephants (Loxodonta africana): Reference intervals and diagnostic performance of acute phase reactants
Gharishvandi et al. Assessment of Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) as an early biomarker for detection of renal impairment in hypertensive patients
CN101405601B (en) Method of evaluating skin sensitivity level by using squamous cell carcinoma-related antigen as indication
CN109839507A (en) A kind of biomarker detecting ultraviolet light injury and its application
JP2021117164A (en) Method of evaluating skin inflammatory conditions
JP7231160B2 (en) Methods and kits for assisting in diagnosing disease in a subject
WO2012008747A2 (en) Skin diagnosis method and kit
JP6530646B2 (en) Evaluation method of compressive stress of scalp
JP2016216436A (en) Skin viscoelasticity improver
CN102533975B (en) For the classification of chronic trauma and the method for prognosis and test kit
JP2024033289A (en) Skin elasticity marker and use thereof
JP7370909B2 (en) Method for preparing hyaluronic acid, method for detecting hyaluronic acid, and kits thereof
WO2024075844A1 (en) Method for detecting inflammatory skin disease and judging severity thereof
Senthilkumaran et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin as an early marker of acute kidney injury in snake bites victims
US20240302365A1 (en) Method for diagnosing chronic urticaria
Chang Noninvasive Detection of Specific Diagnostic Biomarkers for Atopic Dermatitis

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)
GRNT Written decision to grant