KR102001979B1 - Atp 검출에 의한 실시간 세균 측정 장치 - Google Patents

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Abstract

실시간 세균 측정 장치를 제공한다. 일 양상에 따른 반응부, 반응부를 지지하고 있는 지지부, 지지부를 이동시키기 위한 회전축, 및 상기 반응부에 시료를 공급하기 위한 시료 공급부를 포함하는 실시간 세균 측정 장치에 의하면, ATP를 검출하여 실시간으로 세균을 측정할 수 있다.

Description

ATP 검출에 의한 실시간 세균 측정 장치{Real-time bacteria measurement device by ATP detection}
실시간 세균 측정 장치에 관한 것이다.
해마다 공기 중 미세먼지 농도가 점점 증가하고 있고, 공기 중 미생물에 의한 전염과 질병 감염이 빈번하게 문제되면서 공기 질의 안전과 건강 위해성에 대한 국가적, 사회적 관심이 높아지고 있다. 현재 공기 질은 미세먼지 입자의 질량 농도, 일부 화학종의 농도를 기준으로 평가된다. 그러나 이러한 평가는 평균적 경험칙에 근거한 것일 뿐, 실제 인체 건강에 어떤 영향을 미치는지는 정확하게 결정하기 어렵다. 일부 기준으로 삼고 있는 화학종이 인체에 영향을 미치는 위해성 정도는 잘 알려져 있으나, 공기 중 미세먼지의 입자 구성 성분이나 생물학적 인자의 구성 성분은 정확히 알기 어렵다. 공기 질의 건강 위해성을 판단할 때 이들 지표가 중요함에도 불구하고, 이에 대한 명확한 기준이 현재 기준에는 포함되어 있지 않으며, 따라서 이들 구성 성분의 건강에 대한 영향은 더욱 정확하게 판단하기 어렵다.
그 밖에, 가습기 등의 생활 가전 제품들이 공기 중에 존재하는 미생물 또는 접촉 등에 의해 오염되어, 오히려 건강에 악영향을 미치는 사례가 빈번하게 나타나고 있다. 따라서, 주변 환경에 존재하는 미생물을 실시간으로 측정할 필요성이 점점 더 높아지고 있다.
미세먼지의 입자 구성 성분이나 생물학적 인자 구성 성분을 판단하는 방법은 당해 분야에 잘 알려져 있다. 공기 중에 포함된 부유세균의 종류와 농도는 포집된 공기 시료에서 핵산(DNA 또는 RNA)을 추출하고, 알려진 부유세균 종류의 지문인 특정 유전자를 증폭하면 쉽게 판별할 수 있다. 또는 포집된 공기 시료를 미생물 배양을 위한 고체 배지 위에 직접 맞닿게 해서 적절한 온도와 습도를 유지하고 2-3일 배양 과정을 거치면 콜로니가 형성되는데, 형성된 콜로니의 개수를 세면 공기 중 미생물 농도도 쉽게 알 수 있다. 이러한 유전자 증폭법 또는 배양법은 부유 세균 측정에 많이 활용되고 있고, 특히, 배양법은 표준 방법으로 사용되고 있다. 그러나 유전자 증폭법은 유전자를 증폭하는데 필요한 시약과, 증폭을 위한 다양한 온도 변화를 제어하기 위한 온도 변환 장비를 필수적으로 갖추어야 하고, 복잡한 핵산 추출 과정이 필요하다. 배양법은 준비된 고체 배지를 바로 사용할 수 있지만 포집된 세균의 종류에 따라 짧게는 하루에서 길게는 일주일 이상의 배양 시간을 확보해야한다.
따라서 세균의 실시간 또는 준 실시간 모니터링을 목적으로 한다면 유전자 증폭법과 배양법은 적절치 않다.
일 양상은 ATP를 검출하기 위한 시약과 이를 고정하기 위한 부재를 포함하는 세균 검출을 위한 흡수재를 제공한다.
다른 양상은 반응부, 반응부를 지지하고 있는 지지부, 지지부를 이동시키기 위한 회전축, 및 상기 반응부에 시료를 공급하기 위한 시료 공급부를 검출하기 위한 검출부를 포함하는 실시간 세균 측정 장치를 제공한다.
이하, 도면들 참조하면서 실시간 세균 측정 장치의 실시예들에 관하여 설명한다. 도면에서 동일한 참조부호는 동일한 구성요소를 지칭하며, 각 구성요소의 크기, 두께 또는 위치 등은 설명의 명료성을 위하여 과장되어 있을 수 있다.
도 1은 실시간 세균 측정 장치의 개요를 나타낸다.
도 1을 참조하면, 본 발명의 실시간 세균 측정 장치는 반응부, 반응부를 지지하고 있는 지지부, 지지부를 이동시키기 위한 회전축, 및 상기 반응부에 시료를 공급하기 위한 시료 공급부를 포함하여 구성된다. 필요에 따라, 상기 반응부에서 일어나는 반응을 검출하기 위한 검출부를 더 포함하여 구성된다.
시료 공급부는 세균을 포집하고, 포집된 세균을 용해하여 ATP를 포함하는 반응 시료를 반응부에 공급하는 역할을 할 수 있다. 시료 공급부는 필요에 따라 세균 포집부 및 세균 용해부로 구분될 수 있다. 이 경우 시료 포집부에서는 검출 대상 중에 존재하는 세균을 포집하고, 포집된 세균은 세균 용해부로 이동된 후 세균 용해 과정을 통해, ATP를 포함하는 시료를 제공하는 것일 수 있다. 예를 들면, 세균 포집부에서 공기 또는 유체 중에 용액을 노출시키고, 이에 접촉하는 세균을 포집할 수 있으며, 세균 용해부는 포집된 세균에 열처리를 하여, 용해시키는 역할을 수행할 수 있다. 그 밖에 당해 분야에서 통상적으로 이용되는 방법을 이용하여 세균 포집 및 용해를 실시할 수 있다. 시료 공급부의 시료 공급량은 별도의 제어 장치로 조절할 수 있으며, 당해 분야의 통상의 기술자가 반응부의 크기 및 흡습력에 따라 쉽게 조절할 수 있고, 예를 들면 10-100 μL일 수 있다.
반응부는 ATP 검출을 위한 반응 시료가 고정되어 있는 부분을 의미한다. 예를 들면, 반응부는 루시퍼레이즈, 루시페린, 및 효소 반응에 필요한 시약들을 포함할 수 있으며, 상기 시약의 예시로는 다이티오트레이톨(dithiothreitol: DTT), 트리스(tris), 글라이신(glycine), MgSO4, 에틸렌다이아민테트라아세틱 애시드(ethylenediaminetetraacetic acid: EDTA), 및 소듐 아자이드(sodium azide)가 있다. 그 외에도 상업적으로 판매되는 ATP 검출을 위한 시약 또는 당해 분야에서 통상적으로 이용되는 ATP 검출 시약들을 이용할 수 있다. 상기 반응부는 ATP 검출을 위한 모든 시약을 포함하거나, 혹은 일부를 포함하는 것일 수 있다. 상기 반응부가 ATP 검출을 위한 시약의 일부를 포함하는 경우, 포함되지 않은 시약은 시료 공급부에서 시료가 공급될 때 함께 공급되거나, 또는 별도의 시약 공급부를 통해 반응부에 공급될 수 있다. 루시퍼레이즈와 루시페린은 액상에서 저온 보관 (4도 이하)이 권장되기 때문에 시약의 일부를 포함하는 경우에도 루시퍼레이즈와 루시페린은 페이퍼 디스크에 필수로 포함되는 것이 바람직하다.
반응부는 수분을 흡수할 수 있는 종이 재질, 또는 면, 마, 모, 또는 견을 포함하는 천연 섬유, PET계, 아크릴계, 폴리아미드계, 폴리프로필렌계, 폴리비닐알콜계, 폴리염화비닐계, 폴리염화비닐리덴계, 폴리우레탄계, 폴리알킬파라옥시벤조레이트계, 또는 폴리테트라플로오르에틸렌계를 포함하는 함성 섬유 등의 섬유 재질, 또는 다공성 재료로 제조된 것일 수 있다. 반응부의 일 실시예는 루시퍼레이즈 및 루시페린을 포함하는 ATP를 검출하기 위한 시약 및 상기 시약을 건조 고정하기 위한 부재를 포함하는 세균 검출을 위한 흡수재의 형태일 수 있다.
상기 반응부에서는 ATP를 검출하기 위한 반응이 수행되며, ATP의 검출 여부는 육안으로 확인하거나, 또는 별도의 검출부를 이용하여 수행할 수 있다. 예를 들면, 당해 분야의 통상의 기술자는 알려진 지식을 이용하여, ATP가 존재하는 경우 육안으로 확인할 수 있는 발색 반응이 일어나도록 시약을 준비하거나, 또는 루시퍼레이즈에 의한 발광 반응이 일어나도록 시약을 준비하여 별도의 검출 장치로 발광 반응을 측정할 수 있다.
상기 반응부는 지지부 상에 위치한 것일 수 있다. 일 양상에서는 반응부와 지지부가 구분되지 않거나, 또는 동일한 재질로 구성된 것일 수 있다.
상기 반응부와 지지부가 구분되는 경우, 예를 들면, 반응부는 시료 공급부로부터 공급되는 시료를 흡수할 수 있는 재질이고, 지지부는 비 침습성 재질로 제조되거나, 또는 비 침습성 재질로 코팅되어 있는 것일 수 있다. 즉, 액체 시료가 ATP 반응부에만 흡수가 되고 반응부 외부의 지지부로 액화 시료가 번지지 않도록 하는 것을 특징으로 한다. 지지부의 재질은, 예를 들면, 합성수지피막, 염화비닐, 초산비닐, 비닐, 비닐리덴, 폴리에틸렌, 폴리프로필렌 등의 플라스틱 필름일 수 있다.
상기 반응부는 한 면이 공기 중에 노출되어 있고, 다른 한 면은 지지부에 부착되어 있어, 공기 중에 노출되는 면이 용해된 액화 포집 공기 시료와 직접 맞닿는 것일 수 있다. 상기 지지부 상에 위치한 반응부는 연속되거나, 또는 불연속적으로 배열될 수 있다. 불연속적으로 배열되는 경우, 당해 분야의 통상의 기술자는 각각의 반응부 사이의 간격을 회전축의 회전 속도, 시료 공급 속도, 또는 ATP 검출 속도 등에 따라 임의로 정할 수 있다.
상기 지지부의 크기는, 당해 분야의 통상의 기술자가 임의로 정할 수 있으며, 예를 들면, 가로는 1.5 cm ~ 2.0 cm 내외, 길이는 한정이 없는 형태의 기다란 직사각형의 테이프 형태가 될 수 있다.
상기 반응부와 지지부는 모두 유연한 재질로 제조되어, 원통형으로 말릴 수 있는 것일 수 있다. 예를 들면, 상기 반응부는 회전하는 컨베이어벨트 타입의 필름(지지부)에 일정 간격으로 일렬로 배열되어 부착되어 있는 것일 수 있다. 또한, 상기 지지부의 양 끝단은 동일한 지름의 회전축에 말려있는 것일 수 있다. 상기 회전축은 컨트롤러에 연결되어, 사용자가 임의로 회전 속도, 회전 수, 또는 회전 패턴 등을 설정할 수 있다. 예를 들면, 시료 공급부에서 시료가 공급되는 위치 바로 아래에 반응부가 위치하도록 회전축이 회전하고, 시료가 공급된 이후에 반응부는 검출부로 이송되어 시료 내 존재하는 ATP의 양을 측정할 수 있다. 지지부에 부착되는 반응부의 개수는 지지부의 길이, 반응부 사이의 간격에 따라 통상의 기술자가 임의로 결정할 수 있으며, 순차적으로 시료와 반응하여 부착된 반응부가 모두 소진되면, 원통형으로 말린 반응부 및 지지부 필름을 카트리지 형식으로 탈착 가능한 형태일 수 있다.
상기 회전축이 1회 회전할 때마다 반응부가 이동하는 거리는, 시료 공급부에서 시료가 공급되는 위치와, 검출부 사이의 거리와 동일할 수 있다. 따라서 제1 반응부가 지지부의 이동에 따라 검출부로 이동하게 되면, 후속으로 배열되어 있는 제2 반응부가 시료가 공급되는 위치에 위치하게 된다. 회전축은 지지부의 양 끝단에 모두 존재할 수 있으며, 그 동작이 별도로 제어되는 컨트롤러가 연결되어 있을 수 있다.
상기 검출부는 반응부의 반응 양상에 따라 해당하는 반응을 검출할 수 있는 통상적인 장치를 포함할 수 있다. 예를 들어, 반응부에서 진행되는 반응이 ATP, 루시페린, 및 루시퍼레이즈에 의한 발광 반응이라면, 검출부는 발광 반응을 측정하기 위한 루미노미터를 포함할 수 있다. 검출부는 반응부의 반응을 측정하는 측정부 및 측정 결과를 분석하는 분석부로 구분되는 것일 수 있다.
상기 실시간 세균 측정 장치에 따르면, 일정한 시료 부피 내에 세균 수가 증가하면 존재하는 ATP의 양이 많아지고, 이에 따라 추출되는 ATP의 양도 많아지므로, 발광 강도에 따라 시료 내 존재하는 세균 수를 측정할 수 있다.
실시간 세균 측정 장치에 의하면, 세균을 탐지하기 위한 시료 등을 별도로 준비할 필요가 없이, 시료 중 세균의 존재 및 농도 검출 시간을 크게 단축시켜 실시간으로 세균을 측정할 수 있다.
도 1은 실시간 세균 측정 장치의 개요를 나타낸다.
도 2는 일 양상에 따라 제조한 컨베이어벨트 필름에 부착되어 있는 ATP 반응 페이퍼 디스크의 사진이다.
도 3은 대장균 농도에 따른 ATP 반응 페이퍼 디스크의 발광 반응 강도를 나타낸 결과이다.
도 4는 ATP 반응 페이퍼 디스크의 시간에 따른 반응 안정성을 나타낸다.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 페이퍼 디스크가 고정된 컨베이어벨트 타입 필름 테이프의 제조
1.1 루시퍼레이즈 /루시페린/반응 버퍼가 동시 고정된 페이퍼 디스크의 제작
ATP 반응 페이퍼 디스크에 루시퍼레이즈, 루시페린, 다이티오트레이톨(dithiothreitol: DTT), 트리스(tris), 글라이신(glycine), MgSO4, 에틸렌다이아민테트라아세틱 애시드(ethylenediaminetetraacetic acid: EDTA), 소듐 아자이드(sodium azide)를 동시에 고정시켰다. 구체적으로는 다음과 같다.
25 mM 트리스, 192 mM 글라이신, 100 mM MgSO4, 2 mM EDTA, 2 mM 소듐 아자이드를 포함하는 트리스-글라이신 반응 버퍼를 준비하고, pH 7.8로 조정하였다. 100 mM DTT (DL-dithiothreitol)를 별도로 준비해 두었다. 반응 버퍼를 이용하여 10 mM D-루시페린을 준비하였다. 반응버퍼를 이용하여 5 mg/mL 루시퍼레이즈를 준비하였다.
이후, 페이퍼 디스크에 고정화하기 위해, 35.6 mL DI water + 2 mL 반응 버퍼 + 0.4 mL DTT 용액을 먼저 혼합하였다. 이 용액을 기준 반응 용액으로 하여 0.96 mL을 취하고 여기에 0.12 mL의 10 mM 루시페린, 0.12 mL의 5 mg/mL 루시퍼레이즈를 혼합하여 준비하였다. 혼합 용액에는 ATP의 반응에 필요한 모든 반응 성분을 포함시켰다.
페이퍼 디스크는 와트만 필터 페이퍼를 사용하였으며, 대략 지름 0.5 cm - 1.0 cm 원형 형태로 준비하였다. 상기 페이퍼 디스크에 준비한 루시퍼레이즈, 루시페린, DTT, 트리스, 글라이신, MgSO4, EDTA, 및 소듐 아자이드가 모두 포함된 혼합 용액을 10 μL 떨어뜨렸다. 이후 건조하는 과정을 거치고 다시 10 μL를 떨어뜨린 후 건조시키고, 다시 10 μL를 떨어뜨려 하루 정도 실리카겔이 포함된 밀폐 용기에서 건조시켰다. 건조된 페이퍼 디스크는 4도 내지 상온에서 보관하였다.
상기와 같이 제조된 페이퍼 디스크에서는 아래 반응식 1과 같은 반응이 진행될 수 있다.
Figure 112018000950007-pat00001
<반응식 1>
이 기작에서 반응에 필요한 루시페린, 루시퍼레이즈, 및 Mg2 +은 이미 페이퍼 디스크에 고정되어 있다. O2는 페이퍼 디스크가 공기 중에 노출되어 있는 상태로 반응이 진행되기 때문에 따로 공급해줄 필요가 없다. 따라서 ATP가 포함되어 있는 시료와 ATP 반응 페이퍼 디스크가 만나면 그 즉시 발광 반응이 진행된다. 발광 강도를 측정하면 ATP 존재 여부와 ATP 정량이 가능하다.
1.2 페이퍼 디스크가 고정된 컨베이어벨트 타입 필름 제작
실시예 1에서 제조된 페이퍼 디스크를 셀룰로판 테이프에 부착하여 컨베이어벨트 타입 필름 탐지부를 제작하였다. 구체적으로는 다음과 같다.
일반적인 셀룰로판 테이프의 접착면에 ATP 반응 페이퍼 디스크를 일정간격으로 부착시켰다. 페이퍼 디스크가 붙지 않은 부분은 점착 성분이 남아있게 되는데, 동일한 사이즈의 셀룰로판 테이프에 페이퍼 디스크 크기와 같은 크기 그리고 배열된 같은 간격으로 천공을 내고 셀룰로판 테이프의 접착면끼리 마주보도록 붙여, 접착면의 남은 부분이 없도록 하였다. 결과적으로 셀룰로판 테이프의 페이퍼 디스크가 결합된 부분은 수분을 흡수할 수 있고, 그 주변은 수분을 흡수할 수 없는 상태로 제조하였다.
도 2는 상기 실시예에 따라 제조한 페이퍼 디스크가 고정된 필름 테이프이다. 이와 같이 페이퍼 디스크가 일정 간격 부착된 유연한 필름 테이프를 구성할 수 있다.
1.3 ATP 반응 페이퍼 디스크가 고정된 필름의 컨베이어벨트 구성
앞서 언급된 ATP 반응 페이퍼 디스크가 고정된 필름을 구성하고, 이 필름의 양 끝 단을 회전축을 중심으로 말아주었다. 회전축을 모터와 연결하여, 모터 컨트롤러에 의해 회전 횟수와 속도가 제어되도록 하였다. 된다. 양 끝 회전축 사이의 거리는 약 10 cm가 되도록 구성하였다.
이후, 컨베이어 벨트 상의 페이퍼 디스크에 용해된 액화 포집 공기 시료 용액이 떨어질 수 있도록, 시료 포집기를 위치시켰다. 모터의 컨트롤러는 용액을 떨어뜨리는 위치 바로 아래 페이퍼 디스크가 위치할 수 있도록 동작하게 설정하였다. 일정 부피의 용액이 페이퍼 디스크위에 떨어지고 10초간 정치된 후 컨베이어벨트는 모터의 회전으로 일정 간격 이동된다. 용액과 반응되어 이동되는 페이퍼 디스크는 반응에서 발생하는 발광 강도를 읽기 위해 구성된 루미노미터 쪽으로 이송되어, 단위 시간 동안 포집된 부유 세균의 양이 ATP 반응 수준에 따라 측정된다. 다음의 용액이 떨어지는 부분에는 새로운 페이퍼 디스크가 위치하게 된다. 용액이 떨어지는 시간 간격은 별도로 조절할 수 있고, 이에 맞추어 모터가 회전하여 용액이 떨어질 때 페이퍼 디스크가 위치할 수 있도록 한다.
실시예 2. ATP 반응 페이퍼 디스크의 반응성 테스트
상기 실시예 1.1에서 제조한 ATP 반응 페이퍼 디스크를 96 웰 플레이트에 위치시켰다. 이후 ATP 반응 페이퍼 디스크의 반응성을 테스트하기 위해 서로 다른 농도의 대장균 시료를 준비하였다. 400 μL 멸균수에 대장균이 10^1 CFU ~ 10^8 CFU 포함되도록 희석하여 1.5 mL 플라스틱 튜브에 담아 준비하였다. 95℃로 예열된 히팅 블록(heating block)에 1.5 mL 튜브를 최소 2분에서 최대 10분 동안 정치시켰다. 이후, 400 μL의 시료 중 100 μL를 취해서 ATP 반응 페이퍼 디스크가 위치한 웰에 집어 넣고 96 웰 루미노미터로 발광량을 즉시 측정하였다.
도 3은 대장균 농도에 따른 ATP 반응 페이퍼 디스크의 발광 정도를 나타낸다. 10^1 CFU 부터 10^8 CFU까지 점진적으로 발광량이 증가하는 것을 확인할 수 있다.
실시예 3: ATP 반응 페이퍼 디스크의 장기 보관 안정성
상기 실시예 1.1에서 제조한 ATP 반응 페이퍼 디스크의 장기 보관 반응 안정성을 확인하기 위해, 페이퍼 디스크를 여러 개 동시에 제작하여 상온에 보관하면서 특정 일자에 하나씩 사용하여 ATP와의 반응성을 살펴보았다. 또한, 대조군으로서 ATP 반응에 필요한 루시퍼라제/루시페린/반응버퍼를 모두 섞은 반응 용액을 제조하고, 이 반응 용액을 상온에 보관하며 특정 일자에 100 μL씩 사용하여 발광 반응을 살펴보았다. 발광 반응은 10 μM ATP 용액을 사용하였다.
도 4는 10 μM ATP 에 대한 ATP 반응 페이퍼 디스크와 용액 반응의 발광 정도를 특정 일자별로 나타낸다. ATP 반응 페이퍼는 제작 후 약 40일 동안 초기의 발광 강도를 잃지 않거나, 오히려 반응 감도가 증가하는 경우를 보였다. 반면, 상기 반응 용액은 초기의 발광 강도를 점점 잃고 5일 후에는 초기 발광 값의 10% 미만으로 급격히 감소하는 경향을 보였다.

Claims (15)

  1. 삭제
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. ATP를 검출하기 위한 시약이 고정되어 있는 2 이상의 반응부;
    상기 반응부를 지지하고 있는 지지부;
    상기 지지부와 연결되어 지지부를 이동시키기 위한 회전축; 및
    상기 반응부에 시료를 공급하기 위한 시료 공급부를 포함하는 실시간 세균 측정 장치로서,
    상기 반응부는 루시퍼레이즈 및 루시페린을 포함하는 ATP를 검출하기 위한 시약; 및 상기 시약을 건조 고정하기 위한 부재를 포함하는 것이고,
    상기 2 이상의 반응부는 상기 지지부 상에 일정 간격으로 배치되어 있는 것인 실시간 세균 측정 장치.
  5. 청구항 4에 있어서, 상기 ATP를 검출하기 위한 시약은 다이티오트레이톨(dithiothreitol: DTT), 트리스(tris), 글라이신(glycine), MgSO4, 에틸렌다이아민테트라아세틱 애시드(ethylenediaminetetraacetic acid: EDTA), 및 소듐 아자이드(sodium azide)를 더 포함하는 것인 실시간 세균 측정 장치.
  6. 청구항 4에 있어서, 상기 지지부는 비침습성 재질인 것인 실시간 세균 측정 장치.
  7. 청구항 4에 있어서, 상기 시료 공급부는 세균을 포집하기 위한 시료 포집부, 및 세균을 용해시키기 위한 세균 용해부를 포함하는 것인 실시간 세균 측정 장치.
  8. 청구항 7에 있어서, 상기 시료 포집부는 공기 중에 용액을 노출시켜 부유 세균을 포집하는 것인 실시간 세균 측정 장치.
  9. 청구항 7에 있어서, 상기 세균 용해부는 포집된 세균에 열처리를 가하는 것인 실시간 세균 측정 장치.
  10. 청구항 4에 있어서, 상기 시약을 건조 고정하기 위한 부재는 종이, 천연 섬유, 합성 섬유, 또는 다공성 재료 중 어느 하나 이상인 것인 실시간 세균 측정 장치.
  11. 청구항 4에 있어서, 상기 지지부 및 반응부는 상기 회전축의 회전으로 원통형으로 말릴 수 있는 것인 실시간 세균 측정 장치.
  12. 청구항 4에 있어서, 상기 지지부 및 반응부는 상기 실시간 세균 측정 장치에 탈착 가능한 형태인 것인 실시간 세균 측정 장치.
  13. 청구항 4에 있어서, 상기 반응부에서 일어나는 반응을 검출하기 위한 검출부를 더 포함하는 실시간 세균 측정 장치.
  14. 청구항 13에 있어서, 상기 검출부는 루미노미터인 실시간 세균 측정 장치.
  15. 청구항 4의 측정 장치를 이용하여,
    시료 공급부로 제1 반응부에 시료를 공급하는 단계;
    회전축으로 지지부를 이동시켜, 제2 반응부를 시료 공급부로 시료를 공급받을 수 있는 위치에 두는 단계;
    제1 반응부에 존재하는 ATP를 검출하는 단계; 및
    상기 단계들을 2 이상의 반응부를 이용하여 1회 이상 반복하는 단계를 포함하는 실시간 세균 측정 방법.
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