KR101982813B1 - The manufactured method of natural fermented feed for immunity buildup - Google Patents

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KR101982813B1 KR1020180042849A KR20180042849A KR101982813B1 KR 101982813 B1 KR101982813 B1 KR 101982813B1 KR 1020180042849 A KR1020180042849 A KR 1020180042849A KR 20180042849 A KR20180042849 A KR 20180042849A KR 101982813 B1 KR101982813 B1 KR 101982813B1
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Abstract

The present invention relates to a naturally fermented feed capable of strengthening immunity, and a manufacturing method thereof. In particular, the naturally fermented feed capable of strengthening immunity can strengthen immunity with excellent storability and excellent antioxidant activities. The manufacturing method of the naturally fermented feed comprises: a step a) of acquiring a mixed microorganism undiluted solution by mixing a lactobacillus culture fluid, a bacillus subtilis culture fluid, and a yeast culture fluid wherein lactobacillus, bacillus subtilis, and yeast are cultured in a liquid culture medium, respectively; a step b) of treating feed raw materials with water-soluble propolis and the mixed microorganism undiluted solution, and inoculating the same; and a step c) of fermenting the feed raw materials treated with the water-soluble propolis and the mixed microorganism undiluted solution.

Description

면역력 증강 천연발효사료 및 그 제조방법{The manufactured method of natural fermented feed for immunity buildup}FIELD OF THE INVENTION [0001] The present invention relates to a natural fermented feed for immunity buildup,

본 발명은 면역력 증강 천연발효사료 및 그 제조방법에 관한 것으로서, 특히 저장성이 우수하고 항산화활성이 우수하여 면역력을 증강시킬 수 있는 면역력 증강 천연발효사료 및 그 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to an immunopotentiating natural fermented feed and a method for producing the same, and more particularly, to an immunopotentiating natural fermented feed that is excellent in storage stability and antioxidative activity and capable of enhancing the immunity.

전 세계적으로 깨끗하고 안전한 먹거리 생산에 관심이 집중되면서 기존의 축산물 생산방법에서 문제점으로 제기되기 시작한 항생제 잔류에서 벗어나 자유로운 축산물 생산이 이슈화되고 있다. 그러나 집약화, 대형화되어가는 가축생산 규모의 변화에서 항생제의 사용은 불가피한 실정이다. 이들 항생제의 사용으로 생산된 육류로 인해 항생제 잔류 및 내성증가의 피해에서 벗어나고자 식물체에서 생산되는 물질의 항균력에서 강인한 천연물질들이 가축의 생산과정에서 이용되어왔다.With the focus on clean and safe food production around the world, production of free livestock products has become an issue, free from the antibiotic residues that have been raised as problems in existing livestock production methods. However, the use of antibiotics is inevitable in the changes in the size of livestock production, which are becoming more intensive and larger. Robust natural materials have been used in the production of livestock in the antimicrobial activity of substances produced by plants in order to escape from the effects of antibiotic residues and increased tolerance due to the meat produced by the use of these antibiotics.

환자를 치료할 목적으로 개발된 항생제가 사용빈도 및 사용량의 증가로 항생제에 내성을 갖는 미생물이 많아지게 되었고, 지금까지의 항생제로는 듣지 않는 슈퍼박테리아의 출몰도 심심찮게 보고되고 있다. 세계에서 항생제 내성이 높은 상위 국에 속하는 우리 나라에서도 그 대책이 요구되고 있는 바 , 특히 국내 항생제 소 비량의 절반이상이 가축에게 사용하고 있는 점을 감안하연 축산에서의 대책이 중요하다 . The number of microorganisms resistant to antibiotics has increased due to the increase in the frequency and usage of antibiotics developed for the purpose of treating patients, and the appearance of super bacteria that have not been recognized as antibiotics until now has also been reported. In Korea, which is one of the most highly antibiotic resistant countries in the world, countermeasures are required. Especially, measures taken in animal husbandry are important considering that more than half of domestic antibiotic consumption is used by livestock.

또한 양계의 경우 출하하기 1 주일 전인 28일 경에 호흡기 질환이 발병할 경우, 일반적으로 항생제를 사용할 수 없는 형편이다. 그 이유는 항생제가 육계에 잔류하기 때문이다. 따라서 이런 환 경에서 질병을 치료할 수 있는 천연항생제가 절실한 상태이다.In the case of poultry, if respiratory disease develops around 28 days before shipment, it is generally not possible to use antibiotics. This is because antibiotics remain in broiler chickens. Therefore, natural antibiotics that can treat diseases in this environment are in desperate condition.

축산분야에서 사용되는 일반사료는 산란계 사료률 제외하고 대부분 항생제와 성장촉진제가 함유된 것이 많다. 이 것은 공장형 축산을 하는데 필요하기 때문이라 생각된다. 이러한 사료는 가축들의 면역력을 떨어뜨리는 원인이 될 수도 있으며, 면역이 떨어진 가축들에게는 질병에 노출될 위험성이 높아 진다. 현재 닭과 오리는 Al, 돼지는 구제역, 소는 브루셀라 같은 질병이 걸리는 원인을 제공할 수도 있다.Most feeds used in the livestock sector are mostly antibiotics and growth promoters except for the feed rate of laying hens. This is probably due to the need for factory animal husbandry. These feeds can cause the livestock to lose their immunity, and livestock that are immune will be at increased risk for disease. Current chickens and ducks can cause Al, pigs can cause foot-and-mouth disease, and cattle can cause diseases such as brucellosis.

일부 진취적인 축산 농가에서는 친환경적인 축산을 하기 위해 생균제롤 축산 사료에 일정한 비율로 첨가하여 면역을 증가시키는 경우도 있다. 그러나 생균제의 비용과 사료 급이할 때마다 신경써야 하는 부분이 있어 고충을 토로하고 있는 실정이다.In some enterprising livestock farmers, in order to make environmentally friendly livestock, immunity may be increased by adding them at a certain rate to the feed of fertilizers. However, the cost of probiotics and the need to pay careful attention to each feed grade are causing complications.

한편, 항생제를 대체할 수 있는 발효사료가 특허문헌 0001 내지 0003으로 제안된 바 있다.On the other hand, fermented feeds that can replace antibiotics have been proposed in patent documents 0001 to 0003.

특허문헌 0001은 사료 내 첨가된 항생제를 대체할 수 있도록 녹차와 유용미생물을 활용하고, 고품질의 육질을 얻기 위해 벌꿀을 혼합한 벌꿀 및 녹차가 혼합된 액상발효사료의 제조방법에 관한 것으로서, 녹차잎을 보리혼합 맥강을 스팀가열로의 내부에서 1시간 20분 내지 2시간동안 스팀 가열하여 살균 및 호화처리하는 증기처리공정과; 증기처리된 녹차잎과 보리혼합 맥강을 분쇄하는 분쇄공정과; 살균 및 호화처리된 보리혼합 맥강 45~55㎏에, 물 800 ~ 1200ℓ와 유산균 및 누룩곰팡이, 효모제를 혼합하는 혼합공정과; 생균과 가공된 녹차분말 및 보리혼합 맥강의 혼합물을 발효시키는 발효공정과; 발효공정에서 얻어진 액상의 발효액을 2.0~2.5배의 물에 희석하는 희석공정으로 되어 완성되어 지는 것을 특징으로 한다.Patent Literature 0001 relates to a method for preparing a liquid fermented feed comprising honey and green tea mixed with honey to utilize green tea and useful microorganisms so as to replace antibiotics added in the feed and to obtain high quality meat, A steam treatment step of sterilizing and enriching the barley mixed gas steel by steam heating for 1 hour 20 minutes to 2 hours in the steam heating furnace; A pulverizing step of pulverizing steamed green tea leaves and barley mixed gangue; A mixing step of mixing 800 ~ 1200 L of water with lactic acid bacteria, yeast mold and yeast to 45 ~ 55 kg of barley mixed manganese treated with sterilization and aging; A fermentation process for fermenting a mixture of live bacteria, processed green tea powder and barley mixed mangue; And a dilution step of diluting the liquid fermentation broth obtained in the fermentation step with 2.0 to 2.5 times of water.

특허문헌 0002는 인삼 부산물을 유효성분으로 함유하는 기능성 사료첨가제에 관한 것으로서, 인삼 가공 시 발생되는 부산물인 잔근 또는/및 가공박을 미생물 균주를 이용하여 발효시킨 후 이를 사료와 함께 급여함으로써 면역성을 증가시킬 수 있는 이점이 있다.Patent Literature 0002 relates to a functional feed additive containing ginseng by-product as an active ingredient. It is a fermented product of a by-product, which is a byproduct produced during processing of ginseng, and / or a processed foil using a microorganism strain, There is an advantage that can be made.

특허문헌 0003은 유산균 및 효모를 이용한 축산용 발효 사료 및 그 제조방법에 관한 것으로, 락토바실러스 퍼멘텀 JS(KCCM 10499)와 피치아 클루이베리 또는 락토바실러스 퍼멘텀 JS(KCCM 10499)와 사카로마이세스 세레비시아를 배지 전체 중량에 대하여 버섯폐배지 60∼80%, 미강 5∼20%, 대두피 3∼10% 및 깻묵 2∼10%를 포함하는 배지에 접종하여 35-50℃에서 24-72시간 동안 발효하는 것을 특징으로 한다. 가축들에 항생제나 성장촉진제를 사용하지 않고도 친환경 바이오축산을 가능하게 할 수 있다.Japanese Patent Application Laid-Open No. 2000-325914 discloses a fermented feed for livestock production using lactic acid bacteria and yeast, and a method for producing the fermented feed for lactic acid bacteria and yeast using Lactobacillus fermentum JS (KCCM 10499), Pichia culberryberry or Lactobacillus fermentum JS (KCCM 10499) Serabicia was inoculated on a medium containing 60 to 80% of mushroom waste medium, 5 to 20% of rice bran, 3 to 10% of large scalp and 2 to 10% of silkworm, And fermenting for a period of time. Enabling eco-friendly biomass production without the use of antibiotics or growth promoters in livestock.

특허문헌 0001 내지 3의 발효사료는 항생제나 성장촉진제를 사용하지 않는 이점은 있으나, 본 발명자는 저장성이 더 우수하고, 항산화활성이 우수하며 면역력이 증강될 뿐만 아니라 증체율이 대폭 향상된 새로운 발효사료를 발명하였다.Although the fermented feeds of Patent Documents 0001 to 3 have an advantage of not using antibiotics or growth promoters, the inventors of the present invention have invented a new fermented feed which has excellent storage stability, excellent antioxidative activity, enhanced immunity, Respectively.

KR 10-1319097 B1 (2013.10.10)KR 10-1319097 B1 (October 10, 2013) KR 10-1171942 B1 (2012.08.01)KR 10-1171942 B1 (August 1, 2012) KR 10-0840145 B1 (2008.06.16)KR 10-0840145 B1 (June 16, 2008)

이와 같은 종래의 문제점을 해결하기 위해 본 발명자는 종래의 발효사료보다 저장성이 우수하고 항산화활성이 우수하여 면역력을 증강시킬 수 있는 면역력 증강 천연발효사료 및 그 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.In order to solve such conventional problems, the present inventors aim to provide an immunity-enhancing natural fermented feed that is superior in storage stability and antioxidative activity than conventional fermented feeds and can enhance immunity, and a method for producing the same.

상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명은,According to an aspect of the present invention,

a) 유산균, 바실러스 서브틸리스 및 효모를 액체 배지에 각각 배양한 유산균 배양액, 바실러스 서브틸리스 배양액 및 효모 배양액을 혼합하여 혼합미생물 원액을 얻는 단계와;a) obtaining a mixed microorganism stock solution by mixing a lactic acid bacteria culture solution, a Bacillus subtilis culture solution and a yeast culture solution in which a lactic acid bacteria, a Bacillus subtilis and a yeast are respectively cultured in a liquid medium;

b) 사료원료에 수용성 프로폴리스 및 상기 혼합미생물 원액을 처리하여 접종하는 단계와;b) treating the feedstock with water-soluble propolis and the mixed microbial stock solution to inoculate;

c) 상기 수용성 프로폴리스 및 혼합미생물 원액이 처리된 사료원료를 발효시키는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 면역력 증강 천연발효사료의 제조방법을 제공한다.and c) fermenting the feedstock treated with the water-soluble propolis and the mixed microbial stock solution.

특히, 상기 a)단계는 상기 유산균 배양액, 바실러스 서브틸리스 배양액 및 효모 배양액을 1:1:1의 중량비로 혼합하여 혼합미생물 원액을 얻는 것이 좋다.Particularly, in the step a), it is preferable to mix the culture medium of lactic acid bacteria, the culture medium of Bacillus subtilis and the culture medium of yeast at a weight ratio of 1: 1: 1 to obtain a mixed microorganism stock solution.

그리고 상기 b)단계는 상기 사료원료 100중량부에 물 1~15중량부, 상기 수용성 프로폴리스 0.001 내지 0.1중량부 및 상기 혼합미생물 원액 0.1 내지 10중량부를 처리하여 접종하는 것이 바람직하다.In step (b), 1 to 15 parts by weight of water, 0.001 to 0.1 part by weight of water-soluble propolis and 0.1 to 10 parts by weight of the mixed microbial stock solution are preferably inoculated into 100 parts by weight of the feed material.

특히, 상기 b)단계에서 상기 사료원료에 브라질 너트분말, 폴리코사놀 분말 및 비타민나무 분말을 혼합한 후 상기 수용성 프로폴리스 및 상기 혼합미생물 원액을 처리하여 접종하는 것이 좋다.Particularly, in step b), it is preferable to mix the Brazil nut powder, policosanol powder and vitamin wood powder into the feed material and treat the water soluble propolis and the mixed microorganism stock after treatment.

이때, 상기 사료원료 100중량부에 상기 브라질 너트분말 0.01 내지 5중량부, 상기 폴리코사놀 분말 0.01 내지 5중량부 및 상기 비타민나무 분말 0.01 내지 5중량부를 혼합하는 것이 바람직하다.At this time, 0.01 to 5 parts by weight of the Brazil nut powder, 0.01 to 5 parts by weight of the policosanol powder and 0.01 to 5 parts by weight of the vitamin wood powder are mixed into 100 parts by weight of the feed material.

그리고 상기 c)단계는 상기 수용성 프로폴리스 및 혼합미생물 원액이 처리된 사료원료를 20 내지 38℃에서 1 내지 7일간 발효시키는 것이 좋다.In the step c), the feedstock treated with the aqueous propolis and the mixed microorganism stock solution is preferably fermented at 20 to 38 DEG C for 1 to 7 days.

아울러 본 발명은 상기 면역력 증강 천연발효사료의 제조방법에 의해 제조된 것을 특징으로 하는 면연력 증강 천연발효사료를 제공한다.In addition, the present invention provides a fermented natural fermented feed which is produced by the above-mentioned method for producing an immunity-enhancing natural fermented feed.

본 발명의 면역력 증강 천연발효사료는 저장성이 우수하고 항산화활성이 우수하여 면역력을 증강시킬 수 있어 항생제를 사용하지 않고 저렴한 비용으로 친환경적으로 가축을 사육할 수 있는 효과가 있다.The immunity-enhancing natural fermented feed of the present invention is excellent in storage stability and antioxidative activity and can enhance immunity so that it is possible to breed livestock in an eco-friendly manner at low cost without using antibiotics.

특히, 본 발명의 면역력 증강 천연발효사료는 친환경적이고 항산화 효과가 우수하여 축산 질병예방 및 폐사율 저감에 도움을 줄 수 있는 효과가 있다.In particular, the immunopotentiating natural fermented feed of the present invention is eco-friendly and has excellent antioxidative effect, which is effective in preventing livestock diseases and reducing mortality.

이하, 본 발명의 면역력 증강 천연발효사료 및 그 제조방법에 대해 상세히 설명하면 다음과 같다.Hereinafter, the immunity-enhancing natural fermented feed of the present invention and its preparation method will be described in detail as follows.

본 발명의 면역력 증강 천연발효사료의 제조방법은 혼합미생물 원액을 얻는 단계와; 사료원료에 수용성 프로폴리스 및 상기 혼합미생물 원액을 처리하여 접종하는 단계와; 상기 수용성 프로폴리스 및 혼합미생물 원액이 처리된 사료원료를 발효시키는 단계;를 포함한다.A method for producing an immunopotent enhancing natural fermented feed according to the present invention comprises the steps of: obtaining a stock solution of a mixed microorganism; Treating the feedstock with water-soluble propolis and the stock solution of the mixed microorganism to inoculate; And fermenting the feed raw material treated with the aqueous propolis and the mixed microbial stock solution.

먼저, 상기 혼합미생물 원액은 유산균, 바실러스 서브틸리스 및 효모를 액체 배지에 각각 배양하고, 유산균 배양액, 바실러스 서브틸리스 배양액 및 효모 배양액을 동일한 중량비로 혼합하여 제조한다.First, the stock solution of the mixed microorganism is prepared by culturing the lactic acid bacteria, Bacillus subtilis, and yeast in a liquid medium, and mixing the lactic acid bacteria culture, the Bacillus subtilis culture, and the yeast culture solution at the same weight ratio.

유산균은 락토바실러스 프란타룸(LactobacillusPlantarum), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 루테리(Lapctobacillus ruteri) 중 선택된 1종 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있고, 효모는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyce cerevisiae) 등을 사용할 수 있다.Lactic acid bacteria can use a mixture of Lactobacillus Francisco tarum (LactobacillusPlantarum), Lactobacillus casei (Lactobacillus casei), Lactobacillus ruteri alone or in combination of two or more selected ones (Lapctobacillus ruteri), yeasts in my process serenity busy in Saccharomyces (Saccharomyce cerevisiae) and the like can be used.

상기 혼합미생물 원액을 사용할 경우 발효사료를 8주 이상 저장하더라도 유산균 등이 생존하는 등 저장성이 우수하고 발효사료로서 장기간 기능을 할 수 있다. 반면에 유산균 단독으로 사용할 경우 발효사료가 2주 이상 경과시 유산균이 생존하지 않는 등 발효사료로서 사용이 부적절한 문제가 있다.When the fermented feedstuff is stored for 8 weeks or more, the fermented feedstuff can be used for a long period of time as a fermented feedstuff. On the other hand, when lactic acid bacteria alone are used, there is a problem that the fermented feed is inadequately used as a fermented feed such that the lactic acid bacteria do not survive the fermented feed after 2 weeks or more.

다음으로, 사료원료에 상기 혼합미생물 원액가 수용성 프로폴리스원액을 처리하고 접종한다.Next, the mixed microorganism stock solution is treated with a stock solution of a water-soluble propolis and inoculated to the feed stock.

상기 사료원료는 크게 한정되는 것은 아니나, 육계 등의 가축의 영양소 요구량을 만족하는 사료원료이면 족하다. 예를 들면 육계의 경우 요구하는 영양소를 만족하기 위해 옥수수와 대두박을 주원료로 포함하는 사료원료를 사용할 수 있다.The feedstuffs are not limited, but feedstuffs satisfying the nutrient requirements of domestic animals such as broiler chickens are sufficient. For example, in the case of broiler chickens, feedstuffs containing corn and soybean meal as main ingredients can be used to satisfy the required nutrients.

상기 수용성 프로폴리스원액은 육계 등의 가축의 항산화 활성을 향상시키고 면역력을 증대시키기 위한 것으로서, 고유한 향을 완화시켜 향 및 맛에 대한 기호도가 개선된 이점이 있다.The water-soluble propolis stock solution has an advantage of improving the antioxidant activity of livestock such as broiler chickens and enhancing the immunity, thereby alleviating the inherent odor and improving the preference for flavor and taste.

상기 수용성 프로폴리스원액은 항산화 활성을 유지하며 고유한 향을 완화시켜 향 및 맛에 대한 기호도를 개선시키기 위해, 벌집에서 채취한 프로폴리스를 에탄올에 방치한 후 여과하여 프로폴리스 에탄올추출액을 얻은 다음, 프로폴리스 에탄올추출액에 물을 혼합하고 일정시간 경과 후 상등액을 분리제거하여 수용성프로폴리스 추출액을 얻고, 수용성프로폴리스 추출액을 여과지를 사용하여 반복 여과시켜 제조하는 것이 좋다.In order to maintain the antioxidant activity and alleviate the inherent fragrance and improve the preference for flavor and taste, the propolis solution obtained from the honeycomb was left in ethanol and filtered to obtain a propolis ethanol extract, After the water is mixed with the propolis ethanol extract, the supernatant is separated and removed to obtain a water-soluble propolis extract, and the water-soluble propolis extract is repeatedly filtered using a filter paper.

상기 사료원료 100중량부에 상기 혼합미생물 원액 0.1 내지 10중량부, 상기 수용성 프로폴리스원액 0.001 내지 0.1중량부가 혼합되는 것이 바람직하다. 상기 혼합미생물 원액이 0.1 중량부 미만으로 혼합될 경우 발효의 진행 속도가 느리게 일어나 발효사료의 품질이 좋지 못하고, 10 중량부 초과로 혼합될 경우 과발효가 일어나 저장성에 문제가 있다.0.1 to 10 parts by weight of the stock solution of the mixed microorganism and 0.001 to 0.1 part by weight of the aqueous propolis solution are mixed with 100 parts by weight of the feed material. When the mixed microorganism stock solution is mixed at less than 0.1 part by weight, the fermentation proceeds slowly and the quality of the fermented feed is poor. When the mixed microorganism solution is mixed in an amount exceeding 10 parts by weight, fermentation occurs and storage stability is deteriorated.

그리고 상기 수용성 프로폴리스원액이 0.001 중량부 미만으로 혼합될 경우 수용성 프로폴리스원액의 면역효과를 얻을 수 없고, 0.1 중량부 초과로 혼합될 경우 과도하게 강력한 항균작용으로 미생물 생육에 영향을 주어 전체적인 시너지 효과에 문제가 있다.When the water-soluble propolis stock solution is mixed at less than 0.001 part by weight, the immune effect of the water-soluble propolis stock solution can not be obtained. When the water-soluble propolis stock solution is mixed at more than 0.1 part by weight, the microorganism grows with an excessively strong antibacterial effect, There is a problem with.

그리고 상기 사료원료에는 상기 혼합미생물 원액의 발효를 위해 상기 사료원료 100중량부에 대해 물 1~15중량부가 혼합하는 것이 좋다.In order to ferment the stock solution of the mixed microorganism, 1 to 15 parts by weight of water may be added to the feed material, relative to 100 parts by weight of the feed material.

나아가, 상기 사료원료에는 육계 등 가축의 성장률을 더욱 향상시키고 면역력을 강화시키기 위해 브라질 너트분말, 폴리코사놀 분말 및 비타민나무 분말을 더 혼합하는 것이 바람직하다.Further, it is preferable to further mix the Brazil nut powder, policosanol powder and vitamin wood powder to further enhance the growth rate of livestock and the like for the feedstuff and to strengthen the immunity.

상기 브라질 너트분말은 브라질 너트의 열매를 분말화한 것으로서, 브라질 너트의 열매에는 종양의 성장올 억제하는 셀레늄이 풍부하고, 셀레늄 이외에도 미네랄, 필수 지방산, 스테롤, 토코페롤 등을 함유하고 있다. 또한 브라질 너트의 열매에는 풍부한 식이섬유가 들어있고 체내의 나쁜 콜레스테롤을 감소시켜주고 세포막의 탄력을 증가시켜 혈관건강에 좋다.The Brazil nut powder is made by powdering the fruit of a Brazil nut. The fruit of the Brazil nut is rich in selenium that inhibits the growth of the tumor. In addition to selenium, it contains minerals, essential fatty acids, sterols and tocopherols. In addition, the fruit of Brazil nuts contains abundant dietary fiber, reduces bad cholesterol in the body and increases the elasticity of the cell membrane, which is good for vascular health.

상기 폴리코사놀 분말은 사탕수수 겉부분을 싸고 있는 왁스 성분을 분말화한 것으로서, HDL-콜 레스 테룹(고밀도지단 백 콜레스테롤) 수치를 높이고, 나쁜 LDL-콜 레스테롤(저밀도지단백 콜레스테롤) 수치를 낮춰 혈관 건강을 개선시킨다. The policosanol powder is a powdered wax ingredient which encapsulates the sugarcane outer surface. It enhances the HDL-cholesterol (high density lipoprotein cholesterol) level and lowers the bad LDL-cholesterol (low density lipoprotein cholesterol) Improve.

그리고 상기 비티민나무 분말은 비타민나무를 분말화한 것으로서, 비타민나무에는 고단위 오메가 3 지방산과 비타민 C 뿐만 아니라 비티만 E, A를 함유하고 있어 면역력의 증진효과가 있다.Vitamin tree powder is powdered vitamin tree. Vitamin tree contains vitamins E and A, as well as omega 3 fatty acids and vitamin C, and thus has an effect of improving immunity.

특히 상기 사료원료 100중량부에 상기 브라질 너트분말 0.01 내지 5중량부, 상기 폴리코사놀 분말 0.01 내지 5중량부, 상기 비타민나무 분말 0.01 내지 5중량부를 혼합하는 것이 좋다. 상기 브라질 너트분말, 폴리코사놀 분말 및 비타민 분말을 0.01중량부 미만으로 혼합할 경우 효과적으로 면역력을 향상시키지 못하고, 5중량부 초과로 혼합할 경우 재료비 상승 및 최적의 발효를 완성 하는데 시간이 과다하게 소요되어 대량 제품 생산에 좋지 못하다.In particular, 0.01 to 5 parts by weight of the Brazil nut powder, 0.01 to 5 parts by weight of the policosanol powder and 0.01 to 5 parts by weight of the vitamin wood powder are mixed into 100 parts by weight of the feed material. In the case of mixing less than 0.01 part by weight of the Brazil nut powder, policosanol powder and vitamin powder, it is impossible to effectively improve the immunity, and when mixing more than 5 parts by weight, it takes a long time to complete the material fermentation, Not good for product production.

다음으로, 상기 혼합미생물 원액이 처리된 사료원료를 발효시킨다. 이때 상기 혼합미생물 원액이 처리된 사료원료는 20 내지 38℃에서 1 내지 7일간 발효시키는 것이 좋다. 특히 발효 1일부터 7일까지 유산균수가 증가한 후 점차 감소하기 때문에, 저장성을 향상시키기 위해서 상기 혼합미생물 원액이 처리된 사료원료를 1 내지 7일간 발효시키는 것이 좋다.Next, the feed raw material treated with the stock solution of the mixed microorganism is fermented. At this time, it is preferable that the feedstuff to which the mixed microorganism stock solution is treated is fermented at 20 to 38 DEG C for 1 to 7 days. In particular, since the number of lactic acid bacteria is increased from 1 to 7 days of fermentation and then gradually decreases, it is preferable to ferment the feed materials treated with the stock solution of the mixed microorganism for 1 to 7 days in order to improve shelf life.

이와 같이 제조된 본 발명의 면역력 증강 천연발효사료는 저장성이 우수하고 항산화활성이 우수하여 면역력을 증강시킬 수 있어 항생제를 사용하지 않고 저렴한 비용으로 친환경적으로 가축을 사육할 수 있는 이점이 있다.The immunopotentiating natural fermented feed prepared according to the present invention has an excellent storage stability and an excellent antioxidant activity, which can enhance immunity, so that it is advantageous to breed livestock in an eco-friendly manner at a low cost without using antibiotics.

다음으로, 본 발명의 면역력 증강 천연발효사료 및 그 제조방법을 실시예를 들어 상세히 설명하면 다음과 같고, 본 발명의 권리범위는 하기의 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the immunity-enhancing natural fermented feed of the present invention and its preparation method will be described in detail with reference to the following examples, but the scope of the present invention is not limited to the following examples.

[혼합미생물의 제조][Preparation of mixed microorganism]

유산균으로서 Lactobacillus ruteri,Lactobacillus Plantarum, Lactobacillus casei를, 바실러스로서 Bacillus subtilis, 효모로서 Saccharomyces cerevisiae를 각각 한국생명공학연구원 생물자원센터에서 구입하여 사용하였다. Lactobacillus ruteri, Lactobacillus plantarum and Lactobacillus casei were used as lactic acid bacteria, Bacillus subtilis as a bacillus, and Saccharomyces cerevisiae as a yeast were purchased from the BRC at Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology.

Lactobacillus ruteri,LactobacillusPlantarum, Lactobacillus casei, Bacillus subtilis 및 Saccharomyces cerevisiae를 클린벤치에서 증류수에 녹여 제조된 Agar 배지에 멸균된 백금니를 통해 접종하고. 상기 접종된 개별균은 각각의 생육온도에 따라 인큐베이터에서 성장시켰다. Lactobacillus ruteri, Lactobacillus pontarum, Lactobacillus casei, Bacillus subtilis and Saccharomyces cerevisiae were inoculated in sterilized platinum nails to agar medium prepared by dissolving Saccharomyces cerevisiae in distilled water. The inoculated individual bacteria were grown in an incubator according to their growth temperature.

상기 Agar 배지에 접종된 상태의 개별균은 각각의 액체 배지(MRs broth - 유산균, MYP broth - 바실러스, PD broth - 효모)에 접종하였다. 이때, 액체 배지는 끓는 물에 녹인 후 병에 담아 호일로 밀봉 후 Autoclave에 121℃에서 15분간 고온 멸균시킨 후. 클린벤치에서 자외선등과 송풍을 통해 멸균 및 식히는 과정을 거쳐 제조하였다.Each of the individual strains inoculated on the agar medium was inoculated into each liquid medium (MRs broth - lactic acid bacteria, MYP broth - bacillus, PD broth - yeast). At this time, the liquid medium was dissolved in boiling water, sealed in foil, sterilized in autoclave at 121 ° C for 15 minutes, and then sterilized. And sterilized and cooled in a clean bench through ultraviolet light and blowing.

접종된 상태의 병은 호일로 밀봉 후 Parafilm으로 재밀봉한 후 진탕배양기에 넣고 3~5일 정도의 배양과정을 거쳤다. 그리고 이와 같이 배양된 개별균을 스테인레스 발효조에 넣고 기포기를 가동한 상태로 3∼5일 정도 배양시켰고, 각 배양된 개별균들을 동일한 중량비로 혼합하여 혼합미생물 원액을 제조하였다.The inoculated bottles were sealed with foil, resealed with parafilm, placed in a shaking incubator, and cultured for 3 to 5 days. The individual microorganisms cultured in the fermentation tank were incubated for 3 to 5 days while the bubbles were running, and the individual microorganisms were mixed at the same weight ratio.

[실시예 1][Example 1]

배합기에 옥수수와 대두박이 5:3의 중량비로 혼합된 사료원료를 투입하고, 배합사료 100중량부에 물 10중량부, 혼합미생물 원액 10중량부를 분사 및 접종하여 발효사료를 제조하였다.A feedstuff mixed with corn and soybean meal at a weight ratio of 5: 3 was added to a blender, and 10 parts by weight of water and 10 parts by weight of a mixed microbial stock solution were sprayed and inoculated to 100 parts by weight of the blended feed to prepare a fermented feed.

[실시예 2][Example 2]

배합기에 옥수수와 대두박이 5:3의 중량비로 혼합된 사료원료를 투입하고, 배합사료 100중량부에 물 10중량부, 혼합미생물 원액 10중량부, 수용성프로폴리스 원액 0.05중량부를 분사 및 접종하여 발효사료를 제조하였다.10 parts by weight of water, 10 parts by weight of a mixed microbial stock solution and 0.05 part by weight of a water-soluble propolis stock solution were sprayed and inoculated into 100 parts by weight of a mixed feed, The feed was prepared.

이때 수용성프로폴리스 원액은 벌집에서 채취한 프로폴리스를 에탄올에 6주간 방치한 여과하여 프로폴리스 에탄올추출액을 얻은 다음, 프로폴리스 에탄올추출액과 물을 1:1의 부피비로 혼합하고 24시간 경과 후 상등액을 분리제거하여 수용성프로폴리스 추출액을 얻었고, 수용성프로폴리스 추출액을 여과지를 사용하여 반복 여과시켜 제조한 것을 사용하였다.The aqueous propolis solution was prepared by filtering the propolis collected from the honeycomb in ethanol for 6 weeks to obtain a propolis ethanol extract. The propolis ethanol extract and water were mixed at a volume ratio of 1: 1, and after 24 hours, the supernatant To obtain a water-soluble propolis extract, and the water-soluble propolis extract was repeatedly filtered using a filter paper.

[실시예 3][Example 3]

배합기에 옥수수와 대두박이 5:3의 중량비로 혼합된 사료원료 100중량부, 브라질너트 분말 2중량부, 폴리코사놀 분말 0.05중량부, 비타민나무 분말 3중량부를 투입한 후 균일하게 배합하였다. 그리고 배합사료 100중량부 기준으로 물 10중량부, 혼합미생물 원액 10중량부, 수용성프로폴리스 원액 0.05중량부를 분사 및 접종하여 발효사료를 제조하였다.100 parts by weight of a feed material mixed with a mixture of corn and soybean meal at a weight ratio of 5: 3, 2 parts by weight of Brazil nut powder, 0.05 part by weight of policosanol powder and 3 parts by weight of vitamin wood powder were mixed and uniformly mixed. 10 parts by weight of water, 10 parts by weight of the mixed microorganism solution and 0.05 part by weight of the aqueous propolis solution were sprayed and inoculated on the basis of 100 parts by weight of the compounded feed to prepare a fermented feed.

[비교예 1][Comparative Example 1]

육계의 전기 영양소 요구량을 만족하는 옥수수와 대두박을 주원료로 하는 배합사료를 시중에서 구입하여 비교예 1로서 사용하였다.A compound feed containing corn and soybean meal as main ingredients satisfying the electric nutrient requirement of broiler was purchased commercially and used as Comparative Example 1.

[비교예 2][Comparative Example 2]

배합기에 옥수수와 대두박이 5:3의 중량비로 혼합된 사료원료를 투입하고, 배합사료 100중량부에 물 10중량부, 유산균 원액 10중량부를 분사 및 접종하여 발효사료를 제조하였다.A feedstuff prepared by mixing corn and soybean meal at a weight ratio of 5: 3 was added to a blender, and 10 parts by weight of water and 10 parts by weight of a lactic acid bacterium suspension solution were sprayed and inoculated to 100 parts by weight of the blended feed to prepare a fermented feed.

[미생물 생존 실험][Microbial Survival Experiment]

실시예 1 내지 3의 발효사료 및 비교예 1의 배합사료, 비교예 2의 발효사료에 대하여 실온에서 8주간 저장하면서 1일, 1주일, 2주일, 4주일 및 8주일 경과 후 유산균수에 대한 실험을 실시하였다. The fermented feeds of Examples 1 to 3 and the fermented feed of Comparative Example 1 and the fermented feed of Comparative Example 2 were stored for 8 weeks at room temperature and stored for 1 day, 1 week, 2 weeks, 4 weeks, and 8 weeks, Experiments were conducted.

실온에서 1일 저장 후 유산균수 비교Comparison of the number of lactic acid bacteria after 1 day storage at room temperature

실시예 1 내지 3의 발효사료 및 비교예 1의 배합사료, 비교예 2의 발효사료에 대하여 실온에서 1일 저장 후 유산균수에 대한 실험을 실시한 결과는 하기의 표 1과 같다.The fermented feeds of Examples 1 to 3, the compounded feed of Comparative Example 1 and the fermented feed of Comparative Example 2 were subjected to an experiment on the number of lactic acid bacteria after storage at room temperature for 1 day.

구분division 유산균수(cfu/g)Number of lactic acid bacteria (cfu / g) 저장기간(주)Storage period (week) 실시예 1Example 1 3.9×103fu/g3.9 × 10 3 fu / g 00 실시예 2Example 2 4.2×103fu/g4.2 x 10 3 fu / g 00 실시예 3Example 3 5.6×103fu/g5.6 x 10 3 fu / g 00 비교예 1Comparative Example 1 -- 00 비교예 2Comparative Example 2 1.4×10cfu/g1.4 x 10 cfu / g 00

비교예 1의 배합사료는 유산균이 검출되지 않았으나, 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료에서는 유산균수가 l.4×lOcfu/g 생존하였고, 특히 혼합미생물, 수용성프로폴리스 원액 및 브라질너트 분말 등을 첨가한 실시예 3의 발효사료에서는 유산균수가 5.6×103fu/g 존재하였다. 실시예 1 내지 3의 혼합미생물을 첨가한 발효사료는 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료에 비하여 유산균수의 존재가 많이 나타났다.In the case of the compounded feed of Comparative Example 1, no lactic acid bacterium was detected, but in the fermented feed of Comparative Example 2 containing only lactic acid bacterium, the number of lactic acid bacteria was 1.4 x 10Ocfu / g. Particularly, mixed microorganisms, In the fermented feed of Example 3 added, the number of lactic acid bacteria was 5.6 x 10 3 fu / g. The fermented diets containing the mixed microorganisms of Examples 1 to 3 showed a higher presence of lactic acid bacteria than the fermented diets of Comparative Example 2 containing only lactic acid bacteria.

실온에서 저장 1주일 후 유산균수 비교Comparison of the number of lactic acid bacteria after 1 week of storage at room temperature

실시예 1 내지 3의 발효사료 및 비교예 1의 배합사료, 비교예 2의 발효사료에 대하여 실온에서 1주일 저장 후 유산균수에 대한 실험을 실시한 결과는 하기의 표 2와 같다.The fermented feeds of Examples 1 to 3 and the fermented feed of Comparative Example 1 and the fermented feed of Comparative Example 2 were subjected to an experiment on the number of lactic acid bacteria after one week of storage at room temperature, and the results are shown in Table 2 below.

구분division 유산균수(cfu/g)Number of lactic acid bacteria (cfu / g) 저장기간(주)Storage period (week) 실시예 1Example 1 2.6×104cfu/g2.6 x 10 < 4 > cfu / g 1One 실시예 2Example 2 3.5×104cfu/g3.5 x 10 < 4 > cfu / g 1One 실시예 3Example 3 8.7×104cfu/g8.7 x 10 < 4 > cfu / g 1One 비교예 1Comparative Example 1 -- 1One 비교예 2Comparative Example 2 1.1×10cfu/g1.1 x 10 cfu / g 1One

실온에서 저장 l주일 후 , 배합사료인 비교예 1은 유산균이 검출되지 않았으나. 유산균만 접종한 비교예 2의 발효사료에서는 유산균수가 1.1×lOcfu/g 생존하였고, 특히 혼합미생물을 첨가한 실시예 3의 발효사료에서는 유산균수가 8.7×104cfu/g 존재하였다. 유산균만 접종한 비교예 2의 발효사료는 저장 1일 대비 유산균수가 줄었으나, 혼합미생물을 접종한 실시예 3의 발효사료에서는 유산균수가 증가하였고, 더 많은 유산균수가 존재하였다.After 1 week of storage at room temperature, no lactic acid bacterium was detected in Comparative Example 1, which was a compound feed. In the fermented feed of Comparative Example 2 in which the lactic acid bacteria were inoculated only, the number of lactic acid bacteria was 1.1 x 10 < 0 > Cfu / g. Particularly, in the fermented feed of Example 3 containing the mixed microorganism, the number of lactic acid bacteria was 8.7 x 10 < 4 > The fermented feed of Comparative Example 2 inoculated with lactic acid bacteria showed a decrease in the number of lactic acid bacteria per day of storage, but in the fermented feed of Example 3 in which the mixed microorganisms were inoculated, the number of lactic acid bacteria was increased and more lactic acid bacteria were present.

실온에서 저장 2주일 후 유산균수 비교Comparison of the number of lactic acid bacteria after 2 weeks of storage at room temperature

실시예 1 내지 3의 발효사료 및 비교예 1의 배합사료, 비교예 2의 발효사료에 대하여 실온에서 2주일 저장 후 유산균수에 대한 실험을 실시한 결과는 하기의 표 3과 같다.The fermented feeds of Examples 1 to 3, the compounded feed of Comparative Example 1 and the fermented feed of Comparative Example 2 were subjected to an experiment on the number of lactic acid bacteria after storage for 2 weeks at room temperature.

구분division 유산균수(cfu/g)Number of lactic acid bacteria (cfu / g) 저장기간(주)Storage period (week) 실시예 1Example 1 1.7×l04cfu/g1.7 x 10 4 cfu / g 22 실시예 2Example 2 2.2×l04cfu/g2.2 x 10 4 cfu / g 22 실시예 3Example 3 6.3×l04cfu/g6.3 x 10 4 cfu / g 22 비교예 1Comparative Example 1 -- 22 비교예 2Comparative Example 2 -- 22

실온에서 저장 2주일 후. 비교예 1의 배합사료는 유산균이 검출되지 않았고, 유산균만 접종한 비교예 2의 발효사료에서는 유산균이 생존하지 않은 반면, 혼합미생물을 접종한 실시예 3의 발효사료에서는 유산균수가 6.3×l04cfu/g 존재하였다.Two weeks after storage at room temperature. The lactobacillus was not viable in the fermented feed of Comparative Example 2 in which the lactic acid bacteria were not detected in the compounded feed of Comparative Example 1 and the fermented feed of Example 3 in which the mixed microorganisms were inoculated did not survive the fermented feed of Comparative Example 2 in which only the lactic acid bacteria were inoculated and the number of lactic acid bacteria was 6.3 x 10 4 cfu / g.

실온에서 저장 2주일 후 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료는 유산균 생존하지 못했으나, 혼합미생물을 접종한 실시예 1 내지 3 발효사료는 거의 비숫한 유산균수가 존재하였다.The lactic acid bacteria were not viable in the fermented feed of Comparative Example 2 in which only the lactic acid bacteria were added at room temperature after 2 weeks of storage. However, the fermented feeds of Examples 1 to 3 in which the mixed microorganisms were inoculated had almost the same number of lactic acid bacteria.

실온에서 저장 4주일 후 유산균수 비교Comparison of the number of lactic acid bacteria after 4 weeks of storage at room temperature

실시예 1 내지 3의 발효사료 및 비교예 1의 배합사료, 비교예 2의 발효사료에 대하여 실온에서 4주일 저장 후 유산균수에 대한 실험을 실시한 결과는 하기의 표 4와 같다.The fermented feed of Examples 1 to 3 and the fermented feed of Comparative Example 1 and the fermented feed of Comparative Example 2 were subjected to an experiment on the number of lactic acid bacteria after storage for 4 weeks at room temperature.

구분division 유산균수(cfu/g)Number of lactic acid bacteria (cfu / g) 저장기간(주)Storage period (week) 실시예 1Example 1 2.7×l04cfu/g2.7 × 10 4 cfu / g 44 실시예 2Example 2 3.3×l04cfu/g3.3 x 10 4 cfu / g 44 실시예 3Example 3 4.9×l04cfu/g4.9 × 10 4 cfu / g 44 비교예 1Comparative Example 1 -- 44 비교예 2Comparative Example 2 -- 44

실온에서 저장 4주일 후. 비교예 1의 배합사료는 유산균이 검출되지 않았고, 유산균만 접종한 비교예 2의 발효사료에서는 유산균이 생존하지 않은 반면, 혼합미생물을 접종한 실시예 3의 발효사료에서는 유산균수가 4.9×l04cfu/g 존재하였다.After 4 weeks of storage at room temperature. The formulation of Comparative Example 1 Feed was not lactic acid bacteria is detected, the lactic acid bacteria only inoculated in Comparative Example 2 of the fermentation feed the other hand, lactic acid bacteria are not alive, in the fermentation feed of Example 3 was inoculated with a mixed microbiological lactic acid number 4.9 × l0 4 cfu / g.

실온에서 저장 4주일 후 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료는 유산균 생존하지 못했으나, 혼합미생물을 접종한 실시예 1 내지 3 발효사료는 거의 비숫한 유산균수가 존재하였다.After 4 weeks of storage at room temperature, the fermented feed of Comparative Example 2 containing only the lactic acid bacteria did not survive the lactic acid bacteria, but the fermented feeds of Examples 1 to 3 in which the mixed microorganisms were inoculated had almost the same number of lactic acid bacteria.

실온에서 저장 8주일 후 유산균수 비교Comparison of the number of lactic acid bacteria after 8 weeks of storage at room temperature

실시예 1 내지 3의 발효사료 및 비교예 1의 배합사료, 비교예 2의 발효사료에 대하여 실온에서 8주일 저장 후 유산균수에 대한 실험을 실시한 결과는 하기의 표 5와 같다.The fermented feeds of Examples 1 to 3 and the fermented feed of Comparative Example 1 and the fermented feed of Comparative Example 2 were stored at room temperature for 8 weeks and then subjected to experiments on the number of lactic acid bacteria.

구분division 유산균수(cfu/g)Number of lactic acid bacteria (cfu / g) 저장기간(주)Storage period (week) 실시예 1Example 1 4.6×l03cfu/g4.6 × 10 3 cfu / g 88 실시예 2Example 2 5.1×l03cfu/g5.1 x 10 3 cfu / g 88 실시예 3Example 3 7.2×l03cfu/g7.2 x 10 3 cfu / g 88 비교예 1Comparative Example 1 -- 88 비교예 2Comparative Example 2 -- 88

실온에서 저장 8주일 후. 비교예 1의 배합사료는 유산균이 검출되지 않았고, 유산균만 접종한 비교예 2의 발효사료에서는 유산균이 생존하지 않은 반면, 혼합미생물을 접종한 실시예 3의 발효사료에서는 유산균수가 7.2×l03cfu/g 존재하였다.실온에서 저장 8주일 후 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료는 유산균 생존하지 못했으나, 혼합미생물을 접종한 실시예 1 내지 3 발효사료는 거의 비숫한 유산균수가 존재하였다.8 weeks after storage at room temperature. Comparative formula feed of Example 1 lactic acid was detected, lactic acid bacteria only the fermented food of Comparative Example 2 inoculation, while lactic acid bacteria did not survive, in the fermentation feed of Example 3 inoculated with a mixed microbial 7.2 × l0 Lactobacillus number 3 cfu / g. After 8 weeks of storage at room temperature, the fermented feed of Comparative Example 2 containing only the lactic acid bacteria did not survive the lactic acid bacteria, but the fermented feedstuffs of Examples 1 to 3 in which the mixed microorganisms were inoculated had almost the same number of lactic acid bacteria.

이상의 결과를 종합해 볼 때, 비교예 1과 같이 단일 유산균으로 발효사료를 완성할 수 없으며, 혼합미생물 원액을 접종한 실시예 1 내지 3의 발효사료의 경우 유산균수가 저장 후 1주일, 즉 7일 후에 가장 많이 생존하였고, 점차 감소하는 경향을 보이고 있기 때문에 7일이 최적의 발효기간이라 사료된다.As a result of the above results, it is impossible to complete the fermented feed with a single lactic acid bacterium as in Comparative Example 1. In the case of the fermented feeds of Examples 1 to 3 inoculated with the mixed microorganism stock solution, After 7 days, the optimum fermentation period was observed.

[항산화 효과 실험][Antioxidant effect test]

실시예 1 내지 3의 발효사료 및 비교예 1의 배합사료, 비교예 2의 발효사료에 대한 저장서 및 효능에 대한 효과를 비교 실험하기 위하여 항산화 효과를 측정하였다.The antioxidative effects of the fermented feeds of Examples 1 to 3 and the fermented feed of Comparative Example 1 and the fermented feed of Comparative Example 2 were compared in order to compare the effects on storage and efficacy.

항산화 효과는 전자공여능(DPPH) 분석실험법으로 측정하였다. 용매별(물, 에탄올) 추출물의 농도률 달리하여 자유 라디칼(free radacal) 소거활성을 측정하기 위하여 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)률 이용하였다. 즉, 4.0×lO-4M DPPH 용액 2.4mL에 추출물을 각각 0.6 mL 첨가한 후 vortex mixer로 10초간 진탕하고 상온에 30분간 방치한 다음 517 nm에서 흡광도를 측정하여 대조구에 대한 홉광도의 감소비율로서 항산화 활성도를 나타내었다. 이 때. 활성의 비교를 위하여 항산화제인 ascorbic acid를 시료농도와 같도록 첨가하였으며 동일한 방법으로 측정하였다.Antioxidant activity was measured by electron donating ability (DPPH) assay. DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) ratio was used to measure the free radical scavenging activity by varying concentration of solvent (water, ethanol) extract. That is, 0.6 mL of each extract was added to 2.4 mL of 4.0 × 10 -4 M DPPH solution, and the mixture was shaken for 10 seconds with a vortex mixer. The mixture was allowed to stand at room temperature for 30 minutes and absorbance at 517 nm was measured. And showed antioxidant activity. At this time. For comparison of the activity, ascorbic acid, an antioxidant, was added at the same concentration as the sample and measured by the same method.

실온에서 저장 1일 후 항산화 효과 비교Comparison of antioxidative effects after 1 day storage at room temperature

실시예 1 내지 3의 발효사료 및 비교예 1의 배합사료, 비교예 2의 발효사료에 대하여 실온에서 저장 1일 후 항산화 효과에 대한 실험을 실시한 결과는 하기의 표 6과 같다.The antioxidative effects of the fermented feeds of Examples 1 to 3 and the fermented feed of Comparative Example 1 and the fermented feed of Comparative Example 2 after one day of storage at room temperature were as shown in Table 6 below.

구분division DPPH(%)DPPH (%) 에탄올ethanol 증가율(%)Growth rate (%) water 증가율(%)Growth rate (%) 실시예 1Example 1 11.2511.25 437437 9.379.37 732732 실시예 2Example 2 12.8412.84 499499 10.6510.65 832832 실시예 3Example 3 14.3814.38 559559 12.7412.74 995995 비교예 1Comparative Example 1 2.572.57 -- 1.281.28 -- 비교예 2Comparative Example 2 6.846.84 266266 5.935.93 463463

비교예 1의 배합사료에 비해 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료는 에탄올로 추출할 경우 266% 항산화활성이 증가하였으나, 혼합미생물을 첨가한 실시예 3의 발효사료는 에탄율로 추출할 경우 559% 항산화활성이 증가하였다. 혼합미생물을 첨가한 실시예 3의 발효사료는 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료에 비해 2.1배 이상의 항산화 활성을 나타내었다.The fermented feed of Comparative Example 2 containing only lactic acid bacterium as compared with the compounded feed of Comparative Example 1 showed an increase in antioxidative activity by 266% when ethanol was extracted, whereas the fermented feed of Example 3 containing the mixed microorganism was extracted with ethane 559% antioxidant activity was increased. The fermented feed of Example 3 containing the mixed microorganism showed an antioxidative activity 2.1 times or more as compared with the fermented feed of Comparative Example 2 containing only lactic acid bacteria.

물로 추출할 경우 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료는 비교예 1의 일반 배합사료에 비해 463% 항산화활성이 증가하였으나, 혼합미생물을 첨가한 실시예 3의 발효사료는 물로 추출할 경우 995% 항산화활성이 증가하였다. 혼합미생물을 첨가한 실시예 3의 발효사료는 유산균만 첨가한 발효사료에 비해 2.1배 이상의 항산화 활성을 나타내었다.In the case of extracting with water, the fermented feed of Comparative Example 2 containing only lactic acid bacteria showed an increase of 463% antioxidant activity compared to that of Comparative Example 1, but the fermented feed of Example 3 containing mixed microorganisms was 995% Antioxidant activity increased. The fermented feed of Example 3 containing the mixed microorganism showed 2.1 times more antioxidative activity than the fermented feed containing only lactic acid bacteria.

실온에서 저장 7일 후 항산화 효과 비교Comparison of antioxidative effect after 7 days storage at room temperature

실시예 1 내지 3의 발효사료 및 비교예 1의 배합사료, 비교예 2의 발효사료에 대하여 실온에서 저장 7일 후 항산화 효과에 대한 실험을 실시한 결과는 하기의 표 7과 같다.The antioxidative effects of the fermented feeds of Examples 1 to 3 and the fermented feed of Comparative Example 2 and Comparative Example 2 were evaluated at 7 days after storage at room temperature. The results are shown in Table 7 below.

구분division DPPH(%)DPPH (%) 에탄올ethanol 증가율(%)Growth rate (%) water 증가율(%)Growth rate (%) 실시예 1Example 1 16.7216.72 655655 12.2512.25 972972 실시예 2Example 2 18.4918.49 725725 13.6313.63 10811081 실시예 3Example 3 21.3821.38 838838 16.3716.37 12991299 비교예 1Comparative Example 1 2.552.55 -- 1.261.26 -- 비교예 2Comparative Example 2 5.765.76 225225 4.854.85 384384

비교예 1의 배합사료에 비해 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료는 에탄올로 추출할 경우 255% 항산화활성이 증가하였으나, 혼합미생물을 첨가한 실시예 3의 발효사료는 에탄율로 추출할 경우 838% 항산화활성이 증가하였다. 혼합미생물을 첨가한 실시예 3의 발효사료는 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료에 비해 3.7배 이상의 항산화 활성을 나타내었다.The fermented feed of Comparative Example 2 containing only lactic acid bacterium as compared with the compounded feed of Comparative Example 1 showed an antioxidative activity of 255% when ethanol was extracted, whereas the fermented feed of Example 3 containing mixed microorganisms had an ethanol content of 838% antioxidant activity was increased. The fermented feed of Example 3 containing the mixed microorganism showed an antioxidative activity of 3.7 times or more as compared with the fermented feed of Comparative Example 2 containing only lactic acid bacteria.

물로 추출할 경우 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료는 비교예 1의 일반 배합사료에 비해 384% 항산화활성이 증가하였으나, 혼합미생물을 첨가한 실시예 3의 발효사료는 물로 추출할 경우 1299% 항산화활성이 증가하였다. 혼합미생물을 첨가한 실시예 3의 발효사료는 유산균만 첨가한 발효사료에 비해 3.3배 이상의 항산화 활성을 나타내었다.In the case of extracting with water, the fermented feed of Comparative Example 2 containing only lactic acid bacterium showed 384% increase in antioxidative activity compared to that of Comparative Example 1, whereas the fermented feed of Example 3 containing mixed microorganisms showed 1299% Antioxidant activity increased. The fermented feed of Example 3 containing the mixed microorganism showed 3.3 times more antioxidative activity than the fermented feed containing only lactic acid bacterium.

이러한 결과는 혼합미생물을 첨가한 실시예 1 내지 3의 발효사료가 발효에 의해 항산화물질이 생성되어 저장성과 관련이 있는 항산화활성 효과가 증가된 것으로 생각된다.These results suggest that the fermented feeds of Examples 1 to 3 containing the mixed microorganisms were fermented to produce an antioxidant substance, thereby increasing the antioxidative activity effect associated with storage stability.

실온에서 저장 14일 후 항산화 효과 비교Comparison of antioxidant effect after 14 days storage at room temperature

실시예 1 내지 3의 발효사료 및 비교예 1의 배합사료, 비교예 2의 발효사료에 대하여 실온에서 저장 14일 후 항산화 효과에 대한 실험을 실시한 결과는 하기의 표 8과 같다.The antioxidative effects of the fermented feeds of Examples 1 to 3 and the fermented feed of Comparative Example 1 and Comparative Example 2 were evaluated at 14 days after storage at room temperature. The results are shown in Table 8 below.

구분division DPPH(%)DPPH (%) 에탄올ethanol 증가율(%)Growth rate (%) water 증가율(%)Growth rate (%) 실시예 1Example 1 15.2615.26 598598 11.8511.85 940940 실시예 2Example 2 17.6117.61 690690 12.5712.57 997997 실시예 3Example 3 20.6820.68 810810 15.7315.73 1,2481,248 비교예 1Comparative Example 1 2.552.55 -- 1.261.26 -- 비교예 2Comparative Example 2 2.552.55 -- 1.261.26 --

비교예 1의 배합사료에 비해 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료는 에탄올로 추출할 경우 항산화활성이 동일하였으나, 혼합미생물을 첨가한 실시예 3의 발효사료는 에탄율로 추출할 경우 810% 항산화활성이 증가하였다. 혼합미생물을 첨가한 실시예 3의 발효사료는 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료에 비해 8.1배 이상의 항산화 활성을 나타내었다. The antioxidant activity of the fermented diets of Comparative Example 2 containing the lactic acid bacterium added to Comparative Example 1 was the same as that of the fermented diets fed with ethanol but the fermented diets containing the mixed microorganism were 810% Antioxidant activity increased. The fermented feed of Example 3 containing the mixed microorganism showed an antioxidative activity 8.1 times or more as compared with the fermented feed of Comparative Example 2 containing only lactic acid bacteria.

물로 추출할 경우 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료는 비교예 1의 일반 배합사료와 항산화활성이 동일하였으나, 혼합미생물을 첨가한 실시예 3의 발효사료는 물로 추출할 경우 1248% 항산화활성이 증가하였다. 혼합미생물을 첨가한 실시예 3의 발효사료는 유산균만 첨가한 발효사료에 비해 12.4배 이상의 항산화 활성을 나타내었다.In the case of extracting with water, the fermented feed of Comparative Example 2 containing only lactic acid bacterium had the same antioxidative activity as that of the general formula of Comparative Example 1, but the fermented feed of Example 3 containing the mixed microorganism had an antioxidative activity of 1248% Respectively. The fermented feed of Example 3 containing the mixed microorganism showed an antioxidative activity more than 12.4 times as compared with the fermented feed containing only lactic acid bacteria.

이러한 결과는 단일 유산균을 첨가한 비교예 2의 발효사료의 경우 유산균이 2주까지 생존이 불가능하기 때문에 비교예 1의 일반 배합사료와 동일한 항산화효과플 보인 것으로 판단된다. 그러나 혼합미생물을 첨가한 실시예 1 내지 3의 발효사료는 2주까지도 생존이 가능하였기 때문에 항산화 효과가 높게 나타난 것으로 사료된다. 하지만 최고의 항산화 효과를 보인 것은 저장 후 7일에 가장 높은 항산화 효과롤 보였다. 따라서 혼합미생물올 첨가한 실시예 1 내지 3의 발효사료는 저장 후 7일간 발효시켜 사용하는 것이 최적이라고 생각된다.These results indicate that the fermented feed of Comparative Example 2 containing a single lactic acid bacterium has the same antioxidant effect as that of the general formula of Comparative Example 1 because the lactic acid bacteria can not survive until two weeks. However, the fermented feeds of Examples 1 to 3 in which the mixed microorganisms were added were able to survive for up to two weeks, indicating that the antioxidative effect was high. However, the highest antioxidant effect was the highest antioxidant effect on the 7th day after storage. Therefore, it is considered that the fermented feeds of Examples 1 to 3, in which the mixed microbial oil was added, were most suitable to be fermented for 7 days after storage.

결론적으로 혼합미생물의 발효에 의해 항산화물질이 생성되어 저장성과 관련이 있는 항산화활성 효과가 증가된 것으로 판단된다.In conclusion, the fermentation of mixed microorganisms resulted in the production of antioxidants, which is thought to increase the antioxidative activity effect related to storage.

[육계의 성장률 실험][Growth rate experiment of broiler chickens]

가축의 성장률 실험을 위해 성장 속도가 빠른 육계를 이용하여 실시예 1 내지 3의 발효사료 및 비교예 1의 배합사료, 비교예 2의 발효사료의 효과를 실험하였다. 실시예 1 내지 3의 발효사료 및 비교예 1의 배합사료, 비교예 2의 발효사료를 동일하게 급이한 육계를 비교 실함하였고, 육계를 케이지에서 각각 30마리씩 구분하여 70일간 실험한 후 체중 및 증체율을 확인하였고, 그 결과를 표 9로 나타냈다.In order to test the growth rate of livestock, the effects of the fermented feeds of Examples 1 to 3 and the fermented feed of Comparative Example 1 and the fermented feed of Comparative Example 2 were examined using broilers having a high growth rate. The fermented feeds of Examples 1 to 3 and the fermented feed of Comparative Example 1 and the fermented feed of Comparative Example 2 were compared in the same manner and broiler chickens were divided into 30 cows each for 70 days, And the results are shown in Table 9. < tb > < TABLE >

구분division 케이지 사육Cage breeding 성장 체중
(g)
Growth weight
(g)
상대 성장률
(%)
Relative growth rate
(%)
초기 체중(g)Initial weight (g) 70일후 체중(g)Weight after 70 days (g) 실시예 1Example 1 430430 18051805 13751375 115115 실시예 2Example 2 430430 19751975 15451545 129129 실시예 3Example 3 430430 20102010 15801580 132132 비교예 1Comparative Example 1 430430 16201620 11901190 100100 비교예 2Comparative Example 2 430430 16951695 12651265 106106

비교예 1의 일반 배합사료의 경우 70일간 케이지에서 사육한 육계가 평균 l.190g이 증체하였고, 유산균만 첨가한 비교예 2의 발효사료를 급이한 육계의 경우 평균 1,265g 증체하였으나, 혼합미생물을 첨가한 실시예 1 내지 3의 발효사료의 경우 1375g 이상 증체하였고, 특히 브라질 너트분말, 폴리코사놀 분말 및 비타민나무 분말을 더 첨가한 실시예 3의 발효사료의 경우 1580g이 증체하는 등 성장률이 132%로서 현저히 높게 나타났다.In the case of the general compound feed of Comparative Example 1, the average of broilers raised in the cage for 70 days was increased by 1.90 g, and the average of broiler broilers fed the fermented feed of Comparative Example 2 containing only lactic acid bacteria was increased by 1,265 g, The growth rate of the fermented feed of Example 3, in which the addition of the Brazil nut powder, the policosanol powder and the vitamin wood powder, was increased by about 1580 g, and the growth rate of the fermented feed of the Examples 1 to 3 was 132% Respectively.

이러한 결과는 천연항생제 역할을 하는 프로폴리스과 면역력 강화에 도움이 되는 브라질 너트분말, 폴리코사놀 분말 및 비타민나무 분말과 혼합미생물이 사료에 작용하여 면역력을 증강시킨 것으로 사료된다.These results suggest that propolis, which acts as a natural antibiotic, and Brazilian nut powder, policosanol powder, vitamin wood powder and mixed microorganisms, which help strengthen the immunity, act on the feed to enhance the immunity.

Claims (7)

a) 유산균, 바실러스 서브틸리스 및 효모를 액체 배지에 각각 배양한 유산균 배양액, 바실러스 서브틸리스 배양액 및 효모 배양액을 혼합하여 혼합미생물 원액을 얻는 단계와;
b) 사료원료에 브라질 너트분말, 폴리코사놀 분말 및 비타민나무 분말을 혼합한 후 수용성 프로폴리스 및 상기 혼합미생물 원액을 처리하여 접종하는 단계와;
c) 상기 수용성 프로폴리스 및 혼합미생물 원액이 처리된 사료원료를 발효시키는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 면역력 증강 천연발효사료의 제조방법.
a) obtaining a mixed microorganism stock solution by mixing a lactic acid bacteria culture solution, a Bacillus subtilis culture solution and a yeast culture solution in which a lactic acid bacteria, a Bacillus subtilis and a yeast are respectively cultured in a liquid medium;
b) mixing the Brazil nut powder, the policosanol powder and the vitamin wood powder into the feed material, treating the water-soluble propolis and the mixed microbial stock solution to inoculate;
c) fermenting the feedstuff to which the water-soluble propolis and the mixed microbial stock have been treated.
제1항에 있어서,
상기 a)단계는 상기 유산균 배양액, 바실러스 서브틸리스 배양액 및 효모 배양액을 1:1:1의 중량비로 혼합하여 혼합미생물 원액을 얻는 것을 특징으로 하는 면역력 증강 천연발효사료의 제조방법.
The method according to claim 1,
Wherein the step (a) comprises mixing the culture medium of lactic acid bacteria, the culture medium of Bacillus subtilis and the culture medium of yeast at a weight ratio of 1: 1: 1 to obtain a mixed microorganism stock solution.
제1항에 있어서,
상기 b)단계는 상기 사료원료 100중량부에 물 1~15중량부, 상기 수용성 프로폴리스 0.001 내지 0.1중량부 및 상기 혼합미생물 원액 0.1 내지 10중량부를 처리하여 접종하는 것을 특징으로 하는 면역력 증강 천연발효사료의 제조방법.
The method according to claim 1,
Wherein the step b) is carried out by inoculating 1 to 15 parts by weight of water, 0.001 to 0.1 part by weight of the water-soluble propolis and 0.1 to 10 parts by weight of the mixed microbial stock solution by 100 parts by weight of the feed material. A method of producing a feed.
제1항에 있어서,
상기 b)단계에서 상기 사료원료 100중량부에 상기 브라질 너트분말 0.01 내지 5중량부, 상기 폴리코사놀 분말 0.01 내지 5중량부 및 상기 비타민나무 분말 0.01 내지 5중량부를 혼합하는 것을 특징으로 하는 면역력 증강 천연발효사료의 제조방법.
The method according to claim 1,
Wherein in step b), 0.01 to 5 parts by weight of the Brazil nut powder, 0.01 to 5 parts by weight of the policosanol powder and 0.01 to 5 parts by weight of the vitamin wood powder are mixed with 100 parts by weight of the feed material. A method of producing a feed.
제1항에 있어서,
상기 c)단계는 상기 수용성 프로폴리스 및 혼합미생물 원액이 처리된 사료원료를 20 내지 38℃에서 1 내지 7일간 발효시키는 것을 특징으로 하는 면역력 증강 천연발효사료의 제조방법.
The method according to claim 1,
Wherein the step c) comprises fermenting the feedstuff having been treated with the aqueous propolis and the mixed microorganism stock solution at 20 to 38 DEG C for 1 to 7 days.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 면역력 증강 천연발효사료의 제조방법에 의해 제조된 것을 특징으로 하는 면연력 증강 천연발효사료.6. A fermented natural fermented feed according to any one of claims 1 to 5, which is produced by a method for producing an immunopotentiating natural fermented feed. 삭제delete
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