KR101934031B1 - 생체세포 동결 보존 도구 - Google Patents

생체세포 동결 보존 도구 Download PDF

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    • A61B17/435—Gynaecological or obstetrical instruments or methods for reproduction or fertilisation for embryo or ova transplantation

Abstract

생체세포 동결 보존 도구(1)는 내한성 재료에 의해 형성된 본체부(3)와, 내한성 재료에 의해 형성된 생체세포 유지부(2)를 구비한다. 생체세포 유지부(2)는 가늘고 긴 생체세포 부착 유지부(22)를 구비하고, 생체세포 부착 유지부(22)는 생체세포 부착 유지부(22)의 길이 방향으로 복수 설치된 생체세포 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)와, 생체세포 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)와 연통하는 잉여 동결 보존액 배출로(29a, 29b, 29c, 29d, 29e, 29f)를 가지고 있다.

Description

생체세포 동결 보존 도구{LIVING CELL CRYOPRESERVATION TOOL}
본 발명은 포유동물의 난자, 배아 등의 난(卵), 정자, 조혈줄기세포, 다능성 줄기세포 등의 줄기세포 등의 생체세포를 동결 보존할 때에 사용하는 세포 동결 보존 도구에 관한 것이다.
포유동물 배아의 동결 보존은 특정 계통이나 품종의 유전자원의 보존을 가능하게 한다. 또한 절멸의 위기에 직면해 있는 동물종의 유지에도 유효하다. 또한, 인간의 불임 치료에 있어서도 유용하다.
포유동물 배아의 동결 보존 방법으로서는, 특허문헌 1(일본 특개 2000-189155)에서, 포유동물 배아 또는 난자를 멸균 처리한 동결 스트로, 동결 바이얼 또는 동결 튜브 등의 동결 보존용 용기의 내면에, 이들 배아 또는 난자를 덮어씌우기에 충분한 최소량의 유리화액으로 붙이고, 이 동결 보존용 용기를 밀봉하고, 그리고 이 용기를 액체질소에 접촉시켜 급속하게 냉각하는 것이 제안되어 있다. 그리고, 융해방법에서는, 상기의 방법으로 보존한 동결 보존용 용기를 상기 액체질소로부터 꺼내고, 용기의 일단부를 개구하고, 이 용기 내에 33∼39℃의 희석액을 직접 주입하여, 배아 또는 난자의 동결을 융해 희석하는 것이다. 이 방법에 의하면, 포유동물 배아 또는 난자를 바이러스나 세균에 의한 감염의 우려 없이 높은 생존률로 보존 및 융해 희석할 수 있다고 하는 우수한 효과를 가지고 있다.
그러나, 동결 스트로, 동결 바이얼 또는 동결 튜브 등의 동결 보존용 용기의 내면에, 배아 또는 난자 등의 난을 덮어씌우는데 충분한 최소량의 유리화액으로 붙이는 작업이 반드시 용이한 것은 아니었다.
일본 특개 2000-189155 일본 특개 2002-315573(WO 02-085110 A1) 일본 특개 2004-329202(US 공개 2004-0259072)
그래서, 본원 발명자는 특허문헌 2(일본 특개 2002-315573, WO 02-085110 A1)를 제안했다. 특허문헌 2의 난 동결 보존 도구(1)는 내한성 재료에 의해 형성된 본체부(2)와, 본체부(2)의 일단에 부착되고, 가요성이고 투명하며 또한 액체질소 내성 재료에 의해 형성된 난 부착 유지용 스트립(3)과, 난 부착 유지용 스트립(3)을 덮어씌울 수 있도록 본체부(2)에 착탈 자유롭게 부착되는 일단이 봉쇄되고, 또한 내한성 재료에 의해 형성된 통형상 부재(4)로 이루어지는 것이다.
또한 본원 발명자는 특허문헌 3(일본 특개 2004-329202, US 공개 2004-0259072)도 제안했다. 특허문헌 3의 난 동결 보존 도구(1)는 내액체질소 재료로 형성된 난 동결 보존용 튜브(2)와, 튜브(2)를 보호하기 위한 금속제 통형상 보호 부재(3)를 구비한다. 튜브(2)는 본체부(21)와, 내경이 0.1mm∼0.5mm의 난 보존용 가는 직경부(22)를 구비함과 아울러, 가는 직경부의 선단측에서 열밀봉 가능하며, 본체부(21)에서 열밀봉 가능하다. 통형상 보호 부재(3)는 튜브(2)의 가는 직경부(22)의 선단부를 수납하는 통형상부(31)와, 가는 직경부(22)의 통형상부(31)에 수납되지 않은 부분 및 본체부(21)의 선단부(21a)를 수납하는 반통형상부(32)를 구비하고 있다.
특허문헌 2 및 3의 난 동결 보존 도구는 유효하다.
그러나, 보다 용이하게 난 동결 조작을 행할 수 있고, 또한, 동결된 난의 이탈 억제를 확실하게 방지할 수 있는 난 동결 보존 도구가 요망되고 있다.
본 발명의 목적은, 생체세포 동결 보존 도구로의 생체세포 배치 조작이 용이하고, 또한, 생체세포의 동결 작업시에 있어서의 생체세포의 이탈이 없고, 또한 생체세포의 동결을 신속하게 행할 수 있는 생체세포 동결 보존 도구를 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하는 것은 이하의 것이다.
내한성 재료에 의해 형성된 본체부와, 내한성 재료에 의해 형성된 생체세포 유지부를 구비하는 생체세포 동결 보존 도구로서, 상기 생체세포 유지부는 가늘고 긴 생체세포 부착 유지부를 구비하고, 상기 생체세포 부착 유지부는 상기 생체세포 부착 유지부의 길이 방향으로 복수 설치된 생체세포 수납용 오목부와, 상기 생체세포 수납용 오목부와 연통하는 잉여 동결 보존액 배출로를 갖는 생체세포 동결 보존 도구.
도 1은 본 발명의 실시예의 생체세포 동결 보존 도구의 정면도이다.
도 2는 도 1에 도시한 생체세포 동결 보존 부재의 선단측 부분의 확대 정면도이다.
도 3은 도 2에 도시한 생체세포 동결 보존 부재의 좌측면도이다.
도 4는 도 2의 A-A선 단면도이다.
도 5는 도 2의 B-B선 단면도이다.
도 6은 도 2에 도시한 생체세포 동결 보존 부재의 확대 평면도이다.
도 7은 도 2의 C-C선 확대 단면도이다.
도 8은 도 1에 도시한 생체세포 동결 보존 부재의 선단부의 확대 정면도이다.
도 9는 도 8의 D-D선 단면도이다.
도 10은 본 발명의 다른 실시예의 생체세포 동결 보존 부재의 생체세포 수납용 오목부에서 절단한 확대 횡단면도이다.
도 11은 본 발명의 다른 실시예의 생체세포 동결 보존 부재의 확대 종단면도이다.
도 12는 본 발명의 다른 실시예의 생체세포 동결 보존 도구의 선단부의 확대 정면도이다.
도 13은 도 12의 E-E선 단면도이다.
도 14는 도 12의 F-F선 단면도이다.
본 발명의 생체세포 동결 보존 도구를 도면에 도시하는 실시예를 사용하여 설명한다.
본 발명의 생체세포 동결 보존 도구(1)는 내한성 재료에 의해 형성된 본체부(3)와, 내한성 재료에 의해 형성된 생체세포 유지부(난 유지부)(2)를 구비한다. 난 유지부(2)는 가늘고 긴 난 부착 유지부(22)를 구비하고, 난 부착 유지부(22)는, 난 부착 유지부(22)의 길이 방향으로 복수 설치된 생체세포 수납용 오목부(난 수납용 오목부)(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)와, 난 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)와 연통되는 잉여 동결 보존액 배출로(29a, 29b, 29c, 29d, 29e, 29f)를 가지고 있다.
특히, 이 실시예의 세포 동결 보존 도구(1)는 난 동결 보존 도구이며, 생체세포 유지 부재(2)는 난 유지부로 되어 있다. 또한, 본 발명의 세포 동결 보존 도구는 배아 등의 난, 난자, 정자, 조혈줄기세포, 다능성 줄기세포 등의 줄기세포 등의 세포, 특히 상기한 바와 같은 생체세포를 동결 보존하기 위하여 사용할 수 있다.
생체세포 동결 보존 도구(1)는, 도 1 내지 도 5에 도시하는 바와 같이, 내한성 재료에 의해 형성된 본체부(3)와, 내한성 재료에 의해 형성된 생체세포 유지부(2)를 구비한다. 이 실시예의 것에서는, 도 2 내지 도 5(특히, 도 4)에 도시하는 바와 같이, 생체세포 유지부(2)의 기단부에는 선단방향으로 소정 길이 연장되는 구멍부(21a)가 형성되어 있고, 본체부(3)의 선단부에는 상기 구멍부(21a) 내에 진입 가능한 소정 길이 연장되는 돌출부(24)가 설치되어 있다. 그리고, 본체부(3)의 돌출부(24)가 생체세포 유지부(2)의 구멍부(21a) 내에 삽입되고, 양자는 고정되어 있다.
생체세포 유지부(2)는 단면이 대략 직사각형 형상이며, 상기한 바와 같이, 본체부(3)와 접속된 기단부와, 이 기단부로부터 선단측으로 돌출하는 생체세포 부착 유지부(22)를 구비하고 있다. 그리고, 이 실시예의 것에서는, 생체세포 부착 유지부(22)는 가늘고 긴 폭의 좁은 띠 형상(얇은 판 형상)의 것으로 되어 있다. 그리고, 그 표면이 생체세포 부착 유지면을 형성하고 있다.
그리고, 본 발명의 생체세포 동결 보존 도구(1)에서는, 도 2 내지 도 9에 도시하는 바와 같이, 생체세포 부착 유지부(22)의 표면에는, 길이 방향으로 복수 설치된 생체세포 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)가 설치되어 있다. 생체세포 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)는, 도 4 및 도 9에 도시하는 바와 같이, 대략 반구 형상의 오목부로 되어 있다. 또한 복수의 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)는 생체세포 동결 보존 도구(1)의 선단으로부터 소정 길이 기단측의 위치로부터, 기단측으로 직선 모양으로 배열되는 것으로 되어 있고, 또한 각 오목부는 거의 등간격으로 이간되어 있다. 이 실시예에서는, 오목부는 복수 설치되어 있지만, 1개이어도 된다. 또한 복수 설치하는 경우에는, 2∼8이 바람직하다. 오목부의 깊이는 0.05∼0.5mm가 바람직하고, 오목부의 상면의 개구 직경은 0.1∼0.5mm가 바람직하다. 또한 오목부 사이의 이간 거리는 1∼3mm가 바람직하다.
또한, 이 실시예의 것에서는 생체세포 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)가 형성되어 있는 부분의 이면측 부분은, 도 7 및 도 9에 도시하는 바와 같이, 팽출부(38a, 38b, 38c, 38d, 38e)로 되어 있고, 생체세포 수납용 오목부를 형성하는 부분이 얇지 않고, 충분한 강도를 갖는 것으로 되어 있다. 또한, 생체세포 수납용 오목부를 설치하지 않고, 생체세포 동결 보존 도구(1)의 표면을 평탄하게 형성하고, 그 평탄면을 생체세포 부착 유지부로 해도 된다. 또한 생체세포 부착 유지부(22)의 폭은 0.4∼1.0mm가 바람직하고, 길이는 5∼30mm가 바람직하고, 전체의 두께 및 오목부 부분에서의 두께는 0.08∼1.0mm가 바람직하다. 또한 생체세포 유지부(2)의 두꺼운 기단부의 길이는 5∼30mm가 바람직하고, 본체부의 길이는 20∼100mm가 바람직하다.
또한, 이 실시예의 생체세포 동결 보존 도구(1)에서는, 도 6 내지 도 8에 도시하는 바와 같이, 생체세포 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)가 형성된 부분의 생체세포 부착 유지부(22)의 양측부에 설치되고 또한 생체세포 부착 유지부(22)의 길이 방향으로 연장되는 2개의 측부 팽출부(35, 36)를 가지고 있다. 이 때문에, 생체세포 동결 보존 도구(1)는, 생체세포 수납용 오목부의 양측부에 팽출부를 갖기 때문에, 생체세포 배치시에 있어서의 생체세포의 측부 방향으로의 이동을 확실하게 억제할 수 있고, 또한, 배치된 생체세포의 생체세포 수납 오목부로부터의 벗어남도 방지한다.
또한, 이 실시예의 생체세포 동결 보존 도구(1)에서는, 도 1 내지 도 9(특히, 도 6 및 도 7)에 도시하는 바와 같이, 생체세포 부착 유지부(22)는 생체세포 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)보다 생체세포 부착 유지부(22)의 선단측에 설치된 돌출부(27)를 구비하고 있다. 돌출부(27)는 생체세포 부착 유지부(22)의 선단으로부터, 상면측(생체세포 수납용 오목부 형성측)으로 돌출하는 것으로 되어 있다. 또한 돌출부(27)는, 도 9에 도시하는 바와 같이, 선단면은 약간 기단측으로 경사지는 경사면으로 되어 있다. 이러한 돌출부(27)를 형성함으로써, 만일, 생체세포 수납부로부터 생체세포가 이탈하여, 선단측으로 이동했을 때, 생체세포 동결 보존 도구(1), 바꿔 말하면, 생체세포 부착 유지부(22)로부터의 낙하를 방지할 수 있다. 특히, 이 실시예의 생체세포 동결 보존 도구(1)에서는, 상기한 바와 같이, 생체세포 부착 유지부(22)의 양측부에 설치된 팽출부(35, 36)와 협동함으로써, 생체세포의 낙하를 방지한다.
또한, 이 실시예의 생체세포 동결 보존 도구(1)에서는, 도 2 내지 도 9(특히, 도 8 및 도 9)에 도시하는 바와 같이, 생체세포 부착 유지부(22)는 생체세포 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)와 연통하는 잉여동결 보존액 배출로를 구비하고 있다. 이 실시예의 생체세포 동결 보존 도구(1)에서는, 잉여동결 보존액 배출로는 생체세포 부착 유지부(22)의 길이 방향으로 연장되는 홈부(29a, 29b, 29c, 29d, 29e, 29f)에 의해 구성되어 있다. 그리고, 이 실시예의 것에서는, 홈부(29b, 29c, 29d, 29e)는 이웃하는 생체세포 수납용 오목부를 연통하고 있다. 구체적으로는, 홈부(29b)는 오목부(28a)와 오목부(28b)를 연통하고, 홈부(29c)는 오목부(28b)와 오목부(28c)를 연통하고, 홈부(29d)는 오목부(28c)와 오목부(28d)를 연통하고, 홈부(29e)는 오목부(28d)와 오목부(28e)를 연통하고 있다.
또한, 이 실시예에서는, 도 8 및 도 9에 도시하는 바와 같이, 생체세포 부착 유지부(22)는, 생체세포 부착 유지부(22)의 가장 선단측에 위치하는 생체세포 수납용 오목부(28a)로부터, 선단측으로 연장되는 홈부(29a)를 구비하고 있고, 그 단부는 상기한 돌출부에 도달 혹은 그 부근까지 연장되는 것으로 되어 있다. 또한, 이 실시예의 것에서는, 생체세포 부착 유지부(22)는 생체세포 부착 유지부(22)의 가장 기단측에 위치하는 생체세포 수납용 오목부(28e)로부터, 기단측으로 연장되는 홈부(29f)를 구비하고 있다.
이러한 생체세포 수납용 오목부와 연통하는 잉여 동결 보존액 배출로를 설치함으로써, 생체세포 수납용 오목부에 생체세포와 함께 수납된 동결 보존액의 잉여분이 이 홈부 내에 유입되기 때문에, 생체세포가 과잉한 동결 보존액에 의해 피복되는 것을 억제하여, 동결을 신속히 행할 수 있다. 또한, 이웃하는 생체세포 수납용 오목부가 홈부에 의해 연통되어 있으므로, 생체세포 수납용 오목부로부터의 동결 보존액의 이동이 용이하게 되고, 또한 복수의 생체세포 수납용 오목부에 남는 동결 보존액량도 균일하게 된다. 홈부의 폭으로서는 100㎛∼500㎛가 바람직하고, 또한 홈부의 깊이로서는 50㎛∼500㎛가 바람직하다.
본체부(3) 및 생체세포 유지부(2)는 내한성 재료에 의해 형성되어 있다. 특히, 본체부(3) 및 생체세포 유지부(2)는 액체질소 내성 재료, 바꿔 말하면, 액체질소에 접촉해도 취화되지 않는 것이 바람직하다. 또한 생체세포 유지부(2)는 투명 혹은 반투명체인 것이 바람직하고, 또한 다소의 가요성을 갖는 것이 바람직하다. 본체부(3) 및 생체세포 유지부(2)의 형성 재료로서는, 예를 들면, 3-불화폴리에틸렌, 저밀도 폴리에틸렌, 중밀도 폴리에틸렌, 고밀도 폴리에틸렌, 폴리카보네이트, 나일론, 폴리술폰, 폴리에스테르, 폴리스티렌, 폴리이미드, 초고분자량 폴리에틸렌, 에틸렌-아세트산비닐 공중합체 등의 합성 수지, 또한 그들 합성 수지에 의해 형성된 필름의 적층체가 적합하게 사용된다.
상기한 실시예의 생체세포 동결 보존 도구(1)에서는, 도 6, 도 7 및 도 9(특히, 도 7)에 도시하는 바와 같이, 홈부(29a, 29b, 29c, 29d, 29e)는 생체세포 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)의 바닥부에 도달하지 않는 것으로 되어 있다. 이렇게 함으로써, 생체세포 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)의 바닥부에 약간의 동결 보존액의 저류가 가능한 것으로 되어 있다.
그러나, 상술한 바와 같은 것에 한정되지 않고, 도 10 및 도 11에 도시하는 생체세포 동결 보존 도구(10)와 같이, 홈부(29a, 29b, 29c, 29d, 29e)는, 생체세포 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)의 바닥부에 도달하는 것이어도 된다. 이와 같이 함으로써, 생체세포 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)에 저류하는 동결 보존액을 보다 적은 것으로 할 수 있다.
또한 생체세포 수납용 오목부 및 그것과 연통하는 잉여 동결 보존액 배출로의 형태는 전술한 바와 같은 것에 한정되는 것은 아니다.
예를 들면, 도 12 내지 도 14에 도시하는 바와 같은 생체세포 동결 보존 도구(20)와 같은 타입의 것이어도 된다. 도 12는 본 발명의 다른 실시예의 생체세포 동결 보존 도구의 선단부의 확대 정면도이다. 도 13은 도 12의 E-E선 단면도이다. 도 14는 도 12의 F-F선 단면도이다.
생체세포 동결 보존 도구(20)에서는, 생체세포 부착 유지부(22)는 상면에 형성된 복수의 짧은 원통 형상 돌출부를 구비하고 있고, 그들 돌출부의 내부에 생체세포 수납용 오목부(51, 52, 53, 54, 55)가 형성되어 있다. 그리고, 돌출부의 측벽에는, 오목부(51)와 연통하는 2개의 슬릿(61a, 61b), 오목부(52)와 연통하는 2개의 슬릿(62a, 62b), 오목부(53)와 연통하는 2개의 슬릿(63a, 63b), 오목부(54)와 연통하는 2개의 슬릿(64a, 64b), 오목부(55)와 연통하는 2개의 슬릿(65a, 65b)을 가지고 있다. 또한 각 슬릿은 각각의 오목부의 바닥부에 연통해 있다. 또한, 오목부와 연통하는 슬릿은 1개이어도 좋지만, 2개 이상 설치하는 것이 바람직하다. 또한 오목부의 깊이는 0.05∼0.5mm가 바람직하다. 또한, 이 생체세포 동결 보존 도구(20)에서는, 그 이면측(짧은 원통 형상 돌출부의 비형성면측)에는, 축방향으로 연장되고 또한 오목부(51)의 바닥면의 하방을 통과하도록 연장되는 오목부(56)가 형성되어 있다. 이 때문에, 오목부(51)의 바닥면을 형성하는 부분은 얇은 부위로 되어 있어, 오목부로의 열전도를 양호하게 하고 있다.
다음에 본 발명의 생체세포 동결 보존 도구(1)의 사용방법에 대하여 설명한다.
이 설명에서는, 생체세포(구체적으로는, 난자)를 동결 보존하는 경우를 예로 하여 설명한다.
우선, 복수의 생체세포인 난자를 채취하고, 난자의 세포 내액을 평형액으로 치환하는 작업을 행하고, 또한, 세포 외액을 유리화액으로 치환하는 작업을 행한다. 그리고, 현미경하에서, 생체세포 동결 보존 도구(1)의 생체세포 부착 유지부(22)에 설치된 각각의 생체세포 수납용 오목부(28a, 28b, 28c, 28d, 28e)에 난자를 소량의 유리화액과 함께 배치시켜, 부착시킨다. 난자가 부착된 생체세포 동결 보존 도구(1)를 선단측(생체세포 유지부(22)측)으로부터, 미리 준비해 둔 액체질소에 침지하여 동결(유리화)시킨다. 액체질소와의 접촉에 의해, 생체세포는 급격 냉각된다. 동결 생체세포가 부착된 생체세포 동결 보존 도구(1)는, 별도 준비한 통형상 용기 내에 수납한 후, 또한, 수납 용기(케인)에 수납하고, 수납 용기를 액체질소 탱크 내에 넣어 보존한다.
본 발명의 생체세포 동결 보존 도구는 이하의 것이다.
(1) 내한성 재료에 의해 형성된 본체부와, 내한성 재료에 의해 형성된 생체세포 유지부를 구비하는 생체세포 동결 보존 도구로서, 상기 생체세포 유지부는 가늘고 긴 생체세포 부착 유지부를 구비하고, 상기 생체세포 부착 유지부는 상기 생체세포 부착 유지부의 길이 방향으로 복수 설치된 생체세포 수납용 오목부와, 상기 생체세포 수납용 오목부와 연통하는 잉여 동결 보존액 배출로를 갖는 생체세포 동결 보존 도구.
상기 생체세포 동결 보존 도구는, 생체세포 부착 유지부가 복수의 생체세포 수납용 오목부를 가짐으로써, 생체세포 배치 조작에 있어서, 생체세포를 배치하는 타깃으로 되어, 배치 조작을 양호하게 행할 수 있고, 또한, 생체세포 수납용 오목부에 수납된 생체세포는, 이동이 규제되기 때문에, 그 후의 동결 작업 중에서의 생체세포의 이동, 이탈을 방지할 수 있다. 또한, 생체세포 수납용 오목부와 연통하는 잉여 동결 보존액 배출로를 갖기 때문에, 오목부 내에 과잉한 동결 보존액이 저류되지 않아, 동결 작업시에 있어서의 생체세포의 냉각이 신속하게 행해진다.
그리고, 본 발명의 실시태양은 이하의 것이어도 된다.
(2) 상기 잉여 동결 보존액 배출로는 상기 생체세포 수납용 오목부와 연통하고, 또한, 상기 생체세포 부착 유지부의 길이 방향으로 연장되는 홈부인 상기 (1)에 기재된 생체세포 동결 보존 도구.
(3) 상기 생체세포 유지부는, 상기 생체세포 수납용 오목부가 형성된 부분의 상기 생체세포 부착 유지부의 양측부에 설치되고 또한 상기 생체세포 부착 유지부의 길이 방향으로 연장되는 2개의 측부 팽출부를 가지고 있는 상기 (1) 또는 (2)에 기재된 생체세포 동결 보존 도구.
(4) 상기 생체세포 부착 유지부는 가장 선단측의 상기 생체세포 수납용 오목부보다 선단측에 설치된 돌출부를 갖는 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 하나에 기재된 생체세포 동결 보존 도구.
(5) 상기 홈부는 이웃하는 상기 생체세포 수납용 오목부를 접속하고 있는 상기 (2) 내지 (4) 중 어느 하나에 기재된 생체세포 동결 보존 도구.
(6) 상기 생체세포 부착 유지부는 가장 선단측에 위치하는 상기 생체세포 수납용 오목부로부터, 선단측으로 연장되는 홈부를 구비하고 있는 상기 (2) 내지 (5) 중 어느 하나에 기재된 생체세포 동결 보존 도구.
(7) 상기 생체세포 부착 유지부, 가장 기단측에 위치하는 상기 생체세포 수납용 오목부으로부터, 기단측으로 연장되는 홈부를 구비하고 있는 상기 (2) 내지 (6) 중 어느 하나에 기재된 생체세포 동결 보존 도구 .
(8) 상기 내한성 재료는 액체질소 내성 재료인 상기 (1) 내지 (7) 중 어느 하나에 기재된 생체세포 동결 보존 도구.
(9) 상기 생체세포 부착 유지부는 박판 형상의 것인 상기 (1) 내지 (8) 중 어느 하나에 기재된 생체세포 동결 보존 도구.

Claims (9)

  1. 내한성 재료에 의해 형성된 본체부와, 내한성 재료에 의해 형성된 생체세포 유지부를 구비하는 생체세포 동결 보존 도구로서,
    상기 생체세포 유지부는 가늘고 긴 생체세포 부착 유지부를 구비하고, 상기 생체세포 부착 유지부는 상기 생체세포 부착 유지부의 길이 방향으로 복수 설치된 생체세포 수납용 오목부와, 상기 생체세포 수납용 오목부와 연통하는 잉여 동결 보존액 배출로를 갖는 것을 특징으로 하는 생체세포 동결 보존 도구.
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 잉여 동결 보존액 배출로는 상기 생체세포 수납용 오목부와 연통되고, 또한, 상기 생체세포 부착 유지부의 길이 방향으로 연장되는 홈부인 것을 특징으로 하는 생체세포 동결 보존 도구.
  3. 제 1 항에 있어서, 상기 생체세포 유지부는 상기 생체세포 수납용 오목부가 형성된 부분의 상기 생체세포 부착 유지부의 양측부에 설치되고 또한 상기 생체세포 부착 유지부의 길이 방향으로 연장되는 2개의 측부 팽출부를 가지고 있는 것을 특징으로 하는 생체세포 동결 보존 도구.
  4. 제 1 항에 있어서, 상기 생체세포 부착 유지부는 가장 선단측의 상기 생체세포 수납용 오목부보다 선단측에 설치된 돌출부를 갖는 것을 특징으로 하는 생체세포 동결 보존 도구.
  5. 제 2 항에 있어서, 상기 홈부는 이웃하는 상기 생체세포 수납용 오목부를 접속하고 있는 것을 특징으로 하는 생체세포 동결 보존 도구.
  6. 제 2 항에 있어서, 상기 생체세포 부착 유지부는 가장 선단측에 위치하는 상기 생체세포 수납용 오목부로부터 선단측으로 연장되는 홈부를 구비하고 있는 것을 특징으로 하는 생체세포 동결 보존 도구.
  7. 제 2 항에 있어서, 상기 생체세포 부착 유지부는 가장 기단측에 위치하는 상기 생체세포 수납용 오목부로부터 기단측으로 연장되는 홈부를 구비하고 있는 것을 특징으로 하는 생체세포 동결 보존 도구.
  8. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 내한성 재료는 액체질소 내성 재료인 것을 특징으로 하는 생체세포 동결 보존 도구.
  9. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 생체세포 부착 유지부는 박판 형상의 것인 것을 특징으로 하는 생체세포 동결 보존 도구.
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Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10531657B2 (en) 2015-12-07 2020-01-14 Coopersurgical, Inc. Low temperature specimen carriers and related methods
WO2018230477A1 (ja) 2017-06-12 2018-12-20 三菱製紙株式会社 細胞又は組織の凍結保存用治具
US11116206B2 (en) 2018-10-01 2021-09-14 Cook Medical Technologies Llc Cryocontainer
USD918707S1 (en) * 2018-12-04 2021-05-11 Jun Tao Vitrification and storage device
WO2020139819A1 (en) 2018-12-28 2020-07-02 Overture Life, Inc. Cryostorage device for oocytes and embryos during cryopreservation
JP6636202B1 (ja) * 2019-06-19 2020-01-29 リプロサポートメディカルリサーチセンター株式会社 細胞を凍結する前段階で使用される器具
USD951481S1 (en) 2020-09-01 2022-05-10 TMRW Life Sciences, Inc. Cryogenic vial
USD963194S1 (en) 2020-12-09 2022-09-06 TMRW Life Sciences, Inc. Cryogenic vial carrier
CN115777685A (zh) * 2021-09-10 2023-03-14 深圳拜尔洛克生物技术有限公司 用于生物组织冷冻保存或解冻复苏的装置
WO2023036223A1 (zh) * 2021-09-10 2023-03-16 深圳拜尔洛克生物技术有限公司 用于生物组织冷冻保存或解冻复苏的装置

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040259072A1 (en) 2003-04-15 2004-12-23 Kabushiki Kaisha Kitazato Supply Egg freezing and storing tool and method
US20100317108A1 (en) 2008-02-25 2010-12-16 Sydney Ivf Limited Cryopreservation of Biological Cells and Tissues

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2000189155A (ja) * 1998-12-25 2000-07-11 Livestock Improvement Association Of Japan Inc 哺乳動物胚または卵子の保存方法並びに凍結胚または卵子の融解希釈方法
JP4373025B2 (ja) * 2001-04-18 2009-11-25 株式会社北里サプライ 卵凍結保存用具および筒状部材保持器具
EP1838445B1 (en) * 2004-12-21 2013-11-06 McGill University Retractable tool and method for manipulating developmental cells in a process of cryopreservation
US20090123992A1 (en) 2007-11-12 2009-05-14 Milton Chin Shape-Shifting Vitrification Device
WO2009148509A1 (en) 2008-05-30 2009-12-10 Corning Incorporated Cell culture apparatus having different micro-well topography
US8030063B2 (en) * 2008-06-18 2011-10-04 The Cleveland Clinic Foundation Systems and methods for vitrifying tissue
CN102203241B (zh) 2008-10-24 2017-05-03 可乐丽股份有限公司 细胞保存方法和细胞运输方法
JP5062164B2 (ja) * 2008-12-25 2012-10-31 ニプロ株式会社 細胞用デバイス及び細胞用デバイスの製造方法
US20110129811A1 (en) * 2009-12-01 2011-06-02 Scitech Invention, Llc Cryopreservation and Storage Systems and Methods
US20110196358A1 (en) * 2010-02-09 2011-08-11 Enrique Criado Scholz Closed ultra-rapid cell vitrification device and sealing procedure of the device
US20110275153A1 (en) * 2010-05-06 2011-11-10 Vance Products Inc., D/B/A Cook Urological Inc. Cryogenic storage device
JP5935313B2 (ja) * 2010-12-17 2016-06-15 ニプロ株式会社 凍結保存器具

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040259072A1 (en) 2003-04-15 2004-12-23 Kabushiki Kaisha Kitazato Supply Egg freezing and storing tool and method
US20100317108A1 (en) 2008-02-25 2010-12-16 Sydney Ivf Limited Cryopreservation of Biological Cells and Tissues

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EP2765181A4 (en) 2015-06-24
WO2013051520A1 (ja) 2013-04-11
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US20140212962A1 (en) 2014-07-31
CN103842493B (zh) 2015-09-23
KR20140070575A (ko) 2014-06-10
EP2765181A1 (en) 2014-08-13
JP5781621B2 (ja) 2015-09-24
JPWO2013051520A1 (ja) 2015-03-30

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