KR101875912B1 - 암 표적 치료를 위한 방사성 동위원소가 표지된 cd55 표적 항체 및 이의 용도 - Google Patents
암 표적 치료를 위한 방사성 동위원소가 표지된 cd55 표적 항체 및 이의 용도 Download PDFInfo
- Publication number
- KR101875912B1 KR101875912B1 KR1020160132643A KR20160132643A KR101875912B1 KR 101875912 B1 KR101875912 B1 KR 101875912B1 KR 1020160132643 A KR1020160132643 A KR 1020160132643A KR 20160132643 A KR20160132643 A KR 20160132643A KR 101875912 B1 KR101875912 B1 KR 101875912B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- cancer
- antigen
- binding fragment
- antibody
- chelator
- Prior art date
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 84
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 76
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title abstract description 14
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 title description 2
- 102100025680 Complement decay-accelerating factor Human genes 0.000 claims abstract description 188
- 101000856022 Homo sapiens Complement decay-accelerating factor Proteins 0.000 claims abstract description 188
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 99
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 65
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 65
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 65
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 62
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims abstract description 54
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 16
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 14
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 88
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 claims description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 19
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 14
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 claims description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 14
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 13
- -1 4-isothiocyanatobenzyl Chemical group 0.000 claims description 11
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 11
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 9
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 claims description 9
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 8
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 8
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000003128 head Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 claims description 8
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 8
- 210000003739 neck Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 8
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical compound NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 7
- JHALWMSZGCVVEM-UHFFFAOYSA-N 2-[4,7-bis(carboxymethyl)-1,4,7-triazonan-1-yl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 JHALWMSZGCVVEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- JVHROZDXPAUZFK-UHFFFAOYSA-N TETA Chemical compound OC(=O)CN1CCCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCCN(CC(O)=O)CC1 JVHROZDXPAUZFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 5
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 claims description 5
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Natural products NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229940127084 other anti-cancer agent Drugs 0.000 claims description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 3
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 claims description 3
- ITWBWJFEJCHKSN-UHFFFAOYSA-N 1,4,7-triazonane Chemical compound C1CNCCNCCN1 ITWBWJFEJCHKSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ABEIJMWLNYUWMD-KRWDZBQOSA-N 2-[(5s)-4,7-bis(carboxymethyl)-5-[(4-isothiocyanatophenyl)methyl]-1,4,7-triazonan-1-yl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)C[C@@H]1CC1=CC=C(N=C=S)C=C1 ABEIJMWLNYUWMD-KRWDZBQOSA-N 0.000 claims description 2
- UDOPJKHABYSVIX-UHFFFAOYSA-N 2-[4,7,10-tris(carboxymethyl)-6-[(4-isothiocyanatophenyl)methyl]-1,4,7,10-tetrazacyclododec-1-yl]acetic acid Chemical compound C1N(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)C1CC1=CC=C(N=C=S)C=C1 UDOPJKHABYSVIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 claims description 2
- 229940120638 avastin Drugs 0.000 claims description 2
- 229940082789 erbitux Drugs 0.000 claims description 2
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 claims description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 2
- 230000006510 metastatic growth Effects 0.000 claims description 2
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 claims description 2
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 8
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 claims 3
- 210000005168 endometrial cell Anatomy 0.000 claims 3
- ABEIJMWLNYUWMD-UHFFFAOYSA-N 2-[4,7-bis(carboxymethyl)-5-[(4-isothiocyanatophenyl)methyl]-1,4,7-triazonan-1-yl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC1CC1=CC=C(N=C=S)C=C1 ABEIJMWLNYUWMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 claims 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- HSANJBZMPJBTRT-UHFFFAOYSA-N acetic acid;1,4,7,10-tetrazacyclododecane Chemical compound CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.C1CNCCNCCNCCN1 HSANJBZMPJBTRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 201000003914 endometrial carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims 1
- 208000012991 uterine carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 abstract description 85
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 abstract description 85
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 abstract description 85
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 21
- 108010009575 CD55 Antigens Proteins 0.000 abstract description 14
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 abstract description 13
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 abstract description 13
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 11
- 230000005880 cancer cell killing Effects 0.000 abstract description 6
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 abstract description 6
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 abstract description 6
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 2
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 17
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 16
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 14
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 13
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 13
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 12
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 12
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 12
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 12
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 11
- 206010026673 Malignant Pleural Effusion Diseases 0.000 description 9
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 9
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 9
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 9
- 210000004910 pleural fluid Anatomy 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 7
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 7
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 7
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 7
- 206010050017 Lung cancer metastatic Diseases 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 6
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 6
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 6
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 6
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 5
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 5
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 5
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011729 BALB/c nude mouse Methods 0.000 description 4
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 4
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 4
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 4
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 4
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 4
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 210000000779 thoracic wall Anatomy 0.000 description 4
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 4
- UPADCCSMVOQAGF-LBPRGKRZSA-N Gly-Gly-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)CNC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 UPADCCSMVOQAGF-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010023774 Large cell lung cancer Diseases 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 201000009546 lung large cell carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 2
- MGSVBZIBCCKGCY-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MGSVBZIBCCKGCY-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- FKYQEVBRZSFAMJ-QWRGUYRKSA-N Gly-Ser-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FKYQEVBRZSFAMJ-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N Hydroquinone Chemical compound OC1=CC=C(O)C=C1 QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 2
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 2
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- LXXCHJKHJYRMIY-FQPOAREZSA-N Thr-Tyr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O LXXCHJKHJYRMIY-FQPOAREZSA-N 0.000 description 2
- YOPQYBJJNSIQGZ-JNPHEJMOSA-N Thr-Tyr-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 YOPQYBJJNSIQGZ-JNPHEJMOSA-N 0.000 description 2
- DXDMNBJJEXYMLA-UBHSHLNASA-N Trp-Asn-Asp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 DXDMNBJJEXYMLA-UBHSHLNASA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 208000003362 bronchogenic carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 108010001064 glycyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 2
- 208000037819 metastatic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000011575 metastatic malignant neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 2
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 2
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 2
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 2
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 2
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 229920002239 polyacrylonitrile Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 2
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- 229940005561 1,4-benzoquinone Drugs 0.000 description 1
- 102000012440 Acetylcholinesterase Human genes 0.000 description 1
- 108010022752 Acetylcholinesterase Proteins 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- UGLPMYSCWHTZQU-AUTRQRHGSA-N Ala-Ala-Tyr Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CC=C(O)C=C1 UGLPMYSCWHTZQU-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 1
- KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- VWEWCZSUWOEEFM-WDSKDSINSA-N Ala-Gly-Ala-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O VWEWCZSUWOEEFM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- LMFXXZPPZDCPTA-ZKWXMUAHSA-N Ala-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N LMFXXZPPZDCPTA-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- SOBIAADAMRHGKH-CIUDSAMLSA-N Ala-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SOBIAADAMRHGKH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- MLNSNVLOEIYJIU-ZUDIRPEPSA-N Ala-Leu-Thr-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MLNSNVLOEIYJIU-ZUDIRPEPSA-N 0.000 description 1
- AJBVYEYZVYPFCF-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AJBVYEYZVYPFCF-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- IPZQNYYAYVRKKK-FXQIFTODSA-N Ala-Pro-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IPZQNYYAYVRKKK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VNFSAYFQLXPHPY-CIQUZCHMSA-N Ala-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VNFSAYFQLXPHPY-CIQUZCHMSA-N 0.000 description 1
- OMSKGWFGWCQFBD-KZVJFYERSA-N Ala-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OMSKGWFGWCQFBD-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 239000012114 Alexa Fluor 647 Substances 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N Arg-Ala-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ATABBWFGOHKROJ-GUBZILKMSA-N Arg-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ATABBWFGOHKROJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- IZSMEUDYADKZTJ-KJEVXHAQSA-N Arg-Tyr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IZSMEUDYADKZTJ-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- DAPLJWATMAXPPZ-CIUDSAMLSA-N Asn-Asn-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DAPLJWATMAXPPZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- WONGRTVAMHFGBE-WDSKDSINSA-N Asn-Gly-Gln Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N WONGRTVAMHFGBE-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- LTZIRYMWOJHRCH-GUDRVLHUSA-N Asn-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N LTZIRYMWOJHRCH-GUDRVLHUSA-N 0.000 description 1
- WIDVAWAQBRAKTI-YUMQZZPRSA-N Asn-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O WIDVAWAQBRAKTI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- AXXCUABIFZPKPM-BQBZGAKWSA-N Asp-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O AXXCUABIFZPKPM-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- JJQGZGOEDSSHTE-FOHZUACHSA-N Asp-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O JJQGZGOEDSSHTE-FOHZUACHSA-N 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101100505161 Caenorhabditis elegans mel-32 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- NXQCSPVUPLUTJH-WHFBIAKZSA-N Cys-Ser-Gly Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O NXQCSPVUPLUTJH-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091092584 GDNA Proteins 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N Gln-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 1
- NCWOMXABNYEPLY-NRPADANISA-N Glu-Ala-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NCWOMXABNYEPLY-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000002794 Glucosephosphate Dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- XUORRGAFUQIMLC-STQMWFEESA-N Gly-Arg-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)CN)O XUORRGAFUQIMLC-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- HAXARWKYFIIHKD-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ile-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HAXARWKYFIIHKD-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- TWTPDFFBLQEBOE-IUCAKERBSA-N Gly-Leu-Gln Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O TWTPDFFBLQEBOE-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N Gly-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)NCC(O)=O PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- DBJYVKDPGIFXFO-BQBZGAKWSA-N Gly-Met-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DBJYVKDPGIFXFO-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- GGAPHLIUUTVYMX-QWRGUYRKSA-N Gly-Phe-Ser Chemical compound OC[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)C[NH3+])CC1=CC=CC=C1 GGAPHLIUUTVYMX-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- IRJWAYCXIYUHQE-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN IRJWAYCXIYUHQE-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- DBUNZBWUWCIELX-JHEQGTHGSA-N Gly-Thr-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O DBUNZBWUWCIELX-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 1
- TVTZEOHWHUVYCG-KYNKHSRBSA-N Gly-Thr-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O TVTZEOHWHUVYCG-KYNKHSRBSA-N 0.000 description 1
- CUVBTVWFVIIDOC-YEPSODPASA-N Gly-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)CN CUVBTVWFVIIDOC-YEPSODPASA-N 0.000 description 1
- RIUZKUJUPVFAGY-HOTGVXAUSA-N Gly-Trp-His Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC3=CN=CN3)C(=O)O)NC(=O)CN RIUZKUJUPVFAGY-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- UMRIXLHPZZIOML-OALUTQOASA-N Gly-Trp-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)NC(=O)CN UMRIXLHPZZIOML-OALUTQOASA-N 0.000 description 1
- NGRPGJGKJMUGDM-XVKPBYJWSA-N Gly-Val-Gln Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O NGRPGJGKJMUGDM-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 1
- BIAKMWKJMQLZOJ-ZKWXMUAHSA-N His-Ala-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)Cc1cnc[nH]1)C(O)=O BIAKMWKJMQLZOJ-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- RPZFUIQVAPZLRH-GHCJXIJMSA-N Ile-Asp-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N RPZFUIQVAPZLRH-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- UAELWXJFLZBKQS-WHOFXGATSA-N Ile-Phe-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)NCC(O)=O UAELWXJFLZBKQS-WHOFXGATSA-N 0.000 description 1
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 1
- ILJREDZFPHTUIE-GUBZILKMSA-N Leu-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ILJREDZFPHTUIE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N Leu-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- AIQWYVFNBNNOLU-RHYQMDGZSA-N Leu-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O AIQWYVFNBNNOLU-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- TUIOUEWKFFVNLH-DCAQKATOSA-N Leu-Val-Cys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O TUIOUEWKFFVNLH-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007433 Lymphatic Metastasis Diseases 0.000 description 1
- UWKNTTJNVSYXPC-CIUDSAMLSA-N Lys-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN UWKNTTJNVSYXPC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- FUKDBQGFSJUXGX-RWMBFGLXSA-N Lys-Arg-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)O FUKDBQGFSJUXGX-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 1
- GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N Lys-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- NCZIQZYZPUPMKY-PPCPHDFISA-N Lys-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O NCZIQZYZPUPMKY-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- SBQDRNOLGSYHQA-YUMQZZPRSA-N Lys-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SBQDRNOLGSYHQA-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- WZVSHTFTCYOFPL-GARJFASQSA-N Lys-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)O WZVSHTFTCYOFPL-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- VOOINLQYUZOREH-SRVKXCTJSA-N Met-Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCSC)N VOOINLQYUZOREH-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N N-L-alanyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)C)C(O)=O)=CNC2=C1 WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- XDMMOISUAHXXFD-SRVKXCTJSA-N Phe-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O XDMMOISUAHXXFD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- OOLOTUZJUBOMAX-GUBZILKMSA-N Pro-Ala-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OOLOTUZJUBOMAX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- YDTUEBLEAVANFH-RCWTZXSCSA-N Pro-Val-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 YDTUEBLEAVANFH-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 239000012327 Ruthenium complex Substances 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- QGMLKFGTGXWAHF-IHRRRGAJSA-N Ser-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QGMLKFGTGXWAHF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N Ser-Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- BDMWLJLPPUCLNV-XGEHTFHBSA-N Ser-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O BDMWLJLPPUCLNV-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 description 1
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 description 1
- CAJFZCICSVBOJK-SHGPDSBTSA-N Thr-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O CAJFZCICSVBOJK-SHGPDSBTSA-N 0.000 description 1
- GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N Thr-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N 0.000 description 1
- MXDOAJQRJBMGMO-FJXKBIBVSA-N Thr-Pro-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O MXDOAJQRJBMGMO-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- OZUJUVFWMHTWCZ-HOCLYGCPSA-N Trp-Gly-His Chemical compound N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O OZUJUVFWMHTWCZ-HOCLYGCPSA-N 0.000 description 1
- MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N Trp-Val-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- KIJLSRYAUGGZIN-CFMVVWHZSA-N Tyr-Ile-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KIJLSRYAUGGZIN-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 1
- MWUYSCVVPVITMW-IGNZVWTISA-N Tyr-Tyr-Ala Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 MWUYSCVVPVITMW-IGNZVWTISA-N 0.000 description 1
- ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N Tyr-Tyr-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- BZWUSZGQOILYEU-STECZYCISA-N Val-Ile-Tyr Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 BZWUSZGQOILYEU-STECZYCISA-N 0.000 description 1
- DJQIUOKSNRBTSV-CYDGBPFRSA-N Val-Ile-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N DJQIUOKSNRBTSV-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- DEGUERSKQBRZMZ-FXQIFTODSA-N Val-Ser-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DEGUERSKQBRZMZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 1
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 229940022698 acetylcholinesterase Drugs 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 108010069020 alanyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 1
- 108010070783 alanyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 108010004469 allophycocyanin Proteins 0.000 description 1
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 1
- 108010066988 asparaginyl-alanyl-glycyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 239000000022 bacteriostatic agent Substances 0.000 description 1
- 108010051210 beta-Fructofuranosidase Proteins 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 125000004057 biotinyl group Chemical class [H]N1C(=O)N([H])[C@]2([H])[C@@]([H])(SC([H])([H])[C@]12[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 description 1
- 229910001417 caesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 201000000941 chest wall lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- RAABOESOVLLHRU-UHFFFAOYSA-N diazene Chemical compound N=N RAABOESOVLLHRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000071 diazene Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 230000006334 disulfide bridging Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 1
- KTWOOEGAPBSYNW-UHFFFAOYSA-N ferrocene Chemical compound [Fe+2].C=1C=C[CH-]C=1.C=1C=C[CH-]C=1 KTWOOEGAPBSYNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- NBVXSUQYWXRMNV-UHFFFAOYSA-N fluoromethane Chemical compound FC NBVXSUQYWXRMNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Natural products NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010082286 glycyl-seryl-alanine Proteins 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010040030 histidinoalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010036413 histidylglycine Proteins 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 238000010324 immunological assay Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 239000001573 invertase Substances 0.000 description 1
- 235000011073 invertase Nutrition 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N lauric acid triglyceride Natural products CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 108010044311 leucyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 1
- 208000021998 malignant neoplasm of chest wall Diseases 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- RXNXLAHQOVLMIE-UHFFFAOYSA-N phenyl 10-methylacridin-10-ium-9-carboxylate Chemical compound C12=CC=CC=C2[N+](C)=C2C=CC=CC2=C1C(=O)OC1=CC=CC=C1 RXNXLAHQOVLMIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000002985 plastic film Substances 0.000 description 1
- 229920006255 plastic film Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 108010020755 prolyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 description 1
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 208000017572 squamous cell neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000002511 suppository base Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
- G01N33/532—Production of labelled immunochemicals
- G01N33/534—Production of labelled immunochemicals with radioactive label
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/308—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on cancer prevention
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
Abstract
본 발명은 면역 기전을 억제하는 수용체인 Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF)에 대하여 높은 결합력을 가지는 단일클론항체에 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 및 이의 항원 결합 단편, 이의 제조 방법, 상기 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체를 포함하는 암 진단 키트 및 암 진단에 필요한 정보 제공, 상기 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체를 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학 조성물, 및 상기 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체를 포함하는 암 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF)에 대하여 높은 결합력을 가지는 단일클론항체에 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 및 이의 항원 결합 단편으로, CD55에 대한 결합 친화도가 우수하여 CD55에 매우 특이적으로 결합하고, 또한, 민감도와 특이도가 매우 높아 폐암을 비롯하여 각종 암 환자를 스크리닝하는데 유용하게 사용될 수 있다. 나아가, 단일클론항체에 비하여 방사성 동위원소가 결합한 항체는 더욱 높은 암세포 사멸 효과 및 암세포의 전이를 억제하는 효과를 유발하여, 폐암을 비롯하여 각종 암 치료에서, 더욱 높은 치료효과를 나타낼 수 있다.
본 발명은 Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF)에 대하여 높은 결합력을 가지는 단일클론항체에 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 및 이의 항원 결합 단편으로, CD55에 대한 결합 친화도가 우수하여 CD55에 매우 특이적으로 결합하고, 또한, 민감도와 특이도가 매우 높아 폐암을 비롯하여 각종 암 환자를 스크리닝하는데 유용하게 사용될 수 있다. 나아가, 단일클론항체에 비하여 방사성 동위원소가 결합한 항체는 더욱 높은 암세포 사멸 효과 및 암세포의 전이를 억제하는 효과를 유발하여, 폐암을 비롯하여 각종 암 치료에서, 더욱 높은 치료효과를 나타낼 수 있다.
Description
본 발명은 면역 기전을 억제하는 수용체인 Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF)에 대하여 높은 결합력을 가지는 단일클론항체에 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 및 이의 항원 결합 단편, 이의 제조 방법, 상기 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 및 이의 항원 결합 단편을 포함하는 암 진단 키트 및 암 진단에 필요한 정보 제공, 상기 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 및 이의 항원 결합 단편을 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학 조성물, 및 상기 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 및 이의 항원 결합 단편을 포함하는 암 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
기존의 항암 치료제는 빠르게 분열하는 암세포를 공격하는 치료 기전을 가진다. 그러나 이러한 치료 기전에 의하여 장 상피 세포와 같이 정상적으로 빠르게 분열하는 세포도 공격을 받게 되며, 그로 인해 설사, 구토 등 심각한 부작용이 초래된다. 이러한 부작용을 극복하기 위하여 표적 항암 치료기술이 개발되고 있다. 표적 항암 치료 기술은 암세포만을 선택적으로 골라서 공격하기 때문에 정상 세포에 대한 부작용을 현저하게 줄일 수 있는 효율적인 항암 치료법이다. 특히, 방사성 동위원소를 이용한 표적 항암 치료 기술은 암을 표적 화하는 항체 또는 펩타이드에 방사성 동위원소를 결합함으로써 우수한 치료 효과를 보인다.
폐암은 전이가 쉽게 일어나는 암 중 하나로서 특히, 흉강 내에서 악성 흉수를 유발하게 된다. 악성 흉수는 폐암이 흉벽으로 전이되는 원인이 되기도 하며, 생존 기간은 보통 4개월 정도이다. 따라서, 악성 흉수 등 치명적인 전이성 폐암을 치료할 수 있는 효과적인 항암 치료법이 필요하다.
Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF)는 보체 면역기전을 억제하는 수용체이다. 이 수용체는 대장암, 폐암, 위암, 유방암, 난소암, 백혈병, 두경부암 등에서 많이 발현되어 있으며, 체내의 보체 면역체계가 암세포를 파괴하는 것을 억제함으로써 암세포의 증식을 촉진한다. 따라서 이 수용체를 억제하면 체내의 보체 면역체계가 암세포를 파괴하는 데 도움을 줄 수 있다고 예상된다.
Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF)에 대하여 높은 결합력을 가지며 치료효과를 유발할 수 있는 항체를 개발하였다. 단일클론항체에 비하여 방사성 동위원소가 결합 된 항체는 더욱 높은 암세포 사멸효과를 유발할 수 있다. 따라서 Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF) 표적 항체에 방사성 동위원소를 결합함으로써 더욱 높은 치료효과를 유발할 수 있는 치료기술이 필요하다.
본 발명의 목적은 단일 항체에 비하여 향상된 암세포 사멸효과를 발휘할 수 있는, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 암 진단 키트를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 이용하여 암 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 개선용 건강 기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
상술한 과제를 해결하기 위해 본 발명은, 하기 일반식 1을 포함하는, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공할 수 있다:
[일반식 1]
방사성 동위원소-R1-R2
상기 식에서, R1은 킬레이터이며, R2는 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편이다.
본 발명의 또 다른 일 실시예는, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 암 진단 키트를 제공할 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예는, (a) 제1항의 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 암이 의심되는 개체로부터 분리된 생물학적 시료에 접촉시키는 단계; (b) 항원-항체 복합체 형성을 통해 상기 생물학적 시료에서 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편된 CD55 단백질의 발현 수준을 측정하는 단계; 및(c) 상기 (b) 단계에서 측정된 CD55 단백질의 발현 수준을 대조군과 비교하여 대조군에 비해 상기 단백질의 발현 수준이 높으면 암 환자로 판정하는 단계; 를 포함하는 암 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법을 제공할 수 있다.
본 발명은 또한, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명은 또한, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명은 Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF)에 대하여 높은 결합력을 가지는 단일클론항체에 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 및 이의 항원 결합 단편으로, CD55에 대한 결합 친화도가 우수하여 CD55에 매우 특이적으로 결합하고, 또한 민감도와 특이도가 매우 높아 폐암을 비롯하여 각종 암 환자를 스크리닝하는데 유용하게 사용될 수 있다. 나아가, 단일클론항체에 비하여 방사성 동위원소가 결합한 항체는 더욱 높은 암세포 사멸 효과 및 암세포의 전이를 억제하는 효과를 유발하여, 폐암을 비롯하여 각종 암 치료에서, 더욱 높은 치료 효과를 나타낼 수 있다.
도 1은 폐암에서 Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF)의 발현을 보여주는 도면이다.
도 2는 폐암 세포주에서 Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF)의 발현을 보여주는 도면이다.
도 3은 Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF) 표적 항체(4-1H)와 폐암 세포주의 결합력을 보여주는 도면이다.
도 4는 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 방사화학적 순도(>95%) 및 방사화학적 안정성을 보여주는 도면이다.
도 5는 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 폐암 세포에 대한 immunoreactivity를 보여주는 도면이다.
도 6은 이용한 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 폐암 세포의 결합력을 보여주는 도면이다.
도 7은 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 여러 종류의 폐암 세포의 결합력을 보여주는 도면이다.
도 8은 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 폐암 세포의 내재화 및 외재화 속도론을 보여주는 도면이다.
도 9은 흉강내 폐암 전이 동물 모델에서의 해부학 결과 및 CD55의 발현을 보여주는 도면이다.
도 10은 흉강내 폐암 전이 동물모델에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 in vivo 체내 분포를 보여주는 도면이다.
도 11은 흉강내 폐암 전이 동물모델에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 잔류량 및 배출량을 보여주는 도면이다.
도 12은 약물 투여 전 절식 시간에 따른 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 종양 섭취율을 보여주는 도면이다.
도 13은 흉강내 폐암 전이 동물모델에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 SPECT/CT 영상을 보여주는 도면이다.
도 14은 폐암 세포에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 치료효과를 보여주는 도면이다.
도 15은 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 in vivo 폐암(악성 흉수) 치료효과 평가를 보여주는 도면이다.
도 16은 편평상피암에서 CD55의 높은 발현을 보여주는 도면이다.
도 17은 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 in vitro 폐암 전이 억제 효과를 보여주는 도면이다.
도 18은 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 시스플라틴(cisplatin)의 in vitro 폐암 병용 치료효과를 보여주는 도면이다.
도 19 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 시스플라틴(cisplatin)의 in vivo 폐암 병용 치료효과를 보여주는 도면이다.
도 2는 폐암 세포주에서 Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF)의 발현을 보여주는 도면이다.
도 3은 Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF) 표적 항체(4-1H)와 폐암 세포주의 결합력을 보여주는 도면이다.
도 4는 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 방사화학적 순도(>95%) 및 방사화학적 안정성을 보여주는 도면이다.
도 5는 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 폐암 세포에 대한 immunoreactivity를 보여주는 도면이다.
도 6은 이용한 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 폐암 세포의 결합력을 보여주는 도면이다.
도 7은 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 여러 종류의 폐암 세포의 결합력을 보여주는 도면이다.
도 8은 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 폐암 세포의 내재화 및 외재화 속도론을 보여주는 도면이다.
도 9은 흉강내 폐암 전이 동물 모델에서의 해부학 결과 및 CD55의 발현을 보여주는 도면이다.
도 10은 흉강내 폐암 전이 동물모델에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 in vivo 체내 분포를 보여주는 도면이다.
도 11은 흉강내 폐암 전이 동물모델에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 잔류량 및 배출량을 보여주는 도면이다.
도 12은 약물 투여 전 절식 시간에 따른 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 종양 섭취율을 보여주는 도면이다.
도 13은 흉강내 폐암 전이 동물모델에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 SPECT/CT 영상을 보여주는 도면이다.
도 14은 폐암 세포에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 치료효과를 보여주는 도면이다.
도 15은 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 in vivo 폐암(악성 흉수) 치료효과 평가를 보여주는 도면이다.
도 16은 편평상피암에서 CD55의 높은 발현을 보여주는 도면이다.
도 17은 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 in vitro 폐암 전이 억제 효과를 보여주는 도면이다.
도 18은 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 시스플라틴(cisplatin)의 in vitro 폐암 병용 치료효과를 보여주는 도면이다.
도 19 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 시스플라틴(cisplatin)의 in vivo 폐암 병용 치료효과를 보여주는 도면이다.
이하, 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.
본 발명자들은 연구를 통해 CD55가 정상 조직 및 정상 세포에서 낮게 발현되지만, 암 조직 및 암 세포에서는 매우 높게 발현됨을 확인하고 CD55가 암 진단 및 치료에 중요하다는 사실을 알았다. 특히, CD55가 정상 조직 및 정상 세포에서 낮게 발현되지만, 폐암 조직 및 폐암 세포에서는 매우 높게 발현됨을 확인하고 CD55가 폐암 진단 및 치료에 중요하다는 사실을 알았다 (도 1 및 도2).
이에, 본 발명자들은 추가 연구를 통해 CD55에 매우 특이적으로 결합하여 폐암을 비롯하여 각종 암의 진단 및 치료에 유용한 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체를 개발하였다. 본 발명의 단일클론항체는 CD55에 대한 결합 친화도가 우수하여 CD55에 매우 특이적으로 결합하고, 또한 친화력이 매우 높아 폐암을 비롯하여 각종 암의 진단 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다. 나아가, 단일클론항체에 비하여 방사성 동위원소가 결합한 항체는 더욱 높은 암세포 사멸 효과 및 암세포의 전이를 억제하는 효과를 유발하여, 폐암을 비롯하여 각종 암 치료에서, 더욱 높은 치료효과를 나타낼 수 있다.
본 발명은 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.
본 발명에서 용어, "항체"는 면역학적으로 특정 항원과 반응성을 갖는 면역글로불린 분자를 포함하는, 항원을 특이적으로 인식하는 수용체 역할을 하는 단백질 분자를 의미하며, 다클론항체, 단일클론항체, 전체(whole) 항체 및 항체 단편을 모두 포함한다. 또한, 상기 용어는 키메라성 항체(예를 들면, 인간화 뮤린 항체) 및 이가 (bivalent) 또는 양특이성 분자(예를 들어, 양특이성 항체), 디아바디, 트리아바디 및 테트라바디를 포함한다. 전체 항체는 2개의 전체 길이의 경쇄 및 2개의 전체 길이의 중쇄를 가지는 구조이며, 각각의 경쇄는 중쇄와 다이설파이드 결합으로 연결되어 있다. 상기 전체 항체는 IgA, IgD, IgE, IgM 및 IgG를 포함하며, IgG는 아형(subtype)으로, IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4를 포함한다. 상기 항체 단편은 항원결합 기능을 보유하고 있는 단편을 의미하며, Fab, Fab', F(ab')2 및 Fv 등을 포함한다. 상기 Fab는 경쇄 및 중쇄의 가변영역과 경쇄의 불변 영역 및 중쇄의 첫 번째 불변 영역(CH1 도메인)을 가지는 구조로 1개의 항원 결합 부위를 가진다. Fab'는 중쇄 CH1 도메인의 C 말단에 하나 이상의 시스테인 잔기를 포함하는 힌지 영역(hinge region)을 가진다는 점에서 Fab와 차이가 있다. F(ab')2 항체는 Fab'의 힌지 영역의 시스테인 잔기가 디설파이드 결합을 이루면서 생성된다. Fv(variable fragment)는 중쇄 가변부위 및 경쇄 가변부위만을 가지고 있는 최소의 항체조각을 의미한다. 이중쇄Fv(dsFv)는 디설파이드 결합으로 중쇄 가변부위와 경쇄 가변부위가 연결되어 있고 단쇄 Fv(scFv)는 일반적으로 펩타이드 링커를 통하여 중쇄의 가변 영역과 경쇄의 가변 영역이 공유 결합으로 연결되어 있다. 이러한 항체단편은 단백질 가수분해 효소를 이용해서 얻을 수 있고(예를 들어, 전체 항체를 파파인으로 제한 절단하며 Fab를 얻을 수 있고 펩신으로 절단하면 F(ab')2 단편을 얻을 수 있다), 바람직하게는 유전자 재조합 기술을 통하여 제작할 수 있다.
상기 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 하기 일반식 1을 포함하는, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편 일 수 있다:
[일반식 1]
방사성 동위원소-R1-R2
상기 식에서, R1은 킬레이터이며, R2는 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편이다.
본 발명의 상기 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 경쇄 CDR1, 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어진 경쇄 CDR2 및 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어진 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변영역, 및 서열번호 4의 아미노산 서열로 이루어진 중쇄 CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 중쇄 CDR2 및 서열번호 6의 아미노산 서열로 이루어진 중쇄 CDR3을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함할 수 있다. 서열 목록은 하기 표 1과 같다.
| 4H-1의 경쇄 및 중쇄 CDR 아미노산 서열 | ||
| LCDR1 | LCDR2 | LCDR3 |
| SGGGGSYG 서열번호 1) |
WNDKRPS (서열번호 2) |
GGWDSSTYAI (서열번호 3) |
| HCDR1 | HCDR2 | HCDR3 |
| DRGMA (서열번호 4) |
GISSSGRYTYYAPAVKG (서열번호 5) |
NAGAGGWHAAYIDA (서열번호 6) |
전형적으로, 면역글로불린은 중쇄 및 경쇄를 가지며 각각의 중쇄 및 경쇄는 불변 영역 및 가변 영역(상기 부위는 도메인으로 또한 알려져 있음)을 포함한다. 경쇄 및 중쇄의 가변 영역은, 상보성 결정 영역 (complementarity-determining region, 이하 "CDR"이라 함)이라 불리우는 3개의 다변가능한 영역 및 4개의 구조 영역(framework region)을 포함한다. 상기 CDR은 주로 항원의 에피토프(epitope)에 결합하는 역할을 한다. 각각의 사슬의 CDR은 전형적으로 N-말단으로부터 시작하여 순차적으로 CDR1, CDR2, CDR3로 불리우고, 또한 특정 CDR이 위치하고 있는 사슬에 의해서 식별된다.
본 발명에서 용어, " CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 "는 CD55에 결합하여 CD55의 생물학적 활성의 억제를 초래할 수 있는 항체를 의미하며, 본 발명에서 "항 CD55 항체"와 혼용되어 사용될 수 있다. 상기 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체는 CD55에 특이적으로 CD55를 저해하는 단일클론항체라면 제한없이 포함한다. 상기 단일클론항체의 형태는 상기에서 설명한 바와 같이 전체 항체 및 항체 단편을 모두 포함할 수 있다.
본 발명의 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 7의 아미노산 서열로 이루어진 경쇄 가변영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열로 이루어진 중쇄 가변영역을 포함할 수 있다.
| 4H-1의 경쇄 및 중쇄 가변 영역 아미노산 서열 |
| 경쇄 가변 영역 |
| ALTQPSSVSANLGGTVKITCSGGGGSYGWFQQKSPGSAPVTVIYWNDKRPSNIPSRFSGSKSGSTATLTITGVQAEDEAVYYCGGWDSSTYAIFGAGTTLTVL (서열번호 7) |
| 중쇄 가변 영역 |
| AVTLDESGGGLQTPGGALSLVCKASGFSFSDRGMAWVRQAPGKGLEWVAGISSSGRYTYYAPAVKGRATISRDNGQSTVRMQLNNLRAEDTGTYYCAKNAGAGGWHAAYIDAWGHGTEVIVSS(서열번호 8) |
자연발생적인 항체 구조 단위는 통상 사합체(tetramer)를 포함한다. 상기 사합체는 각각 통상적으로 2개의 동일한 폴리펩티드 쇄의 쌍으로 구성되며, 각 쌍은 1개의 전장 경쇄(통상 분자량이 약 15kDa임) 및 1개의 전장 중쇄(통상 분자량이 약 50 내지 70kDa임)를 갖는다. 경쇄 및 중쇄 각각의 아미노-말단 부위는 통상적으로 항원 인지에 관여하는 약 100 내지 110 또는 그 이상의 아미노산의 가변 영역을 포함한다. 각 쇄의 카복시-말단 부위는 통상적으로 효과기 기능에 관여하는 불변 영역을 한정한다. 인간 경쇄는 통상적으로 카파(κ) 및 람다(λ) 경쇄로서 분류된다. 중쇄는 통상적으로 뮤, 델타, 감마, 알파 또는 입실론으로서 분류되며, 각각 IgM, IgD, IgG, IgA 및 IgE로서 항체의 이소타입을 정의한다. IgG는, 이로써 제한되는 것은 아니지만, IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4를 포함한 몇 개의 서브클래스를 갖는다. IgM은, 이로써 제한되는 것은 아니지만, IgM1 및 IgM2를 포함한 서브클래스를 갖는다. IgA는 유사하게, 이로써 제한되는 것은 아니지만, IgA1 및 IgA2를 포함한 서브클래스로 세분된다. 전장 경쇄 및 중쇄 내에서, 통상적으로 가변 및 불변 영역은 약 12개 이상 아미노산의 "J" 영역에 의해 결합되고, 중쇄는 또한 약 10개 이상 아미노산의 "D" 영역을 포함한다. 각각의 경쇄/중쇄 쌍의 가변 영역은 통상 항원-결합 부위를 형성한다. 본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 본 발명의 단일클론항체의 중쇄는 IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA 또는 IgM 이소타입일 수 있고, 경쇄는 카파쇄 또는 람다쇄일 수 있으며, 바람직하게는 카파 경쇄 및 IgG1 중쇄일 수 있다.
본 발명의 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편에 있어서, "이의 항원 결합 단편"은 항원 결합 기능을 보유하고 있는 단편을 의미하며, Fab, F (ab'), F (ab')2 및 Fv 또는 단쇄 항체 분자 분자 등을 포함한다. 항체 결합 단편 중, Fab는 경쇄 및 중쇄의 가변 영역과 경쇄의 불변 영역 및 중쇄의 첫 번째 불변 영역 (CH1)을 가지는 구조로 1개의 항원결합부위를 가진다. F (ab')는 중쇄 CH1 도메인의 C-말단에 하나 이상의 시스테인 잔기를 포함하는 힌지 영역 (hinge region)을 가진다는 점에서 Fab와 차이가 있다. F (ab')2 는 Fab'의 힌지 영역의 시스테인 잔기가 디설파이드 결합을 이루면서 생성된다. Fv는 중쇄 가변 부위 및 경쇄 가변 부위만을 가지고 있는 최소의 항체조각을 말한다. 이러한 항체 단편은 단백질 가수분해 효소를 이용해서 얻을 수 있고, 예를 들어, 전체 항체를 파파인으로 제한 절단하면 Fab를 얻을 수 있고 펩신으로 절단하면 F (ab')2 단편을 얻을 수 있으며, 바람직하게는 유전자 재조합 기술을 통하여 제작할 수 있다.
본 발명의 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편을 코딩하는 핵산 분자는 서열번호 7의 중쇄를 암호화하는 뉴클레오티드 서열 및 서열번호 8의 경쇄를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산 분자일 수 있다.
본 발명에서 용어 "핵산 분자"는 DNA(gDNA 및 cDNA) 그리고 RNA 분자를 포괄적으로 포함하는 의미를 가지며, 핵산 분자에서 기본 구성단위인 뉴클레오타이드는 자연의 뉴클레오타이드뿐만 아니라, 당 또는 염기 부위가 변형된 유사체(analogue)도 포함한다. 본 발명의 중쇄 및 경쇄 가변영역을 코딩하는 핵산 분자의 서열은 변형될 수 있다. 상기 변형은 뉴클레오타이드의 추가, 결실, 또는 비보존적 치환 또는 보존적 치환을 포함한다.
본 발명의 핵산 분자는 상기한 뉴클레오타이드 서열에 대하여 실질적인 동일성을 나타내는 뉴클레오타이드 서열도 포함하는 것으로 해석된다. 상기의 실질적인 동일성은, 상기한 본 발명의 뉴클레오타이드 서열과 임의의 다른 서열을 최대한 대응되도록 정렬(align)하고, 당업계에서 통상적으로 이용되는 알고리즘을 이용하여 정렬된 서열을 분석한 경우에, 최소 80%의 상동성, 일 특정예에서는 최소 90%의 상동성, 다른 특정예에서는 최소 95%의 상동성을 나타내는 뉴클레오타이드 서열을 의미한다.
본 발명의 킬레이터는 3가 금속과 결합이 가능한 킬레이터일 수 있다.
본 발명에서 용어 "킬레이터"는 방사성 동위원소와의 착체를 형성하는 분자를 말하며, 이때 상기 착체는 생리학적 조건하에서 안정한 것이다. 보다 구체적으로, 상기 킬레이터는 방사성 동위원소와 합성되어 생리학적으로 안정하고 스페이서와 접합을 위해 적어도 하나 이상의 반응성 관능기를 가지는 분자일 수 있다. 또한, 킬레이터는 스페이서와 결합하기 위해 금속 킬레이터와 스페이서 사이에 단일 아미노산을 포함할 수 있다.
상기 킬레이터는 DTPA계 킬레이터, NOTA계 킬레이터, DOTA계 킬레이터, DFO계 킬레이터 NODAGA계 킬레이터, N2S2계 킬레이터, TETA계 킬레이터 및 HYNIC계 킬레이터로 이루어진 그룹에서 선택되는 어느 1종 이상일 수 있고, 가장 바람직하게는 DTPA-계일 수 있다.
본 발명의 킬레이터는 3가 금속과 결합이 가능한 킬레이터일 수 있고, 킬레이터는 NOTA(1,4,7-triazacyclononane-1,4,7-triacetic acid), DOTA(1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid), DFO(3-[6,17-dihyroxy-7,10,18,21-tetraoxo-27-[N-acetylhydroxylamino)-6,11,17,22-tetraazaheptaeicosane]thiourea),DTPA(diethylenetriaminepentaacetic acid), N2S2 (diaminedithiol), p-SCN-Bn-NOTA(2-(4'-isothiocyanatobenzyl)-1,4,7-triazacyclononane-1,4,7-triacetic acid), NODAGA(1,4,7-triazacyclononane,1-glutaric acid-4,7-acetic acid), p-SCN-Bn-DOTA(2-(4'-isothiocyanatobenzyl)-1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid), TETA(1,4,8,11-tetraazacyclotetradecane-1,4,8,11-tetraacetic acid), p-SCN-Bn-DTPA(2-(4-isothiocyanatobenzyl)-diethylenetriaminepentaaceticacid), p-SCN-Bn-DFO(1-(4-Isothiocyanatophenyl)-3-[6,17-dihyroxy-7,10,18,21-tetraoxo-27-[Nacetylhydroxylamino)-6,11,17,22-tetraazaheptaeicosane]thiourea),p-SCN-Bn-CHX-A''-DTPA([(R)-2-Amino-3-(4-isothiocyanatophenyl)propyl]-trans-(S,S)-cyclohexane-1,2-diamine-pentaacetic acid) 및 HYNIC (hyrazinonicotinic acid)로 이루어진 그룹에서 선택되는 어느 1종 이상 일 수 있다. 바람직하게는 상기 3가 금속에 대한 금속 킬레이터가 DTPA-계 킬레이터 및 이의 유사체일 수 있다. 가장 바람직하게는 DTPA-계 킬레이터는 p-SCN-Bn-CHX-A''-DTPA(macrocyclics)일 수 있다.
상기 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편과 킬레이터의 몰비는 5:1 내지 500:1일 수 있고, 바람직하게는 25:1 내지 250:1일 수 있고, 가장 바람직하게는 50:1일 수 있다.
상기 동위원소는 177Lu, 64Cu, 67Ga, 68Ga, 111In, 105Rh, 176Yb, 169Gd, 177Lu, 111Ag, 125I, 129I 및 166Ho으로 이루어진 그룹에서 선택되는 어느 하나 이상 것일 수 있으며, 가장 바람직하게는 177Lu 일 수 있다.
본 발명의 방사성 동위원소와, 상기 R1-R2에 대한 상기 방사성 동위원소의 비율은 상기 R1-R2 1mg당 1 내지 100mCi일 수 있고, 바람직하게는 1 내지 50mCi일 수 있고, 가장 바람직하게는 20 mCi일 수 있다.
본 발명의 또 다른 일실시예에 있어서, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 암 진단 키트를 제공할 수 있다. 상기 암은 흑색종, 림프종, 폐, 갑상선, 유방, 대장, 전립선, 두경부, 위, 간장, 방광, 신장, 자궁경부, 췌장, 백혈병, 골수, 난소, 자궁, 육종, 담관 및 자궁내막 세포 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 어느 1종 이상일 수 있고, 가장 바람직하게는 폐암일 수 있다.
본 발명에서 용어, "진단"은 병리 상태의 존재 또는 특징을 확인하는 것을 의미한다. 본 발명의 목적상, 진단은 암 발명 여부를 확인하는 것이다. 특히, CD55 단백질은 암 진단 마커로서 그 중 폐암, 나아가 비소세포폐암 및 전이폐암세포에서, 정상 조직에 비해 폐암 조직에서 높게 나타난다.
본 발명의 키트에 포함되는, CD55에 대한 항체는 바람직하게는 적합한 담체 또는 지지체에 문헌에 개시된 바와 같은 다양한 방법을 이용하여 고정될 수 있으며, 적합한 담체 또는 지지체의 예로는 PBS, 폴리스틸렌, 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 폴리에스테르, 폴리아크릴로니트릴, 불소 수지, 아가로스, 셀룰로즈, 니트로셀룰로즈, 덱스트란, 세파덱스, 세파로즈, 리포솜, 카복시메틸 셀룰로즈, 폴리아크릴아미드, 폴리스테린, 반려암, 여과지, 이온교환수지, 플라스틱 필름, 플라스틱 튜브, 폴리아민-메틸 비닐-에테르-말레산 공중합체, 아미노산 공중합체, 에틸렌-말레산 공중합체, 나일론, 금속, 유리, 글래스 비드, 또는 자성 입자 등이 포함된다. 그 외의 다른 고체 기질로는 세포 배양 플레이트, ELISA 플레이트, 튜브 및 폴리머성 막이 있다. 상기 지지체는 임의의 가능한 형태, 예를 들어 구형 (비드), 원통형 (시험관 또는 웰 내면), 평면형 (시트, 시험 스트립)을 가질 수 있다.
검출 가능한 신호를 생성할 수 있는 표지는 항원-항체 복합체의 형성을 정성 또는 정량적으로 측정가능하게 하며, 이의 예로는 효소, 형광물질, 리간드, 발광물질, 미소입자 (microparticle), 레독스 분자 및 방사성 동위원소 등을 사용할 수 있다. 효소로는 β-글루쿠로니다제, β-D-글루코시다제, 우레아제, 퍼옥시다아제 (호스라디시 퍼옥시다제 등), 알칼라인 포스파타아제, 아세틸콜린에스테라아제, 글리코즈 옥시다아제, 헥소키나제, 말레이트 디하이드로게나아제, 글루코스-6-인산디하이드로게나아제, 인버타아제 등을 사용할 수 있다. 형광물질로는 플루오레신, 이소티오시아네이트, 로다민, 피코에리테린, 피코시아닌, 알로피코시아닌, 플루오르신이소티옥시아네이트 등을 사용할 수 있다. 리간드로는 바이오틴 유도체 등이 있으며, 발광물질로는 아크리디늄 에스테르, 루시페린, 루시퍼라아제 등이 있다. 미소입자로는 콜로이드 금, 착색된 라텍스 등이 있고 레독스 분자로는 페로센, 루테늄 착화합물, 바이올로젠, 퀴논, Ti 이온, Cs 이온, 디이미드, 1,4-벤조퀴논, 하이드로퀴논 등이 있다. 방사성 동위원소로는 3H, 14C, 32P, 35S, 36Cl, 51Cr, 57Co, 58Co, 59Fe, 90Y, 125I, 131I, 186Re 등이 있다. 그러나 상기 예시된 것들 외에 면역학적 분석법에 사용할 수 있은 것이라면 어느 것이라도 사용할 수 있다.
본 발명의 또 다른 일시예에 있어서, 본 발명의 암에 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법은 다음의 단계로 수행될 수 있다.
(a) 제1항의 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 암이 의심되는 개체로부터 분리된 생물학적 시료에 접촉시키는 단계;
(b) 항원-항체 복합체 형성을 통해 상기 생물학적 시료에서 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편된 CD55 단백질의 발현 수준을 측정하는 단계; 및
(c) 상기 (b) 단계에서 측정된 CD55 단백질의 발현 수준을 대조군과 비교하여 대조군에 비해 상기 단백질의 발현 수준이 높으면 암 환자로 판정하는 단계. 상기 암은 흑색종, 림프종, 폐, 갑상선, 유방, 대장, 전립선, 두경부, 위, 간장, 방광, 신장, 자궁경부, 췌장, 백혈병, 골수, 난소, 자궁, 육종, 담관 및 자궁내막 세포 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있고, 가장 바람직하게는 폐암일 수 있다.
상기 본 발명에서, 용어 "분리된 생물학적 시료"란, 암 마커인 CD55 단백질의 발현 수준이 차이 나는 조직(암 조직), 암 세포, 전혈, 혈장, 혈청, 혈액, 타액, 활액, 뇨, 객담, 림프액, 뇌척수액, 조직 부검 시료(뇌, 피부, 림프절, 척수 등), 세포 배양 상등액, 또는 파열된 진핵세포 등을 포함하며, 암의 원발 병소 뿐 아니라 전이 병소에서 유래한 시료를 포함한다. 이들 생물학적 시료를 조작하거나 조작하지 않은 상태로 본 발명의 방사성동윈원소가 표지된 단일클론항체와 반응시켜 CD55 단백질의 발현 수준을 확인할 수 있다.
본 발명에서 용어 "개체"는 소, 돼지, 양, 닭, 개, 인간 등을 포함하는 포유 동물, 조류 등을 포함하며, 암이 의심되는 개체는 제한없이 포함된다.
본 발명의 또 다른 일실시예에 있어서, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공할 수 있다. 상기 암은 흑색종, 림프종, 폐, 갑상선, 유방, 대장, 전립선, 두경부, 위, 간장, 방광, 신장, 자궁경부, 췌장, 백혈병, 골수, 난소, 자궁, 육종, 담관 및 자궁내막 세포 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있고, 가장 바람직하게는 폐암일 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 세포 사멸 유도 또는 암세포의 전이 증식을 억제하는 효과를 가지는 항체인 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명에서 용어, "예방"이란 상기 조성물의 투여에 의해 암의 발병을 억제하거나 지연시키는 모든 행위를 의미하며, "치료"란 조성물의 투여에 의해 암의 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
상기 약학적 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명에서 용어, "약학적으로 허용가능한 담체"란 생물체를 자극하지 않고 투여 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 담체 또는 희석제를 말한다. 액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용되는 약학적 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다.
상기 약학적 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테로 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
상기 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 다른 항암제와 같이 사용되는 것을 특징으로 할 수 있다.
상기 다른 항암제는 아바스틴(Avastin), 얼비툭스(Erbitux), 옵디보(Opdivo), 시스플라틴(cisplatin), 허셉틴(Herceptin), 맙테라(Mabthera) 및 리툭산(Rituxan)으로 이루어진 그룹에서 선택되는 어느 1종 이상 일 수 있고, 가장 바람직하게는 시스플라틴 일 수 있다.
방사성동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공할 수 있다. 상기 암은 흑색종, 림프종, 폐, 갑상선, 유방, 대장, 전립선, 두경부, 위, 간장, 방광, 신장, 자궁경부, 췌장, 백혈병, 골수, 난소, 자궁, 육종, 담관 및 자궁내막 세포 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있고, 가장 바람직하게는 폐암일 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예는, 전술한 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제조하는 방법을 제공할 수 있다.
상기 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편과 킬레이터를 결합하여 결합물을 생성하는 단계에서 상기 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편과 킬레이터의 몰비는 5:1 내지 500:1인 일 수 있으며, 바람직하게는 25:1 내지 250:1일 수 있으며, 가장 바람직하게는 50:1일 수 있다. 또한 상기 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편과 킬레이터를 결합하여 결합물을 생성하는 단계에서 pH는 sodium bicarbonate buffer를 이용하여 pH 5.0 내지 pH 11.5일 수 있으며, 바람직하게는 pH 6.5 내지 pH 9.0일 수 있으며, 가장 바람직하게는 pH8.0-pH8.5 일 수 있다. 나아가, 금속 킬레이터와 항체를 넣고 반응하는 온도는 27℃ 내지 47℃, 바람직하게는 32℃ 내지 42℃일 수 있으며, 가장 바람직하게는 37℃에서 일수 있다. 금속 킬레이터와 항체가 반응하는 시간은 1시간 내지 5시간일 수 있고, 가장 바람직하게는 3시간 일 수 있다. 상기 결합물을 DTPA-anti CD55 Ab일 수 있다.
상기 결합물을 방사선동위원소와 결합하는 단계에서 상기 결합물과 방사선동위원소의 비율은 결합물 1mg당 20 mCi일 수 있다. 결합물을 방사선동위원소와 결합하는 단계에서 pH는 0.1 M ammonium acetate buffer를 이용하여 pH2.0 내지 pH9.0일 수 있고, 바람직하게는 pH3.5 내지 pH7.5일 수 있고, 가장 바람직하게는 pH5.0 내지 pH6.0일 수 있다. 금속 킬레이터-Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF) 표적항체와 방사성 동위원소를 넣고 반응하는 온도는 상온일 수 있다. 금속 킬레이터-Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF) 표적항체와 방사성 동위원소를 넣고 반응하는 시간은 1분 내지 60분일 수 있고, 바람직하게는 1분 내지 30분일 수 있고, 가장 바람직하게는 10분일 수 있다.
상기 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 및 이의 항원 결합 단편은 1시간 내지 100시간 동안 절식 후 섭취할 수 있으며, 바람직하게는 12 내지 60시간 일 수 있으며, 가장 바람직하게는 24 시간 내지 48시간일 수 있다.
실시예 1. 폐암 조직 및 폐암 세포에서 CD55 발현 확인
40명의 폐암 환자와 10명의 일반 환자의 조직을 면역화학염색을 하여 정량화한 결과이다. 면역화학염색 분석은 SuperBioChips 연구소에 의해 제공되는 서비스를 이용하여 수행하였다. 1:200으로 희석한 항-CD55 폴리클로날 안티바디(AP14798A; Abgent)를 면역화학염색 분석에 사용하였다. 다양한 폐암 환자로부터의 조직 어레이 슬라이스는 면역염색하고, 디지털 설비에 의해 촬영하였다. 면역화학염색의 맹검 및 정량은 병리학자에 의해 수행되었다. 도 1a과 같이, CD55는 다양한 폐암 조직에서 발현하고, 그러나, 일반 폐 조직에서는 거의 발현하지 않는 것을 확인했다. 나아가, 폐암의 종류는 크게 비-소세포 폐암(NSCLC), 소세포 폐암 (SCLC)및 전이(metastasis)로 분류된다. 도 1a 보면, CD55의 발현은 비-소세포 폐암에서 특히나 높게 발현된다 (76.47%).
다양한 폐암 환자로부터의 폐암 조직을 상기와 같은 방법으로 면역화학염색을 진행하였다. 도 1b은 순서대로,ⅰ)정상 폐; ⅱ)폐선편평세포암종; ⅲ)폐선암부터 림프절전이암; ⅳ)폐점액표피양 암종; ⅴ)폐편평세포; ⅵ)폐선암; ⅶ)폐대세포암; 및 ⅷ)폐세기관지암이다. 도 1b와 같이 정상 폐와는 다르게 다양한 비-소세포 폐암의 종류에서 CD55의 높은 발현을 확인했다.
폐암 세포에서 CD55의 발현을 보기 위해 웨스턴 블랏(immunoblotting)을 수행하였다. 상기 폐암 세포주는 흉수로부터 H460 (CD55-positive), 세기관지암 H358, 및 소세포폐암의 H69(CD55-negative)을 사용하였다. 또한, 정상 폐 세포로 WI-38를 사용하였다. H460 cells (ATCC HTB-177), H358 (ATCC CRL5807) 및 H69 (ATCC HTB-119) cells은 10% FBS을 넣은 RPMI-1640배지에서 유지하고, WI-38 (ATCC CCL-75) cells은 10% FBS을 넣은 DMEM에서 유지했다. 상기 웨스턴 블랏에 CD55 안티 바디는 Abcam에서, tubulin은 Santa Cruz Biotechnology에서 입수하였다. 그 결과, 비소세포폐암 세포주인, H460에서는 매우 높은 수준으로 H358에서는 다소 높은의 CD55의 발현을 확인했다 (도 2).
실시예 2. Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF) 표적 항체(4-1H) 발현 및 정제
4-1H의 scFv를 포함하는 pComb3x로부터 중쇄 및 경쇄의 가변영역과 불변영역의 절편을 하기 표 3의 프라이머 조합을 이용해서 PCR을 통해 수득하였다.
항체의 가변영역과 불변영역을 하기 표 3의 HC 및 LC 프라이머 조합을 이용하여 PCR로 각각 중쇄와 경쇄를 얻어냈고, pcDNA3.3TM-TOPO®TA 클로닝 키트 및 pOPTIVECTM-TOPO®TA 클로닝 키트(Invitrogen, 미국)를 이용하여 포유류 세포 발현 플라스미드로 옮겼다. 각 벡터(pcDNA3.3TM-TOPO® 벡터와 pOPTIVECTM-TOPO® 벡터) 1ul와 절편을 200 mM NaCl 및 10 mM MgCl2이 포함된 완충액에 총 6ul가 되게 첨가하여 상온에서 5분 동안 반응시켰다. DH 5α 대장균 competent cell에 열충격을 가하여 형질전환하여 콜로니를 얻은 후 대량 배양하여 플라스미드를 얻었다.
상기에서 제조된 플라스미드를 이용하여 HEK293F 세포(Invitrogen, 미국)에 형질감염시킨 후, 7일 동안 배양하여 수득한 항체를 단백질 A 컬럼 (GE, 미국)을 사용하여 정제하였다. 배양액을 컬럼에 로딩하여 배양액 중에 있는 항체(IgG)를 단백질 A와 결합시키고 20mM 구연산 나트륨 버퍼 (pH3.0)로 용출하였다.
| 프라이머 | 서열 | 서열번호 | |
| VH | 정방향 | GCT AGC CGC CAC CAT GGG CTG GTC CTG CAT CAT CCT GTT CCT GGT GGC CAC CGC CAC CGG CGC CGT GAC GTT GGA CGA GTC CGG G | 9 |
| 역방향 | GGG CCC TTG GTG GAG GCG GAG GAG ACG ATG ACT TCG GTC CC | 10 | |
| CH | 정방향 | GCC TCC ACC AAG GGC CCC TC | 11 |
| 역방향 | CGG GAT CCC TTG CCG GCC GT | 12 | |
| HC | 정방향 | GCT AGC CGC CAC CAT GGG | 13 |
| 역방향 | GGA TCC CTT GCC GGC CGT CGC ACT CAC TT | 14 | |
| VL | 정방향 | AAG CTT GCC GCC ACC ATG GGC TGG TCC TGC ATC ATC CTG TTC CTG GTG GCC ACC GCC ACC GGC GCC CTG ACT CAG CCG TCC TCG GTG | 15 |
| 역방향 | GAG GGG GCG GCC ACG GTC CGT AGG ACG GTC AGG GTT GTC CCG GC | 16 | |
| Ck | 정방향 | CGG ACC GTG GCC GCC CCC TC | 17 |
| 역방향 | GCT CTA GAC TAG CAC TCG C | 18 | |
| LC |
정방향 | AAG CTT GCC GCC ACC ATG | 19 |
| 역방향 | TCT AGA CTA GCA CTC GCC | 20 |
실시예 3. Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF) 표적 항체(4-1H)와 폐암 세포주의 결합력 평가
Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF) 표적 항체(4-1H)와 폐암 세포주의 결합력은 유동세포계수법 (FACS)로 수행하였다. 상기 폐암 세포주는 흉수 로부터 대세포폐암의 H460과 소세포폐암의 H69을 사용하였다. 상기 H460 cells (ATCC HTB-177) 및 H69 (ATCC HTB-119) cells은 10% FBS을 넣은 RPMI-1640배지에서 유지했다. 상기 유동세포계수법을 위해, 세포를 Alexa Fluor 647 (A-20186; Molecular Probes)-conjugated anti-CD55 antibody (red histograms) 또는 isotype human control IgG (I4506; Sigma; blue histograms)으로 염색하고, BD FACS Canto II으로 분석하였다. 그 결과, Decay-accelerating factor(CD55 또는 DAF)가 많이 발현되는 H460 세포주에서 매우 높은 수준의 결합력을 보였다 (도 3).
실시예 4. 방사성 동위원소가 표지된 CD55 항체의 생산
[p-SCN-Bn-CHX-A''-DTPA: CD55 표적항체(4-1H)]를 [50: 1]의 몰비로, bicarbonate buffer를 이용하여 pH8.0-pH8.5 조건에서, 37℃에서 3시간 반응시켰다. 상기 반응물을 Amicon Ultracel-50K(millipore)를 이용하여 정제하여 DTPA-anti CD55 Ab를 제조하였다. DTPA-anti CD55 Ab 1 mg 당 방사성 동위원소 Lu-177 10 mCi 비율로, 0.1 M ammonium acetate buffer를 이용하여 pH5.0-pH6.0 조건에서, 상온에서 10분간 반응하여 제조하였다. 반응 결과는 10 Mm sodium citrate buffer를 전개 용매로 하는 TLC-SG로 평가하였으며, 95%이상의 방사화학적 순도를 가지는 방사성 화합물을 제조하여 사용하였다. 또한 제조된 방사성화합물은 생리식염수 또는 37℃ 혈청 내에서 7일간 90% 이상의 방사화학적 순도를 유지하였다 (도 4).
실시예 5. Lindmo assay를 이용한 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 폐암 세포 중 H460에 대한 immunoreactivity 평가.
Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 H460에 대한 immunoreactivity은 Lindmo assay로 수행하였다. 다양한 농도 (0 - 6.0 X 106cells)의 상기 H460 cells (ATCC HTB-177)에 0.074 MBq의 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab 를 넣고, 상온에서 rotation mixer를 이용하여 잘 섞어 주었다. 1시간 뒤, 10% FBS을 넣은 RPMI-1640 배지로 3번 세척 후, Wallac 1470 automated gamma counter (PerkinElmer Life Science) 을 이용하여 샘플에 남아 있는 분당 카운트를 분석하였다. Lindmo assay를 이용하여 immunoreactivity를 평가하였을 때, 78.9 ± 5.4%의 immunoreactivity를 유지하고 있음을 확인하였다 (도 5).
실시예 6. Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 폐암 세포 중 H460에 대한 결합력 평가
Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 폐암 세포 중 H460에 대한 결합력은 saturation binding assay로 수행하였다. 3 X 106 의 상기 H460 cells (ATCC HTB-177)에 다양한 농도 (0 - 25 nmol/L)의 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab 를 넣고, 상온에서 rotation mixer를 이용하여 잘 섞어 주었다. 1시간 뒤, 10% FBS을 넣은 RPMI-1640 배지로 3번 세척 후, Wallac 1470 automated gamma counter (PerkinElmer Life Science) 을 이용하여 샘플에 남아 있는 분당 카운트를 분석하였다. saturation binding assay를 이용하여 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 H460 폐암 세포에 대한 결합력을 평가하였을 때, Kd 값은 7.149 ± 5.144 nmol/L 이었으며 Bmax 값은 30 ± 7.218 fmol/mg 이었다 (도 )6. 이는 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 폐암세포와의 특이적인 바인딩 활성을 보여준다.
실시예 7. Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 여러 종류의 폐암세포의 결합력의 평가
Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 여러 종류의 폐암세포의 결합력은 binding assay로 수행하였다. 상기 폐암 세포주는 흉수로부터 대세포폐암의 H460(CD55high), 세기관지암 H3589(CD55normal), 및 소세포폐암의 H69(CD55low)을 사용하였다. 또한, 일반 폐암 세포로 WI-38(CD55low) 를 사용하였다. 상기 H460 cells (ATCC HTB-177), H358 (ATCC CRL5807) 및 H69 (ATCC HTB-119), 10% FBS을 넣은 RPMI-1640배지에서 유지하고, WI-38 (ATCC CCL-75) cells은 10% FBS을 넣은 DMEM에서 유지했다. 1 X 106 의 상기 H460, H358, H69, WI-38 cells 에 0.074 MBq 의 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab 를 넣은 후, 50배의 unlabeled anti CD55 Ab를 각각 넣거나 넣지 않은 샘플을 상온에서 rotation mixer를 이용하여 잘 섞어 주었다. 1시간 뒤, 10% FBS을 넣은 RPMI-1640 배지로 3번 세척 후, Wallac 1470 automated gamma counter (PerkinElmer Life Science). 을 이용하여 샘플에 남아 있는 분당 카운트를 분석하였다. binding assay를 이용하여 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 여러 종류의 폐암 세포에 대한 결합력을 평가하였을 때, H460 세포에서 가장 높은 수준으로 결합함을 확인하였다 (도 7).
실시예 8. Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 폐암세포의 내재화 및 외재화 속도론의 평가
Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 폐암세포의 내재화 속도론을 다음과 같은 방법으로 수행하였다. 상기 폐암 세포주는 흉수 로부터 대세포폐암의 H460을 사용하였고, 내재화 실험은 6-well plate에 상기 H460 cells (ATCC HTB-177)을 10% FBS을 넣은 RPMI-1640배지에서 배양 후 수행하였다. 25,000 CPM (분당 카운트)의 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab를 해당 well에 넣고 배양하여, 0, 15, 30, 60, 90, 및 120 분 후에 세포로 내재화 된 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab를 Wallac 1470 automated gamma counter (PerkinElmer Life Science) 을 이용하여 분당 카운트를 분석하였다. 상기 결과를 내재화 방사성/ 총 세포를 백분율 (%)로 계산한 것이다. 그 결과 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 폐암세포의 내재화 속도는 30분안에 총 세포 관련 활동성의 약 33.5%인 것으로 나타났다 (도 8a)
Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 폐암 세포의 외재화 속도론을 다음과 같은 방법으로 수행하였다. 외재화 실험은 6-well plate에 상기 H460 cells (ATCC HTB-177)을 10% FBS을 넣은 RPMI-1640배지에서 25,000 CPM (분당 카운트)의 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab를 첨가하고, 2시간 동안 배양 후 수행하였다. 세포 표면에 붙은 방사성은 pH2.5 acetic acid/saline으로 제거하고, 외재화 된 방사성은, 0, 15, 30, 60, 90, 및 120 분 후에 Wallac 1470 automated gamma counter (PerkinElmer Life Science) 을 이용하여 분당 카운트를 분석하였다. 상기 결과를 외재화 방사성/ 총 세포를 백분율 (%)로 계산한 것이다. 그 결과 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 폐암 세포의 외재화 속도는 2시간 뒤에 74.6%인 것으로 나타났다. 이는 내재화 된 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab가 천천히 방출한다는 것을 알 수 있다 (도 8b)
실시예 9. 흉강내 폐암 전이 동물 모델에서의 해부학 결과 및 CD55의 발현 평가
악성 흉수(MPE) 마우스 모델을 유도하기 위해, 1 × 107 H460 cells을 200 ㎕ PBS(phosphate-buffered saline)에 현탁하고, 수컷 balb/c 누드 마우스의 흉강에 주입하고 10일간 배양하였다. 10일 뒤에 전이성 암이 발생하였다. 도 9a 및 9b와 같이, 흉막 전이된 종양은 옆의 폐, 흉벽 또는 뼈에 침투하였으며, 9c와 같이 면역조직화학검사 결과 CD55의 발현이 양성이었다.
실시예 10. 흉강내 폐암전이 동물모델에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 in vivo 체내분포
도 10a은 흉강내 폐암 전이 동물모델에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 in vivo 체내 분포를 표로 정리한 것이고, 도 10b은 그래프로 정리한 도면이다. 악성 흉수(MPE) 마우스 모델을 유도하기 위해, 1 × 107 H460 cells을 200 ㎕ PBS(phosphate-buffered saline)에 현탁하고, 수컷 balb/c 누드 마우스의 흉강에 주입하고 10일간 배양하여, 흉벽 및 흉강 내 폐암이 전이된 동물 모델을 제작하였다. 제작된 동물 모델의 흉강에 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab를 투여하였다. 생체내 분포를 주입 후 1, 6, 24, 72, 120, 및 168시간에 측정하였다. 각 시점에서, 쥐를 희생시키고, 관련 적출 기관, 조직 및 피를 제거하고, 정량하고, Wallac 1470 automated gamma counter (PerkinElmer Life Science) 을 이용하여 샘플에 남아 있는 분당 카운트를 분석하였다. 체내 분포를 평가한 결과는 도 10b와 같다. 종양에 대한 섭취율은 투여 후 1시간째에 15.92 ± 8.75 %ID/g이었으며 7일째에도 8.70 ± 0.20 %ID/g를 유지하여 매우 높은 폐암(흉벽 및 흉강 내 전이된 폐암) 표적 효율을 확인하였다. 도 11에서 보듯이, 마우스에서의 총 잔류 방사능이 서서히 줄어들었다.
실시예 11. 약물 투여 전 절식 시간에 따른 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 종양 섭취율
악성 흉수(MPE) 마우스 모델을 유도하기 위해, 1 × 107 H460 cells을 200 ㎕ PBS(phosphate-buffered saline)에 현탁하고, 수컷 balb/c 누드 마우스의 흉강에 주입하고 10일간 배양하여, 흉벽 및 흉강 내 폐암이 전이된 동물 모델을 제작하였다. 제작된 동물 모델을 0 hr, 12hr 및 24hr 절식 시킨 후, 흉강에 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab를 투여하였다. 그 후 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 종양 섭취율을 보았다. 흥미롭게도, 기아 시 최대 10.47배에 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 흡수가 촉진되었다 (도 12). 이 결과는, 방사성 의약품의 효과가 흡수에 비례한다는 것을 고려해 볼 때, 금식이 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 종양 치사 효과를 강화시킬 수 있을 것 같다.
실시예 12. 흉강내 폐암 전이 동물모델에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 SPECT/CT 영상
악성 흉수(MPE) 마우스 모델을 유도하기 위해, 1 × 107 H460 cells을 200 ㎕ PBS(phosphate-buffered saline)에 현탁하고, 수컷 balb/c 누드 마우스의 흉강에 주입하고 10일간 배양하여, 흉벽 및 흉강 내 폐암이 전이된 동물 모델을 제작하였다. 제작된 동물 모델 흉강에 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab를 투여하였다. 제작된 동물 모델 흉강에 177Lu-anti-CD55 antibody (7.4 MBq)을 직접 주입하고, NanoSPECT/CT system으로 3시간, 24시간 촬영했다. 이미지는 PMOD v3.6 software과 Bioscan in vivo Scope software로 얻었다. 도 13과 같이 흉벽 및 휴강 내에 전이된 폐암 부분을 효과적으로 진단할 수 있었다.
실시예 13. 폐암 세포에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 치료효과
폐암 세포에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 치료효과의 평가는 MTT assay로 수행하였다. 상기 폐암 세포주는 흉수 로부터 대세포폐암의 H460 및 세기관지암 H358을 사용하였고, 상기 H460 cells (ATCC HTB-177)및 H358 (ATCC CRL5807)은 10% FBS을 넣은 RPMI-1640배지에서 유지했다. H460과 H358 3 X 104 개의 암세포를 96-well plate에 분주하고, 0, 5, 10, 50, 100 νg/ml의 다양한 농도의 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab 또는 unlabeled anti CD55 Ab 와 human complement system (Sigma, Cat#: S1764)을 첨가하여, 37 ℃/5% CO2에서 24시간동안 배양하였다. 24시간이 지난 후, plate에 Cell Counting Kit-8 (CCK-8,DOJINDO, Cat#: CK04-11) 용액을 10 νl 첨가하여 1시간정도 어두운 상태에서 37 ℃/5% CO2 incubater에서 반응 시킨 다음, microplate reader에서 450 nm로 흡광도를 측정하여 암세포 사멸 효과를 관찰하였다. MTT assay를 이용하여 세포에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 치료효과를 평가했을 때, 소량의 방사성(0.07 MBq)으 로도 H460 암세포의 사멸을 일으켰다. 또한, 방사능이 표지 되지 않은 CD55 특이 중화 항체 (IgG)는 H358의 생포 생존율에 영향을 미치지 않은 반면에 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab는 H358 세포의 생존을 억제한다 (도 14).
실시예 14. Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 in vivo 폐암(악성 흉수) 치료효과 평가
도 15a은 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 in vivo 폐암(악성 흉수)의 생존률을 보여주는 도면이다. 도 15b은 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 in vivo 폐암(악성 흉수)의 무게 변화를 보여주는 결과이다. H460 폐암 세포를 6주령 누드마우스의 흉강 내에 주입하여 악성 흉수 동물 모델을 제작하였으며, 200 uCi Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab를 흉강 내에 함께 투여함으로써 폐암 세포가 전이된 악성 흉수에 대한 치료효과를 평가하였다. 평가 결과, Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab는 단일클론항체에 비하여 치료효과가 높았으며 대조군과 비교하였을 때 중앙생존기간은 2.1배의 연장 되었다. 또한, 무게도, 대조군과 비교하였을 때 증가하였다.
실시예 15. 편평상피암에서 CD55의 발현의 평가.
도 16은 면역화학염색를 통해 편평상피암에서 CD55를 보여주는 도면이다. 면역화학염색 분석은 SuperBioChips 연구소에 의해 제공되는 서비스를 이용하여 수행하였다. 1:200으로 희석한 항-CD55 폴리클로날 안티바디(AP14798A; Abgent)를 면역화학염색 분석에 사용하였다. 편평상피암 환자로부터의 조직 어레이 슬라이스는 면역염색하고, 디지털 설비에 의해 촬영하였다. 그 결과 편평상피암의 앞 부분에 CD55의 높은 발현을 확인했다 (도 16). 따라서, 폐암세포에 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab을 농도 의존적으로 처리한 결과, 도 17과 같이, 침윤 및 이동이 감소하는 것을 확인하였다.
실시예 16. Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 cisplatin의 in vitro 폐암 병용 치료효과
도 18은 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 cisplatin의 in vitro 폐암 병용 치료효과를 보여주는 도면이다. 폐암 세포에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 cisplatin의 치료효과는 MTT assay로 수행하였다. 상기 폐암 세포주는 흉수 로부터 대세포폐암의 H460 및 세기관지암 H358을 사용하였고, 상기 H460 cells (ATCC HTB-177)및 H358 (ATCC CRL5807)은 10% FBS을 넣은 RPMI-1640배지에서 유지했다. H460과 H358 3 X 104 개의 암세포를 96-well plate에 분주하고, 0.37 MBq의 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab 또는 3 νM cisplatin 과 human complement system (Sigma, Cat#: S1764)을 첨가하여, 37 ℃/5% CO2에서 24시간동안 배양하였다. 24시간이 지난 후, plate에 Cell Counting Kit-8 (CCK-8,DOJINDO, Cat#: CK04-11) 용액을 10 νl 첨가하여 1시간정도 어두운 상태에서 37 ℃/5% CO2 incubater에서 반응 시킨 다음, microplate reader에서 450 nm로 흡광도를 측정하여 암세포 사멸 효과를 관찰하였다. MTT assay를 이용하여 세포에서 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 cisplastin의 폐암 병용 치료효과를 평가했을 때, cisplatin에 비하여 Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab의 폐암 치료효과는 유사하거나 높았으며, 병용 투여 시 치료효과는 월등하게 상승하였다.
실시예 17.Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 cisplatin의 in vivo 폐암 병용 치료효과
도 19은 15Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 cisplatin의 in vivo 폐암의 생존률을 보여주는 도면이다. H460 폐암 세포를 6주령 누드마우스의 흉강 내에 주입하여 악성 흉수 동물 모델을 제작하였으며, 200 uCi Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab와 cisplatin를 흉강 내에 함께 투여함으로써 폐암 세포가 전이된 악성 흉수에 대한 치료효과를 평가하였다. 평가 결과, Lu-177-DTPA-anti CD55 Ab과 cisplatin을 함께 투여할 시 생존율이 32% 증가하였다.
<110> Korea Atomic Research Institute
<120> Radiolabeled anti-CD55 antibody for the diagnosis and therapy of
cancer and use thereof
<130> 1061295
<160> 20
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR1 of a light chain variable region of 4-1H
<400> 1
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Tyr Gly
1 5
<210> 2
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR2 of a light chain variable region of 4-1H
<400> 2
Trp Asn Asp Lys Arg Pro Ser
1 5
<210> 3
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR3 of a light chain variable region of 4-1H
<400> 3
Gly Gly Trp Asp Ser Ser Thr Tyr Ala Ile
1 5 10
<210> 4
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR1 of a heavy chain variable region of 4-1H
<400> 4
Asp Arg Gly Met Ala
1 5
<210> 5
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR2 of a heavy chain variable region of 4-1H
<400> 5
Gly Ile Ser Ser Ser Gly Arg Tyr Thr Tyr Tyr Ala Pro Ala Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 6
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR3 of a heavy chain variable region of 4-1H
<400> 6
Asn Ala Gly Ala Gly Gly Trp His Ala Ala Tyr Ile Asp Ala
1 5 10
<210> 7
<211> 103
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> a light chain variable region of 4-1H
<400> 7
Ala Leu Thr Gln Pro Ser Ser Val Ser Ala Asn Leu Gly Gly Thr Val
1 5 10 15
Lys Ile Thr Cys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Tyr Gly Trp Phe Gln Gln
20 25 30
Lys Ser Pro Gly Ser Ala Pro Val Thr Val Ile Tyr Trp Asn Asp Lys
35 40 45
Arg Pro Ser Asn Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Ser
50 55 60
Thr Ala Thr Leu Thr Ile Thr Gly Val Gln Ala Glu Asp Glu Ala Val
65 70 75 80
Tyr Tyr Cys Gly Gly Trp Asp Ser Ser Thr Tyr Ala Ile Phe Gly Ala
85 90 95
Gly Thr Thr Leu Thr Val Leu
100
<210> 8
<211> 123
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> a heavy chain variable region of 4-1H
<400> 8
Ala Val Thr Leu Asp Glu Ser Gly Gly Gly Leu Gln Thr Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ala Leu Ser Leu Val Cys Lys Ala Ser Gly Phe Ser Phe Ser Asp Arg
20 25 30
Gly Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Gly Ile Ser Ser Ser Gly Arg Tyr Thr Tyr Tyr Ala Pro Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Ala Thr Ile Ser Arg Asp Asn Gly Gln Ser Thr Val Arg
65 70 75 80
Met Gln Leu Asn Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr Gly Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asn Ala Gly Ala Gly Gly Trp His Ala Ala Tyr Ile Asp Ala
100 105 110
Trp Gly His Gly Thr Glu Val Ile Val Ser Ser
115 120
<210> 9
<211> 85
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Foward primer for the amplification for a heavy chain variable
region
<400> 9
gctagccgcc accatgggct ggtcctgcat catcctgttc ctggtggcca ccgccaccgg 60
cgccgtgacg ttggacgagt ccggg 85
<210> 10
<211> 41
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Reverse primer for the amplification for a heavy chain variable
region
<400> 10
gggcccttgg tggaggcgga ggagacgatg acttcggtcc c 41
<210> 11
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Forward primer for the amplification for a heavy chain constant
region
<400> 11
gcctccacca agggcccctc 20
<210> 12
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Reverse primer for the amplification for a heavy chain constant
region
<400> 12
cgggatccct tgccggccgt 20
<210> 13
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Foward primer for the amplification for a heavy chain variable
region and constant region
<400> 13
gctagccgcc accatggg 18
<210> 14
<211> 29
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Reverse primer for the amplification for a heavy chain variable
region and constant region
<400> 14
ggatcccttg ccggccgtcg cactcactt 29
<210> 15
<211> 87
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Forward primer for the amplification for a light chain variable
region
<400> 15
aagcttgccg ccaccatggg ctggtcctgc atcatcctgt tcctggtggc caccgccacc 60
ggcgccctga ctcagccgtc ctcggtg 87
<210> 16
<211> 44
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Reverse primer for the amplification for a light chain variable
region
<400> 16
gagggggcgg ccacggtccg taggacggtc agggttgtcc cggc 44
<210> 17
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Forward primer for the amplification for a constant region of
kappa light chain
<400> 17
cggaccgtgg ccgccccctc 20
<210> 18
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Reverse primer for the amplification for a constant region of
kappa light chain
<400> 18
gctctagact agcactcgc 19
<210> 19
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Forward primer for the amplification for a light chain variable
region and constant region of kappa
<400> 19
aagcttgccg ccaccatg 18
<210> 20
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Reverse primer for the amplification for a light chain variable
region and constant region of kappa
<400> 20
tctagactag cactcgcc 18
Claims (20)
- 하기 일반식 1을 포함하는, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편:
[일반식 1]
방사성 동위원소-R1-R2
상기 식에서,
R1은 킬레이터이고;
R2는 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편으로, 상기 단일클론항체 또는 이의 항원 결합단편은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 경쇄 CDR1, 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어진 경쇄 CDR2 및 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어진 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변영역, 및 서열번호 4의 아미노산 서열로 이루어진 중쇄 CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 중쇄 CDR2 및 서열번호 6의 아미노산 서열로 이루어진 중쇄 CDR3을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함한다. - 삭제
- 제1항에 있어서, 상기 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 7의 아미노산 서열로 이루어진 경쇄 가변영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열로 이루어진 중쇄 가변영역을 포함하는, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
- 제1항에 있어서, 상기 킬레이터는 3가 금속과 결합이 가능한 킬레이터인, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
- 제1항에 있어서, 상기 킬레이터는 DTPA계 킬레이터, NOTA계 킬레이터, DOTA계 킬레이터, DFO계 킬레이터, NODAGA계 킬레이터, N2S2계 킬레이터, TETA계 킬레이터 및 HYNIC계 킬레이터로 이루어진 그룹에서 선택되는 어느 1종 이상인, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
- 제1항에 있어서, 상기 킬레이터는 NOTA(1,4,7-triazacyclononane-1,4,7-triacetic acid), DOTA(1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid), DFO(3-[6,17-dihyroxy-7,10,18,21-tetraoxo-27-[N-acetylhydroxylamino)-6,11,17,22-tetraazaheptaeicosane]thiourea),DTPA(diethylenetriaminepentaacetic acid), N2S2 (diaminedithiol), p-SCN-Bn-NOTA(2-(4'-isothiocyanatobenzyl)-1,4,7-triazacyclononane-1,4,7-triacetic acid), NODAGA(1,4,7-triazacyclononane,1-glutaric acid-4,7-acetic acid), p-SCN-Bn-DOTA(2-(4'-isothiocyanatobenzyl)-1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid), TETA(1,4,8,11-tetraazacyclotetradecane-1,4,8,11-tetraacetic acid), p-SCN-Bn-DTPA(2-(4-isothiocyanatobenzyl)-diethylenetriaminepentaaceticacid), p-SCN-Bn-DFO(1-(4-Isothiocyanatophenyl)-3-[6,17-dihyroxy-7,10,18,21-tetraoxo-27-[Nacetylhydroxylamino)-6,11,17,22-tetraazaheptaeicosane]thiourea),p-SCN-Bn-CHX-A''-DTPA([(R)-2-Amino-3-(4-isothiocyanatophenyl)propyl]-trans-(S,S)-cyclohexane-1,2-diamine-pentaacetic acid) 및 HYNIC (hyrazinonicotinic acid)로 이루어진 그룹에서 선택되는 어느 1종 이상인, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
- 제1항에 있어서, 상기 CD55에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 또는 이의 항원 결합 단편과 킬레이터의 몰비는 5:1 내지 500:1인, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 및 이의 항원 결합 단편.
- 제1항에 있어서, 상기 동위원소는 177Lu, 64Cu, 67Ga, 68Ga, 111In, 105Rh, 176Yb, 169Gd, 111Ag, 125I, 129I 및 166Ho으로 이루어진 그룹에서 선택되는 어느 1종 이상인, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
- 제1항에 있어서, 상기 R1-R2에 대한 상기 방사성 동위원소의 비율은 상기 R1-R2 1mg당 1 내지 100mCi인, 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 및 이의 항원 결합 단편.
- 제1항, 및 제 3항 내지 제9항 중 어느 한 항의 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 암 진단 키트.
- 제10항에 있어서, 상기 암은 흑색종, 림프종, 폐, 갑상선, 유방, 대장, 전립선, 두경부, 위, 간장, 방광, 신장, 자궁경부, 췌장, 백혈병, 골수, 난소, 자궁, 육종, 담관 및 자궁내막 세포 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 1종 이상인, 암 진단 키트.
- (a) 제1항, 및 제 3항 내지 제9항 중 어느 한 항의 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 암이 의심되는 개체로부터 분리된 생물학적 시료에 접촉시키는 단계;
(b) 항원-항체 복합체 형성을 통해 상기 생물학적 시료에서 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편된 CD55 단백질의 발현 수준을 측정하는 단계; 및
(c) 상기 (b) 단계에서 측정된 CD55 단백질의 발현 수준을 대조군과 비교하여 대조군에 비해 상기 단백질의 발현 수준이 높으면 암 환자로 판정하는 단계;
를 포함하는 암 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법. - 제12항에 있어서, 상기 암은 흑색종, 림프종, 폐, 갑상선, 유방, 대장, 전립선, 두경부, 위, 간장, 방광, 신장, 자궁경부, 췌장, 백혈병, 골수, 난소, 자궁, 육종, 담관 및 자궁내막 세포 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 1종 이상인, 암 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법.
- 제1항, 및 제 3항 내지 제9항 중 어느 한 항의 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 유효성분으로 함유하는, 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제14항에 있어서, 상기 암은 흑색종, 림프종, 폐, 갑상선, 유방, 대장, 전립선, 두경부, 위, 간장, 방광, 신장, 자궁경부, 췌장, 백혈병, 골수, 난소, 자궁, 육종, 담관 및 자궁내막 세포 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 1종 이상인, 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제14항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 세포 사멸 유도 또는 암세포의 전이 증식을 억제하는 효과를 가지는 것을 특징으로, 하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제14항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 다른 항암제와 같이 사용하는 것을 특징으로 하는, 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제17항에 있어서, 상기 다른 항암제는 아바스틴(Avastin), 얼비툭스(Erbitux), 옵디보(Opdivo), 시스플라틴(cisplatin), 허셉틴(Herceptin), 맙테라(Mabthera) 및 리툭산(Rituxan)으로 이루어진 그룹에서 선택되는 어느 1종 이상 인, 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항, 및 제 3항 내지 제9항 중 어느 한 항의 방사성 동위원소가 표지된 CD55 표적 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제 19항에 있어서, 상기 암은 흑색종, 림프종, 폐, 갑상선, 유방, 대장, 전립선, 두경부, 위, 간장, 방광, 신장, 자궁경부, 췌장, 백혈병, 골수, 난소, 자궁, 육종, 담관 및 자궁내막 세포 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 1종 이상인, 암 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020160132643A KR101875912B1 (ko) | 2016-10-13 | 2016-10-13 | 암 표적 치료를 위한 방사성 동위원소가 표지된 cd55 표적 항체 및 이의 용도 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020160132643A KR101875912B1 (ko) | 2016-10-13 | 2016-10-13 | 암 표적 치료를 위한 방사성 동위원소가 표지된 cd55 표적 항체 및 이의 용도 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20180040842A KR20180040842A (ko) | 2018-04-23 |
| KR101875912B1 true KR101875912B1 (ko) | 2018-07-06 |
Family
ID=62088965
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020160132643A KR101875912B1 (ko) | 2016-10-13 | 2016-10-13 | 암 표적 치료를 위한 방사성 동위원소가 표지된 cd55 표적 항체 및 이의 용도 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101875912B1 (ko) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3672627A4 (en) * | 2017-08-22 | 2021-05-12 | Agonox, Inc. | PROCEDURES AND COMPOSITIONS RELATED TO A CD55 BINDER |
| EP4279510A1 (en) * | 2021-01-12 | 2023-11-22 | SG Medical Inc. | Novel antibody to cd55 and uses thereof |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000052054A2 (en) * | 1999-03-01 | 2000-09-08 | Genentech, Inc. | Antibodies for cancer therapy and diagnosis |
-
2016
- 2016-10-13 KR KR1020160132643A patent/KR101875912B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000052054A2 (en) * | 1999-03-01 | 2000-09-08 | Genentech, Inc. | Antibodies for cancer therapy and diagnosis |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Current Radiopharmaceuticals. Vol. 6, N. 2, pp. 57-71 (2013) * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20180040842A (ko) | 2018-04-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2798778C (en) | Anti-human trop-2 antibody having anti-tumor activity in vivo | |
| US10202461B2 (en) | Anti-human TROP-2 antibody having an antitumor activity in vivo | |
| CN1675245B (zh) | 人源化单克隆抗体hPAM4 | |
| CN107667120B (zh) | 抗muc16抗体及其应用 | |
| US7241444B2 (en) | Anti-IGF-IR antibodies and uses thereof | |
| JP5570218B2 (ja) | Ｆｇｆｒ４抗体 | |
| JP2021151263A (ja) | シアリル−Ｌｅｗｉｓ ａに対するヒト抗体をコードする核酸 | |
| US7090844B2 (en) | Use of antibodies against the MUC18 antigen | |
| CN107098970B (zh) | 结合细胞内prl-1多肽或prl-3多肽的抗体 | |
| KR20200027971A (ko) | 항-cd166 항체 및 이의 용도 | |
| JP5749330B2 (ja) | 癌を治療するためのヒト化抗ｃｘｃｒ４抗体 | |
| BRPI0306973B1 (pt) | Anticorpos anti-igf-ir, seu método de produção e seus usos, hibridoma murino, ácido nucléico isolado, vetor, composição, kit ou conjunto, e método diagnóstico in vitro de doenças induzidas por uma superexpressão ou uma subexpressão do receptor igf-ir | |
| JP2010528056A (ja) | がん細胞の細胞殺作用を媒介するヒト化抗ｔｒｏｐ−２抗体とキメラ抗ｔｒｏｐ−２抗体 | |
| JP2005527488A (ja) | Ｍｅｔを発現し、肝細胞増殖因子と結合する腫瘍のモノクローナル抗体画像化および治療 | |
| CN112088169A (zh) | 双特异性结合剂及其用途 | |
| US20080063639A1 (en) | Method for the treatment of psoriasis comprising novel anti-IGF-IR antibodies | |
| US11427648B2 (en) | Anti-CD146 antibodies and uses thereof | |
| KR101875912B1 (ko) | 암 표적 치료를 위한 방사성 동위원소가 표지된 cd55 표적 항체 및 이의 용도 | |
| KR20200103751A (ko) | 센트린-1에 대한 항체, 이의 제조 방법, 및 용도 | |
| KR20090008195A (ko) | 췌장암의 진단제 및 치료제 | |
| TW200936757A (en) | Cancerous disease modifying antibodies | |
| JP2010509244A (ja) | 癌性疾患修飾抗体 | |
| AU2012258386B2 (en) | Anti-alpha v beta 6 antibodies and uses thereof | |
| JP2010509246A (ja) | 癌性疾患修飾抗体 | |
| JP2011528010A (ja) | 癌性疾患修飾抗体 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant |