KR101869971B1 - 천연 추출물 및 천연 광물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 - Google Patents

천연 추출물 및 천연 광물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 닥나무(Broussonetia kazinoki) 추출물 및 비취옥 분말을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.

Description

천연 추출물 및 천연 광물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물{COSMETIC COMPOSITON CONTAINING NATURAL EXTRACTS AND NATURAL MINERAL}
본 발명은 천연 원료를 유효성분으로 함유하는 기능성 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부는 인체의 일차 방어막으로서 체내의 기관들을 온도 및 습도 변화, 자외선, 공해물질 등 외부환경의 자극으로부터 보호해 주며, 체온조절 등의 생체 항상성 유지에 중요한 역할을 한다.
산업이 발달함에 따라 환경 오염이 심각해지고, 피부의 노화 방지, 미백 등에 관한 관심이 고조되고 있다. 특히, 사람의 피부는 끊임없이 변화를 겪게 되는데, 가장 대표적인 변화가 노화에 의한 피부 기능 저하 및 시각적 아름다움의 감소이다. 피부 노화로 인해 야기되는 피부 외관에서의 현상은 주름의 형성, 피부 탄력 저하, 노인성 반점 형성 등이 있으며, 주름의 형성이 가장 대표적인 현상으로 손꼽힌다.
피부의 주요 구성물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등은 산화되어 피부 세포 및 조직이 파괴될 수 있으며, 결국 피부가 노화될 수 있다. 특히 단백질의 산화에 의해 피부의 결합조직인 콜라겐, 히알루론산, 엘라스틴, 프로테오글라이칸, 피브로넥틴 등이 절단되고 과다 염증반응이 나타날 수 있으며, 더욱 심화되는 경우 DNA 변이에 의한 돌연변이, 면역기능의 저하, 암의 유발이 촉진될 수 있다.
따라서, 신체의 대사 과정 중 발생하는 활성산소종이나 자외선 조사, 염증반응에 의해 매개 되는 활성산소종을 소거하여 세포막을 보호하고, 활발한 신진대사를 통해 손상 받은 세포를 재생시켜 피부 건강을 회복시키는 것이 바람직하다.
한편, 멜라닌은 색소 세포 내에 존재하는 타이로시네이즈의 작용에 의해 타이로신으로부터 도파(dopa), 도파퀴논(dopaquinone)으로 변환되어 도파크롬(dopachrome) 등을 거쳐 생성된다. 멜라닌은 자외선 등 피부 유해 요소로부터 신체를 보호하고 체내 호르몬 분비를 조절하는 역할을 한다.
그러나, 멜라닌은 과잉 생산되어 기미, 주근깨의 형성 및 피부노화를 촉진시킬 수 있으며, 피부암의 유발에 관여할 수 있으므로, 멜라닌의 과잉생산을 억제하기 위한 연구개발이 활발하게 이루어지고 있다.
종래에 아스코르빈산(일본특개평 4-9320), 하이드로퀴논(일본특개평 6-192062), 코직산(일본특개소 56-7710), 알부틴(일본특개평 4-93150) 및 식물 추출물 등이 타이로시네이즈 저해 활성을 나타내어 미백 화장료로 이용되었다. 하지만, 상기 성분들은 화장품 제형 중에서 안정성이 미흡하여, 분해되어 착색되거나, 이취를 유발할 수 있으며, 생체 내에서 안전성 또는 효능이 불명확하여 그 사용이 제한되고 있다.
한편, 화장품 업계는 화학물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연물을 사용한 제품을 활발히 개발하고 있다. 그러나, 천연물 유래의 화장료 소재는 친환경적인 특성에도 불구하고, 화장료 조성물 내에서 쉽게 변질되어 기능성이 온전히 구현되지 않거나 천연소재에 대한 국내외 연구가 포화상태에 이르러 신규 소재의 발굴이 쉽지 않은 상황이다.
따라서, 최신 피부 과학 이론에 기반하여 새로운 피부 개선 메커니즘을 규명하고, 이를 이용한 화장품 소재 개발이 활발하게 이루어지고 있다.
본 발명은 전술한 종래 기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로, 본 발명의 목적은 천연 재료를 유효성분으로 포함하여 생체 안전성이 우수하며, 피부 미백 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 일 측면에 따르면, 닥나무(Broussonetia kazinoki) 추출물 및 비취옥 분말을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물이 제공된다.
일 실시예에 있어서, 상기 닥나무 추출물은 탈리그닌 처리된 닥나무 추출물일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 탈리그닌 처리된 닥나무는 상기 1 중량% 이하의 리그닌을 포함할 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 닥나무 추출물은 색소를 제거한 닥나무 추출물일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 비취옥 분말은 경옥 분말 30 내지 70 중량부, 및 연옥 분말 30 내지 70 중량부를 포함할 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 페그마타이트, 일라이트, 견운모, 흑운모, 토르말린, 귀양석, 카오린, 석회석 및 이들 중 2 이상의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 하나의 광물 분말을 더 포함할 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 석유에테르, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 트리클로로메탄, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 1,3-부틸렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 용매로 추출될 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 알코올은 65 내지 75% 농도(v/v)의 에탄올일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 피부 미백용일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 수분크림, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 앰플, 젤, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 스프레이 및 파우더로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화될 수 있다.
본 발명에 따르면, 상기 화장료 조성물은 닥나무 추출물의 유효성분 및 천연 광물의 상승 효과로 인한 피부 개선 효과가 우수하며 특히, 피부 미백 효과가 현저히 우수하다.
본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
본 명세서에서 사용되는 용어는 본 발명에서의 기능을 고려하면서 가능한 현재 널리 사용되는 일반적인 용어들을 선택하였으나, 이는 당 분야에 종사하는 기술자의 의도 또는 판례, 새로운 기술의 출현 등에 따라 달라질 수 있다. 또한, 특정한 경우는 출원인이 임의로 선정한 용어도 있으며, 이 경우 해당되는 발명의 설명 부분에서 상세히 그 의미를 기재할 것이다. 따라서 본 발명에서 사용되는 용어는 단순한 용어의 명칭이 아닌, 그 용어가 가지는 의미와 본 발명의 전반에 걸친 내용을 토대로 정의되어야 한다.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
수치 범위는 상기 범위에 정의된 수치를 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최대의 수치 제한은 낮은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 낮은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최소의 수치 제한은 더 높은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 높은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 수치 제한은 더 좁은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼, 더 넓은 수치 범위 내의 더 좋은 모든 수치 범위를 포함할 것이다.
이하, 본 발명의 실시예를 상세히 기술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 한정되지 아니함은 자명하다.
본 발명의 일 측면에 따르면, 닥나무(Broussonetia kazinoki) 추출물 및 비취옥 분말을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물이 제공된다. 상기 화장료 조성물은 천연 유래의 추출물과 함께 천연 광물 분말을 유효성분으로 포함하여 피부 개선 효과 및 생체 안전성이 우수할 뿐만 아니라 피부 자극이 최소화될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 닥나무에 함유된 다양한 유효성분 및 천연 광물의 상호 작용으로 인해 피부 미백 효과가 우수하며, 상기 닥나무 추출물은 탈리그닌 처리된 닥나무 추출물일 수 있다.
상기 “닥나무”는 뽕나무과에 속하는 쌍떡잎 식물로 닥나무(Broussonetia kazinoki Sieb), 꾸지나무(Broussonetia papyrifera Vent), 애기닥나무(Broussonetia kazinoki var. humilis) 등이 있으며, 낙엽활엽성의 관목으로 한국의 대부분 지역(주로 남부에 많이 분포됨), 중국, 대만, 일본 등에 분포한다. 상기 닥나무는 그 인피섬유가 제지의 원료로 사용되어 오고 있으며 또한 여러 가지 약효를 갖고 있어 강장, 명목(明目)작용, 음위, 수종, 익기, 이뇨 등에 효과가 있고 풍을 제거하며, 피를 맑게 하고 시력감퇴 등에 효능이 있는 것으로 보고된다.
상기 닥나무는 다양한 피부에 유익한 다양한 유효성분을 포함하므로 피부 개선을 위한 용도로 사용 가능하며 피부의 멜라닌의 생성 및 티로시나아제 활성을 억제하는 효과가 우수하다.
상기 닥나무의 껍질을 흑피(黑皮) 또는 조피(粗皮)라고 부르며, 이를 가공하면 백피(白皮)를 얻을 수 있다. 상기 닥나무는 본질적으로 목질계 바이오매스로 분류되며, 이러한 목질계 바이오매스는 정성적으로 셀룰로오스, 헤미셀룰로오스, 및 리그닌을 포함한다.
그러나, 상기 리그닌은 셀룰로오스와 헤미셀룰로오스를 고정화하여 이들의 유효한 가공을 저해하며 각종 불순물을 포함하므로 상기 닥나무 추출물의 피부 미백 효과를 저감시킬 수 있다. 따라서, 상기 리그닌을 제거시킴으로써 상기 닥나무 추출물의 피부 미백 효과를 현저히 개선할 수 있으며, 바람직하게는, 일정 공정을 통해 닥나무 중 리그닌의 함량을 1중량% 이하로 제어할 수 있다.
상기 닥나무 추출물은 색소를 제거한 닥나무 추출물일 수 있다. 상기 닥나무 추출물은 피부에 작용하는 다양한 유효성분을 포함하고 있음에도 불구하고, 일부 불순물과 함께 피부에 함께 적용될 때 피부 미백 효과가 충분히 구현되지 않을 수 있다.
상기 닥나무 추출물에 포함된 색소 성분은 상기 닥나무 추출물의 미백 효과를 상쇄시킬 수 있으므로 최소화하는 것이 바람직하며, 물리적인 여과(filtering) 방법이나, 과산화수소 용액을 처리 등 다양한 방법을 통해 제거할 수 있다.
한편, 상기 비취옥 분말은 경옥 분말 30 내지 70 중량부, 및 연옥 분말 30 내지 70 중량부를 포함할 수 있다.
천연 옥 또는 천연 비취는 경도에 따라 연옥, 경옥으로 구분될 수 있다. 상기 천연 옥 또는 천연 비취는 탈취성이 탁월하고 원적외선을 방사하여 인체의 생리활성을 촉진할 수 있다.
상기 경옥은 단사정계에 속하는 알칼리 휘석(輝石)으로, 굳기는 6.5 내지 7, 비중은 3.2 내지 3.3이다. 일반적으로 결정질 또는 세립상(細粒狀)의 치밀한 집합체를 이룬다. 결정질인 것은 거의 직각으로 교차되는 두 방향으로 쪼개지는 성질을 보이지만, 치밀질(緻密質)의 것은 강하여 잘 깨지지 않는다. 또한, 상기 경옥에 포함된, Si, Al, Mg, Ca 등의 무기질은 생리활성을 촉진하며, 체내 노폐물을 배출시키는 효과가 있다. 또한,
상기 연옥은 미세한 섬유상 결정이 얽혀 치밀질의 경괴를 이룬 투섬석 또는 투녹섬석으로, 굳기는 5.5 내지 6.0이고, 비중은 2.9 내지 3.0이다. 상기 연옥은 경옥에 비해 경도가 현저히 낮다. 다만, 상기 연옥의 화학 성분은 상기 경옥와 유사하므로, 이에 포함된 무기염류는 생리활성을 촉진하며, 체내 노폐물을 배출시킬 수 있다.
상기 비취옥 분말은 상기 닥나무 추출물과 상호 작용하여 피부에 대한 미백 효과가 극대화될 수 있다. 특히, 상기 경옥 및 연옥에 함유된 유효성분은 시너지 효과로 인하여 동시에 적용될 때 피부 미백 효과가 현저히 증대될 수 있다.
상기 경옥 및 연옥 분말의 혼합 비율의 편차가 큰 경우, 각 분말에 함유된 유효성분이 적절히 상호 작용할 수 없으므로 최종 제품의 특성 및 품질을 고려하여 혼합비율을 제어할 수 있다.
한편, 상기 화장료 조성물은 페그마타이트, 일라이트, 견운모, 흑운모, 토르말린, 귀양석, 카오린, 석회석 및 이들 중 2 이상의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 하나의 광물 분말을 더 포함할 수 있다.
상기 페그마타이트는 약 3 cm 이상 크기의 매우 굵은 결정 입자가 엉겨 굳어진 맥상암체(脈狀岩體)를 말하며, 거정석 또는 거정 화강암이라고도 한다. 화강암과 거의 같은 조성을 가지나 특징적으로는 석영, 장석, 운모 등의 주성분 광물이 이상적으로 큰 결정체를 이루고 있다. 상기 페그마타이트는 화장독을 완화하고 기미, 주근깨를 개선할 수 있고, 항산화 효과를 가지므로 피부 노화 및 주름을 방지할 수 있다.
상기 일라이트(illite)는 점토 입자 크기의 미립질 광물로서 일반적인 백운모와 흡사한 판상구조를 갖는 점토광물이다. 화학조성은 백운모에 비하여 K, Al은 적으나 Si, H2O는 약간 더 많은 것으로 알려져 있다. 주성분은 SiO2, Al2O3, K2O, FeO2 등으로 된 황/백색 합성광물이다. 일라이트는 우수한 원적외선 방사율로 세포 재생력을 높이고, 생육을 촉진할 수 있다 구체적으로, 원적외선은 피부를 3~5mm까지 투과하여 세포기능을 활성화할 뿐만 아니라, 혈액순환을 촉진하고, 신진대사를 강화하며 조직의 재생력을 향상시킬 수 있다. 또한, 일라이트에서 발생한 음이온은 상기 원적외선과 함께 혈액순환을 촉진하고 세포기능 활성화할 수 있다.
상기 견운모(Sericite)는 점토광물의 일종으로 칼륨(K2O)를 함유하고 색깔은 은백색으로 견사 광택이 강하게 나타나기 때문에 견운모라고 하며, 분자식은 KH2Al3(SiO4)3이다. 상기 견운모는 원적외선과 음이온을 방출하여 신진대사 촉진, 혈액순환 원활, 독소 배출, 노폐물 정화 기능이 있다.
상기 토르말린은 열을 가하면 먼지를 끌어 들이는 초전기성(Pyroelectricity)을 가진다. 토르말린은 원적외선 및 음이온을 방출하여 혈액순환, 세포활성, 신진대사, 피로회복 등을 완화하고 노화를 방지할 수 있다.
상기 귀양석은 적색과 백색의 2종류가 있으며, 각각의 특징으로는, 백색은 원적외선 방출율이 96%로 광석중에서 가장 높다. 적색은 음이온의 발생량이 최대 24,000개/cc로 토르말린 보다 10배 정도 높다. 예를 들어, 백색 귀양석과 적색 귀양석을 각각 30 내지 70 : 30 내지 70의 중량비로 혼합하여 사용하면, 원적외선 및 음이온 방출량을 최대화하여 생리활성 증진 효과를 극대화할 수 있다.
상기 천연 광물 분말의 평균 입도는, 페그마타이트의 경우 0.01~0.05 mm, 경옥 또는 연옥의 경우 0.005~0.01mm, 일라이트, 견운모 및 흑운모의 경우 0.01~0.05mm일 수 있다.
상기 “추출물”은 용매와 추출 원료를 특정 조건 하에서 접촉시킴으로써 추출 원료에 함유된 유효성분이 전이된 용매를 지칭하는 것으로, 천연물로부터 원료에 함유된 성분을 분리해낸 물질이라면, 추출 방법이나 성분의 종류와 무관하게 모두 포함할 수 있다. 예컨대, 물이나 유기용매를 이용하여 천연물로부터 용매에 용해되는 성분을 추출한 것, 천연물의 특정 성분, 예컨대 오일과 같은 특정 성분만을 추출하여 얻어진 것 등을 모두 포함할 수 있다.
상기 혼합 추출물은 정제수, 탄소수 1 내지 4개의 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 및 1,3-부틸렌글라이콜로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 용매로 추출될 수 있고, 상기 알코올은 65 내지 75% 농도(v/v)의 에탄올일 수 있다.
상기 원료에 포함된 유효성분은 용매의 극성에 따라 추출 비율이 상이해질 수 있으며, 상기 에탄올은 천연 원료의 생리 활성 물질 추출에 있어서 선택성이 뛰어나므로 상기 에탄올 추출에 의해 최적의 피부 개선 효과가 구현될 수 있다.
물과 에탄올은 극성이 상이하여, 각 극성에 따라 추출되는 유효성분이 달라질 수 있으며 최적의 피부 개선 효과가 구현될 수 있도록 상기 에탄올의 농도를 적절히 제어할 수 있다. 상기 에탄올의 농도가 75% 초과이면 적정한 수율이 구현되지 않을 수 있고, 65% 미만이면 피부 개선 효과를 나타내는 유효성분이 충분하게 추출되지 않을 수 있다.
상기 추출물은 추출 원료를 물로 수세한 후 건조 및 분쇄하여, 원료 중량의 8 내지 12배에 달하는 부피의 용매로 약 1시간 내지 24시간 동안 환류 순환 추출, 가압 추출, 초음파 추출 등 통상적인 방법으로 추출 및 여과하여 제조할 수 있다. 또한, 상기 추출물은 감압 증류 또는 동결 건조 등과 같은 추가적인 공정에 의해 분말 상태로 수득할 수 있다.
상기 추출물은 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함할 수 있다. 예컨대, 상기 추출물은 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획물을 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 수분크림, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 앰플, 젤, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 스프레이 및 파우더로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 피부 미백용일 수 있고, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 로션, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징 폼, 클렌징워터, 팩, 스프레이, 및 파우더로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 각각의 제형에 있어서 상기 유효성분 외 제형의 종류 또는 사용 목적 등에 따라 본 발명에 따른 목적을 저해하지 않는 범위 내에서 다른 성분들이 적절히 배합될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 최종 제품의 품질이나 기능에 따라 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉 쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 및 친수성 또는 친유성 활성제와 같은 화장료학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 추가적으로 포함할 수 있다.
다만, 상기 보조제 및 그 혼합 비율은 본 발명에 따른 화장료 조성물의 바람직한 성질에 영향을 미치지 않도록 적절히 선택하는 것이 바람직하다.
이하, 첨부된 도면을 참고하여 본 발명의 실시예에 관하여 상세히 서술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 제한되지 아니함은 자명하다.
제조예 1 : 닥나무 추출물의 제조
닥나무 절편을 수세한 후 상온에서 건조시키고 분쇄하여 조분쇄물 500g을 수득하였다. 상기 각 분쇄물 100g을 10배 부피의 70% 농도(v/v) 에탄올에 침지하여 80℃의 온도에서 12시간 동안 환류 추출하였다.
상기 추출물을 250메쉬 및 0.5㎛ 여과지로 필터링하였으며 잔여 원료에 대해 동일한 방법으로 3회 반복 추출한 후 상온에서 냉각하였다. 상기 추출물은 20℃에서 감압 농축되었으며 동결 건조되어 고형으로 수득되었다.
제조예 2 : 탈리그닌 닥나무 추출물의 제조
제조예 1과 동일한 방법으로 추출물을 제조하되, 추출 공정 전 상기 닥나무 원료에 대한 탈리그닌 공정을 적용하여, 리그닌 함량을 일정 수준 이하로 저감시켰다.
제조예 3 : 색소를 제거한 닥나무 추출물의 제조
제조예 1과 동일한 방법으로 추출물을 제조하되, 제조된 추출물에 대한 색소 제거 공정을 적용하였다.
환류 추출된 닥나무 추출물을 감압증발 농축기를 이용하여 95% 농도로 농축시킨 후, 후로랄 워터 혼합물(주정 50% 및 후로랄 워터 50%)에 투입하여 교반하였다.
후로랄 워터 혼합물을 통해 농축 및 희석을 3회 반복한 후 여과지를 이용하여 색소가 제거된 천연 추출물을 수득하였다. 색소가 제거된 추출물은 20℃에서 감압 농축하였으며 동결 건조하여 고형으로 수득하였다.
실시예 1 : 닥나무 추출물, 및 비취옥 분말
제조예 1에서 고형으로 수득한 닥나무 추출물 5g, 경옥 분말 2.5g, 및 연옥 분말 2.5g을 혼합하여 실시예 1의 시료로 하였다.
실시예 2 : 탈리그닌(3 중량% 이상) 닥나무 추출물, 및 비취옥 분말
제조예 2에서 고형으로 수득한 닥나무 추출물 5g, 경옥 분말 2.5g, 및 연옥 분말 2.5g을 혼합하여 실시예 2의 시료로 하였다. 이 때, 탈리그닌 처리된 닥나무의 리그닌 함량은 3.8 중량%였다.
실시예 3 : 탈리그닌(1 중량% 이하) 닥나무 추출물, 및 비취옥 분말
제조예 2에서 고형으로 수득한 닥나무 추출물 5g, 경옥 분말 2.5g, 및 연옥 분말 2.5g을 혼합하여 실시예 3의 시료로 하였다. 이 때, 탈리그닌 처리된 닥나무의 리그닌 함량은 0.7 중량%였다.
실시예 4 : 색소를 제거한 닥나무 추출물, 및 비취옥 분말
제조예 3에서 고형으로 수득한 닥나무 추출물 5g, 경옥 분말 2.5g, 및 연옥 분말 2.5g을 혼합하여 실시예 4의 시료로 하였다.
실시예 5 : 탈리그닌 처리 및 색소를 제거한 닥나무 추출물, 및 비취옥 분말
제조예 2와 동일한 방법으로 수득한 닥나무 추출물 5g, 경옥 분말 2.5g, 및 연옥 분말 2.5g을 혼합하여 실시예 5의 시료로 하였다. 이 때, 제조예 3과 동일한 방법으로 상기 추출물의 색소를 제거하였다.
비교예 1 : 닥나무 추출물
제조예 1에서 고형으로 수득한 닥나무 추출물 10g을 비교예 1의 시료로 하였다.
비교예 2 : 비취옥 분말
경옥 분말 5g, 및 연옥 분말 5g을 혼합하여 비교예 2의 시료로 하였다.
비교예 3 : 연옥 분말
연옥 분말 10g을 비교예 3의 시료로 하였다.
비교예 4 : 경옥 분말
경옥 분말 10g을 비교예 4의 시료로 하였다.
실험예 1 : 피부 안전성 시험
실시예 및 비교예의 시료에 대한 피부 안전성을 검증하기 위해, 섬유아세포(HDF), 멜라닌형성세포(B16F10), 각질세포(HaCaT)에 대한 MTT assay 실험을 수행하였다.
실시예 및 비교예에서 수득한 시료를 정제수에 농도별(0, 10, 및 50 mg/L)로 각각 현탁한 후, 세포 생존율을 측정하였다.
세포 독성은 MTT{3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2-5-diphenyltetrazolium bromide} 시약을 이용하여 세포 생존율을 측정하는 모스만(Mosmann)의 방법을 변형하여 수행하였다.
섬유아세포(HDF), 멜라닌형성세포(B16F10), 및 각질세포(HaCaT)를 각각 96-웰 플레이트에 1×104 cells/well의 농도로 분주하여 37℃, 5 % CO2 에서 48 시간 동안 배양하였다.
배양 배지를 제거하고 시료를 농도별로 처리한 배지에 48 시간 동안 배양한 후 배지를 제거하고 PBS(Phosphate buffered saline)로 반복 세척하였다.
MTT를 5 mg/mL 로 PBS에 녹여 50 L 첨가하고 37℃, 5 %의 CO2 에서 24 시간 동안 배양하였다. DMSO(Dimethyl sulfoxide)를 한 웰(well) 당 100 L 넣고, 10 분 동안 교반한 후 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
측정 결과, 각 시료의 모든 농도에서 세포 독성은 확인되지 않았다. 상기 결과는 상기 추출물 및 비취 분말이 인체에 무해할 뿐만 아니라 인체 안전성이 우수함을 시사한다.
실험예 2 : 멜라닌 생성량 평가
멜라민 함량 분석(melanin contents assay)를 통해 상기 실시예 및 비교예 의한 멜라닌형성(melanogenesis) 저해능을 평가하였다(Eisinger M et al, 1982; Siegrist W and Eberle AN, 1986).
60 mm culture dish에 B16F10 세포를 1.5x105 cells/well의 농도로 접종한 후 24시간 동안 배양하였다. 멜라닌 형성을 촉진하는 호르몬인 α-MSH(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) 및 상기 추출물을 농도별로 배지에 투입하였다(Virador VM et al, 1999).
48시간 경과 후, 세포를 수확하여 PBS로 1회 세척한 후, 1N NaOH lysis buffer 120 μL를 넣고 95℃에서 10분간 가열하여 세포를 용해하였다. microplate reader를 이용하여 450 nm 파장에서 흡광도를 측정하였으며, 대조군으로 100μg/mL 농도의 알부틴(arbutin)을 사용하였다.
하기 수학식에 따라 멜라닌 생성 억제율을 산출하였으며, 평과 결과는 하기 표 1과 같다.
[수학식]
멜라닌 생성 억제율(%) = 100 x (1 - (각 시험물질의 흡광도 / 대조군의 흡광도))
구분 멜라닌 생성 억제율(%)
실시예 1 0 mg/L 0
10 mg/L 22.6
50 mg/L 31.8
실시예 2 0 mg/L 0
10 mg/L 24.8
50 mg/L 34.2
실시예 3 0 mg/L 0
10 mg/L 26.8
50 mg/L 37.4
실시예 4 0 mg/L 0
10 mg/L 23.9
50 mg/L 33.4
실시예 5 0 mg/L 0
10 mg/L 29.6
50 mg/L 41.2
비교예 1 0 mg/L 0
10 mg/L 9.3
50 mg/L 16.7
비교예 2 0 mg/L 0
10 mg/L 8.7
50 mg/L 13.2
비교예 3 0 mg/L 0
10 mg/L 6.3
50 mg/L 11.4
비교예 4 0 mg/L 0
10 mg/L 7.2
50 mg/L 12.8
양성대조군 29.4
상기 실시예 1 내지 5의 시료는 멜라닌의 생성을 효과적으로 억제하였으며, 미백 효과가 널리 알려진 알부틴과 비교하여 멜라닌 생성을 더욱 높은 수준으로 저해하였다.
특히, 닥나무 추출물이 비취옥 분말과 함께 적용되었을 때 멜라닌 생성 억제 효과가 현저히 증대되었을 뿐만 아니라(실시예 1), 닥나무에 대한 탈리그닌 처리(실시예 2, 3) 및 색소 제거(실시예 4, 5)에 의해 멜라닌 생성 억제 효과는 더욱 개선되었다.
또한, 닥나무의 리그닌은 1 중량% 이하로 제어되었을 때, 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과가 증가하였다.
실험예 3 : 티로시나아제 저해 활성 실험
시험관 내에서 티로시나아제 효소 억제 활성을 측정하여 실시예 및 비교예의 미백 효과를 평가하였다.
시료를 적절한 용매에 현탁하여, 0.1M 인산염완충액(pH 6.5) 220 μL, 시료액 20 μL, 티로시나아제(1500 U/ml 내지 2000 U/ml) 20 μL 를 순차적으로 투입하였다. 1.5 mM 티로시나아제 용액 40 μL 를 넣고 37℃에서 약 15분 동안 반응시켰다.
ELISA reader를 이용하여 490 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 공시료액으로 시료액 대신 0.1M 인산염완충액(pH 6.5)을 사용하였다.
대조군으로 50uM 농도의 코직산(Kojic acid)을 사용하였으며, 하기 수학식에 따라 티로시나아제 저해 활성을 산출하였다. 평과 결과는 하기 표 2와 같다.
[수학식]
티로시나아제 저해 활성(%) = 100 x (1 - (각 시험물질의 흡광도 / 음성대조군의 흡광도))
구분 티로시나아제 저해 활성(%)
실시예 1 0 mg/L 0
10 mg/L 25.7
50 mg/L 41.7
실시예 2 0 mg/L 0
10 mg/L 28.8
50 mg/L 45.4
실시예 3 0 mg/L 0
10 mg/L 30.2
50 mg/L 47.5
실시예 4 0 mg/L 0
10 mg/L 27.3
50 mg/L 43.9
실시예 5 0 mg/L 0
10 mg/L 33.5
50 mg/L 50.5
비교예 1 0 mg/L 0
10 mg/L 8.9
50 mg/L 15.3
비교예 2 0 mg/L 0
10 mg/L 7.6
50 mg/L 12.5
비교예 3 0 mg/L 0
10 mg/L 6.3
50 mg/L 10.6
비교예 4 0 mg/L 0
10 mg/L 6.7
50 mg/L 11.4
양성대조군 31.2
상기 실시예 1 내지 5의 시료는 농도 의존적으로 티로시나아제의 활성을 억제하였으며, 양성 대조군(코직산)과 비교하여 티로시나아제 저해 활성이 더욱 높거나 동등한 수준으로 평가되었다.
특히, 닥나무 추출물이 비취옥 분말과 함께 적용되었을 때 티로시나아제의 활성을 효과적으로 억제하였을 뿐만 아니라(실시예 1), 닥나무에 대한 탈리그닌 처리(실시예 2, 3) 및 색소 제거(실시예 4, 5)에 의해 티로시나아제 저해 활성은 더욱 개선되었다.
또한, 닥나무의 리그닌은 1 중량% 이하로 제어되었을 때, 닥나무 추출물의 티로시나아제 저해 활성이 증가하였다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.
본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (10)

  1. 닥나무(Broussonetia kazinoki) 추출물 및 비취옥 분말을 유효성분으로 포함하고,
    상기 닥나무 추출물은 탈리그닌 처리된 닥나무 추출물인 화장료 조성물.
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서,
    상기 탈리그닌 처리된 닥나무는 1 중량% 이하의 리그닌을 포함하는 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 닥나무 추출물은 색소를 제거한 닥나무 추출물인 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 비취옥 분말은 경옥 분말 30 내지 70 중량부, 및 연옥 분말 30 내지 70 중량부를 포함하는 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 페그마타이트, 일라이트, 견운모, 흑운모, 토르말린, 귀양석, 카오린, 석회석 및 이들 중 2 이상의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 하나의 광물 분말을 더 포함하는 화장료 조성물.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 석유에테르, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 트리클로로메탄, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 1,3-부틸렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 용매로 추출된 화장료 조성물.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 알코올은 65 내지 75% 농도(v/v)의 에탄올인 화장료 조성물.
  9. 제1항에 있어서,
    피부 미백용인 화장료 조성물.
  10. 제1항, 제3항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
    유연화장수, 영양화장수, 수분크림, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 앰플, 젤, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 스프레이 및 파우더로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화된 화장료 조성물.
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