KR101849698B1 - 생체 조직 크기 조절용 조성물 및 상기 조성물을 이용한 생체 조직의 크기 조절 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 생체 조직 크기 조절용 조성물 및 상기 조성물을 이용한 생체 조직의 크기 조절 방법을 제공한다.
본 발명에 따른 생체 조직 크기 조절용 조성물은 현미경 사양 및 연구자의 요구에 따라 생체 조직의 크기를 조절할 수 있어 마운팅 용액으로서 사용하여 손쉽게 상기 생체 조직의 이미지를 수득할 수 있다. 따라서, 다양한 질환의 원인을 규명하고 치료법을 찾아내는데 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 생체 조직 크기 조절용 조성물은 현미경 사양 및 연구자의 요구에 따라 생체 조직의 크기를 조절할 수 있어 마운팅 용액으로서 사용하여 손쉽게 상기 생체 조직의 이미지를 수득할 수 있다. 따라서, 다양한 질환의 원인을 규명하고 치료법을 찾아내는데 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 생체 조직 크기 조절용 조성물 및 상기 조성물을 이용한 생체 조직의 크기 조절 방법에 관한 것이다.
x-ray를 통한 의료 진단 기술은 CT나 MRI와 같은 2 차원 스캐닝 후 3 차원으로 재구성하는 기술에 의하여 입체적으로 관찰, 정교하게 진단할 수 있는 기술로 발전하여 왔다. 광원이 아니라 초음파 등을 활용하는 경우 역시 3 차원적 영상을 구현하는 기술이 진단에 활발하게 이용되고 있다. 그러나, 현재 개발된 기술 대부분은 밀리미터 수준의 상대적으로 마이크로 해상력을 가진 기술들로, 세포 수준에서의 분석이 가능한 마이크로 수준을 3 차원으로 측정하는 기술은 상대적으로 그 발전이 미흡하여, 현재 대부분의 세포 수준 분석은 전통적인 2 차원 기술을 이용하고 있다. 즉, 생검 또는 부검 조직 등 생체조직을 고정액으로 고정한 후, 파라핀 또는 폴리머로 포매한 후 수 마이크로미터 또는 나노미터 두께로 절편을 만들어 빛이나 전자파가 투과할 수 있도록 한 후, 투과 이미지를 광학 또는 전자현미경을 이용하여 취득하는 기술을 사용하여 미세구조를 분석한다.
이러한 미세 이미징 기술을 이용하여 3 차윈 이미지를 획득하기 위해서는 콘포칼 현미경 등을 이용해야 하며, 이 경우 일반적으로 수십 마이크로미터 수준의 두께 정보를 획득할 수 있다. 대략적으로 상기 두께는 광원이 침투할 수 있는 깊이에 의하여 그 한계가 있다. 그러나, 대부분의 생체 조직 내 유의미한 구조물들은 수백 마이크로미터 이상의 크기를 가지고 있으므로, 이와 같은 방법으로는 일부의 정보만을 취득할 수 있다. 따라서, 보다 두꺼운 조직 내 이미지를 획득하기 위해서는 수십 마이크로 두께의 연속적인 절편을 제작하고, 이를 일일이 현미경으로 통하여 이미징 한 후, 다시 재구성하는 일련의 과정을 필요로 한다. 특히 뇌조직의 경우 하나의 뉴런 전체를 이미징한다고 할 때, 경우에 따라서는 하나의 뉴런이 수 ｍ까지도 그 액손(Axon)을 뻗기 때문에, 조직을 자르고 붙이는 일련의 과정을 진행하면서 일어날 수 있는 문제점을 많이 가지고 있다.
한편, 조직 투명화 기술은 조직의 손상없이 조직 내부 구조 및 단백질 분포를 확인할 수 있어 기존의 기술의 관찰 한계를 뛰어넘어 더 깊은 곳까지 조직 구조를 관찰하고 다양한 기관계(system)로부터 통합적인 구조와 분자 정보의 접근을 가능하게 하므로 최근 다양한 방법으로 조직을 투명화하는 기술이 개발되었다. 이러한 기술의 발전과 동시에 투명화된 조직을 현미경에서 보다 선명하게 보기 위해 많은 마운팅 용액이 개발 되고 있다. 그러나, 투명화된 거대 조직에 사용되는 마운팅 용액 중 조직의 크기를 조절할 수 있는 마운팅 용액은 보고된 바 없다. 더 나아가, 현재 상업적으로 사용되고 있는 마운팅 용액의 비용 또한 너무나 고가이다. 예를 들면, Focus Clearing 용액의 경우 소비자가로 5 mL에 세금 포함 500,000 만원에 이른다.
이에, 본 발명자는 생체 조직 투명화 조성물 및 이를 이용한 생체 조직 투명화 방법을 개발하여 고가의 전기 영동 장치와 고가의 용액을 필요로 하지 않고, 뇌, 간, 폐, 신장, 장, 심장, 근육, 혈관 등의 다양한 생체 조직에 손상 없이 적용 가능할 뿐만 아니라, 버블 형성, 변색 및 검은 퇴적물이 나타나지 않고 생체 조직의 투명성이 향상되고, 투명화된 조직 내 항체 염색이 가능한 생체 조직 투명화 조성물을 특허 출원한 바 있다(출원번호: 제10-2017-0051443호).
상기 발명에 이어서, 투명화된 생체 조직을 현미경사양 및 연구자의 요구에 따라 단백질의 손상과 조직의 변성 등 조직의 다른 변화 없이 크기를 변형할 수 있는 마운팅 용액을 개발하여 본 발명을 완성하였다.
이와 관련하여 미국 공개특허 제2016/0377514호는 트리클로로에탄올(trichloroethanol)을 포함하는 마운팅 용액을 개시하고 있다.
본 발명의 목적은 생체 조직 크기 조절용 조성물 및 상기 조성물을 이용한 생체 조직의 크기 조절 방법을 제공하는 데 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은
하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 염 및 알칼리 금속 할로겐화물을 포함하는 생체 조직 크기 조절용 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
상기 화학식 1에서,
R1 및 R2는 독립적으로 C1-10의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고; 및
p, q 및 r은 독립적으로 0 내지 10의 정수이다.
또한, 본 발명은
생체 조직을 상기 조성물과 접촉시켜 크기를 조절하는 단계를 포함하는 생체 조직의 크기 조절 방법을 제공한다.
본 발명에 따른 생체 조직 크기 조절용 조성물은 현미경 사양 및 연구자의 요구에 따라 생체 조직의 크기를 조절할 수 있어 마운팅 용액으로서 사용하여 손쉽게 상기 생체 조직의 이미지를 수득할 수 있다. 따라서, 다양한 질환의 원인을 규명하고 치료법을 찾아내는데 유용하게 사용될 수 있다.
도 1 내지 5는 각각 본 발명의 일 실시예에 따른 투명화된 생체 조직을 제조하기 위한 과정 중 단계 별로 수득한 생체 조직의 사진이고,
도 6의 (a) 및 (b)는 본 발명의 일 실시예에 따른 투명화된 생체 조직을 마운팅 용액을 사용하여 크기를 축소시킨 생체 조직의 사진이고, 도 6의 (c)는 현미경을 통하여 수득한 크기가 축소된 생체 조직의 이미지이다.
도 6의 (a) 및 (b)는 본 발명의 일 실시예에 따른 투명화된 생체 조직을 마운팅 용액을 사용하여 크기를 축소시킨 생체 조직의 사진이고, 도 6의 (c)는 현미경을 통하여 수득한 크기가 축소된 생체 조직의 이미지이다.
본 발명은
하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 염 및 알칼리 금속 할로겐화물을 포함하는 생체 조직 크기 조절용 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
상기 화학식 1에서,
R1 및 R2는 독립적으로 C1-10의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고; 및
p, q 및 r은 독립적으로 0 내지 10의 정수이다.
바람직하게는,
상기 R1 및 R2는 독립적으로 C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고; 및
상기 p, q 및 r은 독립적으로 0 내지 5의 정수이다.
더욱 바람직하게는,
상기 R1 및 R2는 메틸이고; 및
상기 p, q 및 r은 1의 정수이다.
가장 바람직하게는,
상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화학식 2로 표시되는 화합물 또는 이의 수화물이다.
[화학식 2]
이하, 본 발명에 따른 생체 조직 크기 조절용 조성물에 대하여 상세히 설명한다.
본 발명에 따른 생체 조직 크기 조절용 조성물은 각 구성물의 함량 및 농도 등을 조절함으로써 생체 조직의 크기를 조절할 수 있다.
또한, 본 발명에 있어서, 상기 생체 조직 크기 조절용 조성물은 현미경을 통하여 생체 조직을 더욱 손쉽게 관찰하기 위한 것으로서 상기 생체 조직은 투명화된 생체 조직일 수 있다.
이때, 상기 투명화된 생체 조직을 수득하기 위한 생체 조직 투명화용 조성물은 통상적으로 사용되는 조성물을 사용하는 것일 수 있으며, 바람직하게 상기 생체 조직 투명화용 조성물은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함할 수 있다. 이때, 상기 화합물의 농도는 2 내지 55 w/v%(중량/부피%)의 농도로 포함될 수 있으며, 20 내지 50 w/v% 농도가 바람직하다. 이때, 상기 농도를 나타내기 위한 용액으로는 통상의 분야에 사용하는 유사 생체 용액(simulated body fluid)일 수 있으며, 보다 구체적으로는 증류수, PBS(phosphate buffer saline), TBS(tris buffer solution) 등을 사용할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 농도가 2 w/v% 미만으로 포함되는 경우에는 생체 조직의 투명화 속도가 현저히 느려질 수 있고, 55 w/v% 초과로 포함되는 경우에는 상기 화학식 1로 표시되는 CHAPS가 완전히 용해되지 않을 수 있다.
나아가, 상기 생체 조직 투명화용 조성물은 삼투압을 조절하여 생체 조직의 투명화를 빠르게 촉진시키는 역할을 하는 물질을 더 포함할 수 있다. 이때, 상기 생체 조직의 투명화를 빠르게 촉진시키는 물질은 우레아(urea), CHAPSO(3-([3-Cholamidopropyl]dimethylammoni o)-2-hydroxy-1-propanesulfonate), 수크로오스(sucrose), 프룩토오스(fructose), 글리세롤, 다이아트라이조산(Diatrizoic acid), Triton X-100, Tween-20, 2,2'-싸이오디에탄올, 이오헥솔(Iohexol), 클로랄 수화물(Chloral hydrate), 또는 이의 조합을 사용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
이때, 상기 생체 조직의 투명화를 빠르게 촉진시키는 물질은 5 내지 80 w/v%의 농도로 포함될 수 있으며, 5 내지 75 w/v%의 농도로 포함될 수 있으며, 10 내지 70 w/v%의 농도로 포함될 수 있으며, 5 내지 50 w/v% 농도로 포함될 수 있으며, 35 내지 60 w/v% 농도로 포함될 수 있다. 이때, 상기 농도가 5 w/v% 미만인 경우 조직의 투명화 속도가 느려지며 80 w/v% 초과인 경우 결정이 유발되거나 용액에 녹지 않을 수 있다. 하나의 구체적인 일례로, 만약 상기 생체 조직의 투명화를 빠르게 촉진시키는 물질로 우레아(urea)를 사용할 경우, 상기 우레아는 10 내지 70 w/v%의 농도가 포함될 수 있으며, 20 내지 60 w/v% 농도가 보다 바람직하다. 또한, 상기 생체 조직의 투명화를 빠르게 촉진시키는 물질의 농도는 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 바람직한 농도 범위와 적절하게 조절할 수 있다.
이어서, 상기 생체 조직 투명화용 조성물을 통하여 생체 조직이 투명화되면 본 발명에 따른 생체 조직 크기 조절용 조성물을 이용하여 생체 조직의 크기를 조절하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 생체 조직 크기 조절용 조성물은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 염 및 알칼리 금속 할로겐화물을 포함한다.
이때, 상기 조성물은 우레아(urea), CHAPSO(3-([3-Cholamidopropyl]dimethylammoni o)-2-hydroxy-1-propanesulfonate), 수크로오스(sucrose), 프룩토오스(fructose), 글리세롤, 다이아트라이조산(Diatrizoic acid), Triton X-100, Tween-20, 2,2'-싸이오디에탄올, 이오헥솔(Iohexol), 클로랄 수화물(Chloral hydrate), 또는 이의 조합을 더 포함하는 것일 수 있으며, 바람직하게 우레아를 더 포함하는 것일 수 있다.
또한, 상기 생체 조직 크기 조절용 조성물은 유사 생체 용액을 더 포함하며 상기 생체 조직 크기 조절용 조성물 및 유사 생체 용액의 혼합액에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 염의 농도는 30 w/v% 내지 60 w/v%이고, 상기 알칼리 금속 할로겐화물의 농도는 1 w/v% 내지 5 w/v%인 것일 수 있다.
상기 알칼리 금속 할로겐화물은 알칼리 금속과 할로겐 원소가 결합된 모든 형태를 포함하는 것일 수 있으며, 바람직하게 소듐 클로라이드(sodium chloride)일 수 있다.
상술한 바와 같이, 본 발명에 따른 생체 조직 크기 조절용 조성물은 투명화된 조직의 크기를 손상 없이 조절할 수 있고, 뇌, 간, 폐, 신장, 장, 심장, 근육, 혈관 등의 다양한 생체 조직에 손상 없이 적용 가능할 뿐만 아니라, 조직의 부풀어짐, 버블 형성, 변색 및 검은 퇴적물이 나타나지 않고 가격도 저렴하여 생체 조직 크기 조절용 조성물로 유용하게 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은
생체 조직을 상기 생체 조직 크기 조절용 조성물과 접촉시켜 크기를 조절하는 단계를 포함하는 생체 조직의 크기 조절 방법을 제공한다.
이하, 본 발명에 따른 생체 조직의 크기 조절 방법을 구체적으로 설명한다.
본 발명에 따른 생체 조직은 투명화된 조직일 수 있으며, 투명화된 조직의 크기를 조절하는 방법은 투명화된 조직을 상기 조성물과 접촉시켜 크기를 조절하는 단계를 포함한다.
구체적으로, 본 발명에 따른 투명화된 조직의 크기를 조절하는 방법은 투명화된 조직을 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 조성물과 접촉시킴으로써 수행되며, 생체 조직의 물리화학적 특성을 변형하여 크기를 조절함으로써 현미경을 통하여 손쉽게 이미지를 얻을 수 있다.
또한, 본 발명에 있어서 투명화된 생체 조직을 제조하기 위해 생체 조직의 고정화가 필요할 수 있으며, 생체 조직을 고정화하는 방법이라면 특별한 제한 없이 적용하여 고정화할 수 있다.
보다 구체적으로 상기 생체 조직의 고정화는 파라포름알데하이드(paraformaldehyde), 에텔렌글리콜 디글리시딜에테르(ethylene glycol diglycidyl ether), 디프로필렌 글리콜 디글리시딜에테르(dipropylene glycol diglycidyl ether), 1,4-부탄디올 디글리시딜에테르(1,4-butanediol diglycidyl ether), 글리세롤 폴리글리시딜 에테르(glycerol polyglycidyl ether), 글루타르알데하이드(glutaraldehyde), 폴리아크릴아마이드 또는 이들의 조합을 사용하여 통상적인 방법을 통해 수행할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 구체적인 실시예로서 CHAPS와 우레아, 및 알칼리 금속 할로겐화물의 혼합물인 생체 조직 크기 조절용 조성물을 처리하면 조직의 크기를 조절할 수 있다.
상기 농도를 나타내기 위한 용액으로는 통상의 분야에 사용하는 유사 생체 용액(simulated body fluid)일 수 있으나, 증류수, PBS(phosphate buffer saline), TBS(tris buffer solution)가 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 담지의 온도는 10℃ 내지 50℃ 온도 범위에서 수행할 수 있고, 12 내지 48℃ 온도 범위에서 수행할 수 있고, 14 내지 46℃ 범위에서 수행할 수 있고, 16 내지 44℃ 범위에서 수행할 수 있고, 18 내지 42℃ 범위에서 수행할 수 있고, 20 내지 40℃ 범위에서 수행할 수 있고, 24 내지 39℃ 범위에서 수행할 수 있고, 28℃ 내지 38℃에서 수행할 수 있고, 30℃ 내지 37℃에서 수행할 수 있고, 33 내지 34℃에서 수행할 수 있다.
또한, 상기 생체 조직 크기 조절용 조성물에 있어서, 상기 유사 생체 용액을 더 포함할 경우, 상기 생체 조직 크기 조절용 조성물 및 유사 생체 용액의 혼합액에 있어서, 상기 CHAPS의 농도는 30 w/v% 내지 60 w/v%이고, 상기 알칼리 금속 할로겐화물의 농도는 1 w/v% 내지 5 w/v%인 것일 수 있다.
이때, 상기 알칼리 금속 할로겐화물은 알칼리 금속과 할로겐 원소가 결합된 모든 형태를 포함하는 것일 수 있으며, 바람직하게 소듐 클로라이드(sodium chloride)일 수 있다.
본 발명에 따른 생체 조직의 크기 조절 방법은 다양한 척추 동물의 조직(tissue)에 적용할 수 있으며, 특히, 뇌(brain), 혈관(blood vessel), 간(liver), 폐(lung), 신장(kidney), 췌장(pancreas), 장(intestine), 심장(heart) 등에 적용하는 것이 바람직하고, 상기 생체 조직의 전체 부분의 크기를 한번에 조절하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 투명화된 조직은 샘플을 손상시키지 않고 크기를 조절하여 세포와 분자의 3 차원 분포를 이미지화하여 관찰할 수 있으므로, 복잡한 구조를 가지는 다양한 생체 조직에 대하여 하나의 완전한 구조로 수백 마이크로미터 이상의 크기로 관찰 연구를 수행할 수 있으므로 조직 내의 유용한 정보를 수득하여 뇌질환 등의 다양한 질환의 원인을 규명하는데 효과적으로 사용할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기의 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<실험예 1> 투명화된 생체 조직의 크기 변화 확인
본 발명에 따른 조성물이 투명화된 조직의 크기를 변화 시키는지 확인하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다. 단, 본 명세서 내에서 모든 동물 실험 과정은 안전성평가연구소 동물 자원 대학위원회의 지침서(Approval No. RS17003)에 따라 수행하였다.
1. 투명화된 생체 조직의 제조(단계 1)
먼저, 흡입 마취제인 Isoflurane (1cc/min) 을 사용하여 성인 생쥐(8주령)를 마취시키고, 경심 관류로 차가운 1X PBS에 50 mL을 관류시킨 후, 차가운 4% PFA (Paraformaldehyde)를 관류시켰다. 그 다음 기관을 적출하고 4%의 PFA용액에 담근 후 4℃에서 24 시간 동안 인큐베이션 하였다. 이때, 상기 온도 범위는 특별히 제한되는 것은 아니지만 0℃ 내지 10℃ 범위일 수 있다.
다음으로, 상기 샘플을 30% 수크로오스(sucrose)로 0~10℃에서 24 시간 동안 인큐베이션 하였다. 전체적인 뇌의 크기는 후각 망울(olfactory bulb) 부분을 제외하고 가로 1cm 세로 1.3cm 이었으며, 그 결과를 도 1의 (a), (b)에 나타내었다.
상기 샘플의 조직을 투명화 하기 위하여 25% CHAPS w/v%와 50 w/v% Urea, 50 mM 소듐 아자이드(sodium azide)의 혼합용액을 35℃ 에서 150 rpm으로 24 시간 동안 쉐이킹 인큐베이션(shaking incubation) 하였고, 상기 인큐베이션은 상기 시간 미만 또는 초과하여 수행할 수도 있다. 전체적인 뇌의 크기는 후각 망울 부분을 제외하고 가로 1.2cm 세로 1.3cm 이었으며, 그 결과를 도 2의 (a), (b)에 나타내었다.
그 후, 50 mL의 0.01% PBS(phosphate buffer saline)가 함유된 멸균 증류수로 0~10℃ 에서 150 rpm으로 24 시간 동안 3 회 교체하며 인큐베이션 하였다. 전체적인 뇌의 크기는 후각 망울 부분을 제외하고 가로 1.3cm 세로 2cm 이었으며, 그 결과를 도 3의 (a), (b)에 나타내었다.
그 후, 다시 20% CHAPS w/v%와 50 w/v% Urea, 50 mM 소듐 아자이드의 혼합용액을 35℃ 에서 150 rpm으로 24 시간 동안 인큐베이션 하였고, 상기 인큐베이션은 상기 시간 미만 또는 초과하여 수행할 수도 있다. 전체적인 뇌의 크기는 후각 망울 부분을 제외하고 가로 1.2cm 세로 1.3cm 이었으며, 그 결과를 도 4의 (a), (b)에 나타내었다.
그 후, 40% CHAPS w/v%와 40 w/v% Urea의 혼합용액에서 37℃, 220rpm으로 24 시간 동안 인큐베이션 하였고, 상기 인큐베이션은 상기 시간 미만 또는 초과하여 수행할 수도 있다. 전체적인 뇌의 크기는 후각 망울 부분을 제외하고 가로 1.2cm 세로 1.3cm 이었으며, 그 결과를 도 5의 (a), (b)에 나타내었다.
상기 과정을 통하여 CHAPS 농도를 서서히 증가시켜가며 상기 샘플을 투명화 시켰다.
2. 단계 1에서 제조된 샘플의 크기 감소(단계 2)
상기 단계 1에서 제조된 투명화된 샘플을 40% CHAPS w/v%, 40 w/v% Urea, 및 50 mM 소듐 클로라이드(sodium chloride)를 포함하는 혼합용액에서 35℃, 220 rpm으로 24 시간 동안 인큐베이션 하였다. 전체적인 뇌의 크기는 후각 망울 부분을 제외하고 가로 0.8 cm 세로 1 cm 이었으며, 그 결과를 도 6의 (a), (b)에 나타내었다.
상기 결과와 같이, 본 발명에 따른 조성물로 투명화된 조직을 처리 시에 상기 조직의 크기가 감소함을 확인할 수 있었다.
<실험예 2> 크기가 감소된 투명화된 조직의 현미경 이미지 수득
본 발명에 따른 조성물을 이용해 투명화된 조직의 크기 감소에 따라 상기 조직을 현미경에서 관찰하기 용이한 크기로 변형하였으며, 이를 통하여 제조된 크기가 감소된 투명화된 뇌 조직을 거대시료이미징 평면레이저 현미경 Macro laser light-sheet illumination imaging systemconfocal microscope 에서 1X 대물렌즈를 이용하여 마우스 뇌의 Green fluorescent protein(GFP) 신호를 확인하였다(도 6의 (c)).
이를 통하여, 상기 투명화된 조직을 현미경 사이즈에 맞게 크기를 축소하여 원하는 이미지를 용이하게 수득할 수 있음을 확인할 수 있었다.
Claims (9)
- 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 염 및 알칼리 금속 할로겐화물을 포함하는 생체 조직 크기 조절용 조성물로서, 유사 생체 용액 및 우레아(urea) 20 내지 60 w/v% 를 더 포함하고, 현미경 관찰시 마운팅 용액으로 사용되는 것을 특징으로 하는 생체 조직 크기 조절용 조성물:
[화학식 1]
(상기 화학식 1에서,
R1 및 R2는 독립적으로 C1-10의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고; 및
p, q 및 r은 독립적으로 0 내지 10의 정수이다).
- 제1항에 있어서,
R1 및 R2는 독립적으로 C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고; 및
p, q 및 r은 독립적으로 0 내지 5의 정수인 것을 특징으로 하는 생체 조직 크기 조절용 조성물.
- 제1항에 있어서,
R1 및 R2는 메틸이고; 및
p, q 및 r은 1의 정수인 것을 특징으로 하는 생체 조직 크기 조절용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화학식 2로 표시되는 화합물 또는 이의 수화물인 것을 특징으로 하는 생체 조직 크기 조절용 조성물:
[화학식 2]
.
- 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 생체 조직 크기 조절용 조성물 및 유사 생체 용액의 혼합액에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 염의 농도는 30 w/v% 내지 60 w/v%이고, 상기 알칼리 금속 할로겐화물의 농도는 1 w/v% 내지 5 w/v%인 것인, 생체 조직 크기 조절용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 생체 조직은 뇌(brain), 혈관(blood vessel), 간(liver), 폐(lung), 신장(kidney), 췌장(pancreas) 또는 장(intestine)인 것을 특징으로 하는 생체 조직 크기 조절용 조성물.
- 생체 조직을 제1항의 조성물과 접촉시켜 크기를 조절하는 단계를 포함하는 생체 조직의 크기 조절 방법.
- 제8항에 있어서,
상기 생체 조직의 크기 조절 방법은 10℃ 내지 50℃ 온도 범위에서 수행하는 것을 특징으로 하는 생체 조직의 크기 조절 방법.
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