KR101827245B1

KR101827245B1 - 알라린을 주성분으로 하는 요독증 치료제

Info

Publication number: KR101827245B1
Application number: KR1020170179309A
Authority: KR
Inventors: 김종출
Original assignee: (주)제이유타이드
Priority date: 2017-12-26
Filing date: 2017-12-26
Publication date: 2018-02-08
Also published as: WO2019132120A1; JP2021500408A; US11642392B2; JP6991615B2; CN111278452A; KR101827245B9; US20220031804A1; US20200254059A1; CN111278452B

Abstract

본 발명은 갈라닌 유사 펩타이드 (GALP) RNA의 스플라이스 변이체에서 유래하여 갈라닌과 유사한 아미노산 서열을 갖는 알라린(Alarin)의 새로운 용도로서 알라린의 요독증 치료제로서의 용도에 관한 것으로, 상기한 본 발명의 요독증 치료제는 알라린(Alarin)을 주성분으로 포함함을 특징으로 한다.
상기와 같이 구성되는 본 발명의 알라린을 주성분으로 하는 요독증 치료제는 생체내에 존재하고 간단히 합성될 수 있는 펩타이드의 일종인 알라린을 주성분으로 하므로, 간단히 제공될 수 있으면서 우수한 요독증 치료효과를 나타내면서도 빈혈, 신성 골이영양증, 심외막염, 알루미늄 골증, 아밀로이드증, 결정성 관절염, 다발성 낭포신, 설사 등의 부작용이 생기지 않고, 또한 치료에 따른 환자의 사회 생활면에서 질적 저하 및 높은 치료비용의 발생을 야기하지 않아 장기간 사용할 수 있는 우수한 요독증 치료제를 제공하여, 상기한 종래의 요독증 치료에 수반하는 문제점을 해결하는 우수한 작용효과를 제공한다.

Description

알라린을 주성분으로 하는 요독증 치료제{Curing agent for uremia comprising alarin}

본 발명은 알라린을 주성분으로 하는 요독증 치료제에 관한 것으로, 보다 자세하게는 갈라닌 유사 펩타이드 (GALP) RNA의 스플라이스 변이체에서 유래하여 갈라닌과 유사한 아미노산 서열을 갖는 알라린(Alarin)의 새로운 용도로서 알라린의 요독증 치료제로서의 용도에 관한 것이다.

의료기술의 발달에도 불구하고 다수의 질병에 대해서는 아직까지 효과적인 치료방법에 제공되지 못하고 있는데, 이러한 난치 질환으로는 요독증도 그 예가 될 수 있다. 요독증이란 혈액속에 축적된 소변의 유해성분에 의해 야기되는 각종 장기, 조직의 기능발현 이상으로부터 생기는 다채로운 임상증상을 나타내는 증후군을 지칭하는 것으로, 원질환이 무엇일지라도 신장기능의 파탄(破綻)에 의해 소변을 체외로 배출할 수 없게 되면 증상이 발현된다. 요독증의 임상증상은 예를 들면 식욕부진, 악심, 구토, 구취, 구내염, 장염 등의 소화기계 이상, 무욕, 무관심, 기명력 저하, 우울상태, 경면, 혼수 등의 신경계 이상, 빈혈, 적혈구 조혈장애, 고혈압, 허혈성 심질환, 심막염, 심근염 등의 순환기계 이상, 색소침착, 소양감, 피하출혈 등의 피부이상 등 여러 가지가 있으며, 요독증은 혈액 속에 축적되는 요독 물질에 의해 야기된다. 요독 물질은 다양한데, 예를 들면, 메틸구아니딘, 인돌 화합물, 말론디알데히드, 크레아티닌, β-아미노이소낙산, 트랜스케톨라아제 억제물질, 폴리아민, 요소, 페놀류 등 현시점에서도 수십종류 이상이라고 여겨지고 있다. 그러나, 이들 요독물질 중에서 어느 물질이 요독증상의 발증에 본질적으로 관여하고 있는지는 아직 불분명하고, 또한, 요독증이 단독물질로만 생기는 것인지, 이들 복수의 물질에 의한 복합 작용인지도 판명되어 있지 않지만, 후자일 가능성이 크다고 보고되어 있다. 이들 사실은 약품에 의한 요독증 치료의 곤란함을 여실히 나타내고 있다. 그 발증이 무엇이든, 적절한 수단에 의해 요독물질을 체외로 배출하거나 혈중 요독물질의 농도를 내리지 않는 한, 요독증 환자는 죽음에 이르는 치명적인 것이다. 현재까지는, 요독증 치료에서 유효하게 되는 치료법은 신장이식, 투석요법 및 활성탄 제제 요법을 들 수 있는데, 후자 두 개에 공통되는 치료법의 이점은, 물리적 수단에 의해 미지의 물질도 포함해서 복수의 요독물질을 비특이적으로 제거 또는 희석할 수 있는 점이다.

그러나, 활성탄 제제는 내복으로 이용되는데, 활성탄 제제의 작용 메커니즘은 소화기 내에서 생성되는 다종, 다양한 요독물질의 흡착, 체외 배출에 의한다. 따라서, 활성탄 제제 요법은 내복제라고 칭하지만, 투석 요법과 마찬가지로 물리적인 치료 수단으로도 간주할 수 있다. 활성탄 제제는 치료 효과가 한정되어 있는 것 이외에 복용하기 어려움, 변비를 유발하는 경향이 강하다는 등의 문제점이 있어 그다지 만족할 수 있는 치료법이 아니다.

한편, 투석은 가장 유효한 요독증의 치료법으로 되어 있으며, 실제로, 투석 요법으로 요독물질을 체외로 배출하면, 가령 신장기능이 폐절되어 있어도, 요독물질에 의한 환자의 죽음은 피할 수 있다 이점이 있지만, 투석 요법에 의한 합병증이 새로운 문제로 되고 있는데, 예를 들면 장기투석에 의한 합병증으로서 빈혈, 신성 골이영양증, 신장암, 심외막염, 알루미늄 골증, 아밀로이드증, 결정성 관절염, 다발성 낭포신 등이 생긴다. 또한, 투석 시설에 빈번하게 다니는 환자의 사회 생활면에서의 질적 저하 및 높은 치료비용의 발생 등 의료경제상의 문제점도 발생하고 있다는 문제점이 있다.

물리적 방법에 의하지 않고 약물적으로 비단백성 질소를 장관내에 이행시키는 「체내투석」이라고 불리는 방법이 보고되어 있다. 이것은 신부전 모델 래트에 15-케토-16-할로겐-프로스타글란딘 E2 류를 투여하면, 그 「엔테로풀링작용(소화관내에 수분을 저장시키는 작용)」에 의해 혈중의 혈청 크레아티닌 (Cre) 및 혈액요소질소(BUN)가 수분과 함께 장관으로 이행된는 현상이다. 그러나, 엔테로풀링작용은 소화관내에 수분을 저장시키는 작용인 것이므로, 필연적으로 설사를 수반하여 보고자도 이 점에 대해 언급하고 있다. 더욱이 아무리 혈중의 혈청 Cre값이나 BUN값을 저하시키더라도, 설사에 의한 체력소모, 탈수의 위험성을 수반하는 본 치료법을 장기에 걸쳐서 실시하는 것은 만성신부전 환자에게 매우 큰 부담을 주는 것이며, 현실적으로 허용될 수 있는 치료법으로 인정되기 힘들다.

따라서, 상기 문제점을 갖지 않는 요독증 치료방법이나 요독증 치료제의 창출이 요구되고 있는데, 이러한 요구에 부응한 것으로 단지 대한민국 특허공개공보 제1989-0001535호(특허문헌 1)에서 요독증의 치료에 유용한 약학 조성물이라는 명칭으로 "염기성 α-아미노선과 분기쇄 필수아미노산의 α-케토유사체의 몇가지 염의 혼합물을 함유하는 약학조성물에 있어서, 위난용성 또는 위교용성 피복정제의 형태로 제공되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물" 정도를 개시하고 있을 뿐이다.

그러나, 상기한 특허문헌 1에 개시된 발명은 여전히 만족스러운 요독증 치료효과를 제공하기 어렵다는 문제점이 있어, 기타 부작용을 야기하지 않아 장기간 사용할 수 있으면서 요독증 치료효과가 우수한 치료제에 대한 요구는 여전하다.

한편, 갈라닌 유사 펩티드 (GALP) RNA의 스플라이스 변이체(splice variant)에서 유래된 알라린(Alarin)이 생체내에서 생합성되어 존재하고 그리고 유전공학적으로 합성되었는데, 이는 APAHRSSTFPKWVTKTERGRQPLRS의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드이다. 이러한 알라린은 GALP와 5개의 아미노산만 공유하기 때문에 GALP 특이적인 수용체를 활성화시킬 수는 없고, 신경펩타이드는 인간 신경 모세포 종양의 신경절 세포에서 발현되는 것으로 보고되어 잠재적인 종양 마커일 수 있다. 이러한 알라린에 대한 보다 자세한 내용은, 그 내용 전체가 본 발명에 참고로 되는, 국제특허공개번호 WO/2006/094973호(특허문헌 2)를 참고할 수 있다.

상기 특허문헌 2에서는 단지 알라린의 신경성 각막염, 레티놀 질환, 급성 및 만성 염증성 및 자가 면역 질환, 비만 또는 성장 결핍 치료, 창상 치유, 자궁 근종, 자궁 내막증, 식욕 부진 치료제로서의 사용을 제안하고 있을 뿐이다.

따라서, 본 발명자 등은 이 기술 분야에 있어서의 상기한 종래의 문제점을 인식하고 이를 해결하기 위해 예의 연구한 결과, 간단히 제공될 수 있는 펩타이드인 알라린이 시스플라틴(Cisplatin) 유도된 요독증에서 우수한 개선 효과를 발휘하면서도, 인체에 존재하는 펩타이드로서 위장관 장애, 간장애, 신장애, 설사 등과 같이 환자에게 부담을 주는 종래 치료제의 부작용을 야기하지 않아 장기간 사용할 수 있는 치료제로 이용될 수 있다는 점에 착안하여 이들의 요독증 치료제로서 사용될 수 있는 실험결과를 얻어 본 발명을 완성하게 되었다.

특허문헌 1: 대한민국 특허공개공보 제1989-0001535호 특허문헌 2: 국제특허공개번호 WO/2006/094973호

따라서, 본 발명의 목적은 상기와 같은 종래 요독증 치료제에 있어서의 제반 문제점에 대한 배경을 기초로 하여 이들 종래 기술의 문제점을 해결하기 위한 것을 그 주요 목적으로 하는 것으로, 자세하게는 간단히 제공될 수 있는 치료제 물질로서 만족스러운 요독증 치료효과를 제공하면서도, 빈혈, 신성 골이영양증, 심외막염, 알루미늄 골증, 아밀로이드증, 결정성 관절염, 다발성 낭포신, 설사 등의 부작용이 생기지 않고, 또한 치료에 따른 환자의 사회 생활면에서 질적 저하 및 높은 치료비용의 발생을 야기하지 않아 장기간 사용할 수 있는 요독증 치료제를 제공하기 위한 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기한 특성을 갖는 요독증 치료제를 보다 용이하게 제공할 수 있는 방법을 제공하기 위한 것이다.

본 발명은 또한 상기한 명확한 목적 이외에 이러한 목적 및 본 명세서의 전반적인 기술로부터 이 분야의 통상인에 의해 용이하게 도출될 수 있는 다른 목적을 달성함을 그 목적으로 할 수 있다.

본 발명자 등은 상기한 종래의 요독증 치료에 있어서의 문제점을 인식하고 이를 해결하기 위해 예의 연구한 결과, GALP와 5개의 아미노산만 공유하는 것으로 신경펩타이드인 알라린이 시스플라틴(Cisplatin) 유도된 요독증에서 우수한 개선 효과를 나타내는 실험 데이터를 얻었으며, 이로부터 알라린을 주성분으로 한 요독증 치료제를 제공할 수 있음을 밝혀내어 상기한 본 발명의 목적을 달성할 수 있었다.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 요독증 치료제는;

알라린(Alarin)을 주성분으로 포함함을 특징으로 한다.

본 발명의 다른 구성에 따르면, 상기 알라린(Alarin)은 하기 아미노산 서열을 갖는 인간 유래 알라린 트리플루오로아세테이트 염(trifluoroacetate salt)임을 특징으로 한다:

H-Ala-Pro-Ala-His-Arg-Ser-Ser-Thr-Phe-Pro-Lys-Trp-Val-Thr-Lys-Thr-Glu-Arg-Gly-Arg-Gln-Pro-Leu-Arg-Ser-OH-트리플루오로아세테이트 염

본 발명의 또 다른 구성에 따르면, 상기 알라린(Alarin)은 분자량 2894.29로, 다음 분자식을 갖는 것임을 특징으로 한다:

C₁₂₇H₂₀₆N₄₃O₃₈

본 발명의 또 다른 구성에 따르면, 상기 본 발명의 요독증 치료제는 알라린(Alarin) 0.5mg 내지 10mg을 성인 60kg 기준에 투여되도록 제형화된 것임을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 구성에 따르면, 상기 제형은 주사제임을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 구성에 따르면, 상기 제형은 피하근육 주사에 의해 투입되는 것임을 특징으로 한다.

상기와 같이 구성되는 본 발명의 알라린을 주성분으로 하는 요독증 치료제는 생체내에 존재하고 간단히 합성될 수 있는 펩타이드의 일종인 알라린을 주성분으로 하므로, 간단히 제공될 수 있으면서 우수한 요독증 치료효과를 나타내면서도 빈혈, 신성 골이영양증, 심외막염, 알루미늄 골증, 아밀로이드증, 결정성 관절염, 다발성 낭포신, 설사 등의 부작용이 생기지 않고, 또한 치료에 따른 환자의 사회 생활면에서 질적 저하 및 높은 치료비용의 발생을 야기하지 않아 장기간 사용할 수 있는 우수한 요독증 치료제를 제공하여, 상기한 종래의 요독증 치료에 수반하는 문제점을 해결하는 우수한 작용효과를 제공한다.

도 1은 뮤어라인(Murine) 유래의 갈라닌 유사 펩타이드 (GALP)들의 유전자 스플라이스 변이형을 도시한 것이다.
도 2는 뮤어라인, 랫트, 짧은 꼬리 원숭이 및 인간으로부터 본 발명의 바람직한 실시형태에 따른 알라린을 얻어 이들의 아미노산 서열을 비교한 결과를 도시한다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따라 시스플라틴(Cisplatin) 유도 요독증 스프라규-다우리 랫트(Sprague-Dawley rat) 모델에서 대조군과 본 발명의 치료제를 투여한 군에서 혈중 우레아 질소(blood urea nitrogen; BUN)의 농도를 나타내는 그래프이다.
도 4는 본 발명의 실시예에 따라 시스플라틴(Cisplatin) 유도 요독증 스프라규-다우리 랫트(Sprague-Dawley rat) 모델에서 대조군과 본 발명의 치료제를 투여한 군에서 크레아틴(creatinine; CRE)의 농도를 나타내는 그래프이다.
도 5는 본 발명의 실시예에 따라 시스플라틴(Cisplatin) 유도 요독증 스프라규-다우리 랫트(Sprague-Dawley rat) 모델에서 대조군과 본 발명의 치료제를 투여한 군에서 조직병리학적 검사결과를 나타내는 그래프로,, 여기서 1점은 피질과 대뇌 피질 간 접합부 사이에 25% 미만의 관상 괴사가 발생한 것이고, 2점은 25% 내지 50%의 관상 괴사가 발생한 것이고, 3점은 50% 내지 75%의 관상 괴사가 발생한 것이고, 4점은 75% 초과의 관상 괴사가 발생한 것이다.
도 6은 본 발명의 실시예에 따라 시스플라틴(Cisplatin) 유도 요독증 스프라규-다우리 랫트(Sprague-Dawley rat) 모델에서 대조군과 본 발명의 치료제를 투여한 군에서 조직병리학적 검사결과의 현미경 사진이다.

이하, 본 발명을 바람직한 실시형태에 의해 보다 자세하게 설명하지만, 본 발명이 이하의 실시형태에 한정되는 것이 아니며 그 요지의 범위 내에서 여러 가지로 변형하여 실시할 수 있음은 물론이다. 또한, 상세한 설명에서는 잘 알려진 구성 요소, 잘 알려진 동작 및 잘 알려진 기술들은 본 발명이 모호하게 해석되는 것을 피하기 위하여 구체적으로 설명되지 않는다.

본 명세서에서 사용된 용어들은 실시형태를 설명하기 위한 것이며 본 발명을 제한하고자 하는 것은 결코 아니다. 본 명세서에서, 단수형은 문구에서 특별히 언급하지 않은 한 복수형도 포함한다. 또한, '포함(또는, 구비)한다'로 언급된 구성 요소 및 동작은 하나 이상의 다른 구성요소 및 동작의 존재 또는 추가를 배제하지 않는다.

본 발명의 바람직한 실시형태에 따른 요독증 치료제는 알라린(Alarin)을 주성분으로 포함한다.

본 발명의 다른 바람직한 실시형태에 따르면, 본 발명의 요독증 치료제로 사용되는 알라린(Alarin)은 하기 아미노산 서열을 갖는 인간 유래 알라린일 수 있다:

Ala-Pro-Ala-His-Arg-Ser-Ser-Thr-Phe-Pro-Lys-Trp-Val-Thr-Lys-Thr-Glu-Arg-Gly-Arg-Gln-Pro-Leu-Arg-Ser-OH

본 발명의 다른 바람직한 실시형태에 따르면, 본 발명의 요독증 치료제로 사용되는 알라린(Alarin)은 상기 아미노산 서열을 갖는 인간 유래 알라린의 약학적으로 허용되는 염일 수 있다.

상기 약학적으로 허용되는 염은 특정 화합물의 유리 산 및 염기의 생물학적 효 과를 보유하며 생물학적으로 또는 달리 해롭지 않은 염을 의미한다. 본 발명의 화합물은 충분히 산성이거나 충분히 염기성이거나 또는 둘 다인 작용기를 가질 수 있으며, 따라서 임의의 많은 무기 또는 유기 염기, 및 무기 및 유기 산과 반응하여 약학적으로 허용되는 염을 생성할 수 있다. 예시적인 약학적으로 허용되는 염으로는 본 발명의 화합물과 무기 또는 유기산 또는 무기 염기와의 반응에 의해 제조된 염, 예를 들면, 다음을 포함한 염들이 포함된다: 트리플루오로아세테이트, 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 포스페이트, 모노하이드로겐포스페이트, 다이하이드로겐포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 아이소뷰티레이트, 카프로에이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 슈베레이트, 세바케이트, 퓨마레이트, 말리에이트, 뷰타인-1,4-다이올레이트, 헥사인-1,6-다이올레이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 다이니트로벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 설포네이트, 자일렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐뷰티레이트, 시트레이트, 락테이트, γ-하이드록시뷰티레이트, 글라이콜레이트, 타르트레이트, 메테인-설포네이트, 프로페인설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트 및 만델레이트.

본 발명의 다른 바람직한 실시형태에 따르면, 본 발명의 요독증 치료제로 사용되는 알라린(Alarin)은 특히 하기 아미노산 서열을 갖는 인간 유래 알라린 트리플루오로아세테이트 염(trifluoroacetate salt)일 수 있다:

본 발명의 다른 바람직한 실시형태에 따르면, 상기 알라린(Alarin)은 분자량 2894.29로, 다음 분자식을 가진다:

C₁₂₇H₂₀₆N₄₃O₃₈

본 발명의 다른 바람직한 실시형태에 따르면, 상기 알라린(Alarin)은 바람직하기로는 -20 ± 5℃에서 안정하게 보관될 수 있다.

본 발명의 다른 바람직한 실시형태에 따르면, 상기 본 발명의 요독증 치료제는 요독증 치료효과를 제공하기 위해 체중 60kg의 성인을 기준으로 알라린(Alarin) 0.5mg 내지 10mg을 투여할 수 있다. 바람직하기로는, 본 발명의 요독증 치료제는 요독증 치료효과를 제공하기 위해 체중 60kg의 성인을 기준으로 알라린 1.0mg 내지 5.0mg을 투여할 수 있다. 더욱 바람직하기로는, 본 발명의 요독증 치료제는 요독증 치료효과를 제공하기 위해 체중 60kg의 성인을 기준으로 알라린 2.0mg 내지 5.0mg을 투여할 수 있다. 보다 더 바람직하기로는, 본 발명의 요독증 치료제는 요독증 치료효과를 제공하기 위해 체중 60kg의 성인을 기준으로 알라린 3.0mg 내지 5.0mg을 투여할 수 있다. 가장 바람직하기로는, 본 발명의 요독증 치료제는 요독증 치료효과를 제공하기 위해 체중 60kg의 성인을 기준으로 알라린 4.0mg 내지 5.0mg을 투여할 수 있다.

본 발명의 또 다른 바람직한 실시형태에 따르면, 상기 본 발명의 요독증 치료제는 요독증 치료효과를 제공하기 위해 체중 60kg의 성인을 기준으로 알라린(Alarin) 0.5mg 내지 10mg, 바람직하기로는, 1.0mg 내지 5.0mg, 더 바람직하기로는, 2.0mg 내지 5.0mg, 보다 바람직하기로는, 3.0mg 내지 5.0mg, 그리고 가장 바람직하기로는, 4.0mg 내지 5.0mg이 투여되도록 되는 제형으로 제형화될 수 있다.

본 발명의 또 다른 바람직한 실시형태에 따르면, 상기 제형은, 특히 여기에 한정하는 것은 아니지만, 바람직하게는 주사제로 될 수 있다.

본 발명의 또 다른 바람직한 실시형태에 따르면, 상기 제형은, 특히 여기에 한정하는 것은 아니지만, 바람직하게는 피하근육 주사에 의해 투입되는 것일 수 있다.

본 발명의 또 다른 바람직한 실시형태에 따르면, 상기 본 발명의 치료제 제형이 주사제로 되는 경우, 담체 성분으로서 용매, 가용화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.

이하, 본 발명을 바람직한 실시예에 의해 보다 자세하게 설명하지만 본 발명이 이들 실시예에 한정되는 것이 아님은 물론이다.

실시예

시스플라틴(Cisplatin) 유도 요독증은 스프라규-다우리 랫트(Sprague-Dawley rat) 모델에서 시험물질의 투여가 요독증 개선에 미치는 영향을 평가하였다. 여기서, G1는 부형제 투여 정상대조군이고, G2는 부형제 투여 유발 대조군이고, G3은 시험물질을 10μg/1 mL/머리 투여군이고, G4는 시험물질 20μg/1 mL/머리 투여군이다. 여기서 시험물질은 본 발명의 알라린 트리플루오로아세테이트 염(Alarin (human) trifluoroacetate salt)이다. 시스플라틴은 복강투여 (IP)를 하였고, 시험물질의 경우는 정맥투여 (IV)를 하였다.

또한, 시험물질 (G3-G4)의 경우는 시스플라틴 투여 후 8 시간째(Day 0)에 단회투여하였고, 시스플라틴 (G2-G4)의 경우, 시험물질 투여 8 시간 전(Day 0)에 5 mg/10 mL/kg의 용량으로 단회투여하였다.

상기 정맥투여는 동물을 보정틀에 넣어 고정하고, 26 게이지 주사바늘이 장착된 주사기를 이용하여 미정맥을 통해 1 mL/min 이내의 속도로 천천히 주입하였다. 상기 복강투여는 동물을 경배부 피부 고정법으로 고정하고, 26 게이지 주사바늘이 장착된 주사기를 사용하여 복강투여하였다

시험물질 투여일, 유발일 및 부검일 (Day 7)에 체중을 측정하였다. 그 결과, 부검 일에 측정한 모든 시험물질 투여군의 체중 수준은 정상대조군과 유의한 차이를 보이지 않았다.

또한, 시험물질 투여 전, 시스플라틴 투여 전 및 부검일에 모든 생존동물의 경정맥에서 채혈을 실시하여 응고 활성제가 들어 있는 튜브에 주입하고 약 15 분간 실온에 방치하여 응고시킨 후 3,000 rpm으로 10 분간 원심분리하여 얻은 혈청으로 혈액생화학분석기 (7180 Hitachi, Japan)를 이용하여 혈중 우레아 질소 (BUN) 및 크레아틴 (CRE)을 검사하였다. 혈액생화학적 검사결과는 시험물질 고용량 투여군의 경우 유발대조군에 비하여 유의하게 낮은 BUN 및 CRE 수준을 보였다.

마지막으로, 부검일에 동물을 에테르로 흡입마취하고, 동물을 안락사시킨 뒤, 신장을 적출하여 10% 중성완충포르말린 용액에 고정하고, 고정된 조직은 삭정, 탈수, 파라핀 포매 및 헤마톡실린 & 에오신 염색 등의 조직처리 과정을 거쳐 조직병리학적 검사를 위한 검체를 제작한 다음, 광학 현미경(Olympus BX53, Japan)을 이용하여 검경을 실시하였다. 조직병리학적 검사결과는 시험물질 고용량 투여군의 병변 수준은 유발대조군에 비하여 유의하게 낮았다.

따라서, 본 시험조건하에서 시스틴을 투여하여 요독증이 유발된 스프라규-다우리 랫트 모델에서 시험물질을 10μg/1 mL/머리 및 20μg/1 mL/머리의 용량으로 단회 투여하였을 때, 시험물질 투여군에서 부형제 대조군 대비 혈액생화학적 수치가 개선되는 경향이 관찰되었고, 특히, 시험물질 20μg/1 mL/헤드 투여군의 BUN 및 CRE 수준은 부형제대조군 대비 유의한 차이를 나타냈다. 또한, 조직병리학적 검사결과에서 용량상관성 있는 변화경향을 나타내며 병변 수준의 유의한 변화를 나타내었다. 따라서, 본 발명의 알라닌(alarin)은 시스플라틴 유도 요독증 모델에서 요독증의 개선에 효력을 갖는 것으로 판단된다.

상기 본 발명의 상세한 설명에서는 알라린을 주성분으로 사용한 요독증 치료제 용도에 대한 바람직한 실시형태에 대해 기술하였지만, 그 내용은 상기 실시형태에 기술된 내용에만 한정되지 않고, 이하의 특허청구범위에서 청구하는 본 발명의 요지를 벗어남이 없이 당해 발명이 속하는 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 누구든지 다양한 변경 실시가 가능한 범위까지 본 발명의 기술적 정신이 있다고 할 것이다.

(부호의 설명 없음)

Claims

알라린(Alarin)을 주성분으로 포함함을 특징으로 하는 요독증 치료제.
제1항에 있어서, 상기 알라린(Alarin)은 하기 아미노산 서열을 갖는 인간 유래 알라린 트리플루오로아세테이트 염(trifluoroacetate salt)임을 특징으로 하는 요독증 치료제:
H-Ala-Pro-Ala-His-Arg-Ser-Ser-Thr-Phe-Pro-Lys-Trp-Val-Thr-Lys-Thr-Glu-Arg-Gly-Arg-Gln-Pro-Leu-Arg-Ser-OH-트리플루오로아세테이트 염.
제1항에 있어서, 상기 알라린(Alarin)은 분자량 2894.29로, 다음 분자식을 갖는 것임을 특징으로 하는 요독증 치료제:
C₁₂₇H₂₀₆N₄₃O₃₈
제1항에 있어서, 상기 요독증 치료제는 알라린(Alarin) 0.5mg 내지 10mg을 성인 60kg 기준에 투여되도록 제형화된 것임을 특징으로 하는 요독증 치료제.
제4항에 있어서, 상기 제형은 주사제임을 특징으로 하는 요독증 치료제.
제4항에 있어서, 상기 제형은 피하근육 주사에 의해 투입되는 것임을 특징으로 하는 요독증 치료제.