KR101753077B1 - A method for preparing fermented ginseng extract and compositions comprising thereof - Google Patents

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Abstract

본 발명은 인삼의 사포닌 함량이 증가된 발효 인삼 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 균주를 이용하여 발효시킨 인삼추출물을 고압유화기로 처리하고 숙성 및 열처리하는 단계를 포함하는 발효 인삼추출물의 제조방법 및 상기 제조방법에 의해 진세노사이드 Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5, Rh2 및 컴파운드 K의 함량이 증가된 발효 인삼 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, 상기 제조방법으로 진세노사이드 Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5, Rh2 및 컴파운드 K를 고함량으로 함유하는 발효 인삼추출물을 제조할 수 있으며, 본 발명의 제조방법을 통하여, 효소를 정제하는 비용을 절감할 수 있으며, 효소처리, 열처리 후의 사포닌 변화 패턴을 발효홍삼제조에 적용함으로써 다양하고 유효한 사포닌이 증가된 발효홍삼농축액 및 분말제품을 생산할 수 있다.
The present invention relates to a fermented ginseng composition in which the content of ginseng saponins is increased, more specifically, a method for producing a fermented ginseng extract comprising a step of treating a ginseng extract fermented with a strain with a high-pressure emulsifier and aging and heat- Wherein the content of ginsenosides Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5, Rh2 and compound K is increased by the production method.
According to the present invention, a fermented ginseng extract containing a high content of ginsenosides Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5, Rh2 and Compound K can be prepared by the above- , And it is possible to produce fermented red ginseng concentrate and powdered product with various effective saponin increased by applying the saponin change pattern after enzyme treatment and heat treatment to fermented red ginseng production.

Description

발효 인삼추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 조성물 {A method for preparing fermented ginseng extract and compositions comprising thereof}TECHNICAL FIELD The present invention relates to a method for preparing fermented ginseng extract and a composition containing the fermented ginseng extract,

본 발명은 인삼의 사포닌 함량이 증가된 발효 인삼 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 균주를 이용하여 발효시킨 인삼추출물을 고압유화기로 처리하고 숙성 및 열처리하는 단계를 포함하는 발효 인삼추출물의 제조방법 및 상기 제조방법에 의해 진세노사이드 Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5, Rh2 및 컴파운드 K의 함량이 증가된 발효 인삼 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a fermented ginseng composition in which the content of ginseng saponins is increased, more specifically, a method for producing a fermented ginseng extract comprising a step of treating a ginseng extract fermented with a strain with a high-pressure emulsifier and aging and heat- Wherein the content of ginsenosides Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5, Rh2 and compound K is increased by the production method.

인삼은 식물 분류학상 오가피나무과(Aralaiaceae)의 인삼속에 속하는 다년생 숙근초로서 지구상에 약 11종이 알려져 있으며, 과거 수천 년 전부터 우리나라를 비롯하여 중국, 일본 등에서 주로 건강증진을 위한 목적으로 널리 사용하여 왔다. 최근에는 수삼을 증기로 수차례 쪄서 가공하여 인체에 유용한 미량의 진세노사이드를 함유한 홍삼의 효능이 뛰어나다고 알려져 있다. 인삼의 대표적인 유효성분인 사포닌(saponine)은 배당체(ginsennoside)라 불리는 화합물의 일종이다. 인삼을 물과 에탄올로 추출한 인삼추출물의 주요 효능을 나타내는 사포닌은 30 종류 이상의 진세노사이드로 구성된다. 진세노사이드는 홍삼추출물의 주요성분으로 면역력강화, 항염증작용, 항알러지작용, 항암효과, 혈압강하작용, 항콜레스테롤작용, 항혈전작용, 성인병 및 노화에 대한 예방 및 치료효과가 있음이 보고되어 있다.Ginseng is a perennial herbaceous perennial plant belonging to ginseng belonging to the genus Arangaiaceae. It has been widely used for health promotion in Korea, China and Japan for thousands of years. Recently, it has been known that red ginseng, which contains a small amount of ginsenoside useful for the human body, is superior in the efficacy of steam ginseng steamed several times. Saponin, a representative active ingredient of ginseng, is a kind of compound called ginsennoside. Saponin, which is the main effect of ginseng extract extracted with water and ethanol, consists of more than 30 kinds of ginsenosides. Ginsenoside is a major component of red ginseng extract and has been reported to have immunity, anti-inflammatory action, anti-allergic action, anti-cancer effect, hypotensive action, anti-cholesterol action, antithrombotic action, have.

체내에 섭취된 사포닌은 장내에 있는 미생물에 의해 분해되어 체내로 흡수된다 [Panta Med. 62, pp453-457, 1996]. 진세노사이드 Rh1의 경우, 장내 미생물에 의해 진세노사이드 Rh, 컴파운드 K, 프로토파낙사디올(protopanaxadiol)로 순차적으로 전환된다. 인삼의 사포닌을 분해하는 장내 미생물은 사람의 체질에 따라, 식습관에 따라 그 존재의 유무와 보유하고 있는 정도가 다르며, 대사산물로 전환하는데 차이가 있으므로 인삼을 복용 후 효능이 나타나는데에 차이가 나타날 수 있다. 또한 장내 미생물 균총이 사람마다 다르기 때문에 진세노사이드의 전환율과 생체이용율은 다를 수밖에 없다 [J. Pharm. Pharmacol., 50, pp1155-1160, 1998]. 따라서 장내 미생물의 차이로 인한 효능과 흡수율의 차이를 없애기 위해, 미생물을 이용한 인삼추출물의 유산균 발효물을 이용하는 것은 개인차를 극복하고 체내 흡수율을 증대시키는 효과가 있다.Saponins ingested in the body are degraded by microorganisms in the intestine and absorbed into the body [Panta Med. 62, pp 453-457, 1996]. In the case of ginsenoside Rh1, it is sequentially converted to ginsenoside Rh, compound K, and protopanaxadiol by intestinal microorganisms. The intestinal microorganisms that degrade saponin of ginseng differ depending on the constitution of humans according to their eating habits and the degree of their existence and the degree of their presence, and there is a difference in the conversion into metabolites, so that there is a difference in efficacy after taking ginseng have. In addition, since intestinal microflora vary from person to person, the conversion rate and bioavailability of ginsenoside are different [J. Pharm. Pharmacol., 50, pp1155-1160, 1998]. Therefore, in order to eliminate the difference between the efficacy and the absorption rate due to differences in intestinal microorganisms, the use of lactic acid bacteria fermented product of ginseng extract using microorganisms has an effect of overcoming individual differences and increasing the body absorption rate.

이에, 본 발명자들은 상기 종래기술들의 문제점들을 극복하기 위하여 예의 연구 노력한 결과, 3 종류의 균주를 이용하여 발효시킨 인삼추출물을 고압유화기로 처리하고 숙성 및 열처리하는 경우, 여러 종류의 사포닌의 함량이 증가된 발효 인삼추출물을 제조할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
The inventors of the present invention have made intensive efforts to overcome the problems of the prior art. As a result, the present inventors have found that when the ginseng extract fermented using three strains is treated with a high-pressure emulsifier and aged and heat-treated, the content of various saponins increases And the present invention has been completed.

따라서 본 발명의 주된 목적은 균주를 이용하여 인삼추출물을 배양하고, 숙성 및 열처리 단계에 의해 사포닌의 함량이 증가된 발효 인삼추출물의 제조방법을 제공하는데 있다.Accordingly, it is a primary object of the present invention to provide a method for producing a fermented ginseng extract wherein the ginseng extract is cultured using a strain, and the content of saponin is increased by aging and heat treatment.

본 발명의 다른 목적은 상기 제조방법을 이용한 발효 인삼 조성물을 제공하는데 있다.
It is another object of the present invention to provide a fermented ginseng composition using the above production method.

본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 하기의 단계를 포함하는 인삼의 사포닌이 증가된 발효 인삼추출물의 제조방법을 제공한다:According to one aspect of the present invention, the present invention provides a method for producing ginseng extract of fermented ginseng with increased saponin of ginseng comprising the steps of:

a) 인삼으로부터 인삼추출액을 준비하는 단계;a) preparing a ginseng extract from ginseng;

b) 상기 인삼추출액을 각기 다른 3 종류의 균주를 혼합배양하여 발효시키는 단계;b) fermenting the ginseng extract by mixing and culturing three different strains;

c) 고압유화기를 이용하여 상기 발효된 인삼발효물의 미생물 세포를 파괴시키는 단계;c) destroying the microbial cells of the fermented ginseng fermentation product using a high-pressure emulsifier;

d) 상기 c)단계에서 얻은 인삼발효물을 숙성시키는 단계; 및d) aging the ginseng fermentation product obtained in the step c); And

e) 상기 숙성된 인삼발효물을 열처리하는 단계.e) heat treating the aged ginseng fermentation product.

본 발명의 발효 인삼추출물의 제조방법에 있어서, 상기 제조방법은 상기 e) 단계의 열처리된 인삼발효물을 여과, 농축 및 건조하여 분말화하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 한다.In the method for producing the fermented ginseng extract of the present invention, the method further comprises a step of filtering, concentrating and drying the heat-treated ginseng fermentation product obtained in the step (e) and pulverizing.

본 발명의 발효 인삼추출물의 제조방법에 있어서, 상기 균주는 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum), 아스페르길루스 니가(Aspergillus niger) 및 트리코더마 리세이(Tricoderma reesei)인 것을 특징으로 한다.In the method for producing the fermented ginseng extract of the present invention, the strain is selected from the group consisting of Lactobacillus fermentum , Aspergillus, niger and tricoderma reesei .

상기 락토바실러스 퍼멘텀 균주로 인삼추출액을 발효하고, 열처리하면 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc 등이 Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5로 전환된다. 아스페르길루스 니가 배양액 성분 중에는 펙틴나아제 성분이 있으며 상기 효소는 PPD(protopanaxadiol) 계열의 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd, Rk1, Rg3-S 등을 컴파운드 K, 진세노사이드 Rh2로 전환시키며, 트리코더마 리세이 배양액 성분 중에는 셀룰라아제 성분이 있으며 상기 효소는 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc 등을 진세노사이드 Rd로 전환시킨다. 따라서 아스페르길루스 니가 배양액 성분으로 사포닌을 반응시키면 컴파운드 K, 진세노사이드 Rh2의 함량은 증가하나 진세노사이드 Rd, Rk1, Rg3-S등의 함량은 감소하며, 트리코더마 리세이 배양액으로 사포닌을 반응시키면 사포닌 패턴이 Rd까지 반응이 진행되나 그 이후로는 반응이 진행되지 않는다. 그리고 락토바실러스 퍼멘텀 배양의 경우 Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5의 함량은 증가하나, 컴파운드 K, 진세노사이드 Rh2, Rd의 함량은 증대시킬 수 없다. 이에 본 발명자들은 인삼추출액을 상기 3가지 균주를 혼합배양하여 발효시킴으로써 7가지의 유효한 진세노사이드를 고함량으로 함유한 발효 인삼추출물을 제조할 수 있었다.When the ginseng extract is fermented with the lactobacillus fermentum strain and heat-treated, the ginsenosides Rb1, Rb2, Rc, etc. are converted into Rg3-S, Rg3-R, Rk1 and Rg5. Aspergillus niger has a pectin Naase component in the culture solution component, and the enzyme is a compound K, a ginsenoside Rh2, a ginsenoside Rb1, Rb2, Rc3, Rd, Rk1 and Rg3-S of protopanaxadiol . Among the components of the culture medium of Trichoderma reesei, there is a cellulase component, which converts ginsenosides Rb1, Rb2, Rc, etc. to ginsenoside Rd. Therefore, when Aspergillus niger reacts with saponin as a culture medium component, the content of compound K and ginsenoside Rh2 increases but the content of ginsenosides Rd, Rk1, and Rg3-S decreases, and saponin is reacted with the culture medium of Trichoderma reesei , The saponin pattern proceeds to Rd, but the reaction does not proceed thereafter. In the Lactobacillus fermentum culture, the contents of Rg3-S, Rg3-R, Rk1 and Rg5 are increased, but the content of compound K, ginsenoside Rh2 and Rd can not be increased. Therefore, the inventors of the present invention were able to produce a fermented ginseng extract containing 7 effective ginsenosides in a high content by mixing and culturing the above three strains of ginseng extract.

본 발명의 제조방법에 있어서, 상기 인삼추출물의 발효과정은 MRS 배지에서 배양한 락토바실러스 퍼멘텀을 상기 인삼추출물에 접종하여 30 내지 37 ℃에서 3 내지 4일 발효하는 단계; 및 상기 발효액에 맥아즙에서 배양한 아스페르길루스 니가와 PDB(potato dextrose broth)에서 배양한 트리코더마 리세이를 각각 접종하여 각각 25 내지 30 ℃에서 3 내지 4일 배양하는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 한다.In the method of the present invention, the fermentation process of the ginseng extract is performed by inoculating the lactobacillus fermentum cultured in the MRS medium into the ginseng extract and fermenting the mixture at 30 to 37 ° C for 3 to 4 days; And culturing the fermentation broth by inoculating each of Aspergillus niger cultivated with malt juice and Tridentiformis broth cultivated in PDB (potato dextrose broth) at 25 to 30 ° C for 3 to 4 days, respectively .

본 발명의 제조방법에 있어서, 상기 c) 단계의 고압유화기 처리는 상기 인삼추출물을 1,300 내지 1,600 bar, 2 내지 4회 조건으로 고압유화기를 통과시키는 것을 특징으로 한다. 상기 고압유화기의 처리시 인삼의 유효성분의 함량이 증가되었다.In the preparation method of the present invention, the high-pressure emulsifier treatment in step c) is characterized in that the ginseng extract is passed through a high-pressure emulsifier at 1,300 to 1,600 bar and 2 to 4 times. The content of active ingredient of ginseng was increased during the treatment of the high pressure emulsifier.

실제 본 발명의 실시예에서 확인한 바와 같이(표 3 참조), 균주로 발효시킨 인삼발효물을 고압유화기를 통과시킨 후 진세노사이드의 함량이 통과 전에 비해 증가하였다. 이는 고압유화기의 통과로 세포들이 파쇄되면서 아스페르길루스 니가 및 트리코더마 리세이가 분비하는 효소의 활성이 증가되어 진세노사이드의 함량이 증대된 것으로 사료된다.As shown in the examples of the present invention (see Table 3), after the ginseng fermented by the strain was passed through a high-pressure emulsifier, the content of ginsenoside was increased compared with that before the passage. This suggests that as the cells are disrupted by the passage of the high pressure emulsifier, the activity of enzymes secreted by Aspergillus niger and Trichoderma secretis is increased and the content of ginsenoside is increased.

상기 제조방법에 있어서, 상기 d) 단계의 숙성은 30 내지 45 ℃에서 1 내지 2일간 수행하는 것을 특징으로 하며, 상기 e) 단계의 열처리는 110 내지 125 ℃에서 20 내지 40 분간 수행하는 것을 특징으로 한다.In the preparation method, the aging in step d) is carried out at 30 to 45 ° C for 1 to 2 days, and the heat treatment in step e) is performed at 110 to 125 ° C for 20 to 40 minutes do.

본 발명의 실시예에서 고압유화기로 처리한 인삼발효물을 숙성 및 열처리하는 경우 진세노사이드 Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5, Rh2 및 컴파운드 K의 함량이 모두 증가되었다.In the examples of the present invention, the contents of ginsenosides Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5, Rh2 and compound K were all increased when the fermented ginseng treated with the high-pressure emulsifier was aged and heat-treated.

따라서 본 발명의 제조방법으로 제조된 발효 인삼추출물은 기존의 열처리, 산처리, 유산균 배양, 효소처리 방법에 의해 부분적으로 증가되는 진세노사이드 Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rg5, Rk1, Rh2, 컴파운드 K의 함량이 모두 증가된 인삼추출물을 얻을 수 있다.
Therefore, the fermented ginseng extract prepared by the method of the present invention can be applied to the ginsenosides Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rg5, Rk1 and Rh2, which are partially increased by conventional heat treatment, acid treatment, cultivation of lactic acid bacteria, , And the compound K content is increased.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 제조방법으로 제조된 인삼의 사포닌이 증가된 발효 인삼 조성물을 제공한다.According to another aspect of the present invention, there is provided a fermented ginseng composition having increased saponin of ginseng produced by the above method.

본 발명의 상기 발효 인삼 조성물은 진세노사이드 Rd, 진세노사이드 Rg3-S, Rg3-R, 컴파운드 K, 진세노사이드 Rk1, 진세노사이드 Rg5 및 진세노사이드 Rh2의 함량이 발효 전에 비해 증가된 것을 특징으로 한다.
The fermented ginseng composition of the present invention is characterized in that the content of ginsenoside Rd, ginsenoside Rg3-S, Rg3-R, compound K, ginsenoside Rk1, ginsenoside Rg5 and ginsenoside Rh2 is increased compared to before fermentation .

이상 설명한 바와 같이, 본 발명에 따르면 인삼추출액을 균주로 배양하고 고압유화기로 처리한 후 숙성 및 고온고압으로 열처리함으로써 진세노사이드 Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5, Rh2 및 컴파운드 K를 고함량으로 함유하는 발효 인삼추출물을 제조할 수 있다. 본 발명의 제조방법을 통하여, 효소를 정제하는 비용을 절감할 수 있으며, 효소처리, 열처리 후의 사포닌 변화 패턴을 발효홍삼제조에 적용함으로써 다양하고 유효한 사포닌이 증가된 발효홍삼농축액 및 분말제품을 생산할 수 있다.
As described above, according to the present invention, the ginseng extract is cultivated as a strain, treated with a high-pressure emulsifier, and then aged and heat-treated at a high temperature and a high pressure to obtain ginsenosides Rd, Rg3- S, Rg3- R, Rk1, Rg5, In a high content can be produced. Through the manufacturing method of the present invention, it is possible to reduce the cost of purification of the enzyme, and by applying the saponin change pattern after the enzyme treatment and the heat treatment to fermented red ginseng manufacturing, it is possible to produce a variety of effective saponin-rich fermented red ginseng concentrates and powder products have.

도 1은 발효 인삼 조성물의 제조방법 모식도를 나타낸 것이다.
도 2는 인삼추출물 및 발효 인삼추출물의 진세노사이드의 증가량 비교 그래프를 나타낸 것이다.
도 3a 내지 도 3d는 인삼추출물의 미생물 배양, 고압유화기 처리 및 숙성 시키는 단계의 유ㆍ무에 따른 사포닌 패턴 변화를 나타낸 그래프이다.
FIG. 1 is a schematic view showing a production method of a fermented ginseng composition.
FIG. 2 is a graph showing an increase in the amount of ginsenosides of the ginseng extract and the fermented ginseng extract.
FIGS. 3A to 3D are graphs showing changes in saponin pattern depending on the presence or absence of the step of culturing ginseng extract, microbial culture, high-pressure emulsifier treatment and aging. FIG.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These embodiments are only for illustrating the present invention, and thus the scope of the present invention is not construed as being limited by these embodiments.

비교예Comparative Example 1. 인삼추출물 제조 1. Manufacture of ginseng extract

6년근 인삼 30 kg을 90 ~ 100 ℃에서 3 ~ 5시간 동안 열처리 한 후, 상기 열처리한 인삼 8.5 kg을 열풍 건조기에서 50 ~ 60 ℃에서 3 일간 건조하였다. 회수한 인삼 건조물에 4 ~ 5배 분량의 이온수를 넣고, 80 ~ 90 ℃에서 8시간 씩 3회 추출하였다. 추출한 액을 농축하여 고형분 60%의 인삼 추출물 엑기스 5.0 kg을 만 든 후, 고형분 60%의 농축액을 얻어내었다.
30 kg of 6-year-old ginseng was heat-treated at 90 to 100 ° C for 3 to 5 hours, and then 8.5 kg of the heat-treated ginseng was dried in a hot air dryer at 50 to 60 ° C for 3 days. Four to five times as much ionized water was added to the recovered ginseng extracts and extracted three times at 80 to 90 ° C for 8 hours. The extracted liquid was concentrated to obtain 5.0 kg of a ginseng extract extract having a solid content of 60%, and then a concentrate having a solid content of 60% was obtained.

실시예Example 1. 발효 인삼추출물의 제조 및 정제  1. Preparation and purification of fermented ginseng extract

6년근 인삼을 30 kg을 90 ~ 100 ℃에서 3 ~ 5시간 동안 열처리 한 후, 상기 열처리한 인삼을 열풍 건조기에서 50 ~ 60 ℃에서 3 일간 건조하였다. 인삼 건조물 8.5 kg을 회수하여 4 ~ 5배 분량의 이온수를 넣고, 80 ~ 90 ℃에서 8시간 씩 3회 추출하였다. 추출한 액을 농축하여 고형분 60%의 인삼 추출물 엑기스를 제조한 후, 60% 홍삼 농축액 5.0 kg을 발효조에 넣고 3배 분량의 이온수 15 L를 첨가하였다. 상기 액을 100 ℃에서 30 분간 살균처리한 후, 37 ℃까지 온도를 낮추었다.30 kg of 6-year-old ginseng was heat-treated at 90 to 100 ° C for 3 to 5 hours, and the heat-treated ginseng was dried in a hot air dryer at 50 to 60 ° C for 3 days. 8.5 kg of ginseng dried product was recovered and 4 ~ 5 times of ionized water was added and extracted three times at 80 ~ 90 ℃ for 8 hours. The extracted liquid was concentrated to prepare a ginseng extract extract having a solid content of 60%. Then, 5.0 kg of a 60% red ginseng concentrate was added to the fermentation tank and 15 L of triple-volume water was added thereto. The solution was sterilized at 100 ° C for 30 minutes and then cooled to 37 ° C.

이후, MRS배지에서 37 ℃, 2일 정치 배양한 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum) 200 mL을 접종한 후, 0.5 bar, 37 ℃, 100 rpm의 발효조 조선으로 2일간 발효하였다. 상기 발효액을 100 ℃에서 30 분간 살균하고, 냉각하여 유산균발효 홍삼추출액을 제조하였다. 이후 3% 맥아즙에서 25 ℃, 160 rpm 조건으로 2일 배양한 아스페르길루스 니가(Aspergillus niger) 전배양액 400 ml과 PDB(potato dextrose broth)에서 28 ℃, 160 rpm의 조건으로 2일 배양한 트리코더마 리세이(Tricoderma reesei) 전배양액 400 ml을 각각 상기 10 L의 유산균발효 홍삼추출액에 접종하여 200 rpm, 0.5vvm 조건으로 각각 25 ℃에서 3일간, 28 ℃에서 3일간 배양하였다. 상기 배양액들을 1,500bar, 3회 조건으로 고압유화기(Microfludizer(110Y), Microfluidics Corperation)를 통과시킨 후, 1일간 40 ℃에서 숙성하였다. 상기 숙성액을 110 ~ 125 ℃에서 30 분간 열처리한 후, 400 g의 여과보조제를 첨가한 후 필터프레스로 여과하였다. 상기 여과액을 고형분 60 ~ 65 %로 농축하여 발효 인삼추출물을 제조하였다.
Thereafter, Lactobacillus ( Lactobacillus sp.) Cultured for 2 days at 37 DEG C in MRS medium fermentum ) was inoculated and fermented for 2 days in a fermenter at 0.5 bar, 37 ° C and 100 rpm. The fermentation broth was sterilized at 100 DEG C for 30 minutes and cooled to prepare a fermented red ginseng extract of lactic acid bacteria. Then, 3% malt juice was cultured at 25 ° C and 160 rpm for 2 days. Aspergillus niger ) culture medium and PDB (potato dextrose broth) at 28 ° C and 160 rpm for 2 days. Tricoderma var. reesei were inoculated into the 10 L lactic acid fermented red ginseng extract and cultured at 25 ° C for 3 days and at 28 ° C for 3 days at 200 rpm and 0.5 vvm, respectively. The cultures were passed through a high-pressure emulsifier (Microfludizer (110Y), Microfluidics Correlation) under the conditions of 1,500 bar and three times, and then aged at 40 ° C for one day. The aged solution was heat-treated at 110 to 125 ° C for 30 minutes, and 400 g of a filter aid was added thereto, followed by filtration with a filter press. The filtrate was concentrated to a solid content of 60 to 65% to prepare a fermented ginseng extract.

실시예 2. 고성능액체크로마토그래피를 이용한 추출물의 진세노사이드 분석Example 2 Analysis of Ginsenosides of Extracts by High Performance Liquid Chromatography

상기 비교예 1과 실시예 1에서 제조한 인삼추출물 및 발효 인삼추출물에 함유된 진세노사이드 성분의 함량을 측정하기 위해, 고성능액체크로마토그래피(Ultra Performance Liquid Chromatography, UPLC, Waters)를 이용하였다. 진세노사이드의 함량 측정을 위한 실험과정은 하기에 자세히 나타내었다.To determine the content of ginsenoside components contained in the ginseng extract and fermented ginseng extract prepared in Comparative Example 1 and Example 1, high performance liquid chromatography (UPLC, Waters) was used. The experimental procedure for measuring the content of ginsenosides is described in detail below.

먼저, 비교예 1의 인삼추출물 및 실시예 1의 발효 인삼추출물을 각각 1 g을 50 mL의 매스플라스크에 정량하여 넣은 후, 이온수로 용해하였다. 상기용해액을 활성화시킨 C18 카트리지(Sep-Pak Plus, WAT020515, Waters, USA)에 통과시켜 물과 30%(v/v) 메탄올로 세척한 후, 메탄올 20 mL로 용리한 다음 60 ℃이하에서 감압농축한 후 메탄올 2 mL로 용해하여 분석시 사용하였다. 표준으로는 진세노사이드 Rb1, Rd, Rg3-S, Rg3-R, 컴파운드 K, 진세노사이드 Rk1, Rg5, Rh2를 각각 1 mg/ml의 농도로 메탄올에 녹여 스톡(stock) 용액으로 하여 1.0, 0.1, 0.01 mg/ml의 검액을 제조하여 검량선용 표준용액으로 사용하여 검량선을 작성하였다. 이때 분석조건은 하기 표 1에 나타내었으며, 이동상(mobile phase)의 gradient table은 표 2에 나타내었다. 각 추출물들의 측정 결과는 도 2에 나타내었다.First, 1 g of each of the ginseng extract of Comparative Example 1 and the fermented ginseng extract of Example 1 was weighed into a 50-mL mass flask and dissolved in ionized water. The solution was passed through a C 18 cartridge (Sep-Pak Plus, WAT020515, Waters, USA) in which the solution was activated, washed with water and 30% (v / v) methanol, eluted with 20 mL of methanol, After concentration under reduced pressure, the residue was dissolved in 2 mL of methanol and used for analysis. As a standard, ginsenosides Rb1, Rd, Rg3-S, Rg3-R, compound K and ginsenosides Rk1, Rg5 and Rh2 were dissolved in methanol at a concentration of 1 mg / 0.1, and 0.01 mg / ml were prepared and used as a standard solution for the calibration curve to prepare a calibration curve. The analysis conditions are shown in Table 1 below, and the gradient table of the mobile phase is shown in Table 2. The measurement results of each of the extracts are shown in Fig.

도 2에 나타낸 것과 같이, 진세노사이드 분해 산물의 전구체가 되는 진세노사이드 Rb1의 함량이 11배 줄어들면서, 진세노사이드 Rd의 함량은 1.6배, Rg3-S는 1.7배, Rg3-R은 2.6배, 진세노사이드 Rk1은 1.8배, 진세노사이드 Rg5는 3.6배가 증가하였으며, 컴파운드 K와 진세노사이드 Rh2는 각각 2.6 mg/g, 0.53 mg/g이 신규로 생성되었음을 확인할 수 있다.
As shown in FIG. 2, the content of ginsenoside Rb1, which is a precursor of the ginsenoside degradation product, decreased by 11 times, the content of ginsenoside Rd was 1.6 times, Rg3-S was 1.7 times, Rg3-R was 2.6 , Ginsenoside Rk1 increased 1.8 times and ginsenoside Rg5 increased 3.6 times. Compound K and ginsenoside Rh2 were newly generated at 2.6 mg / g and 0.53 mg / g, respectively.

[표 1. 진세노사이드의 분석조건][Table 1 Analysis conditions of ginsenoside]

Figure 112010029316400-pat00001

Figure 112010029316400-pat00001

[표 2. Gradient Table][Table 2. Gradient Table]

Figure 112010029316400-pat00002

Figure 112010029316400-pat00002

또한 발효 인삼추출물의 제조과정 중 각 제조단계별로 수득된 시료에 함유된 진세노사이드 성분 함량을 측정하였다. 측정 방법은 상기와 동일한 방법으로 수행하였다. 측정 결과는 하기 표 3에 나타내었다.The content of ginsenoside components contained in the samples obtained during each step of the fermented ginseng extract was measured. The measurement was carried out in the same manner as described above. The measurement results are shown in Table 3 below.

하기 표 3에 나타낸 바와 같이, 인삼추출물을 락토바실러스 퍼멘텀으로 배양한 배양액의 진세노사이드의 성분 함량을 분석하는 경우 균주로 배양하지 않은 인삼추출물에 비해 진세노사이드 Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5 함량이 소폭 증가하였다. 그러나 상기 락토바실러스 퍼멘텀으로 배양시킨 배양액에 아스페르길루스 니가를 접종하여 배양한 배양액의 경우, 진세노사이드 Rb1, Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5의 함량이 감소한 반면 컴파운드 K와 진세노사이드 Rh2의 함량이 증가하였으며, 또한 상기 락토바실러스 퍼멘텀으로 배양시킨 배양액을 트리코더마 리세이를 접종하여 배양한 배양액의 경우, 진세노사이드 Rb1의 함량은 감소하나 진세노사이드 Rd의 함량은 증가하였다. 그리고 각각의 균주로 배양한 배양액을 혼합하여 고압유화기로 처리한 후 숙성한 인삼발효물의 경우, 진세노사이드 Rb1의 함량은 감소된 반면 진세노사이드 Rg3-R, 컴파운드 K, 진세노사이드 Rg5, 진세노사이드 Rh2의 함량이 증가하였다. 이는 고압유화기를 통해 세포가 파쇄되면서 생산되는 펙틴나아제 및 셀룰라아제가 인삼 배양액과 반응하면서 기존의 사포닌 변형 패턴을 강화시켰기 때문인 것으로 사료된다. 또한 상기 숙성액을 열처리한 인삼발효물의 경우, 진세노사이드 Rb1을 제외한 진세노사이드 Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5, Rh2 및 컴파운드 K의 함량을 모두 현저히 증가시켰다.
As shown in the following Table 3, when the content of ginsenosides in the culture solution in which the ginseng extract was cultured with Lactobacillus fermentum was analyzed, the content of ginsenosides Rg3-S, Rg3-R, Rk1 and Rg5 contents increased slightly. However, the content of ginsenosides Rb1, Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rk1 and Rg5 decreased in the culture solution inoculated with Aspergillus niger in the culture solution cultured with the lactobacillus fermentum, K and ginsenoside Rh2 were increased. In the case of the culture liquid inoculated with the cultured medium cultured with the lactobacillus fermentum, the content of ginsenoside Rb1 was decreased, but the content of ginsenoside Rd was decreased Respectively. The content of ginsenoside Rb1 was decreased in the aged ginseng fermented product after mixing with the cultures incubated with the respective strains and treated with a high-pressure emulsifier, while the content of ginsenoside Rg3-R, compound K, ginsenoside Rg5, The content of senoside Rh2 was increased. This is probably due to the fact that pectinase and cellulase, which are produced by cell disruption through high pressure emulsifier, react with ginseng culture to strengthen the existing saponin modification pattern. In the case of the ginseng fermented product obtained by heat-treating the aging solution, the contents of ginsenosides Rd, Rg3-S, Rg3-R, Rk1, Rg5, Rh2 and compound K except ginsenoside Rb1 were all significantly increased.

[표 3. 제조 단계별 진세노사이드 성분 함량 변화(고형분 60% 농축액 기준)][Table 3] Changes in content of ginsenosides by the stage of production (based on 60% solids)

Figure 112010029316400-pat00003

Figure 112010029316400-pat00003

또한 인삼추출물의 미생물 배양, 고압유화기 처리 및 숙성 시키는 단계의 유ㆍ무에 따른 사포닌 패턴 변화를 측정하였다. 측정을 위해 고성능액체크로마토그래피(Ultra Performance Liquid Chromatography, UPLC, Waters)를 이용하였으며, 측정 방법은 상기와 동일하게 수행하였다. 측정 결과는 도 3a 내지 도 3d에 나타내었다.The changes of saponin pattern of ginseng extracts were measured by microbial culture, high pressure emulsifier treatment and aging. High performance liquid chromatography (UPLC, Waters) was used for the measurement, and the measurement was carried out in the same manner as described above. The measurement results are shown in Figs. 3A to 3D.

도 3a 내지 도 3d에 나타낸 것과 같이, 인삼추출액에 유산균(락토바실러스 퍼멘텀)을 배양하고, 아스페르길루스 니가를 상기 인삼추출물 유산균 배양액에 재배양하여 고압유화기를 처리한 후 숙성시키면, 진세노사이드 Rb1, 진세노사이드 Rd, 진세노사이드 Rg3-S, 진세노사이드 Rk1, Rg5 등의 함량이 감소하면서, 컴파운드 K, 진세소사이드 Rh2가 생성된다(도 3a). 또한 인삼추출물 유산균 배양액에 트리코더마 리세이를 배양하고 고압유화기를 처리한 후 숙성시키면, 진세노사이드 Rb1의 함량이 감소하면서, 진세노사이드 Rd의 함량이 현저히 증가한다(도 3b). 따라서 상기 인삼추출물 유산균 배양액을 아스페르길루스 니가 및 트리코더마 리세이로 배양하여 고압유화기를 처리한 후 숙성시키고, 상기 숙성액을 고압고열로 열처리하면 원료인 인삼추출물(도 3c)에 비해 진세노사이드 Rd, Rg3-S, Rg3-R, 진세노사이드 Rk1, 진세노사이드 Rg5의 함량을 증가시킬 수 있으며, 신규로 컴파운드 K와 진세노사이드 Rh2를 생성시킬 수 있다(도 3d).As shown in FIGS. 3A to 3D, when lactic acid bacteria (Lactobacillus perfumont) is cultured in ginseng extract, Aspergillus niger is regenerated in the culture solution of lactic acid bacteria of the ginseng extract, and after high-pressure emulsifier is treated and aged, The compound K and the ginsenoside Rh2 are produced while reducing the content of the senoside Rb1, ginsenoside Rd, ginsenoside Rg3-S, ginsenoside Rk1, Rg5, and the like (Fig. In addition, when the cultured Trichoderma lysine is cultured in a culture solution of lactic acid bacteria of ginseng extract, and after aging after treatment with a high-pressure emulsifier, the content of ginsenoside Rb1 is decreased and the content of ginsenoside Rd is significantly increased (FIG. Therefore, the culture of the ginseng extract lactic acid bacterium culture is cultured with Aspergillus niger and Trichoderma reesei, followed by treatment with a high-pressure emulsifier, followed by aging. When the aged solution is heat-treated under high pressure and high heat, Rd, Rg3-S, Rg3-R, ginsenoside Rk1 and ginsenoside Rg5 can be increased and new compound K and ginsenoside Rh2 can be produced (FIG. 3D).

Claims (9)

하기의 단계를 포함하는 인삼의 사포닌이 증가된 발효 인삼추출물의 제조방법:
a) 인삼으로부터 인삼추출액을 준비하는 단계;
b) 상기 인삼추출액을 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum), 아스페르길루스 니가(Aspergillus niger) 및 트리코더마 리세이(Tricoderma reesei) 균주로 혼합배양하여 발효시키는 단계;
c) 고압유화기를 이용하여 상기 발효된 인삼발효물의 미생물 세포를 파괴시키는 단계;
d) 상기 c)단계에서 얻은 인삼발효물을 숙성시키는 단계; 및
e) 상기 숙성된 인삼발효물을 열처리하는 단계.
A method for preparing saponin-enhanced fermented ginseng extract of ginseng comprising the steps of:
a) preparing a ginseng extract from ginseng;
b) mixing and germinating the ginseng extract with Lactobacillus fermentum , Aspergillus niger and Tricoderma reesei , and fermenting the same;
c) destroying the microbial cells of the fermented ginseng fermentation product using a high-pressure emulsifier;
d) aging the ginseng fermentation product obtained in the step c); And
e) heat treating the aged ginseng fermentation product.
제 1항에 있어서, 상기 제조방법은 상기 e) 단계의 열처리된 인삼발효물을 여과, 농축 및 건조하여 분말화하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 발효 인삼추출물의 제조방법.
[7] The method of claim 1, wherein the fermented ginseng fermented product obtained in step (e) is filtered, concentrated and dried to powder.
삭제delete 제 1항에 있어서, 상기 b) 단계에서의 발효과정은 MRS 배지에서 배양한 락토바실러스 퍼멘텀을 상기 인삼추출물에 접종하여 30 내지 37 ℃에서 3 내지 4일 발효하는 단계; 및 상기 발효 결과물에 맥아즙에서 배양한 아스페르길루스 니가와 PDB(potato dextrose broth)에서 배양한 트리코더마 리세이를 각각 접종하여 각각 25 내지 30 ℃에서 3 내지 4일 배양하는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 하는 발효 인삼추출물의 제조방법.
[2] The method of claim 1, wherein the fermentation in step b) comprises: inoculating the lactobacillus fermentum cultured in the MRS medium to the ginseng extract and fermenting the mixture at 30 to 37 DEG C for 3 to 4 days; And culturing the resultant fermentation product at 25 to 30 ° C for 3 to 4 days, respectively, by inoculating each of the Aspergillus niger cultivated with malt juice and Trichoderma reicei cultured in potato dextrose broth (PDB), respectively, Wherein said fermented ginseng extract is a fermented ginseng extract.
제 1항에 있어서, 상기 c) 단계의 고압유화기 처리는 상기 인삼추출물을 1,300 내지 1,600 bar, 2 내지 4회 조건으로 고압유화기를 통과시키는 것을 특징으로 하는 발효 인삼추출물의 제조방법.
The method according to claim 1, wherein the high-pressure emulsifier treatment in step c) comprises passing the ginseng extract through a high-pressure emulsifier under conditions of 1,300 to 1,600 bar and 2 to 4 times.
제 1항에 있어서, 상기 d) 단계의 숙성은 30 내지 45 ℃에서 1 내지 2일간 수행하는 것을 특징으로 하는 발효 인삼 추출물의 제조방법.
The method according to claim 1, wherein the aging in step d) is carried out at 30 to 45 ° C for 1 to 2 days.
제 1항에 있어서, 상기 e) 단계의 열처리는 110 내지 125 ℃에서 20 내지 40 분간 수행하는 것을 특징으로 하는 발효 인삼추출물의 제조방법.
The method according to claim 1, wherein the heat treatment in step (e) is performed at 110 to 125 ° C for 20 to 40 minutes.
제 1항, 제 2항, 제 4항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 따른 제조방법으로 제조된 인삼의 사포닌이 증가된 발효 인삼 추출물로서, 진세노사이드 Rd, 진세노사이드 Rg3-S, Rg3-R, 컴파운드 K, 진세노사이드 Rk1, 진세노사이드 Rg5 및 진세노사이드 Rh2의 함량이 발효 전에 비해 증가된 것을 특징으로 하는 발효 인삼 추출물.7. The ginseng extract of claim 1, wherein the saponin-enhanced ginseng extract of ginseng is selected from the group consisting of ginsenoside Rd, ginsenoside Rg3-S, Rg3 -R, the compound K, the ginsenoside Rk1, the ginsenoside Rg5 and the ginsenoside Rh2 are increased compared to before fermentation. 삭제delete
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