KR101720106B1 - Use of Sialyl Tn Antigen Related to Pregnancy - Google Patents
Use of Sialyl Tn Antigen Related to Pregnancy Download PDFInfo
- Publication number
- KR101720106B1 KR101720106B1 KR1020150056700A KR20150056700A KR101720106B1 KR 101720106 B1 KR101720106 B1 KR 101720106B1 KR 1020150056700 A KR1020150056700 A KR 1020150056700A KR 20150056700 A KR20150056700 A KR 20150056700A KR 101720106 B1 KR101720106 B1 KR 101720106B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- sialylated
- antigen
- enzyme
- st6galnac1
- sugar chain
- Prior art date
Links
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 89
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 89
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 89
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 title claims abstract description 29
- RMINQIRDFIBNLE-NNRWGFCXSA-N O-[N-acetyl-alpha-neuraminyl-(2->6)-N-acetyl-alpha-D-galactosaminyl]-L-serine Chemical compound O1[C@H](OC[C@H](N)C(O)=O)[C@H](NC(=O)C)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]1CO[C@@]1(C(O)=O)O[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C1 RMINQIRDFIBNLE-NNRWGFCXSA-N 0.000 title 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 51
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 46
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 46
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 33
- 230000036512 infertility Effects 0.000 claims abstract description 22
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 claims abstract description 22
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 18
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 16
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 13
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000002513 implantation Methods 0.000 claims description 17
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 17
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 16
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 16
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 15
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 10
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 claims description 6
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 claims description 5
- 208000007984 Female Infertility Diseases 0.000 claims description 4
- 206010021928 Infertility female Diseases 0.000 claims description 4
- 208000011707 Ovulation disease Diseases 0.000 claims description 4
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims description 4
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 4
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Chemical group CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004473 Threonine Chemical group 0.000 claims description 3
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 3
- 208000015124 ovarian disease Diseases 0.000 claims description 3
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 claims description 2
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 claims description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical group C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 claims description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 claims description 2
- 230000002254 contraceptive effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 230000035558 fertility Effects 0.000 claims description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 claims description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 2
- 201000004535 ovarian dysfunction Diseases 0.000 claims description 2
- 231100000543 ovarian dysfunction Toxicity 0.000 claims description 2
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 claims description 2
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 claims description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 2
- HSRJKNPTNIJEKV-UHFFFAOYSA-N Guaifenesin Chemical group COC1=CC=CC=C1OCC(O)CO HSRJKNPTNIJEKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 claims 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 claims 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 abstract description 15
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 11
- 229940124558 contraceptive agent Drugs 0.000 abstract description 4
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 38
- KUIFHYPNNRVEKZ-VIJRYAKMSA-N O-(N-acetyl-alpha-D-galactosaminyl)-L-threonine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1NC(C)=O KUIFHYPNNRVEKZ-VIJRYAKMSA-N 0.000 description 23
- 210000005168 endometrial cell Anatomy 0.000 description 20
- 210000002993 trophoblast Anatomy 0.000 description 17
- 102000004058 Leukemia inhibitory factor Human genes 0.000 description 14
- 108090000581 Leukemia inhibitory factor Proteins 0.000 description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 14
- 101150025145 St6galnac1 gene Proteins 0.000 description 13
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 13
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 13
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 11
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 10
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 9
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 9
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 238000000018 DNA microarray Methods 0.000 description 6
- -1 alkali metal salts Chemical class 0.000 description 6
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- 102000015278 OSM-LIF Receptors Human genes 0.000 description 5
- 108010064527 OSM-LIF Receptors Proteins 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 239000002585 base Substances 0.000 description 5
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 5
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 5
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 4
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical group CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N 0.000 description 4
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 4
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 4
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 4
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 4
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004495 STAT3 Transcription Factor Human genes 0.000 description 3
- 108010017324 STAT3 Transcription Factor Proteins 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 3
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- 239000003298 DNA probe Substances 0.000 description 2
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 2
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 102000007563 Galectins Human genes 0.000 description 2
- 108010046569 Galectins Proteins 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 2
- 108010092694 L-Selectin Proteins 0.000 description 2
- 102000016551 L-selectin Human genes 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 2
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 2
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 2
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 2
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 238000000760 immunoelectrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical group 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 2
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 2
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 2
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 1
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 1
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004145 Endometritis Diseases 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000006835 Lamins Human genes 0.000 description 1
- 108010047294 Lamins Proteins 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108091027974 Mature messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 208000021642 Muscular disease Diseases 0.000 description 1
- 201000009623 Myopathy Diseases 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-LUWBGTNYSA-N N-acetylneuraminic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)CC(O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-LUWBGTNYSA-N 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004518 RNA Probes Proteins 0.000 description 1
- 239000003391 RNA probe Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102000003838 Sialyltransferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000141 Sialyltransferases Proteins 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 description 1
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035432 Unintended pregnancy Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 1
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 238000010009 beating Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-N bromic acid Chemical compound OBr(=O)=O SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004657 carbamic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-N dithiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 230000032692 embryo implantation Effects 0.000 description 1
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 1
- 201000006828 endometrial hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol Natural products OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 231100000502 fertility decrease Toxicity 0.000 description 1
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 235000012055 fruits and vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 230000012447 hatching Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 230000000951 immunodiffusion Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 229960001375 lactose Drugs 0.000 description 1
- 210000005053 lamin Anatomy 0.000 description 1
- VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N lauric acid triglyceride Natural products CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical compound CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 229940060155 neuac Drugs 0.000 description 1
- CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N neuraminic acid Natural products NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000012149 noodles Nutrition 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229920006284 nylon film Polymers 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 150000008300 phosphoramidites Chemical class 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 235000013550 pizza Nutrition 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 1
- 239000002987 primer (paints) Substances 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000003161 ribonuclease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 125000005630 sialyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- FZHAPNGMFPVSLP-UHFFFAOYSA-N silanamine Chemical compound [SiH3]N FZHAPNGMFPVSLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 229940032147 starch Drugs 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7012—Compounds having a free or esterified carboxyl group attached, directly or through a carbon chain, to a carbon atom of the saccharide radical, e.g. glucuronic acid, neuraminic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7016—Disaccharides, e.g. lactose, lactulose
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/115—Aptamers, i.e. nucleic acids binding a target molecule specifically and with high affinity without hybridising therewith ; Nucleic acids binding to non-nucleic acids, e.g. aptamers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
Abstract
본 발명은 시알화 Tn 당쇄 항원 또는 상기 항원을 활성화제를 유효성분으로 포함하는, 불임 또는 난임의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 시알화 Tn 당쇄 항원의 억제제 또는 상기 항원을 합성하는 효소의 발현 또는 활성 억제제를 포함하는, 피임용 약학 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 시알화 Tn 당쇄 항원을 포함하는 임신 가능성 또는 임신 효율 측정용 마커 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 시알화 Tn 당쇄를 이용하여 불임 또는 난임 치료제, 또는 피임제의 스크리닝 방법에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for preventing or treating any of infertility or ovulation comprising a sialylated Tn sugar chain antigen or an antigen as an active ingredient. In addition, the present invention relates to a pharmaceutical composition for parenteral administration, which comprises an inhibitor of sialylated Tn glycoprotein antigen or an agent for inhibiting the expression or activity of an enzyme synthesizing said antigen. The present invention also relates to a marker composition for measuring pregnancy potential or pregnancy efficiency comprising a sialylated Tn sugar chain antigen. The present invention also relates to a method of screening for an infertility or disability treatment agent or a contraceptive agent using a sialylated Tn sugar chain.
Description
본 발명은 임신과 관련된 시알화 Tn 항원의 용도에 관한 것이다. The present invention relates to the use of sialylated Tn antigens in connection with pregnancy.
구체적으로, 본 발명은 시알화 Tn 당쇄 항원 또는 상기 항원을 활성화제를 유효성분으로 포함하는, 불임 또는 난임의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.Specifically, the present invention relates to a composition for preventing or treating any of infertility or ovulation comprising a sialylated Tn sugar chain antigen or an antigen as an active ingredient.
또한, 본 발명은 시알화 Tn 당쇄 항원의 억제제 또는 상기 항원을 합성하는 효소의 발현 또는 활성 억제제를 포함하는, 피임용 약학 조성물에 관한 것이다. In addition, the present invention relates to a pharmaceutical composition for parenteral administration, which comprises an inhibitor of sialylated Tn glycoprotein antigen or an agent for inhibiting the expression or activity of an enzyme synthesizing said antigen.
또한, 본 발명은 시알화 Tn 당쇄 항원을 포함하는 임신 가능성 또는 임신 효율 측정용 마커 조성물에 관한 것이다.The present invention also relates to a marker composition for measuring pregnancy potential or pregnancy efficiency comprising a sialylated Tn sugar chain antigen.
또한, 본 발명은 시알화 Tn 당쇄를 이용하여 불임 또는 난임 치료제, 또는 피임제의 스크리닝 방법에 관한 것이다.
The present invention also relates to a method of screening for an infertility or disability treatment agent or a contraceptive agent using a sialylated Tn sugar chain.
여성 불임의 원인은 배란장애, 수정란의 이송장애, 착상장애 등으로 분류되며 시험관아기시술법(IVF)으로 배란장애와 수정란의 이송장애는 많은 경우 해결되고 있으나, 착상장애는 아직까지 불임시술의 큰 난관이 되고 있다. The cause of female infertility is classified into ovulation disorder, transfer of embryo, implantation disorder, etc. IVF is used to treat ovulation disorder and embryo transfer difficulties in many cases. However, .
수정란의 착상은 수정란의 투명대가 제거되고(hatching), 수정란과 자궁내피의 느슨한 상호작용(apposition), 수정란과 자궁내피의 강한 결합(adhesion), 결합한 수정란이 자궁내막으로 침투하는(invasion) 등의 과정을 통하여 이루어진다.Embryo implantation involves hatching of embryos, loosening of embryos and endometrium, strong adhesion of embryos and endometrium, invasion of embryos into the endometrium, and so on. Process.
이러한 착상과정에서 인터루킨-6(IL-6) 종류의 하나인 백혈병억제인자(LIF; leukemia inhibitory factor; 백혈병억제인자)의 발현이 중요한데, 백혈병억제인자 결손 생쥐의 경우 착상과정에 결합이 발생하여 착상과 임신이 되지 않으며(Nature. 359(6390):76-9, 1992), 백혈병억제인자 수용체(LIF-R)에 대한 길항제(antagonist)를 이용하여 백혈병억제인자의 기능을 억제하면 착상이 일어나지 않는다는 보고(PNAS 104(49):19357-62, 2007; Contraception S0010-7824(12)00884-0, 2012)가 있는 등 착상과정에 가장 핵심적 인자로 알려져있다. In this process, the expression of leukemia inhibitory factor (LIF), which is one of IL-6, is important. In the case of leukemia inhibitory factor deficient mice, (LIF-R), which inhibits the function of the leukemia inhibitory factor, does not result in an implantation (Nature 359 (6390): 76-9, 1992) (PNAS 104 (49): 19357-62, 2007; Contraception S0010-7824 (12) 00884-0, 2012) are known to be the most important factors in the implantation process.
착상 과정에서 사이토카인의 작용은 다양한 접착인자의 발현을 조절하는 것으로 알려져 있으나, 실제 어떠한 접착인자가 핵심적인 역할을 하는지에 대해서는 명확하게 밝혀진 바가 없다. Although the action of cytokines during the implantation process is known to regulate the expression of various adhesion factors, it is unclear as to what binding factors actually play a key role.
착상에 관련되는 것으로 알려진 인자로는 뮤신(mucin), L-셀렉틴(selectin), 트로포닌(trophonin), E-카드헤린(cadherin), 인테그린(integrin), 갈렉틴(galectin) 등이 대표적이다 (J Hum Reprod Sci. 5(1):2-6; Placenta 35:195-201).Among the factors known to be related to the implantation are mucin, L-selectin, trophonin, E-cadherin, integrin, galectin, and the like J Hum Reprod Sci. 5 (1): 2-6; Placenta 35: 195-201).
특히 착상에 관련된 L-셀렉틴과 갈렉틴은 모두 특정 당쇄 구조를 인식하는 수용체로서 당쇄의 역할이 중요할 것으로 사료되며, 이와 연관하여 세포표면의 N-형 또는 O-형 당쇄의 발현을 전체적으로 억제한 생쥐의 경우 착상 효율이 현저히 감소하는 것이 보고된 바 있다 (Reproduction (2012) 144 455-465).In particular, both L-selectin and galectin related to the implantation are thought to play an important role of the sugar chain as a receptor recognizing a specific sugar chain structure. In this connection, overall inhibition of the expression of N- or O- It has been reported that implantation efficiency is significantly reduced in mice (Reproduction (2012) 144 455-465).
그러나 특정 당쇄항원이 실제로 착상에 중요한 인자로 알려진 것은 시알화 루이스 항원(Sialyl Lewis antigen) 정도에 불과하며(Fertil Steril. 91(3):908-14), 시알화 Tn 항원에 대한 보고는 전무한 상황이다.
However, it has been reported that the specific sugar chain antigen is actually known to be an important factor in the implantation of Sialyl Lewis antigen (Fertil Steril. 91 (3): 908-14), but no report of sialylated Tn antigen to be.
이에 본 발명자들은 세포표면의 O-형 당쇄의 일종인 시알화 Tn 항원이 착상과정에 핵심적인 사이토카인인 백혈병억제인자에 의하여 발현이 증가하는 것을 확인하고, 시알화 Tn 항원의 발현을 억제하거나 항체를 이용하여 중화시키거나 외래의 시알화 Tn 항원을 투여하여 경쟁시킨 경우에 모두 착상 효율이 감소하는 것을 확인하였으며, 이에 상기 시알화 Tn 항원의 착상에의 기능을 명확히 규명하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.Therefore, the present inventors confirmed that the expression of sialylated Tn antigen, which is a type of O-type sugar chain on the cell surface, is increased by a leukemia inhibitor, which is a key cytokine in the process of implantation, and inhibits the expression of sialylated Tn antigen, , Or the sialylated Tn antigen was externally added to the sialyltransferase to compete with each other to decrease the fertilization efficiency. The function of the sialylated Tn antigen on the fusing of the sialylated Tn antigen was clarified to complete the present invention It came.
따라서, 본 발명의 일 양상은 상기 시알화 Tn 항원을 이용한 불임 또는 난임의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다. Accordingly, one aspect of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating any of the infertility or ovulation using the sialylated Tn antigen.
또한, 본 발명의 다른 양상은 시알화 Tn 당쇄 항원의 억제제를 이용한, 피임용 약학 조성물을 제공하는 것이다. Another aspect of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for parenteral administration using an inhibitor of sialylated Tn glycoprotein antigen.
또한, 본 발명의 다른 양상은 상기 시알화 Tn 당쇄 항원을 이용한 임신 효율 측정용 마커 조성을 제공하는 것이다.Another aspect of the present invention is to provide a marker composition for measuring pregnancy efficiency using the sialylated Tn sugar chain antigen.
또한, 본 발명의 다른 양상은 상기 시알화 Tn 당쇄 항원을 이용한 불임 또는 난임 치료제, 또는 피임제의 스크리닝 방법을 제공하는 것이다.
In addition, another aspect of the present invention is to provide a method for screening an infertility or infertility treatment agent or a contraceptive agent using the sialylated Tn sugar chain antigen.
본 발명의 일 양상은 시알화 Tn 당쇄 항원 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는, 불임 또는 난임의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다. One aspect of the present invention provides a composition for preventing or treating any infertility or asthma, comprising a sialylated Tn sugar chain antigen or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
상기 조성물은 약학 또는 식품 조성물일 수 있다. The composition may be a pharmaceutical or a food composition.
이하 본 발명에 대하여 상세히 설명한다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명에서 사용된 용어, 시알화 Tn 당쇄 항원은 단당류 구조의 세린 또는 쓰레오닌에 글리코시드 결합한 N-아세틸갈락토사민을 의미한다. 상기 본 발명의 Tn 당쇄 항원은 시알화된 형태를 지니며, 하기의 화학식 1로 이루어진다.
As used herein, the term " sialylated Tn sugar chain antigens " refers to N-acetylgalactosamine conjugated to serine or threonine glycoside bonds of the monosaccharide structure. The Tn sugar chain antigen of the present invention has a sialylated form and is represented by the following formula (1).
[화학식 1][Chemical Formula 1]
여기서, 상기 R1은 세린 또는 쓰레오닌이며, Wherein R1 is serine or threonine,
상기 시알산의 종류는 R2에 따라서, 상기 R2가 CH3COHN인 경우 N-아세틸뉴라민산 (N-acetyl neuraminic acid, NeuAc)이며, 상기 R2가 OHCH2COHN인 경우 N-글리콜릴뉴라민산 (N-glycolyl neuraminic acid, NeuGC), 이며, R2가 OH인 경우, 2-케토-3-데옥시노믹산 (2-keto-3-deoxynonic acid, Kdn) 이다. 다만 기존 연구에서 인체에는 N-아세틸뉴라민산을 포함하는 시알화 Tn 당쇄 항원만이 발현되며, 인간을 제외한 다른 포유류의 경우에는 N-아세틸뉴라민산과 N-글리콜릴뉴라민산의 두 가지 시알산을 다 포함하는 시알화 Tn 당쇄 항원을 가진 것으로 알려져 있다. Type of the sialic acid according to R2, and wherein R2 is N- acetylneuraminic acid (N-acetyl neuraminic acid, NeuAc ) when the CH 3 COHN, when the R2 is OHCH 2 COHN N- glycol rilnyu lamin acid ( 2-keto-3-deoxynonic acid (Kdn) when R2 is OH. However, in the existing studies, only human sialylated Tn glycoconjugate antigen containing N-acetylneuraminic acid is expressed, and in the case of other mammals except human, two kinds of sialic acid, N-acetylneuraminic acid and N- Lt; RTI ID = 0.0 > Tn < / RTI > sugar chain antigens.
본 발명에 있어서, 상기 유효성분은 시알화 Tn 당쇄 항원의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 개념이다. 본 발명에서 "약학적으로 허용가능한 염"은 개체에게 비교적 비독성이고 무해한 유효작용을 갖는 농도로서 이염에 기인한 부작용이 화학식 1로 표시되는 화합물의 이로운 효능을 저하시키지 않는 상기 화합물의 임의의 모든 유기 또는 무기 부가염을 의미한다. 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 약학적으로 허용가능한 염은, 달리 지시되지 않는 한, 화학식 1로 표시되는 화합물에 존재할 수 있는 산성 또는 염기성 기의 염을 모두 포함한다. 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 약학적으로 허용되는 염의 형태로 사용될 수 있으며, 이러한 염으로는 약학적으로 허용되는 유리산(free acid)에 의해 형성되는 산부가염 또는 염기에 의해 형성되는 금속염이 있다. 상기 유리산으로는 무기산과 유기산이 사용될 수 있으며 무기산으로는 염산, 황산, 브롬산, 아황산 또는 인산 등이 사용될 수 있고 유기산으로는 구연산, 초산, 말레인산, 후마산, 글루콘산, 메탄술폰산 등이 사용될 수 있다. 상기 금속염으로는 알칼리 금속염 또는 알칼리 토금속염이 있으며, 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염이 유용하다.
In the present invention, the above-mentioned effective ingredient is a concept including a pharmaceutically acceptable salt of a sialylated Tn sugar chain antigen. As used herein, the term "pharmaceutically acceptable salt" refers to a concentration that is relatively non-toxic to a subject and that has a harmless effective action, and that adverse effects attributable to the mite are not adversely affected by any of all of the above compounds that do not impair the beneficial efficacy of the compound Organic or inorganic addition salts. The pharmaceutically acceptable salt of the compound represented by the formula (1) includes all the salts of the acidic or basic group which may exist in the compound represented by the formula (1) unless otherwise indicated. The compound represented by the general formula (1) of the present invention can be used in the form of a pharmaceutically acceptable salt. Examples of such salts include acid addition salts formed by pharmaceutically acceptable free acids, There are metal salts. As the free acid, an inorganic acid and an organic acid can be used. As the inorganic acid, hydrochloric acid, sulfuric acid, bromic acid, sulfurous acid or phosphoric acid can be used. As the organic acid, citric acid, acetic acid, maleic acid, fumaric acid, gluconic acid, methanesulfonic acid and the like are used . The metal salts include alkali metal salts or alkaline earth metal salts, and sodium, potassium or calcium salts are useful.
상기 불임은 피임을 시행하지 않은 경우, 정상적인 성생활의 경우에도 1년 이내에 임신에 도달하지 않는 경우를 의미하며, 난임을 포함하는 개념이다. The term "infertility" refers to a case in which contraception is not performed, even in the case of normal sexual life, the pregnancy is not reached within one year.
상기 불임은 일차성 불임, 또는 2차성불임을 모두 포함한다. The infertility includes both primary infertility and secondary infertility.
특히, 본 발명의 상기 약학 조성물은 여성의 불임 또는 난임일 수 있다. 상기 불임 또는 난임 원인의 예로는 난소 기능 저하, 배란 장애, 수정란 이송 장애, 착상 장애, 난관 손상, 난관 결착, 난관주위 유착, 면역학적 이상, 감염, 전신적 질환, 또는 자궁내막증일 수 있으며, 그 원인을 제한하지 않는다. In particular, the pharmaceutical composition of the present invention may be a female infertility or pregnancy. Examples of causes of infertility or parity can be ovarian dysfunction, ovulation disorder, fertility transfer disorder, implantation disorder, tubal injury, tubal adduction, periorbital adhesion, immunological abnormality, infection, systemic disease, or endometriosis, .
본 발명의 가장 바람직한 구체예로는 본 발명의 상기 불임 또는 난임은 모체에서의 착상 장애에 의한 것일 수 있다. In a most preferred embodiment of the present invention, the infertility or discomfort of the present invention may be due to an impaired fertility in the mother.
상기 "난자의 착상장애(Nonimplantation of ovum)"는 여성 불임증의 대표적인 원인으로, 착상 시 수정란이 세포분열을 하면서 이동하여 자궁 속에 들어와 배반포 단계에 이르면 자궁내막에 파묻혀 자리를 잡게 되는데, 배아가 착상할 자궁내막의 두께가 충분치 않거나 손상으로 인해 경직될 경우 착상이 되기가 어려우며 자궁벽의 유착 등으로 공간이 부족할 경우 유산되는 경우가 많다. 자연유산, 계류유산, 임신중절수술, 자궁내막염, 골반결핵 및 자궁 내 장치 등으로 유발된 자궁 내 염증에 의해 자궁내막이 유착되거나, 자궁근종 폴립 등으로 자궁형태변형이 나 자궁내막에 면역학적 과민반응이 생기거나, 선천적 자궁기형 호르몬 분비이상으로 자궁내막형성이 불완전할 경우 착상에 장애가 발생한다.The above-mentioned "Nonimplantation of ovum" is a representative cause of female infertility. When fertilized, the embryo moves while dividing cells into the uterus, and when it reaches the stage of blastocyst, it is buried in the endometrium and seated. If the thickness of the endometrium is not enough, or if it is stiff due to injury, it is difficult to be implanted, and if the space is short due to adhesion of the uterine wall, it is often aborted. Endometrial hyperplasia due to intrauterine inflammation caused by spontaneous abortion, mastectomy, abortion, endometritis, pelvic tuberculosis, and intrauterine device, or uterine myopathy, If there is a response, or if the endometrial formation is incomplete due to abnormal secretion of congenital uterine horny hormones, impairment occurs in the implantation.
본 발명의 실시예에서는 본 발명자는 세포표면의 O-형 당쇄의 일종인 시알화 Tn 항원이 착상과정에 핵심적인 사이토카인인 백혈병억제인자에 의하여 발현이 증가하는 것을 확인하였다. 또한, 상기 시알화 Tn 항원의 기능을 확인하기 위하여 시알화 Tn 항원의 발현을 억제하거나 항체를 이용하여 중화시키거나 외래의 시알화 Tn 항원을 투여하여 경쟁시킨 경우에 착상 효율이 감소하는 것을 확인하였다.
In the examples of the present invention, the present inventors confirmed that the sialylated Tn antigen, which is a kind of O-type sugar chain on the cell surface, is increased in expression by a leukemia inhibitor, which is a key cytokine in the process of implantation. In addition, in order to confirm the function of the sialylated Tn antigen, it was confirmed that the implantation efficiency was reduced when the sialylated Tn antigen was inhibited or neutralized using an antibody or an exogenous sialylated Tn antigen was administered .
또한, 본 발명의 일 양상은 시알화 Tn 당쇄 항원의 활성화제를 포함하는, 불임 또는 난임의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.In addition, one aspect of the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of any of the infertility or ovulation, comprising an activator of sialylated Tn glycatedic antigen.
상기 상기 활성화제는 시알화 Tn 당쇄 항원을 합성하는 효소, 또는 상기 효소를 코딩하는 뉴클레오티드인 것인, 약학 조성물을 제공한다. Wherein the activator is an enzyme that synthesizes a sialylated Tn sugar chain antigen, or a nucleotide that encodes the enzyme.
상기 시알화 Tn 당쇄 항원을 합성하는 효소는 ST6GalNAc1일 수 있다.The enzyme synthesizing the sialylated Tn sugar chain antigen may be ST6GalNAc1.
본 발명에서 사용되는 용어 '예방'은, 상기 화합물을 함유하는 조성물의 투여로 질환을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다. 또한, 본 발명에서 사용되는 용어 '치료'는, 상기 화합물을 함유하는 조성물의 투여로 질환의 증세가 호전되거나 완치되는 모든 행위를 의미한다.
The term " prophylactic " as used in the present invention means any action that inhibits or delays disease by administration of a composition containing the compound. The term " treatment " used in the present invention means all the actions that improve or cure a symptom of a disease upon administration of a composition containing the compound.
또한, 본 발명의 일 양상은 시알화 Tn 당쇄 항원의 억제제를 포함하는, 피임용 약학 조성물을 제공한다.Further, one aspect of the present invention provides a pharmaceutical composition for parenteral administration, which comprises an inhibitor of sialylated Tn glycoprotein antigen.
본 발명에서 피임이란 당사자가 의도하지 않은 임신을 예방하는 것을 의미하며, 상기 피임은 여성 피임일 수 있다. 또한, 상기 피임은 경구 피임 또는 사후 피임, 응급 피임일 수 있다. In the present invention, contraception means prevention of unintended pregnancy by a party, and the contraception may be female contraception. In addition, the contraception may be oral contraception or post-contraception, emergency contraception.
상기 시알화 Tn 당쇄 항원의 억제제는 시알화 Tn 당쇄 항원에 특이적인 항체, 앱타머 또는 화합물일 수 있으며, 그 종류를 제한하지 않는다.
The inhibitor of the sialylated Tn sugar chain antigen may be an antibody, an aptamer or a compound specific for a sialylated Tn glycoprotein antigen, and the kind thereof is not limited.
또한, 본 발명의 일 양상은 시알화 Tn 당쇄 항원을 합성하는 효소의 발현 또는 활성 억제제를 포함하는, 피임용 약학 조성물을 제공한다.Further, one aspect of the present invention provides a pharmaceutical composition for parenteral administration, which comprises an expression or activity inhibitor of an enzyme that synthesizes a sialylated Tn sugar chain antigen.
또한, 본 발명의 일 양상은 유리 (free) 시알화 Tn 당쇄 항원을 유효성분으로 포함하는, 피임용 조성물을 제공한다. In addition, one aspect of the present invention provides a composition for parenteral administration, comprising a free sialylated Tn sugar chain antigen as an active ingredient.
상기 시알화 Tn 당쇄 항원을 합성하는 효소의 발현 억제제는 시알화 Tn 당쇄 항원을 합성하는 효소의 mRNA에 상보적으로 결합하는 안티센스 뉴클레오티드, 짧은 헤어핀 RNA(small hairpin RNA, shRNA), 작은 간섭 RNA(small interfering RNA, siRNA) 또는 리보자임(ribozyme)으로부터 선택될 수 있다.The agent for inhibiting the expression of the enzyme for synthesizing the sialylated Tn sugar chain antigen comprises an antisense nucleotide complementary to the mRNA of the enzyme synthesizing a sialylated Tn sugar chain antigen, a small hairpin RNA (shRNA), a small interference RNA interfering RNA, siRNA) or ribozyme.
또한, 상기 시알화 Tn 당쇄 항원을 합성하는 효소의 활성 억제제는 상기 효소에 특이적으로 결합하는 화합물, 펩티드, 펩티드모방체, 기질 유사체, 앱타머, 또는 항체으로부터 선택될 수 있다.
The activity inhibitor of the enzyme for synthesizing the sialylated Tn sugar chain antigen may be selected from a compound specifically binding to the enzyme, a peptide, a peptide mimetic, a substrate analog, an aptamer, or an antibody.
상기 안티센스 뉴클레오티드는 왓슨-크릭(Watson-Crick) 염기쌍에 정의된 바에 따라, DNA, 미성숙-mRNA 또는 성숙된 mRNA의 상보적 염기서열에 결합(혼성화)하여 DNA에서 단백질로서 유전정보의 흐름을 방해하는 것이다. The antisense nucleotide binds (hybridizes) to a complementary base sequence of DNA, immature-mRNA or mature mRNA, as defined in the Watson-Crick base pair, to interfere with the flow of genetic information as a protein in DNA will be.
상기 siRNA는 상기 효소를 암호화하는 유전자의 mRNA의 염기서열 내에서 선택되는 15 내지 30머(mer)의 센스 서열 및 상기 센스 서열에 상보적으로 결합하는 안티센스 서열로 구성된다.The siRNA comprises a sense sequence of 15 to 30 mers selected in the nucleotide sequence of the mRNA of the gene encoding the enzyme and an antisense sequence complementarily binding to the sense sequence.
상기 펩티드 모방체(Peptide mimetics)는 시알화 Tn 당쇄 항원을 합성하는 효소를 억제하여 시알화 Tn 당쇄의 발현을 억제하는 것이다. 펩티드 모방체는 펩티드 또는 비펩티드일 수 있고, psi 결합과 같은, 비펩티드 결합에 의해 결합된 아미노산으로 구성될 수 있다. 또한, "구조적으로 강제된(conformationally constrained)" 펩티드, 사이클릭 모방체(cyclic mimetics), 적어도 하나의 엑소사이클릭 도메인(exocyclic domain), 결합 부분(결합 아미노산) 및 활성 부위를 포함하는 사이클릭 모방체일 수 있다. The peptide mimetics inhibit the synthesis of sialylated Tn sugar chain antigens and inhibit the expression of sialylated Tn sugar chains. Peptide mimetics can be peptides or non-peptides and can be composed of amino acids joined by non-peptide bonds, such as psi bonds. Also included within the scope of the present invention are "conformationally constrained" peptides, cyclic mimetics, at least one exocyclic domain, a binding moiety (binding amino acid) Can be.
상기 앱타머(aptamer)는 단일 사슬 DNA 또는 RNA 분자로서, SELEX(systematic evolution of ligands by exponential enrichment)라 불리는 올리고 뉴클레오티드 (oligonucleotide) 라이브러리를 이용한 진화적인 방법에 의해 특정 화학 분자나 생물학적 분자에 높은 친화력과 선별력을 갖고 결합하는 올리고머를 분리하여 수득할 수 있다. 앱타머는 표적에 특이적으로 결합하고 표적의 활성을 조정할 수 있는데, 예컨대, 결합을 통하여 표적의 기능을 차단할 수 있다. The aptamer is a single-chain DNA or RNA molecule, which has high affinity for a specific chemical molecule or biological molecule by an evolutionary method using an oligonucleotide library called SELEX (systematic evolution of ligands by exponential enrichment) Can be obtained by separating oligomers that bind with selectivity. Aptamers can specifically bind to a target and modulate the activity of the target, for example, by blocking the function of the target through binding.
상기 항체는 시알화 Tn 당쇄 항원 또는 이를 발현하는 효소에 특이적이고 직접적으로 결합하여 시알화 Tn 당쇄 항원의 활성 또는 효소의 활성을 효과적으로 억제할 수 있다. 상기 항체는 폴리클로날(polyclonal) 항체 또는 모노클로날(monoclonal) 항체를 사용하는 것이 바람직하다. 상기 항원 또는 이를 발현하는 효소에 특이적으로 결합하는 항체는 당업자에게 알려진 공지의 방법으로 제작하여도 무방하며, 상업적으로 알려진 항체를 구입하여 사용할 수 있다. 상기 항체는 당업자에게 알려진 종래 방법에 따라 면역원인 시알화 Tn 당쇄 항원 또는 이를 발현하는 효소를 외부 숙주에 주사함으로써 제조될 수 있다. 외부 숙주는 마우스, 랫트, 양, 토끼와 같은 포유동물을 포함한다. 면역원은 근육 내, 복강 내 또는 피하 주사방법으로 주사되며, 일반적으로 항원성을 증가시키기 위한 보조제(adjuvant)와 함께 투여할 수 있다. 외부 숙주로부터 정기적으로 혈액을 채취하여 형성된 역가 및 항원에 대한 특이성을 보이는 혈청을 수거하여 항체를 분리할 수 있다.
The antibody can specifically and directly bind to a sialylated Tn sugar chain antigen or an enzyme expressing the sialylated Tn sugar chain antigen, thereby effectively inhibiting the activity of the sialylated Tn sugar chain antigen or the activity of the enzyme. The antibody is preferably a polyclonal antibody or a monoclonal antibody. The antibody specifically binding to the antigen or the enzyme expressing the antigen may be prepared by a known method known to those skilled in the art, and commercially available antibodies may be purchased and used. The antibody may be prepared by injecting an immunogen-causing sialylated Tn sugar chain antigen or an enzyme expressing it into an external host according to conventional methods known to those skilled in the art. External hosts include mammals such as mice, rats, sheep, and rabbits. The immunogen may be injected intramuscularly, intraperitoneally or by subcutaneous injection, and may generally be administered with an adjuvant to increase the antigenicity. Blood can be collected periodically from the external host and the antibody formed can be collected by collecting sera showing specificity to the antigen and the titer formed.
또한, 본 발명은 시알화 Tn 당쇄 항원 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 상기 시알화 Tn 당쇄 항원의 활성화제를 유효성분으로 포함하는, 임신촉진 용 약학적 조성물 및 임신 촉진용 식품 조성물을 제공한다.
Further, the present invention provides a pharmaceutical composition for promoting pregnancy and a food composition for promoting pregnancy, which comprises the sialylated Tn sugar chain antigen or a pharmaceutically acceptable salt thereof or an activator of the sialylated Tn sugar chain antigen as an active ingredient do.
본 발명의 조성물은 투여를 위하여, 상기 기재한 유효성분 이외에 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다. 상기 담체, 보형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.The composition of the present invention may contain, for administration, a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent in addition to the above-described effective ingredients. The carrier, the beating agent and the diluent include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methylcellulose, microcrystalline cellulose , Polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate, and mineral oil.
본 발명의 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등 의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사 용액의 형태로 제형화하여 사용할 수 있다. 상세하게는, 제형화할 경우 통상 사용하는 충진제, 중량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제로는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 이러한 고형제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트, 수크로오스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 첨가하여 조제될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 과제를 포함한다. 비수성 용제 및 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 오일, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로솔, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.The composition of the present invention may be formulated in the form of oral, granule, tablet, capsule, suspension, emulsion, syrup, aerosol or the like oral preparation, external preparation, suppository or sterilized injection solution according to a conventional method. In detail, when formulating, it can be prepared by using diluents or excipients such as fillers, weighing agents, binders, humectants, disintegrants, surfactants and the like which are generally used. Solid formulations for oral administration include, but are not limited to, tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like. Such a solid preparation may be prepared by mixing at least one excipient, for example, starch, calcium carbonate, sucrose, lactose, gelatin, etc., in the above compound. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc may also be used. Liquid preparations for oral administration, liquid paraffin, and various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, preservatives and the like. Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations and tasks. Non-aqueous solvents and suspensions may include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, injectable esters such as ethyl oleate, and the like. As a base for suppositories, it is possible to use witepsol, macrosole, tween 61, cacao paper, laurin, glycerogelatin and the like.
본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구투여(예를 들어, 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)할 수 있으며, 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여 경로 및 시간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 상기 화합물의 일일 투여량은 바람직하게는 0.001 ㎍/kg 내지 1000 mg/kg이며, 필요에 따라 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다.
The composition of the present invention may be administered orally or parenterally (for example, intravenously, subcutaneously, intraperitoneally or topically) depending on the desired method, and the dose may be determined depending on the condition and weight of the patient, The mode of administration, the route of administration, and the time, but may be suitably selected by those skilled in the art. The daily dose of the compound is preferably 0.001 占 퐂 / kg to 1000 mg / kg, and may be administered once to several times per day as needed.
본 발명의 식품 조성물은 식품학적으로 허용된 담체와 혼합하여 식품 조성물로서 제공될 수 있다. 유효성분은 전체 식품 조성물에 대해 0.01 내지 99.99% 중량비로 포함되는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.The food composition of the present invention can be provided as a food composition by mixing with a pharmaceutically acceptable carrier. The active ingredient is preferably contained in a weight ratio of 0.01 to 99.99% with respect to the whole food composition, but is not limited thereto.
본 발명의 유효성분을 식품 또는 음료 첨가물로 사용할 경우, 상기 유효성문을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 상기 유효성분의 혼합양은 그의 사용목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적절하게 조절하여 결정될 수 있다.When the active ingredient of the present invention is used as a food or beverage additive, it may be added as it is or may be used together with other food or food ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method. The amount of the active ingredient to be mixed may be determined by suitably adjusting the amount of the active ingredient according to its intended use (prevention, health or therapeutic treatment).
건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취인 경우, 본 발명의 식품 조성물은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에, 장기간 복용이 가능하다.For long-term consumption intended for health or hygiene purposes or for health control purposes, the food composition of the present invention has no problem in terms of safety and can be taken for a long period of time.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿류, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있다. 음료수로 제형화할 경우에 상기 식품 조성물 이외에 첨가되는 액체 성분은 한정되지 않으나, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.There is no particular limitation on the kind of the food. Examples of the food to which the above substances can be added include meat, sausage, bread, chocolate, candy, snack, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, dairy products including ice cream, various soups, drinks, tea, , Alcoholic beverages and vitamin complexes. When formulated into beverage, the liquid ingredient to be added in addition to the above-mentioned food composition is not limited, but may include various flavors or natural carbohydrates such as ordinary beverages as an additional ingredient.
상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드(예를 들면, 포도당, 과당 등), 디사카라이드(예를 들면, 말토오스, 수크로오스 등) 및 폴리사카라이드(예를 들면, 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당), 및 자일리톨, 소르비톨, 에리스리톨 등의 당 알코올이다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마린, 스테비아 추출물) 및 합성 향미제(예를 들면, 사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.Examples of the above-mentioned natural carbohydrates include, but are not limited to, monosaccharides (e.g., glucose and fructose), disaccharides (e.g., maltose, sucrose, etc.), and polysaccharides (e.g., dextrin, cyclodextrin, Phosphorus), and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. The ratio of the natural carbohydrate is generally about 1 to 20 g, preferably about 5 to 12 g per 100 ml of the composition of the present invention. Natural flavors (taumarin, stevia extract) and synthetic flavorings (e.g., saccharin, aspartame, etc.) other than those described above can be used.
본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 중점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 또한 본 발명의 식품 조성물은 과일 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 단독으로 또는 조합으로 사용될 수 있으며, 이러한 첨가제의 비율은 조성물 전체 중량당 0.001 내지 50 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
The food composition of the present invention can be used as a flavoring agent such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors, colorants and enhancers (cheese, chocolate etc.), pectic acid and salts thereof, PH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonating agents used in carbonated drinks, and the like. The food composition of the present invention may also contain pulp for the production of fruit and vegetable drinks. These components may be used singly or in combination, and the proportion of such additives is generally selected in the range of 0.001 to 50 parts by weight based on the total weight of the composition.
또한, 본 발명의 다른 양상은 시알화 Tn 당쇄 항원을 포함하는 임신 여부, 임신 가능성 또는 임신 효율 측정용 마커 조성물을 제공한다. 또한 또한 본 발명의 다른 양상은 시알화 Tn 당쇄 항원을 측정할 수 있는 제제를 포함하는, 임신 여부, 임신 가능성 또는 임신 효율 측정용 조성물을 제공한다. 상기 시알화 Tn 당쇄 항원을 측정할 수 있는 제제는 항원 자체, 및 상기 항원을 합성하는 효소를 측정할 수 있는 제제를 모두 포함하는 개념이다. Further, another aspect of the present invention provides a marker composition for measuring pregnancy, pregnancy possibility, or pregnancy efficiency comprising a sialylated Tn glycoprotein antigen. Still another aspect of the present invention also provides a composition for measuring pregnancy, pregnancy possibility or pregnancy efficiency, comprising a preparation capable of measuring sialylated Tn glycoprotein antigen. The agent capable of measuring the sialylated Tn sugar chain antigen includes both an antigen itself and an agent capable of measuring an enzyme synthesizing the antigen.
상기 제제는 항원 자체 발현 수준, 상기 항원을 합성하는 효소의 mRNA 발현 수준 및 효소의 발현 수준을 측정할 수 있다. The agent may measure an antigen self-expression level, an mRNA expression level of an enzyme synthesizing the antigen, and an expression level of an enzyme.
“mRNA 발현 수준 측정”이란 시알화 Tn 당쇄 항원을 합성하는 효소의 mRNA 존재 여부와 발현 정도를 확인하는 과정으로, mRNA의 양을 측정하여 이루어진다. 이를 위한 분석 방법으로는 예를 들어, 역전사 중합효소반응(RT-PCR), 경쟁적 역전사 중합효소반응(Competitive RT-PCR), 실시간 역전사 중합효소반응(Realtime RT-PCR), RNase 보호 분석법(RPA; RNase protection assay), 노던 블랏팅(Northern blotting), DNA 칩 등이 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명에서 유전자의 mRNA 수준을 측정하는 제제는 바람직하게는 안티센스 올리고뉴클레오티드, 프라이머 쌍 또는 프로브이다.&Quot; Measurement of mRNA expression level " is a process of confirming the presence and expression level of an mRNA of an enzyme synthesizing a sialylated Tn sugar chain antigen and measuring the amount of mRNA. For example, RT-PCR, competitive RT-PCR, real-time RT-PCR, and RNase protection assay (RPA). RNase protection assay, Northern blotting, DNA chip, and the like. The agent for measuring the mRNA level of a gene in the present invention is preferably an antisense oligonucleotide, a primer pair or a probe.
본 발명에서 "프라이머"는 짧은 자유 3말단 수산화기를 가지는 핵산 서열로 상보적인 템플레이트(template)와 염기쌍을 형성할 수 있고 템플레이트 가닥 복사를 위한 시작 지점으로 기능을 하는 짧은 핵산 서열을 의미한다. 프라이머는 적절한 완충용액 및 온도에서 중합반응(즉, DNA 중합효소 또는 역전사효소)을 위한 시약 및 상이한 4가지 뉴클레오사이드 트리포스페이트의 존재하에서 DNA 합성이 개시할 수 있다."Primer" in the present invention means a short nucleic acid sequence capable of forming a base pair with a complementary template with a short free 3-terminal hydroxyl group and serving as a starting point for template strand copying. Primers can initiate DNA synthesis in the presence of reagents and four different nucleoside triphosphates for polymerization reactions (i. E., DNA polymerase or reverse transcriptase) at appropriate buffer solutions and temperatures.
본 발명에서 "프로브"란 mRNA와 특이적 결합을 이룰 수 있는 짧게는 수 염기 내지 길게는 수백 염기에 해당하는 RNA 또는 DNA 등의 핵산 단편을 의미하며 표지(Labelling)되어 있어서 특정 mRNA의 존재 유무를 확인 할 수 있다. 프로브는 올리고 뉴클레오티드 프로브, 단쇄 DNA(single stranded DNA) 프로브, 이중쇄 DNA(double stranded DNA) 프로브, RNA 프로브 등의 형태로 제작될 수 있다. 적당한 프로브의 선택 및 혼성화 조건은 당업계에 공지된 것을 기초로 변형할 수 있다.The term "probe" in the present invention means a nucleic acid fragment such as RNA or DNA corresponding to a few nucleotides or hundreds of nucleotides that can specifically bind to mRNA and is labeled so that presence or absence of a specific mRNA Can be confirmed. The probe can be produced in the form of an oligonucleotide probe, a single stranded DNA probe, a double stranded DNA probe, or an RNA probe. Selection of suitable probes and hybridization conditions can be modified based on what is known in the art.
본 발명의 안티센스 올리고뉴클레오티드, 프라이머 또는 프로브는 포스포르 아미다이트 고체 지지체 방법, 또는 기타 널리 공지된 방법을 사용하여 화학적으로 합성할 수 있다. 이러한 핵산 서열은 또한 당해 분야에 공지된 많은 수단을 이용하여 변형시킬 수 있다. 이러한 변형의 비-제한적인 예로는 메틸화, 캡화, 천연 뉴클레오티드 하나 이상의 동족체로의 치환, 및 뉴클레오티드 간의 변형, 예를 들면, 하전되지 않은 연결체(예: 메틸 포스포네이트, 포스포트리에스테르, 포스포로아미 데이트, 카바메이트 등) 또는 하전된 연결체(예: 포스포로티오에이트, 포스포로디티오에이트 등)로의 변형이 있다.
The antisense oligonucleotides, primers or probes of the present invention can be chemically synthesized using the phosphoramidite solid support method, or other well-known methods. Such nucleic acid sequences may also be modified using many means known in the art. Non-limiting examples of such modifications include, but are not limited to, methylation, capping, substitution with one or more of the natural nucleotide analogs, and modifications between nucleotides, such as uncharged linkers (e.g., methylphosphonate, phosphotriester, Amidates, carbamates, etc.) or charged linkages (e.g., phosphorothioates, phosphorodithioates, etc.).
본 발명에서 시알화 Tn 당쇄 항원 또는 시알화 Tn 당쇄 항원을 합성하는 효소의 존재 여부와 발현 정도를 확인할 수 있다. 이는 상기 항원 또는 효소의 양을 측정하여 이루어진다. 이를 위한 분석 방법으로는 웨스턴 블랏, ELISA (enzyme linked immunosorbent assay), 방사선면역분석(RIA: Radioimmunoassay), 방사 면역 확산법 (radioimmunodiffusion), 오우크테로니(Ouchterlony) 면역확산법, 로케트(rocket) 면역전기영동, 조직면역 염색, 면역침전 분석법(Immunoprecipitation Assay), 보체 고정 분석법(Complement Fixation Assay), 유세포분석 (Fluorescence Activated Cell Sorter, FACS), 단백질 칩(protein chip) 등이 있으나 이로 제한되는 것은 아니다. 본 발명에서 단백질 발현 수준을 측정하는 제제는 바람직하게는 항체이다.
In the present invention, the presence and the degree of expression of an enzyme synthesizing a sialylated Tn sugar chain antigen or a sialylated Tn sugar chain antigen can be confirmed. This is done by measuring the amount of the antigen or enzyme. Examples of the assay methods include Western blotting, enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), radioimmunoassay (RIA), radioimmunodiffusion, Ouchterlony immunodiffusion, rocket immunoelectrophoresis But are not limited to, tissue immuno staining, immunoprecipitation assays, complement fixation assays, fluorescence activated cell sorters (FACS), protein chips, and the like. The agent for measuring the protein expression level in the present invention is preferably an antibody.
또한, 본 발명은 상기 측정용 조성물을 포함하는 임신 여부, 임신 가능성 또는 임신 효율 측정 또는 진단용 키트를 제공할 수 있다. 본 발명의 키트는 상기 효소의 mRNA, 및 항원 및 효소의 발현 여부 및 수준을 확인함으로써 임신 가능성 및 임신 효율을 진단을 할 수 있다. 본 발명의 키트에는 분석 방법에 적합한 한 종류 또는 그 이상의 다른 구성 성분 조성물, 용액, 또는 장치가 더 포함될 수 있으며, 바람직하게는 RT-PCR 키트, 마이크로어레이 칩 키트, DNA 칩 키트, 단백질 칩 키트의 형태일 수 있으나 이에 제한되지 않는다.In addition, the present invention can provide a kit for measuring or diagnosing pregnancy, pregnancy possibility or pregnancy efficiency including the composition for measurement. The kit of the present invention can diagnose the possibility of pregnancy and the efficiency of pregnancy by confirming the mRNA of the enzyme, the expression level and the level of the antigen and the enzyme. The kit of the present invention may further include one or more other component compositions, solutions, or devices suitable for the assay, preferably RT-PCR kits, microarray chip kits, DNA chip kits, protein chip kits But is not limited thereto.
구체적인 일례로서, 본 발명에서 mRNA 발현 수준을 측정하기 위한 키트는 RT-PCR을 수행 하기 위해 필요한 필수 요소를 포함하는 키트일수 있다. RT-PCR 키트는 마커 유전자에 대한 특이적인 각각의 프라이머 쌍 외에도 테스트 튜브 또는 다른 적절한 컨테이너, 반응 완충액, 데옥시뉴클레오티드(dNTPs), Taq-중합효소 및 역전사효소와 같은 효소, DNase, RNase 억제제, DEPC-물(DEPC-water), 멸균수 등을 포함할 수 있다.As a specific example, a kit for measuring mRNA expression level in the present invention may be a kit containing necessary elements necessary for performing RT-PCR. RT-PCR kits contain enzymes such as test tubes or other appropriate containers, reaction buffers, deoxynucleotides (dNTPs), Taq-polymerase and reverse transcriptase, DNase, RNase inhibitors, DEPC Water (DEPC-water), sterile water, and the like.
또한, 본 발명의 키트는 마이크로어레이를 수행하기 위해 필요한 필수 요소를 포함하는 키트일 수 있다. 마이크로어레이 키트는, 유전자 또는 그의 단편에 해당하는 cDNA가 프로브로 부착되어 있는 기판을 포함하고 기판은 정량 대조구 유전자 또는 그의 단편에 해당하는 cDNA를 포함할 수 있으며, 본 발명의 마커를 이용하여 당업계에서 통상적으로 사용되는 제조 방법에 의하여 용이하게 제조될 수 있다. 마이크로어레이를 제작하기 위해서, 상기 탐색된 마커를 탐침 DNA 분자로 이용하여 DNA 칩의 기판상에 고정화시키기 위해 파이조일렉트릭 (piezoelectric) 방식을 이용한 마이크로피펫팅(micropipetting)법 또는 핀(pin) 형태의 스폿터(spotter)를 이용한 방법 등을 사용하는 것이 바람직하나 이에 제한되지 않는다. 상기 마이크로어레이 칩의 기판은 아미노-실란(amino-silane), 폴리-L-라이신(poly-Llysine) 및 알데히드(aldehyde)로 이루어진 군에서 선택되는 활성기가 코팅된 것이 바람직하나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 상기 기판은 슬라이드 글래스, 플라스틱, 금속, 실리콘, 나일론 막 및 니트로셀룰로스 막(nitrocellulose membrane)으로 이루어진 군에서 선택되는 것이 바람직하나 이에 제한되지 않는다.In addition, the kit of the present invention may be a kit including essential elements necessary for performing the microarray. The microarray kit may include a substrate to which a cDNA corresponding to a gene or a fragment thereof is attached as a probe and the substrate may include a cDNA corresponding to a quantitative control gene or a fragment thereof, Can be easily produced by a production method commonly used in the art. In order to fabricate a microarray, a micropipetting method using a piezo electric method or a micropipetting method using a pin-shaped method to immobilize the detected marker on a substrate of a DNA chip using the probe as a probe DNA molecule A method using a spotter or the like is preferably used, but the present invention is not limited thereto. The substrate of the microarray chip is preferably coated with an activator selected from the group consisting of amino-silane, poly-L-lysine and aldehyde, but is not limited thereto. In addition, the substrate is preferably selected from the group consisting of slide glass, plastic, metal, silicon, nylon film, and nitrocellulose membrane, but is not limited thereto.
또한, 본 발명의 키트는 DNA 칩을 수행하기 위해 필요한 필수 요소를 포함하는 키트일 수 있다. DNA 칩 키트는 유전자 또는 그의 단편에 해당하는 cDNA 또는 올리고뉴클레오티드(oligonucleotide)가 부착되어 있는 기판, 및 형광표식 프로브를 제작하기 위한 시약, 제제, 효소 등을 포함할 수 있다. 또한 기판은 대조군 유전자 또는 그의 단편에 해당하는 cDNA 또는 올리고뉴클레오티드를 포함할 수 있다.
In addition, the kit of the present invention may be a kit containing essential elements necessary for performing a DNA chip. The DNA chip kit may include a substrate to which a cDNA or oligonucleotide corresponding to a gene or a fragment thereof is attached, and reagents, preparations, enzymes, and the like for producing a fluorescent-labeled probe. The substrate may also comprise a cDNA or oligonucleotide corresponding to a control gene or fragment thereof.
또한, 본 발명의 일 양상은 임의의 물질인 후보물질을 세포에 처리하는 단계;In addition, one aspect of the present invention is a method for treating a cell, comprising: treating a cell with a candidate substance, which is an arbitrary substance;
상기 세포에서 시알화 Tn 당쇄 항원의 발현을 측정하는 단계를 포함하는, 불임 또는 난임 치료제, 또는 피임제 후보물질의 스크리닝 방법을 제공한다. And measuring the expression of the sialylated Tn glycosylated antigen in the cell, or a method for screening a contraceptive candidate substance.
상기 시알화 Tn 당쇄 항원의 발현 측정은 시알화 Tn 당쇄 항원 자체의 발현, 또는 시알화 Tn 당쇄 항원을 합성하는 효소의 발현, 또는 상기 효소의 mRNA 발현 수준을 측정함으로써 수행할 수 있다. The expression of the sialylated Tn sugar chain antigen can be measured by expressing the sialylated Tn sugar chain antigen itself, or expressing an enzyme synthesizing a sialylated Tn sugar chain antigen, or measuring the mRNA expression level of the enzyme.
본 발명에서 mRNA 발현 수준을 측정하는 방법은 역전사 중합효소반응(RT-PCR), 경쟁적 역전사 중합효소반응 (Competitive RT-PCR), 실시간 역전사 중합효소반응(Realtime RT-PCR), RNase 보호 분석법(RPA; RNase protection assay), 노던 블랏팅(Northern blotting), DNA 칩 등이 있으나 이에 제한되지 않는다.Methods for measuring mRNA expression levels in the present invention include RT-PCR, competitive RT-PCR, real-time RT-PCR, RNase protection assay (RPA RNase protection assay, Northern blotting, DNA chip, and the like.
본 발명에서 항원 또는 이를 합성하는 효소의 발현 수준을 측정하기 위한 방법은 웨스턴 블랏, ELISA (enzyme linked immunosorbent assay), 방사선면역분석(RIA: Radioimmunoassay), 방사 면역 확산법(radioimmunodiffusion), 오우크테로니 (Ouchterlony) 면역확산법, 로케트(rocket) 면역전기영동, 조직면역 염색, 면역침전 분석법In the present invention, the method for measuring the expression level of an antigen or an enzyme synthesizing the antigen may be Western blot, enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), radioimmunoassay (RIA), radioimmunodiffusion, Immunoprecipitation, Rocket Immunoelectrophoresis, Tissue Immunostaining, Immunoprecipitation Assay
(Immunoprecipitation Assay), 보체 고정 분석법(Complement Fixation Assay), 유세포분석(Fluorescence Activated Cell Sorter, FACS), 단백질 칩(protein chip) 등이 있으나 이에 제한되지 않는다.But are not limited to, immunoprecipitation assays, complement fixation assays, fluorescence activated cell sorters (FACS), protein chips, and the like.
상기 시알화 Tn 당쇄 항원의 발현이 정상세포보다 증가한 경우, 상기 후보물질은 불임 또는 난임 치료제의 후보물질일 수 있으며, 상기 시알화 Tn 당쇄 항원의 발현이 정상세포보다 감소한 경우, 상기 후보물질은 피임제의 후보물질일 수 있다.
When the expression of the sialylated Tn sugar chain antigen is higher than that of a normal cell, the candidate substance may be a candidate substance for an infertility or an opioid therapeutic agent. If the expression of the sialylated Tn sugar chain antigen is lower than that of a normal cell, Lt; / RTI >
본 발명에 따른 시알화 Tn 항원은 임신의 착상과 깊은 관련성이 있는 바, 불임치료제 또는 피임제로 사용될 수 있으며, 이를 이용하여 임신 가능성 또는 임신 효율을 측정할 수 있고, 더욱이 불임치료제 또는 피임제의 스크리닝 방법으로 이용가능하다.Since the sialylated Tn antigen according to the present invention is closely related to the implantation of pregnancy, it can be used as an infertility treatment agent or a contraceptive agent, and the pregnancy possibility or the pregnancy efficiency can be measured using the sialylated Tn antigen. Further, Lt; / RTI >
도 1은 시알화 Tn 당쇄 항원의 화학적 구조를 나타낸 것이다.
도 2는 백혈병억제인자에 의한 ST6GalNAc1 유전자의 및 시알화 Tn 당쇄항원의 발현 증가를 나타낸 것이다.
도 3은 백혈병억제인자에 의하여 증가된 자궁내막세포와 영양막세포(trophoblast)의 결합을 시알화 Tn 항원에 대한 항체의 처리에 의하여 감소됨을 나타낸 것이다.
도 4는 백혈병저해인자에 의하여 증가된 자궁내막세포와 영양막세포의 결합이 시알화 Tn 당쇄항원의 처리에 의하여 감소됨을 나타낸 것이다.
도 5는 시알화 Tn 당쇄항원을 합성하는 유전자인 ST6GalNAc1 유전자의 발현을 억제한 자궁내막세포주는 영양막세포주와의 결합능력이 저해됨을 나타낸 것이다.
그림 6은 백혈병억제인자 수용체의 길항제(antagonist)의 처리에 의하여 자궁내막 세포주에서 ST6GalNAc1 유전자의 발현과 STAT3의 인산화가 억제되고 시알화 Tn 당쇄항원의 발현이 줄어들며, 결과적으로 자궁내막세포와 영양막세포의 결합이 저해됨을 나타낸 것이다. Figure 1 shows the chemical structure of sialylated Tn sugar chain antigens.
Figure 2 shows the expression of the ST6GalNAc1 gene and sialylated Tn glycated antigen by leukemia inhibitory factor.
FIG. 3 shows that binding of endometrial cells and trophoblasts, which are increased by leukemia inhibitory factors, is reduced by treatment of antibodies against sialylated Tn antigen.
FIG. 4 shows that the binding of endometrial cells and trophoblast cells increased by leukemia inhibitory factor was reduced by treatment with sialylated Tn glycoconjugate antigen.
FIG. 5 shows that the endometrial cell line inhibiting the expression of the ST6GalNAc1 gene, which is a gene synthesizing a sialylated Tn sugar chain antigen, is inhibited in binding to the trophoblast cell line.
Figure 6 shows that ST6GalNAc1 gene expression and STAT3 phosphorylation are suppressed and the expression of sialylated Tn glycoconjugate antigen is reduced in endometrial cell line by treatment with an antagonist of leukemia inhibitory factor receptor and consequently endometrial cells and trophoblast cells Binding is inhibited.
이하 본 발명은 실시 예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시 예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시 예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples. However, these examples are for illustrative purposes only, and the scope of the present invention is not limited to these examples.
실시예 1: 백혈병억제인자에 의한 ST6GalNAc1 유전자 및 시알화 Tn 당쇄항원의 발현 증가 확인 Example 1: Increased expression of ST6GalNAc1 gene and sialylated Tn glycoprotein by leukemia inhibitory factor
자궁내막세포에서의 ST6GalNAc1 유전자 및 시알화 Tn 당쇄항원의 발현 양상을 확인하기 위하여, 인간 자궁내막세포주인 ECC-1 세포에 백혈병억제인자를 25, 50 ng/ml의 농도로 처리하였다. 그 결과를 도 2에 나타내었다. 또한, ST6GalNAc1 유전자의 발현을 RT-PCR로 분석하였으며, 시알화 Tn 항원의 발현 여부를 유세포분석(FACS) 방법으로 확인하였다. In order to confirm the expression pattern of ST6GalNAc1 gene and sialylated Tn sugar chain antigen in endometrial cells, leukemia inhibitory factor was treated at a concentration of 25, 50 ng / ml in human endometrial cell line ECC-1 cells. The results are shown in Fig. In addition, the expression of ST6GalNAc1 gene was analyzed by RT-PCR and the expression of sialylated Tn antigen was confirmed by flow cytometry (FACS).
상기 PCR에 사용된 프라이머의 염기서열은 하기와 같다.The base sequence of the primer used in the PCR is as follows.
도 2에 나타난 바와 같이, 백혈병억제인자의 처리는 시알화 Tn 당쇄항원을 합성하는 효소인 ST6GalNAc1 유전자의 발현이 증가하는 것을 RT-PCR 방법으로 확인하였다 (A). 또한, 시알화 Tn 항원이 발현되는 것을 FITC 형광이 표지된 시알화 Tn 항원에 특이적인 항체(Abcam사의 ab76756, Clone no. STn219-FITC)를 이용하여 유세포분석(FACS) 방법으로 확인하였다 (B).
As shown in FIG. 2, the expression of the ST6GalNAc1 gene, an enzyme synthesizing sialylated Tn sugar chain antigens, was increased by the RT-PCR method (A). In addition, the expression of sialylated Tn antigen was confirmed by flow cytometry (FACS) using an antibody specific for sialylated Tn antigen (ab76am, ab76756, Clone no. STn219-FITC) .
실시예 2: 자궁내막세포와 영양막세포(trophoblast)의 결합에 있어서, 시알화 Tn 항원의 역할 확인Example 2: The role of sialylated Tn antigen in binding endometrial cells and trophoblasts
자궁내막세포와 영양막세포의 결합에서 시알화 Tn 항원의 역할을 확인하기 위하여, 시알화 Tn 항원에 대한 항체(Abcam사의 ab76754, Clone no. STn219)를 처리하였다. 구체적으로, 자궁내막세포주인 ECC-1 세포를 단일층으로 배양한 후 백혈병억제인자를 48시간 처리하고, 한 군에는 시알화 Tn 항원에 대한 항체를 백혈병억제인자와 함께 처리하였다. ECC-1 세포와 영양막 세포인 JAR 세포와의 결합을 측정하기 위하여, 형광물질로 표지된 JAR 세포를 ECC-1 단일층 위에 추가한 후 30분간 40 rpm의 속도로 교반하여 배양하였다. ECC-1과 결합하지 않은 JAR 세포를 제거하기 위하여 인산염완충용액(PBS)으로 세척한 후 형광을 나타내는 JAR 세포의 수를 형광현미경으로 확인하였다. 그 결과를 도 3에 나타내었다.To confirm the role of sialylated Tn antigen in binding endometrial cells and trophoblast cells, an antibody against sialylated Tn antigen (Abcam, ab76754, Clone no. STn219) was treated. Specifically, the endometrial cell line ECC-1 cells were cultured in a single layer, and the leukemia inhibitory factor was treated for 48 hours. In one group, antibody against sialylated Tn antigen was treated with a leukemia inhibitor. In order to measure the binding between ECC-1 cells and JAR cells as a trophoblast cell, fluorescently labeled JAR cells were added to the ECC-1 monolayer and cultured for 30 minutes at a speed of 40 rpm. After washing with phosphate buffer (PBS) to remove JAR cells not bound to ECC-1, the number of JAR cells showing fluorescence was confirmed by fluorescence microscopy. The results are shown in Fig.
도 3에 나타난 바와 같이, 백혈병억제인자에 의하여 증가된 자궁내막세포와 영양막세포(trophoblast)의 결합은 시알화 Tn 항원에 대한 항체의 처리에 의하여 감소되는 것을 확인할 수 있었다.
As shown in FIG. 3, it was confirmed that the binding of the endometrial cells and trophoblasts increased by the leukemia inhibitory factor was reduced by the treatment of the antibody against sialylated Tn antigen.
실시예 3: 백혈병저해인자에 의하여 증가된 자궁내막세포와 영양막세포의 결합이 시알화 Tn 당쇄항원의 처리에 의한 감소Example 3: Binding of endometrial cells and trophoblast cells increased by leukemia inhibitory factor by treatment with sialylated Tn glycoconjugate antigen
자궁내막세포주인 ECC-1 세포를 단일층으로 배양한 후 백혈병억제인자를 24시간 처리하고, 동시에 시알화 Tn 당쇄항원을 JAR 세포에 처리하여 ECC-1의 시알화 Tn 당쇄와 결합할 것으로 예상되는 불특정의 시알화 Tn 당쇄항원에 대한 세포표면 수용체를 차단시켰다. 그 후에 ECC-1세포와 JAR 세포와의 결합을 측정하기 위하여 형광물질로 표지된 JAR 세포를 ECC-1 단일층 위에 추가한 후 30분간 40 rpm의 속도로 교반하여 배양하였다. ECC-1과 결합하지 않은 JAR 세포를 제거하기 위하여 인산염완충용액(PBS)으로 세척한 후 형광을 나타내는 JAR 세포의 수를 형광현미경으로 확인하였다. 그 결과를 도 4에 나타내었다.It is anticipated that ECC-1 cells, an endometrial cell line, will be cultured as a single layer, treated with leukemia inhibitors for 24 hours, and simultaneously treated with sialylated Tn glycoprotein glycoprotein JAR cells to bind to sialylated Tn glycans of ECC-1 Cell surface receptors against unspecified sialylated Tn glycoprotein receptors were blocked. Then, in order to measure the binding between ECC-1 cells and JAR cells, fluorescently labeled JAR cells were added to the ECC-1 monolayer and cultured for 30 minutes at a speed of 40 rpm. After washing with phosphate buffer (PBS) to remove JAR cells not bound to ECC-1, the number of JAR cells showing fluorescence was confirmed by fluorescence microscopy. The results are shown in Fig.
도 4에 나타난 바와 같이, 백혈병저해인자에 의하여 증가된 자궁내막세포와 영양막세포의 결합은 시알화 Tn 당쇄항원의 처리에 의하여 감소함을 확인하였다.
As shown in FIG. 4, it was confirmed that the binding of the endometrial cells and the trophoblast cells increased by the leukemia inhibitory factor was reduced by treatment with the sialylated Tn sugar chain antigen.
실시예 4: ST6GalNAc1 유전자의 발현을 억제한 자궁내막세포주의 영양막 세포주와의 결합력 확인Example 4: Confirmation of binding ability of endometrial cell line inhibiting ST6GalNAc1 gene expression to trophoblast cell line
시알화 Tn 당쇄항원은 ST6GalNAc1 효소에 의하여 합성되기 때문에, 해당 효소의 유전자를 shRNA 기법으로 발현을 억제한 세포주 (shST6GAlNAc1)를 확립하였다. Since the sialylated Tn sugar chain antigens are synthesized by the ST6GalNAc1 enzyme, a cell line (shST6GAlNAc1) inhibiting the expression of the gene of the enzyme by the shRNA technique has been established.
상기 세포주 및 벡터만 주입한 대조군 세포주(pLKO.1)와 영양막세포주와의 결합능력을 확인하였다. 그 결과를 도 5에 나타내었다.The ability of the control cell line (pLKO.1) injected with the cell line and the vector alone to bind the trophoblast cell line was confirmed. The results are shown in Fig.
도 5에 나타난 바와 같이, shRNA 기법으로 발현을 억제한 세포주 (shST6GAlNAc1)와 벡터만 주입한 대조군 세포주(pLKO.1)의 영양막세포주와의 결합능을 비교할 때, 시알화 Tn 당쇄항원을 합성하는 유전자인 ST6GalNAc1 유전자의 발현을 억제한 자궁내막세포주는 영양막세포주와의 결합능력이 저해됨을 확인하였다. 이에 따라서, ST6GalNAc1 유전자의 발현이 억제된 세포주의 경우에는 LIF에 의한 착상증진 효과가 사라진 것이다. 따라서 ST6GalNAc1 유전자의 발현 및 그 효소에 의하여 발현되는 시알화 Tn 당쇄항원이 착상에 중요한 인자임을 알 수 있었다.
As shown in FIG. 5, when comparing the binding ability of the cell line (shST6GAlNAc1) inhibiting expression by the shRNA technique and the control cell line (pLKO.1) injected with the vector only to the trophoblast cell line, the gene for synthesizing a sialylated Tn sugar chain antigen Endometrial cell line inhibiting the expression of ST6GalNAc1 gene was found to be inhibited in binding to the trophoblast cell line. Accordingly, in the case of the cell line in which expression of the ST6GalNAc1 gene was inhibited, the effect of the LIF-induced enhancement was lost. Therefore, expression of ST6GalNAc1 gene and sialylated Tn sugar chain antigen expressed by the enzyme were found to be important factors in implantation.
실시예 5: 백혈병억제인자 수용체의 길항제(antagonist)의 처리에 의한 자궁내막세포와 영양막세포의 결합의 영향 확인Example 5: Confirmation of the effect of binding of endometrial cells and trophoblast cells by treatment with antagonist of leukemia inhibitory factor receptor
Hudson 등(J Biol Chem. 271:11971-11978)의 방법에 의해서 백혈병억제유전자 수용체(LIF-R)의 길항제인 LIF-05를 박테리아에서 발현시켜 정제한 후, ECC-1 세포주에 처리하여 백혈병억제인자의 효과를 억제시킨 후 ST6GalNAc1 유전자의 발현을 RT-PCR을 이용하여 확인하였다. 또한, 백혈병억제인자에 의한 대표적인 하류 신호전달 과정인 STAT3의 인산화를 특이적인 항체를 이용하여 western blot 방법으로 확인하였다.LIF-05, an antagonist of the leukemia inhibitory gene receptor (LIF-R), was purified in bacteria by the method of Hudson et al. (J Biol Chem. 271: 11971-11978) and then treated with ECC-1 cell line to inhibit leukemia After suppressing the effect of the factor, the expression of ST6GalNAc1 gene was confirmed by RT-PCR. In addition, phosphorylation of STAT3, a typical downstream signal transduction pathway by leukemia inhibitory factor, was confirmed by western blot method using specific antibody.
그 결과를 도 6에 나타내었다.The results are shown in Fig.
도 6의 (A)에 나타난 바와 같이, 백혈병억제인자 수용체의 길항제(antagonist)를 처리하는 경우, 자궁내막 세포주에서 ST6GalNAc1 유전자의 발현이 감소하였다. 또한, (B)에 나타난 바와 같이, 백혈병억제인자 수용체의 길항제(antagonist)의 처리에 의하여 STAT3의 인산화가 억제됨을 확인하였다.
As shown in Fig. 6 (A), when the antagonist of the leukemia inhibitory factor receptor was treated, expression of ST6GalNAc1 gene was decreased in the endometrial cell line. Furthermore, as shown in (B), it was confirmed that phosphorylation of STAT3 was inhibited by treatment with an antagonist of leukemia inhibitory factor receptor.
또한 ECC-1 세포주에 백혈병억제인자와 그 수용체의 길항제를 처리한 후 세포 표면에 발현하는 시알화 Tn 당쇄항원의 발현을 FITC가 표지된 시알화 Tn 항원에 특이적인 항체를 이용하여 유세포분석 방법으로 확인하였다. In addition, the expression of sialylated Tn glycoprotein expressed on the cell surface after treatment with leukemia inhibitor and its receptor antagonist in ECC-1 cell line was analyzed by flow cytometry using an antibody specific for sialylated Tn antigen labeled with FITC Respectively.
또한 자궁내막세포와 영양막세포의 결합이 저해되었는지를 확인하기 위하여, 백혈병억제인자와 그 수용체의 길항제를 ECC-1 세포에 처리하고 48시간 후에, 형광물질로 표지된 JAR 세포를 ECC-1 세포 단일층에 추가한 후 30분간 40 rpm으로 교반하였다. 그 후 접착되지 않은 세포를 인산염완충용액으로 세척하여 제거한 후 접착이 일어난 세포만을 형광현미경으로 관찰하였다.In order to confirm whether the binding of endometrial cells and trophoblast cells was inhibited, ECC-1 cells were treated with leukemia inhibitor and its receptor antagonist, and after 48 hours, the JAR cells labeled with fluorescent substance were incubated with ECC-1 cells Layer, followed by stirring at 40 rpm for 30 minutes. Subsequently, the unadhered cells were washed and washed with phosphate buffer solution, and then only the adherent cells were observed under a fluorescence microscope.
그 결과를 도 6에 나타내었다. 도 6의 (C)에 나타난 바와 같이, 백혈병억제인자 수용체의 길항제(antagonist)의 처리에 의하여 시알화 Tn 당쇄항원의 발현이 줄어들며, 결과적으로 자궁내막세포와 영양막세포의 결합이 저해됨을 확인하였다.
The results are shown in Fig. As shown in FIG. 6 (C), the expression of sialylated Tn glycoprotein antigens was reduced by treatment with an antagonist of a leukemia inhibitory factor receptor, and as a result, binding of endometrial cells to trophoblast cells was inhibited.
Claims (21)
[화학식 1]
여기서, 상기 R1은 세린 또는 쓰레오닌이며,
상기 R2는 CH3COHN, OHCH2COHN, 또는 OH이다.The composition of claim 1, wherein the sialylated Tn glycoprotein antigen is of the formula
[Chemical Formula 1]
Wherein R1 is serine or threonine,
Wherein R2 is a CH 3 COHN, OHCH 2 COHN, or OH.
상기 세포에서 시알화 Tn 당쇄 항원의 발현을 측정하는 단계를 포함하는, 불임 또는 난임 치료제 또는 피임제의 후보물질의 스크리닝 방법. Treating the candidate substance with a cell;
And measuring the expression of the sialylated Tn glycosylated antigen in the cell.
21. The screening method according to claim 19, wherein, when the expression of the sialylated Tn glycated antigen is lower than that of a normal cell, the candidate substance is a candidate substance of a contraceptive.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020150056700A KR101720106B1 (en) | 2015-04-22 | 2015-04-22 | Use of Sialyl Tn Antigen Related to Pregnancy |
| PCT/KR2016/004260 WO2016171521A2 (en) | 2015-04-22 | 2016-04-22 | Use of sialylated tn antigen related to pregnancy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020150056700A KR101720106B1 (en) | 2015-04-22 | 2015-04-22 | Use of Sialyl Tn Antigen Related to Pregnancy |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20160125781A KR20160125781A (en) | 2016-11-01 |
| KR101720106B1 true KR101720106B1 (en) | 2017-03-27 |
Family
ID=57144615
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020150056700A KR101720106B1 (en) | 2015-04-22 | 2015-04-22 | Use of Sialyl Tn Antigen Related to Pregnancy |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101720106B1 (en) |
| WO (1) | WO2016171521A2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101873527B1 (en) * | 2016-09-02 | 2018-07-02 | 부산대학교 산학협력단 | Compound for preventing or treating endometriosis comprising sialic acid derivative |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100803289B1 (en) * | 2006-03-17 | 2008-02-13 | 서울향료(주) | A composition comprising medical herbs for infertility |
| CN102007147B (en) * | 2008-06-30 | 2014-11-05 | 协和发酵麒麟株式会社 | Anti-CD27 antibody |
| JP5686431B2 (en) * | 2011-01-28 | 2015-03-18 | 学校法人 京都産業大学 | Ovarian cancer detection method and kit |
| KR101333207B1 (en) * | 2011-07-13 | 2013-11-26 | 부산대학교 산학협력단 | Genetic markers associated with endometriosis and use thereof |
| KR101538047B1 (en) * | 2013-09-12 | 2015-07-21 | 부산대학교 산학협력단 | Composition containing polysacchride-removed Paeonia lactiflora extract for improving pregnancy |
-
2015
- 2015-04-22 KR KR1020150056700A patent/KR101720106B1/en active IP Right Grant
-
2016
- 2016-04-22 WO PCT/KR2016/004260 patent/WO2016171521A2/en active Application Filing
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Role of the human ST6GalNAc-1 and ST6GalNAc-2 in the synthesis of the cancer-associated sialyl-Tn Antigen, cancer research, 2004, vol64, pp. 7050-7057 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101873527B1 (en) * | 2016-09-02 | 2018-07-02 | 부산대학교 산학협력단 | Compound for preventing or treating endometriosis comprising sialic acid derivative |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2016171521A2 (en) | 2016-10-27 |
| WO2016171521A3 (en) | 2016-12-15 |
| WO2016171521A9 (en) | 2017-01-12 |
| KR20160125781A (en) | 2016-11-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5715589B2 (en) | How to diagnose and treat pregnancy complications | |
| JP4942052B2 (en) | Diagnosis of ovarian endometriosis | |
| ES2427136T3 (en) | Methods and means for the treatment of osteoarthritis | |
| US7723289B2 (en) | PIF tetrapeptides | |
| KR101820572B1 (en) | Method for providing the information for chronic myeloid leukemia | |
| IL175063A (en) | Use of pif peptides in the manufacture of a medicament for treating intolerance to embryo implantation | |
| KR101720106B1 (en) | Use of Sialyl Tn Antigen Related to Pregnancy | |
| KR102225039B1 (en) | A pharmaceutical composition for preventing or treating cd8+ memory t cell mediated diseases | |
| KR102101071B1 (en) | Composition for treatment and predicting prognosis of head and neck squamous cell carcinoma | |
| US20160279202A1 (en) | Interleukin-1 (il-1) inhibitors for treating fertility disorders | |
| JP2016079170A (en) | Prophylactic/therapeutic agent for diseases associated with cell migration regulation and disease activity determination/prognosis evaluation of pulmonary interstitial disease | |
| JP2007297282A (en) | Influence caused by midkine when endometriosis appear | |
| KR102479523B1 (en) | Composition for preventing or treating obesity comprising cotl1 inhibitor | |
| WO2022154504A1 (en) | Composition for preventing or treating preeclampsia or eclampsia | |
| JP4553602B2 (en) | Screening method for fertility treatment agent, in vitro fertilization promoting agent and fertility treatment agent | |
| KR102147491B1 (en) | Pharmaceutical composition for preventing or treating infertility or abortion comprising inhibitors of DEPTOR protein or mSIN1 protein as an active ingredient | |
| JP6226315B2 (en) | Inflammatory disease preventive / therapeutic agent and screening method for inflammatory disease prophylactic / therapeutic agent | |
| KR20180113426A (en) | Use of human bitter taste receptor TAS2R8 for the diagnosis and treatment of cancer | |
| WO2022085687A1 (en) | Prophylactic or therapeutic agent for respiratory disease, examination method, examination reagent, method for screening active ingredient of prophylactic or therapeutic agent, and method for evaluating induction or exacerbation | |
| KR20230041128A (en) | Novel Biomarker for Diagnosing or Predicting Prognosis of Charcot-Marie-Tooth Disease Type 1A and Uses Thereof | |
| Yu | ST6GALNAC1-mediated sialylation in uterine endometrial epithelium facilitates the epithelium-embryo attachment | |
| JP6846808B2 (en) | Treatment, diagnosis and screening with CARD14 | |
| KR20200030444A (en) | Composition for preventing or treating behcet's diseases containing cd83 inhibitor | |
| Ma | Carbohydrate receptors, preterm labor, and periodontitis | |
| KR20200034969A (en) | Pharmaceutical composition for preventing or treating infertility or abortion comprising inhibitors of mSIN1 protein as an active ingredient |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| GRNT | Written decision to grant | ||
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20200225 Year of fee payment: 4 |