KR101704589B1 - Composition comprising extracts of Magnolia flower and Magnolia officinlis for preventing or treating periodentitis as an active ingredient - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a pharmaceutical composition comprising an extract of magnolia officinalis with an extract of magnolia liliflora as active ingredients for stimulating growth of dental root and peridental tissues, or for preventing or treating periodontitis. Particularly, it is shown that a mixture of an extract of magnolia officinalis with an extract of magnolia liliflora inhibits activity of nitric oxide (NO) derived with LPS in Raw264.7 cells, inhibits activity of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) to suppress differentiation of osteoclasts, and increases activity of alkaline phosphatase (ALP) in MC3T3 cells to stimulate differentiation of osteoblasts. In addition, it is shown that the mixture shows a high cell growth rate and ALP activity in human peridental ligament cells, and stimulates growth of dental roots and peridental tissues abstracted from mice. Thus, the mixture of an extract of magnolia officinalis with an extract of magnolia liliflora according to the present invention can be used advisably as a composition for stimulating growth of dental roots/ peridental tissues, a pharmaceutical composition for preventing or treating periodontitis, a quasi-drug composition for stimulating growth of dental roots/ peridental tissues or improving periodontitis, a health-aid food for stimulating growth of dental roots/ peridental tissues or improving periodontitis, and a cosmetic composition for stimulating growth of dental roots/ peridental tissues or improving periodontitis.

Description

후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치주조직 성장 촉진용 및 치주염 예방 또는 치료용 약학적 조성물{Composition comprising extracts of Magnolia flower and Magnolia officinlis for preventing or treating periodentitis as an active ingredient}[0001] The present invention relates to a pharmaceutical composition for promoting periodontal growth and preventing or treating periodontal disease, which contains as an active ingredient,

본 발명은 후박 추출물(Magnolia officinlis) 및 신이 추출물(Magnolia flower)의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치주조직 성장 촉진용 및 치주염 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a pharmaceutical composition for promoting periodontal growth and preventing or treating periodontal disease, which comprises a mixture of Magnolia officinlis and Magnolia flower as an active ingredient.

치주조직은 치은(잇몸), 백악질, 치주인대 및 치조골로 구성된 연조직과 경조직을 모두 포함하는 복잡한 기관이다. 치은은 치아의 지지와 저작과정에 관여하는 단순 결합조직인 반면에, 치주인대는 치아와 치조골 사이에 위치하여 치아를 악골에 부착 지지하며, 저작력과 같은 다양한 방향의 기계적 스트레스에 저항하고, 또한 감각기능을 하는 고도로 분화된 세포성 결합조직이다. 이러한 치주인대는 치조골측에 골모세포(osteoblast)와 파골세포(osteoclast), 치주인대의 중심측에 섬유모세포(fibroblast), Malassez 상피세포(epithelial rests of Malassez), 대식세포, 미분화 간엽세포, 신경 요소 그리고 혈관내피세포; 치근측에 위치하고 있는 백악모세포(cementoblasts) 등의 다양한 세포들로 구성되어 치조골, 치근 및 백악질의 수복과 재생에 관여하는 것으로 알려져 있다.Periodontal tissue is a complex organ containing both soft and hard tissues consisting of gingiva (gums), cementum, periodontal ligament and alveolar bone. The gingiva is a simple connective tissue involved in the supporting and chewing process of the teeth, whereas the periodontal ligament is located between the teeth and the alveolar bone to support the teeth to the jaw, to resist mechanical stresses in various directions such as masticatory force, Is a highly differentiated cellular connective tissue. These periodontal ligaments are composed of osteoblasts and osteoclasts on the alveolar bone, fibroblasts on the center of periodontal ligaments, epithelial rests of Malassez, macrophages, undifferentiated mesenchymal cells, And vascular endothelial cells; And cementoblasts located on the root side, and are known to be involved in restoration and regeneration of alveolar bone, root and cementum.

치주 질환은 세균에 의해 야기되는 치아 지지조직의 염증상태를 말하며, 치은염 및 치주염으로 분리할 수 있다. 발병원인은 불량한 구강 위생상태로 인하여 구강 세균이 치면세균막을 형성하는데 있다. 치면세균막이란 침에 있는 끈끈한 물질을 접착제로 이용하여 세균이 치아 표면에 달라붙은 후 증식한 세균덩어리를 말한다. 치면세균막은 그냥 방치해 두면, 염증이 생겨 가끔 잇몸에서 피가 나고, 구취가 나는 경우가 있으며 이러한 증상을 치은염이라고 한다.Periodontal disease refers to the inflammatory state of the tooth supporting tissues caused by bacteria, which can be separated into gingivitis and periodontitis. The cause of the disease is due to the poor oral hygiene state that oral bacteria bite to form a bacterial membrane. Tooth surface bacteria is a bacterial mass that grows after the bacteria stick to the surface of the teeth by using a sticky substance in the needle as an adhesive. If you do not leave the bacterial membrane in the tooth, inflammation occurs, sometimes gum bleeding, bad breath, and sometimes the symptoms of gingivitis is called.

치은염이 더 진행되면, 치아와 잇몸사이의 벌어진 틈이 더 깊어져서 치주낭이 생기고, 여기에 치주질환을 일으키는 세균들이 번식하여 치주염이 발생한다. 치주염이 진행되면 칫솔질과 같은 약한 자극에도 잇몸에서 피가 나기도 하며 붓고, 종종 급성염증으로 변화되어 통증을 유발한다. 이러한 염증은 골을 만드는 기능은 저하시키고, 골을 흡수하는 작용이 높아져서 치조골이 점점 낮아지게 되어 치조골이 파괴되고 결국 치아를 상실하게 된다. 진행된 치주염은 치아 상실을 일으키는데 40세 이후의 성인에 있어서 치아를 뽑게 되는 원인 중 치주염이 차지하는 비율이 40%나 된다는 보고가 있을 정도로 치주염으로 인한 치아상실은 심각한 문제이다. As the gingivitis develops further, the gap between the tooth and the gum becomes deeper, resulting in a periodontal pouch, where germs that cause periodontal disease multiply and periodontitis occurs. As periodontitis progresses, mild irritation, such as brushing, may cause bleeding from the gums and swelling, often causing acute inflammation and pain. Such inflammation lowers the function of making bone and increases the action of absorbing bone, so that the alveolar bone is gradually lowered, causing the alveolar bone to be destroyed and eventually to lose teeth. Progressive periodontitis causes tooth loss. It is reported that the percentage of periodontal disease among the causes of tooth extraction in adults aged 40 years or older is as high as 40%, and tooth loss caused by periodontitis is a serious problem.

치주질환에서 치주인대와 치조골의 파괴는 이들 조직의 주성분인 교원질(collagen)의 분해에 의한 것이다. 이에 대한 정확한 기전(mechanism)은 아직 밝혀져 있지는 않지만, 교원질의 분해는 숙주가 분비하는 콜라게나아제와 치주질환 유발 세균으로부터 분비된 중성 단백질 분해 효소에 의한 것으로 알려져 있다. 따라서 콜라게나아제 효소 및 단백질 분해 효소의 활성을 억제함으로써 치주질환의 진행을 억제하려는 연구가 시도되고 있다.The destruction of periodontal ligament and alveolar bone in periodontal disease is due to the degradation of collagen, which is the main component of these tissues. Although the precise mechanism for this is not yet known, collagen degradation is known to be caused by neutral proteases secreted from host-secreted collagenases and periodontal disease-causing bacteria. Therefore, studies have been made to inhibit the progression of periodontal disease by inhibiting the activities of collagenase and protease.

치주질환의 치료는 환자의 개선된 구강위생의 확립, 비외과적 혹은 외과적인 치석제거술, 치근활택술, 치은소파술과 신부착을 응용한 치주조직의 재생술들이 이용되어져 왔다. 그러나 이런 외과적인 치료 방법은 치료를 위해 치과를 가야 하는 번거로움으로 인해 효과적인 치료가 어렵고 또한 병의 예방보다는 병이 어느정도 진행되었을 경우 행하는 치료에 국한되어 있어, 치료를 하지 않을 경우 대부분이 만성으로 진행되는 경우가 대부분이다. 부가적인 치료로 전신적인 항생제의 복용과 국소 서방형 제재가 사용되어 왔으나, 불필요한 부위에도 약물이 너무 많이 전달되어 그로 인한 부작용과 최근 사용되는 항생제에 대한 내성을 나타내는 치주질환균이 분리된 예가 보고되고 있어 심각한 문제점을 안고 있다. 치주질환으로 인하여 치아가 상실될 경우, 보철치료나 치과 임플란트 치료 등으로 인하여 환자의 부담이 급증하게 되며, 특히, 사회경제적 취약 계층에게 더욱 높은 진료 장벽이 될 수 있다. 따라서, 치아 상실에 이르기 전 손상된 조직을 재생할 수 있다면 치아 상실에 따르는 인공치아 또는 보철과 같은 치료의 수요를 줄여 경제적 사회적 부담을 경감시킬 수 있다.Treatment of periodontal disease has been based on the establishment of improved oral hygiene in patients, non-surgical or surgical calculus removal, root resorption, gingival curettage, and regeneration of periodontal tissue using neoadjuvant. However, these surgical treatment methods are difficult to effectively treat due to the hassle of going to the dentist for treatment, and they are limited to the treatment that is performed when the disease has progressed to some extent rather than the prevention of the disease. . The use of systemic antibiotics and local controlled release agents have been used as adjunctive therapies. However, there has been reported a case in which periodontal disease bacteria, which are resistant to antibiotics recently used, There is a serious problem. If the tooth is lost due to periodontal disease, the burden of the patient will be increased due to the prosthodontic treatment or the dental implant treatment. In particular, it can become a higher medical barrier for socioeconomically vulnerable people. Thus, if the damaged tissue can be regenerated before the tooth loss, the economic and social burden can be alleviated by reducing the demand for treatments such as artificial teeth or prosthesis following tooth loss.

외과적 치료의 한계성과 항생제 사용의 문제점을 보완하고 치주질환 예방 및 치료효과를 향상시키기 위해서는 파괴 및 소실된 치주조직을 원상회복시키는 효능을 지닌 제제의 개발이 절실히 요구되고 있다. 치주조직은 구성 조직 특성이 모두 다르기에 치주질환으로 파괴된 병소를 재생하기 위한 치료는 아직까지 예지성이 있는 결과를 보여주는 것이 많지 않다. 치태, 치석과 같은 염증성 결합조직에 대한 비외과적 혹은 외과적 제거 치료를 통하여 치주 질환은 치유단계에 접어들게 되지만, 상실된 치주 조직은 이러한 전통적인 치료방식을 통해서는 치주 조직 개개 구성요소들의 재생이 아닌 상피조직의 증식으로 불완전한 치유의 결과를 가져오게 된다.In order to overcome the limitations of surgical treatment and the problems of antibiotic use and to improve the prevention and treatment effect of periodontal disease, it is urgently required to develop a preparation having the effect of restoring the damaged and lost periodontal tissue. Because periodontal tissues are different from each other in their constitutional characteristics, the treatment for regenerating lesions that have been destroyed by periodontal disease does not yet show promising results. Although periodontal disease enters the healing phase through non-surgical or surgical removal of inflammatory connective tissue such as plaque and calculus, the loss of periodontal tissue does not lead to regeneration of individual components of periodontal tissue Proliferation of epithelial tissue results in incomplete healing.

골재형성에는 크게 두 종류의 세포가 관여하는 것으로 알려져 있다. 두 세포 중 하나는 뼈를 생성하는 조골세포(osteoblast)이고, 다른 하나는 뼈를 파괴하는 파골세포(osteoclast)이다. 이들은 서로 다른 세포에서 유래하는데 간엽줄기세포(mesenchymal stem cell)가 분화되어 조골세포(osteoblast), 근원세포(myoblast), 지방세포(adipocyte), 섬유아세포(fibroblast), 연골세포(chondrocyte) 등의 세포로 분화되고, 조혈모세포(hematopoietic stem cell)가 분화되어 파골세포(osteoclast), 대식세포(macrophage), T 세포(T cell), B 세포(B cell), 수지상세포(dentritic cell), 호염구(basophile), 호산구(eosinophile), 호중구(neutrophile), 혈소판(platelet), 적혈구(Red blood cell) 등의 세포로 분화된다. 조골세포 주요 분화인자인 Runx2(Runt-related transcription factor 2), 근원세포 주요 분화인자인 MyoD, 지방세포 주요 분화인자인 PPARγ(peroxisome proliferator-activated receptors γ), 연골세포 주요 분화인자인 Sox9 등은 서로의 발현을 억제조절하며 분화를 유도한다(Yamashita S. et al., Exp Cell Res., 315(13), pp.2231-40, 2009, Charles A. et al., Exp Cell Res., 300(2), pp.406-17, 2004, David V. et al., Endocrinology., 148(5), pp.2553-62, 2007, HillTP. et al., Dev Cell., 8(5), pp.727-38, 2005, Wang H. et al., J Bone Miner Res., 23(6), pp.939-48, 2008, Lengner CJ. et al., J Biol Chem., 280(16), pp.15872-9, 2005). 또한 연골세포 분화의 주요 인자인 Sox9은 조골세포의 성숙과 분화를 억제시키고, 조골세포의 분화인자인 Wnt는 Runx2를 촉진시키나 Sox9은 분해시켜 억제시키며 조골세포의 분화인자인 osterix는 연골세포의 분화를 억제한다(Dy P. et al., Dev Cell., 13;22(3), pp.597-609, 2012, Gunil I. et al., 대한류마티스학회지, 15(1), 2008, Tominaga H. et al., J Bone Miner Metab., 27(1), pp.36-45, 2009).It is known that two types of cells are involved in aggregate formation. One of the cells is osteoblast that produces bone, and the other is osteoclast that destroys bone. These cells are derived from different cells, and mesenchymal stem cells are differentiated into cells of osteoblast, myoblast, adipocyte, fibroblast, chondrocyte, etc. And hematopoietic stem cells are differentiated into osteoclasts, macrophages, T cells, B cells, dentritic cells, basophiles, ), Eosinophile, neutrophile, platelet, red blood cell and the like. Run-2 (Runt-related transcription factor 2), MyoD (myoepithelial cell differentiation factor), PPARγ (peroxisome proliferator-activated receptors γ), and Sox9 (Exp. Cell Res., 315 (13), pp. 2231-40, 2009, Charles A. et al., Exp Cell Res., 300 2, pp. 406-17, 2004, David V. et al., Endocrinology., 148 (5), pp.2553-62, 2007, Hill TP. Et al., Dev Cell., 8 , J. Biol. Res., 23 (6), pp.939-48, 2008, Lengner CJ et al., J Biol Chem., 280 (16) pp.15872-9, 2005). In addition, Sox9, which is a major factor of chondrocyte differentiation, inhibits the maturation and differentiation of osteoblasts. Wnt, which is a differentiation factor of osteoblast, promotes Runx2 but inhibits Sox9 by degrading osteoblast. Osterix, (1), 2008, Tominaga H, et al., "Diseases of the Gastric Cancer Cell Line," Proc. et al., J Bone Miner Metab., 27 (1), pp. 36-45, 2009).

조골세포는 RANKL(Receptor activator of NF-κB ligand)과 이것의 유도 수용체(decoy receptor)인 OPG(Osteoprotegerin)를 생성한다. RANKL이 파골 전구세포(osteoclast progenitor cells) 표면에 있는 수용체인 RANK(Receptor activator of NF-κB)에 결합하면 파골 전구 세포가 거대 다핵 파골세포로 성숙화(maturation)되어 골 흡수(bone resorption)가 일어난다. 그러나 OPG가 RANKL과 결합하면 RANKL과 RANK간 결합이 차단되어 파골세포의 형성이 억제되고 필요 이상의 골 흡수가 일어나지 않게 된다(Theill LE. et al., Annu Rev Immunol., 20, pp.795-823, 2002; Wagner EF. et al., Curr Opin Genet Dev., 11, pp.527-532, 2001). 이러한 파골세포의 활성으로 오래된 뼈의 흡수 또는 파괴가 이루어지며 이는 뼈에 구멍을 내어 적은 양의 칼슘이 혈류로 방출되어 신체기능을 유지하는데 사용된다(William J. et al., Nature., 423, pp.337342, 2003).Osteoblasts produce RANKL (Receptor activator of NF-κB ligand) and its inducible receptor (decoy receptor), OPG (Osteoprotegerin). When RANKL binds to the receptors RANK (Receptor activator of NF-κB) on the surface of osteoclast progenitor cells, osteoclast precursor cells are maturated into large polynuclear osteoclasts and bone resorption occurs. However, when OPG binds to RANKL, the binding between RANKL and RANK is blocked, resulting in inhibition of osteoclast formation and no more bone resorption than necessary (Theill LE et al., Annu Rev Immunol., 20, pp. 795-823 , 2002; Wagner EF. Et al., Curr Opin Genet Dev., 11, pp. 527-532, 2001). The activity of these osteoclasts results in the absorption or destruction of old bone, which is used to maintain bodily function by piercing the bone and releasing a small amount of calcium into the bloodstream (William J. et al., Nature 423, pp. 3737342, 2003).

한편, 뼈세포에서 생성된 조골세포는 교원질로 구멍을 채우고 칼슘과 인의 침척물(hydroxyapatite)을 덮어서 단단한 새로운 뼈를 만들어 골격을 재건한다(Stains JP. et al., Birth Defects Res C Embryo Today., 75(1), pp.72-80, 2005). 뼈가 파괴되기 시작하여 다시 새로운 뼈로 재형성 되기까지는 약 100일 정도 걸린다(Schwarz EM. et al., Curr Opin Orthop., 11, pp.329-335, 2000). 유아에서는 1년 내에 뼈의 칼슘이 100% 바뀌지만 성인에서는 매년 골격의 약 10~30%가 이런 과정을 통하여 재형성되며, 파골속도와 조골속도가 동일해야만 전과 같은 골밀도를 유지할 수 있다. 이러한 두 과정 즉, 골흡수와 골형성은 서로 밀접하게 연결되어 이루어지고 골의 정상적인 구조를 유지하는 데 중요하다. On the other hand, the osteoblasts generated from bone cells fill holes with collagen and cover the hydroxyapatite of calcium and phosphorus to form new hard bones (Stains JP et al., Birth Defects Res C Embryo Today. 75 (1), pp. 72-80, 2005). It takes about 100 days for the bones to begin to break down and rebuild into new bones (Schwarz EM. Et al., Curr Opin Orthop., 11, pp. 329-335, 2000). In infants, bone calcium is 100% changed within a year, but about 10-30% of the bone is reshaped every year in adults, and the osteopenic rate and osteotomy speed are the same so that bone density can be maintained as before. These two processes, namely, bone resorption and bone formation, are closely linked to each other and are important for maintaining the normal structure of the bone.

염증은 교원질, 칼슘 및 인의 침적물로 단단한 뼈를 만드는 조골세포의 골을 만드는 기능을 저하시키고, 파골세포의 뼈를 파괴 또는 흡수하는 작용이 높아져서 치조골이 점점 낮아지고 파괴되어 결국 치아를 상실하게 된다. 이때, 파골세포는 골수 내의 단핵구/대식세포 계통의 세포로부터 유래하고, 이 단핵전구세포는 혈액 내로 순환되며 골내막층에서 전구세포들이 증식되어 다핵세포를 형성하기 위해 융합된다고 알려져 있으며, 파골세포에는 특징적으로 타르트레이트(tartrate)에 대해 저항성을 나타내는 산성포스파타제인 TRAP을 가지며 이는 다른 골조직 세포와 구별할 수 있는 파골세포의 세포화학적 표지효소로 이용된다고 알려져 있다(대한민국 제 10-2006-0092651호).Inflammation is a deposition of collagen, calcium, and phosphorus, which weakens the ability of osteoblasts to make hard bone, and destroys or absorbs osteoclast bones. As a result, the alveolar bone is gradually lowered and destroyed, eventually resulting in tooth loss. It is known that osteoclasts are derived from monocyte / macrophage lineage cells in bone marrow, these mononuclear progenitor cells circulate in the blood, and progenitor cells proliferate in the endosteal layer and are fused to form polynuclear cells. It is known that TRAP, which is characteristic of acid phosphatase resistant to tartrate, is used as a cytochemical labeling enzyme for osteoclasts which can be distinguished from other bone tissue cells (Korean 10-2006-0092651).

치주인대(Periodontal ligament)는 평균 0.2mm 정도 두께의 층이며, 치아에 부착되어 치아를 치조골에 부착하고 지지하는 역할을 한다. 또한 치주인대는 치아가 음식을 씹을 때 치조골에 힘을 분산시켜 완충 작용을 하고, 치아의 감각을 치조골에 전달한다. 치주인대에는 미분화 간엽세포가 존재하고 있기 때문에 전체적인 구조와 기능이 변화되지 않으면서 지속적으로 골개조를 계속할 수 있다. 치주인대 내의 미분화 간엽세포는 치조골쪽으로 이동하여 치조골을 개조시키거나, 치아쪽으로 이동하여 교원섬유를 생산하여 치아를 더욱 단단히 지지하기도 한다(대한민국 제 10-2016-0016127호).The periodontal ligament is a layer with an average thickness of 0.2 mm, which attaches to the teeth and attaches and supports the teeth to the alveolar bone. In addition, periodontal ligaments disperse the force to the alveolar bone when the tooth chews the food to buffer and transmit the sense of the tooth to the alveolar bone. Because there are undifferentiated mesenchymal cells in the periodontal ligament, bone reconstruction can be continued without changing the overall structure and function. The undifferentiated mesenchymal cells in the periodontal ligament migrate toward the alveolar bone and modify the alveolar bone, or move toward the teeth to produce the collagen fibers to firmly support the teeth (Korean Patent No. 10-2016-0016127).

신이(Magnolia flower)는 목련과(Magnoliaceae)에 속하는 목련꽃의 봉우리를 이르는 말로 꽃봉우리가 약간 매운 맛이 나기 때문에 신이(辛夷)라고 한다. 한국에서는 목련과의 백목련(Magnolia denudata Desrousseaux) 또는 동속식물의 꽃봉우리를 말려서 사용하며, 일본에서는 백목련(M. denudata Desr.), 망춘화(M. flower Pamp., 望春花), 일본신이(M. kobus DC., 日本辛夷), 향신이(M. salicifolia Maxim.:香辛夷) 및 무당 옥란(M. sprengeri Pamp.: 武當玉蘭)을 사용하며, 중국에서는 백목련(M. denudata Desr), 망춘화(M. flower Pamp., 望春花) 및 무당옥란(M. sprengeri Pamp., 武當玉蘭)을 사용한다. 신이에 대해 한방에서는 그 성질을 따뜻하다고 보며 두통, 요통 및 비염에 효능이 있고 또한 축농증을 치료해주고 진통제의 약성이 있다고 보고되어 있다.The Magnolia flower is the word that leads to the peaks of magnolia flowers belonging to Magnoliaceae and is called ginseng because the flower peaks taste a little spicy. In Korea, dried Magnolia denudata Desrousseaux or flower peaks are used in Korea. In Japan, M. denudata Desr., M. flower Pamp., M. korea, M. korea, Kobus DC., M. salicifolia Maxim., and M. sprengeri Pamp. In China, M. denudata Desr, M. flower Pamp., And M. sprengeri Pamp. Are used. It has been reported that Shin-yi has the properties of warmth and is effective for headache, low back pain and rhinitis, and also treats sinusitis and has the weakness of analgesic.

후박(Magnolia officinlis )은 목련과 식물인 후박나무 Magnolia officinalis Rehd. et Wils.의 줄기나 뿌리껍질을 말린 것이다. 봄에 20년이상 자란 나무의 껍질을 벗겨 그늘에서 말리거나 끓는 물에 잠깐 담갔다가 건져서 햇볕에 말린 다음 이것을 다시 증기에 쪄서 원통 모양으로 말아 햇볕에서 말려서 사용한다. 약리 실험에서 항균 작용, 약한 이뇨 작용을 나타낸다는 것이 밝혀졌으며 한방에서는 소화 장애, 구토, 설사, 위장염, 위경련, 기침이 나고 숨이 찬 데, 기관지염, 기관지 천식등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. Magnolia (Magnolia officinlis) is a magnolia Magnolia officinalis Rehd magnolia and plants. It dried the roots and roots of et Wils. Peel off the bark of trees that have grown more than 20 years in the spring, dry them in the shade, dip them in boiling water for a while, dry them, dry them in the sun, steam them in steam again and roll them in a cylindrical shape and dry them in the sun. It has been shown that the pharmacological test shows antimicrobial activity and weak diuretic effect. It has been known to be effective in digestive disorders, vomiting, diarrhea, gastroenteritis, stomach cramps, coughing and breathing, bronchitis and bronchial asthma.

미국 출원특허 US 13/739,340호는 골형성(osteogenesis)을 촉진하는 약학적 조성물에 관한 것으로, 목련과 식물의 잎 또는 껍질 등에서 수득한 추출물이 부작용은 없으면서 골밀도 및 골성장을 촉진하는 효과가 있음을 개시하고 있다. 또한, 대한민국 등록특허 10-0204165호는 후박 추출물을 함유하는 골 조직 재생 촉진 조성물에 관한 것으로, 후박 추출물이 절골, 파골, 쇄골 등의 손상된 뼈의 재생을 촉진시키는 효과가 있음을 개시하고 있을 뿐, 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 치주조직 성장 촉진용 및 치주염 치료 기능에 관해서는 보고된 바가 없다. US patent application Ser. No. 13 / 739,340 relates to a pharmaceutical composition for promoting osteogenesis, wherein extracts obtained from magnolia or plant leaves or bark have the effect of promoting bone mineral density and bone growth without side effects Lt; / RTI > Korean Patent Registration No. 10-0204165 also relates to a composition for promoting bone tissue regeneration containing an extract of Zygomycetum, and discloses that Zygomycetes extract has an effect of promoting regeneration of injured bones such as osteotomy, osteoclast, There has been no report on the ability to promote periodontal growth and the treatment of periodontitis in the combination of rosemary extract and ginseng extract.

반면, 치아 형성은 상기 골형성 과정과 달리, 태생 6주에 발생이 시작되면, 표면의 상피가 안으로 함입해 들어오고, 함입한 내부의 결합조직에서 세포들이 증식하기 시작하며, 상피 쪽에서 함입된 세포들이 점점 자라면서 아래에서는 치수의 조직이 형성된다. 상피 쪽 세포들은 나중의 치아의 겉을 싸는 법랑아세포로 분화되고, 내부에서는 상아질을 형성하는 조상아세포와 여러 가지 치수 세포들이 분화된다. 이와 같이, 뼈 형성과 치아 형성은 관여하는 세포 및 기전이 전혀 상이함을 알 수 있다.On the other hand, tooth formation, unlike the osteogenesis process, occurs at the 6th week of birth, the surface epithelium enters the inside, the cells begin to multiply in the internal connective tissue, and the cells embedded in the epithelium As they grow increasingly, the tissue of the dimension is formed below. The epithelial cells are differentiated into enamel cells that enclose the outer surface of the later teeth, and the ancestral cells and dendritic cells that form the dentin are differentiated inside. As described above, bone formation and tooth formation are completely different from each other in the involved cells and mechanism.

이에, 본 연구자들은 치주염으로 인한 치주조직의 손실을 막고, 치주조직의 재생을 촉진할 수 있는 물질을 연구하던 중, 신이 추출물 및 후박 추출물의 혼합물이 파골세포 분화를 억제하고, 조골세포를 활성화 시키며, 치근 및 지주조직 성장을 촉진하는 효능이 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다. In this study, we investigated the effect of periodontal ligament on osteoblast differentiation, osteoclast activation, and osteoblast differentiation, while inhibiting periodontal tissue loss by periodontitis and promoting regeneration of periodontal tissue. , Root and root tissue growth, and thus the present invention has been completed.

본 발명의 목적은 본 발명은 후박(Magnolia officinlis) 추출물 및 신이(Magnolia flower) 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치근/치주조직 성장 촉진용 조성물, 치주염 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 치근/치주조직 성장 촉진용 또는 치주염 개선용 의약외품 조성물, 치근/치주조직 성장 촉진용 또는 치주염 개선용 건강기능식품 및 치근/치주조직 성장 촉진용 또는 치주염 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다It is an object of the present invention to provide a composition for promoting growth of root / periodontal tissue comprising a mixture of Magnolia officinlis extract and Magnolia flower extract as an active ingredient, a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of periodontitis, A quasi-product composition for promoting tissue growth or improving periodontal disease, a health functional food for promoting root / periodontal tissue growth promotion or improving periodontal disease, and a cosmetic composition for promoting root / periodontal tissue growth or periodontal disease improvement

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치근 또는 치주조직 성장 촉진용, 또는 치주염 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention provides a pharmaceutical composition for promoting root growth or periodontal growth promotion, or preventing or treating periodontal disease, comprising a mixture of an extract of Lilac and a ginseng extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치근 또는 치주조직의 성장 촉진용, 또는 치주염의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다. The present invention also provides a quasi-drug composition for promoting the growth of a root or periodontal tissue containing a crude extract and a ginseng extract as an active ingredient, or for preventing or improving periodontitis.

또한, 본 발명은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치근 또는 치주조직의 성장 촉진용, 또는 치주염의 개선용 건강기능식품을 제공한다.The present invention also provides a health functional food for accelerating the growth of root or periodontal tissue or improving periodontal disease, which comprises a mixture of an aftercooled extract and a ginseng extract as an active ingredient.

아울러, 본 발명은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치근 또는 치주조직의 성장 촉진용, 또는 치주염의 개선용 화장료 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a cosmetic composition for promoting the growth of root or periodontal tissue or improving periodontal disease, which comprises a mixture of an aftercooled extract and a ginseng extract as an active ingredient.

본 발명의 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물은 Raw264.7 세포에서 LPS로 유도된 NO(nitric oxide)의 활성을 억제하고, TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase) 활성을 억제하여 파골세포 분화를 억제하였으며, MC3T3 세포에서 ALP(alkaline phosphatase)활성을 증가시킴으로써 조골세포 분화 촉진을 확인하였다. 또한, 사람 치주인대세포에서 우수한 세포 증식률 및 ALP 활성을 나타냄을 확인하였고, 마우스로부터 적출한 치근 및 지주조직 성장이 촉진되는 것을 확인함으로써, 본 발명의 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물은 치근/치주조직 성장 촉진용 조성물, 치주염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 치근/치주조직 성장 촉진용 또는 치주염 개선용 의약외품 조성물, 치근/치주조직 성장 촉진용 또는 치주염 개선용 건강기능식품 및 치근/치주조직 성장 촉진용 또는 치주염 개선용 화장료 조성물로써 유용하게 사용될 수 있다. The inventive extract of the present invention inhibited the activity of nitric oxide (NO) induced by LPS in Raw264.7 cells and suppressed osteoclast differentiation by inhibiting TRAP (Tartrate-resistant acid phosphatase) Increasing ALP (alkaline phosphatase) activity in MC3T3 cells promoted osteoblast differentiation. In addition, it was confirmed that the human periodontal ligament cells exhibited excellent cell proliferation and ALP activity, and confirming that the root and trabecular tissue growths extracted from the mice were promoted, the mixture of the Chinese cabbage extract and Shin- A composition for growth promotion, a pharmaceutical composition for preventing or treating periodontitis, a quasi-composition for promoting root growth / periodontal tissue growth or improving periodontal disease, a health functional food for improving root / periodontal tissue growth or improving periodontal / periodontal tissue growth Or as a cosmetic composition for improving periodontitis.

도 1은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물에 의한 Raw 264.7 세포에서 nitric oxide(NO) 활성 억제 효과를 나타낸 도이다.
도 2는 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물에 의한 Raw 264.7 세포에서 TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase) 활성 억제 효과를 나타낸 도이다.
도 3은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물에 의한 MC3T3-E1 세포에서 alkaline phosphatase(ALP) 활성 증가 효과를 나타낸 도이다.
도 4는 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물에 의한 사람 치주인대세포에서의 세포 증식률을 확인한 도이다.
도 5는 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물에 의한 사람 치주인대세포에서 ALP activity를 확인한 도이다.
도 6은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물에 의한 마우스의 치근 및 치주조직 성장 촉진용 효과를 나타낸 도이다.
1 is a graph showing the inhibitory effect of nitric oxide (NO) on Raw 264.7 cells induced by a mixture of the extract and the extract.
FIG. 2 is a graph showing the effect of inhibiting TRAP (Tartrate-resistant acid phosphatase) activity in Raw 264.7 cells by a mixture of an extract of Lilac and a ginseng extract.
FIG. 3 is a graph showing the effect of increasing alkaline phosphatase (ALP) activity in MC3T3-E1 cells by the mixture of the extract of Leek extract and Shin extract.
FIG. 4 is a chart for confirming the cell proliferation rate in human periodontal ligament cells by the mixture of the extract of Leek extract and Shin extract.
FIG. 5 is a graph showing ALP activity in human periodontal ligament cells by the mixture of the extract of Leek extract and Shin extract.
FIG. 6 is a graph showing the effect of the mixture of the extract of Lycoris spp. And the extract of Shin extract on the growth of root and periodontal tissues of mice.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은, 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치주조직 성장 촉진용, 또는 치주염 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. The present invention provides a pharmaceutical composition for promoting periodontal growth or preventing or treating periodontal disease, which comprises a mixture of an aftercooled extract and a ginseng extract as an active ingredient.

상기 혼합물은 후박 추출물 및 신이 추출물이 1:1 내지 1:50의 농도비로 혼합되는 것이 바람직하며, 1:3 내지 1:30의 농도비로 혼합되는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.It is preferable that the mixture of the backbone extract and the Shin extract is mixed at a concentration ratio of 1: 1 to 1:50, more preferably, but not necessarily, at a concentration ratio of 1: 3 to 1:30.

상기 혼합물은 NO(nitric oxide) 활성을 억제하고, TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase) 활성을 억제하며, ALP(alkaline phospatase) 활성을 증가시키는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. The mixture is preferably, but not limited to, inhibiting nitric oxide (NO) activity, inhibiting TRAP (tartrate-resistant acid phosphatase) activity, and increasing ALP (alkaline phosphatase) activity.

본 발명의 구체적인 실시예에서, Raw.264.7 세포에 후박 추출물 또는 신이 추출물 각각의 단독처리, 또는 후박 추출물 및 신이 추출물을 1:3, 1:10 또는 1:30 비율로 혼합한 혼합물을 처리하였을 때, 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물이 LPS(lipopolysaccharide)에 의해 증가된 NO(nitric oxide) 활성을 억제하며(도 1 참조), RANKL 처리에 의해 증가한 Raw.264.7의 TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase) 활성을 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물이 효과적으로 낮추는 것을 관찰하여(도 2 참조), 파골세포 분화를 억제하는 효과가 있음을 확인하였으며, 상기 파골세포 분화 억제 효과는 각 추출물의 단독 처리에 비교했을 때, 후박 추출물 및 신이 추출물을 1:10 및 1:30의 농도비로 혼합한 혼합물에서 가장 효과적인 파골세포 분화 억제 효과를 보이는 것을 확인하였다(도 1 및 2 참조). In a specific example of the present invention, when Raw.264.7 cells were treated with a single extract of L. extract or Shin extract, or a mixture of L. extract and Shin extract at a ratio of 1: 3, 1: 10 or 1: (Fig. 1) inhibited nitric oxide (NO) activity induced by LPS (lipopolysaccharide) (see FIG. 1), and increased RAP.264.7 TARP (Tartrate-resistant acid phosphatase) activity by RANKL treatment (Fig. 2), and it was confirmed that osteoclast differentiation was inhibited. The osteoclast differentiation inhibitory effect of osteoclast differentiation was compared with that of each extract alone, 1, and 1: 30, respectively. The mixture was found to have the most effective osteoclast differentiation inhibitory effect (see FIGS. 1 and 2).

또한, 본 발명자들은 MC3T3-E1 세포에서 ALP(alkaline phosphatase) 활성을 억제하는 것을 확인하여 조골세포 분화를 촉진하는 효과가 있음을 확인하였고(도 3 참조), 상기 조골세포 분화 촉진 효과는 각 추출물의 단독 처리에 비교했을 때, 후박 추출물 및 신이 추출물을 1:10의 농도비로 혼합한 혼합물에서 가장 효과적인 조골세포 분화 촉진 효과를 보이는 것을 확인하였다. In addition, the present inventors confirmed that the inhibition of ALP (alkaline phosphatase) activity in MC3T3-E1 cells was effective in promoting osteoblast differentiation (see FIG. 3) Compared with single treatment, it was confirmed that the most effective osteoblast differentiation promoting effect was obtained in a mixture in which the extract of Puerariae Radix and Shin extract was mixed at a ratio of 1:10.

또한, 본 발명자들은 후박 추출물 및 신이추출물이 사람 치주인대세포 증식및 세포 활성도 증가, 그리고 분화 정도에 미치는 영향을 확인하였으며, 그 결과 후박추출물 또는 신이추출물이 단독으로 존재할 때에 비해 복합물이 1:10의 비율로 존재할 때에 현저하게 높은 세포활성도를 나타내었다(도 4 참조). 이 결과는 후박추출물과 신이추출물을 혼합한 경우에 두 가지 추출물이 함께 작용하여 상승효과를 나타내었기 때문인 것으로 확인되었다. In addition, the present inventors have confirmed the effects of the extract of L. and Shin extract on human periodontal ligament cell proliferation, cell activity, and differentiation degree. As a result, when the L. extract or Shin extract is present alone, (See Fig. 4). This result was confirmed by the fact that the two extracts showed synergistic effect when the extract of L. extract and Shin extract were mixed together.

또한, 본 발명자들은 후박추출물 및 신이추출물 복합물이 ALP 활성을 증가시키는지 여부를 확인하였으며, 그 결과 후박추출물 및 신이추출물의 혼합비율 1:10의 혼합물 처리에서 신이추출물을 단독으로 처리하였을 때보다 ALP 활성이 약 40% 이상 증가된 것을 확인하였다(도 5 참조). In addition, the present inventors confirmed that the extract of L. extract and Shinkai extract increased the ALP activity. As a result, it was found that when the extract was treated alone with the mixture of L. extract and Shin extract at a mixing ratio of 1:10, ALP Activity was increased by about 40% or more (see FIG. 5).

또한, 본 발명자들은 마우스 아래턱 어금니를 후박 추출물 및 신이 추출물을 포함하고 있는 아가로스 비드에 포매한 뒤, 숙주마우스에 이식하여 3주 후, 치근 및 치주조직 성장을 확인한 결과, 대조군에서는 치근 및 뼈의 성장이 거의 관찰되지 않았고, 후박 추출물 또는 신이 추출물 단독 처리시 치근 및 치주조직의 성장이 미미하였으나, 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 처리는 치주조직 성장을 증가시켰으며 혼합물 농도비율 1:10에서 치근성장과 이식된 치아 주위의 치조골 형성이 가장 우수한 것을 확인하였다(도 6 참조).In addition, the inventors of the present invention found that the mouse lower mandibles were embedded in agarose beads containing the extract of Guava extract and Shin extract, and then transplanted into a host mouse. After 3 weeks, root and periodontal tissue growth were observed. In the control group, The growth of root and periodontal tissues was negligible during the treatment with the extract of L. or Shin extract but the treatment of mixture of L. and Shin extract increased the periodontal tissue growth. And the alveolar bone formation around the implanted teeth was the most excellent (see FIG. 6).

따라서, 본 발명의 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물은 치근 또는 치주조직 성장 촉진용 및 치주염 예방 또는 치료용 약학적 조성물로써 유용하게 사용될 수 있다. Therefore, the mixture of the extract of Liliaceae and the extract of Liliaceae of the present invention can be usefully used as a pharmaceutical composition for promoting root growth or periodontal growth and for the prevention or treatment of periodontitis.

본 발명의 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 본 발명의 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 0.1 내지 99.9 중량%를 유효성분으로 함유하고, 약제학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다. The composition of the present invention may contain, as an active ingredient, 0.1 to 99.9% by weight of a mixture of the nutmeg and extract of the present invention with respect to the total weight of the composition, and may include a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent.

약제학적으로 허용 가능한 담체는 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로스 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 이용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주이용 제형, 산제, 정제, 캡슐제, 환, 과립 또는 주사액제로 제제화 할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(Mack Publishing Company, Easton PA, 18th, 1990)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.The pharmaceutically acceptable carrier may be a mixture of saline, sterilized water, Ringer's solution, buffered saline, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol, ethanol, and one or more of these components. If necessary, an antioxidant, Other conventional additives such as a bacteriostatic agent may be added. In addition, diluents, dispersants, surfactants, binders, and lubricants may be additionally added to formulate into main dosage forms such as aqueous solutions, suspensions, emulsions, powders, tablets, capsules, rings, granules or injection solutions. Further, it can be suitably formulated according to each disease or ingredient, using the method disclosed in Remington's Pharmaceutical Science (Mack Publishing Company, Easton PA, 18th, 1990) in a suitable manner in the art.

본 발명의 구강질환 예방 및 치료용 약학적 조성물은, 통상적인 방법에 의해 정제, 캅셀제, 산제, 과립제, 현탁제, 유제, 시럽제, 기타 액제로 제형화될 수 있다. 구체적으로 본 발명의 약학적 조성물은 경구 투여용 제형, 예를 들면 정체, 트로치제(troches), 로젠지(lozenge), 수용성 또는 우성현탁액, 조제분말 또는 과립, 에멀젼, 하드 또는 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제(elixirs)로 제제화된다. 정제 및 캡슐 등의 제형으로 제제하기 위해 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴, 셀룰로오스 또는 젤라틴과 같은 결합제, 디칼슘 포스페이트와 같은 부형제, 옥수수 전분 또는 고구마 전분과 같은 붕해제, 스테아르산 마르네슘, 스테아르산 칼슘, 스테아릴푸마르산 나트륨 또는 폴리에틸렌글리콜 왁스와 같은 윤활유가 함유된다. 캡슐제형의 경우는 상기에서 언급한 물질 이외에도 지방유와 같은 액체 담체를 함유한다.The pharmaceutical composition for the prevention and treatment of oral diseases of the present invention can be formulated into tablets, capsules, powders, granules, suspensions, emulsions, syrups and other liquid preparations by a conventional method. Specifically, the pharmaceutical compositions of the present invention can be formulated for oral administration, for example, as tablets, troches, lozenges, aqueous or aqueous suspensions, prepared powders or granules, emulsions, hard or soft capsules, It is formulated into elixirs. Binders such as lactose, saccharose, sorbitol, mannitol, starch, amylopectin, cellulose or gelatin, excipients such as dicalcium phosphate, disintegrants such as corn starch or sweet potato starch, disintegrants such as starch, , Calcium stearate, sodium stearyl fumarate, or polyethylene glycol wax. In the case of a capsule formulation, in addition to the above-mentioned substances, a liquid carrier such as fatty oil is contained.

또한, 본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여시 피하주사, 정맥주사, 근육내 주사 또는 흉부내 주사 주입방식을 선택하는 것이 바람직하다. 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위해서는 본 발명의 화합물 1과 함께 물에서 혼합하여 현탁액으로 제조하고 이를 앰플 또는 바이알의 단위 투여형으로 제제한다.In addition, the pharmaceutical composition of the present invention can be administered orally or parenterally, and it is preferable to select subcutaneous injection, intravenous injection, intramuscular injection, or intra-thoracic injection injection method for parenteral administration. For formulation into parenteral administration formulations, Compound 1 of the present invention is mixed with water to prepare a suspension, which is then formulated in unit dosage forms of ampoules or vials.

본 발명에 따른 유효성분의 투여량은 체내에서 활성성분의 흡수도, 불활성화율 및 배설속도, 환자의 연령, 성별 및 상태, 치료할 질병의 중증 정도에 따라 적절히 선택되나, 경구 투여제의 경우 일반적으로 성인에게 1일에 체중 1 kg당 본 발명의 화합물1을 0.0001 ~ 500 mg의 양으로 1회 내지 수회 나누어 투여할 수 있으며, 0.001 ~ 100 mg의 양으로 투여하는 것이 바람직하다. 본 발명의 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.The dosage of the active ingredient according to the present invention is appropriately selected depending on the degree of absorption, inactivation rate and excretion rate of the active ingredient in the body, the age, sex and condition of the patient, and severity of the disease to be treated. The compound 1 of the present invention may be administered to an adult in an amount of 0.0001-500 mg per 1 kg of body weight per day, preferably in an amount of 0.001-100 mg. The composition of the present invention may be used alone or in combination with methods using surgery, radiation therapy, hormone therapy, chemotherapy, and biological response modifiers.

또한, 본 발명은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치근 또는 치주조직의 성장 촉진용, 또는 치주염의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다. The present invention also provides a quasi-drug composition for promoting the growth of a root or periodontal tissue containing a crude extract and a ginseng extract as an active ingredient, or for preventing or improving periodontitis.

상기 의약외품 조성물은 치약, 구강청정제 또는 구강세정제등의 구강용 조성물 제형인 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. The quasi-drug composition is preferably an oral composition such as a toothpaste, an oral cleanser, or an oral cleanser, but is not limited thereto.

상기 혼합물은 후박 추출물 및 신이 추출물이 1:1 내지 1:50의 농도비로 혼합되는 것이 바람직하며, 1:3 내지 1:30의 농도비로 혼합되는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.It is preferable that the mixture of the backbone extract and the Shin extract is mixed at a concentration ratio of 1: 1 to 1:50, more preferably, but not necessarily, at a concentration ratio of 1: 3 to 1:30.

상기 혼합물은 NO(nitric oxide) 활성을 억제하고, TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase) 활성을 억제하며, ALP(alkaline phospatase) 활성을 증가시키는 것이 바람직하다.Preferably, the mixture inhibits nitric oxide (NO) activity, inhibits TRAP (tartrate-resistant acid phosphatase) activity, and increases ALP (alkaline phosphatase) activity.

본 발명의 구체적인 실시예에서, 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물이 LPS(lipopolysaccharide)에 의해 증가된 NO(nitric oxide) 활성을 억제하며(도 1 참조), RANKL 처리에 의해 증가한 Raw.264.7의 TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase) 활성을 효과적으로 낮추어(도 2 참조), 파골세포 분화를 억제하는 효과가 있음을 확인하였으며, 후박 추출물 및 신이 추출물을 1:10 및 1:30의 농도비로 혼합한 혼합물에서 가장 효과적인 파골세포 분화 억제 효과를 보이는 것을 확인하였다(도 1 및 2 참조). In a specific embodiment of the present invention, the combination of rosemary extract and ginseng extract inhibits nitric oxide (NO) activity by LPS (lipopolysaccharide) (see FIG. 1) and increased RAP 264.7 TRAP Tartrate-resistant acid phosphatase activity was effectively inhibited (see FIG. 2), and it was confirmed that osteoclast differentiation was inhibited. The extract of L. elata and Shin extract was mixed at a ratio of 1:10 and 1:30 (Fig. 1 and Fig. 2).

또한, 본 발명자들은 MC3T3-E1 세포에서 ALP(alkaline phosphatase) 활성을 억제하는 것을 확인하여 조골세포 분화를 촉진하는 효과가 있음을 확인하였고(도 3 참조), 후박 추출물 및 신이 추출물을 1:10의 농도비로 혼합한 혼합물에서 가장 효과적인 조골세포 분화 촉진 효과를 보이는 것을 확인하였다. In addition, the present inventors confirmed that the inhibition of ALP (alkaline phosphatase) activity in MC3T3-E1 cells was effective in promoting osteoblast differentiation (see FIG. 3) Concentration ratio, the most effective osteoblast differentiation promotion effect was confirmed.

또한, 본 발명자들은 후박 추출물 및 신이추출물이 사람 치주인대세포 증식및 세포 활성도 증가, 그리고 분화 정도에 미치는 영향을 확인하였으며, 그 결과 후박추출물 또는 신이추출물이 단독으로 존재할 때에 비해 복합물이 1:10의 비율로 존재할 때에 현저하게 높은 세포활성도를 나타내었다(도 4 참조). 이 결과는 후박추출물과 신이추출물을 혼합한 경우에 두 가지 추출물이 함께 작용하여 상승효과를 나타내었기 때문인 것으로 확인되었다. In addition, the present inventors have confirmed the effects of the extract of L. and Shin extract on human periodontal ligament cell proliferation, cell activity, and differentiation degree. As a result, when the L. extract or Shin extract is present alone, (See Fig. 4). This result was confirmed by the fact that the two extracts showed synergistic effect when the extract of L. extract and Shin extract were mixed together.

또한, 본 발명자들은 후박추출물 및 신이추출물 복합물이 ALP 활성을 증가시키는지 여부를 확인하였으며, 그 결과 후박추출물 및 신이추출물의 혼합비율 1:10의 혼합물 처리에서 신이추출물을 단독으로 처리하였을 때보다 ALP 활성이 약 40% 이상 증가된 것을 확인하였다(도 5 참조). In addition, the present inventors confirmed that the extract of L. extract and Shinkai extract increased the ALP activity. As a result, it was found that when the extract was treated alone with the mixture of L. extract and Shin extract at a mixing ratio of 1:10, ALP Activity was increased by about 40% or more (see FIG. 5).

또한, 본 발명자들은 마우스 아래턱 어금니를 후박 추출물 및 신이 추출물을 포함하고 있는 아가로스 비드에 포매한 뒤, 숙주마우스에 이식하여 3주 후, 치근 및 치주조직 성장을 확인한 결과, 치주조직 성장을 증가시켰으며 혼합물 농도비율 1:10에서 치근성장과 이식된 치아 주위의 치조골 형성이 가장 우수한 것을 확인하였다(도 6 참조).In addition, the present inventors increased the periodontal tissue growth by confirming the root and periodontal tissue growth after embedding the lower jaw molars into the agarose beads containing the extract of Zucchini and Shin extract, And it was confirmed that the root growth and the alveolar bone formation around the implanted tooth were the best at a mixture concentration ratio of 1:10 (see FIG. 6).

따라서, 본 발명의 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물은 치근 또는 치주조직 성장 촉진용 또는 치주염 개선용 의약외품 조성물로써 유용하게 사용될 수 있다. Therefore, the mixture of the extract of Liliaceae and the extract of Liliaceae of the present invention can be usefully used as a composition for promoting growth of root or periodontal tissue or quasi salts for improving periodontal disease.

본 발명에서 제공하는 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 함유하는 의약외품 조성물은 그 제형에 있어 특별히 한정되지 않고 통상의 제형을 가질 수 있으며, 구체적으로는 치약, 구강세정제 또는 구강청정제 등의 제형을 가질 수 있다. 본 발명에서 제공하는 구강 조성물은 그 제형에 따라 제제화에 필요한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다. 예를 들면, 구강용 조성물의 제형이 치약류인 경우, 연마제, 습윤제, 기포제, 결합제, 감미제, pH조절제, 방부제, 약효성분, 향료, 증백제, 색소, 용제 등을 첨가하여 제조할 수 있다.The composition of the present invention, which is a quasi-drug composition containing a crude extract and a mixture of a ginseng extract, is not particularly limited in its formulation and may have conventional formulations. Specifically, it may contain a formulation such as a toothpaste, mouthwash or mouthwash have. The oral composition provided in the present invention may contain various bases and additives necessary for formulation according to the formulation, and the kind and amount of these ingredients can be easily selected by those skilled in the art. For example, when the oral composition is a dentifrice, it may be prepared by adding an abrasive, a wetting agent, a foaming agent, a binder, a sweetener, a pH adjuster, a preservative, a medicinal ingredient, a flavoring agent, a brightener, a colorant and a solvent.

또한, 본 발명은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치근 또는 치주조직의 성장 촉진용, 또는 치주염의 개선용 건강기능식품을 제공한다. The present invention also provides a health functional food for accelerating the growth of root or periodontal tissue or improving periodontal disease, which comprises a mixture of an aftercooled extract and a ginseng extract as an active ingredient.

상기 혼합물은 후박 추출물 및 신이 추출물이 1:1 내지 1:50의 농도비로 혼합되는 것이 바람직하며, 1:3 내지 1:30의 농도비로 혼합되는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.It is preferable that the mixture of the backbone extract and the Shin extract is mixed at a concentration ratio of 1: 1 to 1:50, more preferably, but not necessarily, at a concentration ratio of 1: 3 to 1:30.

상기 혼합물은 NO(nitric oxide) 활성을 억제하고, TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase) 활성을 억제하며, ALP(alkaline phospatase) 활성을 증가시키는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. The mixture is preferably, but not limited to, inhibiting nitric oxide (NO) activity, inhibiting TRAP (tartrate-resistant acid phosphatase) activity, and increasing ALP (alkaline phosphatase) activity.

본 발명의 구체적인 실시예에서, 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물이 LPS(lipopolysaccharide)에 의해 증가된 NO(nitric oxide) 활성을 억제하며(도 1 참조), RANKL 처리에 의해 증가한 Raw.264.7의 TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase) 활성을 효과적으로 낮추어(도 2 참조), 파골세포 분화를 억제하는 효과가 있음을 확인하였으며, 후박 추출물 및 신이 추출물을 1:10 및 1:30의 농도비로 혼합한 혼합물에서 가장 효과적인 파골세포 분화 억제 효과를 보이는 것을 확인하였다(도 1 및 2 참조). In a specific embodiment of the present invention, the combination of rosemary extract and ginseng extract inhibits nitric oxide (NO) activity by LPS (lipopolysaccharide) (see FIG. 1) and increased RAP 264.7 TRAP Tartrate-resistant acid phosphatase activity was effectively inhibited (see FIG. 2), and it was confirmed that osteoclast differentiation was inhibited. The extract of L. elata and Shin extract was mixed at a ratio of 1:10 and 1:30 (Fig. 1 and Fig. 2).

또한, 본 발명자들은 MC3T3-E1 세포에서 ALP(alkaline phosphatase) 활성을 억제하는 것을 확인하여 조골세포 분화를 촉진하는 효과가 있음을 확인하였고(도 3 참조), 후박 추출물 및 신이 추출물을 1:10의 농도비로 혼합한 혼합물에서 가장 효과적인 조골세포 분화 촉진 효과를 보이는 것을 확인하였다. In addition, the present inventors confirmed that the inhibition of ALP (alkaline phosphatase) activity in MC3T3-E1 cells was effective in promoting osteoblast differentiation (see FIG. 3) Concentration ratio, the most effective osteoblast differentiation promotion effect was confirmed.

또한, 본 발명자들은 후박 추출물 및 신이추출물이 사람 치주인대세포 증식및 세포 활성도 증가, 그리고 분화 정도에 미치는 영향을 확인하였으며, 그 결과 후박추출물 또는 신이추출물이 단독으로 존재할 때에 비해 복합물이 1:10의 비율로 존재할 때에 현저하게 높은 세포활성도를 나타내었다(도 4 참조). 이 결과는 후박추출물과 신이추출물을 혼합한 경우에 두 가지 추출물이 함께 작용하여 상승효과를 나타내었기 때문인 것으로 확인되었다. In addition, the present inventors have confirmed the effects of the extract of L. and Shin extract on human periodontal ligament cell proliferation, cell activity, and differentiation degree. As a result, when the L. extract or Shin extract is present alone, (See Fig. 4). This result was confirmed by the fact that the two extracts showed synergistic effect when the extract of L. extract and Shin extract were mixed together.

또한, 본 발명자들은 후박추출물 및 신이추출물 복합물이 ALP 활성을 증가시키는지 여부를 확인하였으며, 그 결과 후박추출물 및 신이추출물의 혼합비율 1:10의 혼합물 처리에서 신이추출물을 단독으로 처리하였을 때보다 ALP 활성이 약 40% 이상 증가된 것을 확인하였다(도 5 참조). In addition, the present inventors confirmed that the extract of L. extract and Shinkai extract increased the ALP activity. As a result, it was found that when the extract was treated alone with the mixture of L. extract and Shin extract at a mixing ratio of 1:10, ALP Activity was increased by about 40% or more (see FIG. 5).

또한, 본 발명자들은 마우스 아래턱 어금니를 후박 추출물 및 신이 추출물을 포함하고 있는 아가로스 비드에 포매한 뒤, 숙주마우스에 이식하여 3주 후, 치근 및 치주조직 성장을 확인한 결과, 치주조직 성장을 증가시켰으며 혼합물 농도비율 1:10에서 치근성장과 이식된 치아 주위의 치조골 형성이 가장 우수한 것을 확인하였다(도 6 참조).In addition, the present inventors increased the periodontal tissue growth by confirming the root and periodontal tissue growth after embedding the lower jaw molars into the agarose beads containing the extract of Zucchini and Shin extract, And it was confirmed that the root growth and the alveolar bone formation around the implanted tooth were the best at a mixture concentration ratio of 1:10 (see FIG. 6).

따라서, 본 발명의 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물은 치근 또는 치주조직 성장 촉진용 또는 치주염 개선용 건강기능식품으로써 유용하게 사용될 수 있다. Therefore, the mixture of the extract of the present invention and the ginseng extract of the present invention can be useful as a health functional food for promoting root growth or periodontal tissue growth or improving periodontal disease.

본 발명의 건강기능식품은 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강기능식품 100 중량부당 0.01 ~ 0.04 중량부, 구체적으로는 약 0.02 ~ 0.03 중량부 범위에서 선택할 수 있다.The health functional food of the present invention may contain various flavors or natural carbohydrates as an additional ingredient. The above-mentioned natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose and fructose, disaccharides such as maltose and sucrose, and polysaccharides such as dextrin and cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. Examples of sweeteners include natural sweeteners such as tau Martin and stevia extract, synthetic sweeteners such as saccharin and aspartame, and the like. The ratio of the natural carbohydrate may be selected from the range of 0.01 to 0.04 part by weight, specifically about 0.02 to 0.03 part by weight per 100 parts by weight of the health functional food of the present invention.

상기 외에 본 발명의 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강식품 100 중량부 당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the above, the health functional food of the present invention may contain various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, colorants, pectic acid and salts thereof, alginic acid and its salts, protective colloid thickener, pH adjuster, stabilizer, preservative, glycerin, A carbonating agent used in a carbonated beverage, and the like. These components may be used independently or in combination. The proportion of such additives is not critical, but is generally selected in the range of 0.01 to 0.1 parts by weight per 100 parts by weight of the health food of the present invention.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.There is no particular limitation on the kind of the food. Examples of the food to which the above substances can be added include dairy products including meat, sausage, bread, chocolate, candy, snack, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, ice cream, various soups, drinks, tea, Alcoholic beverages, and vitamin complexes, all of which include healthy foods in a conventional sense.

아울러, 본 발명은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치근 또는 치주조직의 성장 촉진용, 또는 치주염의 개선용 화장료 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a cosmetic composition for promoting the growth of root or periodontal tissue or improving periodontal disease, which comprises a mixture of an aftercooled extract and a ginseng extract as an active ingredient.

상기 혼합물은 후박 추출물 및 신이 추출물이 1:1 내지 1:50의 농도비로 혼합되는 것이 바람직하며, 1:3 내지 1:30의 농도비로 혼합되는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.It is preferable that the mixture of the backbone extract and the Shin extract is mixed at a concentration ratio of 1: 1 to 1:50, more preferably, but not necessarily, at a concentration ratio of 1: 3 to 1:30.

상기 혼합물은 NO(nitric oxide) 활성을 억제하고, TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase) 활성을 억제하며, ALP(alkaline phospatase) 활성을 증가시키는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. The mixture is preferably, but not limited to, inhibiting nitric oxide (NO) activity, inhibiting TRAP (tartrate-resistant acid phosphatase) activity, and increasing ALP (alkaline phosphatase) activity.

본 발명의 구체적인 실시예에서, 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물이 LPS(lipopolysaccharide)에 의해 증가된 NO(nitric oxide) 활성을 억제하며(도 1 참조), RANKL 처리에 의해 증가한 Raw.264.7의 TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase) 활성을 효과적으로 낮추어(도 2 참조), 파골세포 분화를 억제하는 효과가 있음을 확인하였으며, 후박 추출물 및 신이 추출물을 1:10 및 1:30의 농도비로 혼합한 혼합물에서 가장 효과적인 파골세포 분화 억제 효과를 보이는 것을 확인하였다(도 1 및 2 참조). In a specific embodiment of the present invention, the combination of rosemary extract and ginseng extract inhibits nitric oxide (NO) activity by LPS (lipopolysaccharide) (see FIG. 1) and increased RAP 264.7 TRAP Tartrate-resistant acid phosphatase activity was effectively inhibited (see FIG. 2), and it was confirmed that osteoclast differentiation was inhibited. The extract of L. elata and Shin extract was mixed at a ratio of 1:10 and 1:30 (Fig. 1 and Fig. 2).

또한, 본 발명자들은 MC3T3-E1 세포에서 ALP(alkaline phosphatase) 활성을 억제하는 것을 확인하여 조골세포 분화를 촉진하는 효과가 있음을 확인하였고(도 3 참조), 후박 추출물 및 신이 추출물을 1:10의 농도비로 혼합한 혼합물에서 가장 효과적인 조골세포 분화 촉진 효과를 보이는 것을 확인하였다. In addition, the present inventors confirmed that the inhibition of ALP (alkaline phosphatase) activity in MC3T3-E1 cells was effective in promoting osteoblast differentiation (see FIG. 3) Concentration ratio, the most effective osteoblast differentiation promotion effect was confirmed.

또한, 본 발명자들은 후박 추출물 및 신이추출물이 사람 치주인대세포 증식및 세포 활성도 증가, 그리고 분화 정도에 미치는 영향을 확인하였으며, 그 결과 후박추출물 또는 신이추출물이 단독으로 존재할 때에 비해 복합물이 1:10의 비율로 존재할 때에 현저하게 높은 세포활성도를 나타내었다(도 4 참조). 이 결과는 후박추출물과 신이추출물을 혼합한 경우에 두 가지 추출물이 함께 작용하여 상승효과를 나타내었기 때문인 것으로 확인되었다. In addition, the present inventors have confirmed the effects of the extract of L. and Shin extract on human periodontal ligament cell proliferation, cell activity, and differentiation degree. As a result, when the L. extract or Shin extract is present alone, (See Fig. 4). This result was confirmed by the fact that the two extracts showed synergistic effect when the extract of L. extract and Shin extract were mixed together.

또한, 본 발명자들은 후박추출물 및 신이추출물 복합물이 ALP 활성을 증가시키는지 여부를 확인하였으며, 그 결과 후박추출물 및 신이추출물의 혼합비율 1:10의 혼합물 처리에서 신이추출물을 단독으로 처리하였을 때보다 ALP 활성이 약 40% 이상 증가된 것을 확인하였다(도 5 참조). In addition, the present inventors confirmed that the extract of L. extract and Shinkai extract increased the ALP activity. As a result, it was found that when the extract was treated alone with the mixture of L. extract and Shin extract at a mixing ratio of 1:10, ALP Activity was increased by about 40% or more (see FIG. 5).

또한, 본 발명자들은 마우스 아래턱 어금니를 후박 추출물 및 신이 추출물을 포함하고 있는 아가로스 비드에 포매한 뒤, 숙주마우스에 이식하여 3주 후, 치근 및 치주조직 성장을 확인한 결과, 치주조직 성장을 증가시켰으며 혼합물 농도비율 1:10에서 치근성장과 이식된 치아 주위의 치조골 형성이 가장 우수한 것을 확인하였다(도 6 참조).In addition, the present inventors increased the periodontal tissue growth by confirming the root and periodontal tissue growth after embedding the lower jaw molars into the agarose beads containing the extract of Zucchini and Shin extract, And it was confirmed that the root growth and the alveolar bone formation around the implanted tooth were the best at a mixture concentration ratio of 1:10 (see FIG. 6).

따라서, 본 발명의 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물은 치근 또는 치주조직 성장 촉진용 또는 치주염 개선용 화장료 조성물로써 유용하게 사용될 수 있다. Therefore, the mixture of the extract of Lilac and the extract of Liliaceae of the present invention can be usefully used as a cosmetic composition for promoting root growth or periodontal growth or improving periodontal disease.

상기 화장료 조성물은 로션, 연고, 겔, 크림, 패치 또는 분무제 등이 있으나 여기에 국한되는 것은 아니다. 본 발명의 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 함유하는 화장료 조성물을 제조함에 있어서, 통상적으로 함유되는 화장료 조성물에 본 발명의 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물이 3 내지 30 중량부, 바람직하게는 5 또는 20 중량부로 첨가할 수 있다. The cosmetic composition may include, but is not limited to, lotions, ointments, gels, creams, patches or sprays. In preparing a cosmetic composition containing a mixture of a rosemary extract and a ginseng extract of the present invention, 3 to 30 parts by weight, preferably 5 or 20 parts by weight, of the rosemary extract and the ginseng extract of the present invention are added to a cosmetic composition usually contained in the composition By weight.

본 발명의 화장료 조성물에는 본 발명의 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장료 조성물에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may further contain, in addition to the mixture of the extract and the extract of the present invention, a lipid, an organic solvent, a solubilizing agent, a thickening agent and a gelling agent, a softening agent, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, A preservative, a vitamin, a barrier, a wetting agent, a essential oil, a dye, a pigment, a hydrophilic or lipophilic active agent, a lipid vesicle or May contain adjuvants conventionally used in the field of dermatology, such as any other ingredient conventionally used in cosmetic compositions. The components can also be introduced in amounts commonly used in the field of dermatology.

이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해서 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples and Experimental Examples.

단 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명이 하기 실험예에 의해서 한정되는 것은 아니다. EXAMPLES The following examples and experimental examples are for illustrative purposes only and are not intended to limit the scope of the present invention.

신이 추출물의 제조Manufacture of ginseng extract

본 발명자들은 중국산 신이(일본 오사카 천해당에서 구입) 꽃봉오리를 이의 중량 10배에 해당하는 에탄올을 첨가하여 3-7일 동안 추출하였다. 이후, 추출액을 여과하여 불용성 성분인 잔사를 제거하였고, 여과된 추출액은 감압농축기를 이용하여 농축하였다. The present inventors extracted the flower bud of Chinese origin (purchased from Osaka cloth, Japan) for 3-7 days by adding ethanol corresponding to 10 times its weight. Thereafter, the extract was filtered to remove insoluble residue, and the filtered extract was concentrated using a vacuum concentrator.

농축된 추출액을 동결건조하여 고상의 신이 추출물 300 g을 수득하였다.The concentrated extract was lyophilized to obtain 300 g of a ginseng extract as a solid phase.

후박 추출물의 제조Preparation of extract

본 발명자들은 일본 오사카 천해당에서 구입한 후박나무 껍질(1 kg)을 이의 중량 10배에 해당하는 에탄올을 첨가하여 3-7일 동안 추출하였다. 이후, 추출액을 여과하여 불용성 성분인 잔사를 제거하였고, 여과된 추출액은 감압농축기를 이용하여 농축하였다. The present inventors extracted the husk bark (1 kg) purchased from Osaka cloth, Japan, for 3-7 days by adding ethanol corresponding to 10 times its weight. Thereafter, the extract was filtered to remove insoluble residue, and the filtered extract was concentrated using a vacuum concentrator.

농축된 추출액을 동결건조하여 고상의 후박추출물 200 g을 수득하였다.The concentrated extract was lyophilized to obtain 200 g of a supernatant extract.

후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물 제조Manufacture of a mixture of ginger extract and ginger extract

본 발명자들은 상기 <실시예 1> 및 <실시예 2>에서 얻은 분말 형태의 신이 추출물 및 후박 추출물을 DMSO에 용해하여 (후박추출물 0.5, 1, 3 mg/ml, 신이추출물 1.5, 3, 5, 10, 15 ,30 mg/ml)의 농도로 제조하였다.The inventors of the present invention found that the powdery ginseng extract obtained from Example 1 and Example 2 were dissolved in DMSO (0.5, 1, 3 mg / ml, 1.2, 3, 5, 10, 15, 30 mg / ml).

하기 <실험예 1>에 사용하기 위한 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물 제조를 위해, 상기 제조된 후박 추출물 및 신이 추출물의 농도비를 1:3(후박 추출물 1 ㎍/ml + 신이 추출물 3 ㎍/ml), 1:10(후박 추출물 1 ㎍/ml + 신이 추출물 10 ㎍/ml) 또는 1:30(후박 추출물 1 ㎍/ml + 신이 추출물 30 ㎍/ml)으로 제조하였다. For the preparation of the mixture of the crude extract and the Shin extract for use in the following <Experimental Example 1>, the ratio of the crude extract to the fresh extract was adjusted to 1: 3 (1 ㎍ / ml + fresh extract 3 ㎍ / ml) , 1:10 (1 mg / ml of glutinous extract, 10 g / ml of glutinous extract) or 1:30 (1 mg / ml of glutinous extract and 30 g / ml of glutinous extract).

또한, 하기 <실험예 2>에 사용하기 위한 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물 제조를 위해, 후박 추출물 및 신이 추출물의 농도비를 1:3(후박 추출물 0.5 ㎍/ml + 신이 추출물 1.5 ㎍/ml), 1:10(후박 추출물 0.5 ㎍/ml + 신이 추출물 5 ㎍/ml) 또는 1:30(후박 추출물 0.5 ㎍/ml + 신이 추출물 15 ㎍/ml)으로 제조하였다. For the preparation of the mixture of the extract and the extract of the present invention for use in the following <Experimental Example 2>, the concentration ratio of the extract and the extract was adjusted to 1: 3 (0.5 g / ml of Extract extract + 1.5 g / ml of Extract of Shin extract) The extracts were prepared at 1:10 (0.5 ml / ml of glutinous extract + 5% g / ml of Shin extract) or 1:30 (glutinous extract of 0.5 g / ml + Shin extract of 15 g / ml).

또한, 하기 <실험예 3>에 사용하기 위한 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물 제조를 위해, 후박 추출물 및 신이 추출물의 농도비를 1:1(후박 추출물 3 ㎍/ml+신이 추출물 3 ㎍/ml), 1:3(후박 추출물 3 ㎍/ml+신이 추출물 10 ㎍/ml) 또는 1:10(후박 추출물 3 ㎍/ml+신이 추출물 30 ㎍/ml)으로 제조하였다. For the preparation of the mixture of the extract and the extract of the present invention for use in the following <Experimental Example 3>, 1: 1 (3. (3 ug / ml + ginseng extract 10 ㎍ / ml) or 1:10 (3 ug / ml + ginseng extract 30 g / ml).

<< 실험예Experimental Example 1> 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물이 nitric oxide(NO) 생성에 미치는 영향 확인 1> Determination of the Effect of Mixture of Extracts and Extracts on Nitric Oxide Production

<1-1> 후박 추출물 및 신이 추출물 처리에 따른 세포 생존율 확인<1-1> Determination of cell survival rate by treatment with extracts of Guanxi and Shin extract

본 발명자들은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 세포독성을 확인하고자 상기 <실시예 1> 내지 <실시예 3>에서 제조한 후박 추출물 또는 신이 추출물, 그리고 이의 혼합물을 Raw 264.7 세포에 하기와 같이 처리하는 실험을 수행하였다.The present inventors investigated the cytotoxicity of the mixture of the extract and the extract of Shin extract by treating the extracts or the extracts prepared in Examples 1 to 3 and the mixture thereof in Raw 264.7 cells as follows Experiments were performed.

구체적으로, Raw 264.7 세포를 96웰 배양접시 3 X 10³세포/웰의 농도로 접종한 후, 37℃, 5% CO₂에서 4시간 배양했다. 여기에 0.01 ㎍/ml의 LPS를 처리하고, 상기 <실시예 2>에서 얻은 1 mg/ml 농도의 후박 추출물 (배지 50 ㎕에 1 ㎍/ml의 농도가 되도록 0.05 ㎕), 상기 <실시예 1>에서 얻은 3, 10, 30 mg/ml 농도의 신이 추출물을 각각 (신이 3, 10, 30 ㎍/ml의 신이추출물의 농도가 되도록 배지 50 ul에 각각 0.05 ul로), 또는 상기 <실시예 3>에서 제조한 후박 추출물 및 신이 추출물 1:3, 1:10 및 1:30의 농도비로 혼합한 혼합물 (배지 50 ㎕에 후박 및 신이추출물 0.05 ㎕)를 처리한 후 4일 동안 배양하였다. Cell Counting kit(Dojindo)를 10 ㎕/웰 처리한 후 microplate reader를 이용하여 450/620 nm에서 흡광도를 측정하고 대조군의 흡광도와 비교하여 세포생존율을 백분율로 환산하였다. Specifically, Raw 264.7 cells were inoculated at a concentration of 3 × 10 3 cells / well in a 96-well culture dish and cultured at 37 ° C. and 5% CO 2 for 4 hours. LPS was treated with 0.01 ㎍ / ml of LPS and the extract of L. urea (0.05 되도록 in concentration of 1 / / ml in 50 배 of medium) at a concentration of 1 mg / ml obtained in <Example 2> The extracts of 3, 10 and 30 mg / ml obtained in Example 3 were diluted to 0.05 μl in 50 μl of the medium to give a concentration of 3, 10 and 30 μg / ml of Shin extract, respectively, (50 μl of the medium and 0.05 μl of the extract of Shinji) were mixed and cultured for 4 days at a concentration ratio of 1: 3, 1:10 and 1:30. The cell counting kit (Dojindo) was treated with 10 μl / well, and the absorbance was measured at 450/620 nm using a microplate reader. The cell viability was converted into a percentage by comparing with the absorbance of the control group.

그 결과, 후박 및 신이 추출물 처리군은 대조군과 세포 생존율의 유의한 차이를 보이지 않아, 세포독성이 없음을 확인하였다. As a result, it was confirmed that there was no significant cytotoxicity in the group treated with the extract of Goji and Shin extract.

<1-2> 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 NO(nitric oxide) 생성 억제 활성 확인<1-2> Confirmation of NO (nitric oxide) production inhibitory activity of mixture of extract and ginseng extract

본 발명자들은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물이 NO 생성에 미치는 영향을 확인하고자 하기와 같은 실험을 하였다.The present inventors conducted the following experiments in order to confirm the effect of the mixture of the extract and the extract on the production of NO.

구체적으로, Raw 264.7 세포를 96웰 배양접시에 3 X 10³세포/웰의 농도로 접종한 후 37℃, 5% CO₂에서 4시간 동안 배양하고, 0.01 ㎍/ml의 LPS를 처리하고, 상기 <실시예 2>에서 얻은 1 mg/ml 농도의 후박 추출물 (배지 50 ul에 1 ㎍/ml의 농도가 되도록 0.05 ul)ml, 상기 <실시예 1>에서 얻은 3, 10, 30 mg/ml 농도의 신이 추출물을 각각 (신이 3, 10, 30 ㎍/ml의 신이추출물의 농도가 되도록 배지 50 ul에 각각 0.05 ul로), 또는 상기 <실시예 3>에서 제조한 후박 추출물 및 신이 추출물 1:3, 1:10 및 1:30의 농도비로 혼합한 혼합물 (배지 50 ㎕에 후박 및 신이추출물 0.05 ㎕)를 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 배양액 50 ㎕를 취하여 같은 양의 Griess Reagent(Promega)를 넣어주고 10분간 상온에 반응시킨 후 ELISA 분석기로 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. Specifically, Raw 264.7 cells were inoculated in a 96-well culture dish at a concentration of 3 × 10 3 cells / well, cultured at 37 ° C. in 5% CO 2 for 4 hours, treated with 0.01 μg / ml of LPS, Ml of the extract obtained in Example 2 (concentration of 1 μg / ml in 50 μl of the culture medium) (0.05 μl), the concentration of 3, 10 and 30 mg / ml obtained in Example 1 The extracts were added to each of 50 μl of the medium (the concentrations of 3, 10 and 30 μg / ml of the extract were adjusted to 0.05 μl in the medium, respectively), or the extracts of the dried and dried extracts prepared in Example 3 : 10 and 1: 30 (50 [mu] l of medium and 0.05 [mu] l of extract of Shinki) were mixed and cultured for 24 hours. The same amount of Griess Reagent (Promega) was added to the culture solution (50 ㎕), and incubated at room temperature for 10 minutes. Absorbance was measured at 540 nm by ELISA.

그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이 후박 추출물 및 신이 추출물의 1:30의 농도 비율로 처리한 세포에서 LPS에 의해 증가한 NO의 생성 억제 활성이 가장 큰 것을 확인하였다. 후박 추출물 1 ㎍/ml 및 신이 추출물 3 및 10 ㎍/ml의 농도에서는 LPS에 의해 증가한 NO를 억제하지 못하였고, 신이 추출물 30 ㎍/ml 처리시 NO 활성이 약 30% 억제하는 것을 확인하였다. As a result, as shown in FIG. 1, it was confirmed that the inhibitory activity of NO production by LPS was the highest in the cells treated with the 1: 30 ratio of L. extract and Shin extract. The inhibition of NO increased by LPS at 1 ㎍ / ml and Shin extracts of 3 and 10 ㎍ / ml was inhibited by 30% inhibition of NO activity at 30 ㎍ / ml of Shin extract.

또한, 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합 처리시 NO 활성이 유의적으로 억제되었으며, 후박 및 신이 추출물 1:3 비율 혼합물 처리군은 신이 추출물 3 ㎍/ml 처리에 비하여 약 10%, 후박 및 신이 추출물 1:30 비율 혼합물 처리군은 신이 추출물 30 ㎍/ml에 비하여 약 20%의 NO 활성 억제 효과를 보였지만, 후박 및 신이 추출물 1:10 비율 혼합물 처리군은 신이 추출물 10 ㎍/ml 처리군에 비하여 약 50%의 NO 활성 억제 효과를 보여, 농도비율 1:10의 혼합 효과가 가장 크며, 10 ㎍/ml 농도의 신이 추출물이 포함된 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 제조가 경제성이 있을 것으로 판단된다. In addition, the NO activity was significantly inhibited by the mixture of the extract of L. extract and the extract of Shin extract. The ratio of 1: 3 mixture of L. and Shin extract was about 10% higher than that of 3 ㎍ / : 30 ratio mixture showed 20% inhibitory effect on NO activity compared with 30 ㎍ / ml extract of Shin extract. However, in the mixture treated with 1:10 mixture of extract and. Extract, about 50 %. The concentration ratio of 1:10 was the most effective, and it was concluded that the preparation of the mixture of the extract and the ginseng extract containing 10 ㎍ / ml of ginseng extract would be economical.

<< 실험예Experimental Example 2> 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 파골세포 분화 억제 효과 확인 2> Confirmation of the osteoclast differentiation inhibitory effect of a mixture of acanthoxylate extract and ginseng extract

<2-1> 후박 추출물 및 신이 추출물 처리에 따른 세포생존율 확인<2-1> Determination of cell survival rate by treatment with extracts of Puerariae Radix and Extracts

본 발명자들은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 세포독성을 확인하고자 상기 <실시예 1> 내지 <실시예 3>에서 제조한 후박 추출물 또는 신이 추출물, 그리고 이의 혼합물을 Raw 264.7 세포에 하기와 같이 처리하는 실험을 수행하였다.The present inventors investigated the cytotoxicity of the mixture of the extract and the extract of Shin extract by treating the extracts or the extracts prepared in Examples 1 to 3 and the mixture thereof in Raw 264.7 cells as follows Experiments were performed.

구체적으로, Raw 264.7 세포를 96 웰 배양접시 3 X 10³세포/웰의 농도로 접종한 후, 37℃, 5% CO₂에서 4시간 배양했다. 여기에 50 mg/ml의 RANKL을 (배지 50ul에 50 ㎍/ml의 농도가 되도록 0.05 ul)로 처리하고, 상기 <실시예 2>에서 얻은 0.5 mg/ml 농도의 후박 추출물, 상기 <실시예 1>에서 얻은 1.5, 5, 15 mg/ml 농도의 신이 추출물을 각각 (0.5 ㎍/ml농도의 후박, 1.5, 5, 15 ㎍/ml의 신이추출물의 농도가 되도록 배지 50 ul에 각각 0.05 ul로) 처리 또는 상기 <실시예 3>에서 제조한 후박 추출물 및 신이 추출물 1:3, 1:10 및 1:30의 농도비로 혼합한 혼합물(배지 50 ㎕에 후박 및 신이추출물 0.05 ㎕)를 처리한 후 4일 동안 배양하였다. Cell Counting kit(Dojindo)를 10 ㎕/웰 처리한 후 microplate reader를 이용하여 450/620 nm에서 흡광도를 측정하고 대조군의 흡광도와 비교하여 세포생존율을 백분율로 환산하였다. Specifically, Raw 264.7 cells were inoculated at a concentration of 3 × 10 3 cells / well in a 96-well culture dish and cultured at 37 ° C. and 5% CO 2 for 4 hours. The RANKL of 50 mg / ml was treated with 0.05 μl of 50 μg / ml of 50 μg / ml of the medium, and 0.5 ml of the supernatant extract obtained in Example 2, the extract of Example 1 (0.05 μl each in 50 μl of the medium so that the concentrations of the extracts of 0.5 μg / ml and 1.5 μg, 5 μg and 15 μg / ml were obtained, respectively) at the concentrations of 1.5, 5 and 15 mg / (50 μl of the medium and 0.05 μl of the extract of Shinwha and Shin extract) were mixed at a concentration ratio of 1: 3, 1:10 and 1:30, respectively, Lt; / RTI &gt; The cell counting kit (Dojindo) was treated with 10 μl / well, and the absorbance was measured at 450/620 nm using a microplate reader. The cell viability was converted into a percentage by comparing with the absorbance of the control group.

그 결과, 후박 및 신이 추출물 처리군은 대조군과 세포 생존율의 유의한 차이를 보이지 않아, 세포독성이 없음을 확인하였다. As a result, it was confirmed that there was no significant cytotoxicity in the group treated with the extract of Goji and Shin extract.

<2-2> 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 TRAP(&Lt; 2-2 > TRAP ( TartrateTartrate -resistant acid -resistant acid phosphatase포스화제 ) 억제 활성 확인) Inhibitory activity

본 발명자들은 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물이 파골세포 분화에 미치는 효과를 확인하기 위하여, Raw 264.7 세포에 RANKL을 처리하여 파골세포 분화를 유도하고, 후박 추출물, 신이 추출물을 또는 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 처리한 후, 파골세포 특이 유전자인 TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase)활성을 측정하였다.In order to confirm the effect of the mixture of the extract and the extract on the osteoclast differentiation, Raw 264.7 cells were treated with RANKL to induce osteoclast differentiation, After treatment of the mixture, the activity of TRAP (Tartrate-resistant acid phosphatase), an osteoclast-specific gene, was measured.

구체적으로, Raw 264.7 세포를 96 웰 배양접시 3 X 10³세포/웰의 농도로 접종한 후 37℃, 5% CO₂에서 4시간 배양한 후, RANKL을 (배지 50 ㎕에 50 ㎍/ml의 농도가 되도록 0.05 ul)로 처리하고, 상기 <실시예 2>에서 얻은 0.5 mg/ml 농도의 후박 추출물, 상기 <실시예 1>에서 얻은 1.5, 5, 15 mg/ml 농도의 신이 추출물을 각각 (0.5 ㎍/ml농도의 후박, 1.5, 5, 15 ㎍/ml의 신이추출물의 농도가 되도록 배지 50 ul에 각각 0.05 ul로) 처리, 또는 상기 <실시예 3>에서 제조한 후박 추출물 및 신이 추출물 1:3, 1:10 및 1:30의 농도비로 혼합한 혼합물 (배지 50 ㎕에 후박 및 신이추출물 0.05 ㎕)를 처리한 후 4일 동안 배양하였다. 배지를 제거하고 10% 포르말린용액을 각 웰당 50 ㎕씩 첨가하여 25분 동안 고정시켰다. 10% 포르말린용액을 제거한 후 100 ㎕의 100% 에탄올로 세척한 뒤, 1일 동안 plate를 건조시킨 후 p-Nitrophenyl phosphate를 1.36 mg/ml의 농도로 함유한 TRAP assay 완충액을 100㎕/웰씩 처리하였다. 1시간 동안 반응시킨 뒤 반응액 85 ㎕를 취하여 동량의 0.1N NaOH와 혼합하여 새로운 배양 접시에서 반응시킨 뒤, 405/620 nm에서 흡광도를 측정하였다. Specifically, Raw 264.7 cells were inoculated at a concentration of 3 × 10 3 cells / well in a 96-well culture dish and cultured at 37 ° C. and 5% CO 2 for 4 hours. Then, RANKL (50 μg / 0.05 μl), and the extracts of 0.5 ml / ml of the extract obtained in Example 2 and the extracts of 1.5, 5 and 15 mg / ml of the extract obtained in Example 1 (0.5 μg / ml), 1.5, 5, and 15 占 퐂 / ml of Shin extract were added to each 50 占 퐇 of the extract to a concentration of 1: 3, , 1: 10 and 1: 30 (50 [mu] l of the medium and 0.05 [mu] l of the extract of Shinki and Shinchi) were cultured for 4 days. The medium was removed and 50 [mu] l / well of 10% formalin solution was added and fixed for 25 minutes. After removing the 10% formalin solution and washing with 100 μl of 100% ethanol, the plate was dried for 1 day and treated with 100 μl / well of TRAP assay buffer containing p-Nitrophenyl phosphate at a concentration of 1.36 mg / ml . After reacting for 1 hour, 85 μl of the reaction solution was mixed with the same amount of 0.1 N NaOH, reacted in a new culture dish, and absorbance was measured at 405/620 nm.

그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이 후박 추출물 0.5 ㎍/ml 및 신이 추출물 1.5 및 5 ㎍/ml의 농도에서는 TRAP 억제 활성을 나타내지 않았으나, 15 ㎍/ml의 신이 추출물 처리시 약 20%의 TRAP 억제효능을 나타내었다. 그러나 후박 추출물과 신이 추출물을 1:3, 1:10, 1:30의 농도비율로 혼합하여 처리하였을 때 신이 추출물 15 ㎍/ml 단독 처리보다도 TRAP 억제 효과가 더 뛰어난 것을 확인하였다(도 2). As a result, as shown in FIG. 2, TRAP inhibitory activity was not exhibited at a concentration of 0.5 μg / ml of extract of Bean curd extract and 1.5 and 5 μg / ml of Shin extract. However, TRAP inhibitory effect of about 20% Respectively. However, it was confirmed that the mixture of the extract of Phellinus linteus extract and the extract of Shin extract was mixed at a ratio of 1: 3, 1:10, 1: 30, and the TRAP inhibitory effect was better than that of the extract of Shin extract (15 ㎍ / ml alone).

후박 추출물 및 신이 추출물의 1:3 비율 혼합물 처리군은 신이 추출물 1.5 ㎍/ml 처리에 비하여 약 25%, 후박 추출물 및 신이 추출물의 1:30 비율 혼합물 처리군은 신이 추출물 30 ㎍/ml에 비하여 약 30%의 TRAP 활성 억제 효과를 보여 주었으나, 후박 추출물 및 신이 추출물의 1:10 비율 혼합물 처리군은 신이 추출물 5 ㎍/ml 처리군에 비하여 약 50%의 TRAP 활성 억제 효과를 보여주어 농도비율 1:10의 혼합 효과가 가장 크며, 10 ㎍/ml 농도의 신이 추출물이 포함된 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 제조가 경제성이 있을 것으로 판단된다. The ratio of 1: 3 ratio mixture of L. extract and Ginseng extract was about 25% higher than that of Shin extract at 1.5 ㎍ / ml and that of L. extract and Shin.i extract at 1: 30% TRAP inhibitory effect, but the 1:10 ratio mixture of L. extract and Shin extract showed about 50% inhibition of TRAP activity compared with 5 ㎍ / ml extract of Shin extract. : 10 was the most effective, and it was concluded that it would be economical to prepare a mixture of the extracts of Phellodendri acerbacterium L. and Shin extract containing 10.

또한, 후박 추출물 0.5 ㎍/ml 또는 신이 추출물 1.5 또는 5 ㎍/ml의 단독 처리에 의하여 TRAP 활성이 억제되지 않았으나, 후박 추출물 및 신이 추출물의 1:3(후박 0.5 ㎍/ml+신이 1.5 ㎍/ml) 또는 1:10(후박 0.5 ㎍/ml+신이 5 ㎍/ml) 혼합 처리에 의하여 TRAP 활성이 억제되었고, 1:30의 비율이 가장 큰 파골세포 분화 억제 효과를 나타내었으며, 후박 및 신이 추출물의 혼합처리가 파골세포 억제에 대해 시너지효과를 가지는 것을 확인하였다. 특히, 1:10 혼합처리에 의해 약 50%의 TRAP 활성 억제효과를 보이며, 1:30 비율의 혼합처리와 크게 차이나지 않아, 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합비율 1:10 에서 혼합으로 인한 파골세포 분화 억제 효과가 뛰어남을 확인하였다(도 2).In addition, TRAP activity was not inhibited by the addition of 0.5 ㎍ / ml of extract or 0.5 to 5 ㎍ / ml of Shin extract. However, 1: 3 (0.5 ㎍ / ml of glutinous extract plus 1.5 ㎍ / ml of Shin extract) Or 1:10 (0.5 μg / ml of glutamine plus 5 μg / ml of glutamine) inhibited TRAP activity. The ratio of 1: 30 inhibited the osteoclast differentiation, Were synergistic against osteoclast inhibition. In particular, 1:10 mixture treatment showed about 50% inhibition of TRAP activity, and it was not significantly different from 1:30 ratio mixing treatment. It was confirmed that the osteoclast differentiation inhibitory effect was excellent (Fig. 2).

<< 실험예Experimental Example 3> 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 조골세포 분화 유도 효과 확인 3> Confirmation of osteoblast differentiation inducing effect of mixture of extract

후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 조골세포 분화 유도 효과를 확인하기 위해 MC3T3-E1 세포에서 조골세포 분화의 표지자인 alkialine phosphatase(ALP) 활성을 측정하였다. To determine the osteoblast differentiation inducing effect of the extracts of Puerariae Radix and Shin extract, alkaline phosphatase (ALP) activity, which is a marker of osteoblast differentiation, was measured in MC3T3-E1 cells.

구체적으로, MC3T3-E1 세포를 96웰 배양접시에 5 X 10³세포/웰 농도로 접종한 후 37℃, 5% CO₂에서 2일간 배양하였다. 상기 <실시예 2>에서 얻은 3 mg/ml 농도의 후박 추출물, 상기 <실시예 1>에서 얻은 3, 10, 30 mg/ml 농도의 신이 추출물, 또는 상기 <실시예 3>에서 제조한 후박 추출물 및 신이 추출물 1:1, 1:3 및 1:10의 농도비로 혼합한 혼합물을 각각 50 ㎕/웰로 처리한 후 분화유도인자를 포함한 배양배지를 150 ㎕/웰으로 배지를 교환한 후 4일간 배양하였다. 배지를 제거하고 100㎕의 100% 메탄올로 세척한 후 1일 동안 배양접시를 건조한 뒤 p-Nitrophenyl phosphate를 2.47 mg/ml의 농도로 함유한 ALP assay buffer를 100 ㎕/웰으로 처리하여 1시간 반응시킨 후 microplate reader를 이용하여 405/620 nm에서 흡광도를 측정하였다.Specifically, MC3T3-E1 cells were inoculated in a 96-well culture dish at a concentration of 5 × 10 3 cells / well, followed by incubation at 37 ° C. and 5% CO 2 for 2 days. The topical extract at a concentration of 3 mg / ml obtained in Example 2, the Shin extract at the concentrations of 3, 10 and 30 mg / ml obtained in Example 1, or the topical extract prepared in Example 3 And gins were mixed at a concentration ratio of 1: 1, 1: 3, and 1:10, respectively, to a concentration of 50 μl / well. After the medium was replaced with 150 μl / well of the culture medium containing the induction factor, Respectively. After removing the medium and washing with 100 μl of 100% methanol, the culture dish was dried for 1 day, treated with 100 μl / well of ALP assay buffer containing p-Nitrophenyl phosphate at a concentration of 2.47 mg / ml, The absorbance was measured at 405/620 nm using a microplate reader.

그 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이 후박 추출물 3 ㎍/ml 또는 신이 추출물 3, 10, 30 ㎍/ml을 단독으로 처리하였을 때 신이 추출물 30 ㎍/ml에서 대조군에 비해 ALP 활성이 약 20% 증가하였고, 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 처리하였을 때, 혼합비율 1:10의 후박 추출물 및 신이 추출물 혼합물 처리에서 신이 추출물을 단독으로 처리(30 ㎍/ml)하였을 때 보다 ALP 활성이 약 50% 이상 증가되었다. 따라서, 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물 중 특히 1:10 비율의 혼합물은 조골세포의 분화를 촉진하는 것을 확인하였다(도 3). As a result, as shown in FIG. 3, when 3 μg / ml of extract of Extendant extract or 3, 10 and 30 μg / ml of Extendant extract were treated alone, the ALP activity was increased about 20% (30 ㎍ / ml), the extracts were treated with a mixture of the extracts of L. and L. extracts at a mixing ratio of 1:10. The ALP activity was increased by more than 50% . Therefore, it was confirmed that a mixture of the mixture of the extract and the ginseng extract, particularly at a ratio of 1:10, promoted osteoblast differentiation (FIG. 3).

<< 실험예Experimental Example 4> 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 사람  4> Man of mixture of ginger extract and ginger extract 치주인대세포Periodontal ligament cells 증식 및 세포 활성 효과 확인 Identification of proliferation and cell activity

<4-1> <4-1> 후박추출물Acacia extract  And 신이추출물의Ginseng extract 치주인대세포Periodontal ligament cells 증식 효과 확인 Confirmation of proliferation effect

본 발명자들은 상기 <실시예 1> 내지 <실시예 >에서 수득한 후박 추출물 및 신이추출물이 사람 치주인대세포 증식 및 세포 활성도 증가 그리고 분화 정도에 미치는 영향을 알아보기 위해, 하기와 같은 실험들을 실시하였다.The present inventors conducted the following experiments in order to investigate the effects of the extracts of the Chinese cabbage extract and Shin extract on the growth of the human periodontal ligament cells and the degree of cell activity increase and differentiation obtained in the above Examples 1 to 3 .

구체적으로, 건강한 사람의 교정치료 목적으로 발거한 소구치의 치주인대 부분을 큐렛(curret)을 이용하여 무균적으로 긁어 배양접시에 올려놓은 후 10% FBS(Fetal bovine serum)을 첨가한 배양액을 넣어 배양하였다. 3일 간격으로 배양액을 교환해 주면서 5계대 까지 배양하여 실험에 사용하였다. 배양시 습도는 95%, 온도 37C, 5% CO2를 계속 공급하여 배양하였다. 치주인대세포 증식효과를 확인하기 위해 96 well plate에 3X103 세포/웰 접종한 후 2일간 배양하여 100% Conflency 시켰다. 2일 후 100% Confluency 된 세포에 상기 <실시예 2>에서 얻은 1 mg/ml 농도의 후박추출물, 상기 <실시예 1>에서 얻은 1, 3, 10 mg/ml의 농도의 신이추출물(1 ㎍/ml의 농도의 후박, 1, 3, 10 ㎍/ml의 신이추출물의 농도가 되도록 배지 50 ㎕에 각각 0.05 ㎕로 처리)또는 <상기예 3>에서 제조한 후박추출물 및 신이추출물 1:1, 1:3 및 1:10의 농도비로 혼합한 혼합물(50 ㎕)을 넣어 총 200 ㎕가 되게 하여 4일간 배양하였다. 배양이 끝난 후 PBS에 용해한 MTT(methyl thiazol-2-YL-2,5-diphenyl tetraolium bromide, sigma)용액 20 ㎕를 각 well에 넣고 4시간 동안 배양한 후 MTT 용액을 제거하고 formazon 결정을 용해시키기 위해 각 well에 100 ㎕씩 첨가하였다. Plate를 잘 흔든 후 microplate reader를 이용하여 405/620 nm에서 흡광도를 측정하였다. Specifically, the portion of the periodontal ligament of the premolars extracted for the purpose of orthodontic treatment for healthy persons was aseptically scratched using a curret, placed on a culture dish, and cultured with 10% FBS (Fetal Bovine Serum) Respectively. The culture was exchanged at intervals of 3 days and cultured up to 5 passages and used for the experiment. During the culture, the culture was continued by supplying 95% humidity, 37C, and 5% CO 2 . To confirm the effect of periodontal ligament cell proliferation, 3 × 10 3 cells / well were inoculated in a 96-well plate, followed by incubation for 2 days. After 2 days, 100 μl of the confluent cells were treated with the extract of 1 mg / ml of the extract obtained in Example 2 and the extract of Shin extract of 1, 3 and 10 mg / ml obtained in Example 1 / ml, and treated with 0.05 μl each of 50 μl of the medium so that the concentrations of 1, 3, and 10 μg / ml of the extract were in the range of 1: 1, 1: 1, 1: 3 and 1:10, and the mixture was incubated for 4 days. After incubation, 20 μl of MTT (methyl thiazol-2-YL-2,5-diphenyl tetraolium bromide, Sigma) dissolved in PBS was added to each well and incubated for 4 hours. The MTT solution was removed and the formazon crystals were dissolved 100 [mu] l / well were added to each well. Plate was shaken well and absorbance was measured at 405/620 nm using a microplate reader.

그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이 후박추출물 또는 신이추출물이 단독으로 존재할 때에 비해 복합물이 1:10의 비율로 존재할 때에 현저하게 높은 세포활성도를 나타내었다(도 4). 이 결과는 후박추출물과 신이추출물을 혼합한 경우에 두 가지 추출물이 함께 작용하여 상승효과를 나타내었기 때문인 것으로 확인되었다. As a result, as shown in FIG. 4, when the complex was present at a ratio of 1:10 as compared with when the extract was extracted singly, the extract showed remarkably high cell activity (FIG. 4). This result was confirmed by the fact that the two extracts showed synergistic effect when the extract of L. extract and Shin extract were mixed together.

<4-2> <4-2> 후박추출물Acacia extract  And 신이추출물의Ginseng extract 치주인대세포의Periodontal ligament cells ALP activity 확인 Check ALP activity

ALP(Alkaline phosphatase, ALP)는 치주인대세포 분화의 초기 지표로 알려져 있다. 따라서, 본 발명자들은 후박 및 신이추출물 복합물이 ALP 활성을 증가시키는지 여부를 평가하였다.ALP (Alkaline phosphatase, ALP) is known as an early indicator of periodontal ligament cell differentiation. Thus, the present inventors assessed whether the pasta and ginseng extract complexes increased ALP activity.

구체적으로, 배양된 세포를 96 well plate 각 well에 3X103 cells/well의 농도로 접종한 후 37C, 5% CO2에서 2일간 배양하였다. 100% Confluency 된 세포에 상기 <실시예 2>에서 얻은 1 mg/ml 농도의 후박추출물, 상기 <실시예 1>에서 얻은 1, 3, 10 mg/ml의 농도의 신이추출물(1 ㎍/ml의 농도의 후박, 1, 3, 10 ㎍/ml의 신이추출물의 농도가 되도록 배지 50 ㎕에 각각 0.05 ㎕로 처리) 또는 <상기예 3>에서 제조한 후박추출물 및 신이추출물 1:1, 1:3 및 1:10의 농도비로 혼합한 혼합물(50 ㎕)과 분화유도인자((10 mM beta-glycerophosphate(Sigma), 50 ㎍/ml L-ascorbic acid(Sigma))를 포함한 배양배지 150 ㎕/well 배지를 교환한 후 4일간 배양하였다. 배지를 제거하고 100 ㎕의 100% 메탄올로 세척한 후 1일 동안 배양접시를 건조한 뒤 p-Nitrophenyl phosphate를 2.47 mg/ml의 농도로 함유한 ALP assay buffer를 100 ㎕/well로 처리하여 1시간 반응시킨 후 microplate reader를 이용하여 405/620 nm에서 흡광도를 측정하였다. Specifically, the cultured cells were inoculated into each well of a 96-well plate at a concentration of 3 × 10 3 cells / well and cultured at 37 ° C and 5% CO 2 for 2 days. 100% confluent cells were cultured in the same manner as in Example 2 except that the extract of 1 mg / ml of the extract obtained in Example 2 and the extract of Shin extract of 1, 3 and 10 mg / ml obtained in Example 1 1, 3 and 10 쨉 g / ml of the extract were treated with 0.05 쨉 l each of 50 쨉 l of the medium so as to obtain the concentration of the extract, And 50 μl of a mixture (50 μl) mixed at a concentration ratio of 1:10 and 150 μl / well of a culture medium containing differentiation inducing factors (10 mM beta-glycerophosphate (Sigma), 50 μg / ml L-ascorbic acid After removing the medium and washing with 100 μl of 100% methanol, the culture dish was dried for 1 day and ALP assay buffer containing 2.47 mg / ml p-Nitrophenyl phosphate was added to 100 After incubation for 1 hour, the absorbance was measured at 405/620 nm using a microplate reader.

그 결과, 도 5에 나타낸 바와 같이 후박 추출물 1 ㎍/ml 또는 신이추출물 1, 3, 10 ㎍/ml을 단독으로 처리하였을 때 신이추출물 10 ㎍/ml에서 대조군에 비해 ALP 활성이 약 10% 증가하였고, 후박추출물 및 신이추출물의 혼합물을 처리하였을 때, 혼합비율 1:10의 후박추출물 및 신이추출물 혼합물 처리에서 신이추출물을 단독으로 처리하였을 때보다 ALP 활성이 약 40% 이상 증가된 것을 확인하였다(도 5). 따라서, 후박추출물 및 신이추출물의 혼합물 중 특히 1:10의 비율의 혼합물은 치주인대세포의 분화를 촉진하는 것을 확인하였다.As a result, as shown in FIG. 5, ALP activity was increased about 10% at 10 ㎍ / ml of the extract of Shin extract when compared with the control, when 1 ㎍ / ml of extract or 1, 3 and 10 ㎍ / , The extracts of Puerariae Radix, and the extracts of Ginkgo biloba extract, the ALP activity was increased by about 40% or more when the extract was administered alone, 5). Therefore, it was confirmed that a mixture of the mixture of the extract and the ginseng extract, especially at a ratio of 1:10, promoted the differentiation of periodontal ligament cells.

<< 실험예Experimental Example 5> 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 치근 및 치주조직 성장 촉진 효과 확인 5> Confirmation of Root Root and Periodontal Growth Promoting Effect of Mixture of Extracts and Extracts

후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물의 치근 및 치주조직 성장 촉진 효과를 확인하기 위하여 후박 추출물, 신이 추출물 또는 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 마우스로부터 적출한 치아의 치수에 하기와 같이 처리하는 실험을 수행하였다.In order to confirm the effect of accelerating the root and periodontal growth of the mixture of ginseng extract and ginseng extract, an experiment was conducted in which the gums of the ginseng extract, ginseng extract or ginseng extract and ginseng extract were treated as follows .

구체적으로, 1 ml의 PBS에 5 mg/ml 후박 추출물 (5 ㎍/ml 되도록 1 ㎕ 첨가) 및 1 ml의 PBS에 15, 50 mg/ml 신이 추출물(15, 50 ㎍/ml 되도록 1ul), 그리고 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합 비율이 1:3 또는 1:10의 비율이 되도록 PBS에 희석하여 준비하였다. 그리고 4개의 아가로스 비드(Affi-Gel Blue Gel, #153-7301, Bio-Rad Laboratories Inc.)를 PBS로 세척한 뒤 상기 후박 추출물, 신이 추출물 또는 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물이 비드에 흡수되도록 최소 60분 동안 반응시켰다. 대조군으로 다른 4개의 비드는 PBS에만 반응시켰다. 그 후, 5일령의 C57BL/6 마우스(대한바이오링크)를 희생시켜 아래턱(Lower jaws)에서 어금니(Molar)를 적출하고, 적출한 치아의 치수를 후박 추출물, 신이 추출물 또는 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 포함하고 있는 아가로스 비드에 포매(Embedding)하였다. 대조군으로는 적출한 치아의 치수를 PBS를 포함한 아가로스 비드에 포매하였다. 아가로스 비드는 8주령의 C57BL/6 숙주마우스 신장의 캡슐에 각각 이식(Graft)하였고, 숙주 마우스는 12시간 명암주기, 실온, 자유섭식 조건에서 사육하였고, 이식 3주 후에 희생시켜 신장을 꺼내고 치아를 관찰하였다. 상기 치아의 3D 이미지는 마이크로 CT로 촬영하였다.Specifically, 1 μl of 5 mg / ml L. extract (1 μl added to 5 μg / ml) and 1 μl of 15,50 mg / ml Shin extract (1 μl to make 15 μg / ml) were added to 1 ml of PBS, The mixture was adjusted to a ratio of 1: 3 or 1: Then, four agarose beads (Affi-Gel Blue Gel, # 153-7301, Bio-Rad Laboratories Inc.) were washed with PBS, and the mixture was applied so that the beak extract, The reaction was allowed to proceed for at least 60 minutes. The other four beads as controls were reacted only with PBS. Thereafter, Molar was removed from the lower jaws at the sacrifice of C57BL / 6 mouse (BioLink) at 5 days of age and the size of the extracted tooth was compared with that of the Lilium extract, Shin extract or Lilium extract and Shin extract And embedded in agarose beads containing the mixture. As a control, the size of extracted teeth was embedded in agarose beads containing PBS. Agarose beads were grafted into capsules of 8-week-old C57BL / 6 host mouse kidneys, and the host mice were raised at 12 hours of light-dark cycle, room temperature, free-feeding conditions, sacrificed three weeks after transplantation, Respectively. The 3D image of the tooth was photographed by micro CT.

그 결과, 도 6에 나타낸 바와 같이 대조군(PBS)에서는 치근(dental root) 및 뼈의 성장이 거의 관찰되지 않았고, 후박 추출물 또는 신이 추출물 단독 처리시 치근 및 치주조직의 성장이 미미하였으나, 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 처리하였을 경우 치주조직 성장이 증가되었으며, 1:3 비율에 비하여 1:10의 비율의 농도에서 치근 성장과 이식된 치아 주위에 치조골이 새롭게 형성이 더욱 증가되어 있는 것을 관찰하였다. 따라서, 후박 추출물 또는 신이 추출물 단독 처리보다 상기 두 추출물을 혼합하여 처리하였을 때, 치근 및 치주조직 형성 촉진 효과가 뛰어나며, 특히, 후박 추출물:신이 추출물의 혼합 비율이 1:10에서 치근 및 치주조직 형성 촉진 효과가 가장 우수한 것을 확인하였다.As a result, as shown in FIG. 6, growth of dental root and bone was hardly observed in the control group (PBS), and growth of root and periodontal tissues was minimal when the extract of Leucaceae or Shin extract was used alone. However, When ginseng extract was treated with a mixture of extracts, periodontal tissue growth was increased. At a ratio of 1: 10 compared with the 1: 3 ratio, root formation and alveolar bone were newly formed around the root growth and implanted teeth. Therefore, when the two extracts were mixed with each other, the effect of promoting root formation and periodontal tissue formation was better than that of the extract of L. extract or Shin.i extract alone. In particular, when the mixture ratio of L. extract: Shin extract was 1:10, It was confirmed that the promoting effect was the most excellent.

이하, 본 발명의 후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 활성성분으로 함유하는 약학적 조성물, 의약외품 조성물, 및 화장료 조성물을 위한 제조예를 예시한다.Hereinafter, a preparation example for a pharmaceutical composition, a quasi-drug composition, and a cosmetic composition containing as an active ingredient a combination of an extract of Lilac and a extract of Shin extract of the present invention is illustrated.

<< 제조예Manufacturing example 1> 약학적 조성물의 제조 1> Preparation of pharmaceutical composition

<1-1> 정제의 제조(직접 가압)<1-1> Preparation of Tablets (Direct Pressurization)

활성성분 5.0 ㎎5.0 mg of active ingredient

락토오스 14.1 ㎎Lactose 14.1 mg

크로스포비돈 USNF 0.8 ㎎Crospovidone USNF 0.8 mg

마그네슘 스테아레이트 0.1 ㎎0.1 mg of magnesium stearate

통상적인 정제의 제조 방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 첨가하여 균일하게 혼합하고 가압하여 정제를 제조하였다.According to the conventional preparation method of tablets, the above ingredients were added in the prescribed amounts, uniformly mixed and pressed to prepare tablets.

<1-2> 정제의 제조(습식 조립)<1-2> Preparation of tablets (wet assembly)

활성성분 5.0 ㎎5.0 mg of active ingredient

락토오스 16.0 ㎎Lactose 16.0 mg

녹말 4.0 mgStarch 4.0 mg

프리솔베이트 80 0.3 mgPresorbate 80 0.3 mg

실리콘 다이옥사이드 2.7 ㎎2.7 mg of silicon dioxide

마그네슘 스테아레이트 2.0 ㎎2.0 mg of magnesium stearate

활성성분을 체로 친 후, 락토오스와 녹말을 혼합하였다. 이후, 폴리솔베이트를 순수한 물에 녹인 녹인 후, 적당량을 활성성분, 락토오스 및 녹말 혼합물에 첨가한 다음 미립화하였다. 건조 후에 미립을 제질한 후, 콜로이달 실리콘 다이옥사이드 및 마그네슘 스타아레이트와 혼합하였다. 미립을 가압하여 정제를 제조하였다.The active ingredient was sieved and then lactose and starch were mixed. Then, the polysorbate was dissolved in pure water, and an appropriate amount was added to the active ingredient, lactose and starch mixture, followed by atomization. After drying, the granulate was sieved and mixed with colloidal silicon dioxide and magnesium starate. The granules were pressurized to prepare tablets.

<< 제조예Manufacturing example 2> 의약외품 조성물의 제조 2> Preparation of quasi-drug composition

<2-1> 구강용 <2-1> Oral use 가글제의Gaggle 제조 Produce

활성성분 0.1 ~ 1.0 g0.1 to 1.0 g of the active ingredient

자일리톨 5 ~ 10 gXylitol 5 to 10 g

에틸알콜 5 ~ 15 gEthyl alcohol 5-15 g

솔비톨 5 ~ 15 gSorbitol 5 to 15 g

사카린 나트륨 10 ~ 100 ㎎10 to 100 mg of saccharin sodium

소디움 모노플루오로포스페이트 500 ~ 1000 ㎎Sodium monofluorophosphate 500 to 1000 mg

소디움 라우릴설페이트 100 ~ 200 ㎎Sodium lauryl sulfate 100-200 mg

폴리솔베이트 20 100 ~ 1000 ㎎Polysorbate 20 100 to 1000 mg

페파민트 플레이버 10 ~ 100 ㎎Pepaminite flavor 10 to 100 mg

소디움 벤조에이트 10 ~ 100 gSodium benzoate 10-100 g

<2-2> 치약의 제조<2-2> Preparation of Toothpaste

활성성분 1.9 중량부Active ingredient 1.9 parts by weight

무수 실리카 10.0 중량부10.0 parts by weight of anhydrous silica

잔탄검 0.7 중량부Xanthan gum 0.7 part by weight

황산마그네슘 2.0 중량부Magnesium sulfate 2.0 parts by weight

모노플루오르인산나트륨 0.7 중량부Sodium monofluorophosphate 0.7 part by weight

소르비톨 59.0 중량부Sorbitol 59.0 parts by weight

폴리에틸렌글리콜 4.0 중량부Polyethylene glycol 4.0 parts by weight

사카린나트륨 0.2 중량부0.2 part by weight of sodium saccharin

라우릴황산나트륨 1.0 중량부Sodium lauryl sulfate 1.0 part by weight

향료 0.5 중량부Fragrance 0.5 part by weight

정제수 20.0 중량부Purified water 20.0 parts by weight

<2-3> 액상 치약의 제조<2-3> Preparation of liquid toothpaste

활성성분 2.2 중량부2.2 parts by weight of active ingredient

모노플루오르인산나트륨 0.7 중량부Sodium monofluorophosphate 0.7 part by weight

소르비톨 54.0 중량부Sorbitol 54.0 parts by weight

농축 글리세린 2.0 중량부Concentrated glycerin 2.0 parts by weight

에탄올 5.0 중량부Ethanol 5.0 parts by weight

황산마그네슘 2.0 중량부Magnesium sulfate 2.0 parts by weight

사카린나트륨 0.2 중량부0.2 part by weight of sodium saccharin

카라기난 0.5 중량부Carrageenan 0.5 part by weight

라우릴황산나트륨 0.5 중량부Sodium lauryl sulfate 0.5 part by weight

폴리글리세린지방산에스테르 2.0 중량부Polyglycerin fatty acid ester 2.0 parts by weight

향료 0.9 중량부0.9 parts by weight fragrance

정제수 30 중량부Purified water 30 parts by weight

Claims (9)

후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치근 또는 치주조직의 성장 촉진용, 또는 치주염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
The present invention relates to a pharmaceutical composition for promoting growth of root or periodontal tissue comprising a mixture of an extract of Lilac and a ginseng extract as an active ingredient, or for the prevention or treatment of periodontitis.
제 1항에 있어서, 상기 혼합물은 후박 추출물 및 신이 추출물이 1:1 내지 1:50의 질량비로 혼합되는 것을 특징으로 하는 조성물.
2. The composition of claim 1, wherein the mixture is a mixture of a rosemary extract and a ginseng extract in a mass ratio of 1: 1 to 1:50.
제 1항에 있어서, 상기 혼합물은 NO(nitric oxide) 활성 및 TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase) 활성을 억제하며, ALP(alkaline phospatase) 활성을 증가시키는 것을 특징으로 하는 조성물.
The composition of claim 1, wherein the mixture inhibits nitric oxide (NO) activity and tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) activity and increases ALP (alkaline phosphatase) activity.
후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치근 또는 치주조직의 성장 촉진용, 또는 치주염의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물.
A composition for controlling the growth of root or periodontal tissue comprising a mixture of an extract of Lilac and a ginseng extract as an active ingredient, or a composition for preventing or improving periodontal disease.
제 4항에 있어서, 상기 의약외품 조성물은 치약, 구강청정제 또는 구강세정제인 것을 특징으로 하는 치근 또는 치주조직의 성장 촉진용, 또는 치주염의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물.
5. The quasi-drug composition according to claim 4, wherein the quasi-drug composition is a dentifrice, an oral cleanser or an oral cleanser, for promoting growth of root or periodontal tissue, or for preventing or improving periodontitis.
제 4항에 있어서, 상기 혼합물은 후박 추출물 및 신이 추출물이 1:1 내지 1:50의 질량비로 혼합되는 것을 특징으로 하는 조성물.
5. A composition according to claim 4, wherein the mixture is a mixture of a rosemary extract and a ginseng extract in a mass ratio of 1: 1 to 1:50.
제 4항에 있어서, 상기 혼합물은 NO(nitric oxide) 활성을 억제하고, TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase) 활성을 억제하며, ALP(alkaline phospatase) 활성을 증가시키는 것을 특징으로 하는 조성물.
5. The composition of claim 4, wherein the mixture inhibits nitric oxide (NO) activity, inhibits TRAP (Tartrate-resistant acid phosphatase) activity, and increases ALP (alkaline phosphatase) activity.
후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치근 또는 치주조직의 성장 촉진용, 또는 치주염의 개선용 건강기능식품.
The present invention relates to a health functional food for accelerating the growth of root or periodontal tissue or improving periodontal disease, which comprises a mixture of an ascorbic acid extract and a ginseng extract as an active ingredient.
후박 추출물 및 신이 추출물의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 치근 또는 치주조직의 성장 촉진용, 또는 치주염의 개선용 화장료 조성물.
The present invention relates to a cosmetic composition for promoting the growth of root or periodontal tissue or for the improvement of periodontitis, which contains as an active ingredient a mixture of an extract of Lilac and a ginseng extract.
KR1020160087982A 2016-07-12 2016-07-12 Composition comprising extracts of Magnolia flower and Magnolia officinlis for preventing or treating periodentitis as an active ingredient KR101704589B1 (en)

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