KR101698924B1 - 식물 당단백질 추출물을 함유하는 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 함유하는 조성물을 개시한다. 상기 조성물은 피부 주름 예방 또는 개선, 피부 미백, 염증 예방 또는 개선, 피부 보습, 피부 재생 촉진, 흉터 예방 또는 개선, 아토피 피부 개선, 항산화 증진, 노화 방지 또는 개선하는 효과가 있다.

Description

식물 당단백질 추출물을 함유하는 조성물{Composition containing glycoproteins extract from plant}

본 발명은 식물에서 추출한 당단백질을 함유하는 조성물에 관한 것이다.

최근 인간의 평균 수명이 점차 길어지면서 얼마나 오래 사느냐가 아니라 얼마나 오랫동안 젊음을 유지하면서 사느냐가 관건이 되고 있다. 나이가 들어감에 따라 노화는 피할 수 없는 현상이다. 게다가 환경 오염, 스트레스가 점점 심해지고 자외선 노출 빈도가 높아지는 현대 사회에서, 노화는 오히려 예전보다 일찍 시작되고 있다.

인체의 모든 기관이 일정한 비율로 서서히 노화가 진행되는데, 그 중 피부 노화는 여러 가지 자연 노화 현상이 외부 환경의 영향을 받아 진행되며, 이는 복합적인 과정에 의한다. 대부분의 초기 피부 노화는 피부의 건성화 현상으로부터 시작되는데, 구체적으로 수분의 부족으로 인한 피부 탄력성 저하와 주름 발생을 들 수 있다. 나이가 들어감에 따라 세포 재생력이 떨어져 탄력성을 잃게 되고 호르몬과 자외선의 영향으로 파괴된 피부의 결합 조직이 늘어져 주름이 생성된다.

구체적인 피부 노화 현상으로는 피부 재생이 느려지고 노화 각질이 많이 쌓여 피부가 거칠어지며, 콜라겐 합성량이 감소되어 주름이 생기고, 자외선에 대한 방어력이 떨어짐에 의해 피부색이 얼룩지고 기미, 검버섯 등 색소 침착이 나타나며, 피부 보호 기능이 저하되어 약물이나 자극에 쉽게 반응을 하는 것을 들 수 있다.

본 발명은 피부 주름 예방 또는 개선, 피부 미백, 염증 예방 또는 개선, 피부 보습, 피부 재생 촉진, 흉터 예방 또는 개선, 아토피 피부 개선, 항산화 증진, 노화 방지 또는 개선하는 조성물을 제공하고자 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 베르게니아 코르디폴리아(Bergenia cordifolia), 로디올라 로시아(Rhodiola rosea), 코마룸 파루스트레(Comarum palustre), 아비스 시비리카(Abies Sibirica), 베툴라 펜둘라 버즈(Betula pendula Buds), 및 이노노투스 오브리쿠스(Inonotus Obliquus)로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 함유하는 조성물을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 피부 주름 예방 또는 개선 용도를 갖는 것을 그 특징으로 한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 피부 미백 용도를 갖는 것을 그 특징으로 한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 염증 예방 또는 개선 용도를 갖는 것을 그 특징으로 한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 피부 보습 용도를 갖는 것을 그 특징으로 한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 피부 재생 촉진 용도를 갖는 것을 그 특징으로 한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 흉터 예방 또는 개선 용도를 갖는 것을 그 특징으로 한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 아토피 피부 개선 용도를 갖는 것을 그 특징으로 한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 항산화 증진 용도를 갖는 것을 그 특징으로 한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 노화 방지 또는 개선 용도를 갖는 것을 그 특징으로 한다.

본 발명의 조성물은 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 함유하여, 피부 주름 예방 또는 개선, 피부 미백, 염증 예방 또는 개선, 피부 보습, 피부 재생 촉진, 흉터 예방 또는 개선, 아토피 피부 개선, 항산화 증진, 노화 방지 또는 개선하는 효과를 가진다.

도 1은 DPPH를 이용하여 6종의 각 식물에서 추출한 당단백질 및 비타민 C의 항산화력을 측정한 시험예 8의 결과 그래프이다.

본 명세서에서 "추출물"이라 함은, 천연물로부터 그 안의 성분을 뽑아냄으로써 얻어진 물질이라면, 뽑아내는 방법이나 성분의 종류와 무관하게 모두 포함한다. 예컨대, 물이나 유기용매를 이용하여 천연물로부터 용매에 용해되는 성분을 추출해 낸 것, 천연물의 특정 성분, 예컨대 오일과 같은 특정 성분만을 추출하여 얻어진 것 등을 모두 포함하는 광의의 개념이다.

본 명세서에서 "피부"라 함은, 동물의 체표를 덮는 조직을 의미하는 것으로서, 얼굴 또는 바디 등의 체표를 덮는 조직뿐만 아니라, 두피와 모발을 포함하는 최광의의 개념이다.

이하에서, 본 발명을 상세하게 설명한다.

본 발명의 일실시예는 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 함유하는 조성물이다.

상기에서 베르게니아 코르디폴리아(Bergenia cordifolia)는 시베리아 바위취라고도 하며, 장미목 범의귀과의 여러해살이 풀이다. 원산지는 시베리아, 몽골이고, 키는 30-40cm 정도이며, 꽃은 늦은 봄이나 이른 봄에 걸쳐 붉은 자색이나 연분홍색, 흔치는 않지만 백색으로 핀다. 로디올라 로시아(Rhodiola rosea)는 범의귀목, 돌나무과에 속하고, 홍경천이라고도 하며, 유럽이나 아시아의 북극 인접 지역 산에서 주로 자란다. 코마룸 파루스트레(Comarum palustre)는 샤빌니크 발로트니라고도 하며, 장미과에 속하고, 러시아에서 주로 자라는 허브류이다. 아비스 시비리카(Abies Sibirica)는 소나무목 소나무과에 속하는 시베리아 전나무로 추운 북쪽 지역 산의 습한 곳에서 주로 자란다. 베툴라 펜둘라(Betula pendula)는 참나무목 자작나무과에 속하고, 펜둘라 자작나무, 실버 버치라고도 하며, 눈 부분을 주로 이용한다. 유럽 전역 및 아시아 지역의 산에서 서식하고, 남유럽에서는 높은 고도에서 자란다. 이노노투스 오브리쿠스(Inonotus Obliquus)는 소나무비늘버섯과에 속하며 차가 버섯이라고도 한다. 원산지는 시베리아이고, 시베리아, 북아메리카, 북유럽 등 북위 45도 이상 지방의 자작나무에 기생한다.

본 명세서에서 "콜라겐"은 동물 결합 조직의 중요한 섬유성 단백질을 말하는데, 이는 피부 주름 예방 또는 개선, 세포 재생, 흉터 예방 또는 개선, 피부 탄력 강화, 피부 노화 방지 기능을 갖는다. "프로콜라겐"은 여러 척추 동물의 피부 및 기타의 기관에서 발견되는 콜라겐의 전구물질로, 결과적으로 콜라겐과 동일한 기능을 가지게 된다. 따라서, 콜라겐 및 프로콜라겐의 수치가 높아지면 피부 주름이 예방 또는 개선되며, 세포가 재생되고, 흉터를 예방 또는 개선하며, 피부 탄력이 강화되고, 피부 노화가 예방 또는 개선될 수 있다. 한편, "콜라게네이즈"는 콜라겐을 분해하는 효소로, 피부 주름을 만드는 원인 중 하나로 알려져 있다. 따라서 이의 발현을 저해하면 피부의 콜라겐 수치가 높아지므로 역시 피부 주름이 예방 또는 개선되며, 세포가 재생되고, 피부 탄력이 강화되며, 피부 노화가 예방 또는 개선될 수 있다. 본 명세서에 개시된 조성물은 프로콜라겐 생합성을 촉진하고 콜라게네이즈(MMP-1)의 생성을 저해하는 효과가 있는 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 함유함으로써 피부 주름 예방 또는 개선, 세포 재생, 흉터 예방 또는 개선, 피부 탄력 강화, 피부 노화 방지 용도로 사용될 수 있다.

"멜라닌"은 흑갈색 색소로서 일정량 이상의 자외선을 차단하는 기능이 있어 자외선으로부터 피부를 보호하는 작용을 하므로 피부가 자외선에 노출되는 경우 피부를 보호하기 위해 몸에서 멜라닌이 다량 생성되게 된다. 이때 피부색이 멜라닌의 양에 의해 결정되므로 멜라닌의 양이 많아질수록 피부색은 검은색을 띠게 되고, 이는 기미, 점, 주근깨, 검버섯 등의 원인이 된다. 따라서 이러한 멜라닌 생성을 억제하는 조성물은 피부가 검게 되는 것을 방지하여 피부 미백 효과를 가질 수 있다. 본 명세서에 개시된 조성물은 멜라닌 생성을 억제하는 효과가 있는 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 함유함으로써 피부 미백 용도로 사용될 수 있다.

인터루킨-6(IL-6)는 B 세포 자극 인자 2(BSF2) 또는 인터페론 β2(INF-β2)로도 불리는 사이토카인으로, 염증 질환에서 염증 반응을 매개하는 것으로 알려져 있다. 인터루킨-8(IL-8)은 호중구 유인/활성화 단백질-1(NAP-1)이라고도 불리며, 역시 염증 반응을 매개하고 아토피 피부 질환자에게 있어 히스타민 방출을 유도할 수 있다고도 알려져 있다. MCP-1(Momocyte Chemoattractant Protein-1)은 CCL-2로도 칭하며, 역시 염증성 사이토카인으로 알려져 있다. 따라서, 상기 사이토카인들의 생합성을 억제하는 경우 항염증 작용을 할 수 있고, 나아가 아토피 피부를 예방 또는 개선할 수 있다. 본 명세서에 개시된 조성물은 LPS로 유도된 염증을 억제하고 IL-6, IL-8, 및 MCP-1의 생합성을 억제하는 효과가 있는 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 함유함으로써 염증을 예방 또는 개선하고, 아토피 피부를 개선하며 피부 노화를 예방 또는 개선하는 용도로 사용될 수 있다.

PPARγ는 피부 구성세포에 전반적으로 존재하는 인자로, 표피 각질형성세포의 분화와 지질 대사를 조절하여 정상적인 표피층 형성을 유도함으로써 표피의 항상성을 유지시키므로, 피부 장벽 기능의 항상성 유지 및 복원, 보습, 염증 치유 과정의 발현에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이러한 특징으로 인해 PPARγ는 염증 관련 피부 질병뿐만 아니라 표피층의 과증식으로 인한 건선, 상처 치유, 여드름 등 다양한 피부 질환의 핵심 조절자로 작용할 수 있다. 특히 PPARγ가 활성화되면, 피부 장벽 기능의 강화를 통한 피부 내적인 보습 효과를 기대할 수 있다.　본 명세서에 개시된 조성물은 PPARγ를 활성화시키는 효과가 있는 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 함유함으로써 피부 보습 효능을 가지고, 아토피 피부를 개선하며, 나아가 피부 노화를 예방 또는 개선할 수 있다.

본 명세서에서 "세포 재생"은 손상된 부분의 세포를 다시 만들어내는 현상을 의미하며, "피부 세포 재생"은 특히 피부 세포를 다시 만들어 내는 것을 의미한다. 피부 재생이 원활히 이루어지지 않으면 피부의 노화가 촉진되며, 표피 내의 색소 세포에서 생성된 멜라닌 색소가 배출되지 않고 남아 있는 색소 침착이 있게 된다. 반면 피부 재생이 원활히 이루어지는 경우 피부 흉터를 예방 또는 개선할 수 있고, 피부 보습에도 도움을 줄 수 있다. 본 명세서에 개시된 조성물은 세포 재생, 특히 피부 재생을 촉진하는 효과가 있는 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 유효성분으로 함유함으로써 피부 주름을 예방 또는 개선하고, 피부 미백 및 피부 보습 효과를 가지며, 피부 재생을 촉진하고, 흉터 예방 또는 개선하며, 나아가 노화를 예방 또는 개선할 수 있다.

필요 이상으로 많은 산소가 인체에 존재하는 경우 잔여 산소 중 일부는 활성이 큰 자유기(Free Radical)가 된다. 반응성이 큰 자유기는 세포를 공격하게 되고 그 공격으로 인해 세포가 손상된다. 생체 조직을 공격하고 세포를 손상시키는 산화력이 강한 산소를 활성 산소라고 하는데, 이는 일반적으로 신체 대사 과정에서 생성되고, 호흡시 산소 과량 섭취나 스트레스 및 다른 원인에 의해서도 비정상적으로 증가한다. 이러한 활성산소는 강력한 세포 독성을 가지므로 이를 제거할 필요가 있다. 본 명세서에서 "항산화"란 유해 산소인 활성산소를 제거하는 작용을 말한다. 본 명세서에 개시된 조성물은 항산화 효능이 있는 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 유효성분으로 함유함으로써 활성 산소 또는 자외선 등에 의한 세포의 손상을 예방할 수 있고, 피부 주름을 예방 또는 개선할 수 있으며, 이를 통해 노화를 예방 또는 개선할 수 있다.

본 발명의 일실시예에서 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질은 조성물의 형태에 따라 총 조성물 중량에 대하여 0.1 내지 30 중량%로 함유될 수 있다. 0.1 중량%보다 작게 함유하는 경우 그 효과가 미비하며, 30 중량%보다 많이 함유하는 경우 조성물 안정성에 문제가 있을 수 있기 때문이다.

본 발명에 따른 일실시예에서 본 발명이 이루고자 하는 효과는 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질에서 비롯된다.

상기 각 식물에서 당단백질을 추출하는 방법은 다음과 같다: 냉장 처리된 원료 식물을 파쇄기로 쵸핑한 후 pH 2 ~ 3의 유기산 용액을 원료 중량 대비 1:2 ~ 1:5의 비율로 혼합하여 수용액을 제조한 다음 온도를 30 ~ 50℃로 유지한다. 상기 수용액의 pH를 1.0 ~ 3.0으로 조정하면서 유기산 수용액 대비 0.1g 중량% ~ 1g 중량%의 단백질 가수분해 효소를 첨가하고 온도 30 ~ 50℃에서 2시간 ~ 24시간 동안 처리한다. 효소 처리된 상기 수용액의 농도가 목적한 농도에 도달하면 당단백질 수용액만을 걸러내는 과정인 제1차 여과 과정을 거친다. 여과된 수용액의 온도를 85℃ 이상으로 급격하게 상승시켜 일정한 시간 동안 계속 가열함에 의해 효소의 실활과 동시에 살균을 함으로써 반응을 종결한다. 살균이 끝난 추출물은 원심분리기를 이용하여 이물질을 제거하고 건조 장치를 사용하여 건조시킴으로써 당단백질 분말 제품을 완성한다(한국 특허 공개 번호 제10-2004-27283호 참조).

또한, 상기 당단백질은 각 식물 원료를 침출하고, 정제, 분리하는 일반적인 방법으로 얻을 수도 있다.

본 발명은 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 함유하는 조성물을 포함하는 미용 조성물을 제공할 수 있다. 미용 조성물은 예를 들어 화장품일 수 있으며, 이에 따른 화장품의 외형은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는, 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이, 클렌져 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다.

미용 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.

상기 미용 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일 및 바디에센스 등의 화장품으로 제형화될 수 있다.

또한, 본 발명은 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 함유하는 조성물을 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 이러한 약학 조성물은 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 약제학적 보조제 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 다양한 경구 투여제 또는 비경구 투여제 형태로 제형화할 수 있다.

상기 경구 투여제는 예를 들면, 정제, 환제, 경질 및 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 분제, 산제, 세립제, 과립제, 펠렛제 등이 있으며, 이들 제형은 유효성분 이외에 계면 활성제, 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로오즈 및 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및 폴리에틸렌 글리콜)를 함유할 수 있다. 정제는 또한 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로오즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로오즈 및 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제, 흡수제, 착색제, 향미제, 및 감미제 등의 약제학적 첨가제를 함유할 수 있다. 상기 정제는 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다.

또한, 상기 비경구 투여제는 예를 들어, 주사제, 점적제, 연고, 로션, 겔, 크림, 스프레이, 현탁제, 유제, 좌제(坐劑), 패취, 등의 제형일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명에 따른 상기 약학 조성물은 경구, 비경구, 직장, 국소, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 피하 등으로 투여될 수 있다.

또한, 상기 활성성분의 투여량은 치료받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있다. 일반적인 투여량은 0.001mg/kg/일 내지 2000mg/kg/일, 보다 구체적으로는 0.5mg/kg/일 내지 2.5mg/kg/일이다.

본 발명은 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 함유하는 조성물을 포함하는 건강식품 조성물을 제공한다. 상기 건강식품 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으나, 예를 들어, 정제, 과립제, 드링크제, 카라멜, 다이어트바 등으로 제형화될 수 있다. 각 제형의 건강식품 조성물은 유효 성분 이외에 해당 분야에서 통상적으로 사용되는 성분들을 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승 효과가 일어날 수 있다.

상기 유효 성분의 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 약물의 1일 투여 용량은 투여하고자 하는 대상의 미만 진행 정도, 발병 시기, 연령, 건강상태, 합병증 등의 다양한 요인에 따라 달라지지만, 성인을 기준으로 할 때 일반적으로는 상기 조성물 1 내지 500mg/kg, 바람직하게는 30 내지 200 mg/kg을 1일 1 내지 2회 분할하여 투여할 수 있으며, 상기 투여량은 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.

이하, 실시예 및 시험예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예 및 시험예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 하기 실시예 및 시험예에 의해 제한되는 것은 아니다.

[실시예]

냉장 처리된 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스 각각을 파쇄기로 쵸핑한 후, pH 2 ~ 3의 구연산 수용액을 상기 쵸핑한 식물과 1:3의 비율로 혼합하여 수용액을 제조하였다. 상기 수용액의 pH를 2.0으로 조정하면서 수용액 대비 0.3g 중량%의 펩신을 첨가하고 40℃에서 18시간 동안 처리하였다.

효소 처리된 상기 수용액 대비 5% 수율의 당단백질을 얻게 되면 온도를 85℃로 급격하게 상승시켜 40분간 처리하였다. 이후 얻은 추출물을 원심분리기로 이물질을 제거함으로써 각 당단백질을 액상 형태로 제조하였다. 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스에서 얻은 당단백질을 각각 실시예 1, 실시예 2, 실시예 3, 실시예 4, 실시예 5, 및 실시예 6으로 하였다.

상기와 같은 추출 및 분리 과정을 통하여 얻은 실시예들은 하기 표 1와 같은 아미노산 조성을 가졌다.

	실시예 1	실시예 2	실시예 3	실시예 4	실시예 5	실시예 6
아스파트산	45.11	4.20	10.94	10.50	6.24	9.82
클루탐산	21.59	62.25	33.12	24.38	14.91	14.98
세린	2.39	1.07	3.49	5.27	2.31	3.67
글라이신	3.00	0.81	2.66	4.24	3.10	2.36
히스티딘	1.37	0.43	1.22	1.75	0.68	0.41
알기닌	2.44	3.59	5.33	4.12	0.98	0.39
트레오닌	1.09	0.39	1.52	2.75	1.28	2.00
알라닌	5.75	1.14	10.55	7.65	2.54	2.59
프롤린	12.72	25.18	26.54	33.93	61.09	58.45
티로신	0.58	0.19	0.55	0.28	1.04	0.38
발린	1.35	0.13	1.25	1.82	1.33	1.64
메티오닌	0.23	0.05	0.20	0.21	0.59	0.28
시스테인	0.14	0.11	0.23	0.01	0.06	0.05
이소류신	0.55	0.15	0.88	0.92	0.74	0.87
류신	0.70	0.13	0.76	1.33	1.15	1.36
페닐알라닌	0.43	0.08	0.43	0.51	0.92	0.53
라이신	0.58	0.11	0.34	0.33	1.04	0.22
합	100	100	100	100	100	100

[시험예 1] 프로콜라겐 생합성능

인간 피부에서 분리한 섬유아세포를 24공에 1공 당 10⁶개씩 파종하여 90% 정도 자랄 때까지 배양하였다. 이를 24시간 동안 무혈청 배지로 배양한 후 실시예들을 각각 무혈청 배지에 녹여서 100 ppm 농도로 처리하고 24시간 동안 CO₂ 배양기에 배양하였다. 이들의 상층액을 떠내어 프로콜라겐 형(I) Elisa 키트(Procollagen type 1)을 이용하여 프로콜라겐의 증감 여부를 보았다. 양성 대조군으로 비타민 C도 함께 시험하였다. 세포독성을 고려한 농도에서 시험을 진행하였으며, 그 결과를 표 2에 나타내었다. 합성능은 비처리군을 100으로 하여 대비한 것이다.

성분	합성능(%)
비처리군	100
비타민 C	128.5
실시예 1	122.8
실시예 2	123.4
실시예 3	117.6
실시예 4	119.4
실시예 5	126.2
실시예 6	107.3

상기 표 2에서 알 수 있듯이, 비처리군에 비해 실시예들의 프로콜라겐 합성능이 우수하였다. 따라서, 각 실시예들은 콜라겐 생성을 촉진하여 피부 노화에 의해 발생하는 콜라겐 감소 현상을 완화할 수 있다. 그러므로 각 식물에서 추출한 당단백질을 함유하는 조성물은 피부 주름을 예방 또는 개선하고, 흉터를 예방 또는 개선하며, 피부 노화를 예방 또는 개선할 수 있다. 그리고 각 식물에서 추출한 당단백질들은 2종 이상 혼합하여 사용이 가능하다.

[시험예 2] 콜라게네이즈(MMP-1) 저해능

시험은 2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)이 함유된 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 인간의 피부에서 채취하여 직접 배양한 섬유아세포를 5,000 세포/공(well)이 되도록 넣고, 70~80% 정도 자랄 때까지 배양하였다. 그리고 실시예들을 10ppm 농도로 24시간 동안 처리한 후, 세포 배양액을 채위하였다. 채위한 세포 배양액을 상업적으로 이용 가능한 콜라게네이즈 측정 기구(미국 아머샴파마샤 사. Catalog #: RPN 2610)를 이용하여 콜라게네이즈 발현 정도를 측정하였다. 먼저 1차 콜라게네이즈 항체가 균일하게 도포된 96-공 평판에 채위된 세포 배양액을 넣고 3시간 동안 항원-항체 반응을 항온조에서 실시하였다. 3시간 후 발색단이 결합된 2차 콜라겐 항체를 96-공 평판에 넣고 다시 15분간 반응시켰다. 15분 후 발색 유발 물질을 넣어 실온에서 15분간 발색을 유발시키고, 다시 1M 황산을 넣어 반응(발색)을 중지시켜 반응액의 색깔이 노란색을 띠게 하였다. 이때, 반응 진행의 정도에 따라 노란색의 정도가 다르게 나타난다. 노란색을 띤 96-공 평판의 흡광도를 흡광계를 이용하여 405nm에서 측정하고, 아무것도 처리하지 않은 비처리군의 채위된 세포배양액의 반응 흡광도를 기준으로 하여 하기 수학식 1에 의해 콜라게네이즈의 발현 정도를 계산하였다. 레티노익산만을 처리한 양성 대조군과 UV 처리만을 한 음성 대조군을 함께 시험하였다. 세포 독성을 고려한 농도에서 시험을 진행하였으며, 그 결과를 표 3에 나타내었다.

[수학식 1]

콜라게네이즈 발현 정도(%) = (각 시험 물질의 흡광도/비처리군의 흡광도) X 100

성분	콜라게네이즈 발현 억제 정도(%)
비처리군	100
UV 처리	151.2
레티노익산	73.5
실시예 1	38.6
실시예 2	21.3
실시예 3	40.4
실시예 4	86.7
실시예 5	75.8
실시예 6	67.3

콜라게네이즈 발현의 억제가 많이 될수록 %가 낮아지므로 상기 표 3에서 보이는 바와 같이, 각 실시예들은 콜라게네이즈인 매트릭스 메탈로프로테아제(MMP-1)를 억제하는 효과를 가진다. 즉, 각 식물에서 추출한 당단백질을 함유하는 조성물은 내적 노화 또는 외적 환경요인에 의하여 발생하는 피부조직 분해 효소인 MMP-1의 생합성을 저해하여 피부 내 콜라겐 감소를 억제하고 주름을 개선할 수 있다. 그리고 각 식물에서 추출한 당단백질들은 2종 이상 혼합하여 사용이 가능하다.

[시험예 3] Melan-a cell을 이용한 멜라닌 생성 억제능 평가

Melan-a 세포(영국, St. George's Hospital Medical School에서 입수)를 10% FBS가 함유된 DMEM으로 6공 평판(멜라닌 정량)에 2 X 10⁴ 세포/공(최종 부피 3 ml), 96공 평판(MTT assay)에 2 X 10³ 세포/공(최종 부피 200μl)로 넣고 37 ℃, 5% CO₂ 배양기(MCO-20AIC, 산요)에서 24시간 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 10% FBS, 2 μM α-MSH(멜라노사이트 자극 호르몬), 2 mM 테오필린(theophylline)이 함유된 DMEM을 새로운 배지로 사용하고 배지에 실시예들을 첨가하여 3일간 매일 처리하였다. 5일째에 6공 평판에서 배양된 배지를 제거하고 0.25% 트립신-EDTA(시그마 화학 주식회사)용액을 처리하여 세포 펠렛(pellet)을 회수하고 1.5 ml 시험관으로 옮겨 10,000 rpm으로 10분간 원심 분리하여 상등액을 제거하였다. 얻어진 펠렛을 60℃에서 건조시킨 후 1N NaOH 100 μl를 넣어 세포 내 멜라닌을 녹였다. 이 용액을 PBS로 희석시킨 다음 ELISA 리더 475 nm에서 흡광도를 측정하여 실시예들의 멜라닌 생성 저해율을 구했다. 아무것도 처리하지 않은 비처리군을 음성 대조군으로 하고, 알부틴을 처리한 군을 양성 대조군으로 하였다. 비처리군에서의 멜라닌 함량과 비교하여 실시예의 멜라닌 생성 저해 정도를 측정하여 미백 효과를 측정하였다. 하기 수학식 2에 따라 멜라닌 생성 저해율을 계산하여 그 결과를 표 4에 나타내었다.

[수학식 2]

멜라닌 생성 저해율(%) =(각 시험 물질의 흡광도/비처리군의 흡광도) X 100

멜라닌 생성 저해 효과

성분	농도	멜라닌 생성 저해율(% control)
비처리군	무첨가	-
알부틴	50ppm	43.8%
실시예 1	25ppm	21.5%
	50ppm	33.8%
실시예 2	25ppm	31.5%
	50ppm	36.3%
실시예 3	25ppm	20.6%
	50ppm	27.4%
실시예 4	25ppm	43.8%
	50ppm	51.3%
실시예 5	25ppm	37.5%
	50ppm	43.2%
실시예 6	25ppm	17.3%
	50ppm	27.5%

상기 표 4으로부터 알 수 있는 바와 같이, 각 실시예들은 멜라닌 생성 저해 효과가 있음이 인정되었고, 이러한 효과는 당단백질의 농도가 높을수록 뛰어났다. 이를 통해 본 발명에 의한 각 식물에서 추출한 당단백질들은 멜라닌 생성을 저해하므로 우수한 미백 효과를 있음을 확인할 수 있었다. 그리고 각 식물에서 추출한 당단백질들은 2종 이상 혼합하여 사용이 가능하다.

[시험예 4] 항염증 활성 측정(세포-기초 분석)

가공되지 않은 246.7 마크로파지 세포 라인(한국 세포주 은행에서 입수)을 DMEM에 넣고 10% FBS 페니실린(100IU/㎖)과 스트렙토마이신(100㎍/㎖)을 넣은 후 온도 37^oC, 5% CO₂ 배양기에서 세포를 키워 48공 평판에 5 × 10⁵세포/㎖의 밀도로 300㎕를 분주하고, 24시간 후 실시예들을 각각 농도별로 처리하였다. 1시간 후에 염증 유발 물질인 LPS 1㎍/㎖를 처리하여 18시간 후 배지 내에 방출된 NO 양을 그리스 시약(Griess reagent)을 이용하여 측정하였다. 10μM의 덱사메타손(dexamethasone)을 처리한 군을 NO의 방출을 저해시키는 항염증 활성의 양성 대조군으로 하였고, LPS 1㎍/㎖만을 처리한 군을 음성 대조군으로 하였다. NO의 양은 표준품 NaNO₂의 측정값과 비교하여 결정한 후 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다.

성분	추출물 농도(ppm)	% 억제율
LPS 1㎍/㎖ + 덱사메타손 10μM	-	100
LPS 1㎍/㎖	-	0
LPS 1㎍/㎖ + 실시예 1	50	42.2
LPS 1㎍/㎖ + 실시예 2	50	31.6
LPS 1㎍/㎖ + 실시예 3	50	39.1
LPS 1㎍/㎖ + 실시예 4	50	39.6
LPS 1㎍/㎖ + 실시예 5	50	41.1
LPS 1㎍/㎖ + 실시예 6	50	29.3

상기 표 5에서 나타나듯이, 각 실시예들은 음성 대조군에 비해 NO 생성을 억제하여 LPS로 유발되는 염증을 저해하는 효과를 가진다. 따라서 각 식물에서 추출한 당단백질들이 염증을 예방 또는 개선하는 효과를 가짐을 확인할 수 있었다. 그리고 각 식물에서 추출한 당단백질들은 2종 이상 혼합하여 사용이 가능하다.

[시험예 5] 각질 세포주 HaCaT에서 자극에 의한 IL-6, IL-8, MCP-1 분비 억제 효능 확인

시험 세포인 각질형성세포(세포주명: HaCaT 입수처: 독일 암 연구소, 독일 하이델베르크)를 10%의 우태아 혈청(Fetal bovine sereum, FBS, 입수처: Gibco, 미국)과 1% 페니실린-스트렙토마이신(Penicillin-Streptomycin, 입수처: Gibco, 미국)을 함유한 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium, 입수처: Lonza, 미국)를 이용하여 48공 평판(48 well plate)에 약 2 x 10⁴ 세포수/공의 밀도로 분주한 후, 37°C, 5% CO₂ 조건하에서 24시간 동안 배양하였다. 배양액을 제거한 후, 인산염완충용액(Phosphate buffered saline, PBS) 200μl로 1회 세척하고, 우태아 혈청이 함유되지 않는 DMEM 200μl를 넣어 24시간 배양하였다. 이후 1% 우태아 혈청이 함유된 DMEM로 실시예들을 하기 표 6, 표 7 및 표 8에 언급한 농도로 10분간 각각 처리한 후 10μM 농도의 레티노익산(Retinoic acid, 입수처: Sigma-Aldrich, 미국)으로 처리하여 24시간 동안 배양시켰다. 배양액 50μl를 취하여 IL-6, IL-8, MCP-1 ELISA kit(입수처: BD pharmigen, 미국)를 이용하여 이들 사이토카인의 분비 억제 효과를 평가하였다. 한편, 각 실시예 대신 하이드로코르티손 1ppm을 사용한 군을 양성 대조군으로, 아무것도 처리하지 않은 군을 음성 대조군으로 하고, 레티노익산만을 단독 처리한 군도 함께 시험하였다. 상기 사이토카인 분비 억제 효과는 표준 물질인 rh IL-6, rh IL-8, rh MCP-1 (입수처: BD pharmigen, 미국)의 흡광도를 토대로 표준 곡선을 그려 흡광도와 표준 물질 간의 반응식을 구한 후, 실시예들의 흡광도를 대입하여 이들 사이토카인의 분비량을 얻고, 아래 수학식 3에 의해 자극 완화율을 구하는 방법으로 평가하였다. 또한 레티노익산을 처리하지 않은 HaCaT 세포와 레티노익산을 처리한 HaCaT 세포의 사이토카인 분비량 차이를 기준으로 한 아래 수학식 4로 억제율을 계산하여 각 실시예들의 사이토카인 분비 억제 효능을 평가하였다.

[수학식 3]

자극 완화율(%) = [1 - (각 시험 물질의 사이토카인 분비량/레티노익산 단독 처리군의 사이토카인 분비량)] x 100

[수학식 4]

억제율(%) = {1-[(각 시험 물질의 사이토카인 분비량－음성 대조군의 사이토카인 분비량)/각 시험 물질의 사이토카인 분비량]} x 100

하기 표 6, 표 7, 및 표 8은 각각 IL-6, IL-8, 및 MCP-1과 관련된 시험 결과이다.

성분	추출물농도(ppm)	IL-6 분비량(pg/ml)	자극 완화율(%)	억제율(%)
음성대조군	-	20.12	-	-
레티노익산(10μm)	-	78.55	-	-
레티노익산(10μm)+ 하이드로코르티손(1ppm)	-	22.58	71.25	89.10
레티노익산(10μm)+ 실시예 1	100	23.62	69.92	85.18
레티노익산(10μm)+ 실시예 2	100	27.45	65.05	73.29
레티노익산(10μm)+ 실시예 3	100	38.27	51.26	52.57
레티노익산(10μm)+ 실시예 4	100	28.13	64.18	71.52
레티노익산(10μm)+ 실시예 5	100	29.55	62.38	68.08
레티노익산(10μm)+ 실시예 6	100	34.62	55.92	58.11

성분	추출물 농도(ppm)	IL-8 분비량(pg/ml)	자극 완화율(%)	억제율(%)
음성대조군	-	128.5	-	-
레티노익산(10μm)	-	521.9	-	-
레티노익산(10μm)+ 하이드로코르티손(1ppm)	-	159.7	69.40	80.46
레티노익산(10μm)+ 실시예 1	100	200.3	61.62	64.15
레티노익산(10μm)+ 실시예 2	100	145.6	72.10	88.25
레티노익산(10μm)+ 실시예 3	100	192.6	63.09	66.71
레티노익산(10μm)+ 실시예 4	100	207.5	60.24	61.92
레티노익산(10μm)+ 실시예 5	100	163.3	68.71	78.68
레티노익산(10μm)+ 실시예 6	100	138.3	73.50	92.91

성분	추출물농도(ppm)	MCP-1 분비량(pg/ml)	자극 완화율(%)	억제율(%)
음성대조군	-	638.83	-	-
레티노익산(10μm)	-	1406.24	-	-
레티노익산(10μm)+ 하이드로코르티손(1ppm)	-	710.68	49.46	90.64
레티노익산(10μm)+ 실시예 1	100	835.32	40.59	74.40
레티노익산(10μm)+ 실시예 2	100	763.21	45.73	83.70
레티노익산(10μm)+ 실시예 3	100	782.05	44.39	81.68
레티노익산(10μm)+ 실시예 4	100	738.24	47.50	86.53
레티노익산(10μm)+ 실시예 5	100	724.51	48.48	88.17
레티노익산(10μm)+ 실시예 6	100	789.38	43.87	80.92

상기 표 6, 7, 및 8에서 볼 수 있는 바와 같이, 각 실시예들은 IL-6, IL-8, 및 MCP-1의 분비를 억제하는 효과를 나타낸다. 따라서, 각 식물에서 추출한 당단백질들은 염증 유발 인자인 상기 사이토카인들의 분비를 억제하여 항염증 효과를 가지므로 염증을 예방 또는 개선하는 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 그리고 각 식물에서 추출한 당단백질들은 2종 이상 혼합하여 사용이 가능하다.

[시험예 6] PPARγ 효능 평가

1) 세포배양

정상적인 아프리카 녹색원숭이의 신장 상피세포인 CV-1 세포(ATCC에서 입수)를 10% 우태아 혈청(Fetal Bovine Serum)과 100 unit/ml 페니실린-스트렙토마이신(penicillin-streptomycin)이 들어 있는 DMEM(Dulbecco Modified Eagle's Medium)에 넣고 37℃, 5% CO₂에서 배양하였다.

2) 플라스미드 도입(plasmid transfection)

플라스미드는 일반적인 배양 조건에서도 PPARγ가 발현되는 PPARγ 플라스미드, PPARs가 결합하여 활성화되는 PPARs 반응 요소(PPARs Response Element, "PPRE")를 프로모터로 가지고 뒤에 리포터로서 역할을 하는 반딧불(firefly) 루시퍼라제(luciferase) 유전자를 지닌 PPRE-Luc 플라스미드, 트랜스펙션의 값 보정을 위해서 사용되는 β-gal 플라스미드의 3종이 사용되었다.

CV-1 세포를 5 x 10⁴의 농도로 24공 평판에 분주하여 18~24시간 배양하고 상기 플라스미드들과 DMEM, PEI(Polyethylenimine)의 1:3(μg:μl) 혼합액을 상온에서 15분간 반응시킨 후, 각각의 공에 뿌려주는 방법으로 세포 안으로 플라스미드들을 도입시켰다.

　

3) PPAR-γ 활성도 측정

세포에 플라스미드들을 도입시키고 24시간 동안 배양해서 안정화시킨 후, 실시예들을 처리하고 다시 24시간 동안 배양하였다. 배양이 끝나면 세포를 차가운 PBS로 두 번 씻고, 세포에 리포터 라이시스버퍼(reporter lysis buffer, Promega)를 15분간 처리하여 세포를 파괴하였다. 이렇게 얻어진 세포 용출액을 마이크로 튜브로 옮기고 4℃에서 12,000rpm으로 3분간 원심 분리하여 세포 잔여물을 분리함으로써 순수한 세포 용출액을 얻었다.

각 실시예의 PPAR-γ 활성도는 세포 용출액에 루시퍼라제 기질(Luciferase substrate, Promega)을 2:1 비율로 혼합하고, 루미노메터로 방출되는 빛의 양을 측정함으로써 비교하였다. 또한 세포 용출액에 동량의 2X β-갈락토시다아제 엔자임 에세이 버퍼(2X β-galactosidase enzyme assay buffer, Promega)를 처리하고 37℃에서 30분 동안 반응시킨 후 420nm 파장의 흡광도를 측정함으로써 각 실시예의 베타-갈락토시다제 활성도를 비교하였다. 각 실시예의 PPAR-γ 활성도를 각각의 베타-갈락토시다제의 활성도로 나누어 플라스미드 도입 정도에 따른 차이를 보정 하였으며, 이 보정 값을 미니탭의 이 표본 t 검정을 이용해서 활성의 유의성을 평가하였다. 한편, PPAR-γ 효능제인 TGZ(troglitazone)를 양성 대조군으로 함께 시험하였다.

성분	농도	활성도 (% control)
비처리군	무첨가	100%
TGZ	5μM	563%
실시예 1	50ppm	233%
실시예 2	50ppm	319%
실시예 3	50ppm	180%
실시예 4	50ppm	255%
실시예 5	50ppm	384%
실시예 6	50ppm	129%

표 9에서 알 수 있는 것과 같이, 각 실시예들의 PPARγ 활성도가 비처리군에 비해 우수하였다. 따라서, 각 식물에서 추출한 당단백질들은 PPARγ를 활성화 시켜 뛰어난 피부 보습 효과를 가짐을 확인할 수 있었다. 그리고 각 식물에서 추출한 당단백질들은 2종 이상 혼합하여 사용이 가능하다.

[시험예 7] 세포 재생 효능 평가

각질형성 세포, HaCaT(세포주명: HaCaT 입수처: 독일 암 연구소, 독일 하이델베르크)을 96 공 평판배양기에 1 공당 10⁴개로 첨가하고, 10% FBS(fetal bovine serum)가 함유된 DMEM로 30℃ 인큐베이터에서 24시간 배양하였다. 그런 다음, 상기 실시예들이 각각 0.5, 2.8ppm 농도로 포함된 1% FBS가 함유된 DMEM로 교체한 후, 48시간 배양하였다. 여기에 WST-1 용액(Roche)을 1/10배로 넣은 후, 37℃ 인큐베이터에서 2시간 동안 반응시켰다. 배양이 끝난 평판 배양기는 각각 440nm에서 발색 정도를 측정하였다. 비처리군의 발색 정도를 100으로 하였을 때 각 실시예들의 발색 정도를 평가하여 세포의 증식 정도(%)를 정량하였다. 또한 아무것도 처리하지 않은 비처리군과 10% FBS만을 처리한 군을 함께 시험하였고, 그 결과는 하기 표 10에 나타내었다.

성분	농도	세포 증식 정도(% control)
비처리군	무첨가	100%
FBS	10%	188%
실시예 1	0.5ppm	157%
	2.8ppm	132%
실시예 2	0.5ppm	133%
	2.8ppm	124%
실시예 3	0.5ppm	129%
	2.8ppm	131%
실시예 4	0.5ppm	144%
	2.8ppm	139%
실시예 5	0.5ppm	129%
	2.8ppm	147%
실시예 6	0.5ppm	125%
	2.8ppm	109%

표 10에서 알 수 있듯이, 각 실시예들은 비처리군에 비해 세포를 증식시키는 효과가 우수하였다. 즉, 각 식물에서 추출한 당단백질들은 세포 증식 효과가 인정되므로 세포를 재생시키는 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 따라서, 각 식물에서 추출한 당단백질들은 피부 주름 개선 또는 예방, 피부 미백, 피부 보습, 세포 재생, 흉터 예방 또는 개선, 노화 예방 또는 개선 효과를 가질 수 있다. 또한, 각 식물에서 추출한 당단백질들은 2종 이상 혼합하여 사용이 가능하다.

[시험예 8] 항산화력(DPPH) 평가

상기 실시예에서 제조된 6종류의 당단백질 액상 제품인 실시예 1, 실시예 2, 실시예 3, 실시예 4, 실시예 5, 및 실시예 6을 동결 건조기를 이용하여 건조시킴으로써 분말 제품을 제조하였다. 이후, 이의 건조 중량 100g을 DMSO에 10% 농도가 되도록 녹여 준비하였다. 양성 대조군으로는 비타민 C를 물에 녹여 1%로 만들어 두었다. DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)를 에탄올에 100μM 농도가 되도록 준비 하였다. 준비된 당단백질액과 비타민 C 용액을 에탄올로 1/2 계단 희석하여 5개의 농도로 용액을 만든 후, 이렇게 준비된 각각의 용액 10 μl와 DPPH 용액 190μl를 섞어 37℃에서 30분간 배양 시켰다. 그 후, 540nm에서 OD값을 측정하였다. 한편, 아무것도 처리하지 않은 비처리군을 음성 대조군으로 하여 함께 시험하였고, 이렇게 측정된 값을 비처리군을 100으로 하였을 때 각 실시예의 항산화력으로 평가하여 도 1에 나타내었다. 도 1에서 Y축 값이 100보다 낮아질수록 항산화력이 커지는 것을 의미한다.

도 1에서 알 수 있듯이, 각 실시예들은 음성 대조군에 비해 우수한 항산화 효과를 가지며, 농도가 높을수록 그 효과가 증가하였다. 따라서, 각 식물에서 추출한 당단백질은 뛰어난 항산화 효과를 가짐을 확인할 수 있었다. 그리고 각 식물에서 추출한 당단백질들은 2종 이상 혼합하여 사용이 가능하다.

이하 본 발명에 의한 베르게니아 코르디폴리아, 로디올라 로시아, 코마룸 파루스트레, 아비스 시비리카, 베툴라 펜둘라 버즈, 및 이노노투스 오브리쿠스로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 함유하는 조성물을 포함하는 미용 조성물, 약학 조성물 및 건강 식품 조성물의 제형예를 보다 상세하게 설명하나, 미용 조성물, 약학 조성물 및 건강 식품 조성물은 여러 가지 제형으로 응용 가능하고, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.

[제형예 1] 유연화장수(스킨로션)

하기 표 11에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 유연화장수를 제조하였다.

배합 성분	함량 (중량 %)
각 식물에서 추출한 당단백질	0.1
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	2.0
프로필렌글리콜	2.0
카르복시비닐폴리머	0.1
피이지-12 노닐페닐에테르	0.2
폴리솔베이트 80	0.4
에탄올	10.0
트리에탄올아민	0.1
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제형예 2] 영양화장수(밀크로션)

하기 표 12에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양화장수를 제조하였다.

배합 성분	함량 (중량 %)
각 식물에서 추출한 당단백질	0.1
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
카르복시비닐폴리머	0.1
밀납	4.0
폴리솔베이트 60	1.5
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	5.0
스쿠알란	5.0
솔비타세스퀴올레이트	1.5
유동파라핀	0.5
세테아릴 알코올	1.0
트리에탄올아민	0.2
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제형예 3] 영양크림

하기 표 13에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조하였다.

배합 성분	함량(중량%)
각 식물에서 추출한 당단백질	0.1
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	3.0
유동파라핀	7.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	3.0
스쿠알란	5.0
세테아릴 글루코사이드	1.5
소르비탄 스테아레이트	0.4
폴리솔베이트 60	1.2
트리에탄올아민	0.1
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제형예 4] 마사지 크림

하기 표 14에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 마사지 크림을 제조하였다.

배합 성분	함량(중량%)
각 식물에서 추출한 당단백질	0.1
글리세린	8.0
부틸렌글리콜	4.0
유동파라핀	45.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	3.0
밀납	4.0
세테아릴 글루코사이드	1.5
세스퀴 올레인산 소르비탄	0.9
바세린	3.0
파라핀	1.5
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제형예 5] 팩

하기 표 15에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 팩을 제조하였다.

배합 성분	함량(중량%)
각 식물에서 추출한 당단백질	0.1
글리세린	4.0
폴리비닐알콜	15.0
히알루론산 추출물	5.0
베타글루칸	7.0
알란토인	0.1
노닐 페닐에테르	0.4
폴리솔베이트 60	1.2
에탄올	6.0
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제형예 6] 피부 외용제 중 연고

하기 표 16에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 연고를 제조하였다.

배합 성분	함량(중량%)
각 식물에서 추출한 당단백질	0.1
글리세린	8.0
부틸렌글리콜	4.0
유동파라핀	15.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	3.0
스쿠알란	1.0
세테아릴 글루코사이드	1.5
소르비탄 스테아레이트	0.4
세테아릴 알코올	1.0
밀납	4.0
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제형예 7] 산제의 제조

각 식물에서 추출한 당단백질............100 mg

유당...................................100 mg

탈크.....................................10 mg

유지...................................... 5 mg

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.

[제형예 8] 정제의 제조

각 식물에서 추출한 당단백질........50 mg

옥수수전분......................100 mg

유당..................................100 mg

스테아린산 마그네슘........2 mg

비타민 C............................50 mg

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.

[제형예 9] 캅셀제의 제조

각 식물에서 추출한 당단백질...............50 mg

옥수수전분................................100 mg

유당.............................................100 mg

스테아린산 마그네슘...................2 mg

비타민 C.......................................50 mg

세린................................................50 mg

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.

[제형예 10] 액제의 제조

각 식물에서 추출한 당단백질.............................100 mg

이성화당...................................................10 g

만니톨.....................................................5 g

비타민 C...................................................50 mg

세린........................................................50 mg

유지........................................................적량

정제수.......................................................적량

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100 ㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.

[제형예 11] 건강 식품의 제조

각 식물에서 추출한 당단백질...................1000 ㎎

비타민 혼합물

비타민 A 아세테이트............................70 ㎍

비타민 E ......................................1.0 ㎎

비타민 B1.......................................0.13 ㎎

비타민 B2 .............................. ......0.15 ㎎

비타민 B6........................................0.5 ㎎

비타민 B12........................................0.2 ㎍

비타민 C.........................................10 ㎎

비오틴..........................................10 ㎍

니코틴산아미드....................................1.7 ㎎

엽산..............................................50 ㎍

판토텐산 칼슘......................................0.5 ㎎

무기질 혼합물

황산제1철..........................................1.75 ㎎

산화아연............................................0.82 ㎎

탄산마그네슘.....................................25.3 ㎎

제1인산칼륨.........................................15 ㎎

제2인산칼슘.........................................55 ㎎

구연산칼륨...........................................90 ㎎

탄산칼슘.............................................100 ㎎

염화마그네슘.....................................24.8 ㎎

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 제형예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.

[제형예 12] 건강 음료의 제조

각 식물에서 추출한 당단백질.....................................1000 ㎎

구연산..........................................................1000 ㎎

올리고당.........................................................100 g

매실농축액.........................................................2 g

타우린..............................................................1 g

정제수를 가하여 전체....................................900 ㎖

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.

조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 제형예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

Claims (7)

1. 코마룸 파루스트레(Comarum palustre)에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 포함하는 피부 주름 예방 또는 개선용 조성물.
2. 코마룸 파루스트레(Comarum palustre)에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 포함하는 피부 탄력 개선용 조성물.
3. 코마룸 파루스트레(Comarum palustre)에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 포함하는 흉터 예방 또는 개선용 조성물.
4. 코마룸 파루스트레(Comarum palustre)에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 포함하는 피부재생 촉진용 화장료 조성물.
5. 코마룸 파루스트레(Comarum palustre)에서 추출한 당단백질을 유효 성분으로 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 조성물.
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 코마룸 파루스트레에서 추출한 당단백질을 총 조성물 중량에 대하여 0.1 내지 30 중량%로 포함하는 조성물.
7. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 조성물은 프로콜라겐의 합성을 촉진하는 것인, 조성물.

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