KR101665354B1 - Antioxidant, anti-inflammatory and antibacterial cosmetic composition containing extract of styrax japonicus' young leaves - Google Patents
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Abstract
본 발명은 때죽나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하여 피부에 대한 항산화, 항염, 항균 효과를 나타내는 화장료 또는 약학 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic or pharmaceutical composition containing an extract of Quercus acutissima Leaf as an active ingredient and showing antioxidant, anti-inflammatory and antibacterial effects on skin.
Description
본 발명은 항산화, 항염, 항균용 조성물에 관한 것으로서, 상세하게는 때죽나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하여 피부에 대한 항산화, 항염, 항균 효과를 나타내는 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a composition for antioxidant, anti-inflammation, and antimicrobial activity, and more particularly, to a composition containing an antioxidant, anti-inflammatory and antimicrobial effect on skin by containing a pine needle leaf extract as an active ingredient.
항산화(抗酸化)란 산화를 억제하는 작용을 말한다. 물이나 공기 중 산소에 의한 식품의 산화에는 특히 불포화지방산을 함유하는 산화와 변질, 열화가 문제가 되나 항산화작용이 강한 차의 카테킨류나 비타민 E를 첨가하므로써 그 산화가 억제된다. 한편 활성산소에 의한 생체지질의 산화에서는 생체막 인지질(불포화지방산포함) 이외에 단백질(여러 효소를 포함)이나 유전의 정보를 담당하는 DNA의 손상 등이 관련하여 나아가서 간 장해나 순환기계 질환 혹은 암 등의 질병 그리고 노화를 유도하는 것으로 생각하고 있다. 녹차에 다량으로 함유된 카테킨류는 생체의 in vitro에 있어서 과산화물(보기로서 t-butyl hydroperoxide) 유기의 과산화 반응은 물론 생체 내 in vitro에 있어서 반응생성물(thiobarbituric acid 반응생성물, TBARS)의 생성축적을 유의적으로 억제하는 작용이 있는 것이 증명되었다. 항산화작용 활성은 카테킨의 종류에 따라 약간 달리 epigallocatechin(EGC)과 그의 몰식자산 ester인 epigallocatechin gallate(EGCG)가 가장 강하고 적어도 in vitro의 실험에서는 비타민 C나 E, 혹은 식품첨가물로서 사용되는 BHT(t-butyl hydroperoxy toluene)를 상회한다.Antioxidant (anti-oxidation) refers to the action of inhibiting oxidation. Oxidation of food by oxygen in water or air is particularly problematic due to oxidation, deterioration and deterioration, which contain unsaturated fatty acids. However, oxidation of the food is inhibited by adding catechins or vitamin E, which are highly antioxidant. On the other hand, in the oxidation of living body lipids by reactive oxygen species, in addition to the biosynthetic phospholipids (including unsaturated fatty acids), damage of DNA (including various enzymes) and DNA responsible for genetic information, Disease and aging. Catechins which are present in large quantities in green tea are not only the peroxidation of peroxides (for example, t-butyl hydroperoxide) in vitro but also the production and accumulation of thiobarbituric acid reaction product (TBARS) in vivo in vitro It has been proved that there is an effect of inhibiting significantly. Epigallocatechin (EGC) and epigallocatechin gallate (EGCG) were the most potent antioxidative activity of epigallocatechin (EGCG) and at least in vitro experiments showed that vitamin C and E, or t-butyl hydroperoxy toluene).
한편, 염증(炎蒸, inflammation)이란 어떤 자극에 대한 생체조직의 방어반응의 하나로, 조직 변질, 순환장애와 삼출(出), 조직 증식의 세 가지를 병발하는 복잡한 병변을 일컫는다. 또한, 여러 가지 형태의 감염(infection)이나 생체 내 대사산물 중의 자극성 물질에 대한 생체 내 방어기전의 발현이라 할 수 있고, 다양한 화학적 매개체가 염증의 발현 기전에 관여하고 있으며, 그 병인도 매우 복잡하다. 이는 조직의 상해 또는 파괴에 의해 유발되는 국소 보호 반응으로, 상해 유발 물질과 상해된 조직 모두를 파괴, 약화시키거나 차폐하는 작용을 한다. 이러한 염증의 특징은 미세혈관이 천공되고, 혈액 성분이 틈새 공간으로 누출되며, 백혈구가 염증 조직으로 이동한다는 것으로, 통상적으로 홍반, 부종, 통각 과민 및 통증 등의 임상적 증상들을 동반한다. 생체에 있어서 염증의 발생 원인으로는 다양한 생화학적인 현상이 관여하고 있으며, 특히 산화질소(nitric Oxide:NO)를 발생시키는 효소인 니트릭옥사이드 신타제(nitric oxide synthase:NOS)와 프로스타글란딘(prostaglandin)의 생합성에 관련된 효소들이 염증 반응을 매개하는데 있어서 중요한 역할을 하고 있는 것으로 알려진 바 있다. 이에 L-아르기닌(L-Arginine)으로부터 NO를 생성시키는 효소인 NOS나, 아라키돈산(Arachidonic acid)으로부터 프로스타글란딘류를 합성하는데 관련된 효소인 COX(시클로옥시게나제)는 염증을 차단하는데 있어서 주된 작용을 하고 있다. 최근의 연구 결과에 따르면, NOS는 뇌에 존재하는 bNOS(brain NOS), 신경계에 존재하는 nNOS(neuronal NOS), 혈관계에 존재하는 eNOS(endothelial NOS) 등이 있으며, 체내에 항상 일정수준으로 발현되고 있고, 이들에 의해 소량 생성되는 NO는 신경전달이나 혈관확장을 유도하는 등 정상적인 신체의 항상성 유지에 중요한 역할을 한다. 이에 반하여, 각종 사이토카인(cytokines)이나 외부 자극물질에 의해 유도되는 iNOS(inducible NOS)에 의해 급격히 과량 발생되는 NO는 세포독성이나 각종 염증반응을 일으키는 것으로 알려져 있으며, 만성 염증은 iNOS 활성의 증가와 관련 있다는 연구가 있다. TNF-와 같은 다기능성 사이토카인(cytokine)은 정상조직에서 발현될 뿐만 아니라 병변 과정에서 그 발현 정도가 증가되며, 특히 암촉진 과정에서 일어나는 피부염증에 중요한 역할을 한다. TNF-가 인간의 염증성 피부 질환과 관련이 있음은 이미 많이 보고되고 있다. 또한, 여러 염증질환과 알러지(allergy) 현상에 TNF-에 대한 항체를 처리하였을 때 증상이 완화되었고, TNF-는 호중성 백혈구를 활성화시켜 과산화수소 생성을 증가시킴으로써 내인성 암촉진제로서의 기능도 하고 있다. 지금까지 널리 알려져 있는 항염 소재의 성분으로는 유기화합물(이종원자 구조화합물, 탄소환 또는 비환화합물), 생약추출물, 효소, 펩타이드, 당류, 스테로이드 및 오일 등이 있으나, 물리화학적 불안정으로 인한 제형에서의 안정성이 떨어지고 피부염의 특성상 장기 복용에 따른 부작용의 우려와 아토피로 인한 2차 감염 등 피부에 자극을 일으킬 수 있는 단점을 가지고 있어 실제적으로 제품에 적용하는데 한계가 있다.On the other hand, inflammation is one of the defensive responses of biological tissues to certain stimuli. It refers to complicated lesions involving tissue degeneration, circulatory disorders, exudates, and tissue proliferation. In addition, various types of infection and expression in the in vivo defense system against irritants in metabolites in vivo, various chemical mediators are involved in the mechanism of expression of inflammation, and the pathogenesis thereof is very complicated. It is a topical protective response caused by tissue injury or destruction, which acts to destroy, weaken or mask both injurious and injurious tissues. The characteristic of this inflammation is that the microvessels are perforated, the blood components leak into the interstitial space, and the white blood cells migrate to the inflammatory tissues, usually accompanied by clinical symptoms such as erythema, edema, hyperalgesia and pain. The causes of inflammation in living organisms are various biochemical phenomena. In particular, nitric oxide synthase (NOS) and prostaglandin (NO), which are enzymes that generate nitric oxide (NO) Enzymes involved in biosynthesis have been shown to play an important role in mediating inflammatory responses. Thus, NOS, an enzyme that produces NO from L-arginine, and COX (cyclooxygenase), an enzyme involved in the synthesis of prostaglandins from arachidonic acid, have a major role in blocking inflammation . Recent studies have shown that NOS is expressed in the brain such as brain nOS, neuronal nOS, and endothelial NOS in the vasculature, , And the small amount of NO produced by them plays an important role in maintaining normal body homeostasis, such as inducing neurotransmission or vasodilation. On the other hand, NO, which is rapidly over-induced by various cytokines or inducible NOS induced by external stimulants, is known to cause cytotoxicity and various inflammatory responses, and chronic inflammation is associated with an increase in iNOS activity There is research that is related. Multifunctional cytokines such as TNF- are expressed not only in normal tissues but also in the process of the lesions, and they play an important role in skin inflammation, especially in cancer-promoting processes. It has been reported that TNF- is associated with inflammatory skin diseases in humans. In addition, symptoms are alleviated when TNF- antibody is administered to various inflammatory diseases and allergy, and TNF- activates neutrophil leukocytes to increase the production of hydrogen peroxide, thereby functioning as an endogenous cancer promoter. The components of the anti-inflammatory substance, which have been known so far, include organic compounds (heterocyclic compounds, carbocyclic or non-cyclic compounds), herbal medicine extracts, enzymes, peptides, sugars, steroids and oils. However, The stability is poor and the nature of dermatitis has a disadvantage that it can cause irritation to the skin such as a concern about side effects due to long-term use and secondary infection caused by atopy.
한편, 항균(抗菌)이란 약제나 생리활성물질에 의한 세균과 진균의 생육저해작용으로 살균적인 것과 정균적인 것으로 대별된다. 항균작용을 갖는 물질로서 가장 중시되고 있는 것이 항생물질(anti- biotics)이다. 항생물질이 항균작용에 미치게 할 수 있는 미생물의 범위를 항균 스펙트럼 또는 항균역이라고 부른다. 항균 스펙트럼이 넓은 항생물질을 광역 스펙트럼 항생물질이라고 부른다. 테트라사이클린(tetracy- cline)계 항생물질이나 세팔로스포린(cephalosporin)계 항생물질 등이 이에 해당한다. 항생물질의 등장에 의해 대부분의 세균감염증이 제압된 것은 주지의 사실이지만 항균작용에 저항하는 약제내성균의 출현과 만연은 치료에 문제점을 남기고 있다. 항생물질의 항균작용의 분자기구도 대부분의 것이 분명하게 밝혀져 있다. β-락탐계(β-lactam), 항생물질(penicillin계, 세팔로스포린계)의 항균작용은 세포벽합성저해에 의해, 클로람페니콜, macrolide계, 테트라사이클린계와 아미노배당계 항생물질은 단백질합성 저해에 의해 항균작용을 나타낸다. Quinolone은 DNA 합성을, 리팜피신은 RNA 합성을, 설파(sulfa)제는 엽산합성을 저해하는 것으로 항균작용을 발휘한다. 세균에 비하여 진균에 대한 작용을 발휘하는 뛰어난 항균제는 적지만 항생물질로서는 니아스타틴이나 클세오플빈이, 합성품으로는 살리실산(salicylic acid)이나 프로피온산, 소르브산염 등이 진균에 대하여 항균작용을 갖는 것이 알려지고 있다. On the other hand, antimicrobial (antibacterial) is classified into bactericidal and bacteriological due to the inhibition of the growth of bacteria and fungi by medicines and physiologically active substances. Anti-biotics are the most important antimicrobial agents. The range of microorganisms that antibiotics can bring to the antimicrobial action is called the antimicrobial spectrum or antimicrobial. Antibiotics with a broad spectrum of antimicrobial activity are called broad-spectrum antibiotics. These include tetracy- cline antibiotics and cephalosporin antibiotics. It is well known that most bacterial infections are suppressed by the emergence of antibiotics. However, the emergence and spread of drug-resistant bacteria resistant to antimicrobial action are causing problems in the treatment. Most of the molecular mechanisms of the antimicrobial action of antibiotics are also evident. Antimicrobial activity of β-lactam and antibiotics (penicillin, cephalosporin) is inhibited by the inhibition of cell wall synthesis, while chloramphenicol, macrolide, tetracycline and amino-saccharide antibiotics inhibit protein synthesis And exhibits an antibacterial action. Quinolone inhibits DNA synthesis, rifampicin inhibits RNA synthesis, and sulfa inhibits folate synthesis. It is known that antibiotics such as salicylic acid, propionic acid and sorbic acid have antimicrobial activities against fungi, while antibiotics such as niacatin and kleopalvin are used as antibiotics. ought.
하지만 최근 화학물질들의 다양한 부작용으로 인해 피부 및 화장품 분야에서 천연 항균물질을 이용한 많은 추출물이 발명되었으나 실질적 효능을 갖기에는 미미한 실정이다. 따라서 실질적 효능을 갖는 천연물의 개발이 절실한 상태이다.Recently, however, due to various side effects of chemicals, many extracts using natural antimicrobial materials have been invented in skin and cosmetics field, but it is insufficient to have a practical effect. Therefore, the development of a natural product having a substantial effect is in desperate condition.
한편, 때죽나무(Styrax japonica Sieb. et Zucc.)는 Styrax 속에 속하는 관목으로 100종이 있으며, 열대지역이나 따뜻한 지역에서 자란다. 낙엽성 잎은 호생엽이고, 짧은 잎자루를 가지고 있다. 흰꽃은 주로 말단 군집형태로 매달려 있으며, 다섯 개의 둥근 돌출부로 된 화관을 가지고 있다. 과거에 섬 지역에서 물을 정화시키거나 세탁용으로 사용했다는 기록이 있다. 현재까지 때죽나무 추출물은 다른 용도로도 사용되고 있지 않은 신규한 원료이다. 게다가 본 발명에서와 같이 때죽나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화, 항염, 항균 효과가 있는 화장료 조성물에 대해서는 개시된 바가 없는 실정이다.
On the other hand, Styrax japonica Sieb. Et Zucc. Is a shrub belonging to the genus Styrax. It grows in tropical or warm regions. Deciduous leaves are horned leaves and have short petiole. The white flower hangs mainly in the form of an end cluster, and has a corolla composed of five rounded protrusions. There is a record in the past that the island has used water for cleaning or washing. Until now, Quercus mongolica extract is a new raw material that has not been used for other purposes. In addition, as in the present invention, cosmetic compositions having antioxidant, anti-inflammation and antibacterial effects containing the extract of Quercus acutissima Leaf as an active ingredient have not been disclosed.
본 발명자들은 피부에 적용이 가능하고 인체에 무해하여 안전성이 매우 뛰어난 천연 추출물 및 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 또는 약학 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다. The present inventors intend to provide a natural extract which is applicable to the skin and which is harmless to human body and which is very safe, and a cosmetic or pharmaceutical composition containing it as an active ingredient.
또한, 본 발명은 때죽나무 잎 추출물 및 이를 유효성분으로 하고 항산화, 항염증, 항균력이 뛰어난 것을 특징으로 하는 화장료 또는 약학 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
It is another object of the present invention to provide a cosmetic composition or a pharmaceutical composition, which is characterized by having an antioxidant, anti-inflammation and antimicrobial activity using a pine needle leaf extract and an effective ingredient thereof.
상기의 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 때죽나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a cosmetic composition characterized by containing a pine tree leaf extract as an active ingredient.
또한, 본 발명은 때죽나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물을 제공한다.
In addition, the present invention provides a pharmaceutical composition characterized by containing a potato leaf extract as an active ingredient.
본 발명은 때죽나무 잎 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는데, 여기서, 본 발명의 때죽나무 잎 추출물은 바람직하게는 때죽나무 어린잎 추출물을 사용하는 것이 좋다. 때죽나무 어린잎은 새로 나온 연한 잎을 의미하는 것으로 3 ~ 5월경의 이른 봄에 돋아나는 새싹을 채취하여 사용한다. 때죽나무 잎은 독성이 있어 인체안전성에 문제가 있으나, 때죽나무 어린잎은 독성이 없어 인체에 무해하고 항산화 효과가 뛰어나다. 게다가, 때죽나무 어린잎은 항염효과가 뛰어나 피부염증 개선에 효과적이며, 나아가 피부 트러블을 완화시키고, 아토피성 피부를 개선하며, 피부 과민 반응을 완화시키는 효과가 뛰어나다. 또한, 때죽나무 어린잎은 우수한 항균 활성을 나타내고, 항균 스펙트럼이 넓어 방부능력이 우수하다. The present invention is characterized by containing a pine tree leaf extract, wherein the pine tree leaf extract of the present invention is preferably a pine tree leaf extract. Quercus variabilis The young leaf is a newly emerged soft leaf, which is taken from early spring around March to May. Quercus variabilis leaves are toxic and have a problem in human safety. However, young leaves of Quercus variabilis have no toxicity and are harmless to human body and have excellent antioxidant effect. In addition, young leaves of Quercus acutissima have excellent anti-inflammatory effect, and are effective in improving inflammation of the skin. Furthermore, they are effective in alleviating skin troubles, improving atopic skin and relieving skin irritation. In addition, young leaves of Quercus acutissima have excellent antimicrobial activity and broad antimicrobial spectrum and excellent antiseptic ability.
하기 실험예에 의하면, 본 발명의 때죽나무 어린잎 추출물은 항산화 효과(참조: 실험예 1), 항염 효과(참조: 실험예 3), 항균 효과(참조: 실험예 4, 실험예 5)가 뛰어나다. 또한, 이러한 효과를 갖는 때죽나무 어린잎 추출물을 유효성분으로 함유하여 제조한 화장료 조성물의 경우, 방부 효과(참조 : 실험예 6)가 뛰어난 것으로 나타났다.According to the following Experimental Example, the Youngjoo tree young leaf extract of the present invention is excellent in antioxidant effect (see Experimental Example 1), anti-inflammatory effect (Experimental Example 3) and antibacterial effect (see Experimental Example 4 and Experimental Example 5) . In addition, the cosmetic composition prepared by containing the leaves extract of Quercus mongolica var. Japonica having the effect as an active ingredient showed excellent preservative effect (Reference Example 6).
한편, 본 발명의 때죽나무 잎 추출물은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 다양한 추출 방법을 이용할 수 있다. 예를 들면, 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 헥산의 용매를 각각 단독으로 또는 이들을 2종 이상 혼합한 용매를 추출 용매로 이용하여 추출할 수 있다. Meanwhile, the extract of Quercus acutissima Leaf leaf of the present invention can be used various extracting methods commonly used in the technical field of the present invention. For example, it is possible to use a solvent in which purified water, methanol, ethanol, glycerin, ethyl acetate, butylene glycol, propylene glycol, dichloromethane and hexane are used alone or as a mixture of two or more thereof as an extraction solvent .
또한, 본 발명의 때죽나무 잎 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라 다른 방법으로 추출된 추출물도 포함한다. 예컨대, 초고압 추출법에 의한 추출; 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리; 다양한 크로마토그래피, 예를 들어 크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 크로마토그래피에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 때죽나무 잎 추출물에 포함되는 것이다.In addition, the potato leaf extract of the present invention includes not only the extract obtained by the above-mentioned extraction solvent, but also the extract extracted by other methods. Extraction by ultra-high pressure extraction; Separation using an ultrafiltration membrane having a constant molecular weight cut-off value; Fractions obtained through various purification methods, such as separation by chromatography produced for various chromatographies, for example, separation by size, charge, hydrophobicity or affinity, are also included in the potato leaf extract of the present invention .
본 발명의 때죽나무 잎 추출물은 바락직하게는 초고압 추출법을 이용하는 것이 좋으며, 이 경우에는 바람직하게는 압력 100∼3000MPa, 온도 40∼90℃에서 20 ~ 30시간 처리하며, 더욱 바람직하게는 압력 500∼1000MPa, 온도 40~60℃에서 23 ~ 25시간 처리하는 것이 좋다. 또한, 초고압 추출시 pH는 특정 pH에 한정하는 것은 아니나, 바람직하게는 초고압기 내부 물의 pH를 1∼6으로 낮춰 처리하는 것이 좋다. 또한, 본 발명은 이와 같이 초고압 처리한 때죽나무 잎을 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 헥산 및 그의 혼합물로부터 선택된 추출용매를 이용하여 환류 추출하고 냉침한 후, 여과시킨 여과액을 농축조로 이송하여 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하는 것이 바람직하다. 본 발명은 이렇게 얻어진 감압농축물 및 동결건조물이 0.001 ~ 70.0 중량% 함유되게 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 추출물을 제조할 수 있다. In this case, it is preferable to treat the leaves of the present invention with a pressure of 100 to 3000 MPa at a temperature of 40 to 90 DEG C for 20 to 30 hours, 1000 MPa at a temperature of 40 to 60 ° C for 23 to 25 hours. In addition, the pH during the extraction of ultra-high pressure is not limited to a specific pH, but it is preferable to lower the pH of the water in the ultra-high pressure apparatus to 1 to 6. The present invention is also directed to a process for the production of a water-in-oil extract according to the present invention by refluxing and extracting leaves of ultra-high pressure treated Quercus variabilis with an extraction solvent selected from purified water, methanol, ethanol, glycerin, ethyl acetate, butylene glycol, propylene glycol, dichloromethane, After that, the filtered solution is transferred to a concentration tank and concentrated under reduced pressure and freeze-dried at 50 ° C or lower. The extract of the present invention can be prepared by using at least one solvent selected from purified water, ethanol, butylene glycol and propylene glycol so that the thus obtained reduced-pressure concentrate and the lyophilized product are contained in an amount of 0.001 to 70.0% by weight.
또한, 본 발명의 때죽나무 잎 추출물은 상기 추출물을 일부 또는 전부 농축하여 얻은 농축물, 또는 다시 그 농축물을 건조시켜 제조한 추출 엑기스 및 추출물 중에 함유되고 있는 주 효과를 발휘하는 화학물질 그 자체를 포함한다.당업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건하에서, 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있다. In addition, the potato leaf extract of the present invention can be obtained by concentrating a part or all of the above extract, or extracting an extract prepared by drying the concentrate and a chemical substance itself exhibiting a main effect contained in the extract May be prepared according to conventional methods known in the art, that is, under the conditions of ordinary temperature and pressure, using conventional solvents.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 때죽나무 잎 추출물은 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.0001 ~ 30.0중량% 첨가되는 것일 수 있다. 상기 때죽나무 잎 추출물의 함량이 0.0001중량% 미만인 경우에는 항산화, 항염증, 항균 효과가 미미하며, 30.0중량% 초과인 경우에는 경제적이지 못하다.Meanwhile, in the cosmetic composition of the present invention, the extract of Quercus acutissima L. can be added in an amount of 0.0001 to 30.0% by weight based on the total weight of the cosmetic composition. The antioxidative, anti-inflammatory and antimicrobial effects are insignificant when the content of the extract is less than 0.0001% by weight, and it is not economical when the content is more than 30.0% by weight.
한편, 본 발명의 화장료 조성물은 유효 성분으로서 상기 때죽나무 잎 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.In addition, the cosmetic composition of the present invention may contain, as an active ingredient, the components commonly used in cosmetic compositions in addition to the above-mentioned Quercus variabilis leaf extract, and may contain conventional components such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, Adjuvants, and carriers.
한편, 본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있다. 다만, 이에 반드시 한정되는 것은 아니다. 더욱 상세하게는, 유연 화장수, 수렴 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.Meanwhile, the cosmetic composition of the present invention may be prepared in any form conventionally produced in the art, and examples thereof include a solution, a suspension, an emulsion, a paste, a gel, a cream, a lotion, a powder, a soap, Containing cleansing, oils, powder foundations, emulsion foundations, wax foundations and sprays. However, the present invention is not limited thereto. More specifically, it can be manufactured in the form of a soft lotion, a convergent lotion, a nutritional lotion, a nutritional cream, a massage cream, an essence, an eye cream, a cleansing cream, a cleansing foam, a cleansing water, a pack, a spray or a powder.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a paste, a cream or a gel, an animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide Can be used.
또한, 본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component, Propane / butane, or dimethyl ether. ≪ RTI ID = 0.0 >
또한, 본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a dissolving agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate , Propylene glycol, 1,3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan fatty acid esters.
또한, 본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is in the form of a suspension, the carrier component may include water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester Suspending agent, microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.
또한, 본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a cleansing composition containing an interfacial active agent, it is preferable to use, as carrier components, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, Fatty acid amide ether sulfate, alkylamido betaine, aliphatic alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, lanolin derivative, or ethoxylated glycerol fatty acid ester.
한편, 본 발명의 약학 조성물의 제형으로는 일 예로 경고제(PLASTERS), 로션제(LOTIONS), 리니멘트제(LINIMENTS), 액제(LIQUIDS AND SOLUTIONS), 에어로솔제(AEROSOLS), 엑스제(EXTRACTS), 연고제(OINTMENTS), 유동엑스제(FLUIDEXTRACTS), 유제(EMULSIONS), 현탁제(SUSPESIONS), 캅셀제(CAPSULES), 크림제(CREAMS), 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀, 첩부제, 서방화제제가 있다. Examples of formulations of the pharmaceutical composition of the present invention include PLASTERS, LOTIONS, LINIMENTS, LIQUIDS AND SOLUTIONS, AEROSOLS, EXTRACTS, Ointments, FLUIDEXTRACTS, EMULSIONS, SUSPESIONS, CAPSULES, CREAMS, soft or hard gelatin capsules, pastes, and sustained release preparations.
한편, 본 발명의 약학 조성물은 약리학적으로 허용되는 기제; 운반제; 부형제; 전분, 트래거캔스 고무, 젤라틴, 당밀, 폴리비닐 알콜, 폴리비닐 에테르, 폴리비닐 피롤리돈, 히드록시프로필 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스 및 카르복시메틸 셀룰로오스를 포함하는 결합제; 한천, 전분, 젤라틴 가루, 카르복시메틸 셀룰로오스 나트륨, 카르복시메틸 셀룰로오스 칼슘, 결정 셀룰로오스, 탄산칼슘, 탄산수소나트륨 및 알긴산 나트륨을 포함하는 분쇄제; 스테아린산 마그네슘, 활석 및 수첨 식물유를 포함하는 윤활제; 및 착색제 등을 포함할 수 있고, 상기 운반제 및 부형제로는 젖당, 글루코오스, 수크로오스, 만니톨, 감자녹말, 옥수수녹말, 탄산칼슘, 인산칼슘 및 셀룰로오스 등이 있다. 상기 외에도 안정화제, 용해보조제, 경피흡수 촉진제 등의 보조제 방향제, 방부제 등의 첨가제가 더 첨가될 수 있다.On the other hand, the pharmaceutical composition of the present invention comprises a pharmacologically acceptable base; Carrier; Excipients; Binders comprising starch, tragacanth gum, gelatin, molasses, polyvinyl alcohol, polyvinyl ether, polyvinylpyrrolidone, hydroxypropylcellulose, methylcellulose, ethylcellulose and carboxymethylcellulose; A pulverizing agent comprising agar, starch, gelatin powder, carboxymethyl cellulose sodium, carboxymethyl cellulose calcium, crystalline cellulose, calcium carbonate, sodium hydrogen carbonate and sodium alginate; Lubricants including magnesium stearate, talc and hydrogenated vegetable oils; And a coloring agent. Examples of the carrier and excipient include lactose, glucose, sucrose, mannitol, potato starch, cornstarch, calcium carbonate, calcium phosphate, and cellulose. In addition to the above, additives such as stabilizers, solubilizers, perfume fragrances such as transdermal absorption accelerators, and preservatives may be further added.
한편, 많은 환자에게 본 발명인 약학 조성물에 대한 표준 투여량은 환자의 개별적 특성에 의해 그 양이 변화될 수 있으며, 실질적으로 숙련된 임상 의사는 환자를 위해 본 발명의 약학 조성물에 대한 이상적인 투여량 및 투여 계획, 예를 들어, 특정 필요 및 환자의 전체적인 조건의 관점에서 가장 적절한 치료 전략을 정할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물에 대하여, 적절한 투여량을 결정하는 데는 수많은 참조 문헌을 참조할 수 있다. On the other hand, for many patients, the standard dosage for the pharmaceutical composition of the present invention may be varied depending on the individual characteristics of the patient, and a physician skilled in the art will be able to determine the optimal dosage for the pharmaceutical composition of the present invention It is possible to determine the most appropriate treatment strategy in terms of the dosage regimen, for example, the specific needs and the overall condition of the patient. For the pharmaceutical compositions of the present invention, reference can be made to a number of references for determining suitable dosages.
또한, 본 발명의 약학 조성물의 적절한 투여량은 시험관 내 또는 동물 모델에서 일반적으로 결정될 수도 있다. 예를 들어, 시험관 내에서 표적 세포에 대해 여러 농도의 본 발명의 약학 조성물을 첨가하여 그 적절한 투여량을 결정할 수도 있다. 일 예로, 본 발명의 약학 조성물은 유효성분을 기준으로 하였을 때 1일 0.1 내지 100 ㎎/㎏(체중)으로 1회 이상 처방가능하다. 그러나 상기의 투여량은 예시하기 위한 일 예에 불과하며, 환자의 상태에 따라 의사의 처방에 이해 변화될 수 있다.In addition, suitable dosages of the pharmaceutical compositions of the present invention may be routinely determined in vitro or in animal models. For example, various doses of the pharmaceutical composition of the present invention may be added to the target cells in vitro to determine their proper dosage. For example, the pharmaceutical composition of the present invention can be prescribed more than once at 0.1 to 100 mg / kg (body weight) per day based on the active ingredient. However, the dosage is merely an example, and may vary depending on the condition of the patient.
본 발명은 인체에 무해하여 안전성이 뛰어나고 항산화 효과가 뛰어난 화장료 또는 약학 조성물을 제공할 수 있다. The present invention can provide a cosmetic or pharmaceutical composition which is harmless to human body and is excellent in safety and excellent in antioxidative effect.
또한, 본 발명은 피부 자극 등의 문제가 없고 항산화, 항염증 및 우수한 항균효과를 제공할 수 있다.Further, the present invention has no problems such as skin irritation and can provide antioxidant, anti-inflammation and excellent antibacterial effect.
또한, 본 발명은 항염효과가 뛰어나 피부염증 개선에 효과적이며, 나아가 피부 트러블을 완화시키고, 아토피성 피부를 개선하며, 피부 과민 반응을 완화시키는 효과가 뛰어나다.Further, the present invention is excellent in anti-inflammatory effect, and is effective in improving skin inflammation, further alleviating skin troubles, improving atopic skin, and relieving skin irritation.
또한, 본 발명은 우수한 항균 활성을 나타내고, 항균 스펙트럼이 넓어 방부능력이 우수하다.
Further, the present invention exhibits excellent antimicrobial activity and broad antimicrobial spectrum and is excellent in preservative ability.
이하, 본 발명의 내용을 하기 실시예를 통해 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, the scope of the present invention is not limited to the following embodiments, and includes modifications of equivalent technical ideas.
제조예 1 : 때죽나무 잎 추출물의 제조Production Example 1: Preparation of Quercus acutissima Leaf Extract
때죽나무의 어린잎을 정제수로 세척하고 건조한 다음 모두 분쇄한 후 100메시의 체를 이용하여 미세하게 만들었다. 그 후, 때죽나무의 어린잎 분쇄물을 100g/L가 되도록 70% 에탄올을 첨가하여 5시간씩 3회 환류추출하고 냉침하고, 와트만(whatman) #3 여과지로 여과 후, 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하였다.
The young leaves of Quercus serrata were washed with purified water, dried, and then pulverized and finely ground using a sieve of 100 mesh. Thereafter, 70% ethanol was added to 100 g / L of the leaves of the leaves of Quercus serrata, refluxed for 3 hours for 5 hours, cooled, filtered through whatman # 3 filter paper, Concentrated and lyophilized.
제조예 2 : 때죽나무 잎 초고압 추출물의 제조Preparation Example 2: Preparation of Extra-high Pressure Extract of Quercus serrata
때죽나무의 어린잎을 음건하여 파쇄 후 50.0 g을 초고압처리기를 이용하여 압력 1000MPa 하에서 온도를 50℃로 승온시키고 24시간 처리한 후 실온으로 냉각시켰다. 초고압 처리한 때죽나무 어린잎을 최종 70%(V/V) 에탄올 수용액이 되도록 에탄올을 첨가하여 5시간씩 3회 환류추출하고 냉침한 후, 와트만(whatman) #10 여과지로 여과하였다. 이렇게 얻은 여과액을 다시 0.25uM의 여과기를 이용하여 농축조로 이송하여 60℃ 정도에서 감압농축 또는 동결 건조하였다.
After shredding young leaves of Quercus serrata, 50.0 g of the leaves were heated to 50 ° C under a pressure of 1000 MPa using an ultra-high pressure processor, treated for 24 hours, and then cooled to room temperature. Ethanol was added to make the final leaf of 70% (V / V) ethanol solution, and the mixture was refluxed three times for 5 hours, cooled and filtered with a filter of whatman # 10. The filtrate thus obtained was transferred to a concentration tank using a 0.25 uM filter and concentrated under reduced pressure or freeze-dried at about 60 ° C.
비교제조예 1 : 때죽나무 가지 추출물의 제조Comparative Preparation Example 1: Preparation of Quercus alba extract
때죽나무 가지에 대하여 제조예 1과 동일한 방법으로 때죽나무 가지 추출물을 제조하였다.
The extracts of Quercus variabilis were prepared in the same manner as in Preparation Example 1.
비교제조예 2 : 때죽나무 열매 추출물의 제조Comparative Preparation Example 2: Preparation of fruit quince fruit extract
때죽나무 열매에 대하여 제조예 1과 동일한 방법으로 때죽나무 열매 추출물을 제조하였다.
Quercus acutissima fruit extract was prepared in the same manner as in Production Example 1.
비교제조예 3 : 때죽나무 가지 초고압 추출물의 제조Comparative Preparation Example 3: Preparation of ultra-high pressure extract
때죽나무 가지에 대하여 제조예 2와 동일한 방법으로 때죽나무 가지 초고압추출물을 제조하였다.
Extra high pressure extrudates of Quercus variabilis were prepared in the same manner as in Preparation Example 2.
비교제조예 4 : 때죽나무 열매 초고압 추출물의 제조Comparative Preparation Example 4: Preparation of Extra-high Pressure Extract of Quercus acutissima
때죽나무 열매에 대하여 제조예 2와 동일한 방법으로 때죽나무 열매 초고압 추출물을 제조하였다.
Extra-high pressure extract of Quercus acutissima was prepared in the same manner as in Preparation Example 2.
[실험예 1: 때죽나무 잎 추출물의 DPPH법을 이용한 항산화 평가][Experimental Example 1: Evaluation of antioxidative activity of Quercus acutissima Leaf extract using DPPH method]
제조예 1, 2에서 수득한 때죽나무 잎 추출물의 농도별(0.001, 0.002, 0.005, 0.01 %) 자유라디칼 소거 활성(free radical scavenging acticity)을 평가하고자 하였다.Free radical scavenging activity (0.001, 0.002, 0.005, 0.01%) according to the concentrations of the leaves of Quercus acutissima L. extract obtained in Preparation Examples 1 and 2.
DPPH 측정법은 억제제(inhibitor)가 안정한 라디칼 DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl radical)를 소거하여 탈색되는 정도를 540 nm에서 흡광도를 측정하는 방법이다. 사용한 시료는 하기 표 1과 같이 시험하여 하기 수학식 1을 이용하여 자유라디칼 소거활성을 측정하였다. 대조군은 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG, Epigallocatechin gallate)로 하였다.The DPPH assay measures absorbance at 540 nm to the extent that the inhibitor decolorizes the stable radical DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl radical). The used samples were tested as shown in Table 1 below and free radical scavenging activity was measured using the following equation (1). The control group was Epigallocatechin gallate (EGCG).
A: Abs of experimental groupA: Abs of experimental group
B: Abs blank of experimental groupB: Abs blank of experimental group
C: Abs of control groupC: Abs of control group
D: Abs blank of control groupD: Abs blank of control group
실험결과, 상기 표 2와 같이 제조예 1, 2의 때죽나무 잎 추출물이 비교제조예 1 내지 4의 때죽나무 가지, 열매 추출물에 비하여 우수한 자유라디칼 소거활성을 나타내 항산화능이 높게 나타남을 확인할 수 있었다.
As a result of the experiment, it was confirmed that the potato leaf extracts of Preparation Examples 1 and 2 exhibited excellent free radical scavenging activity and higher antioxidative activity than the extracts of Quercus variabilis and Fruit extracts of Comparative Examples 1 to 4 as shown in Table 2 above.
[실험예 2: 때죽나무 잎 추출물의 세포 생존율 평가][Experimental Example 2: Evaluation of cell survival rate of Quercus acutissima Leaf extract]
제조예 1, 2의 때죽나무 잎 추출물이 세포에 미치는 독성을 측정하였다.The toxicity of the leaves of Quercus acutissima L. leaves of Preparation Examples 1 and 2 on cells was measured.
세포 독성은 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2-5-diphenyltetrazolium bromide(MTT) 시약을 이용하여 세포 생존율을 측정하는 Mosmann의 방법을 변형하여 실시하였다. Cytotoxicity was performed by modifying Mosmann's method of measuring cell viability using 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2-5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) reagent.
HDF를 96-well plate에 1×104 cells/well의 농도로 분주하여 37℃, 5% CO2 에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 배지를 제거하고 시료를 농도별로 처리한 배지에 24시간 동안 배양한 후 배지를 제거하고 PBS (Phosphate buffered saline) 두 번씩 세척하였다. 그 후, MTT 를 5 mg/mL 로 PBS에 녹여 50 L 첨가하고 37℃, 5%의 CO2 에서 2시간 동안 배양하였다. 그 후, DMSO를 한 well 당 100 L 넣고 10분 동안 교반한 후 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.HDF was added to 96-well plates at a concentration of 1 × 10 4 cells / well and cultured at 37 ° C and 5% CO 2 for 24 hours. The culture medium was removed and the sample was cultured for 24 hours in a concentration-treated medium. The medium was removed and washed twice with PBS (phosphate buffered saline). After that, MTT was dissolved in PBS at 5 mg / mL, 50 L was added, and the cells were cultured at 37 ° C and 5% CO 2 for 2 hours. After that, 100 L of DMSO was added per well, and the mixture was stirred for 10 minutes and absorbance was measured at 540 nm.
측정 결과, 각 시료의 모든 농도에서 세포 독성은 나타나지 않았다. 이로부터 본 발명의 때죽나무 잎 추출물은 인체에 무해하며 안전성이 매우 우수함을 확인할 수 있었다.
As a result of the measurement, no cytotoxicity was observed at all concentrations of each sample. From this, it can be confirmed that the present invention of the present invention is safe and harmless to the human body.
[실험예 3: 때죽나무 잎 추출물의 항염 평가(5-Lipoxygenase 저해)][Experimental Example 3: Evaluation of anti-inflammatory properties of Quercus acutissima Leaf Extract (5-Lipoxygenase inhibition)]
제조예 1, 2의 때죽나무 잎 추출물과 비교제조예1 내지 4의 때죽나무 가지, 열매 추출물의 5-Lipoxygenase 저해 활성 실험을 하여 항염 효과를 평가하고자 하였다.Lipoxygenase inhibitory activity of the extracts of Quercus acutissima L. and fruit extracts of Preparation Examples 1 to 4 was compared with that of Quercus variabilis leaf extracts of Preparation Examples 1 and 2 to evaluate the anti-inflammatory effect.
lipoxygenase는 arachidonic acid로부터 생체내 염증반응이나 알레르기 반응 등에 관여하는 다양한 화학적인 매개체 역할을 하는 여러 물질들을 생성한다. 따라서 lipoxygenase를 저해하는 물질은 각종 chemical mediators의 생성을 억제하는 결과를 가져오게 되므로 알레르기에 유효할 것이라고 추정할 수 있다. lipoxygenase의 활성정도는 기질과 효소를 이용하여 과산화물 생성정도로 측정하는 실험이다.Lipoxygenase produces many substances that act as various chemical mediators involved in inflammatory and allergic reactions in vivo from arachidonic acid. Therefore, lipoxygenase inhibitors can inhibit the production of various chemical mediators, which can be considered to be effective for allergy. The degree of lipoxygenase activity is an experiment to measure the degree of peroxide formation using substrates and enzymes.
사용한 시료는 하기 표 3과 같이 시험하여 상기 수학식 1을 이용하여 5-Lipoxygenase 저해 활성을 측정하였다. 대조군은 노르디히드로구아이아레트산 (NDGA, Nordihydroguaiaretic acid)로 하였다. 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.The used samples were tested as shown in Table 3 below and the 5-Lipoxygenase inhibitory activity was measured using the above equation (1). The control group was nordihydroguaiaretic acid (NDGA). The results are shown in Table 4 below.
상기 표 4의 결과에서 보는 바와 같이, 본 발명의 때죽나무 잎 추출물은 때죽나무 가지, 열매 추출물에 비하여 5-Lipoxygenase 저해능이 우수하게 나타난 것으로 보아 우수한 항염효과를 확인할 수 있었으며, 특히, 때죽나무 잎 초고압 추출물이 가장 우수한 항염효과를 나타내었다.
As can be seen from the results of Table 4, the extract of Quercus acutissima L. exhibited excellent 5-Lipoxygenase inhibitory effect as compared with that of Quercus acutissima and Fruit extract, The extract showed the best anti - inflammatory effect.
[실험예 4: 때죽나무 잎 추출물의 항균력 평가(Paper disc test)][Experimental Example 4: Evaluation of antibacterial activity of Quercus acutissima Leaf Extract (Paper disc test)]
본 발명의 때죽나무 잎 추출물의 항균 효과를 알아보기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다. 균주는 CTFA에서 선정한 4가지 피검균 포도상구균(Staphylococcus aureus) KCTC1916, 녹농균(Pseudomonas aeruginosa) KCTC 1636, 대장균(Escherichia coli) KCTC 1039, 캔디다균(Candida albicans) KCTC 7965 에 적용하여 수행한다. 세균은 Tryptic Soy Broth 배지에, 진균은 Potato Dextrose Broth 배지에 시험균주 1%씩을 접종한 후 세균은 37℃에서 24시간, 진균은 25℃에서 48시간 진탕 배양한 후, 세균은 1×106 cfu/ml, 진균은 1×105 cfu/ml로 0.9% NaCl에 희석한다. 준비한 샘플은 실험할 농도별로 희석한 후 빈 페트리디쉬에 지름 8mm의 paper disc를 올리고 50 ㎕ 처리하여 클린벤치 내에서 완전히 건조한다. 미리 만들어 50℃에서 보관한 tap agar(0.7% Agar) 10 ㎖에 희석한 균을 각각 100 ㎕씩 접종하여 세균은 Tryptic Soy Broth 배지에, 진균은 Potato Dextrose Broth 배지에 부어준다. agar 가 완전히 굳으면 그 위에 건조된 paper disc를 올려 놓는다. 세균은 37℃에서 24시간, 진균은 25℃에서 48시간 배양한 후 paper disc 주의의 미생물이 성장하지 못한 지름(inhibition zone)을 측정하여 mm로 나타내어 항균활성을 평가하였다. 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다.In order to examine the antimicrobial effect of the present invention, the following experiment was carried out. The strain is applied to four selected strains of Staphylococcus aureus KCTC1916, Pseudomonas aeruginosa KCTC 1636, Escherichia coli KCTC 1039 and Candida albicans KCTC 7965 selected by CTFA. Bacteria were inoculated into Tryptic Soy Broth medium and fungi were inoculated into Potato Dextrose Broth medium with 1% of test strain. Bacteria were incubated at 37 ° C for 24 hours and fungi were shaken at 25 ° C for 48 hours. Bacteria were cultured at 1 × 10 6 cfu / ml, and the fungus is diluted to 0.9% NaCl at 1 × 10 5 cfu / ml. The prepared sample is diluted by the concentration to be tested, and then a paper disc of 8 mm in diameter is placed on an empty petri dish and treated with 50 μl, and completely dried in a clean bench. 100 μl each of the diluted bacteria in 10 ml of tap agar (0.7% Agar) stored at 50 ° C in advance is inoculated into the Tryptic Soy Broth medium and the fungus is poured into the Potato Dextrose Broth medium. When the agar is completely hardened, place a dried paper disc on it. The antimicrobial activity was evaluated by measuring the inhibition zone in which the microorganisms did not grow in the paper disc culture after 24 hours at 37 ° C for 24 hours and at 48 ° C for 48 hours at 25 ° C. The results are shown in Table 5 below.
(단위 : mm)(Unit: mm)
상기 표 5의 결과에서 보는 바와 같이, 본 발명의 때죽나무 잎 추출물은 때죽나무 가지, 열매 추출물에 비하여 저해환이 넓게 나타난 것으로 보아 우수한 항균효과를 확인 할 수 있었다. 특히, 때죽나무 잎 초고압 추출물이 저해환이 가장 넓게 나타나 항균효과가 매우 높음을 알 수 있었다.
As can be seen from the results of Table 5, the antioxidant effect of the present invention was more excellent than that of the extract of Quercus acutissima L. and fruit extracts. Especially, the extract of Quercus acutissima Leaf Extract showed the most inhibitory effect and the antimicrobial effect was very high.
[실험예 5: 때죽나무 잎 추출물의 항균력 평가(MIC test)][Experimental Example 5: Evaluation of antibacterial activity of Quercus acutissima Leaf Extract (MIC test)]
본 발명의 때죽나무 잎 추출물의 항균 효과를 알아보기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다. 균주는 CTFA에서 선정한 4가지 피검균 포도상구균(Staphylococcus aureus) KCTC1916, 녹농균(Pseudomonas aeruginosa) KCTC 1636, 대장균(Escherichia coli) KCTC 1039, 캔디다균(Candida albicans) KCTC 7965 에 적용하여 수행한다. 세균은 Tryptic Soy Broth 배지에, 진균은 Potato Dextrose Broth 배지에 시험균주 1%씩을 접종한 후 세균은 37℃에서 24시간, 진균은 25℃에서 48시간 진탕 배양한 후, 세균은 1×106 cfu/ml, 진균은 1×105 cfu/ml로 0.9% NaCl에 희석한다. 준비한 샘플을 각 농도별로 세균은 Tryptic Soy Broth 배지에, 진균은 Potato Dextrose Broth 배지에 용해하여 총 10 ㎖가 되게 하고, 여기에 희석한 균주를 100 ㎕ 씩을 접종하였다. 그 후, 세균은 24시간 , 진균은 48시간 후 배지의 탁도(turbidity) 변화를 통하여 피검균의 성장 여부를 확인하여 평가하였다. 한편, 피검균이 자라지 않은 농도를 최소저해농도(Minimal inhibitory concentration, MIC)라 한다. 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다.In order to examine the antimicrobial effect of the present invention, the following experiment was carried out. The strain is applied to four selected strains of Staphylococcus aureus KCTC1916, Pseudomonas aeruginosa KCTC 1636, Escherichia coli KCTC 1039 and Candida albicans KCTC 7965 selected by CTFA. Bacteria were inoculated into Tryptic Soy Broth medium and fungi were inoculated into Potato Dextrose Broth medium with 1% of test strain. Bacteria were incubated at 37 ° C for 24 hours and fungi were shaken at 25 ° C for 48 hours. Bacteria were cultured at 1 × 10 6 cfu / ml, and the fungus is diluted to 0.9% NaCl at 1 × 10 5 cfu / ml. The prepared samples were dissolved in Tryptic Soy Broth medium and the Potato Dextrose Broth medium to a total concentration of 10 ml, and 100 μl of the diluted strains were inoculated. After that, the growth of the test organism was confirmed by evaluating the turbidity of the medium for 24 hours and the fungus for 48 hours. On the other hand, the concentration at which the test organism does not grow is referred to as a minimum inhibitory concentration (MIC). The results are shown in Table 6 below.
(단위 : %)(unit : %)
상기 표 6의 결과에서 보는 바와 같이, 본 발명의 때죽나무 잎 추출물은 때죽나무 가지, 열매 추출물에 비하여 MIC 농도가 낮게 나타난 것으로 보아 항균효과가 높음을 확인 할 수 있었다.
As shown in the results of Table 6 above, it was confirmed that the antioxidative effect of the present invention was higher than that of the extract of Quercus acutissima L. and fruit extracts.
[실시예 1: 때죽나무 잎 추출물을 함유하는 화장료의 제조][Example 1: Preparation of a cosmetic composition containing a potato leaf extract]
제조예 1, 2의 때죽나무 잎 추출물 30.0중량%가 포함된 화장료 조성물을 하기 표 7의 조성으로 제조하여 이를 처방예 1, 2이라 하고, 비교제조예 4의 때죽나무 열매 초고압 추출물 30.0중량%가 포함된 화장료 조성물을 하기 표 7의 조성으로 제조하여 이를 비교처방예 1이라 하였다.The cosmetic composition containing 30.0% by weight of the Quercus acutissima Leaf Extract of Preparation Examples 1 and 2 was prepared according to the composition shown in Table 7 below, and was designated as Prescription Examples 1 and 2, and 30.0% by weight of Quercus acutissima extract of Comparative Preparation Example 4 The included cosmetic compositions were prepared with the compositions of Table 7 below and referred to as Comparative Prescription Example 1.
(중량%)Prescription Example 1
(weight%)
(중량%)Prescription Example 2
(weight%)
(중량%)Comparative Prescription Example 1
(weight%)
[실험예 6: 때죽나무 잎 추출물을 함유하는 화장료의 방부력 평가(Challenge test)][Experimental Example 6: Challenge test of cosmetics containing Quercus acutissima Leaf extract]
본 발명의 때죽나무 추출물을 함유하는 화장료의 방부력 효과를 알아보기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다. 균주는 CTFA에서 선정한 4가지 피검균 포도상구균(Staphylococcus aureus) KCTC1916, 녹농균(Pseudomonas aeruginosa) KCTC 1636, 대장균(Escherichia coli) KCTC 1039, 캔디다균(Candida albicans) KCTC 7965 에 적용하여 수행한다. 세균은 Tryptic Soy Broth 배지에, 진균은 Potato Dextrose Broth 배지에 시험균주 1%씩을 접종한 후 세균은 37℃에서 24시간, 진균은 25℃에서 48시간 진탕 배양한 후, 세균은 1×106 cfu/ml, 진균은 1×105 cfu/ml 로 0.9% NaCl에 희석하여 준비한 샘플 50g에 시험균주를 모두 접종한다. 접종 직후 30분 이내에 1ml을 취해 0.9% NaCl 9ml에 두 번 희석하여 세균은 37℃에서 24시간, 진균은 25℃에서 48시간 배양하여 생균수를 측정한다. 이는 대조군으로써 zero point로 사용하고, 1일, 2일, 3일, 7일, 14일, 28일 간격으로 위의 방법대로 생균수를 측정하여 더 이상 균이 측정되지 않는 지점을 확인하였다. 그 결과를 하기 표 8은 실험예 5에서 MIC 농도를 확인하였던 제조예 1, 제조예 2, 비교제조예 4를 실시예 1과 같이 화장료로 제조하여 평가한 결과를 나타낸 것이다.In order to examine the effect of the cosmetic composition containing the extract of Quercus mongolica extract of the present invention, the following experiment was conducted. The strain is applied to four selected strains of Staphylococcus aureus KCTC1916, Pseudomonas aeruginosa KCTC 1636, Escherichia coli KCTC 1039 and Candida albicans KCTC 7965 selected by CTFA. Bacteria were inoculated into Tryptic Soy Broth medium and fungi were inoculated into Potato Dextrose Broth medium with 1% of test strain. Bacteria were incubated at 37 ° C for 24 hours and fungi were shaken at 25 ° C for 48 hours. Bacteria were cultured at 1 × 10 6 cfu / ml, the fungus is diluted to 0.9 × 10 5 cfu / ml in 0.9% NaCl, and all the test strains are inoculated into 50 g of the prepared sample. Immediately after inoculation, take 1 ml of the solution and dilute twice with 9 ml of 0.9% NaCl. The bacteria are incubated at 37 ° C for 24 hours and the fungus is incubated at 25 ° C for 48 hours. The number of viable cells was measured at the 1st, 2nd, 3rd, 7th, 14th, and 28th day intervals using the zero point as a control. The results are shown in Table 8 below. Production Example 1, Production Example 2, and Comparative Production Example 4 in which the MIC concentration was confirmed in Experimental Example 5 were evaluated as cosmetic preparations as in Example 1. FIG.
(단위: 일(days))(Unit: days)
상기 표 8의 결과에서 보는 바와 같이, 본 발명의 때죽나무 잎 추출물을 함유하는 화장료인 처방예 1, 2의 경우 방부활성을 확인할 수 있었으며, 초고압 추출을 했던 처방예 2에서 더 높은 효과를 확인하였다. 한편 때죽나무 열매 추출물을 함유하는 화장료인 비교처방예 1의 경우 미미하지만 방부활성을 확인할 수 있었으나, 일반적으로 방부력에 따라 방부활성이 더 빨리 나타나므로 상기의 결과는 본 발명의 때죽나무 잎 추출물을 함유하는 화장료가 높은 방부력을 나타낸다는 것을 확인시켜 준 것이다.As can be seen from the results of Table 8, Preservative Examples 1 and 2, which are the cosmetic compositions containing the Quercus acutissima Leaf extract of the present invention, were able to confirm preservative activity, and higher efficacy was confirmed in Prescription Example 2 in which ultra-high pressure extraction was performed . In contrast, Comparative Prescription Example 1, which is a cosmetic composition containing the extract of Quercus acutissima L., showed a preservation activity but it was found that the preservative activity was faster than that of the quercetin extract. It was confirmed that the cosmetic contained therein exhibited high repellency.
Claims (12)
A cosmetic composition for improving skin inflammation, alleviating skin troubles, improving atopic skin, alleviating skin hypersensitivity, antibacterial and antimicrobial agent characterized by containing ultra high pressure extract of Quercus acutissima Leaf leaf.
상기 때죽나무 잎 초고압 추출물은 때죽나무 어린잎 초고압 추출물인 것을 특징으로 하는 피부 염증 개선, 피부 트러블 완화, 아토피성 피부 개선, 피부 과민 반응 완화, 항균 및 방부용 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
The cosmetic composition for improving skin irritation, alleviating skin troubles, improving atopic skin, alleviating skin irritation, antibacterial and antifungal composition, characterized in that the ultra high pressure extract of Quercus acutissima Leaf Extract is an ultra high pressure extract of Quercus serrata.
상기 초고압 처리한 때죽나무 잎을 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 헥산 및 그의 혼합물로부터 선택된 추출용매로 추출하여 때죽나무 잎 초고압 추출물을 수득하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 염증 개선, 피부 트러블 완화, 아토피성 피부 개선, 피부 과민 반응 완화, 항균 및 방부용 화장료 조성물의 제조방법.The leaves are treated with high pressure at a pressure of 100 to 3000 MPa and a temperature of 40 to 90 DEG C for 20 to 30 hours,
The step of extracting the ultrahigh-pressure treated Quinceanera leaves with an extraction solvent selected from purified water, methanol, ethanol, glycerin, ethyl acetate, butylene glycol, propylene glycol, dichloromethane, hexane and mixtures thereof, A method for preparing a cosmetic composition for improving skin irritation, alleviating skin troubles, improving atopic skin, alleviating skin irritation, and antimicrobial and ophthalmic composition,
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