KR101639393B1 - Food composition for relieving hangover comprising Lactococcus lactis subsp. lactis - Google Patents
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Abstract
본 발명은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물에 관한 것으로, 상세하게는 에탄올 및 아세트알데하이드 분해기능을 갖는 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 사용하여 기능성 크림치즈를 제조하였고, 이 기능성 크림 치즈는 숙취해소용 기능성 건강 식품으로 사용됨이 바람직하며, 넓게는 에탄올 분해 산물인 아세트알데하이드를 분해함으로써 체내의 암을 유발할 가능성이 있는 아세트알데하이드의 축적을 최소화할 수 있다. 또한 시중의 크림 치즈에 비해 단가를 낮추기 위한 치즈 스타터로써 시중에 판매되는 크림 치즈와 차별화될 수 있다. The present invention is Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus lactis subsp. lactis) or relates to a hangover for improved food composition comprising a culture thereof as an active ingredient, specifically, the Lactococcus lactis subspecies lactis with ethanol and acetaldehyde decomposition function (Lactococcus lactis subsp. lactis ) was used to produce a functional cream cheese. The functional cream cheese is preferably used as a functional food for hangover, and it is widely used as an acetaldehyde, which may cause cancer in the body by decomposing acetaldehyde, Can be minimized. It can also be differentiated from commercially available cream cheese as a cheese starter to lower the unit price compared to commercial cream cheese.
Description
본 발명은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물에 관한 것이다.The present invention is Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus lactis subsp. lactis or a culture thereof as an active ingredient.
치즈는 수천 년 전부터 인간에게 알려진 발효식품이다. 현재 치즈의 종류는 1,400여 종 이상으로 알려져 있다. BC 6000년경 메소포타미아에 치즈와 비슷한 식품에 대한 기록이 있으므로 그 기원은 오래된 것으로 추측된다. 또한 BC 3000년경 스위스 코르테요 문화나 크레타섬의 미노아 문명 시대에 치즈 제조용인 목제기구의 출토가 있으므로 옛날부터 치즈가 이용된 것으로 생각된다. 1,400여 종류의 치즈가 있지만 서로 간에 비슷한 것들도 있고 아주 다른 것도 있는데 이는 형태, 크기, 숙성기간, 사용하는 원유, 첨가물, 포장법 그리고 제조지역에 따라 달라진다. 코덱스(Codex)에서는 계속해서 생산이 되는 치즈의 품질규격을 검토해 나가면서 개정해 나가고 있다. 일반적으로 치즈에는 단백질과 지방이 20~30%씩 들어 있으며, 카티지나 크림치즈는 단백질보다 지방함량이 더 많다. 숙성이 된 치즈는 그 성분이 유산균 등의 효소의 영향으로 소화나 흡수가 되기 쉬운 형태로 변해 있다. 그 밖에 칼슘, 인 황 등 무기질과 비타민 A, B 등의 함유량도 많아 미용에도 좋으며, 성장하는 어린이는 물론 소화기관이 약한 환자나 노인들의 영양식품으로 적극 추천할만한 발효 식품이다.Cheese is a fermented food known to man for thousands of years. Currently, more than 1,400 varieties of cheese are known. There is evidence of food similar to cheese in Mesopotamia around 6000 BC, so its origin is presumed to be outdated. It is also believed that cheese has been used since ancient times because of the excavation of the wooden artifacts for the production of cheese during the Corsican culture of Switzerland and the Minoan civilization of Crete island around 3000 BC. There are more than 1,400 kinds of cheese, but there are some similar to each other and very different depending on the type, size, aging period, crude oil used, additives, packaging method and manufacturing area. Codex is continuing to revise its quality standards as it continues to produce cheese. Generally, cheeses contain 20 to 30 percent protein and fat, and catgina or cream cheese has more fat content than protein. The fermented cheese has become a form that is easily digested and absorbed by the enzyme, such as lactic acid bacteria. In addition, there are many minerals such as calcium and phosphorus, and vitamin A and B, and it is good for beauty. It is a fermented food which is highly recommended as a nutritional food for patients and elderly people who are not only growing children but also digestive organs.
크림치즈는 이름 그대로 크림타입의 치즈로 텁텁한 맛과 냄새의 치즈 본연의 성질을 갖지 않는다. 흰색의 부드러운 크림 덩어리 형태로 요구르트가 발효되는 중간과정에서나 볼 수 있는 새콤한 맛과 고소한 맛을 지니며, 식감이 부드러운 것을 특징으로 한다. 크림치즈는 각종 유산균을 포함한 스타터와 응유효소를 가하여 생긴 커드를 가온 및 분리한 것으로 수분함량이 높기 때문에 저장조건이 까다롭고 이렇게 생산된 크림치즈는 고비용으로 판매되고 있는 실정이다. Cream cheese, as its name suggests, is a creamy cheese with no tasty flavor and odorless nature of cheese. It is characterized by a soft texture with a sour flavor and a sour taste that can be seen in the middle process of yogurt fermentation in the form of a white soft cream lump. Cream cheeses are made by heating and separating the curd resulting from the addition of the starter containing the various lactic acid bacteria and the cough enzyme. Therefore, the storage conditions are difficult because the moisture content is high and the cream cheese produced in such a manner is sold at a high cost.
한편, 음주 후 다음날 느끼는 숙취는 신체 건강은 물론 삶의 질까지 떨어뜨리는 원인이 된다. 술을 마시고 난 다음날이면 대부분의 사람들은 속 쓰림과 구토, 심한 두통에 시달리게 된다. 술마다 약간의 차이는 있지만 소주를 기준으로 에탄올 1g당 7.1kcal의 열량을 가지며, 다른 영양소는 거의 없다. 음주로 흡수된 에탄올은 2∼10%만이 신장이나 폐를 통해 소변이나 내쉬는 호흡으로 체외로 배출되고, 나머지 에탄올의 90% 이상은 빠른 속도로 간에서 대사된다. 간에서 분해되는 에탄올은 아세트알데히드를 생성하고 다시 아세트산으로 변화돼 물과 탄산가스로 분해된다. 이때 생기는 아세트알데히드가 얼굴을 붉게 하고 심장을 두근거리게 하며 두통과 위통을 유발시키는, 숙취의 원인이 된다. 잦은 음주는 알코올을 분해하는 간에 큰 무리를 주는 주요 원인이다. On the other hand, the hangover that you feel the next day after drinking may cause you to lose your quality of life as well as physical health. The next day after drinking, most people suffer from soreness, vomiting and severe headaches. There is a slight difference in each alcohol, but based on soju, it has a calorie of 7.1kcal per 1g of ethanol, and there are few other nutrients. Only 2% to 10% of alcohol absorbed into the body is excreted in the urine or exhaled breath through the kidneys or lungs, and more than 90% of the remaining ethanol is rapidly metabolized in the liver. Ethanol decomposed in the liver produces acetaldehyde, which in turn is converted to acetic acid and decomposed into water and carbon dioxide. The resulting acetaldehyde causes a hangover, reddening the face, pounding the heart, and causing headaches and stomach pain. Frequent drinking is the main cause of the large crowd that breaks down alcohol.
이와 같이 음주 후 나타나는 숙취를 해소하기 위하여 예로부터 콩나물, 북어, 녹두 등이 음주 후의 숙취 해소용 음식으로 이용되어 왔다. 이외에도 숙취해소와 관련하여 많은 식품들이 알려져 있으나, 이는 민간 요법 또는 고전 한의서에 기술된 원료 및 효능을 바탕으로 의존하고 있어 과학적 접근이 부족한 실정이다.In order to solve the hangover after drinking, bean sprouts, curry, mung bean have been used as food for hangover after drinking. In addition, many foods related to hangover relief are known, but they are dependent on the raw materials and efficacy described in the folk remedy or classical treaties, and the scientific approach is lacking.
본 발명의 목적은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물을 제공하는데 있다.It is an object of the present invention to provide a method for producing Lactococcus lactis subsp. lactis or a culture thereof as an active ingredient.
본 발명은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물을 제공한다.The present invention is Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus lactis subsp. lactis ) or a culture thereof as an active ingredient.
또한, 본 발명은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 배양한 후, 우유와 혼합하여 숙취개선용 크림치즈를 제조하는 방법을 제공한다.The present invention also relates to the use of Lactococcus lactis subtilis lactis subsp. lactis ), and then mixing with milk to prepare a cream cheese for hangover improvement.
본 발명은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물에 관한 것으로, 상세하게는 에탄올 및 아세트알데하이드 분해기능을 갖는 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 사용하여 기능성 크림치즈를 제조하였고, 이 기능성 크림 치즈는 숙취해소용 기능성 건강 식품으로 사용됨이 바람직하며, 넓게는 에탄올 분해 산물인 아세트알데하이드를 분해함으로써 체내의 암을 유발할 가능성이 있는 아세트알데하이드의 축적을 최소화할 수 있다. 또한 시중의 크림 치즈에 비해 단가를 낮추기 위한 치즈 스타터로써 시중에 판매되는 크림 치즈와 차별화될 수 있다. The present invention is Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus lactis subsp. lactis) or relates to a hangover for improved food composition comprising a culture thereof as an active ingredient, specifically, the Lactococcus lactis subspecies lactis with ethanol and acetaldehyde decomposition function (Lactococcus lactis subsp. lactis ) was used to produce a functional cream cheese. The functional cream cheese is preferably used as a functional food for hangover, and it is widely used as an acetaldehyde, which may cause cancer in the body by decomposing acetaldehyde, Can be minimized. It can also be differentiated from commercially available cream cheese as a cheese starter to lower the unit price compared to commercial cream cheese.
도 1은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 및 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 이용하여 크림 치즈를 제조한 것이다.
도 2는 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 크림 치즈를 마우스 대식세포인 RAW 264.7 세포에 처리하여 세포 독성 평가를 확인한 것이다.
도 3은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 포함하는 배양물을 In vitro 방법을 통하여 알코올 디하이드로게나아제(ADH) 활성을 측정한 것이다.
도 4는 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 포함하는 배양물을 In vitro 방법을 통하여 아세트알데하이드 디하이드로게나아제(ALDH) 활성을 측정한 것이다.
도 5는 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 크림 치즈를 In vitro 방법을 통하여 알코올 디하이드로게나아제(ADH) 활성을 측정한 것이다.
도 6은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 크림 치즈를 In vitro 방법을 통하여 아세트알데하이드 디하이드로게나아제(ALDH) 활성을 측정한 것이다.
도 7은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 및 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 이용하여 만든 크림 치즈의 알코올 디하이드로게나아제(ADH) 및 아세트알데하이드 디하이드로게나아제(ALDH) 활성을 측정하여 비교한 것이다.
도 8은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 이용하여 만든 크림 치즈를 마우스에 경구 투여하여 혈중 알코올의 농도를 측정한 것이다.
도 9는 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 이용하여 만든 크림 치즈를 마우스에 경구 투여하여 혈중 아세트알데하이드의 농도를 측정한 것이다.Figure 1 is a schematic representation of the Lactococcus chungangensis ) and Lactococcus lactis subsp . lactis ( Lactococcus lactis subsp. lactis ) was used to make cream cheese.
Figure 2 is a Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus lactis subsp. lactis ) cream cheese was treated with mouse macrophage RAW 264.7 cells to confirm cytotoxicity evaluation.
Figure 3 is a graph showing the activity of Lactococcus lactis < RTI ID = 0.0 > lactis subsp. lactis ) was treated with In through in vitro methods The activity of alcohol dehydrogenase (ADH) was measured.
Figure 4 shows the activity of acetaldehyde dehydrogenase (ALDH) activity measured in vitro by culturing a culture containing Lactococcus lactis subsp. Lactis .
5 is Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus lactis subsp. lactis ) Cream Cheese In through in vitro methods The activity of alcohol dehydrogenase (ADH) was measured.
Figure 6 is a graph showing the activity of Lactococcus lactis < RTI ID = 0.0 > lactis subsp. lactis ) Cream Cheese In acetaldehyde dehydrogenase (ALDH) activity was measured through an in vitro method.
FIG. 7 is a graph showing the activity of Lactococcus lactis subsp. The activity of alcoholic dihydrogenase (ADH) and acetaldehyde dehydrogenase (ALDH) in cream cheese made using lactis and Lactococcus chungangensis was measured and compared.
8 is Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus lactis subsp. lactis ) was orally administered to mice to measure the concentration of alcohol in the blood.
FIG. 9 is a Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus lactis subsp. lactis ) was orally administered to mouse to measure the concentration of acetaldehyde in blood.
본 발명에서는 에탄올 및 아세트알데하이드 분해기능을 갖는 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 사용하여 기능성 크림치즈를 제조하였고, 이 기능성 크림 치즈는 숙취해소용 기능성 건강 식품으로 사용됨이 바람직하며, 넓게는 에탄올 분해 산물인 아세트알데하이드를 분해함으로써 체내의 암을 유발할 가능성이 있는 아세트알데하이드의 축적을 최소화할 수 있다. 또한 시중의 크림 치즈에 비해 단가를 낮추기 위한 치즈 스타터로써 시중에 판매되는 크림 치즈와 차별화될 수 있다.
In the present invention, Lactococcus lactis subtilis Lactococcus having ethanol and acetaldehyde decomposing function lactis subsp. lactis ) was used to produce a functional cream cheese. The functional cream cheese is preferably used as a functional food for hangover, and it is widely used as an acetaldehyde, which may cause cancer in the body by decomposing acetaldehyde, Can be minimized. It can also be differentiated from commercially available cream cheese as a cheese starter to lower the unit price compared to commercial cream cheese.
본 발명은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물을 제공한다. 또한, 상기 식품조성물은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)(KCTC 12684BP) 또는 이의 배양액을 더 포함할 수 있다.The present invention is Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus lactis subsp. lactis ) or a culture thereof as an active ingredient. In addition, the food composition may be in the form of Lactococcus chungangensis (KCTC 12684BP) or a culture thereof.
바람직하게는, 상기 배양액은 25 내지 37℃에서 24시간 내지 48시간 동안 배양시킬 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.Preferably, the culture broth can be cultured at 25 to 37 DEG C for 24 to 48 hours, but is not limited thereto.
상세하게는, 상기 식품조성물은 에탄올 분해 활성 또는 아세트알데히드 분해 활성을 가져 숙취를 개선할 수 있다.
Specifically, the food composition may have ethanololytic activity or acetaldehyde decomposing activity to improve hangover.
본 발명의 조성물은 본 발명에 따른 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 및 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 생균, 건조균, 이의 배양액 또는 발효물을 유효성분으로 함유할 수 있으며, 상기 배양액 또는 발효물은 본 발명에 따른 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 및 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 적합한 액체 배지에서 배양한 배양액 자체, 상기 배양액을 여과 또는 원심분리하여 균주를 제거한 여액(여과액 또는 원심분리한 상등액) 등을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.
The compositions of the present invention may be used in combination with the Lactococcus lactis subsp. ≪ RTI ID = 0.0 > lactis subsp. lactis) and Lactococcus central Zen sheath (Lactococcus chungangensis) live cells, can contain the dried bacteria, the culture thereof, or fermented product as an active ingredient, the culture or the fermented product is Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus according to the present invention lactis subsp. lactis ) and Lactococcus chungangensis ) in a suitable liquid medium, a filtrate (filtrate or centrifuged supernatant) obtained by removing the strain by filtration or centrifugation of the culture broth, but the present invention is not limited thereto.
또한, 본 발명은 식품이나 발효제품으로 활용될 수 있으며, 상기 식품 또는 발효제품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있고, 상기 발효제품은 햄 및 소시지와 같은 발효육제품, 발효생식제품, 발효유제품, 김치 등을 포함한다. 본 발명의 유산균을 이용한 발효제품은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라 제조될 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 일 실시예로 상기 식품은 치즈, 특히 크림치즈일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
Further, the present invention can be utilized as a food or a fermented product, and the kind of the food or fermented product is not particularly limited. Examples of foods include dairy products such as meat, sausage, bread, chocolates, candies, snacks, confections, pizza, ramen noodles, other noodles, gums, ice cream, soups, drinks, tea, drinks, alcoholic beverages, The fermented product includes a fermented meat product such as ham and sausage, fermented reproductive product, fermented milk product, kimchi and the like. The fermented product using the lactic acid bacterium of the present invention can be produced according to a conventional method known in the art. Preferably, in one embodiment of the invention, the food may be cheese, especially cream cheese, but is not limited thereto.
본 발명에 있어서, "스타터(starter)"란 발효물을 제조하는 경우에 사용하는 미생물 배양액을 말한다. 따라서 스타터 미생물의 종류는 그 제품의 특성을 결정하게 되며 제품의 품질에 중요한 영향을 미친다. 미생물 중에서 스타터로 사용되고 있는 것은 박테리아, 곰팡이, 효모 등을 들 수 있으며, 이것을 단독 혹은 혼합하여 사용할 수 있다.
In the present invention, the term "starter" refers to a culture medium of microorganisms used for producing a fermented product. Therefore, the types of starter microorganisms determine the characteristics of the product and have an important influence on the quality of the product. Bacteria, fungi, yeast, etc., which are used as starters in microorganisms, can be used alone or in combination.
또한, 본 발명은 (1) 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 또는 이의 배양액을 우유에 접종하여 배양하는 단계; (2) 상기 (1) 단계에서 배양된 배양물을 저온 살균하는 단계; (3) 상기 저온 살균한 배양물을 우유와 혼합하여 가열하는 단계; 및 (4) 상기 가열하여 얻어진 치즈에서 수분을 제거하는 단계를 포함하는 숙취개선용 크림치즈 제조방법을 제공한다. 한편, 상기 (1) 단계에서는 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)(KCTC 12684BP) 또는 이의 배양액을 더 포함할 수 있다.
In addition, the present invention relates to (1) a Lactococcus lactis subsp. lactis ) or a culture thereof in milk; (2) pasteurizing the culture cultured in the step (1); (3) heating the pasteurized culture with milk and heating; And (4) removing moisture from the cheese obtained by the heating. Meanwhile, in the above step (1), Lactococcus chungangensis (KCTC 12684BP) or a culture thereof.
이하에서는, 본 발명을 한정하지 않는 실시예에 따라 본 발명을 상세히 설명한다. 본 발명의 하기 실시예는 본 발명을 구체화하기 위한 것일 뿐 본 발명의 권리범위를 제한하거나 한정하는것이 아님은 물론이다. 따라서, 본 발명의 상세한 설명 및 실시예로부터 본 발명이 속하는 기술분야의 전문가가 용이하게 유추할 수 있는 것은 본 발명의 권리범위에 속하는 것으로 해석된다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to examples which do not limit the present invention. It should be understood that the following embodiments of the present invention are only for embodying the present invention and do not limit or limit the scope of the present invention. It is therefore to be understood that within the scope of the appended claims, the invention may be practiced otherwise than as specifically described herein.
< < 실험예Experimental Example > >
하기의 실험예들은 본 발명에 따른 각각의 실시예에 공통적으로 적용되는 실험예를 제공하기 위한 것이다.
The following experimental examples are intended to provide experimental examples that are commonly applied to the respective embodiments according to the present invention.
1. One. 락토코커스Lactococcus 락티스Lactis 아종 Subspecies 락티스Lactis (( LactococcusLactococcus lactislactis subspsubsp .. lactislactis ) 및) And 락토코커스 Lactococcus 중앙젠시스Zhenzhen (( LactococcusLactococcus chungangensischungangensis ) 배양) Culture
락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis, KCTC3769T)는 Korean Collection for Type Cultures(KCTC)에서 분양받아 사용하였다. Lactococcus lactis Lactococcus lactis subsp. lactis , KCTC3769 T ) were purchased from Korean Collection for Type Cultures (KCTC).
락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)는 본 실험실에서 분리한 균주로서, 활성화된 슬러지 거품에서 분리되었다. 상기 균주는 Korean Collection for Type Cultures(KCTC)에 KCTC12684BP로 기탁되었다. Lactococcus chungangensis was isolated from this laboratory and isolated from activated sludge bubbles. The strain was deposited as KCTC12684BP in Korean Collection for Type Cultures (KCTC).
락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 및 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 대두카제인 배지(TSB: Tryptic Soy Broth) 배양액에 각각 접종하고, 30℃ shaking incubator에서 24시간 배양하였다. 각각의 세포밀도는 microplate reader(model Infinite®F200, Tecan, Mannedorf, Switzerland)를 이용하여 측정하였고, 상기 균주는 4×108 세포의 농도를 이용하여 각각 산성화된 우유에 접종하였다.
Lactococcus lactis Lactococcus lactis subsp. lactis and Lactococcus chungangensis were inoculated in a culture medium of TSB (Tryptic Soy Broth) and cultured in a shaking incubator at 30 ° C for 24 hours. Each cell density was measured using a microplate reader (model Infinite®F200, Tecan, Mannedorf, Switzerland) and the strain was inoculated with acidified milk at a concentration of 4 × 10 8 cells.
2. 2. 락토코커스Lactococcus 락티스Lactis 아종 Subspecies 락티스Lactis (( LactococcusLactococcus lactislactis subspsubsp .. lactislactis ) 및 락토코커스 ) And Lactococcus 중앙젠시스(Central Zensys ( Lactococcus chungangensisLactococcus chungangensis )를) 이용한 크림 치즈 제조 Manufacture of cream cheese
크림치즈 스타터로 사용될 유산균 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 및 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 산성화된 우유에 각각 접종하여 48시간 동안 배양하였다. 배양 후, 68℃에서 30분 동안 저온 살균하여 식힌 우유와 섞어 70℃에서 5분간 가열하였다. 가열 후 생긴 치즈의 수분을 제거하기 위해 천을 이용해 커드만을 얻었고, 0.5% 소금을 이용하여 수분을 제거하여 치즈를 완성하였다(도 1). 이렇게 완성된 치즈는 분말형태로 보관하기 위해 동결건조를 실시하여 추가 실험이 있기까지 4℃에서 보관하였다.
Lactic acid bacteria used as cream cheese starters Lactococcus Lactococcus lactis subsp. lactis ) and Lactococcus chungangensis were inoculated in acidified milk and cultured for 48 hours. After incubation, the mixture was pasteurized at 68 DEG C for 30 minutes, mixed with cooled milk, and heated at 70 DEG C for 5 minutes. In order to remove the moisture of the cheese after heating, only the curd was obtained using a cloth, and water was removed using 0.5% salt to complete the cheese (FIG. 1). The finished cheese was freeze-dried for storage in powder form and stored at 4 ° C until further experimentation.
3. 3. 락토코커스Lactococcus 가비에Gabi (( LactococcusLactococcus garvieaegarvieae ), 락토코커스 서브스페시스 홀디니애(), Lactococcus subsp. ≪ RTI ID = 0.0 > LactococcusLactococcus lactislactis subspsubsp . . hordiniaehordiniae ), ), 락토코커스Lactococcus 서브스페시스Subspecies 트럭태( Truck LactococcusLactococcus lactislactis subspsubsp .. tructaetructae ) 및 ) And 락토코커스Lactococcus 타이완엔시스( Taiwan Nation ( LactococcusLactococcus taiwanensis taiwanensis ) 배양) Culture
락토코커스 가비에(Lactococcus garvieae -KCTC3772T) 및 락토코커스 서브스페시스 홀디니애(Lactococcus lactis subsp. hordiniae -KCTC3768)는 KCTC(Korean Collection for Type Cultures)에서 분양받아 사용하였다. 락토코커스 서브스페시스 트럭태(Lactococcus lactis subsp. tructae -NBRC110453) 및 락토코커스 타이완엔시스(Lactococcus taiwanensis-NBRC109049)는 NBRC(National Biological Resource Center)에서 분양받아 사용하였다. Lactococcus garvieae - KCTC3772 T ) and Lactococcus subsp. lactis subsp. hordiniae - KCTC3768) were purchased from KCTC (Korean Collection for Type Cultures). Lactococcus subspecies lactis subsp. tructae - NBRC110453) and Lactococcus taiwanensis (NBRC109049) were purchased from the National Biological Resource Center (NBRC).
락토코커스 가비에(Lactococcus garvieae), 락토코커스 서브스페시스 홀디니애(Lactococcus lactis subsp. hordiniae), 락토코커스 서브스페시스 트럭태(Lactococcus lactis subsp. tructae) 및 락토코커스 타이완엔시스(Lactococcus taiwanensis)를 대두카제인 배지(TSB: Tryptic Soy Broth) 배양액에 접종하고, 30℃ shaking incubator에서 24시간 배양하였다. 각각의 세포밀도는 microplate reader(model Infinite F200, Tecan, Mannedorf, Switzerland)를 이용하여 측정하였고, 상기 균주들은 4×108 세포의 농도를 이용하여 산성화된 우유에 접종하였다.
Lactococcus garvieae , Lactococcus subsp. lactis subsp. hordiniae ), Lactococcus subspecies ( Lactococcus lactis subsp. tructae) and Lactococcus Taiwan N-Sys (Lactococcus taiwanensis) soybean-casein medium (TSB: Tryptic Soy Broth) culture medium inoculated to and cultured at 30 ℃ shaking incubator 24 hours. Each cell density was measured using a microplate reader (model Infinite F200, Tecan, Mannedorf, Switzerland) and the strains were inoculated into acidified milk at a concentration of 4 × 10 8 cells.
4. 4. 락토코커스Lactococcus 가비에Gabi (( LactococcusLactococcus garvieaegarvieae ), ), 락토코커스Lactococcus 서브스페시스Subspecies 홀디니애( Holdiniya ( LactococcusLactococcus lactislactis subspsubsp . . hordiniaehordiniae ), ), 락토코커스Lactococcus 서브스페시스Subspecies 트럭태( Truck LactococcusLactococcus lactislactis subspsubsp .. tructaetructae ) 및 ) And 락토코커스Lactococcus 타이완엔시스( Taiwan Nation ( LactococcusLactococcus taiwanensis taiwanensis )를 이용한 크림 치즈 제조) To make cream cheese
크림치즈 스타터로 사용될 유산균 락토코커스 가비에(Lactococcus garvieae), 락토코커스 서브스페시스 홀디니애(Lactococcus lactis subsp. hordiniae), 락토코커스 서브스페시스 트럭태(Lactococcus lactis subsp. tructae) 및 락토코커스 타이완엔시스(Lactococcus taiwanensis)를 산성화된 우유에 접종하여 48시간 동안 배양하였다. 배양 후, 68℃에서 30분 동안 저온 살균하여 식힌 우유와 섞어 70℃에서 5분간 가열하였다. 하지만 상기 균주들로는 치즈를 만들기 위한 커드를 얻을 수 없었고, 크림 치즈 제조에 실패하였다.
The lactic acid bacterium Lactococcus Garvey used as cream cheese starter (Lactococcus garvieae), Lactococcus Spanish sub-system holdi niae (Lactococcus lactis subsp. hordiniae ), Lactococcus subspecies ( Lactococcus lactis subsp. inoculated in tructae) and Lactococcus Taiwan acidified milk the N-Sys (Lactococcus taiwanensis) and incubated for 48 hours. After incubation, the mixture was pasteurized at 68 DEG C for 30 minutes, mixed with cooled milk, and heated at 70 DEG C for 5 minutes. However, the strains were unable to obtain a curd to make cheese, and failed to make cream cheese.
5. 가스크로마토그래피(5. Gas Chromatography ( GasGas chromatographychromatography )를 이용한 크림 치즈의 지방산 측정Measurement of fatty acids in cream cheese
상기 실험방법에 의거하여 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)로 만들어진 크림치즈로부터 휘발성 지방산을 검출하여 생산량을 비교하였다. 상기 크림 치즈를 동결건조 후 곱게 가루로 만들어 사용하였다. 메틸화 혼합물(Methylation mixture)(MeOH:Benzen:DMP:H2SO4=39:20:5:2)를 340㎕, 헵탄(heptane) 200㎕를 넣어 교반한 후 80℃에서 2시간 추출하였다. 유기산의 분석은 FID가 장착된 가스크로마토그래피에서 수행하였다. 컬럼(Column)은 DB-Wax(Agilent, 30mm*0.25mm*0.25um)를 이용하였으며, 분석조건은 오븐온도가 50℃에서 분당 25℃로 상승하여 230℃까지 올리며, 주입구 및 검출기의 온도는 250℃로 설정하였다.
Based on the above experimental method, Lactococcus lactis subsp. lactis ), and the amount of volatile fatty acid was compared. The cream cheese was lyophilized and finely ground. 340 μl of a methylation mixture (MeOH: Benzen: DMP: H 2 SO 4 = 39: 20: 5: 2) and 200 μl of heptane were added to the mixture and stirred at 80 ° C for 2 hours. Analysis of organic acids was carried out in gas chromatography equipped with FID. The analytical conditions were as follows: the oven temperature was raised to 25 ° C per minute at 50 ° C and increased to 230 ° C, and the temperature of the inlet and the detector was 250 ° C (250 ° C). The column was DB-Wax (Agilent, 30mm * 0.25mm * 0.25um) Lt; 0 > C.
6. 크림 치즈의 6. Cream cheese RAWRAW 264.7 세포 독성 평가 264.7 Cytotoxicity Assessment
상기에서 수득한 크림 치즈의 세포 독성 측정을 수행하였다. 마우스 대식세포인 RAW 264.7 세포를 세포 독성 측정 실험에 사용하였다. RAW 264.7 세포는 1주일에 3-4회 계대하였으며, 배지는 20/ml 젠타마이신 용액과 10% FBS(fetal bovine serum)를 함유한 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium) 배지를 이용하여 37℃, 5% CO2의 환경에서 배양하였다. 이렇게 배양된 세포를 이용하여 1×105 세포/well의 농도로 96-well plate에 분주하고, 24시간 동안 배양하였다. FBS가 함유되지 않은 새로운 DMEM 배지에 각각 크림 치즈의 최종 농도가 10mg/ml이 되도록 녹여 세포주에 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 세포주의 생존율을 측정하기 위해 MTT[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide] 시약을 사용하여 microplate reader로 590nm에서 흡광도를 측정하였다. 또한 세포의 손상을 측정하기 위해 LDH(lactate dehydrogenase)의 효소 측정을 수행하였다. 세포에서 방출되는 LDH의 양은 microplate reader로 430nm에서 흡광도를 측정하였다.
Cytotoxicity measurement of the cream cheese obtained above was carried out. Mouse macrophage RAW 264.7 cells were used for cytotoxicity measurement experiments. RAW 264.7 cells were transfected 3-4 times a week. The medium was maintained in DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) medium containing 20% gentamycin solution and 10% FBS (fetal bovine serum) CO 2. & Lt; / RTI > The cells were cultured in 96-well plates at a concentration of 1 × 10 5 cells / well and cultured for 24 hours. FBS-free DMEM medium was added to the final concentration of 10 mg / ml of the cream cheese, and the cells were treated for 24 hours. The absorbance at 590 nm was measured with a microplate reader using MTT [3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide] reagent. Enzyme determinations of LDH (lactate dehydrogenase) were also performed to measure cell damage. The amount of LDH released from the cells was measured with a microplate reader at 430 nm.
7. 7. 락토코커스Lactococcus 락티스Lactis 아종 Subspecies 락티스Lactis (( LactococcusLactococcus lactislactis subspsubsp .. lactislactis )를 포함하는 배양물의 알코올 디하이드로게나아제() ≪ / RTI > < RTI ID = 0.0 > ADHADH ) 및 ) And 아세트알데하이드Acetaldehyde 디하이드로게나아제Dihydrogenase (( ALDHALDH ) 활성 측정) Active measurement
상기에서 선발된 세포독성이 없는 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 포함하는 배양물에 대하여 다음의 방법으로 알코올 및 아세트알데하이드 분해능을 측정하였다. 유산균을 포함하는 배양물의 알코올 디하이드로게나아제(ADH) 활성 측정은 Lebsack과 Bostian의 방법을 변형하여 측정하였다. ADH 활성은 microplate reader를 이용하여 340nm에서 흡광도를 측정하여 대조군에 대한 상대적 활성을 비교하였다. 대조군은 ADH를 사용하여 비교 분석하였다. 반응액 조성은 1.0 M Tris/HCl buffer(pH 8.8), 20 mM NAD+, 0.2 M 에탄올, 증류수로 총 부피가 3 ml가 되게 첨가하고, 30 항온수조에서 5분간 반응시킨 뒤 상등액을 회수하여 340nm에서 흡광도를 측정하였다. 유산균을 포함하는 배양물의 아세트알데하이드 디하이드로게나아제(ALDH) 활성 측정은 Tottmar의 방법을 변형하여 측정하였다. ALDH 활성 또한 microplate reader를 이용하여 340nm에서 흡광도를 측정하여 대조군에 대한 상대적 활성을 비교하였다. 대조군은 ALDH를 사용하여 비교 분석하였다. 반응액 조성은 1.0 M Tris/HCl buffer(pH 8.0), 20 mM NAD+, 3.0 M KCl, 0.33 M 2-mercaptoehanol, 1.0 M 아세트알데하이드, 증류수로 총 부피가 3 ml가 되게 첨가하고, 30 항온수조에서 5분간 반응시킨 뒤 상등액을 회수하여 340nm에서 흡광도를 측정하였다.
The ability to degrade alcohol and acetaldehyde was determined in the following manner for cultures containing Lactococcus lactis subsp. Lactis without cytotoxicity selected above. Measurements of alcohol dehydrogenase (ADH) activity of cultures containing lactic acid bacteria were determined by modifying the Lebsack and Bostian methods. The ADH activity was measured by using a microplate reader at 340 nm, and the relative activities of the ADH activity were compared with the control group. Control groups were compared using ADH. The reaction mixture was added to a total volume of 3 ml with 1.0 M Tris / HCl buffer (pH 8.8), 20 mM NAD + , 0.2 M ethanol and distilled water. The reaction mixture was reacted in a constant temperature water bath for 30 minutes and the supernatant was recovered. The absorbance was measured. The activity of acetaldehyde dehydrogenase (ALDH) in cultures containing lactic acid bacteria was measured by modifying the method of Tottmar. The activity of ALDH was also measured by using a microplate reader at 340 nm. Controls were compared using ALDH. The reaction mixture was added to a total volume of 3 ml with 1.0 M Tris / HCl buffer (pH 8.0), 20 mM NAD + , 3.0 M KCl, 0.33 M 2-mercaptoehanol, 1.0 M acetaldehyde, distilled water, For 5 min. The supernatant was recovered and absorbance was measured at 340 nm.
8. 크림 치즈의 알코올 8. Alcohol in cream cheese 디하이드로게나아제Dihydrogenase (( ADHADH ) 및 ) And 아세트알데하이드Acetaldehyde 디하이드로게나아제( Dihydrogenase ( ALDHALDH ) 활성 측정) Active measurement
상기에서 선발된 세포독성이 없는 크림 치즈에 대해서도 상기 유산균을 포함한 배양물로 측정한 것과 같은 방법으로 알코올 및 아세트알데하이드 분해능을 측정하였다.
The ability to degrade alcohol and acetaldehyde was also measured for the creamy cheese without cytotoxicity selected in the above, by the same method as that for the culture containing the lactic acid bacteria.
9. 9. 락토코커스Lactococcus 락티스Lactis 아종 Subspecies 락티스Lactis (( LactococcusLactococcus lactislactis subspsubsp .. lactislactis )) 및 락토코커스 And Lactococcus 중앙젠시스(Central Zensys ( Lactococcus chungangensisLactococcus chungangensis )를) 이용하여 만든 크림 치즈를 마우스에 경구 투여하여 알코올 및 Cream cheeses made by using the oral administration to mice and alcohol 아세트알데하이드의Acetaldehyde 농도 측정 Concentration measurement
본 발명에서는 샘타코(경기도, 오산)로부터 구입한 생후 5주령 Imprinting Control Region(ICR) 마우스를 1주일간 고형배합사료와 물로 예비 사육시킨 후 실험을 수행하였다. 상기에서 선발된 알코올 및 아세트알데하이드 분해능이 우수한 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 및 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)로 만든 크림 치즈에 대하여 알코올성 숙취에 미치는 영향을 알아보기 위해서 알코올 섭취 후 시간경과(1, 3, 5, 7 시간)에 따른 혈중 알코올 농도 및 아세트알데하이드 농도를 측정하였다. 동물실험은 증류수를 경구 투여한 정상군, 알코올을 경구 투여한 대조군, 알코올 및 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 또는 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)로 만든 크림 치즈를 경구 투여한 실험군으로 각 군당 10마리씩 나누어 수행하였다. 알코올은 22%(15ml/kg body wt.)경구 투여하고, 양성 대조군은 알코올 및 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 또는 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)로 만든 크림 치즈(100mg/kg body wt.)를 함께 경구 투여하였다. 투여 후, 1시간, 3시간, 5시간, 7시간 후에 혈액을 채취하여 실온에서 30분간 방치 후 4℃에서 10분간 방치하고 1,500 rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 분리하였다. 0.3 M potassium phosphate buffer(pH 9.0)와 49 mM NAD+를 혼합한 후 혈액 샘플을 첨가하여 20℃에서 5분간 반응시킨 후 microplate reader를 이용하여 340nm에서 흡광도를 측정하였다 (A1). 또한 이상의 혼합액에 ADH 또는 ALDH 50를 첨가하여 20℃에서 5분간 반응시킨 후 340nm에서 흡광도를 측정하였다 (A2). 이를 바탕으로 혈중 알코올의 농도는 아래의 공식에 의해 정량하였다.
In the present invention, 5-week-old Imprinting Control Region (ICR) mice purchased from Samtako (Kyonggi-do, Osan) were preliminarily fed with solid feed and water for 1 week and then experiments were conducted. The alcohol and acetaldehyde resolving ability of Lactococcus lactis, lactis subsp. lactis) and Lactococcus central Zen sheath (Lactococcus chungangensis) BAC and acetaldehyde according to the after alcohol consumption in order to investigate the effect on alcohol hangover against the cream cheese from time (1, 3, 5, 7 hours) . Animals were divided into two groups: the normal group orally administered distilled water, the control group orally administered alcohol, the alcohol and Lactococcus lactis lactis subsp. lactis ) or cream cheese made with Lactococcus chungangensis was orally administered to each group. Each group was divided into 10 groups. Alcohol was orally administered at 22% (15 ml / kg body wt.) And the positive control group was alcohol and Lactococcus lactis subsp. lactis ) or cream cheese (100 mg / kg body wt.) made with Lactococcus chungangensis were orally administered together. Blood was collected 1 hour, 3 hours, 5 hours, and 7 hours after administration, and left at room temperature for 30 minutes, then left at 4 ° C for 10 minutes and centrifuged at 1,500 rpm for 15 minutes to separate the supernatant. After mixing 0.3 M potassium phosphate buffer (pH 9.0) and 49 mM NAD + , the blood sample was added, reacted at 20 ° C for 5 minutes, and absorbance was measured at 340 nm using a microplate reader (A1). After addition of ADH or ALDH 50 to the above mixture, the reaction was carried out at 20 ° C for 5 minutes and the absorbance was measured at 340 nm (A2). Based on this, the concentration of blood alcohol was quantified by the following formula.
Concentration = 0.7259/3.6×△AConcentration = 0.7259 / 3.6 x DELTA A
△A = sample(A2-A1)-blank(A2-A1)
ΔA = sample (A2-A1) -blank (A2-A1)
또한, 혈중 아세트알데하이드의 농도는 아래의 공식에 의해 정량하였다.
Also, the concentration of acetaldehyde in blood was quantified by the following formula.
Concentration = 0.7158/3.6×△AConcentration = 0.7158 / 3.6 x DELTA A
△A = sample(A2-A1)-blank(A2-A1)
ΔA = sample (A2-A1) -blank (A2-A1)
< < 실시예Example > >
1. 가스크로마토그래피(1. Gas Chromatography ( GasGas chromatographychromatography )를 이용한 ) 락토코커스Lactococcus 락티스Lactis 아종 락티스( Subspecies Lactis ( LactococcusLactococcus lactislactis subspsubsp .. lactislactis )) 및 And 락토코커스Lactococcus 중앙젠시Zhongzhen City 스(( LactococcusLactococcus chungangensischungangensis ) 크림 치즈의 지방산 분석 ) Fatty acid analysis of cream cheese
가스크로마토그래피를 이용하여 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 크림 치즈의 지방산 성분을 분석한 결과, Methyl palmitate 성분이 가장 많이 발견되었고, 그다음으로 Oleic acid, Methyl pentadecanoate, Octadecanoic acid, Methyl myristate 순으로 차이를 보였다. 이러한 성분의 비중은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 크림 치즈의 풍미를 결정지을 수 있다(표 1).
Using gas chromatography, Lactococcus lactis subsp. lactis) analysis of the fatty acid component of the cream cheese, ingredients Methyl palmitate was found most frequently, was the difference in Oleic acid, Methyl pentadecanoate, Octadecanoic acid , Methyl myristate order then. The specific gravity of these components was determined by Lactococcus lactis subsp. lactis ) cream cheese (Table 1).
가스크로마토그래피를 이용하여 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈의 지방산 성분을 분석한 결과, Methyl palmitate 성분이 가장 많이 발견되었고, 그 다음으로 Oleic acid, Methyl pentadecanoate, Octadecanoic acid, Methyl myristate 순으로 차이를 보였다. 이러한 성분의 비중은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈의 풍미를 결정지을 수 있다(표 2).
The fatty acid composition of Lactococcus chungangensis cream cheese was analyzed by gas chromatography. Methyl palmitate was the most abundant, followed by Oleic acid, Methyl pentadecanoate, Octadecanoic acid and Methyl myristate Respectively. The specific gravity of these components was determined by Lactococcus chungangensis ) can be determined (Table 2).
2. 2. 락토코커스Lactococcus 락티스Lactis 아종 Subspecies 락티스Lactis (( LactococcusLactococcus lactislactis subspsubsp .. lactislactis ) 및 락토코커스 ) And Lactococcus 중앙젠시스Zhenzhen (( LactococcusLactococcus chungangensischungangensis ) 크림 치즈를 처리한 ) Processed with cream cheese RAWRAW 264.7 세포의 독성 평가 264.7 Toxicity assessment of cells
락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 및 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈를 처리한 RAW 264.7 세포의 생존율은 감소하지 않았으며 LDH의 방출 양은 현저히 낮아 세포 손상이 없었음을 확인하였다. 따라서 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 크림 치즈는 세포 독성을 없음을 확인하였으며(도 2), 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈도 세포 독성이 없음을 확인하였다.
Lactococcus lactis Lactococcus lactis subsp. lactis ) and Lactococcus chungangensis) Survival of RAW 264.7 cells treated with the cream cheese was not confirmed that the emission reduction could significantly lower the amount of cell damage LDH. Thus, Lactococcus lactis subsp. lactis ) cream cheese was not cytotoxic (Fig. 2), and Lactococcus chungangensis ) cream cheese was not cytotoxic.
3. 3. 락토코커스Lactococcus 락티스Lactis 아종 락티스( Subspecies Lactis ( LactococcusLactococcus lactislactis subspsubsp . . lactislactis )를 포함하는 배양물의 알코올 디하이드로게나아제() ≪ / RTI > < RTI ID = 0.0 > ADHADH ) 및 ) And 아세트알데하이드Acetaldehyde 디하이드로Dihydro 게나아제(ALDH) 활성 측정Determination of the activity of alkaline phosphatase (ALDH)
In vitro 연구는 알코올 대사 과정에 발생하는 중요한 두 가지 화학반응인 ADH와 ALDH 활성을 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 포함하는 배양물을 평가하였다. 도 3에 도시된 바와 같이 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 포함하는 배양물의 ADH 활성 결과, 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 포함하는 배양물이 대조군으로 사용한 ADH 보다 활성은 낮았지만, 55.2%로 높은 활성을 보였다. 또한 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 포함하는 배양물의 ALDH 활성을 확인한 결과, 도 4에 도시된 바와 같이 대조군으로 사용한 ALDH 활성보다 활성은 낮았지만, 58.3%로 높은 활성을 보였다. 이러한 결과는 더 넓게 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)가 숙취 해소 및 간의 기능을 돕는 기능성 식품으로 사용 가능함을 나타내는 것이다.
In vitro studies have evaluated cultures containing Lactococcus lactis subsp. Lactis (ADH) and ALDH activity, two important chemical reactions that occur during alcohol metabolism. As shown in Figure 3, the ADH activity of cultures containing Lactococcus lactis subsp. Lactis showed that cultures containing Lactococcus lactis subsp. Lactis The activity was lower than that of ADH used as a control, but the activity was as high as 55.2%. As a result of confirming ALDH activity of the culture containing Lactococcus lactis subsp. Lactis , the activity was lower than the ALDH activity used in the control group as shown in FIG. 4, but was as high as 58.3% . These results indicate that Lactococcus lactis subsp. Lactis can be used as a functional food to help hangover and liver function.
4. 4. 락토코커스Lactococcus 락티스Lactis 아종 Subspecies 락티스Lactis (( LactococcusLactococcus lactislactis subspsubsp .. lactislactis ) 및 락토코커스 ) And Lactococcus 중앙젠시스Zhenzhen (( LactococcusLactococcus chungangensischungangensis ) 크림 치즈의 알코올 ) Alcohol of cream cheese 디하이드Dihydro 로게나아제(Rogenase ( ADHADH ) 및 ) And 아세트알데하이드Acetaldehyde 디하이드로게나아제Dihydrogenase (( ALDHALDH ) 활성 측정) Active measurement
In vitro 연구는 알코올 대사 과정에 발생하는 중요한 두 가지 화학반응인 ADH와 ALDH 활성을 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈를 평가하였다. 도 5에 도시된 바와 같이 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 크림 치즈의 ADH 활성 결과, 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)를 이용하여 만든 크림치즈가 대조군으로 사용한 ADH 대비하여, 94.8%로 높은 활성을 보였다. 또한 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 크림 치즈의 ALDH 활성을 확인한 결과, 도 6에 도시된 바와 같이 대조군으로 사용한 ALDH 대비하여, 67.3%로 높은 활성을 보였다. In vitro studies have shown that ADH and ALDH activities, two important chemical reactions that occur in alcohol metabolism, are activated by Lactococcus chungangensis ) cream cheese. As shown in Fig. 5, Lactococcus lactis subsp. ≪ RTI ID = 0.0 > lactis subsp. lactis ) cream cheese, Lactococcus lactis subsp . lactis ( Lactococcus lactis subsp. lactis ) was 94.8% higher than that of control (ADH). In addition, Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus lactis subsp. lactis ) cream cheese was 67.3% higher than that of ALDH as a control group as shown in FIG. 6.
또한, 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈의 ADH 활성 결과, 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 이용하여 만든 크림치즈가 대조군으로 사용한 ADH 보다 0.4% 더 높은 활성을 보였다. 또한 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈의 ALDH 활성을 확인한 결과, 대조군으로 사용한 ALDH 활성보다 활성은 낮았지만, 82.1%로 높은 활성을 보였다(도 7). In addition, Lactococcus As a result of ADH activity of cream cheese, cream cheese made with Lactococcus chungangensis showed 0.4% higher activity than ADH used as a control. In addition, Lactococcus chungangensis ) cream cheese, the activity was lower than the ALDH activity used as the control group, but the activity was as high as 82.1% (FIG. 7).
즉, 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)와 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)로 만든 크림치즈를 비교 평가하면, 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)의 ADH 활성은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 보다 5.6% 더 높은 활성을 보였다. 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)의 ALDH 활성은 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 보다 14.8%로 더 높은 활성을 보였다. 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)는 크림치즈처럼 에탄올 분해가 가능한 크림 치즈 스타터로 사용하기 용이하며, 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 크림 치즈는 숙취 해소 및 간의 기능을 돕는 기능성 식품으로 사용 가능함을 나타내는 것이다(도 8).
That is, Lactococcus lactis subsp. Lactis lactis subsp. lactis) and Lactococcus central Zen system (when compared to the evaluation made with cream cheese Lactococcus chungangensis), ADH activity of Lactococcus Zen Central System (Lactococcus chungangensis) is Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus lactis subsp. lactis ). Lactococcus central Zensys ALDH activity (Lactococcus chungangensis) is Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus lactis subsp. lactis ). Lactococcus Zen Central System (Lactococcus chungangensis) and is easy to use with cream cheese starter ethanol degradable like cream cheese and Lactococcus lactis subspecies lactis (Lactococcus lactis subsp. lactis ) Cream cheese indicates that it can be used as a functional food to help hangover and liver function (FIG. 8).
5. 5. 락토코커스Lactococcus 락티스Lactis 아종 Subspecies 락티스Lactis (( LactococcusLactococcus lactislactis subspsubsp .. lactislactis ) 크림 치즈를 마우스에 경구 투여하여 알코올 및 ) ≪ / RTI > Cream cheeses were orally administered to mice, 아세트알데하이드의Acetaldehyde 농도 측정 Concentration measurement
락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 크림 치즈의 숙취 개선 효능을 확인하기 위하여 흰쥐를 이용하여 혈중 알코올과 아세트알데하이드의 농도를 측정하였다. 도 9에 도시된 바와 같이 혈중 알코올 농도는 음주 후 3시간이 될 무렵 최고치에 도달하였으며, 음주 5시간 뒤 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)로 만든 크림 치즈와 함께 알코올 섭취한 군이 알코올 섭취군에 비하여 23% 혈중 알코올 농도가 감소한 것을 확인하였다. 또한 도 7에 도시된 바와 같이 혈중 아세트알데하이드의 농도는 음주 후 1시간이 될 무렵 최고치에 도달하였으며, 음주 5시간 뒤 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis)로 만든 크림 치즈와 함께 알코올 섭취한 군이 알코올 섭취군에 비하여 14% 혈중 아세트알데하이드 농도가 감소한 것을 확인하였다. 이상의 결과를 볼 때 본 발명에서 락토코커스 락티스 아종 락티스(Lactococcus lactis subsp. lactis) 크림 치즈는 숙취의 주요 원인으로 알려진 혈중 아세트알데하이드의 농도를 감소시킴으로써 알코올 섭취 후 신체에 나타나는 유해한 증상들을 감소시킬 수 있을 것으로 사료되며, 기능성 식품으로 사용 가능함을 보여 주었다.
Lactococcus lactis Lactococcus lactis subsp. lactis ) The concentration of alcohol and acetaldehyde in blood was measured by using rat in order to confirm the improvement effect of hangover of cream cheese. As shown in FIG. 9, the blood alcohol concentration peaked at about 3 hours after drinking, and after 5 hours of drinking, the alcohol concentration of the cream cheese made with Lactococcus lactis subsp. Lactis Group showed a 23% lower blood alcohol concentration than the alcohol - treated group. Also, as shown in FIG. 7, the concentration of acetaldehyde in the blood reached its peak at about 1 hour after drinking, and with the cream cheese made of Lactococcus lactis subsp.
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Menghin Liu 외 3명, ‘Comparative Genomics of Enzymes in Flavor-Forming Pathways from Amino Acids in Lactic Acid Bacteria’, Applied and Enviromental Microbiology 제74권제15호, 4590~4600쪽, 2008년 8월.* |
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