KR101616995B1 - Composition for slimming - Google Patents

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Abstract

본 발명은 인터루킨 17(interleukin-17, IL-17)을 유효성분으로 함유하는 슬리밍용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 슬리밍용 조성물의 유효 성분인 유의적인 지방세포의 분화 억제, 및 분화된 지방세포 내의 지질체 수준 감소를 통해, 우수한 슬리밍 효과를 발휘할 수 있다.The present invention relates to a composition for slimming comprising interleukin-17 (IL-17) as an active ingredient. The slimming effect can be exerted through inhibition of the differentiation of the fat cells, which is an effective ingredient of the composition for slimming according to the present invention, and reduction of lipid levels in differentiated adipocytes.

Description

슬리밍용 조성물{COMPOSITION FOR SLIMMING}COMPOSITION FOR SLIMMING [0002]

본 발명은 슬리밍용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 지방세포의 분화를 억제하거나 또는 지방세포 내의 지질체 수준을 감소시키기 위한 슬리밍용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for slimming, and more particularly, to a composition for slimming to inhibit differentiation of adipocytes or reduce lipid levels in adipocytes.

인터루킨 17(interleukin-17, IL-17)은 세포독성 T-림프구-관련 세린 에스터 레이즈(cytotoxic T-lymphocyte-associated serine esterase 8, CTLA8)로도 알려져 있는 사이토카인의 일종이다.Interleukin-17 (IL-17) is a type of cytokine, also known as cytotoxic T-lymphocyte-associated serine esterase (CTLA8).

한편, 비만 또는 지방종을 비롯한 다양한 질환들이 비정상적인 지방세포 분화 또는 지방세포 내의 지질체 함량과 관련된 것으로 알려져 있다. 이에, 지방세포 분화 및 지방세포 내의 지질체 함량에 대한 연구가 활발히 진행되고 있으며, 지방세포 분화 또는 지방세포 내의 지질체 수준을 효과적으로 조절할 수 있는 인자 또는 물질의 개발이 요구되고 있다.On the other hand, various diseases including obesity or lipomas are known to be related to abnormal lipid differentiation or lipid body content in adipocytes. Accordingly, studies on lipid differentiation and lipid body content in adipocytes have been actively conducted, and development of factors or substances capable of effectively controlling lipid differentiation or lipid level in adipocytes is required.

이에, 본 발명자들은 이러한 인자 또는 물질을 발견하고자 노력하여, IL-17이 중간엽 줄기세포가 지방세포로 분화되는 것을 효과적으로 억제할 뿐 아니라, 이미 분화된 지방세포 내의 지질체 수준을 감소시킬 수 있음을 확인함으로써, 본 발명을 완성하게 되었다.Thus, the present inventors have tried to discover such factors or substances, and have found that IL-17 not only effectively inhibits the differentiation of mesenchymal stem cells into adipocytes, but also reduces lipid levels in already differentiated adipocytes Thereby completing the present invention.

따라서, 본 발명은 상기와 같은 과거로부터 요청되어온 기술적 과제를 해결하는 것을 목적으로 한다.Accordingly, it is an object of the present invention to solve the technical problems requested from the past.

구체적으로, 본 발명의 일실시예에 따른 목적은 지방세포 분화 억제 효과를 발휘하는 인터루킨 17(interleukin-17, IL-17)을 유효성분으로 함유하는 슬리밍용 조성물을 제공하는 것이다.Specifically, an object of an embodiment of the present invention is to provide a composition for slimming comprising interleukin-17 (IL-17), which is effective for inhibiting adipocyte differentiation, as an active ingredient.

본 발명의 또 다른 실시예에 따른 목적은 지방세포 내의 지질체를 감소시킬 수 있는 인터루킨 17을 유효성분으로 함유하는 슬리밍용 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a composition for slimming comprising interleukin 17 as an active ingredient capable of reducing lipid in adipocytes.

이러한 목적을 달성하기 위한 본 발명에 따른 슬리밍용 조성물은 인터루킨 17(interleukin-17, IL-17)을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다.To achieve the above object, the composition for slimming according to the present invention is characterized by containing interleukin-17 (IL-17) as an active ingredient.

본 발명을 통해, 인터루킨 17이 지방세포 분화를 억제하고 지방세포 내의 지질체 수준을 감소시키는 효과를 나타낼 수 있음을 확인할 수 있는 바, IL-17을 유효성분으로 함유하는 본 발명에 따른 조성물은 우수한 슬리밍 효과를 발휘할 수 있다.It is confirmed from the present invention that IL-17 inhibits adipocyte differentiation and reduces lipid levels in adipocytes. Thus, the composition according to the present invention containing IL-17 as an active ingredient has excellent The slimming effect can be exhibited.

도 1 내지 도 4는 본 발명의 일실시예에 따라, IL-17A 또는 IL-17F의 지방세포 분화 억제 효과를 보여주는 현미경 사진 및 그래프들이다;
도 5 내지 도 10은 본 발명의 일실시예에 따라, IL-17A 또는 IL-17F에 의한 IL-17RA 및 IL-17RC mRNA의 발현 변화 및 IL-17A를 처리한 세포에서 PPARγ, FABP4 및 아디포넥틴 각각의 mRNA 발현 수준을 보여주는 결과를 나타내는 그래프들이다;
도 11 및 도 12는 본 발명의 일실시예에 따라, IL-17A의 지방세포 분화 억제효과를 안티-IL-17A를 통해 관찰한 결과를 나타내는 그래프들이다;
도 13 내지 도 15는 본 발명의 일실시예에 따라, 지방세포 내의 지질체 수준을 정량적으로 측정한 결과를 나타내는 현미경 사진 및 그래프들이다;
도 16 내지 도 19는 본 발명의 일실시예에 따라, IL-17A가 분화된 지방세포에서 IL-6 및 IL-8 유전자의 발현을 조절하는지 여부를 평가한 결과를 나타내는 그래프들이다;
도 20은 본 발명의 일실시예에 따라, 1개월 간 고지방식을 섭취하여 비만을 유도한 C57BL/6 생쥐의 오른쪽 부고환지방조직에 IL-17A를 주사한 지 7일 후, 부고환지방조직 질량을 측정하였을 때, 지방조직 감소를 보여준 결과이다.
FIGS. 1 to 4 are micrographs and graphs showing the effect of inhibiting adipocyte differentiation of IL-17A or IL-17F, according to one embodiment of the present invention;
5 to 10 are graphs showing changes in the expression of IL-17RA and IL-17RC mRNA by IL-17A or IL-17F and the expression of PPARgamma, FABP4 and adiponectin in cells treated with IL-17A according to an embodiment of the present invention Lt; RTI ID = 0.0 > mRNA < / RTI >
FIGS. 11 and 12 are graphs showing the results of observing the inhibitory effect of IL-17A on adipocyte differentiation through anti-IL-17A, according to an embodiment of the present invention;
FIGS. 13 to 15 are photomicrographs and graphs showing the results of quantitative measurement of lipid levels in adipocytes, according to one embodiment of the present invention;
16 to 19 are graphs showing the results of evaluating whether IL-17A regulates the expression of IL-6 and IL-8 genes in differentiated adipocytes, according to an embodiment of the present invention;
FIG. 20 is a graph showing the relationship between the amount of epididymal adipose tissue mass and the number of epididymal adipose tissues after 7 days of injecting IL-17A into the right epididymal adipose tissue of C57BL / 6 mice in which obesity was induced by consuming one month of high fat diet according to an embodiment of the present invention When measured, it showed a decrease in adipose tissue.

본 발명에서 사용되는 용어 '슬리밍'은 비만의 경감 또는 방지 뿐 아니라, 지방 조직의 증가와 관련된 질병의 예방 또는 치료, 미용 또는 성형 목적의 체중 감소, 또는 지방 조직의 증가로 인한 몸의 탄력 감소, 굴곡있는 몸 상태의 형성을 경감시키거나 또는 방지함으로써 만들어진 몸의 탄력 있고, 매끈한 피부 상태를 모두 포함하는 광범위한 의미로, 상기 목적에 반하지 않는다면, 특별히 제한되지 않는다.The term " slimming " as used in the present invention is intended to include not only alleviation or prevention of obesity but also prevention or treatment of diseases associated with an increase in fat tissue, weight loss for cosmetic or plastic purposes, And is not particularly limited as long as it does not violate the above object in a broad sense including all the elastic and smooth skin conditions of the body made by alleviating or preventing the formation of the bending body state.

본 출원의 발명자들은 인터루킨 17(interleukin-17, IL-17), 그 중에서도 IL-17A 및 IL-17F로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 조성물의 유효성분으로 함유하는 경우, 중간엽 줄기세포에서 지방 세포로의 분화를 억제시킬 수 있고, 이미 분화가 완료된 지방세포에서는 지질체(lipid droplet) 수준을 감소시킬 수 있음을 확인하였다.When the inventors of the present application include at least one selected from the group consisting of interleukin-17, IL-17, IL-17A and IL-17F as an active ingredient of the composition, And lipid droplet levels in the fat cells that have already been differentiated can be reduced.

상기 인터루킨 17은 사람의 섬유아세포에서 조혈계의 분화에 영향을 주는 것으로 알려져 있는 사이토카인인, 인터루킨 6(interleukin 6, IL-6), 인터루킨 8(interleukin 8, IL-8) 및 과립구 콜로니 자극 인자(granulocyte colony stimulating factor, G-CSF) 등의 발현을 증가시키는 것으로 알려져 있다(Yao et al., Human IL-17: a novel cytokine derived from T cells. J. Immun. 155: 5483-5486, 1995). 또한, 인터루킨 17은 알러지 반응과 관련이 있는 T 세포성 면역반응을 조절하는 역할을 하는데, 이는 IL-17이 결핍된 생쥐를 사용한 실험으로부터 입증되었다(Nakae et al., Suppression of immune Induction of collagen-induced arthritis in IL-17-deficient mice. J. Immun. 171: 6173-6177, 2003). 뿐만 아니라, IL-17은 관절염의 발병에도 영향을 주는 것으로 추정되고 있는데, 이는 IL-17이 결핍된 생쥐에서 콜라겐에 의한 관절염 유도가 일어나지 않는 현상이 보고되었기 때문이다(Nakae et al., IL-17 production from activated T cells is required for the spontaneous development of destructive arthritis in mice deficient in IL-1 receptor antagonist. Proc. Nat. Acad. Sci. 100: 5986-5990, 2003). 특히, IL-17은 IL-17이 골관절염(osteoarthritis) 환자에 비해 류마티스성 관절염 환자의 관절 활액(synovial fluid)에서 더 높은 농도로 존재하는 것으로 보고되어 있기 때문에, 류마티스성 관절염의 발병과 밀접하게 관련되어 있을 것으로 추정된다(Kotake et al., IL-17 in synovial fluids from patients with rheumatoid arthritis is a potent stimulator of osteoclastogenesis. J. Clin. Invest. 103: 1345-1352, 1999).Interleukin-17 is a cytokine, interleukin 6, IL-6, interleukin 8, IL-8, and granulocyte colony stimulating factor, which are known cytokines that affect the differentiation of hematopoietic system in human fibroblasts (IL-17: a novel cytokine-derived T cells, J. Immun. 155: 5483-5486, 1995), which is known to increase the expression of granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) . In addition, interleukin 17 plays a role in regulating T-cell-mediated immune responses that are associated with allergic responses, which has been demonstrated from experiments using mice deficient in IL-17 (Nakae et al., Suppression of immune Induction of collagen- induced arthritis in IL-17-deficient mice. J. Immun. 171: 6173-6177, 2003). In addition, IL-17 is also thought to affect the onset of arthritis, as IL-17 deficient mice have been reported to be less likely to induce collagen-induced arthritis (Nakae et al., IL- 17 production from activated T cells is required for the spontaneous development of destructive arthritis in mice deficient in IL-1 receptor antagonist Proc Nat. Acad Sci., 100: 5986-5990, 2003). In particular, IL-17 has been reported to be associated with the onset of rheumatoid arthritis because IL-17 is reported to be present at a higher concentration in the synovial fluid of patients with rheumatoid arthritis compared to patients with osteoarthritis (Kotake et al., IL-17 in synovial fluids from patients with rheumatoid arthritis is a potent stimulator of osteoclastogenesis, J. Clin. Invest. 103: 1345-1352, 1999).

이러한 많은 연구들에도 불구하고, 인터루킨 17(IL-17)을 유효 성분으로 하는 조성물의 경우, 우수한 슬리밍 효과를 발휘할 수 있음은 보고된 바 없다.Despite these many studies, it has not been reported that a composition containing IL-17 (IL-17) as an active ingredient can exert an excellent slimming effect.

상기 인터루킨 17은 예를 들어, IL-17A, IL-17B, IL-17C, IL-17D, IL-17E 및 IL-17F로 이루어진 인터루킨 17군에서 선택된 하나 이상을 포함할 수 있으나, 하기 실험예를 통해 입증된 바와 같이 IL-17A 및 IL-17F로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상, 그 중에서도 IL-17A를 유효 성분으로 하는 조성물이 특히 우수한 슬리밍 효과를 발휘할 수 있다.The interleukin 17 may include one or more selected from the group consisting of IL-17A, IL-17B, IL-17C, IL-17D, IL-17E and IL-17F. A composition comprising at least IL-17A and IL-17F selected from the group consisting of IL-17A and IL-17A as an active ingredient can exert an especially excellent slimming effect.

하나의 실시예에서, 상기 조성물은 유효 성분으로 포함된 인터루킨 17 그 중에서도, IL-17A 또는 IL-17F에 의해 지방세포의 분화를 억제시키는 것일 수 있으며, 이에 따라 본 발명에 따른 조성물은 지방조직의 비대화와 관련된 질환을 예방 또는 치료하거나, 미용 또는 성형을 위한 지방 조직 감소 효과를 나타낼 수 있다. 상기 지방조직의 비대화와 관련된 질환은 특별히 제한되지 않으나, 예를 들어 비만 및 지방종(lipoma)일 수 있다,In one embodiment, the composition may be one that inhibits the differentiation of adipocytes by IL-17A or IL-17F, among which interleukin 17 as an active ingredient, Preventing or treating diseases associated with hypertrophy, or exhibiting an effect of reducing fat tissue for cosmetic or cosmetic purposes. The disease associated with hypertrophy of the adipose tissue is not particularly limited, but can be, for example, obesity and lipoma,

상기 IL-17A 또는 IL-17F가 지방세포의 분화를 억제할 수 있음은 하기 실험예를 통해 입증된 바와 같이, IL-17A 또는 IL-17F를 처리한 지방세포의 분화 과정에서 PPARγ(peroxisome proliferator activating receptort γ) mRNA, FABP4(fatty acid binding protein 4) mRNA 및 아디포넥틴(adiponectin) mRNA로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 지방세포 관련 유전자의 발현 수준 감소를 통해서도 확인할 수 있으며, 이는 IL-17A 또는 IL-17F에 의해 지방세포의 분화가 효과적으로 억제될 수 있음을 의미하는 것일 수 있다.The ability of the IL-17A or IL-17F to inhibit the differentiation of adipocytes can be confirmed by the following experimental examples. In the differentiation of adipocytes treated with IL-17A or IL-17F, PPARgamma (peroxisome proliferator activating 17A or IL-17F, which is expressed by a decrease in the expression level of at least one adipocyte-related gene selected from the group consisting of adiponectin mRNA, FABP4 (fatty acid binding protein 4) mRNA and adiponectin mRNA. Lt; RTI ID = 0.0 > differentiation < / RTI > of adipocytes can be effectively inhibited.

상기 지방세포 분화는 동물, 바람직하게는 포유동물의 지방전구세포 또는 중간엽 줄기세포가 지방세포로 분화되는 것일 수 있으며, 보다 바람직하게는 인간의 중간엽 줄기세포가 지방세포로 분화되는 것일 수 있다.The adipocyte differentiation may be that an adipose precursor cell or mesenchymal stem cell of an animal, preferably a mammal, is differentiated into an adipocyte, more preferably a mesenchymal stem cell of a human is differentiated into an adipocyte .

상기 중간엽 줄기세포는 피하 조직 등에서 채취한 지방전구세포를 완전한 지방세포로 분화시키는 방법과 거의 유사한 방법을 이용하여 지방세포로 분화시킬 수 있기 때문에, 지방세포 분화 연구에 널리 이용되고 있으며, 지방세포로 분화될 수 있는 중간엽줄기세포는 신체의 대부분의 조직에 분포되어 있으며, 지방세포뿐만 아니라 연골세포 또는 뼈세포 등의 다른 유형의 세포로도 분화될 수 있다고 알려져 있는 중간엽 줄기세포는 그것이 어느 조직으로부터 유래한 것인지에 따라, 그 성질 또는 특성에 있어서 미세한 차이가 있으나, 일반적으로 유사한 성질 또는 특성을 가지며 구체적으로, 상기 중간엽 줄기세포는 가장 바람직하게는 인간의 골수로부터 유래한 중간엽 줄기세포일 수 있다.The mesenchymal stem cells are widely used in the study of adipocyte differentiation because they can be differentiated into adipocytes by almost the same method as the method of differentiating the adipocyte precursor cells collected from subcutaneous tissues into complete adipocytes. The mesenchymal stem cells, which are known to be able to differentiate into other types of cells such as chondrocytes or bone cells as well as adipocytes, are distributed in most tissues of the body. The mesenchymal stem cells are most preferably similar to the mesenchymal stem cells derived from the human bone marrow. The term " mesenchymal stem cells " .

하나의 실시예에서, 상기 조성물은 분화된 지방세포 내 지질체(lipid droplet)의 크기 및 수를 감소시키는 것일 수 있다. 하기 실험예를 통해 입증된 바와 같이, 글리세롤 농도를 측정하여 IL-17, 그 중에서도 IL-17A 처리에 대한 지질체의 수준 및 지질분해 정도를 측정한 결과, 지질체의 크기 및 숫자가 줄어드는 것을 확인하였으며, 지방세포의 지질분해 역시 현저하게 증가됨을 확인하였다.In one embodiment, the composition may be one that reduces the size and number of lipid droplets in differentiated adipocytes. As demonstrated by the following experimental examples, the level of lipid and the degree of lipid degradation of IL-17, especially IL-17A, were measured by measuring glycerol concentration. As a result, it was confirmed that the size and number of lipid bodies were reduced And lipid degradation of adipocytes was also significantly increased.

본 발명에 따른 슬리밍용 조성물은 예를 들어, 화장료 조성물, 건강식품 조성물 또는 약학 조성물로 제형화될 수 있다.The composition for slimming according to the present invention can be formulated into, for example, a cosmetic composition, a health food composition or a pharmaceutical composition.

상기 슬리밍용 화장료 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으나, 예를 들어, 유연화장수, 영양화장수, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤, 바디로션, 바디크림, 바디오일 또는 바디 에센스의 형태로 제형화될 수 있으며, 각 제형의 화장료 조성물은 상기 IL-17A 또는 IL-17F 이외의 다른 성분들을 제형 또는 사용 목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.The composition of the slimming cosmetic composition is not particularly limited and may be in the form of a softening agent, a nutritional lotion, a nutrition lotion, a massage cream, a nutritional cream, a pack, a gel, a body lotion, a body cream, a body oil or a body essence And the cosmetic composition of each formulation can be mixed with other ingredients other than IL-17A or IL-17F without difficulty by those skilled in the art depending on the purpose of formulation or use.

상기 슬리밍용 건강식품 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으나, 예를 들어, 정제, 과립제, 드링크제, 캬라멜, 다이어트바 등으로 제형화될 수 있다. 각 제형의 건강식품 조성물은 상기 IL-17A 또는 IL-17F 이외에 해당 분야에서 통상적으로 사용되는 성분들을 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승 효과가 일어날 수 있다.The formulation for the slimming health food composition is not particularly limited, but may be formulated into, for example, tablets, granules, drinks, caramels, diet bars and the like. The health food composition of each formulation may be formulated by those skilled in the art without difficulty, depending on the purpose of formulation or use, in addition to the IL-17A or IL-17F described above. If the composition is applied simultaneously with other ingredients A synergistic effect can occur.

상기 슬리밍용 약학 조성물은 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 약제학적 보조제 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 다양한 경구 또는 비경구 투여 형태로 제형화할 수 있다.The pharmaceutical composition for slimming may further contain a preservative, a stabilizer, a wetting agent or an emulsifying accelerator, a pharmaceutical adjuvant such as a salt and / or a buffer for controlling osmotic pressure, and other therapeutically useful substances, May be formulated in a variety of oral or parenteral dosage forms.

경구 투여용 제형으로는 예를 들면, 정제, 환제, 경질 및 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및 폴리에틸렌 글리콜)를 함유하고 있다. 정제는 또한 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제, 흡수제, 착색제, 향미제, 및 감미제 등의 약제학적 첨가제를 함유할 수 있다. 정제는 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다.Examples of the formulations for oral administration include tablets, pills, hard and soft capsules, liquids, suspensions, emulsions, syrups, granules, etc. These formulations may contain, in addition to the active ingredient, a diluent such as lactose, dextrose, Sucrose, mannitol, sorbitol, cellulose and glycine), lubricants (e.g., silica, talc, stearic acid and magnesium or calcium salts thereof, and polyethylene glycols). Tablets may also contain binders such as magnesium aluminum silicate, starch paste, gelatin, tragacanth, methylcellulose, sodium carboxymethylcellulose and polyvinylpyrrolidine, optionally mixed with starch, agar, alginic acid or its sodium salt Such as disintegrants, absorbents, coloring agents, flavoring agents, and sweetening agents. Tablets can be prepared by conventional mixing, granulating or coating methods.

또한, 비경구 투여용 제형의 대표적인 것은 주사용 제형으로 등장성 수용액 또는 현탁액이 바람직하다. 상기 비경구 투여용 제형의 경우 0.00001 mg/kg 내지 0.01 mg/kg, 바람직하게는 0.00001 mg/kg 내지 0.001 mg/kg를 비경구적 경로 또는 지방조직이 있는 부위에 국소적으로 투여될 수 있다.In addition, a representative aqueous solution for parenteral administration is preferably an isotonic aqueous solution or suspension in a form of injection. In the case of the parenteral administration form, 0.00001 mg / kg to 0.01 mg / kg, preferably 0.00001 mg / kg to 0.001 mg / kg, can be administered locally to a site having a parenteral route or adipose tissue.

상기 유효 성분의 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 0.001mg/kg/일 내지 2000mg/kg/일, 바람직하게는 0.5mg/kg/일 내지 2.5mg/kg/일이다. 그러나 실제 투여량은 증상의 중증도, 선택된 투여 경로, 대상의 연령, 성별, 체중 및 건강상태 등의 여러 관련 인자에 맞춰 결정되어야 하는 것으로 이해되어야 하며, 따라서 상기 투여량은 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하지 않는다.The dosage of the active ingredient is within the level of those skilled in the art. Generally, the dosage is 0.001 mg / kg / day to 2000 mg / kg / day, preferably 0.5 mg / kg / day to 2.5 mg / kg / day. However, it should be understood that the actual dosage should be determined in accordance with various relevant factors such as the severity of the symptoms, the route of administration chosen, the age, sex, weight and health status of the subject, It does not limit the scope.

또한, 상기 유효 성분으로 사용되는 IL-17A 또는 IL-17F은 조성물 총 중량에 대해서 0.001 ∼ 100 중량%의 양으로 함유되는 것이 바람직하며, 유효 성분이 조성물 총 중량에 대해서 100 중량%의 양으로 함유되는 경우, IL-17A 또는 IL-17F가 슬리밍 효과를 나타내기에 적절한 형태로 유지되어, 단백질 그 자체가 슬리밍용 조성물에 사용될 수 있음을 의미한다.In addition, IL-17A or IL-17F used as the active ingredient is preferably contained in an amount of 0.001 to 100% by weight based on the total weight of the composition, and the active ingredient is contained in an amount of 100% , IL-17A or IL-17F is maintained in a form suitable for exhibiting a slimming effect, meaning that the protein itself can be used in a composition for slimming.

상기 IL-17은 특별하게 제한되지 않으나, 포유동물, 보다 바람직하게는 인간으로부터 유래된 것일 수 있으며, 재조합 기법에 의해 제조된 재조합 IL-17이거나 또는 정제된 천연 IL-17일 수 있고, 가장 바람직하게는 ⅰ) 서열번호: 1의 아미노산 서열; ⅱ) 서열번호 1의 아미노산 서열의 단편으로서, 서열번호: 1과 동일한 슬리밍 활성을 보유한 단편; 또는 ⅲ) 서열번호 1의 아미노산 서열의 변이체로서, 서열번호: 1의 서열과 95% 이상의 상동성을 가지며, 서열번호: 1과 동일한 슬리밍 활성을 보유한 변이체를 포함하는 IL-17일 수 있다.The IL-17 may be, but is not limited to, a mammal, more preferably a human, and may be recombinant IL-17 produced by recombinant techniques, or purified natural IL-17, I) an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1; Ii) a fragment of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, having the same slimming activity as SEQ ID NO: 1; Or iii) a variant of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, which has 95% or more homology with the sequence of SEQ ID NO: 1, and which has the same slimming activity as SEQ ID NO: 1.

본 명세서에서 사용되는 "단편"은 슬리밍 활성을 보유한 것을 의미하며, 이와 같은 단편들은 알려진 효소 절단에 의해 또는 재조합 기술에 의해 생산될 수 있다.As used herein, "fragment" means having a slimming activity, and such fragments may be produced by known enzyme cleavage or by recombinant techniques.

본 명세서에서 사용되는 "변이체"는 아미노산의 상보성이 적어도 하나 이상의 아미노산이 변경된 아미노산을 의미한다. 당업자는 본 명세서에 기재된 아미노산들의 변이체들을 제조 및 테스트함으로써 슬리밍 활성을 보유한 IL-17에 특이적으로 결합하여 슬리밍 활성을 보유하는 것으로 판별된 모든 변이체들이 본 발명의 범위 내에 속한다는 것을 이해할 것이다.As used herein, "variant" means an amino acid in which the complementarity of an amino acid is altered by at least one or more amino acids. Those skilled in the art will appreciate that all variants determined to possess slimming activity by specifically binding to IL-17 having slimming activity by producing and testing variants of the amino acids described herein are within the scope of the present invention.

상기 변이체들에는 아미노산 서열의 전반적인 분자 구조를 보존하는 변이체들도 포함된다. 개별 아미노산들의 성질들에 대한 정보가 주어진다면, 당업자들은 몇몇 합리적인 치환들을 인식하게 될 것이다. 이러한 보존적 치환들은 예컨대, 관련된 잔기들의 극성, 전하, 용해도, 소수성, 친수성 및/또는 양친매성을 기초로 하여 수행될 수 있다. 예를 들어, 아미노산은 극성에 따라 무극성(소수성) 아미노산, 극성 중성 아미노산, 양극 대전된 (염기성) 아미노산, 음극 대전된 (산성) 아미노산으로 분류될 수 있다. 무극성 (소수성) 아미노산들에는 알라닌, 루신, 이소루신, 발린, 프롤린, 페닐알라닌, 트립토판 및 메티오닌을 포함된다. 극성 중성 아미노산들에는 글리신, 세린, 트레오닌, 시스테인, 티로신, 아스파라긴 및 글루타민이 포함된다. 양극 대전된 (염기성) 아미노산들은 아르기닌, 리신, 및 히스티딘이 포함된다. 그리고, 음극 대전된 (산성) 아미노산들에는 아스파르트산 및 글루타민산이 포함된다. 상기 각 그룹 내에서는 치환들이 통상적으로 이루어질 수 있다.Such variants also include variants that preserve the overall molecular structure of the amino acid sequence. Given information about the properties of individual amino acids, one of ordinary skill in the art will recognize some reasonable substitutions. Such conservative substitutions can be performed, for example, on the basis of the polarity, charge, solubility, hydrophobicity, hydrophilicity and / or amphipathic nature of the related residues. For example, amino acids can be classified into nonpolar (hydrophobic) amino acids, polar neutral amino acids, bipolar charged (basic) amino acids, and negatively charged (acidic) amino acids, depending on the polarity. Non-polar (hydrophobic) amino acids include alanine, leucine, isoleucine, valine, proline, phenylalanine, tryptophan and methionine. Polar neutral amino acids include glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine, asparagine, and glutamine. Bipolar charged (basic) amino acids include arginine, lysine, and histidine. The negatively charged (acidic) amino acids include aspartic acid and glutamic acid. Within each of the above groups, substitutions can be made conventionally.

본 명세서에 개시된 "서열"은 본 명세서에 기재된 아미노산을 인코딩하는 서열번호 1의 서열 뿐 아니라, 이들의 변이체를 포함할 수 있다. 상기 "변이체"는 80% 이상의 서열 상동성을 가지는 것일 수 있다. 또한, 90% 이상 또는 95% 이상의 서열 상동성을 가지는 것일 수 있다. 상기와 같은 상동성을 갖는 변이체 중에서 매우 높은 엄격한 조건 하에서도 혼성화가 일어나는 변이체들을 포함한다."Sequence" disclosed herein may include sequences of SEQ ID NO: 1 encoding the amino acids described herein, as well as variants thereof. The "variant" may have a sequence homology of 80% or more. In addition, it may have 90% or more or 95% or more of the sequence homology. Among such mutants having the above homology, there are variants in which hybridization occurs even under very high stringency conditions.

이하, 하기 실시예에 의하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 범위가 이들만으로 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, the following examples are intended to illustrate the present invention, but the scope of the present invention is not limited thereto.

[실험예 1] 인간의 골수 중간엽 줄기세포의 지방세포 분화에 대한 IL-17의 효과[Experimental Example 1] Effect of IL-17 on adipocyte differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells

인간 골수 중간엽 줄기세포(human bone marrow mesenchymal stem cells, hBM-MSCs)를 론자사(Lonza, Inc. Walkersville, MD, USA)에서 구입하여 론자사의 지침서에 따라 배양하였다. 보다 구체적으로, 인간 골수 중간엽 줄기세포(human bone marrow mesenchymal stem cells, hBM-MSCs)를 10% 우혈청 (fetal bovine serum), 1% 페니실린/스트렙토마이신 및 1% 글루타맥스(glutamax)를 포함하는 낮은 농도의 포도당(1g/L) 배양액(Dulbecco modified eagle's medium (DMEM))(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)에서 배양하였다. 배양 접시 내의 세포 밀도가 100%에 이르게 되면, 지방세포로 분화시키는 조건으로 바꿔주었다. 인간 골수 중간엽 줄기세포의 배양액(높은 농도의 포도당 (4.5g/L) 배양액)에 인슐린 1㎍/ml, 데사메타손(Dexamethasone, DEXA) 1μM, 3-이소부틸-1-메틸잔틴(3-isobutyl-1-methylxanthine, IBMX) 0.5mM 및 트로글리타존(troglitazone, T)(이하, IDXT라 함)을 넣고, 인간 골수 중간엽 줄기세포를 14일 동안 지방세포로 분화시켰다.Human bone marrow mesenchymal stem cells (hBM-MSCs) were purchased from Lonza, Inc. (Walkersville, MD, USA) and cultured according to Lonza's guidelines. More specifically, human bone marrow mesenchymal stem cells (hBM-MSCs) were treated with 10% fetal bovine serum, 1% penicillin / streptomycin and 1% glutamax (Invitrogen, Carlsbad, Calif., USA) in a low glucose (1 g / L) medium (Dulbecco's modified eagle's medium (DMEM) When the cell density in the culture dish reached 100%, the conditions for differentiating into adipocytes were changed. 1 μg / ml of insulin, 1 μM of Dexamethasone (DEXA), and 1 μM of 3-isobutyl-1-methylxanthine (3- 0.5 mg of isobutyl-1-methylxanthine, IBMX) and troglitazone (T) (hereinafter referred to as IDXT), and human bone marrow mesenchymal stem cells were differentiated into adipocytes for 14 days.

한편, 실험군의 경우, 지방세포 분화 유도시에 IDXT와 25 ng/ml의 IL-17A, IL-17F 또는 IL-22을 배지에 더 첨가하여, 15일 동안 처리하였으며, 중간엽 줄기세포의 지방세포 분화를 시작한지 15일 후, 세포 배양액을 제거하고, 10 ml의 인산염 완충액(Phosphate Buffered Saline, PBS)으로 세포를 세척한 후, 10% 포르말린/PBS 용액 0.2 ml/cm2을 사용하여 세포를 10분간 고정시켰다. 고정된 세포를 60% 이소프로판올 용액 0.5 ml/cm2로 1회 세척하고, 오일레드오(Oil Red O)를 60% 이소프로판올에 녹인 염색액 0.2 ml/cm2로 10분간 지방세포 내의 지질체를 염색하였다. 이어서, 헤마톡실린(hematoxylin)으로 재염색을 행하여 세포핵을 쉽게 구분되도록 한 후 현미경으로 관찰하였으며, IDXT를 단독으로 처리한 대조군(control)과의 비교 결과를 도 1에 나타내었다.In the experimental group, IDXT and 25 ng / ml of IL-17A, IL-17F or IL-22 were added to the medium for induction of adipocyte differentiation and treated for 15 days. After 15 days from the start of differentiation, the cell culture medium was removed, and the cells were washed with 10 ml of phosphate buffer (PBS). Cells were washed with 10% formalin / PBS solution (0.2 ml / cm 2) Lt; / RTI > The fixed cells were washed once with a 60% isopropanol solution (0.5 ml / cm 2 ), and the lipid in the adipocyte was stained with 0.2 ml / cm 2 of a dye solution obtained by dissolving Oil Red O in 60% isopropanol Respectively. Subsequently, re-staining with hematoxylin was carried out to easily distinguish the nucleus. The result was observed with a microscope and the result of comparison with a control (control) treated with IDXT alone is shown in FIG.

또한, 지방세포 분화 정도를 측정하기 위해, 지방세포를 오일레드오로 염색한 후, 염색된 오일레드오를 100% 이소프로판올 용액으로 용출시킨 후 500 나노미터(nm)의 파장에서 흡광도를 측정하여 도 2에 나타내었다.In order to measure the degree of differentiation of adipocytes, the adipocytes were stained with Oil Red Oto, and then the dyed oil red oe was eluted with a 100% isopropanol solution. Then, the absorbance was measured at a wavelength of 500 nanometers (nm) Respectively.

도 1 및 2를 참조하면, IDXT를 단독으로 처리한 대조군과 비교하여, IL-17A 또는 IL-17F이 분화를 각각 77.6 % 및 45.6 %정도로 억제할 수 있음을 확인하였으나, 25 ng/mL IL-22를 함께 처리한 군은 통계적으로 중요한 지방세포 분화 억제 효과가 나타나지 않았다.1 and 2, it was confirmed that IL-17A or IL-17F can inhibit the differentiation to 77.6% and 45.6%, respectively, as compared with the control group treated with IDXT alone. However, when 25 ng / mL IL- 22 did not show statistically significant inhibitory effect on adipocyte differentiation.

IL-17의 다른 사이토카인(cytokine) 군의 지방세포 분화 억제 효과를 측정하여, 도 3에 나타내었다.The inhibitory effect of different cytokines of IL-17 on adipocyte differentiation was measured and shown in Fig.

도 3을 참조하면, IL-17A 및 IL-17F와 달리 IDXT를 단독 처리한 대조군과 비교하여, IL-17B, IL-17C, IL-17D 또는 IL-17E은 특별한 분화 억제 효과가 나타나지 않음을 확인하였다.As shown in FIG. 3, IL-17B, IL-17D or IL-17E did not exhibit a specific inhibitory effect in comparison with IL-17A and IL-17F, Respectively.

이후, IL-17A가 농도 의존적으로 분화 억제 효과를 나타내는지 여부를 확인하였으며, 그 결과를 도 4에 나타내었다.Thereafter, it was confirmed whether or not IL-17A showed a concentration-dependent inhibition of differentiation, and the results are shown in FIG.

도 4를 참조하면, IDXT와 25, 5 또는 1 ng/mL의 IL-17A은 각각 IDXT를 단독 처리한 대조군과 비교하여, 81.9, 75.6 또는 46.2 %로 억제함을 확인하였으며, 이는 IL-17A가 농도 의존적으로 지방세포 분화를 억제시킴을 나타내는 결과이다.4, IDXT and IL-17A of 25, 5 or 1 ng / mL were inhibited to 81.9, 75.6 or 46.2%, respectively, as compared with the control group treated with IDXT alone, indicating that IL-17A And thus inhibits adipocyte differentiation in a concentration-dependent manner.

[실험예 2] IL-17A가 IL-17RC 및 IL-17RA의 전사(transcription) 수준에 영향을 미치는지 여부[Experimental Example 2] Whether IL-17A affects the transcription level of IL-17RC and IL-17RA

실시예 1에 기재된 방법과 동일한 방법으로 지방세포로의 분화를 유도한 인간의 골수 중간엽 줄기세포에 IL-17을 1 ng/ml 농도로 7일간 처리한 후, 트리졸 시약(Trizol reagent, Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)을 사용하여 세포 내의 RNA를 분리하였다. 분리된 RNA를 키아젠사의 RNA 키트(Qiagen RNeasy kit, Qiagen, Valencia, CA)로 한번 더 정제한 후, 애질런트사의 바이오어낼라이저 2100 모델 기기(Agilent 2100 BioAnalyzer, Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA)를 사용하여 RNA의 질(quality)을 확인하였다. 인비트로젠사의 역전사키트(Superscript Reverse Transcriptase (RT) Ⅱ kit, Invitrogen, Carlsbad, CA)를 이용하여 상기 RNA로부터 cDNA를 합성하였고, 이를 실시간역전사중합효소연쇄반응(real time-reverse transcription polymerase chain reaction, Q-RT-PCR)으로 정량적으로 분석하였다. IL-17A 및 IL-17F 시그널링(signaling)에서 중요한 역할을 수행하는 것으로 알려진, 지방세포 분화의 초기 단계에 IL-17A에 의해 유도되는 막전위 수용체단백질(transmembrane receptor protein)인 IL-17RA 및 IL-17RC mRNA의 발현 변화가 있는지 여부를 측정하여 플라이드바이오시스템사의 택맨유전자발현시스템(TaqMan® gene expression assay kit, Applied Biosystems, Foster City, CA)을 이용하여 평가하였으며, 그 결과를 도 5 및 6에 나타내었다.IL-17 was treated at a concentration of 1 ng / ml for 7 days in human bone marrow mesenchymal stem cells that induced differentiation into adipocytes by the same method as described in Example 1, and then treated with triazol reagent (Trizol reagent, Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). The separated RNA was further purified with an RNA kit (Qiagen RNeasy kit, Qiagen, Valencia, Calif.) From Agilent Technologies, Inc. (Agilent 2100 BioAnalyzer, Agilent Technologies, Santa Clara, Calif. Were used to confirm the quality of the RNA. Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was performed using the reverse transcription kit (Invitrogen, Carlsbad, Calif.) Of Invitrogen. Q-RT-PCR). IL-17RA and IL-17RC, which are transmembrane receptor proteins induced by IL-17A at early stages of adipocyte differentiation, are known to play an important role in IL-17A and IL-17F signaling, (TaqMan gene expression assay kit, Applied Biosystems, Foster City, Calif.). The results were shown in FIGS. 5 and 6 .

도 5를 참조하면, 지방세포로 분화하지 않은 인간 골수 중간엽 줄기세포 및 지방세포로 분화된 인간 골수 중간엽 줄기세포 모두에서 IL-17RA 및 IL-17RC mRNA발현량은 증가하였음을 확인할 수 있다. 그러나, 분화를 유도한지 5일 이후, 분화되지 않은 대조군의 IL-17RA mRNA, IDXT 처리된 분화된 인간 골수 중간엽 줄기세포 및 IDXT 존재하에 IL-17A 처리된 세포 사이에 특별한 차이가 없는 것을 확인하였다.FIG. 5 shows that IL-17RA and IL-17RC mRNA expression levels were increased in both human myelinated mesenchymal stem cells differentiated into adipocytes and human myelinated mesenchymal stem cells differentiated into adipocytes. However, after 5 days of inducing differentiation, there was no specific difference between IL-17 RA mRNA in the non-differentiated control, differentiated human myeloid mesenchymal stem cells treated with IDXT, and IL-17A treated cells in the presence of IDXT .

한편, 도 6을 참조하면, 분화되지 않은 대조군에 비해 IDXT 처리된 세포에서 IL-17RC의 유전자는 2배 이상 발현이 증가함을 확인하였다. 이를 통해, IL-17RC mRNA의 발현 수준은 IL-17A의 존재에 현저한 영향을 받음을 확인하였다.6, the expression of IL-17RC gene was more than 2-fold higher in IDXT-treated cells than in the non-differentiated control group. This confirms that the expression level of IL-17RC mRNA is significantly affected by the presence of IL-17A.

또한, IL-17A에 대한 하기 지방세포 관련 유전자의 발현 패턴 변화를 플라이드바이오시스템사의 택맨유전자발현시스템(TaqMan® gene expression assay kit, Applied Biosystems, Foster City, CA)을 이용하여 평가하였으며, 그 결과를 도 7 내지 9에 나타내었다: 렙틴(Hs00174877_ml), 렙틴수용체(Hs00174497_ml), 아디포넥틴(adiponectin Hs00605917_ml), FABP4(fatty acid binding protein 4: Hs00609791_ml), PPARγ(peroxisome proliferator activating receptor γ: Hs00233423_ml).In addition, changes in the expression pattern of the adipocyte-related gene on IL-17A were evaluated using a TaqMan gene expression assay kit (Applied Biosystems, Foster City, Calif.) Of Fried Biosystems, Inc. Are shown in FIGS. 7 to 9: leptin (Hs00174877_ml), leptin receptor (Hs00174497_ml), adiponectin Hs00605917_ml, FABP4 (fatty acid binding protein 4: Hs00609791_ml), PPARγ (peroxisome proliferator activating receptor γ: Hs00233423_ml).

도 7 내지 9를 참조하면, 지방세포 분화를 시작한 지 5일 후, IDXT 대조군에 비하여 IDXT 및 IL-17A를 함께 처리한 세포에서 PPARγ, FABP4 및 아디포넥틴은 mRNA 발현 수준이 현저하게 감소함을 확인할 수 있다.7 to 9, it was confirmed that mRNA expression levels of PPARγ, FABP4, and adiponectin were significantly decreased in cells treated with IDXT and IL-17A 5 days after the start of adipocyte differentiation compared to IDXT control have.

도 10을 참조하면, Q-RT-PCR 분석에 사용된 동일한 세포 배양액에 IL-17A을처리하는 경우, IDXT만을 처리한 군과 비교하여 아디포넥틴 단백질 분비가 현저하게 감소한 것을 확인할 수 있다.10, when IL-17A was treated with the same cell culture medium used for Q-RT-PCR analysis, adiponectin protein secretion was remarkably reduced compared to the group treated with IDXT alone.

[실험예 3] 인간 골수 중간엽 줄기세포에 대한 IL-17A의 효과를 안티-IL-17A(Anti-IL-17A)가 중성화(neutralize)시키는지 여부 확인[Experimental Example 3] Confirmation of whether the effect of IL-17A on human bone marrow mesenchymal stem cells is neutralized by Anti-IL-17A

안티-IL-17A가 인간 골수 중간엽 줄기세포에 대한 IL-17A의 분화 억제 효과를 중성화시킬 수 있는지 여부를 확인하였으며, 그 결과를 도 11 및 도 12에 나타내었다.It was confirmed whether anti-IL-17A could neutralize the inhibitory effect of IL-17A on human bone marrow mesenchymal stem cells, and the results are shown in Figs. 11 and 12.

도 11을 참조하면, 250 ng/mL의 안티-IL-17A가 IL-17A가 매개하는 지방세포분화 억제를 상쇄시켰다. 이러한 관찰 결과를 확인하기 위하여 ELISA를 통해 다양한 지방 형성 조건에서 배양된 인간 골수 중간엽 줄기세포에서의 아디포넥틴 수준을 측정하였으며, 그 결과를 도 3B에 나타내었다.Referring to FIG. 11, 250 ng / mL anti-IL-17A abrogated IL-17A mediated adipocyte differentiation inhibition. To confirm these observations, levels of adiponectin in human bone marrow mesenchymal stem cells cultured under various lipogenic conditions were measured by ELISA, and the results are shown in FIG. 3B.

도 12를 참조하면, IL-17A가 아디포넥틴의 분비를 억제하였으며, 그 효과는 안티-IL-17A 항체를 동시에 처리하여, 현저하게 감소되었다. 이러한 결과를 통해, IL-17A가 인간 골수 중간엽 줄기세포에서의 지방세포 분화를 억제시키는데 중요한 역할을 하는 것을 확인할 수 있다.Referring to FIG. 12, IL-17A inhibited the secretion of adiponectin, and the effect was remarkably reduced by simultaneously treating the anti-IL-17A antibody. These results indicate that IL-17A plays an important role in inhibiting adipocyte differentiation in human bone marrow mesenchymal stem cells.

[실험예 4] 분화된 지방세포 내의 지질체 수준에 대한 IL-17A의 효과[Experimental Example 4] Effect of IL-17A on lipid levels in differentiated adipocytes

실험예 1에서와 동일한 방식으로 인간의 골수 중간엽줄기세포를 배양하고 지방세포 분화를 유도한 후 IL-17A 25 ng/ml을 처리하였다. 인간의 골수 중간엽 줄기세포에서 지방세포 분화를 15일 동안 유도하여 50% 이상의 세포가 지방세포로 분화된 시점에서 IL-17 A로 7일 동안 처리하였다.Human bone marrow mesenchymal stem cells were cultured in the same manner as in Experimental Example 1, and adipocyte differentiation was induced, followed by treatment with 25 ng / ml IL-17A. Adipocyte differentiation was induced in human bone marrow mesenchymal stem cells for 15 days and treated with IL-17 A for 7 days at the time when 50% or more cells were differentiated into adipocytes.

분화된 지방세포 내의 지질체 수준을 정량적으로 측정하고 현미경으로 관찰하기 위해, 오일레드오 염색/헤마톡실린 재염색 및 흡광도 측정을 수행하여 그 결과를 도 13 내지 15에 나타내었다.To quantitatively measure the level of lipid in the differentiated adipocytes and observe with a microscope, oil red staining / hematoxylin re-staining and absorbance measurement were carried out and the results are shown in Figures 13-15.

도 13 및 14를 참조하면, IL-17A는 분화된 지방세포 내에서 지질체의 크기 및 숫자를 모두 감소시켰다. 지질분해(lipolysis)의 수준을 측정하기 위하여, 분화된 지방세포 배양액으로부터의 상등액에 포함된 글리세롤 농도를 측정하였으며, 그 결과를 도 15에 나타내었다.Referring to Figures 13 and 14, IL-17A reduced both the size and number of lipids in differentiated adipocytes. In order to measure the level of lipolysis, the concentration of glycerol contained in the supernatant from differentiated adipocyte cultures was measured and the results are shown in Fig.

도 15를 참조하면, IL-17A는 지방세포의 지질분해를 현저하게 증가시킴을 확인할 수 있으며, 이러한 결과를 IL-17A가 분화된 지방세포의 지질분해를 조절함으로써, 분화된 지방세포의 대사 상태(metabolic state)를 조절함을 확인할 수 있다.FIG. 15 shows that IL-17A significantly increased lipid degradation of adipocytes. These results indicate that by controlling the lipid degradation of adipocytes differentiated with IL-17A, the metabolism state of differentiated adipocytes it is possible to confirm that the metabolic state is regulated.

[실험예 5] IL-17A이 IL-6 및 IL-8의 생성에 영향을 미치는지 여부[Experimental Example 5] Whether IL-17A affects the production of IL-6 and IL-8

케라티노사이트(keratinocyte) 및 시노비오사이트(synoviocyte)와 같은 비면역세포(non-immune cell)에서 IL-17A이 IL-17A 시그널링(signaling)에 작용하는 수용체를 발현하는 친염증 유발인자(pro-inflammatory)인 IL-6 및 IL-8의 생성에 영향을 미치는지 여부를 확인하였다.In a non-immune cell such as keratinocyte and synoviocyte, pro-inflammatory IL-17A expresses a receptor that acts on IL-17A signaling, inflammatory effects of IL-6 and IL-8.

IL-17A가 분화된 지방세포에서 IL-6 및 IL-8 유전자의 발현을 조절하는지 여부를 평가하였다. 지방세포 분화를 15일 동안 유도하고 15일 후, IL-6 mRNA 수준을 측정하였으며, 그 결과를 16 및 17에 나타내었다.We evaluated whether IL-17A regulates the expression of IL-6 and IL-8 genes in differentiated adipocytes. Adipogenic differentiation was induced for 15 days and after 15 days, IL-6 mRNA levels were measured and the results are shown in 16 and 17.

도 16을 참조하면, 처리하지 않은 인간 골수 중간엽 줄기세포와 비교하여 IDXT 지방세포 분화 조건하에서 IL-6의 전사는 하위-조절(down-regulation)되는 것을 확인할 수 있으며, IDXT 및 25 ng/mL의 IL-17A를 동시에 처리한 분화된 지방세포에서는 IL-6 mRNA의 수준이 현저하게 증가됨을 확인할 수 있다. 또한, 도 17을 참조하면, IDXT 대조군과 비교하여 지방세포 분화가 진행될수록 IL-8 전사 수준이 현저하게 증가됨을 확인할 수 있다.16, the transcription of IL-6 under down-regulation of IDXT adipocytes was down-regulated compared to untreated human myeloid mesenchymal stem cells, and IDXT and 25 ng / mL IL-6 < / RTI > mRNA levels were significantly increased in differentiated adipocytes treated with IL-17A at the same time. Also, referring to FIG. 17, it can be seen that as the adipocyte differentiation progresses, the transcription level of IL-8 is remarkably increased as compared with the IDXT control group.

더욱이, 인간 골수 중간엽 줄기세포에서 지방세포가 분화하는 동안 증가된 IL-6 및 IL-8 단백질 생성을 확인하기 위하여 ELISA를 사용하였으며, 그 결과를 도 18에 나타내었다. 도 18을 참조하면, 25 ng/mL의 IL-17A을 처리하는 경우, 지방세포에서 단백질 수준의 IL-6 및 IL-8의 발현이 증가됨을 확인할 수 있다.Furthermore, ELISA was used to confirm increased IL-6 and IL-8 protein production during adipocyte differentiation in human bone marrow mesenchymal stem cells, and the results are shown in FIG. Referring to FIG. 18, the expression of IL-6 and IL-8 at the protein level in adipocytes is increased when 25 ng / mL of IL-17A is treated.

다만, 도 19를 참조하면 IL-17F의 처리에 의해 IL-6의 mRNA 수준이 상위-조절(up-regulation) 되었으나, 처리하지 않은 세포와 IL-17F로 처리한 세포에서 큰 차이점을 확인하지 못하였으며, IL-8은 IL-17A 및 IL-17F을 처리한 경우 단백질 분비 및 유전자 발현 모두에서 유사한 패턴의 발현을 보였다.19, IL-17 mRNA levels were up-regulated by treatment with IL-17F. However, no significant difference was observed between untreated cells and IL-17F treated cells And IL-8 showed similar patterns of expression in both protein secretion and gene expression when IL-17A and IL-17F were treated.

따라서, IL-17A가 인간 골수 중간엽 줄기세포 유래의 분화된 지방세포에서IL-6 및 IL-8의 생성을 조절함을 확인할 수 있다.Thus, it can be confirmed that IL-17A modulates the production of IL-6 and IL-8 in differentiated adipocytes derived from human bone marrow mesenchymal stem cells.

[실험예 6] 생체 내에서의 지방조직 질량에 대한 IL-17A의 효과[Experimental Example 6] Effect of IL-17A on the fat tissue mass in vivo

4주령의 C57BL/6 생쥐에게 1개월 동안 고지방식(AIN-93G 40% 지방식, 제조회사: 피드랩 코리아(Feedlap korea) (www.feedlap.co.kr), 조성(1 kg중 g함량으로 표시됨): 카세인 200, 쇼트닝 330, 대두유 70, 슈크로스 100, 덱스트로스 132, 옥수수 전분 48.7, 셀룰로스 50, L-시스틴(cystine) 3, TBHQ 0.14, 콜린 비타르테이트(Choline bitartate) 2, 미네랄 혼합물 50, 비타민 혼합물 14.3)을 공급하여 섭취하게 함으로써 비만을 유도한 후, 35 g 정도의 체중을 가진 생쥐들을 선별하였다. 실험할 생쥐들은 선별된 생쥐들을 군 당 6 내지 7 마리씩 2개의 실험군으로 나눔으로써 준비하였고, 주사할 IL-17A은 1 μg의 IL-17을 1 ml의 PBS에 용해하고 주사 멸균함으로써 준비하였다. 한 실험군의 생쥐들을 케타민으로 마취시킨 후, 상기 준비된 IL-17A 용액 0.1 ml를 26 게이지의 주사를 이용하여 마취된 생쥐의 부고환 지방조직(epididymal fat bed)에 주사하였다. 대조군의 C57BL/6 생쥐들에게는 동일한 절차를 이용하여 PBS만을 주사하였다. IL-17A를 주사한 후, 생쥐들에게 고지방식을 7일 동안 계속 공급하여 섭취하게 한 후, 생쥐들의 체중을 측정하고 희생시켰다. 희생시킨 생쥐들로부터 부고환지방조직을 채취하여 그 질량을 측정하였고, 그 결과를 도 20에 나타내었다. 도 20으로부터 알 수 있는 바와 같이, PBS만을 주사한 대조군 생쥐들에 비하여 IL-17A을 주사한 실험군 생쥐들의 부고환지방조직의 질량이 감소하였다(도 20 참조).Four weeks old C57BL / 6 mice were treated with high-fat diet (AIN-93G 40%, method: Feedlap korea (www.feedlap.co.kr), composition L-cystine 3, TBHQ 0.14, choline bitartate 2, minerals mixture (see Table 1): casein 200, shortening 330, soybean oil 70, sucrose 100, dextrose 132, corn starch 48.7, cellulose 50, 50, vitamin mixture 14.3) to induce obesity, and mice weighing about 35 g were selected. The mice to be tested were prepared by dividing the selected mice into 2 experimental groups of 6 to 7 mice per group, and IL-17A to be injected was prepared by dissolving 1 μg of IL-17 in 1 ml of PBS and sterilizing by injection. One experimental group of mice was anesthetized with ketamine and 0.1 ml of the prepared IL-17A solution was injected into the epididymal fat bed of anesthetized mice using an injection of 26 gauge. In the control C57BL / 6 mice, only PBS was injected using the same procedure. After injection of IL-17A, the mice were fed a high fat diet for 7 days, and the mice were weighed and sacrificed. From the sacrificed mice, epididymal adipose tissue was collected and its mass was measured. The results are shown in FIG. As can be seen from FIG. 20, the mass of epididymal adipose tissues of mice in the experimental group injected with IL-17A was reduced compared with control mice injected with only PBS (see FIG. 20).

하기에 상기 조성물의 제제예를 설명하나, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Hereinafter, formulation examples of the above composition will be described, but the present invention is not intended to be limited thereto but is specifically described.

[제제예 1] 로션 제조[Formulation Example 1] Lotion preparation

IL-17A 또는 IL-17F.................30.00 (%)IL-17A or IL-17F ............ 30.00 (%)

L-아스코르빈산-2-인산마그네슘염.................1.00L-ascorbic acid-2-phosphate magnesium salt ............... 1.00

수용성 콜라겐 (1 % 수용액)........................1.00Water soluble collagen (1% aqueous solution) ........................ 1.00

시트르산나트륨.....................................0.10Sodium citrate ....................................... 0.10

시트르산............................................0.05Citric acid ............................................ 0.05

감초 엑기스.........................................0.20Licorice extract .......................................... 0.20

1,3-부틸렌글리콜.....................................3.001,3-butylene glycol ....................................... 3.00

유지..................................................2.00maintain................................................. .2.00

세린..................................................1.00Serine ................................................. .1.00

정제수로 전량을 100으로 하였으며, 상기의 배합비(%)에 의해 로션을 제조하였다.The whole amount was adjusted to 100 with purified water, and a lotion was prepared according to the compounding ratio (%).

[제제예 2] 크림 제조[Formulation Example 2] Cream production

IL-17A 또는 IL-17F..........................10.00(%)IL-17A or IL-17F ... 10.00 (%)

폴리에틸렌글리콜모노스테알레이트.........................2.00Polyethylene glycol monostearate ......................... 2.00

자기유화형모노스테아르산글리세린...........................5.00Self-emulsifying monostearic acid glycerin ...

세틸알코올.................................................4.00Cetyl alcohol ................................................ .4.00

스쿠알렌...................................................6.00Squalane ................................................. ..6.00

트리2-에틸헥산산글리세릴...................................6.00Glyceryl tri-2-ethylhexanoate ...

스핑고당지질...............................................1.00Sphingo glycolipid ............................................... 1.00

1.3-부틸렌글리콜............................................7.001,3-Butylene glycol ............................................ 7.00

비타민 C....................................................1.00Vitamin C ................................................ .... 1.00

정제수로 전량을 100으로 하였으며, 상기의 배합비(%)로 크림을 제조하였다.The whole amount was adjusted to 100 with purified water, and the cream was prepared in the above blending ratio (%).

[제제예 3] 미용액 제조[Formulation Example 3] Preparation of serum

IL-17A 또는 IL-17F......................20.00(%)IL-17A or IL-17F ..................... 20.00 (%)

히드록시에틸렌셀룰로오스(2 % 수용액)...............12.00Hydroxyethylene Cellulose (2% aqueous solution) ............... 12.00

크산탄검(2 % 수용액)...............................2.00Xanthan gum (2% aqueous solution) ............................... 2.00

1,3-부틸렌글리콜....................................6.001,3-butylene glycol .................................... 6.00

진한 글리세린.......................................4.00Dark glycerin ....................................... 4.00

히알루론산나트륨 (1 % 수용액)......................5.00Sodium hyaluronate (1% aqueous solution) ...................... 5.00

유지................................................2.00Maintain ................................................ 2.00

세린................................................1.00Serine ................................................ 1.00

비타민 C............................................1.00Vitamin C ............................................ 1.00

정제수로 전량을 100으로 하였으며, 상기의 배합비(%)로 미용액을 제조하였다.The whole amount was adjusted to 100 with purified water, and a serum was prepared with the blending ratio (%).

[제제예 4] 산제의 제조[Formulation Example 4] Preparation of powder

IL-17A 또는 IL-17F................................100 mgIL-17A or IL-17F ............................ 100 mg

유당.............................................................100 mgLactose ................................................. ............ 100 mg

탈크.............................................................10 mgTalc ................................................. ............ 10 mg

유지..............................................................5 mgmaintain................................................. ............. 5 mg

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.The above components are mixed and filled in airtight bags to prepare powders.

[제제예 5] 정제의 제조[Formulation Example 5] Preparation of tablets

IL-17A 또는 IL-17F...............................50 mgIL-17A or IL-17F ... 50 mg

옥수수전분..................................................100 mgCorn starch ................................................ 100 mg

유당........................................................100 mgLactose ................................................. ....... 100 mg

스테아린산 마그네슘..........................................2 mgMagnesium stearate .......................................... 2 mg

비타민 C.....................................................50 mgVitamin C ................................................ ..... 50 mg

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.After mixing the above components, tablets are prepared by tableting according to the usual preparation method of tablets.

[제제예 6] 캅셀제의 제조[Formulation Example 6] Preparation of capsules

IL-17A 또는 IL-17F...............50 mgIL-17A or IL-17F ... 50 mg

옥수수전분................................................100 mgCorn starch ................................................ 100 mg

유당.......................................................100 mgLactose ................................................. ...... 100 mg

스테아린산 마그네슘.....................................2 mgMagnesium stearate ..................................... 2 mg

비타민 C....................................................50 mgVitamin C ................................................ .... 50 mg

세린........................................................50 mgSerine ................................................. ....... 50 mg

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.The above components are mixed according to a conventional capsule preparation method and filled in gelatin capsules to prepare capsules.

[제제예 7] 주사제의 제조[Formulation Example 7] Preparation of injection

IL-17A 또는 IL-17F..........................50 mgIL-17A or IL-17F ... 50 mg

주사용 멸균 증류수.........................................적량Sterile sterilized distilled water for injection .........................................

pH 조절제..................................................적량pH adjusting agent ................................................ .. Good

통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.(2 ml) per 1 ampoule according to the usual injection preparation method.

[제제예 8]액제의 제조[Formulation Example 8] Preparation of liquid agent

IL-17A 또는 IL-17F.............................100 mgIL-17A or IL-17F ............................. 100 mg

이성화당.....................................................10 gIsolation Party ................................................ ..... 10 g

만니톨.......................................................5 gMannitol ................................................. ...... 5 g

비타민 C.....................................................50 mgVitamin C ................................................ ..... 50 mg

세린..........................................................50 mgSerine ................................................. ......... 50 mg

유지..........................................................적량maintain................................................. .........

정제수.........................................................적량Purified water................................................. ........

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100 ㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.Each component was added to purified water in accordance with the usual liquid preparation method and dissolved, and the lemon flavor was added in an appropriate amount. Then, the above components were mixed, and purified water was added thereto. The whole was adjusted to 100 ml with purified water, And sterilized to prepare a liquid preparation.

[제제예 9] 건강 식품의 제조[Formulation Example 9] Preparation of health food

IL-17A 또는 IL-17F........................1000 mgIL-17A or IL-17F ... 1000 mg

비타민 혼합물Vitamin mixture

비타민 A 아세테이트............................70 ㎍Vitamin A Acetate ............................ 70 ㎍

비타민 E ......................................1.0 mgVitamin E ...................................... 1.0 mg

비타민 B1.......................................0.13 mgVitamin B1 ....................................... 0.13 mg

비타민 B2 .....................................0.15 mgVitamin B2 ..................................... 0.15 mg

비타민 B6........................................0.5 mgVitamin B6 ........................................ 0.5 mg

비타민 B12.........................................0.2 ㎍Vitamin B12 .............................. 0.2 g

비타민 C..........................................10 mgVitamin C .......................................... 10 mg

비오틴...........................................10 ㎍Biotin ........................................... 10 μg

니코틴산아미드.....................................1.7 mgNicotinic acid amide ....................................... 1.7 mg

엽산...............................................50 ㎍Folic acid ............................................... 50 ㎍

판토텐산 칼슘.......................................0.5 mgCalcium pantothenate ....................................... 0.5 mg

무기질 혼합물Mineral mixture

황산제1철...........................................1.75 mgFerrous sulfate ........................................... 1.75 mg

산화아연.............................................0.82 mgZinc oxide ............................................. 0.82 mg

탄산마그네슘......................................25.3 mgMagnesium carbonate ...................................... 25.3 mg

제1인산칼륨..........................................15 mgPotassium phosphate monohydrate .......................................... 15 mg

제2인산칼슘..........................................55 mgSecondary calcium phosphate ...................................... 55 mg

구연산칼륨............................................90 mgPotassium citrate ............................................ 90 mg

탄산칼슘..............................................100 mgCalcium carbonate .............................................. 100 mg

염화마그네슘......................................24.8 mgMagnesium chloride ...................................... 24.8 mg

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.Although the composition ratio of the above-mentioned vitamin and mineral mixture is comparatively mixed with a composition suitable for health food as a preferred embodiment, the compounding ratio may be arbitrarily modified, and the above ingredients are mixed according to a conventional method for producing healthy foods , Granules can be prepared and used in the manufacture of health food compositions according to conventional methods.

[제제예 10] 건강 음료의 제조[Formulation Example 10] Preparation of health drink

IL-17A 또는 IL-17F.................................1000 mgIL-17A or IL-17F ............................ 1000 mg

구연산.........................................................1000 mgCitric acid ................................................. ........ 1000 mg

올리고당.........................................................100 goligosaccharide................................................. ........ 100 g

매실농축액.........................................................2 gPlum concentrate ................................................ ......... 2 g

타우린.............................................................1 gTaurine ................................................. ............ 1 g

정제수를 가하여 전체...................................900 ㎖Purified water was added to the whole ... 900 ml

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.The above components were mixed according to a conventional health drink manufacturing method, and the mixture was heated at 85 DEG C for about 1 hour with stirring, and the solution thus prepared was filtered to obtain a sterilized 2-liter container, which was sealed and sterilized, ≪ / RTI >

상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.Although the compositional ratio is relatively mixed with a component suitable for a favorite drink, it is also possible to arbitrarily modify the compounding ratio according to the regional or national preference such as the demand class, the demanding country, and the use purpose.

본 발명이 속한 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기 내용을 바탕으로 본 발명의 범주내에서 다양한 응용 및 변형을 행하는 것이 가능할 것이다.It will be understood by those skilled in the art that various changes in form and details may be made therein without departing from the spirit and scope of the invention as defined by the appended claims.

Claims (13)

IL-17A 및 IL-17F로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 인터루킨 17(interleukin-17, IL-17)을 유효성분으로 함유하는 슬리밍용 화장료 조성물.IL-17A, IL-17A, and IL-17F as an active ingredient. IL-17A 및 IL-17F로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 인터루킨 17(interleukin-17, IL-17)을 유효성분으로 함유하는 슬리밍용 건강식품 조성물.IL-17A, IL-17A, and IL-17F as an active ingredient. IL-17A 및 IL-17F로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 인터루킨 17(interleukin-17, IL-17)을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 지방종의 예방 또는 치료용 약학 조성물.A pharmaceutical composition for preventing or treating obesity or lipoma containing, as an active ingredient, interleukin-17 (IL-17) which is at least one selected from the group consisting of IL-17A and IL-17F. 제 3 항에 있어서,
상기 조성물은 지방세포의 분화를 억제시키는 것을 특징으로 하는 조성물.
The method of claim 3,
Wherein said composition inhibits the differentiation of adipocytes.
제 4 항에 있어서,
상기 지방세포 분화는 중간엽 줄기세포가 지방세포로 분화되는 것을 특징으로 하는 조성물.
5. The method of claim 4,
Wherein the adipocyte differentiation differentiates mesenchymal stem cells into adipocytes.
제 5 항에 있어서,
상기 지방세포 분화는 골수의 중간엽 줄기세포가 지방세포로 분화되는 것을 특징으로 하는 조성물.
6. The method of claim 5,
Wherein said adipocyte differentiation differentiates mesenchymal mesenchymal stem cells into adipocytes.
제 1 항에 있어서,
상기 조성물은 지방세포 내의 지질체(lipid droplet) 수(number) 또는 크기(size)를 감소시키는 것을 특징으로 하는 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein said composition reduces the number or size of lipid droplets in adipocytes.
제 2 항에 있어서,
상기 조성물은 지방세포 내의 지질체(lipid droplet) 수(number) 또는 크기(size)를 감소시키는 것을 특징으로 하는 조성물.
3. The method of claim 2,
Wherein said composition reduces the number or size of lipid droplets in adipocytes.
제 3 항에 있어서,
상기 조성물은 지방세포 내의 지질체(lipid droplet) 수(number) 또는 크기(size)를 감소시키는 것을 특징으로 하는 조성물.
The method of claim 3,
Wherein said composition reduces the number or size of lipid droplets in adipocytes.
제 3 항에 있어서,
상기 유효 성분은 조성물 총 중량을 기준으로 0.001 ∼ 100 중량%의 양으로 함유되는 것을 특징으로 하는 조성물.
The method of claim 3,
Wherein the active ingredient is contained in an amount of from 0.001 to 100% by weight based on the total weight of the composition.
제 1 항에 있어서,
상기 IL-17은 재조합 IL-17이거나, 또는 정제된 천연 IL-17인 것을 특징으로 하는 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein said IL-17 is recombinant IL-17 or purified natural IL-17.
제 2 항에 있어서,
상기 IL-17은 재조합 IL-17이거나, 또는 정제된 천연 IL-17인 것을 특징으로 하는 조성물.
3. The method of claim 2,
Wherein said IL-17 is recombinant IL-17 or purified natural IL-17.
제 3 항에 있어서,
상기 IL-17은 재조합 IL-17이거나, 또는 정제된 천연 IL-17인 것을 특징으로 하는 조성물.
The method of claim 3,
Wherein said IL-17 is recombinant IL-17 or purified natural IL-17.
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