KR101536871B1 - Compositions for Improving Skin Conditions Comprising L-aspartic acid as an Active Ingredient - Google Patents
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Abstract
본 발명은 아스파틱산(L-Aspartic acid)을 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 유효성분인 아스파틱산은 우수한 피부상태 개선 효과를 가지고, 세포독성 및 피부 부작용이 없어 화장료, 약제학적 및 식품 조성물에 안전하게 적용할 수 있다.The present invention relates to a composition comprising aspartic acid (L-Aspartic acid) as an active ingredient. The aspartic acid, which is an active ingredient of the present invention, has an excellent skin condition improving effect and can be safely applied to cosmetic, pharmaceutical and food compositions without cytotoxicity and skin side effects.
Description
본 발명은 피부용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 제품 안정성이 우수하고 피부에 대한 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있으며 자외선 보호 효과, 저색소증 개선효과, 항노화 및 주름개선효과, 및 육모효과가 우수한 아스파틱산을 유효성분으로 포함하는 피부용 조성물에 관한 것이다.More particularly, the present invention relates to a composition for dermatological use which is excellent in product stability, can be safely used without adverse effects on the skin, has an ultraviolet protective effect, a hypochromic improving effect, an anti-aging and wrinkle- The present invention relates to a composition for dermatological use, which contains, as an active ingredient,
본 발명은 자외선 조사로 야기되는 손상으로부터 피부를 보호하기 위한 약제와 화장품 및 식품 조성물에 관한 것으로, 자외선 조사로부터 피부를 보호하는 역할을 담당하는 멜라닌합성을 증가시키고, 자외선으로부터 각질형성세포와 섬유모세포, 지방줄기세포 및 피부줄기세포를 보호하기 위한 것이다.The present invention relates to a medicament, a cosmetic and a food composition for protecting skin from damage caused by ultraviolet irradiation, and it relates to a composition for enhancing melanin synthesis, which plays a role of protecting skin from ultraviolet radiation, , Adipocyte stem cells and dermal stem cells.
지구 표면에 도달하는 자외선은 UVA (320~400 nm)와 UVB (290~320 nm)로 일반적으로 광선성피부증(photo-dermatosis)이 유발된다. UVB에 의한 피부반응은 다음과 같이 서술될 수 있다. UVB의 에너지양은 매우 높아서 짧은 노출에도 홍반이 형성된다. UVB의 반복적 노출은 피부노화를 촉진시키고 피부노화는 피부암으로 이어질 수 있고, 피부 표피층의 살아있는 세포가 UVB의 조사를 받으면 피리미딘 다이머(pyrimidine dimerization)를 형성하며 DNA, RNA에도 손상을 주어 돌연변이를 유도한다. 피부타입이 I, II에 속하는 사람은 UVB에 대한 보호역할을 할 수 있는 태닝(tanning) 작용이 이루어지지 않으므로 반드시 UVB (UVA뿐만 아니라)에 대해 피부를 보호해야 한다. UVA 조사 역시 피부손상을 야기한다. UVA는 진피 깊숙히까지 많은 양이 도달하며 혈관, 연결조직, 콜라겐, 엘라스틱파이버까지 손상을 줄 수 있다. 지상에 도달하는 UVA의 양은 UVB보다 수 배 많고 UVB 조사량이 지역, 계절, 시간대에 따라 다양한 것에 비해 UVA의 조사량은 이러한 조건과 상관없이 일정하다. 따라서 지속적으로 일정한 양으로 받게 되는 UVA는 사람의 일생동안 꾸준히 축적되므로 그 조사량이 중요하다. UVA 조사를 계속 받게 되면 피부염증과 홍반반응이 나타난다. UVA는 피부노화와 피부암에 관여한다. UVA는 UVB의 작용을 더 강화시킬 수 있다. UVA도 세포에 영향을 미치는데 피리미딘 다이머 형성과 DNA 합성 억제, 피부면역세포인 랑게르한스세포의 감소를 유발한다. 광독성이나 광알러지반응은 대부분 UVA에 의해 매개된다. UVA는 급성흑화반응 (IPD: immediate pigment darkening)을 일으킨다. 이러한 흑화반응은 멜라닌 색소 형성을 통해 UV로부터 피부를 보호하기도 한다. The ultraviolet rays reaching the earth's surface are UVA (320 to 400 nm) and UVB (290 to 320 nm), which generally cause photo-dermatosis. The skin reaction by UVB can be described as follows. The amount of UVB energy is so high that erythema is formed even at short exposures. Repeated exposure to UVB promotes skin aging, skin aging can lead to skin cancer, and living cells in the skin's epidermis can undergo irradiation with UVB to form pyrimidine dimerization and damage DNA and RNA, leading to mutations do. People who belong to type I or II skin must protect their skin against UVB (as well as UVA) since they do not tanning to protect against UVB. UVA irradiation also causes skin damage. UVA reaches deep into the dermis and can damage blood vessels, connective tissue, collagen, and elastomeric fibers. The amount of UVA reaching the ground is several times higher than that of UVB, and the UVA dose is constant regardless of these conditions, while the UVB dose varies depending on the region, season, and time of day. Therefore, the amount of UVA that is received constantly in a constant amount is steadily accumulated over a person's lifetime, so the dose is important. Continued UVA irradiation results in skin irritation and erythema reactions. UVA is involved in skin aging and skin cancer. UVA can further enhance the action of UVB. UVA also affects cells, leading to the formation of pyrimidine dimers, inhibition of DNA synthesis, and the reduction of skin-immune Langerhans cells. Phototoxicity and photoallergic responses are mostly mediated by UVA. UVA causes immediate pigment darkening (IPD). This blackening reaction also protects the skin from UV through melanin pigmentation.
사람의 피부색은 피부 내부의 멜라닌(melanin) 농도와 분포에 따라 결정되어진다. 인체 피부의 멜라닌 세포에서 생성되는 멜라닌 색소는 검은 색소와 단백질의 복합형태를 갖는 페놀계 고분자 물질로서, 자외선으로 발생하는 피부손상을 차단하는 중요한 역할을 하고 있다. 멜라닌 생합성에는 멜라닌 세포에 존재하는 타이로시네이즈의 작용이 가장 중요한 것으로 보고되어 있고, 타이로시네이즈(tyrosinase)는 아미노산의 일종인 티로신(tyrosine)을 멜라닌 중합체 생성의 중간산물인 도파(DOPA) 및 도파퀴논(dopaquinone)으로 전환함으로써 피부 흑화과정에 핵심적 역할을 수행한다. 멜라닌은 UV나 IR로부터 photon을 흡수하거나 굴절시키는 작용을 통해 자외선으로부터 피부를 보호한다. 그 밖에도 체온조절, 피부보호색, 비타민 D합성, 자유라디칼소거 등의 작용을 한다. 멜라닌 세포가 외부스트레스 또는 자가면역질환에 의해 파괴되거나 제 기능을 수행하지 못해 발생하는 저색소증 질환에는 백반증(vitiligo), 탈색소 백모, 백색 비강진(pseudoleucoderma atopicum), 어루러기(Tinea versicolor), 반상 경피증, 알레르기, 염증 후 탈색증, 특발성 적상 저색소증, 탈색소 모반, 부분 백피증 등이 있다(Bolognia와 Pawelek, J Am Acad Dermatol (1988) 19:217-255; Pinto와 Bolognia, Pediatr Clin North Am (1991) 38:991-1017). 현재 보고되어 있는 저색소증 치료법으로는 소랄렌 등의 광감작제를 이용한 광화학적 방법, 수술 등의 외과적 방법, 멜라닌세포의 활성을 높여 멜라닌 생성을 증가시키는 방법, 산화적 스트레스로부터 멜라닌 세포를 보호하는 방법 등이 있다. The skin color of a person is determined by the concentration and distribution of melanin in the skin. The melanin pigment, which is produced in melanocytes of human skin, is a phenolic high molecular substance having a complex form of black pigment and protein and plays an important role in blocking skin damage caused by ultraviolet rays. Tyrosinase, which is present in melanocytes, has been reported to be the most important for melanin biosynthesis. Tyrosinase is a type of amino acid tyrosine, which is an intermediate product of melanin polymer production (DOPA) And dopaquinone, thereby playing a key role in the skin blackening process. Melanin protects the skin from ultraviolet rays by absorbing or refracting photons from UV or IR. Other functions include body temperature control, skin protection, vitamin D synthesis, and free radical scavenging. Hypopigmentation disorders caused by melanocyte failure due to external stress or autoimmune disease or nonfunctioning function include vitiligo, decolorant white spot, pseudoleucoderma atopicum, tinea versicolor, (Bolognia and Pawelek, J Am Acad Dermatol (1988) 19: 217-255; Pinto and Bolognia, Pediatr Clin North Am (1991) 38: 991-1017). The currently reported hypoxia treatment methods include photochemical methods using photosensitizers such as psoralen, surgical methods such as surgery, methods for increasing melanin production by increasing melanin cell activity, and methods for increasing melanin cells from oxidative stress And how to protect them.
환경오염, 자동차 배기가스 등으로 인해 호르몬 불균형 현상이 심화되고 있다. 이로 인해 탈모 발생율이 높아지고, 발생연령도 낮아지고 있고, 피부면역시스템의 부조화가 초래되어 아토피와 건선과 같은 다양한 피부질환 등이 발생하고 있다. 또한 인스턴트 음식, 육류중심의 식생활변화로 어린 나이에도 불구하고 비만으로 고통을 받고 있는 인구가 급격히 증가하고 있다.Environmental pollution, automobile exhaust gas, etc., are becoming more and more unbalanced. As a result, the rate of occurrence of hair loss is increased, the age of skin is lowered, and the inconsistency of the skin immune system is caused, resulting in various skin diseases such as atopy and psoriasis. In addition, due to changes in dietary patterns centering on instant food and meat, the population suffering from obesity is growing rapidly despite its young age.
따라서 미적인 차원뿐만 아니라 심각한 사회 문제가 되고 있는 여러 가지 현상 예를 들어, 자외선에 의한 피부손상, 피부암, 피부저색소증, 비만, 면역불균형 및 탈모 등과 같은 현상을 효과적으로 해결할 수 있는 물질 개발이 심도있게 연구되고 있다. 이러한 배경 하에서, 본 발명자들은 안전성과 안정성이 높으며, 피부관련 효능이 우수한 화장료를 검색한 결과, 아스파틱산이 자외선보호효과, 항노화 및 주름개선, 피부저색소증 개선효과 및 발모효과를 포함한 다양한 효능을 가지고 있으며, 동시에 안전성과 안정성이 뛰어남을 확인하였다.
Therefore, there are many phenomena that are not only an aesthetic dimension but also a serious social problem. For example, there are deeply developed substances that can effectively solve phenomena such as skin damage caused by ultraviolet rays, skin cancer, hypochloremia, obesity, immune unbalance and hair loss Research. Under these circumstances, the inventors of the present invention found that cosmetic compositions having high safety and stability and excellent skin-related efficacy showed that aspartic acid had various effects including ultraviolet protective effect, anti-aging and wrinkle improvement, skin hypochlorite improvement effect, And at the same time, it is confirmed that the safety and stability are excellent.
본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.A number of patent documents are referred to throughout this specification and their citations are indicated. The disclosures of the cited patent documents are hereby incorporated by reference herein in their entirety to better illustrate the state of the art to which the invention pertains and the teachings of the present invention.
본 발명자들은 자외선보호 효과, 저색소증개선효과, 발모촉진 효과, 항노화 및 주름개선 효과가 우수하고 안정성이 높아 피부 부작용이 없는 신규의 물질을 개발하고자 노력하였다. 그 결과, 아스파틱산을 유효성분으로 포함하는 조성물을 제조하면 그 효능과 안전성이 우수한 피부상태 개선 조성물을 제공할 수 있음을 확인함으로써, 본 발명을 완성하게 되었다.The present inventors have sought to develop new substances which are excellent in ultraviolet ray protecting effect, hypochromic improving effect, hair growth promoting effect, anti-aging and wrinkle reducing effect and high stability and thus have no skin side effects. As a result, it has been found that a composition containing aspartic acid as an active ingredient can be provided to provide a skin condition improving composition excellent in its efficacy and safety, thereby completing the present invention.
본 발명의 목적은 피부 상태(skin conditions) 개선용 조성물을 제공하는 데 있다.It is an object of the present invention to provide a composition for improving skin conditions.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.Other objects and advantages of the present invention will become more apparent from the following detailed description of the invention, claims and drawings.
본 발명은 아스파틱산을 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공한다. 본 발명의 조성물에서 이용되는 유효성분인 아스파틱산은 우수한 피부개선 효과를 가지며, 상기 피부개선은 자외선으로부터 피부보호효과, 피부저색소증 개선, 발모 촉진인 것을 포함한다. 아스파틱산은 섬유아세포와 각질형성세포를 보호하며, 인체유래 정상 멜라닌세포의 멜라닌 생성과 산화적 스트레스로부터 멜라닌 세포를 보호하는 기전을 통해 우수한 저색소증 개선 효과 및 우수한 발모 촉진 효과를 가진다. 또한, 아스파틱산은 면역관련 반응을 조절하는 효과 및 비만 억제 효과를 가진다. 그리고 세포독성 및 피부 부작용이 없어 화장료, 약제학적 및 식품 조성물에 안전하게 적용할 수 있다.The present invention provides a composition comprising aspartic acid as an active ingredient. The aspartic acid, which is an active ingredient used in the composition of the present invention, has an excellent skin improving effect, and the skin improvement includes a skin protecting effect from ultraviolet rays, an improvement of skin hypochromatosis, and promotion of hair growth. Aspartic acid protects fibroblasts and keratinocytes and has an excellent hypocholinergic effect and an excellent hair growth promoting effect through a mechanism of protecting melanocytes from melanin production and oxidative stress of normal melanocytes derived from human body. In addition, aspartic acid has an effect of regulating an immune-related response and an effect of suppressing obesity. And can be safely applied to cosmetic, pharmaceutical and food compositions without cytotoxicity and skin side effects.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the same is by way of illustration and example only and is not to be construed as limiting the scope of the present invention. It is therefore intended that the scope of the invention be defined by the claims appended hereto and their equivalents.
본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 아스파틱산(L-aspartic acid)을 유효성분으로 포함하는 피부 상태(skin conditions) 개선용 조성물을 제공한다.According to one aspect of the present invention, there is provided a composition for improving skin conditions comprising aspartic acid as an active ingredient.
본 발명의 아스파틱산(L-aspartic acid)은 하기 화학식 1의 구조를 가진다. The aspartic acid of the present invention has a structure represented by the following formula (1).
아스파틱산의 생리적인 활성으로는 만성피로를 개선하고, 항체생산을 유도한다고 보고되어 있다. 뿐만 아니라, 신경계의 건강을 유지하고, 간장에서 과량의 암모니아를 제거하는 효과가 있다고 알려진 물질이다.Physiological activity of aspartic acid has been reported to improve chronic fatigue and induce antibody production. It is also known to be effective in maintaining the health of the nervous system and removing excess ammonia from the liver.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 피부상태 개선은 자외선보호효과, 피부저색소증 개선, 발모 촉진인 것을 특징으로 하는 조성물을 말한다.According to a preferred embodiment of the present invention, the improvement of the skin condition refers to a composition characterized by an ultraviolet ray protecting effect, skin hypochlorite improvement, hair growth promotion.
본 발명의 피부상태 개선용 조성물은 자외선 보호 용도를 갖는다. 본 발명의 조성물은 세포독성도 낮으면서, 자외선으로부터 피부세포를 보호하며 특히 자외선으로부터 피부를 보호하는 기능을 하는 멜라닌세포를 활성화시켜 피부보호 효능을 발휘하며, 이와 같은 사실은 하기의 실시예에 명확하게 기재되어 있다. 본 발명의 조성물의 용도인 자외선 보호 효과는 통상적인 피부 보호용도(피부진정효과, 피부흑화유도 효과, 피부암예방효과)를 포함하는 것으로 해석된다.The skin condition improving composition of the present invention has an ultraviolet ray protection use. The composition of the present invention exhibits skin protection effect by activating melanocytes that protect skin cells from ultraviolet rays, especially protecting skin from ultraviolet rays while having low cytotoxicity, and this fact is clearly demonstrated in the following Examples. Lt; / RTI > The ultraviolet protection effect, which is the application of the composition of the present invention, is interpreted to include conventional skin protection uses (skin soothing effect, skin blackening inducing effect, skin cancer prevention effect).
또한, 본 발명의 피부상태 개선용 조성물은 피부저색소증 개선 용도를 갖는다. 본 명세서에서 용어 저색소증 개선은 멜라닌 세포나 멜라닌 색소합성 기능에 이상이 생겨 멜라닌 생성이 감소되어 야기되는 백반증, 백모 등의 피부 트러블을 개선하는 작용을 의미한다.In addition, the skin condition improving composition of the present invention has an application for improving skin hypocholality. In the present specification, the term improvement of hypochlorite means an action to improve skin troubles such as vitiligo and white moth caused by abnormal melanin cell or melanin pigment synthesis function and reduced melanin production.
본 발명의 피부 저색소증 개선 조성물에서, 아스파틱산은 인체유래 멜라닌세포의 멜라닌 생성을 증가시키고, 멜라닌 세포의 수지상 돌기의 수와 길이를 증가시키고, 산화적 스트레스로 인한 멜라닌 세포의 세포사를 억제하는 효과를 나타내며, 안정성이 높고, 시간 경과에 따른 성분 함량의 변화가 거의 없으며 피부 자극 유발 등의 부작용이 거의 없다.In the composition for improving dermal hypocholality of the present invention, the aspartic acid increases the melanin production of melanocytes derived from human body, increases the number and length of dendrites of melanocytes, inhibits the cell death of melanocytes due to oxidative stress It has high stability, hardly changes the ingredient content over time, and has little side effects such as skin irritation.
또한, 본 발명의 피부개선용 조성물은 발모 촉진에 매우 효과적으로 작용한다. 본 명세서에서 사용되는 용어 발모 촉진은 당업계에서 이용되는 또 다른 용어 양모 또는 육모 촉진과 동일한 의미를 가진다.
In addition, the composition for skin improvement of the present invention is very effective for promoting hair growth. As used herein, the term hair growth promoting has the same meaning as another term wool or hair growth promotion used in the art.
본 발명의 조성물은 아스파틱산을 유효성분으로 포함하여 면역반응을 조절하는 효과를 가진다. 상세하게는, 유효성분인 아스파틱산은 수지상세포인 KG-1 (Myeloid dendritic cells) 세포의 세포증식을 활성화시키고, 산화적 스트레스에 의한 KG-1 세포의 세포사를 억제한다.The composition of the present invention contains an aspartic acid as an active ingredient and has an effect of regulating an immune response. Specifically, aspartic acid as an active ingredient activates cell proliferation of KG-1 (Myeloid dendritic cells) cells, which are dendritic cells, and inhibits cell death of KG-1 cells by oxidative stress.
따라서, 본 발명의 면역조절용 조성물은 면역반응을 조절하여 예방 또는 치료될 수 있는 다양한 질환, 질병 또는 이상 상태에 적용될 수 있다. 본 발명의 조성물이 면역조절과 관련해서 응용될 수 있는 분야는 노화에 따른 피부면역약화 부분이다. 염증 관련 질환은, 예를 들어, 수포성 유천포창, 반흔성유천포창, 원판성 낭창, 홍반성 루푸스, 건선, 전신성 홍반성 루푸스, 홍반성 루푸스, 알러지 및 아토피를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
Accordingly, the immunomodulating composition of the present invention can be applied to various diseases, diseases or abnormal conditions which can be prevented or treated by modulating the immune response. The field of application of the composition of the present invention in relation to immunomodulation is the part of skin immunity weakening due to aging. Inflammatory diseases include, but are not limited to, pemphigus vulgaris, cicatricial pemphigus, scarred lupus, lupus erythematosus, psoriasis, systemic lupus erythematosus, lupus erythematosus, allergies and atopy.
또한, 본 발명의 조성물의 유효성분인 아스파틱산은 우수한 비만억제효과를 가진다.
In addition, the aspartic acid, which is an active ingredient of the composition of the present invention, has an excellent obesity suppressing effect.
본 발명의 상기 화학식 1의 아스파틱산은 당업계에서 통상적으로 실시되는 치환기의 부가 또는 치환 반응에 의하여 얻어지는 유도체 중 자외선 보호 효과, 피부 저색소증 개선, 발모 촉진, 피부 면역조절효과 및 항비만 효과를 나타내는 유도체를 포함한다는 것은 당업계의 기술 수준을 고려하여 당업자에게 명확하다. 보다 상세하게는, 본 발명에서 유효성분으로 이용되는 아스파틱산은 상기 화학식 1의 화합물뿐만 아니라, 상기 화학식 1의 구조를 핵(nucleus)으로 하여 당업계에 공지된 다양한 치환체 및 치환체 결합 반응을 통하여 얻어진 화학식 1의 유도체도 본 발명의 범위에 포함된다. 예를 들어, 화학식 1에 히드록실기, 할로기, 니트로기 또는 탄소수 1-3의 알킬기가 결합되어도 화학식 1의 아스파틱산과 동일 또는 유사한 효능을 발휘할 것으로 판단되며, 이러한 치환 유도체도 본 발명의 범위에 포함된다.
The aspartic acid of formula (1) of the present invention can be used as an aspartic acid derivative of the present invention for protecting ultraviolet rays, improving skin hypochromatosis, promoting hair growth, controlling skin immunity, and anti-obesity effect among derivatives obtained by substitution or substitution reaction, It is obvious to those skilled in the art in view of the state of the art. More specifically, the aspartic acid used as an active ingredient in the present invention can be obtained not only by the compound of Formula 1 but also by various substituent and substitution reaction known in the art, with the structure of Formula 1 being the nucleus. Derivatives of formula (1) are also included within the scope of the present invention. For example, when a compound having a hydroxyl group, a halo group, a nitro group, or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms is bonded to the formula (1), the same or similar effect as the aspartic acid of the formula (1) .
본 발명의 바람직한 구현예에서, 상기 아스파틱산의 유효성분은 전체 조성물을 기준으로 하여 0.00001 내지 15.0 중량%, 보다 바람직하게는 0.0001 내지 10 중량%, 가장 바람직하게는 0.0001 내지 5 중량%이다. 아스파틱산의 유효성분의 중량이 0.00001 중량% 미만일 때는 피부 관련 효능이 미약하고, 15.0 중량%를 초과하는 경우에는 함량의 증가에 따른 효과의 증가가 매우 미약하고, 제형상의 안정성이 확보되지 않는 문제점이 있다.
In a preferred embodiment of the present invention, the effective component of the aspartic acid is 0.00001-15.0 wt%, more preferably 0.0001-10 wt%, and most preferably 0.0001-5 wt%, based on the total composition. When the weight of the active ingredient of the aspartic acid is less than 0.00001% by weight, the skin-related efficacy is weak. When the weight of the active ingredient is more than 15.0% by weight, the increase in the effect is insignificant, .
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 화장료 조성물이다.According to a preferred embodiment of the present invention, the composition of the present invention is a cosmetic composition.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 아스파틱산 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.The components included in the cosmetic composition of the present invention include components commonly used in cosmetic compositions in addition to aspartic acid as an active ingredient and include conventional additives such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavors, and Carrier.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 영양 크림, 수렴 화장수, 유연 화장수, 로션, 에센스, 영양젤 또는 마사지 크림의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention can be prepared into any of the formulations conventionally produced in the art and can be used as a solution, a suspension, an emulsion, a paste, a gel, a cream, a lotion, a powder, a soap, , Oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation and spray, but is not limited thereto. More specifically, it can be prepared as a nutritional cream, a convergent lotion, a soft lotion, a lotion, an essence, a nutritional gel or a massage cream.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, an animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as the carrier component .
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component. In the case of a spray, in particular, / Propane or dimethyl ether.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a dissolving agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, , 3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan fatty acid esters.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.In the case where the formulation of the present invention is a suspension, a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is an interfacial active agent-containing cleansing, the carrier component may include aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters.
본 발명의 조성물은 약제학적 조성물로 제조될 수 있다.The compositions of the present invention may be prepared with pharmaceutical compositions.
본 발명의 조성물이 약제학적 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본 발명의 약제학적 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체는 제제 시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약제학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.When the composition of the present invention is manufactured from a pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition of the present invention includes a pharmaceutically acceptable carrier. The pharmaceutically acceptable carriers to be contained in the pharmaceutical composition of the present invention are those conventionally used in the formulation and include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, acacia rubber, calcium phosphate, alginate, gelatin, But are not limited to, calcium silicate, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, cellulose, water, syrups, methylcellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. It is not. The pharmaceutical composition of the present invention may further contain a lubricant, a wetting agent, a sweetening agent, a flavoring agent, an emulsifying agent, a suspending agent, a preservative, etc. in addition to the above components. Suitable pharmaceutically acceptable carriers and formulations are described in detail in Remington ' s Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995).
본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 바람직하게는 비경구 투여, 보다 바람직하게는 도포에 의한 국부 투여(topical application) 방식으로 적용된다.The pharmaceutical composition of the present invention can be administered orally or parenterally, and is preferably applied by parenteral administration, more preferably topical application by application.
본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물의 투여량은 성인 기준으로 0.001-100 mg/kg 범위 내이다. 또한 외용제인 경우에는 성인 기준으로 1.0 내지 3.0 ml의 양으로 1일 1회 내지 5회 도포하여 1개월 이상 계속 하는 것이 좋다. 다만, 상기 투여량은 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.The appropriate dosage of the pharmaceutical composition of the present invention may vary depending on factors such as the formulation method, administration method, age, body weight, sex, pathological condition, food, administration time, administration route, excretion rate, . The dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is in the range of 0.001-100 mg / kg on an adult basis. When the composition is an external preparation, it is preferably applied in an amount of 1.0 to 3.0 ml on an adult basis once to five times a day, and continued for 1 month or more. However, the dose is not intended to limit the scope of the present invention.
본 발명의 약제학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액, 시럽제 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 산제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention may be formulated into a unit dose form by formulating it using a pharmaceutically acceptable carrier and / or excipient according to a method which can be easily carried out by a person having ordinary skill in the art to which the present invention belongs. Or by intrusion into a multi-dose container. The formulations may be in the form of solutions, suspensions, syrups or emulsions in oils or aqueous media, or in the form of excipients, powders, powders, granules, tablets or capsules, and may additionally contain dispersing or stabilizing agents.
또한, 본 발명의 조성물은 식품 조성물로 제조될 수 있다.In addition, the composition of the present invention can be manufactured into a food composition.
본 발명의 조성물이 식품 조성물로 제조되는 경우, 유효성분으로서 아스파틱산뿐만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.When the composition of the present invention is prepared as a food composition, it contains not only aspartic acid as an active ingredient, but also components which are ordinarily added at the time of food production, for example, proteins, carbohydrates, fats, nutrients, . Examples of the above-mentioned carbohydrates are monosaccharides such as glucose, fructose, and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose, oligosaccharides and the like; And polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. Natural flavorings such as tau martin and stevia extract (e.g., rebaudioside A and glycyrrhizin) and synthetic flavorings (saccharine, aspartame, etc.) can be used as flavorings.
예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제로 제조되는 경우에는 본 발명의 아스파틱산 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 두충 추출액, 대추 추출액, 감초 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다. For example, when the food composition of the present invention is prepared as a drink, citric acid, liquid fructose, sugar, glucose, acetic acid, malic acid, juice, mulberry extract, jujube extract and licorice extract may be further added in addition to the aspartic acid of the present invention have.
한편, 본 발명의 구체적 실시예에서 아스파틱산에 대한 피부누적 자극시험 결과 아스파틱산은 천연물질로서 인체에 무해한 물질임이 밝혀졌다. 따라서, 본 발명의 아스파틱산은 독성 및 부작용이 거의 없으므로 장기간 사용 시에도 안심하고 사용할 수 있으며, 특히 상기한 바와 같은 화장료, 약제학적 및 식품 조성물에 안전하게 적용할 수 있다.Meanwhile, as a result of the cumulative skin irritation test for aspartic acid in the specific examples of the present invention, it was found that aspartic acid is a harmless substance as a natural substance. Accordingly, since the aspartic acid of the present invention has little toxicity and side effects, it can be safely used even for long-term use, and can be safely applied to cosmetic, pharmaceutical and food compositions as described above.
본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:The features and advantages of the present invention are summarized as follows:
(1) 본 발명의 조성물은 아스파틱산을 유효성분으로 포함한다.(1) The composition of the present invention contains aspartic acid as an active ingredient.
(2) 유효성분인 아스파틱산은 우수한 피부개선 효과를 가지며, 상기 피부개선은 자외선으로부터 피부보호효과, 피부저색소증 개선, 발모 촉진 효과를 포함한다. 아스파틱산은 자외선으로부터 섬유아세포와 각질형성세포를 보호하며, 인체유래 정상 멜라닌세포의 멜라닌 생성과 산화적 스트레스로부터 멜라닌 세포를 보호하는 기전을 통해 우수한 저색소증 개선 효과 및 우수한 발모 촉진 효과를 가진다.(2) The aspartic acid as an active ingredient has an excellent skin improving effect, and the skin improvement includes a skin protecting effect from ultraviolet rays, an improvement of skin hypochromatosis, and a hair growth promoting effect. Aspartic acid protects fibroblasts and keratinocytes from ultraviolet rays and has excellent hypochromatosis improving effect and excellent hair growth promoting effect through a mechanism of protecting melanocytes from melanin production and oxidative stress of normal melanocytes derived from human body.
(3) 유효성분인 아스파틱산은 우수한 면역증진 효과 및 비만 억제 효과를 가진다.(3) The aspartic acid, which is an active ingredient, has excellent immunity enhancing effect and obesity inhibiting effect.
(4) 또한, 세포독성 및 피부 부작용이 없어 화장료, 약제학적 및 식품 조성물에 안전하게 적용할 수 있다.
(4) In addition, it can be safely applied to cosmetic, pharmaceutical and food compositions without cytotoxicity and skin side effects.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명 하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood that both the foregoing general description and the following detailed description are exemplary and explanatory only and are not to be construed as limiting the scope of the present invention. It will be self-evident.
실시예Example 1: One: 아스파틱산의Aspartic 자외선 보호 효과 측정 Measuring Ultraviolet Protection Effect
자외선에 의해 유도된 각질형성세포 (HaCaT), 섬유모세포(Fibroblasts), 피부줄기세포(Epidermal stem cells)의 세포독성을 아스파틱산이 억제할 수 있는지 세포생존력 시험을 통해 평가하였다.Cell viability tests were performed to evaluate whether aspartic acid can inhibit cytotoxicity of ultraviolet-induced keratinocytes (HaCaT), fibroblasts, and epidermal stem cells.
각질형성세포와 인체유래 섬유모세포는 DMEM 기본배지에 페니실린-스트렙토마이신 및 혈청으로 구성된 배지 내에서 배양하였다. 12-well plate에 well당 1×105 개로 접종한 후 5% CO2, 37℃ 하에서 세포가 well 바닥에 약 80 % 이상 부착될 때까지 배양하였다. 자외선 조사 24 시간 전에 아스파틱산을 농도별로 첨가하였다. 자외선 조사군과 비조사군의 무처리군을 대조군으로 준비하였다. 배양액을 PBS로 바꾸어주고 자외선 (UVB 20mJ)을 조사한다. 자외선 조사 후 배양액으로 바꾸어주고 48시간을 더 배양하고 배양 마지막 날 MTT assay를 이용해 세포생존력을 측정하였다. 아스파틱산의 세포보호효과는 하기 표 1에 나타내었다. 표 1에서 보여지듯 아스파틱산은 자외선에 의해 유도된 각질형성 세포와 섬유모세포 및 피부줄기세포의 세포사를 처리농도 의존적으로 억제시키는 효과를 보였다. The keratinocytes and the human fibroblasts were cultured in medium consisting of penicillin-streptomycin and serum in DMEM basic medium. The cells were inoculated in a 12-well plate at 1 × 10 5 cells per well and cultured at 37 ° C in 5% CO 2 until cells were attached to the bottom of the wells at about 80%. Aspartic acid was added by concentration 24 hours before ultraviolet irradiation. UV - irradiated and non - irradiated groups were prepared as a control group. The culture medium is changed to PBS and irradiated with ultraviolet rays (UVB 20 mJ). After irradiation with ultraviolet light, the culture medium was changed to 48 hours, and cell viability was measured by MTT assay on the last day of culture. The cytoprotective effect of aspartic acid is shown in Table 1 below. As shown in Table 1, aspartic acid inhibited ultraviolet-induced keratinocytes, fibroblasts, and cell death of dermal stem cells in a concentration-dependent manner.
무처리군Untreated group
(% of control)Cell survival rate
(% of control)
stem cellsEpidermal
stem cells
실시예Example 2: 2: 아스파틱산에Aspartic acid 의한 by 인체멜라닌Human melanin 세포의 멜라닌 생성 증진효과 측정 Measurement of melanin production enhancing effect of cells
인체 멜라닌세포(melanocyte)를 이용하여 아스파틱산에 의한 멜라닌 생성 효과를 측정하였다. 본 실험은 먼저 Cascade Biologics사로부터 구입한 Human epidermal melanocyte (신생아유래) 세포를 역시 같은 회사에서 구입한 Human Melanocyte Growth supplement를 포함한 Medium 254 배지에서 배양하였. Human epidermal melanocytes를 6-well plate에 well당 2×105 개로 접종한 후 5 % CO2, 37℃ 하에서 세포가 well 바닥에 약 80 % 이상 부착될 때까지 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 시료를 적당 농도로 희석해서 배지에 처리한 후 5% CO2, 37℃ 하에서 이틀에 한 번 배지를 갈아주면서 5일간 배양하였다. 아스파틱산의 농도범위는 세포독성이 없는 1 uM, 10 uM, 100 uM로 결정하였다. 처리가 끝난 후 배지를 제거하고 PBS(phosphated buffer saline)로 세척한 후, 이것을 트립신으로 처리하여 세포를 회수하였다. 회수된 세포는 hematocytometer를 이용하여 세포수를 측정한 후 각 처리 그룹별 세포수를 동수로 맞추어 2 mL 튜브에 나눠담은 뒤 5,000 내지 10,000 rpm으로 10분간 원심분리한 다음 상등액을 제거하여 pellet을 얻었다. 이 세포 pellet을 60℃에서 건조한 후, 10% DMSO가 함유된 1M 수산화나트륨액 100 ㎕를 넣어 60℃ 항온조에서 세포내 멜라닌을 얻었다. 이 액을 가지고 microplate reader로 490 nm에서 흡광도를 측정하여 세포 일정 수당 멜라닌 양을 구하였다. 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.Melanin production by aspartic acid was measured using human melanocytes. Human epidermal melanocyte (newborn-derived) cells purchased from Cascade Biologics were first cultured in Medium 254 medium containing Human Melanocyte Growth supplement purchased from the same company. Human epidermal melanocytes were inoculated in a 6-well plate at 2 × 10 5 cells per well and cultured at 37 ° C in 5% CO 2 until cells were attached to the wells at least 80%. After the culture, the medium was removed, the sample was diluted to a proper concentration, treated with the medium, and incubated at 37 ° C in 5% CO 2 for 5 days while changing the medium every other day. The concentration range of aspartic acid was determined as 1 uM, 10 uM, and 100 uM without cytotoxicity. After the treatment, the medium was removed, washed with PBS (phosphatized buffer saline), and treated with trypsin to recover the cells. The recovered cells were counted using a hematocytometer, and the cell numbers of each treatment group were adjusted to the same number. Then, the cells were transferred to a 2-mL tube, centrifuged at 5,000 to 10,000 rpm for 10 minutes, and the supernatant was removed to obtain a pellet. The cell pellet was dried at 60 ° C, and 100 μl of a 1 M sodium hydroxide solution containing 10% DMSO was added thereto to obtain intracellular melanin in a 60 ° C thermostatic chamber. The amount of melanin per cell constant was determined by measuring the absorbance at 490 nm with a microplate reader. The results are shown in Table 2 below.
표 2에 나타낸 바와 같이, 아스파틱산은 인체유래 멜라닌 세로의 멜라닌 생성을 농도의존적으로 증가시켰다. As shown in Table 2, aspartic acid increased the melanin production of human-derived melanin in a concentration-dependent manner.
(% of control)Melanin contents
(% of control)
실시예Example 3: 3: 아스파틱산에Aspartic acid 의한 by 인체멜라닌Human melanin 세포 보호효과 측정 Measurement of cell protection effect
백반증의 정확한 원인은 밝혀져 있지 않으나 심리적인 스트레스, 정신적인 충격, 일광화상, 사고나 수술 등의 물리적인 외상을 받은 후, 임신, 내부장기 이상이나 기타 질병 후에 생긴 경우가 많이 보고되어 있다. 활성산소인 과산화수소(hydrogen peroxide; H2O2)가 역시 백반증의 원인으로 알려져 있다 (Experimental Dermatology, 17, 139-160, 2008). 멜라닌세포의 칼슘 항상성과 카테콜아민 생성 증가 등으로 표피 내의 과산화수소가 증가하며, 백반증 환자에서는 과산화수소를 제거하는 catalase가 부족해 멜라닌 세포가 활성산소에 쉽게 손상되어 면역학적인 공격대상이 된다(J Invest Dermatol 97:1081-5, 1991). 이런 이론에 근거하여 pseudocatalase 등의 항산화제를 사용하여 백반증의 악화를 막고 병의 호전을 유도하기도 한다. 본 실험에서는 멜라닌 세포에서 H2O2에 의해 유도된 세포사를 아스파틱산이 억제할 수 있는지 세포생존력시험을 통해 알아보았다. Human epidermal melanocytes를 6-well plate에 well당 2×105 개로 접종한 후 5 % CO2, 37℃ 하에서 세포가 well 바닥에 약 80 % 이상 부착될 때까지 배양하였다. 배양 후 H2O2 300uM과 아스파틱산을 농도별로 배지에 처리한 후 5% CO2, 37℃ 하에서 2일간 배양하였다. 배양 마지막 날 MTT assay를 이용해 세포생존력을 측정한 결과 표 3에서 보여지 듯 아스파틱산은 H2O2에 의해 유도된 멜라닌 형성세포의 세포사를 농도 의존적으로 억제시키는 효과를 보였다.Although the exact cause of vitiligo is not known, many cases have been reported after physical trauma such as psychological stress, mental shock, sunburn, accident or surgery, pregnancy, internal organs or other diseases. Active oxygen, hydrogen peroxide (H 2 O 2 ), is also known to cause vitiligo (Experimental Dermatology, 17, 139-160, 2008). In patients with vitiligo, the lack of catalase to remove hydrogen peroxide causes melanin cells to be easily damaged by reactive oxygen species, leading to an immunological attack (J Invest Dermatol 97: 1081 -5, 1991). Based on these theories, antioxidants such as pseudocatalase may be used to prevent the worsening of vitiligo and lead to improvement of the disease. In this experiment, cell viability was examined to determine whether aspartic acid could inhibit H 2 O 2 - induced cell death in melanocytes. Human epidermal melanocytes were inoculated in a 6-well plate at 2 × 10 5 cells per well and cultured at 37 ° C in 5% CO 2 until cells were attached to the wells at least 80%. After incubation, H 2 O 2 300 uM and aspartic acid were added to the culture medium and cultured at 37 ° C in 5% CO 2 for 2 days. As a result of cell viability measurement using MTT assay at the last day of culture, as shown in Table 3, aspartic acid showed a concentration-dependent inhibition of cell death of melanocyte-induced cells induced by H 2 O 2 .
무처리군Untreated group
+ L-+ L-
asparticaspartic
acid-100 acid-100
uMuM
(% of control)Cell viability
(% of control)
실시예Example 4: 4: 아스파틱산의Aspartic 인체 피부에 대한 안전성 확인 실험 Safety test for human skin
4-1. 아스파틱산을 포함한 피부외용제의 제조4-1. Preparation of external skin preparation containing aspartic acid
아스파틱산이 인체피부에도 안전한지 확인하기 위하여, 아스파틱산 및 비타민 C을 함유한 피부외용제를 제조하고 이에 의한 피부 안전성 검증 실험을 수행하였다.In order to confirm that aspartic acid is safe for human skin, a skin external preparation containing aspartic acid and vitamin C was prepared and a skin safety verification experiment was conducted.
아스파틱산과 비타민 C을 함유한 피부외용제는 하기 표 4의 성분함량으로 제조하였다. 하기 표 4에서 대조군은 티로시나제 저해제를 포함하지 않은 피부외용제이며, 각각 시험군 1과 시험군 2는 아스파틱산과 비타민 C을 포함한 피부외용제이다.Skin external preparations containing aspartic acid and vitamin C were prepared with the ingredient contents shown in Table 4 below. In Table 4 below, the control group is an external preparation for skin which does not contain a tyrosinase inhibitor. Test group 1 and test group 2 are external preparations for skin including aspartic acid and vitamin C, respectively.
피부외용제 제조를 위하여, 정제수, 글리세린, 부틸렌글리콜을 혼합하고 70℃ 에서 용해하였으며(수상파트), 상기 세 성분과 트리메탄올아민을 제외한 나머지 성분을 70℃에서 용해하였다(유상파트). 상기 오일파트를 수상파트에 첨가하고 호모믹서(일본 Tokushu Kika사)로 교반하여 1차 유화하였고, 여기에 트리메탄올아민을 최종 첨가하였다. 혼합액에 생성된 기포를 제거한 후, 실온으로 냉각시켜 피부외용제를 제조하였다.For the preparation of external preparation for skin, purified water, glycerin, and butylene glycol were mixed and dissolved at 70 캜 (water part), and the other components except for trimethanolamine were dissolved at 70 캜 (oil part). The oil part was added to the water-based part, and the mixture was firstly emulsified by stirring with a homomixer (Tokushu Kika, Japan), and trimethanolamine was finally added thereto. After the bubbles generated in the mixed solution were removed, the mixture was cooled to room temperature to prepare an external preparation for skin.
4-2. 피부누적 자극 시험4-2. Skin Cumulative Stimulation Test
상기 실시예 4-1에서 제조한 각 피부외용제를 사용하여 건강한 30명의 성인을 대상으로 윗팔뚝 부위에 격일로 총 9회의 24시간 누적첩포를 시행하는 것에 의하여 아스파틱산이 피부에 자극을 주는지의 여부를 측정하였다.Using the skin external preparations prepared in Example 4-1, a total of 9 times 24 hour cumulative patches were applied to 30 healthy adults in the upper forearm every other day to determine whether aspartic acid stimulates the skin Were measured.
첩포 방법은 핀 챔버(Finn chamber, Epitest Ltd, 핀란드)를 이용하였다. 챔버에 상기 각 피부외용제를 15ul씩 적하한 후 첩포를 실시하였다. 매회 피부에 나타난 반응의 정도를 아래의 공식을 이용하여 점수화 하였으며, 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다.A pin chamber (Finn chamber, Epitest Ltd, Finland) was used as the deposition method. 15 [mu] l of each of the external preparations for skin was dropped into the chamber, followed by applying a patch. The degree of skin reaction on each occasion was scored using the following formula, and the results are shown in Table 5 below.
(실험식 1)(Empirical formula 1)
평균반응도=[[(반응지수×반응도)/(총피검자수×최고점수(4점))]×100]/검사회수(9회)Average response rate = [[(Reaction index × reactivity) / (total number of subjects × highest score (4 points))] × 100] / number of tests (9 times)
이 때, 반응도에서 ±는 1점, +는 2점, ++는 4점의 점수를 부여하며, 평균반응도가 3 미만일 때 안전한 조성물로 판정하였다.At this time, ±, 1, 2, and ++ were given a score of ±, 1, and 4, respectively, and a safe composition was determined when the average degree of reaction was less than 3.
상기 표 5에서 시험군 1의 경우, ±, +, ++에 해당하는 사람의 수가 각각 2명, 0명, 0명이었고, 그 외 나머지는 반응이 나타나지 않았다. 상기 기재된 식에 따라 계산하면 [(1×2)/(30×4)]×100/9 = 0.18로 평균 반응도가 3 이하가 되어 안전한 조성물로 판단되었다. In Table 5, in test group 1, the numbers of persons corresponding to ±, +, and ++ were 2, 0, and 0, respectively. (1 × 2) / (30 × 4)] × 100/9 = 0.18, and the average degree of reaction was 3 or less.
상기 표 5에 기재된 바와 같이, 아스파틱산(시험군 1)를 포함한 피부외용제는 대조군이나 비타민 C을 포함한 피부 외용제와 같이 뚜렷한 누적자극 양상을 나타내지 않았으며 인체 피부에 안전한 물질로 판정되었다.
As shown in Table 5, the external preparation for skin including aspartic acid (test group 1) did not exhibit a clear cumulative irritation pattern as in the control group or the external preparation for skin including vitamin C, and was judged to be safe for human skin.
실시예Example 5: 5: 아스파틱산에Aspartic acid 의한 수지상 세포 증식 효과 및 보호효과 Effect of dendritic cell proliferation and protective effect
KG-1은 ATCC사로부터 구입하였고 혈청을 20% 포함하는 EMEM배지를 이용해 배양하였다. 인체유래 수지상 세포인 KG-1 (Human Myeloid dendritic cells)를 혈청 1%를 포함하는 배지에 배양하고 아스파틱산을 농도별로 처리하여 아스파틱산이 세포생존능에 미치는 효과를 관찰하였다. KG-1 was purchased from ATCC and cultured with EMEM medium containing 20% serum. Human-derived dendritic cells, KG-1 (Human Myeloid dendritic cells), were cultured in a medium containing 1% serum, and aspartic acid was treated at different concentrations to observe the effect of aspartic acid on cell viability.
KG-1의 1×105 개를 12 웰 플레이트(well plate)에 접종한 후, 과산화수소 (H2O2) 300μM과 아스파틱산을 농도별로 처리한 후 72시간 배양하였다. 시험 마지막날 MTT 용액을 전체부피의 10% 되게 넣어주고 3시간 반응 뒤 O.D 값을 측정하여 백분율로 환산하였다. 하기 표 6에 나타낸 바와 같이, 아스파틱산 단독처리군에서 KG-1의 세포증식이 농도의존적으로 증가하였고, 과산화수소에 의해 유도된 KG-1의 세포사를 억제하는 효과를 보여주었다. 1 × 10 5 of KG-1 were inoculated into a 12-well plate, treated with 300 μM of hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) and aspartic acid by concentration, and cultured for 72 hours. On the last day of the test, the MTT solution was added to 10% of the total volume. After 3 hours of reaction, the OD value was measured and converted into a percentage. doing As shown in Table 6, the cell proliferation of KG-1 was increased in a concentration-dependent manner in aspartic acid alone treatment group, and inhibited the cell death of KG-1 induced by hydrogen peroxide.
무처리군Untreated group
+ L-aspartic acid-100 + L-aspartic acid-100
uMuM
(% (%
ofof
controlcontrol
))
실시예Example 6: 6: 아스파틱산에Aspartic acid 의한 by 항비만Anti-obesity 효과 effect
비만억제시험은 일반적으로 잘 알려진 동물을 이용한 하기 방법으로 실시하였다. 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다.The obesity inhibition test was generally carried out by the following method using well-known animals. The results are shown in Table 7 below.
비만억제활성의 측정방법은 다음과 같다:Methods for measuring obesity-inhibiting activity are as follows:
Crj : 생후 7주된 ICR 계 수컷 마우스(챨스리버, 일본)를 1주일 동안 예비사육하고 1군 7마리로 실험에 사용하였다. 동물은 온도 23±1℃, 습도 55±5%, 조명시간 12시간/일(day)로 설정된 항온항실에서 사육하고, 사료에 라보MR(일본농산공업 제조)을 사용하며 물은 자유롭게 섭취할 수 있도록 하였다. 아스파틱산은 0.1% 와 1%가 되도록 리포좀제형(레시틴 5%에 녹인 것)으로 제조하였다. 각 시료 용액은 마우스 10 g당 0.1 ml 투여되도록 농도를 조정하여 투여량을 1.5 g/kg과 1 g/kg으로 하였다. 또한, 대조군은 5% 레시틴 에멀젼으로 하였다. 마우스는 투여하기 전날부터 절식(絶食) 상태로 하여 다음날 강제로 단회(單回) 투여하였다. 시험기간은 2주일로 하고 체중 및 일반증상을 측정 및 관찰하였다.Crj: Seven week old ICR male mice (Charles River, Japan) were preliminarily fed for one week and used in the experiment with 7 mice per group. The animals were housed in a thermostatic chamber set at a temperature of 23 ± 1 ° C, a humidity of 55 ± 5% and an illumination time of 12 hours / day, and Labo MR (manufactured by Nihon Agric. Respectively. Aspartic acid was prepared in liposome formulations (dissolved in 5% lecithin) to 0.1% and 1%. Each sample solution was administered at a dose of 1.5 g / kg and 1 g / kg by adjusting the concentration to 0.1 ml per 10 g of the mouse. In addition, the control group was a 5% lecithin emulsion. The mice were fasted from the day before administration to the next day for a single administration. The test period was 2 weeks and body weight and general symptoms were measured and observed.
리포좀제형Aspartic acid
Liposome formulation
상기 표 7에 기재된 바와 같이, 아스파틱산은 비만억제 효과를 나타내었고, 투여 농도가 높아질수록 그 효능이 증가됨을 관찰할 수 있었다.
As shown in Table 7, the aspartic acid showed an obesity-suppressing effect, and it was observed that the higher the dose, the more effective it was.
실시예Example 7: 7: 아스파틱산에Aspartic acid 의한 by HairHair folliclefollicle dermaldermal papillarpapillar 세포 보호효과 Cytoprotective effect
본 발명에 따른 아스파틱산의 육모 효과를 in vitro 조건에서 알아보기 위하여, 하기의 실험을 수행하였다.In order to examine the hair growth effect of aspartic acid according to the present invention in vitro, the following experiment was conducted.
Hair follicle dermal papillar cell에서 아스파틱산이 함유된 무혈청 배지에 배양하여 이들 세포생존능에 미치는 효과를 관찰하였다. Hair follicle dermal papillar cell은 Cell Application 사로부터 구입하였고 Hair Follicle Dermal Papilla Cell Growth Medium (Cell Apllications, Inc. USA)배지를 이용해 배양하였다.Hair follicle dermal papillary cells were cultured in serum - free medium containing aspartic acid and their effects on cell viability were observed. Hair follicle dermal papillary cells were purchased from Cell Application and cultured in Hair Follicle Dermal Papilla Cell Growth Medium (Cell Apllications, Inc. USA).
Hair Follicle Dermal Papilla Cell Growth Medium을 이용해 배양한 hair follicle dermal papillar cell 3×105 개를 6 웰 플레이트(well plate)에 접종하여 안착시킨 후, 다음 날 혈청을 제거한 배양액으로 1회 세척한 다음, H2O2와 아스파틱산이 함유된 무혈청 배지에 72시간 배양한 후, 혈청을 제거한 배양액으로 1회 세척한 다음, 10% MTT가 들어있는 무혈청배지로 교체하고 3시간 반응 뒤 O.D 값을 측정하여 백분율로 환산하였다. 하기 표 8에 나타낸 바와 같이, 아스파틱산은 H2O2에 의해 감소된 hair follicle dermal papillar cell의 세포증식을 농도의존적으로 증가시켰다.Hair Follicle Dermal 3 × 10 5 hair follicle dermal papillar cells cultured with Papilla Cell Growth Medium were inoculated on a 6-well plate, and the cells were washed once with the serum-free culture medium, 2 O 2 and aspartic acid for 72 hours, washed once with serum-free culture medium, replaced with serum-free medium containing 10% MTT, and incubated for 3 hours to measure the OD value And converted into percentages. As shown in Table 8 below, aspartic acid increased cell proliferation of hair follicle dermal papilla cells reduced by H 2 O 2 in a concentration-dependent manner.
실시예Example 8: 8: 육모효과Hair growth effect
본 발명에 따른 아스파틱산의 육모 효과에 대하여 알아보기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.In order to examine the hair growth effect of aspartic acid according to the present invention, the following experiment was conducted.
8-1. 발모제 조성물의 제조8-1. Preparation of hair growth inhibitor composition
아스파틱산을 함유한 발모제 조성물은 하기 표 9의 성분 함량으로 하여 하이드로겔 베이스를 제조하였다. 시험군 1 및 2는 각각 아스파틱산을 포함하는 발모제 조성물이다.The hair growth inhibitor composition containing aspartic acid was prepared in the following manner. Test groups 1 and 2 are respectively hair growth inhibitor compositions containing aspartic acid.
8-2. 육모 효과 측정8-2. Measuring hair growth effect
40대에서 60대 후반에 이르는, 모낭이 위축되어 두피가 매끈매끈한 민 대머리성 탈모증 환자, 전형적인 남성탈모증 환자 및 급성 원형탈모증 환자 등 40명을 4개 군으로 나누고, 1군당 10명씩 할당하였다. 상기 1에서 제조한 발모제를 탈모증 환자의 탈모부위에 1일 2회 각각 3씩 6개월간 적용하였다. 1개월 단위로 탈모 및 육모 상태를 관찰하였다. 비교군으로는 시판중인 목시딜(한미약품)을 사용하였으며, 대조군으로는 50% 에탄올만을 적용하였다.Forty patients, ranging from 40s to late 60s, were enrolled in the study, divided into four groups: follicular, hairy scalp hairy baldness, typical male alopecia, and acute alopecia areata. The hair growth inhibitor prepared in the above step 1 was applied to hair loss sites of alopecia patients for 3 days each for 6 months, twice a day. Hair loss and hair growth were observed on a monthly basis. As a comparative group, commercially available Moxidil (Hanmi Pharm) was used and only 50% ethanol was used as a control group.
판정기준은 다음과 같다:The criteria are as follows:
4: 높은 효과 있음 = 신생모가 보임4: High Effective = Newborn Eye
3: 중간 정도의 효과 있음 = 신생모가 보임(솜털)3: moderate effect = newborn eye (fluffy)
2: 약간 효과 있음 = 탈모의 수가 감소함2: slightly effective = reduced number of hair loss
1: 효과 없음 = 전혀 변화가 보이지 않음1: No effect = No change at all
결과는 표 10에 나타내었다.The results are shown in Table 10.
상기 표 10에 나타난 바와 같이, 본 발명의 아스파틱산을 포함하는 발모제를 사용한 탈모증 환자에게서 처치 1개월 또는 2개월째부터 솜털을 비롯한 강모의 신생모가 나타나기 시작하였고, 처치 6개월째에는 50% 이상의 환자에게서 발모 효과가 나타났다. 또한, 신생모가 지속적으로 자라났으며 탈모 현상이 발견되지 않음을 관찰하였다.
As shown in Table 10, newborns of hairy hairs began to appear from one month or two months after treatment with alopecia using a hair growth inhibitor containing aspartic acid of the present invention. At 6 months after treatment, more than 50% . In addition, we observed that newborn babies grew continuously and no hair loss phenomenon was found.
하기에 본 발명의 조성물을 위한 제제예를 예시한다.Examples of formulations for the composition of the present invention are illustrated below.
제제예 1 : 화장료 제제Formulation Example 1: Cosmetic preparation
1. 유연화장수 (함량 : 중량%) 1. Flexible life (content:% by weight)
아스파틱산 0.01Aspartic acid 0.01
글리세린 3.0Glycerin 3.0
부틸렌 글리콜 2.0Butylene glycol 2.0
프로필렌 글리콜 2.0Propylene glycol 2.0
카복시비닐폴리머 0.1Carboxyvinyl polymer 0.1
에탄올 10.0Ethanol 10.0
트리에탄올아민 0.1Triethanolamine 0.1
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량정제수 잔량Preservative, trace pigment, trace flavor and trace amount of purified water
총계 100.0
Total 100.0
2. 영양화장수 (함량 : 중량%)2. Nourishing lotion (content:% by weight)
아스파틱산 0.01Aspartic acid 0.01
밀납 4.0Beeswax 4.0
폴리소르베이트 60 1.5Polysorbate 60 1.5
소르비탄세스퀴올레이트 0.5Sorbitan sesquioleate 0.5
유동파라핀 5.0Liquid paraffin 5.0
스쿠알란 5.0Squalane 5.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 5.0Caprylic / Capric Triglyceride 5.0
글리세린 3.0Glycerin 3.0
부틸렌 글리콜 3.0Butylene glycol 3.0
프로필렌 글리콜 3.0Propylene glycol 3.0
카복시비닐폴리머 0.1Carboxyvinyl polymer 0.1
트리에탄올아민 0.2Triethanolamine 0.2
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량정제수 잔량Preservative, trace pigment, trace flavor and trace amount of purified water
총계 100.0
Total 100.0
3. 영양크림 (함량 : 중량%)3. Nourishing cream (content:% by weight)
아스파틱산 0.01Aspartic acid 0.01
밀납 10.0Wax 10.0
폴리소르베이트 60 1.5Polysorbate 60 1.5
소르비탄세스퀴올레이트 0.5Sorbitan sesquioleate 0.5
유동파라핀 10.0Liquid paraffin 10.0
스쿠알란 5.0Squalane 5.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 5.0Caprylic / Capric Triglyceride 5.0
글리세린 5.0Glycerin 5.0
부틸렌 글리콜 3.0Butylene glycol 3.0
프로필렌 글리콜 3.0Propylene glycol 3.0
트리에탄올아민 0.2Triethanolamine 0.2
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량정제수 잔량Preservative, trace pigment, trace flavor and trace amount of purified water
총계 100.0
Total 100.0
4. 맛사지 크림 (함량 : 중량%)4. Massage cream (content:% by weight)
아스파틱산 0.01Aspartic acid 0.01
밀납 10.0Wax 10.0
폴리소르베이트 60 1.5Polysorbate 60 1.5
소르비탄세스퀴올레이트 0.8Sorbitan sesquioleate 0.8
유동파라핀 40.0Liquid paraffin 40.0
스쿠알란 5.0Squalane 5.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 4.0Caprylic / Capric Triglyceride 4.0
글리세린 5.0Glycerin 5.0
부틸렌 글리콜 3.0Butylene glycol 3.0
프로필렌 글리콜 3.0Propylene glycol 3.0
트리에탄올아민 0.2Triethanolamine 0.2
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량정제수 잔량Preservative, trace pigment, trace flavor and trace amount of purified water
총계 100.0
Total 100.0
5. 팩 (함량 : 중량%)5. Pack (content:% by weight)
아스파틱산 0.01Aspartic acid 0.01
폴리비닐알콜 13.0Polyvinyl alcohol 13.0
소듐카복시메틸셀룰로스 0.2Sodium carboxymethylcellulose 0.2
알란토인 0.1Allantoin 0.1
에탄올 5.0Ethanol 5.0
노닐페닐에테르 0.3Nonyl phenyl ether 0.3
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량정제수 잔량Preservative, trace pigment, trace flavor and trace amount of purified water
총계 100.0
Total 100.0
제제예 2 : 약학적 제제Formulation Example 2: Preparation of a pharmaceutical preparation
1. 산제의 제조1. Manufacturing of powder
아스파틱산 2gAspartic acid 2 g
유당 1gLactose 1g
상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
The above components were mixed and packed in airtight bags to prepare powders.
2. 정제의 제조2. Preparation of tablets
아스파틱산 100 Aspartic acid 100
옥수수전분 100 Corn starch 100
유 당 100 100 per 100
스테아린산 마그네슘 2 Magnesium stearate 2
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
After mixing the above components, tablets were prepared by tableting according to a conventional method for producing tablets.
3. 캡슐제의 제조3. Preparation of capsules
아스파틱산 100 Aspartic acid 100
옥수수전분 100 Corn starch 100
유 당 100 100 per 100
스테아린산 마그네슘 2 Magnesium stearate 2
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.After mixing the above components, the capsules were filled in gelatin capsules according to the conventional preparation method of capsules.
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- 2014-08-25 KR KR1020140110514A patent/KR101536871B1/en active IP Right Grant
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