KR101470919B1 - The manufacturing method for oat-based feedstuff using bio-reaction - Google Patents

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Abstract

귀리를 원료사료로 하여 곡물 사료를 가공하는 방법으로서, (a) 원료사료로서 귀리를 제공하는 단계; (b) 귀리를 침지하는 단계; (c) 증자하는 단계; (d) 균주를 접종하여 발효하는 단계; (e) 효소처리를 행하는 단계; 및 (f) 건조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물 사료의 가공방법이 개시된다. 본 발명은 귀리를 사료원료로 하는 단미사료를 제조함에 있어서 최적의 효소처리 및 발효처리 조건을 밝힌 것으로서, 호화도 및 유리당의 함량이 증가되고, 가축에서의 소화율 및 성장을 개선하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료에 관한 것이며, 이를 배합사료에 혼합하여 급이할 수 있다.A method of processing cereal feed using oats as feedstock, comprising the steps of: (a) providing oats as a feedstock; (b) immersing the oats; (c) a step of capitalizing; (d) inoculating and fermenting the strain; (e) performing an enzyme treatment; And (f) a step of drying the oat grain feed. The present invention discloses optimal enzymatic treatment and fermentation treatment conditions in preparing a dietary feedstuff containing oats as feedstuffs, and is characterized in that the content of starch and free sugars is increased and digestibility and growth in livestock are improved It is about oat grain feed, which can be mixed with the feed to feed.

Description

바이오 리액션을 이용한 귀리를 원료로 하는 사료곡물의 가공방법{THE MANUFACTURING METHOD FOR OAT-BASED FEEDSTUFF USING BIO-REACTION}BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a method for processing a feed grain using oat as a raw material,

본 발명은 귀리를 원료로 하는 곡물사료의 가공방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로는, 귀리를 원료로 하는 곡물사료의 가공방법으로서, 증자공정, 발효공정 및 효소공정을 포함하는 것을 특징으로 하는 곡물사료의 가공방법에 관한 것이다. 더 나아가서는, 귀리를 원료로 하는 곡물사료의 가공방법으로서, 최적의 발효조건 및 효소처리조건을 갖는 것을 특징으로 한 곡물사료의 가공방법에 관한 것이다. 또한, 이와 같은 가공방법에 의하여 제조된 귀리 곡물사료로서 호화도 및 유리당의 함량이 증가되고, 가축에서의 소화율 및 성장을 개선하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료에 관한 것이다.The present invention relates to a method for processing cereal feed made from oats. More specifically, the present invention relates to a method for processing a cereal grain feed containing oats as a raw material, which comprises a thickening step, a fermentation step and an enzyme step. Further, the present invention relates to a method for processing a grain feed using oats as a raw material, and a method for processing a grain feed having an optimum fermentation condition and an enzyme treatment condition. The present invention also relates to an oat grain feed characterized in that the content of starch and free sugar as an oat grain feed produced by such a processing method is increased and digestibility and growth in livestock are improved.

최근 곡물의 재배환경 및 기후 온난화에 의한 식량 수급 불안정 등으로 인한 곡물가의 상승으로 과거에 비해 생산성의 개선을 위한 보다 효율적 기능을 갖는 원료의 요구가 늘어나고 있다. 국내에서 생산되는 원료 중 에너지 공급원으로 사용되고 있는 곡류의 경우 수입의존도가 80%이상에 달하고 있으며, 특히 양돈 사료에 있어 가장 이상적인 에너지 원료라 할 수 있는 옥수수, 소맥, 귀리는 배합 사료 원료의 50~70%를 차지하는 곡물로서 원료의 이용성을 높일 수 있는 사료의 가공방법이 필요하다.In recent years, there has been an increase in the demand for raw materials having more efficient functions for improving productivity compared to the past due to the increase in grain prices due to the grain growing environment and the unstable supply and demand of food due to the warming of the climate. In the case of cereals used as an energy source among domestic raw materials, import dependency is more than 80%. Especially, corn, wheat and oats, which are ideal energy sources for pig feed, It is necessary to process feeds that can increase the availability of raw materials as grains that account for%.

한편, 이 중, 귀리는 줄기가 곧고 분열이 많아 조사료로서의 가치가 보리와 밀보다 높고 가축의 기호성이 다른 맥종보다 우수한 것으로 알려져 있다. 귀리의 성분으로는 라이신 등 필수아미노산이 높으며 타작물의 경우 단백질 함량과 라이신은 반비례 하나 귀리의 경우 라이신 함량은 단백질 함량과 관계없이 일정하다. 귀리는 Globulin이 70~80% 정도 차지하며 Prolamin 함량은 낮은 편이다. 또한 지방 함량이 4~12%로 다른 화곡류보다 높으며 Palmitic, Oleic, Linoleic acid 등이 약 95%정도 차지하며 75~80%가 불포화지방산이다.On the other hand, it is known that oats are superior to barley and wheat, which have a straight stem and a large number of cleavage. The oat ingredient is high in essential amino acids such as lysine. In the case of other crops, protein content is inversely proportional to lysine, but in oats, lysine content is constant regardless of protein content. Globulin accounts for 70 ~ 80% of oats and the content of prolamin is low. In addition, the fat content is 4 ~ 12% higher than other grain, and about 95% of Palmitic, Oleic and Linoleic acid are 75 ~ 80% unsaturated fatty acids.

이유자돈 사료내 귀리를 첨가할 경우 귀리의 면역증강물질인 베타글루칸이 이유후 스트레스, 설사 및 폐사를 예방하는 효과를 나타내게 된다 (Mand Spieler, 1997; Kyriakis et al., 1999). 특히, 일반 귀리보다 발효시 베타글루칸의 함량이 옥수수나 보리에 비해 높아지게 되고 또한 발효귀리의 프로스타 글라딘 성분으로인해 염증을 조절하며 자돈의 성장을 촉진시키는 효과가 있다고 보고되고 있다.When oats are added to weaned diets, beta-glucan, an oat immunity enhancer, is effective in preventing post-stress, diarrhea and mortality (Mand Spieler, 1997; Kyriakis et al., 1999). In particular, it is reported that the content of beta-glucan is higher than that of corn or barley when fermented from general oats, and that the content of probastadine in fermented oats controls the inflammation and promotes the growth of piglets.

한편, 사료를 제조하는 종래 기술과 관련하여서는, 사료원료에 특정 미생물을 접종해서 발효시키는 방법 또는 사료원료에 효소를 혼합하여 효소처리를 행하거나 특정 효소가 추가된 사료를 제조하는 방법등이 알려져 있었으나, 이들은 특정한 사료원료에 초점을 맞추었다고 하기보다는, 각종 곡물원료의 혼합물 또는 식품 찌꺼기등을 사료원료로 하는 것이었다. On the other hand, in connection with the prior art for producing feeds, there has been known a method of inoculating a feedstock with a specific microorganism by inoculation and fermenting the feedstock, or a method of mixing an enzyme into a feedstock to perform an enzyme treatment or producing a feed supplemented with a specific enzyme , Rather than focusing on specific feedstuffs, they used a mixture of various cereal raw materials or food debris as feedstuffs.

그런데, 원료사료의 가공방법과 관련하여서는, 각 원료사료에 존재하는 특성이 모두 다르기 때문에, 이를 정확히 파악하여 그에 적합한 가공방법을 개발하는 것이 중요한데, 위에서 설명한 바와 같이, 종래 기술은 원료사료의 특성을 고려한 가공방법이라고 하기 보다는, 구체적인 원료사료를 특정하지 아니한 채, 다양한 종류의 원료들을 혼합한 상태에서 발효 또는 효소처리를 행하고 있었고, 따라서, 특정 원료사료, 보다 구체적으로는, 귀리를 원료사료로 하여 곡물단미사료를 제조할 때에 있어서의 최적의 가공조건을 밝히는 문헌은 보고된 바 없다.However, in relation to the method of processing the raw feed, it is important to accurately grasp the characteristics of each raw feed as it exists, and to develop a suitable processing method. As described above, according to the prior art, The fermentation or the enzymatic treatment is carried out in a state in which various kinds of raw materials are mixed without specifying the specific raw material feed rather than the considered processing method and thus the specific raw material feed and more specifically the oat is used as the raw material feed No literature has been reported to identify the optimum processing conditions in the production of grain-feed diets.

한국공개특허공보 제10-2010-0126849호Korean Patent Publication No. 10-2010-0126849 일본공개특허공보 특개평 08-256699호Japanese Patent Application Laid-Open No. 08-256699 일본공개특허공보 특개2005-130820호Japanese Patent Application Laid-Open No. 2005-130820 일본공개특허공보 특개평11-514240호Japanese Patent Application Laid-Open No. 11-514240 일본공개특허공보 특개평06-70693호Japanese Patent Application Laid-Open No. 06-70693

이에, 본 발명에서는, 귀리를 사료원료로 하는 곡물사료의 가공방법으로서, 사료원료의 특성을 반영하여 이에 최적화된 곡물사료의 가공방법을 제공하는 것을 해결하고자 하는 과제로 한다. 세부적으로는, 귀리에 포함되어 있는 난소화성 탄수화물을 분해할 수 있는 효과적인 수단 및 조건이 확립된 곡물사료의 가공방법이 제공되며; 효소처리공정과 고체발효공정을 활용하여 최적의 가공조건을 갖는 곡물사료의 가공방법이 제공되고; 대량생산 공정에 적합한 곡물사료의 가공방법이 제공된다. Accordingly, in the present invention, as a processing method of a grain feed using oats as a feedstuff, it is an object of the present invention to provide a method for processing a grain feed optimized for the characteristics of the feedstuff. Specifically, there is provided a method for processing grain feed in which effective means and conditions for decomposing indigestible carbohydrates contained in oats are established; There is provided a method of processing a grain feed having optimal processing conditions utilizing an enzyme treatment process and a solid fermentation process; A method of processing grain feed suitable for mass production processes is provided.

나아가, 상기 방법에 의하여 제조된 곡물사료로서 원료사료의 영양소의 구성 및 생리적 기능물질을 최적화되어 포함된 것을 특징으로 하는 곡물사료를 제공하는 것을 또 다른 과제로 한다. Further, it is a further object to provide a grain feed comprising the nutrient composition and the physiologically functional substance of the feed as optimized as the grain feed produced by the above method.

이와 같은 과제를 해결하기 위해서, 본 발명에서는 하기와 같은 해결 수단을 제공한다. In order to solve such a problem, the present invention provides the following solution means.

즉, 본 발명에서는, 귀리를 원료사료로 하여 곡물 사료를 가공하는 방법으로서, That is, in the present invention, as a method for processing a grain feed using oats as a raw material feed,

(a) 원료사료로서 귀리를 제공하는 단계;(a) providing oats as a feedstuff;

(b) 귀리를 침지하는 단계;(b) immersing the oats;

(c) 증자하는 단계; (c) a step of capitalizing;

(d) 균주를 접종하여 발효하는 단계;(d) inoculating and fermenting the strain;

(e) 효소처리를 행하는 단계; 및(e) performing an enzyme treatment; And

(f) 건조하는 단계(f) drying step

를 포함하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물 사료의 가공방법을 제공한다.A method for processing an oat grain feed is provided.

또한, 상기 귀리 곡물사료의 가공방법에 있어서, (c) 귀리를 증자하는 단계는 80~150℃에서 20~60분간 증자하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료의 가공방법을 제공한다.Also, in the method for processing the oat grain feed, (c) the step of growing oats is carried out at 80 to 150 ° C for 20 to 60 minutes.

또한, 상기 귀리 곡물사료의 가공방법에 있어서, (d) 발효하는 단계는, Bacilluse subtilis 1-6CX, B. subtilis 1-12CX, B. subtilis 2-19CX, B. subtilis P11, Aspergillus oryzae GB-641, A. niger GB-124 및 A. niger GB-X2으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 균주를 접종하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료의 가공방법을 제공한다. Also, the method comprising: according to the processing method of the oat grain feed, (d) fermenting, Bacilluse subtilis 1-6CX, B. subtilis 1-12CX, B. subtilis 2-19CX, B. subtilis P11, Aspergillus oryzae GB-641, A. niger GB-124 and A. niger A strain selected from the group consisting of GB-X2 is inoculated.

또한, 상기 귀리 곡물사료의 가공방법에 있어서, (d) 발효하는 단계는, 20~40℃에서 24~48시간 발효하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료의 가공방법을 제공한다.Further, in the method for processing the oat grain feed, (d) the step of fermenting comprises fermenting at 20 to 40 ° C for 24 to 48 hours.

또한, 상기 귀리 곡물사료의 가공방법에 있어서, (e) 효소처리를 행하는 단계는 Arabanase, Cellulase, Beta-glucanase, Hemicellulase, Xylanase, Endo-glucanase, Alpha-amylase 및 glucoamylase로 이루어지는 군으로부터 선택되는 효소를 사용하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료의 가공방법을 제공한다.In addition, in the method for processing the oat grain feed, (e) the step of performing the enzyme treatment includes an enzyme selected from the group consisting of Arabanase, Cellulase, Beta-glucanase, Hemicellulase, Xylanase, Endo-glucanase, Alpha-amylase and glucoamylase A method for processing an oat grain feed is provided.

또한, 상기 귀리 곡물사료의 가공방법에 의해서 제조한 귀리 곡물사료로서, 유리당의 함량이 14.0mg/g 이상인 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료가 제공된다.Also, an oat grain feed prepared by the above-described processing method of oat grain feed, wherein the content of free sugar is 14.0 mg / g or more.

또한, 상기 귀리 곡물사료의 가공방법에 의해서 제조한 귀리 곡물사료로서, 상기 귀리 곡물사료는 알칼린 포스파타아제, 크리스틴아릴아미다아제, 트립신, 나프톨-AS-BI-포스포하이드롤라아제, N-아세틸-β-글루코사민다아제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 효소를 포함하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료를 제공한다.In addition, the oat grain feeds prepared by the above-described processing method of oat grain feeds include oat grain feeds such as alkaline phosphatase, cristin arylamidase, trypsin, naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, N -Acetyl-beta-glucosamine diacid. ≪ / RTI >

또한, 상기 귀리 곡물사료의 가공방법에 의해서 제조한 귀리 곡물사료로서, 상기 귀리 곡물사료는 Bacilluse subtilis 1-6CX, B. subtilis 1-12CX, B. subtilis 2-19CX, B. subtilis P11, Aspergillus oryzae GB-641, A. niger GB-124 및 A. niger GB-X2으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 균주가 원료표면에 존재하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료를 제공한다.Also, as the oat grain feed prepared by the above-mentioned processing method of oat grain feed, the oat grain feed is Bacilluse subtilis 1-6CX, B. subtilis 1-12CX, B. subtilis 2-19CX, B. subtilis P11, Aspergillus oryzae GB-641, A. niger GB-124 and A. niger And GB-X2 is present on the surface of the raw material.

본 발명에 의하여, 가축의 에너지 이용성 증대를 위한 친환경 사료자원 개발을 위해 귀리를 사료원료로 하는 고체발효 공정이 개시된다. 귀리의 난분해성 다당류의 분해정도를 알 수 있는 간접지표로서 고체발효시 유리당을 최대한 생성할 수 있는 균주들이 선별되어 최적의 발효 조건이 확립된다. 본 발명의 가공방법으로 가공된 귀리 곡물사료는 가공전의 사료원료에 비해 호화도 및 유리당의 함량이 증가하였으며 유용 미생물균수와 효소활성이 관찰 되어 생리적 기능이 개선된 원료로 전환되고, 가축의 이용성이 증대된 사료 자원으로 이용 될 수 있다. 또한 본 발명에 의한 귀리 곡물사료는 원료의 표면에 존재하는 GRAS 균주들이 높은 개체수로 존재하기 때문에 probiotics로서의 기능도 기대할 수 있다. 또한, 배합사료에 있어서, 본 발명에 의한 귀리 곡물사료로 귀리를 대체하는 경우, 가수분해된 탄수화물, 단백질 등의 영양소를 가장 효율적으로 흡수할 수 있는 기회를 제공함과 동시에 발효과정에서 생성된 대사물질의 공급을 통해 돼지의 소화생리적 활성을 원활하게 함으로써 궁극적으로 성장을 개선하는 효과를 가져온다. 또한, 본 발명의 귀리 곡물사료는 영양소의 소화율을 개선해주고, 장내 미생물 서식환경을 정상적으로 유지함으로써 이상 대사를 유도하지 않고 정상적인 균총을 유지함으로써 원활한 대사 과정을 유도할 수 있다. 또한, 배합사료에 있어서, 본 발명의 귀리 곡물사료로 귀리 첨가량의 일부 또는 전부를 대체하는 경우, 생산성이 향상되므로 대체가 가능하며, 이에 의하여 이유자돈 및 육성돈의 생산성이 향상되는 효과가 있다. According to the present invention, a solid fermentation process using oats as a feedstuff is disclosed in order to develop eco-friendly feed resources for enhancing energy utilization of livestock. As an indirect indicator of the degree of decomposition of defatted polysaccharides in oats, strains capable of producing the most free sugars upon solid fermentation are selected and optimal fermentation conditions are established. The oat grain feed processed by the processing method of the present invention has an increased degree of gelatinization and free sugar content compared to the raw feed materials before processing and is converted into a raw material having improved physiological functions by observing the number of useful microorganisms and enzyme activity, Can be used as an increased feed resource. Also, the oat grain feed according to the present invention can be expected to function as probiotics because the GRAS strains present on the surface of the raw material are present in high numbers. In addition, in the case of replacing oats with the oat grain feed according to the present invention in the formulated feed, it is possible to provide the opportunity to absorb nutrients such as hydrolyzed carbohydrates and proteins most efficiently, And thus the digestive physiological activity of the pig is smoothly provided, thereby ultimately improving the growth of the pig. In addition, the oat grain feed of the present invention improves the digestibility of the nutrients and maintains the intestinal microbial habitat environment normally, thereby inducing a smooth metabolic process by maintaining the normal microflora without inducing the abnormal metabolism. In addition, in the case of replacing some or all of the added amount of oats with the oat grain feed of the present invention in the formulated feed, the productivity can be improved and the substitution is possible, thereby improving the productivity of the progeny pigs and breeding pigs.

도 1은 귀리의 최적 발효를 위한 균주 선발실험을 나타내는 도이다.
도 2는 초기 수분 함량에 따른 B. subtilis 2-19CX에 의한 귀리의 발효 영향을 나타내는 도이다.
도 3은 초기 접종 균수에 따른 B. subtilis 2-19CX에 의한 옥수수의 발효 영향을 나타내는 도이다.
도 4는 귀리의 최적 발효를 위한 균주 선발을 나타내는 도이다.
도 5는 초기 수분 함량에 따른 A. niger GB-124 균주에 의한 귀리의 발효 영향을 나타내는 도이다.
도 6은 초기 접종 균수에 따른 A. niger GB-124 균주에 의한 귀리의 발효 영향을 나타내는 도이다.
도 7은 발효 귀리의 pilot scale 생산 공정중의 변화를 나타내는 도이다.
도 8은 귀리에 대한 최적의 가공 조건을 나타내는 도이다.
도 9는 대량 생산 공정을 나타내는 도이다.
도 10은 귀리의 대량 가공 생산 공정중의 변화(발효후 효소 처리공정)를 나타낸다.
1 is a diagram showing a strain selection test for optimum fermentation of oats.
2 is a graph showing the effect of B. subtilis 2-19CX on the fermentation of oats according to the initial moisture content.
FIG. 3 is a graph showing the effect of corn fermentation by B. subtilis 2-19CX on the number of initial inocula.
4 is a diagram showing a strain selection for optimal fermentation of oats.
FIG. 5 is a graph showing the effect of A. niger GB-124 on the fermentation of oats according to the initial moisture content.
FIG. 6 shows the effect of A. niger GB-124 strain on the fermentation of oats according to the number of inoculated bacteria.
FIG. 7 is a graph showing changes in the pilot scale production process of fermented oats. FIG.
8 is a diagram showing optimum processing conditions for oats.
9 is a diagram showing a mass production process.
Fig. 10 shows changes in the mass production process of oats (enzyme treatment process after fermentation).

본 발명은 귀리를 사료원료로 한 곡물사료의 가공방법에 관한 것이다. 귀리는 양돈에 있어서 사료원료로 널리 사용되고 있는 곡물이지만, 펜토산, 셀룰로오스, 펙틴등의 비전분성 다당류(Non Starch Polysaccharide)가 포함되어 있고, 이들 비전분성 다당류는 돼지 체내에서 거의 소화되지 않는 특성을 보인다. 또한, 전분, 단백질 및 지방의 소화율을 저하시키고, 증체량 감소 및 건강상태 악화등의 영향을 줄 수 있으므로, 항영양인자로서 작용하며, 소화기내의 점성을 증가시킬 수 있고, 이로 인하여 가축의 소화기관에서 생산된 효소들의 작용을 저해하고 영향소의 흡수를 감소시킨다. 따라서, 상기 NSP를 분해할 수 있는 단일 효소제 또는 복합제의 사용이 제안되어 오기는 왔지만, NSP는 다양한 사료원료, 즉, 옥수수, 귀리, 소맥, 대두박등의 식물성 사료원료에 따라서 그 종류와 함량이 각기 상이하므로, 특정한 원료사료에 따라서 보다 세밀하게 조절된 가공방법이 절실하게 요구되고 있는 실정이다. 이에, 본 발명자들은, 귀리에 함유되어 있는 NSP의 종류 및 그 함량을 비롯하여 호화도 및 유리당의 함량등을 규명한 후, 이에 적합한 최적의 가공방법을 개발함으로서, 사료원료에 물리적, 화학적, 기능적 변화가 발생한다는 지견을 얻어 본 발명에 이르게 되었다.The present invention relates to a method for processing a grain feed using oats as a feedstuff. Oats are grains widely used as feedstuffs in pigs, but they contain non-starch polysaccharides such as pentose, cellulose, and pectin, and these non-oligosaccharide polysaccharides are almost non-digestible in pigs . In addition, it can reduce starch, protein and fat digestibility, reduce weight gain and deteriorate health condition, so that it acts as an anti-inflammatory agent and can increase the viscosity in the digestive tract, Inhibits the action of enzymes and reduces the absorption of influenza. Therefore, although the use of a single enzyme or a complex capable of decomposing the NSP has been proposed, the NSP can be classified into various feed materials such as corn, oats, wheat, soybean meal, Therefore, a more finely controlled processing method is desperately required according to a specific raw material feed. Accordingly, the inventors of the present invention have studied the kind and content of NSP contained in oats, the degree of gelatinization and the content of free sugars, and then developed an optimal processing method suitable for this purpose. Thus, physical, chemical and functional changes And thus the present invention has been achieved.

즉, 본 발명자들은, 사료원료로 사용되는 때의 귀리의 각종 특성을 규명한 후, 귀리를 사료원료로 하여 곡물사료로 가공할 때에 미치는 여러 가지 요소들, 예를 들면, 입자도, 가수량, 침지시간 및 증자조건을 비롯하여, 최적의 효소처리공정, 최적의 발효처리공정을 개발함으로서, 호화도 및 유리당(released glucose)의 함량의 변화 및 유용 미생물 증가 및 효소활성의 보유등에서 뛰어난 곡물사료를 개시한다. 즉, 본 발명은, 다양한 사료원료들을 혼합하거나 또는 식품찌꺼기등을 대상으로 하여 범용적인 효소처리 또는 발효처리를 행하는 일반적인 사료의 제조방법이 아닌, 귀리라는 특정의 사료원료를 대상으로 한 특정한 가공방법임에 유의하여야 한다. That is, the inventors of the present invention have found out various characteristics of oats when they are used as feedstuffs, and then various factors affecting the processing of oats as feedstuffs into cereal feeds, such as particle size, By developing the optimal enzymatic treatment process and optimal fermentation process including immersion time and growth conditions, it is possible to develop excellent grain feeds in terms of the degree of hydrolysis and the content of released glucose, the increase of useful microorganisms, do. That is to say, the present invention is not limited to a method for producing general feeds, in which various feedstuffs are mixed or a general enzyme treatment or fermentation treatment is performed on food waste or the like, but a specific processing method for specific feedstuffs called oats .

본 발명의 가공방법은 귀리를 원료사료로 하여 곡물 사료를 가공하는 방법으로서, (a) 원료사료로서 귀리를 제공하는 단계; (b) 귀리를 침지하는 단계; (c) 증자하는 단계; (d) 귀리 발효에 적합한 균주를 접종하여 발효하는 단계; (e) 효소처리를 행하는 단계; 및 (f) 건조하는 단계를 포함한다. 이하, 각각의 단계에 대해서 설명한다. A processing method of the present invention is a method for processing a grain feed using oats as a feedstock, comprising the steps of: (a) providing oats as a feedstock; (b) immersing the oats; (c) a step of capitalizing; (d) inoculating and fermenting a strain suitable for oat fermentation; (e) performing an enzyme treatment; And (f) drying. Hereinafter, each step will be described.

원료사료로서 귀리를 제공하는 단계에 대해서 설명한다. The step of providing oats as a raw material feed will be described.

본 발명에서는, 귀리를 원료사료로 한 곡물사료의 가공방법을 세밀하게 조정하기 위해서, 귀리의 일반성분, 생리적 항영양인자(Non starch polysaccharide, NSP), 총에너지(Gross energy, GE), 아미노산을 분석하였다. 특히 사료영양소의 이용률을 저해하는 세포막 구성을 성분별로 집중 분석함으로서 가축의 이용성이 높은 사료자원 가공기술 개발을 위한 기본 자료로 활용하고 사료자원내의 NSP 분석을 위한 재현성이 우수한 분석방법을 정립하였다. 또한, 귀리 이외에도, 국내 배합사료에 주로 사용되는 원료로 소맥, 소맥피, 대두박, 옥수수에 대해서도 분석을 행하였는데, 이는 각 사료원료에 따라 가공조건이 달라져야 함을 밝히기 위한 것이다. 그 결과는 후술하는 실시예 1의 표 1 및 표2에 나타내었는데, 이에 의하면, 곡물사료의 종류에 따라서, 존재하는 NSP의 종류 및 그 함량이 각각 다르며 또한 총 에너지도 각기 상이함을 알 수 있다. 따라서, 단일 사료원료로 제조하는 단미사료의 경우, 원료사료의 종류에 따라서 그 특성을 반영한 최적의 가공조건이 필요하게 됨을 이해할 수 있다. 본 발명은, 이와 같은 지견에 따라서, 귀리를 사료원료로 할 때의 최적의 가공조건을 밝힌 것에 유의할 필요가 있다. In the present invention, in order to finely adjust the processing method of a grain feed using oats as a raw material feed, a general component of oats, a nonstarch polysaccharide (NSP), a total energy (Gross energy, GE) Respectively. Especially, by analyzing the composition of cell membranes that inhibit the utilization of feed nutrients, the analysis method was applied to the development of high - availability animal feed processing technology and the reproducible analysis method for NSP analysis in feed resources. In addition to oats, the analysis of wheat, wheat bran, soybean meal, and corn as raw materials mainly used in domestic feedstuffs was conducted to clarify that processing conditions should be changed according to each feedstuff. The results are shown in Tables 1 and 2 of Example 1, which will be described later. According to this, it can be seen that the kind and content of NSPs present are different from one another and the total energy is also different depending on the type of grain feed . Therefore, it can be understood that, in the case of a short-term feed made from a single feed, the optimum processing conditions are required depending on the kind of the feed. It should be noted that, in accordance with this finding, the present invention clarifies the optimum processing conditions when oats are used as feed materials.

다음으로 침지공정 및 증자공정에 대해서 설명한다.Next, the immersion process and the thickening process will be described.

침지공정은 사료원료로 제공된 귀리에 실온에서 물을 가하여 귀리의 호화도를 증가시키는 공정이며, 증자공정은 침지공정 후 일정시간 열을 가하는 공정이다. 본 발명에서는, 침지공정과 증자공정을 동시에 채택하고 있으며, 실제의 대량생산공정에 있어서 상업적으로 이용가능한 최적의 조건을 제공한다. 침지공정에서의 물의 양 및 침지시간에 따라서 귀리의 호화도가 변화하게 되는데, 이와 같은 침지시간이 길어질수록 호화도는 증가하지만 침지시간이 너무 길어지는 경우 공정이 지연되는 단점이 있다는 점을 고려하여 최적의 침지조건을 밝혀내었다. 또한, 침지공정은 주로 실온에서 행해지지만, 그 온도를 상승시키는 경우 침지시간을 단축할 수 있다. The immersion process is a process for increasing the degree of gelatinization of oats by adding water at room temperature to the oats provided as feedstuffs, and the process for adding the heat is a process for heating for a certain period of time after the immersion process. In the present invention, the immersion step and the thickening step are adopted at the same time, and they provide an optimum condition commercially available in an actual mass production process. The degree of gelatinization of oats changes according to the amount of water and the immersion time in the immersion process. Considering that there is a disadvantage that the process is delayed when the immersion time is too long, And the optimum immersion condition was revealed. In addition, although the immersion process is mainly performed at room temperature, the immersion time can be shortened when the temperature is raised.

본 발명에서는 귀리 가공을 위해 가수량이 원료대비 20 ~ 45%이며, 증자온도가 100~121℃가 바람직하다. 즉, 100℃, 30분간 열처리를 통해 가공한 경우 수분함량 45%에서 최대 호화도는 78.7%로 나타났고, 100℃, 30분간 열처리 공정에서는 가수량 40% 이상에서 80% 이상의 호화도를 나타내었다. 다만, 이상의 조건에서는 가공조건후 약간의 뭉침현상이 발생되었는데, 121℃, 30분 열처리 공정에서는 수분함량 35%에서 호화도가 80% 이상으로 대량생산공정에서 공정 문제없이 적용 가능한 수분함량으로 귀리 가공을 위한 최적 가공조건임이 확인되었다.In the present invention, the amount of hydrolyzate is preferably 20 to 45% by weight based on the raw material for the oat processing, and the boiling temperature is preferably 100 to 121 占 폚. That is, the maximum degree of gelatinization was found to be 78.7% at a moisture content of 45% when it was heat treated at 100 ° C. for 30 minutes. In the heat treatment process at 100 ° C. for 30 minutes, the degree of gelatinization was 80% . However, under the above conditions, slight aggregation occurred after the processing conditions. In the heat treatment process at 121 ° C for 30 minutes, the moisture content was 35% and the degree of gelatinization was 80% or more. In the mass production process, It was confirmed that the optimum processing conditions were obtained.

다음으로 발효공정에 대해서 설명한다.Next, the fermentation process will be described.

사료원료의 발효를 위해 사용된 균주들은 xylanase, cellulase 활성이 우수하며 amylase와 protease를 발현하는 균주들로 Bacilluse subtilis 1-6CX[기탁번호 : KCCM 11091P ], B. subtilis 1-12CX[기탁번호 KCCM 11090P ], B. subtilis 2-19CX[기탁번호 KCCM 11089P ], B. subtilis P11[기탁번호 ], Aspergillus oryzae GB-641[기탁번호 KCCM 11190P ], A. niger GB-124[기탁번호 KCCM 11189P], A. niger GB-X2[기탁번호 KCCM 11127P]로 이루어지는 군으로부터 선택되는 균주일 수 있다. 이들 균주는 부숙된 호두과육, 과수원 토양, 낙엽토, 식당가 폐수, 염소 분변등에서 채취한 3000여개의 균주중 균주의 효소활성에 대한 기준으로 기질의 분해도에 기초하여 평가하여 최종적으로 선발한 것이다. 발효공정은 사료원료에 대한 침지공정 및 증자공정이 완료된 후, 35℃이하로 냉각시킨 후, 선발된 균주를 접종 후 초기 균수가 1.0X 103~1.2×106 cfu/g이 되도록 접종한다. 발효시간을 24~48시간으로 설정하고 배양온도 20~40℃, 습도 50~80%의 조건으로 원료 두께를 1~1.5cm가 되게 하여 호기발효를 진행할 수 있다. 사료원료로서의 가치를 증가시키기 위해서는 우선적으로 난소화성 물질인 NSP의 함량이 감소되어야 하는데 이를 위해서는 선별한 균주의 NSP를 분해하는 효소의 발현을 최대한 유도하여야 한다. 따라서 발효 공정 후의 NSP 분해 지수로서 유리된 당의 함량을 기준으로 위 발효조건을 확립한 것이다. The strains used for the fermentation of feedstuffs were xylanase, cellulase activity, and strains expressing amylase and protease. Bacilluse subtilis 1-6CX [Accession No .: KCCM 11091P], B. subtilis 1-12CX [Accession No. KCCM 11090P], B. subtilis 2-19CX [Accession No. KCCM 11089P], B. subtilis P11 [Accession No.], Aspergillus oryzae GB-641 [Deposit No. KCCM 11190P], A. niger GB-124 [Deposit No. KCCM 11189P], A. niger GB-X2 (Accession No. KCCM 11127P). These strains were finally selected based on the degree of degradation of the substrate as a criterion for the enzyme activity of more than 3,000 strains collected from composted walnut pulp, orchard soil, litter soil, restaurant wastewater and chlorine feces. After fermentation process is completed, the fermentation process is cooled to 35 ℃ or less after the immersion process and the thickening process are completed, and the selected strain is inoculated so that the initial number of bacteria is 1.0 × 10 3 to 1.2 × 10 6 cfu / g after inoculation. The fermentation time can be set to 24 to 48 hours, the fermentation can be carried out with the raw material thickness being 1 to 1.5 cm under the conditions of the culture temperature of 20 to 40 ° C and the humidity of 50 to 80%. In order to increase the value as a feedstock, the content of NSP, which is an indigestible substance, should be decreased. To this end, the expression of the enzyme that degrades NSP of the selected strain should be maximally induced. Therefore, the fermentation conditions were established based on the content of the saccharide liberated as the NSP degradation index after the fermentation process.

한편, 원료의 호화정도에 따라서도 가축에 급이 시 소화 및 영양소 이용성에 영향을 미치므로 증자 후 발효공정 중 원료의 수분함량에 따라 발효 과정 중 호화도 변화도 참작하여 위 발효조건을 확립하였다. 따라서 귀리 발효공정 확립을 위해서는 초기 수분함량 역시 매우 중요하며, 이와 같은 초기 수분함량은 발효조건 뿐 아니라 곡류의 이용성의 지표가 되는 호화도에도 영향을 주는 요소로서 발효 및 건조공정에 따른 영향을 최소화 할 수 있는 최적 수분함량을 추가로 찾아야 한다. 이를 위해 발효 배지인 귀리의 초기 수분함량을 30~70%로 달리하여 수분함량에 따른 호화도, 유리 당, xylanase 활성 및 미생물 균수를 분석한 바, 초기 수분함량이 높을수록 호화도는 증가하는 경향을 나타내었으며, 반면 xylanase 활성 및 유리당 함량은 초기수분함량이 50% 까지는 증가하였고 그 이상의 조건에서는 완만하게 증가하는 경향을 나타내었다. 호화도 증가를 위해서는 수분 함량이 70% 수준까지도 처리하여 가공을 할 수 있으나 과도한 수분 첨가는 대량 생산 공정에 적용 시 원료의 점성 증가, 원료의 뭉침 발생, 원료 이송중 막힘등의 문제가 예상될 수 있어 발효공정을 통한 NSP 분해 능력이 최대로 나타나는 수분 함량을 최적의 수분 조건으로 선정하는 것이 바람직하며, 따라서, 초기 수분함량을 50%로 조절하는 것이 바람직하다. On the other hand, depending on the degree of liquefaction of raw materials, the feeding effect on the livestock affects the digestion and nutrient availability. Therefore, the fermentation condition was established by considering the degree of hydrolysis during fermentation depending on the moisture content of the raw material during the fermentation process. Therefore, the initial moisture content is also very important for establishing the oat fermentation process, and this initial moisture content is a factor affecting not only the fermentation condition but also the degree of gelatinization which is an index of the utilization of the cereal, The optimum moisture content should be found. For this purpose, the degree of gelatinization, free sugar, xylanase activity and microbial counts according to the moisture content was analyzed by varying the initial moisture content of the oat, which is a fermentation medium, by 30 to 70%. The higher the initial moisture content, While the xylanase activity and free sugar content increased up to 50% in the initial moisture content and gradually increased in the above conditions. In order to increase the degree of aging, it is possible to process up to 70% of the water content. However, excessive water addition may cause problems such as viscosity increase of raw materials, clustering of raw materials and clogging of raw materials when applied to mass production process Therefore, it is preferable to select the moisture content that maximizes the NSP degradation ability through the fermentation process as the optimal moisture condition, and therefore, it is preferable to adjust the initial moisture content to 50%.

또한, 고체발효에서 초기 균주 접종량 역시 발효에 있어서 중요한 요소이다. 초기 균수가 너무 낮을 때에는 원하지 않는 다른 균에 의한 오염의 빈도가 증가할 수 있으며 반대로 단일 면적당 너무 높은 개체수로 존재 시에는 경쟁관계로 되어 증식 및 효소발현 보다는 개체를 유지하는 대사활동으로 energy flux가 진행되며 또한 대량생산시 종균 수급문제가 발생한다. 따라서 최적 종균 접종량을 결정하기 위해 초기 균주 접종량의 범위를 다른 균의 성장 및 대량 생산시의 종균 공급량 등을 고려하여 최소 1.0 × 103 cfu/g에서 최대 1.0 × 106 cfu/g으로 종균 접종량을 달리할 수 있으며, 가장 바람직하게는 1.0 × 103 cfu/g일 때 가장 높은 xylanase 활성과 유리당 함량이 된다. In addition, the initial strain inoculum in solid fermentation is also an important factor in fermentation. When the initial number of bacteria is too low, the frequency of contamination by other undesirable bacteria may increase. On the other hand, when the population is too high per single area, the energy flux becomes competitive due to competition and metabolism activity In addition, the problem of supply and demand of seeds occurs in mass production. Therefore, in order to determine the optimum inoculum size, the range of inoculum size of the initial strain should be set at 1.0 × 10 3 cfu / g at the maximum and 1.0 × 10 6 cfu / g at the maximum, And most preferably at 1.0 × 10 3 cfu / g, the highest xylanase activity and free sugar content are obtained.

발효시간에 있어서는, 즉, 유리당의 함량과 xylanase의 활성을 고려하여 평가하였을 때, 24 시간 내지 48시간이 바람직하다. When the fermentation time is evaluated in consideration of the content of free sugar and the activity of xylanase, it is preferably from 24 hours to 48 hours.

이하, 효소처리공정에 대해서 설명한다.Hereinafter, the enzyme treatment process will be described.

본 발명의 효소처리공정에는, Arabanase, Cellulase, Beta-glucanase, Hemicellulase, Xylanase, Endo-glucanase, Alpha-amylase 및 glucoamylase로 이루어지는 군으로부터 선택되는 효소를 사용할 수 있다.. 본 효소처리공정에서는, 이들 효소를 단독으로 사용할 수 있고, 또한, 조합하여 복합효소로 사용할 수 있다. 예를 들면, 예를 들면, Arabanase, Cellulase, Beta-glucanase, Hemicellulase, Xylanase등으로 포함하는 복합효소(이하 NSP-VS라 한다), Endo-glucanase를 포함하는 단일효소(이하 NSP-CE라 한다), Beta-glucanase, Cellulase, Alpha-amylase, Xylanase를 포함하는 복합효소(이하 NSP-VF라 한다) 및 Glucoamylase를 포함하는 단일효소(이하 NSP-SP라한다)로서 사용할 수 있다. An enzyme selected from the group consisting of Arabanase, Cellulase, Beta-glucanase, Hemicellulase, Xylanase, Endo-glucanase, Alpha-amylase and glucoamylase can be used in the enzyme treatment process of the present invention. Can be used alone or in combination as a complex enzyme. For example, a single enzyme (hereinafter referred to as NSP-CE) containing a complex enzyme (hereinafter referred to as NSP-VS) and Endo-glucanase, which includes, for example, Arabanase, Cellulase, Beta-glucanase, Hemicellulase, Xylanase, (Hereinafter, referred to as NSP-SP) containing a complex enzyme (hereinafter referred to as NSP-VF) and Glucoamylase, which comprises Beta-glucanase, Cellulase, Alpha-amylase and Xylanase.

효소제의 사용을 위한 최적 온도로서는, 최적 온도범위는 NSP-CE가 50~60℃, NSP-VS 및 NSP-VF가 40~50℃, NSP-SP가 65~75℃이다. 효소처리 공정은 가수 후 침지공정을 효소반응공정으로 대체하고 효소반응 공정 이후 열처리 공정을 통해 귀리 원료 가공조건을 설정하는 것도 가능하다. 즉, 귀리의 침지공정을 효소처리 공정으로 대체하고, 효소반응공정 이후 열처리 공정을 행할 수 있다. 이 경우, 효소처리 조건은 초기 가수량을 조절한 후 효소반응을 위해 온도를 상기 효소반응에 최적한 온도까지 올린 후 효소제를 첨가수준별로 단독 혹은 복합으로 첨가하여 반응시킬 수 있으며, 효소반응의 종료후 증자를 실시할 수 있다. The optimal temperature range for the use of the enzyme is 50 to 60 ° C for NSP-CE, 40 to 50 ° C for NSP-VS and NSP-VF, and 65 to 75 ° C for NSP-SP. In the enzyme treatment process, it is also possible to replace the post-hydration immersion process with an enzyme reaction process, and set the processing conditions of the oat raw material through the heat treatment process after the enzyme reaction process. That is, the oat immersion step can be replaced with an enzyme treatment step, and a heat treatment step can be performed after the enzyme reaction step. In this case, the enzyme treatment may be performed by adjusting the initial amount of the enzyme, raising the temperature to an optimal temperature for the enzyme reaction, adding the enzyme to the reaction mixture individually or in combination, and terminating the enzyme reaction It is possible to carry out a capital increase.

이하 발효공정 및 효소처리 공정의 조합에 대해서 설명한다.Hereinafter, the combination of the fermentation process and the enzyme treatment process will be described.

본 발명의 또 다른 일태는, 귀리를 원료사료로 하여 곡물사료를 가공하는 방법에 있어서, 대량 생산에 적합한 최적의 가공방법을 제공한다는 점이다. 즉, 위에서 설명한 침지조건, 증자조건, 발효조건 및 효소조건에 있어서, 각각의 최적한 조건들이 있으나, 이를 실제의 생산환경에서 비용적인 면 및 설비를 포함하는 기술적인 면까지 고려하였을 때 이들을 서로 유기적으로 연관시킨 보다 최적화된 가공방법을 제공한다. 즉, 본 발명의 특징은, 증자공정과 발효공정과 효소공정의 상관관계를 고려하여 이를 조합함으로서, 유리당의 함량이나 Xylanase의 활성 및 최종 제품에서의 미생물 균수등에 있어서 가장 우수한 제품을 제조할 수 있는 가공방법을 제공하는 것이다.Another aspect of the present invention is to provide an optimum processing method suitable for mass production in a method for processing a grain feed using oats as a raw material feed. That is, when there are optimum conditions for the immersion condition, the fermentation condition, the fermentation condition and the enzyme condition described above, but considering the technical aspects including the cost and the facility in the actual production environment, To provide a more optimized machining method. That is, it is a feature of the present invention that it is possible to produce the best product in terms of the content of free sugars, the activity of Xylanase, and the number of microorganisms in the final product by considering the correlation between the fermentation process and the enzyme process And to provide a processing method.

본 발명자들의 연구에 의하면, 이와 같은 최적의 가공방법은 ‘증자공정, 발효공정 및 효소처리공정’(이하 ‘공정 1’이라 한다), ‘증자공정, 발효공정 및 효소처리공정’(이하 ‘공정 2’라 한다) 또는 ‘효소처리공정, 증자공정 및 발효공정’(이하 공정 3이라 한다)으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 가공방법이다. 즉, 종래 기술에 있어서는, 원료사료에 대해서 효소처리를 하거나 발효시키는 방법이 알려져 있었는데, 본 발명에서는, 이 양자를 특정의 사료원료에 초점을 맞추어 조합한 후, 그 최적의 가공공정을 찾아 내었다는 점에서 특징이 있다. 예를 들면, 본 발명의 상기 공정 2에 있어서의 구체적인 조건은 다음과 같다. 즉, 사료원료인 귀리의 수분을 40~50%로 조절한다. 수분이 조절된 귀리를 약 30분~4시간 침지한 후, 80~150℃에서 20~60분간 증자한 후, 35℃ 이하로 냉각한 후, 초기균수가 1.0×103~1.2×106이 되도록 접종한다. 배양조건은 온도가 20~40℃, 습도가 50~80%, 발효시간을 24~48이 되도록 발효한다. 발효가 종료되었을 때, 효소를 0.1~0.45% 첨가하여 30분 ~1 시간 반응시킨다. 또한, 상기 효소처리공정을 발효공정 전에 하는 것도 가능하다. 이와 같이 가공된 최종 귀리 단미사료는 귀리 원료와 비교하였을 때, 호화도가 350%이상 증가하며, 유리당이 440%이상, 유용미생물이 증가하며 효소활성을 보유한 특성을 갖는다. According to the studies of the inventors of the present invention, such an optimum processing method can be applied to a variety of processing methods such as a process for growing, a fermentation process and an enzyme process (hereinafter referred to as "process 1"), 2 ') or an enzyme treatment process, a thickening process and a fermentation process (hereinafter referred to as process 3). That is, in the prior art, there has been known a method of enzymatically treating or fermenting raw material feeds. In the present invention, however, these two methods have been combined with focusing on specific feed materials, In terms of features. For example, the concrete conditions in the step 2 of the present invention are as follows. That is, the moisture content of oats, which is a feedstock, is controlled to 40 to 50%. After immersing the moisture-controlled oats for about 30 minutes to 4 hours, they were heated at 80 to 150 ° C for 20 to 60 minutes and then cooled to 35 ° C or lower. The initial number of bacteria was 1.0 × 10 3 to 1.2 × 10 6 Inoculate as much as possible. The culture conditions are such that the temperature is 20 to 40 ° C, the humidity is 50 to 80%, and the fermentation time is 24 to 48. When fermentation is over, add 0.1 to 0.45% of enzyme and incubate for 30 minutes to 1 hour. It is also possible to carry out the enzyme treatment step before the fermentation step. The finished oat finished diets thus processed have a degree of gelatinization of more than 350%, a free sugar content of more than 440%, an increase in useful microorganisms, and an enzyme activity, as compared with oat raw materials.

이하, 본 발명의 실시예를 설명한다. 다만, 이하의 실시예는 본 발명의 구체적인 한 태양을 보이는 것으로, 본 발명의 기술사상을 제한하는 것은 아니다.
Hereinafter, embodiments of the present invention will be described. However, the following examples illustrate specific embodiments of the present invention and are not intended to limit the scope of the present invention.

실시예 1 : 사료원료의 제공Example 1: Supply of feed ingredients

AOAC 및 Weende 방법을 이용하여 옥수수, 소맥, 소맥피, 대두박, 귀리를 대상으로 일반성분 및 사료자원에 대한 total pentosan, Pectin, Total NSP 함량을 분석하였다. Total pentosan은 Orcinol-iron 방법, Pectin은 Sadasivan 과 Manickam 방법, 그리고 Total NSP는 Englyst와 Cummings 방법들을 일부 수정하여 분석을 실시하였다.Total pentosan, pectin and total NSP contents of corn, wheat, wheat, soybean meal and oats were analyzed by AOAC and Weende method. Total pentosan was analyzed by Orcinol-iron method, Pectin by Sadasivan and Manickam method, and Total NSP by Englyst and Cummings methods.

사료자원인 소맥, 옥수수, 귀리, 대두박, 소맥피의 gross energy는 Mclean과 Tobin의 방법에 따라 bomb calorimetry로 분석하였으며, 아미노산 함량은 6 N HCl로 사료 샘플을 산 가수분해 후 ninhydrin 반응을 이용하여 측정하고, 황 함유 아미노산은 별도로 performic acid로 산 가수분해 후 ninhydrin반응을 이용하여 아미노산 자동분석기 (Hitachi L-8500)로 분석을 실시하였다. 그 결과는 하기 표 1과 같다.The gross energy of wheat, corn, oats, soybean meal, and wheat bran was analyzed by bomb calorimetry according to Mclean and Tobin 's method. Amino acid content was measured by ninhydrin reaction after acid hydrolysis with 6 N HCl , Sulfur-containing amino acids were separated by acid hydrolysis using performic acid, and analyzed by an amino acid automatic analyzer (Hitachi L-8500) using ninhydrin reaction. The results are shown in Table 1 below.

(%)(%) 옥수수
(USA)
corn
(USA)
소맥
(EU)
Wheat
(EU)
귀리
(Australia)
oat
(Australia)
대두박
(Domestic)
Soybean meal
(Domestic)
소맥피
(Domestic)
Wheat flour
(Domestic)
수분moisture 12.2512.25 11.3711.37 10.3710.37 11.4811.48 11.6811.68 조단백질Crude protein 7.577.57 9.29.2 10.8810.88 49.1749.17 14.4314.43 조섬유소Crude fiber 3.13.1 2.772.77 2.432.43 3.813.81 8.28.2 조지방Crude fat 3.693.69 0.50.5 9.049.04 1.571.57 2.72.7 회분Ash 2.112.11 1.611.61 1.591.59 6.696.69 5.215.21 NFE* NFE * 68.0468.04 74.5574.55 65.6965.69 27.2827.28 57.7857.78

* NFE : (Nitrogen Free Extract)* NFE: (Nitrogen Free Extract)

이어서, 사료원료의 세포막 구성 물질을 이루고 있는 NSP 함량을 알아보기 위해 세포막 구성물질에 대한 분석은 Van Soest 방법과 Updegroff 방법을 이용하였으며, total pentosan, pentose 분석은 Frazer 등 (1956)의 분석방법을 이용하여 분석을 실시하였다. Pectin의 분석에는 Sadasivan 과 Annison (1996)의 분석방법(중량측정법)을 사용하였으며, total NSP함량은 Englyst와 Cummings 방법을 기초로 비색법을 이용하여 사료원료별 total NSP함량을 분석하였다. 그 결과를 표 2에 나타내었다.Then, Van Soest method and Updegroff method were used to analyze the cell membrane constituents, and total pentosan and pentose analyzes were performed using the analytical method of Frazer et al. (1956) Respectively. Pectin was analyzed by Sadasivan and Annison (1996), and total NSP contents were analyzed by using colorimetric method based on Englyst and Cummings method. The results are shown in Table 2.

(%)(%) 옥수수corn 소맥Wheat 귀리oat 대두박Soybean meal 소맥피Wheat flour 펜토산Pentanoic acid 3.95±0.37 3.95 ± 0.37 6.25±0.94 6.25 + -0.94 4.16±0.25 4.16 ± 0.25 4.64±0.88 4.64 ± 0.88 15.02±1.37 15.02 + - 1.37 셀룰로오스cellulose 1.45±0.16 1.45 ± 0.16 1.74±0.12 1.74 + - 0.12 0.80±0.22 0.80 + - 0.22 2.12±0.22 2.12 + -0.22 5.10 ±0.03 5.10 + 0.03 펙틴pectin 2.56±0.75 2.56 ± 0.75 3.72±1.08 3.72 ± 1.08 3.95±0.11 3.95 + 0.11 2.20±0.46 2.20 ± 0.46 8.15±4.31 8.15 ± 4.31 총 NSPTotal NSP 16.60±0.73 16.60 ± 0.73 14.90±2.96 14.90 ± 2.96 25.68±2.32 25.68 + - 2.32 12.59±0.14 12.59 + - 0.14 36.65±0.61 36.65 ± 0.61

이상의 결과로부터, 세포막의 총 NSP 함량은 소맥피에서 36%로 가장 함유량이 높았으며, 귀리에서는 26%를 나타냄을 알 수 있었다. 세포막 구성성분 중 cellulose 함량은 소맥피에서 높게 나타났으며, pentosan 및 pectin 함량도 다른 사료자원에 비해 높은 함량을 나타내었다. From the above results, it was found that the total NSP content of the cell membrane was the highest at 36% in the wheat flour and 26% in the oat flour. The cellulosic content of the cell membranes was higher in the wheat flour than in the other feeds. The content of pentosan and pectin was higher than that of other feed sources.

또한, 이상 사료자원의 총 에너지 분석결과를 하기 표 3에 나타냈다. The results of the total energy analysis of abnormal feed resources are shown in Table 3 below.

사료원료Feedstuff 총에너지 (Kcal/Kg)Total energy (Kcal / Kg) 옥수수corn 4,0184,018 소맥Wheat 4,1044,104 귀리oat 4,6534,653 대두박Soybean meal 4,2424,242 소맥피Wheat flour 4,1644,164

이상으로부터, 곡물사료라고 하여도, 각각의 곡물사료에 존재하는 NSP의 종류 및 총 NSP의 양이 동일하지 않다는 사실을 확인할 수 있다.
From the above, it can be confirmed that the kind of NSP present in each grain feed and the total amount of NSP are not the same even if it is a grain feed.

실시예 2 : 가수량 및 증자조건의 설정Example 2: Setting of the amount of water and the condition of increase

귀리 가공을 위해 가수량을 원료대비 20 ~ 45%로 달리 설정하고, 증자온도를 100~121℃별로 가공을 통한 가공정도를 분석하였다. 100℃, 30분간 열처리를 통해 가공한 경우 수분함량 45%에서 최대 호화도는 78.7%로 나타났났다. 100℃, 30분간 열처리 공정에서는 가수량 40% 이상에서 80% 이상의 호화도를 나타내었다. 121℃, 30분 열처리 공정에서는 수분함량 35%에서 호화도가 80% 이상으로 대량생산공정에서 공정 문제없이 적용 가능한 수분함량으로 귀리 가공을 위한 최적 가공조건이라고 생각되었다. 그 결과를 이하의 표 4(100℃, 30분간 열처리를 통한 가수량에 따른 귀리 호화도 변화), 표 5(110℃, 30분간 열처리를 통한 가수량에 따른 귀리 호화도 변화 ) 및 표 6(121℃, 30분간 열처리를 통한 가수량에 따른 귀리 호화도 변화)에 나타내었다. For the processing of oats, the amount of water was set to 20 ~ 45% of the raw material, and the degree of processing was analyzed by processing the temperature by 100 ~ 121 ℃. The maximum degree of gelatinization was found to be 78.7% when the moisture content was 45% when heat treated at 100 ℃ for 30 min. In the heat treatment process at 100 ℃ for 30 minutes, the degree of gelatinization was 80% or more at a water content of 40% or more. In the heat treatment process at 121 ℃ for 30 min, the moisture content was 35% and the degree of gelatinization was 80% or more. The results are shown in Table 4 below (change in oat strength according to the amount of water through heat treatment at 100 ° C for 30 minutes), Table 5 (change in oat strength according to the amount of water through heat treatment at 110 ° C for 30 minutes) Change in oat strength according to the amount of water through heat treatment at 121 ° C for 30 minutes).

처리구Treatment 가수량(%, w/v)Amount of water (%, w / v) 호화도Luxury degree 증가율(%)Growth rate (%) 1One 20%20% 19.819.8 -- 22 30%30% 21.221.2 7.1 7.1 33 35%35% 56.356.3 184.3 184.3 44 40%40% 68.168.1 243.9 243.9 55 45%45% 78.778.7 297.5 297.5

처리구Treatment 가수량(%, w/v)Amount of water (%, w / v) 호화도Luxury degree 증가율(%)Growth rate (%) 1One 20%20% 37.937.9 -- 22 30%30% 62.162.1 63.9 63.9 33 35%35% 75.375.3 98.7 98.7 44 40%40% 82.282.2 116.9 116.9 55 45%45% 85.585.5 125.6 125.6

처리구Treatment 가수량(%, w/v)Amount of water (%, w / v) 호화도Luxury degree 증가율(%)Growth rate (%) 1One 20%20% 38.138.1 -- 22 30%30% 67.367.3 76.6 76.6 33 35%35% 80.980.9 112.3 112.3 44 40%40% 83.183.1 118.1 118.1 55 45%45% 85.885.8 125.2 125.2

실시예 3 : 발효조건의 설정Example 3: Setting of fermentation conditions

귀리에 적합한 발효 균주를 선별하고자 발효실험을 진행하였다. 사료원료의 영양소 이용성을 저해하는 성분으로 알려져 있는 NSP(Non starch polysaccharide)를 분해하는 지표로서 발효 후 유리되는 glucose 함량을 분석하여 상대적으로 높은 유리된 glucose 함량을 나타내는 균주를 최종 선발하였다. 선발된 균주들은 사료원료의 초기 수분함량, 초기 균주 접종량 별로 최적 조건을 확립하였다.Fermentation experiments were conducted to select suitable fermentation strains for oats. As an index for decomposing NSP (Non Starch polysaccharide), which is known to inhibit the nutrient utilization of feed materials, a strain showing relatively high liberated glucose content was selected by analyzing glucose content liberated after fermentation. The selected strains were optimized for the initial moisture content and initial inoculum amount of feedstuff.

사료원료의 발효를 위해 사용된 균주들은 xylanase, cellulase 활성이 우수하며 amylase와 protease를 발현하는 균주들로서, Bacilluse subtilis 1-6CX, B. subtilis 1-12CX, B. subtilis 2-19CX, B. subtilis P11, Aspergillus oryzae GB-641, A. niger GB-124, A. niger GB-X2이다. 고체발효조건은 수분을 40%로 보정한 사료원료를 30분간 침지한 후 121℃, 30분간 증자하여 35℃이하로 냉각된 사료 원료에 선발균주를 접종 후 초기 균수가 1.2 X 106 cfu/g이 되도록 접종하였다. 총 발효시간을 48시간으로 설정하고 배양온도 30℃, 습도 55%의 조건으로 원료 두께를 1~1.5cm가 되게 하여 호기발효를 진행하였다. 발효후 하기와 같은 방법을 사용하여 Xylanase 활성, 유리당 함량 및 호화도를 구하였다.
Bacillus subtilis 1-6CX, B. subtilis 1-12CX, B. subtilis 2-19CX, B. subtilis P11, and B. subtilis strains were used for the fermentation of feedstuffs. , Aspergillus oryzae GB-641, A. niger GB-124, and A. niger GB-X2. The solid fermentation conditions were as follows: the feed material was adjusted to 40% moisture for 30 minutes, and then cultured at 121 ° C for 30 minutes to inoculate the feedstock cooled to below 35 ° C. The initial number of bacteria was 1.2 × 10 6 cfu / g . The total fermentation time was set to 48 hours, and the raw material was allowed to have a thickness of 1 to 1.5 cm under a condition of a culture temperature of 30 캜 and a humidity of 55%. After fermentation, Xylanase activity, free sugar content and degree of gelatinization were determined by the following methods.

- Xylanase 활성 측정- Xylanase activity measurement

Xylan은 xylanase에 의해 oligosaccharide와 monosaccharide로 분해된다. 이때, 산화기를 갖게 되는 oligosaccharide와 환원기를 갖게 되는 monosaccharide는 boiling bath에서 DNS 시약과 발색 반응을 일으키게 되는데 이 발색 정도를 spectrophotometer로 측정한다. Xylanase 1U는 37℃, pH5.5의 조건에서 5㎎/㎖의 xylan solution으로부터 1μmol의 환원당을 유리시키는 데 필요한 효소의 양으로 정의한다. 간략한 측정방법은 다음과 같다.Xylan is degraded by oligosaccharide and monosaccharide by xylanase. At this time, the oligosaccharide having an oxidizing group and the monosaccharide having a reducing group react with a DNS reagent in a boiling bath, and the degree of color development is measured by a spectrophotometer. Xylanase 1U is defined as the amount of enzyme required to liberate 1 μmol of reducing sugar from 5 mg / ml xylan solution at 37 ° C, pH 5.5. A brief measurement method is as follows.

- 호화도 분석- Luxury analysis

호화도 분석은 식품공전 호화도 분석방법을 이용하여 분석을 실시하였다.
The degree of hydrograph analysis was analyzed using the food grade hydrograph analysis method.

- 유리당 분석- Free sugar analysis

효소처리 가공공정 개발을 위해 효소처리 곡물에 대한 released glucose 함량 분석은 megazyme glucose kit를 이용하여 분석하였다.
Analysis of released glucose content of enzyme treated grains for the development of enzymatic processing process was analyzed using megazyme glucose kit.

실험은 B. subtilis 1-6CX, B. subtilis 1-12CX, B. subtilis 2-19CX을 사용한 1차 실험 및 B. subtilis P11, B. subtilis 2-19CX aspegillus oryzae GB-641, niger GB-124, A. niger GB-X2을 사용한 2차 실험으로 나누어 실시하였다. 1차 실험에 있어서, 3가지 균주 모두 Bacillus 균주로서 귀리 발효에 적합한 균주를 선발하는 과정에서 고체발효조건을 기준으로 효소 발현을 위한 최적 조건을 설정하였다. 이를 위해 초기 수분함량을 50%, 배양온도를 32℃, 배양시간을 48시간으로 설정하여 발효에 대한 지표로 미생물 균수 및 영양소 이용성 증대에 대한 간접지표인 귀리에서 유리된 glucose 함량을 비교 평가하였으며, 그 결과를 도 1에 나타낸다. 도 1에 있어서, 가장 효과가 우수한 것으로 여겨지는 B. subtilis 2-19CX 균주를 이용해서, 초기 수분함량 및 접종 균수별로 조건을 달리하여 최적의 고체발효 조건을 찾고자 고체발효실험을 진행하였다. 사료원료로서의 가치를 증가시키기 위해서는 우선적으로 난소화성 물질인 NSP의 함량이 감소되어야 하는데 이를 위해서는 선별한 균주의 NSP를 분해하는 효소의 발현을 최대한 유도하여야 한다. 따라서 발효 공정 후의 NSP 분해 지수로서 유리된 당의 함량을 기준으로 우선적으로 조건을 탐색하였다. 또한, 원료의 호화정도에 따라서도 가축에 급이 시 소화 및 영양소 이용성에 영향을 미치므로 증자 후 발효공정 중 원료의 수분함량에 따라 호화 후 노화정도에 영향을 미치므로 발효 과정 중 호화도 변화도 조사하였다. 따라서 귀리 발효공정 확립을 위해 가장 우선시되어야 하는 발효 조건은 초기 수분함량으로 발효조건 뿐 아니라 곡류의 이용성의 지표가 되는 호화도에도 영향을 주는 요소로서 발효 및 건조공정에 따른 영향을 최소화 할 수 있는 최적 수분함량을 찾아야 한다. 이를 위해 발효 배지인 귀리의 초기 수분함량을 30~70%로 달리하여 수분함량에 따른 호화도, 유리 당, xylanase 활성 및 미생물 균수를 분석하였다. 그 결과를 도 2에 나타낸다. 도 2에서 보는 바와 같이 초기 수분함량이 높을수록 호화도는 증가하는 경향을 나타내었으며, 특히 초기수분함량이 60% 이상에서는 급격한 호화도의 증가를 확인 할 수 있었다. 반면 xylanase 활성은 50%까지는 급격하게 증가하였으나 그 이상에서는 완만하게 증가하였으며, 유리당 함량은 초기수분함량이 50% 까지는 증가하였으나, 그 이상의 조건에서는 오히려 감소하는 경향을 나타내었다. 호화도 증가를 위해서는 수분 함량이 70% 수준까지도 처리하여 가공을 할 수 있으나 과도한 수분 첨가는 대량 생산 공정에 적용 시 원료 이송공정 등에 문제가 예상될 수 있어 발효공정을 통한 NSP 분해 능력이 최대로 나타나는 수분 함량을 최적의 수분 조건으로 선정하고자 하였다. 귀리의 NSP 분해의 지표인 유리당 함량은 xylansas 역가 변화와 같은 경향을 나타내었으며, xylanase활성과 동일하게 50%가 최적의 수분함량인 것을 확인할 수 있었다. 결과적으로 귀리에서 B. subtilis 2-19CX 균주의 발효를 통해 최대 xylanase 활성 및 최대 유리 당 함량과 최적의 호화도를 얻을 수 있는 수분함량은 40~50%인 것으로 확인되어 고체발효를 위한 최적 수분조건으로 선정하였다. Experiments were carried out in a primary experiment using B. subtilis 1-6CX, B. subtilis 1-12CX, B. subtilis 2-19CX and B. subtilis P11, B. subtilis 2-19CX aspeg illus oryzae GB-641, niger GB-124 , And A. niger GB-X2. In the first experiment, optimal conditions for enzyme expression were determined based on the solid fermentation conditions in the selection of strains suitable for oat fermentation as Bacillus strain in all three strains. The initial moisture content was 50%, the incubation temperature was 32 ℃, and the incubation time was 48 hours. As an index for fermentation, we compared the glucose content liberated from oats, which is an indirect indicator of microbial count and nutrient availability, The results are shown in Fig. 1, the solid fermentation experiment was carried out using the B. subtilis 2-19CX strain, which is considered to be the most effective, to determine the optimal conditions for the solid fermentation under different conditions depending on the initial moisture content and number of inoculated bacteria. In order to increase the value as a feedstock, the content of NSP, which is an indigestible substance, should be decreased. To this end, the expression of the enzyme that degrades NSP of the selected strain should be maximally induced. Therefore, preference was sought on the basis of the content of free sugars as NSP degradation index after the fermentation process. In addition, depending on the degree of liquefaction of the raw materials, it affects the digestion and nutrient utilization of the livestock, and therefore affects the degree of aging after liquefaction depending on the moisture content of the raw material in the post-enhancement fermentation process. Respectively. Therefore, the most important fermentation condition for establishing the oat fermentation process is the initial moisture content, which influences not only the fermentation conditions but also the degree of gelatinization which is an index of the utilization of the cereals. The moisture content should be found. For this purpose, the initial moisture content of oat, which is a fermentation medium, was varied from 30 to 70%, and the degree of hydrolysis, free sugar, xylanase activity and microbial counts were analyzed. The results are shown in Fig. As shown in FIG. 2, the higher the initial moisture content, the higher the degree of gelatinization. Especially, when the initial moisture content was higher than 60%, the increase in the degree of gelatinization was observed. On the contrary, xylanase activity increased rapidly up to 50%, but gradually increased. The free sugar content increased up to 50% in the initial water content, but decreased in the above conditions. In order to increase the degree of hydrolysis, it is possible to process up to 70% of the water content. However, since excessive water addition is expected to cause a problem in the material transfer process when applied to a mass production process, the NSP decomposition ability is maximized through the fermentation process And the water content was selected as the optimal moisture condition. Free sugar, an indicator of NSP degradation of oats, showed the same trend as that of xylansas and 50% of water content was the same as xylanase activity. As a result, the maximum xylanase activity, maximum free sugar content and optimum moisture content of B. subtilis 2-19CX strain in oats were 40 ~ 50% Respectively.

또한, 고체발효에서 초기 균주 접종량은 발효에 있어서 중요한 factor로서 초기 균수가 너무 낮을 때에는 원하지 않는 다른 균에 의한 오염의 빈도가 증가할 수 있으며 반대로 단일 면적당 너무 높은 개체수로 존재 시에는 경쟁관계로 되어 증식 및 효소발현 보다는 개체를 유지하는 대사활동으로 energy flux가 진행된다. 따라서 최적 종균 접종량을 결정하기 위해 초기 균주 접종량의 범위를 다른 균의 성장 및 대량 생산시의 종균 공급량 등을 고려하여 최소 1.0×103 cfu/g에서 최대 1.0×106 cfu/g으로 종균 접종량을 달리하여 발효실험을 진행하하여 그 결과를 도 3에 나타냈다. 그 결과 접종 종균 수준이 낮을수록 xylanase 활성 및 유리당 함량이 증가하는 것을 확인하여 B. subtilis 2-19CX 균주의 초기 종균 접종수준을 1.0×103~1.0X106 cfu/g 으로 설정하였다. In addition, the amount of initial strain in solid fermentation is an important factor in fermentation. When the initial number of bacteria is too low, the frequency of contamination by unwanted other bacteria may increase. On the other hand, And metabolism activity that maintains the individual rather than the expression of the enzyme. Therefore, in order to determine the optimum inoculum size, the range of inoculum size of the initial strain should be set at 1.0 × 10 3 cfu / g at the maximum and 1.0 × 10 6 cfu / g at the maximum, The results of the fermentation experiments were shown in Fig. As a result, it was confirmed that xylanase activity and free sugar content were increased with lower inoculum level, and the initial inoculation level of B. subtilis 2-19CX strain was set to 1.0 × 10 3 to 1.0 × 10 6 cfu / g.

B. subtilis P11, B. subtilis 2-19CX aspegillus oryzae GB-641, niger GB-124, A. niger GB-X2을 사용한 2차 실험에 있어서는, 고체발효 조건인 초기 수분함량 40%, 온도 33℃, 48시간동안 호기발효하여 비교하였고, 그 결과를 도 4에 나타냈다. 발효 후의 미생물 균수는 108 CFU/g 수준으로 유사하였으나 유리된 glucose 함량과 xylanase 활성에서는 A. niger GB-124 균주가 42.7 mg/g, 140 U/g으로 가장 우수한 결과를 나타내었다. A. niger GB-124 균주를 이용하여 초기 수분함량 및 접종 균수별로 조건을 달리하여 최적의 고체발효 조건을 찾고자 고체발효실험을 진행하였다. 사료원료로서의 가치를 증가시키기 위해서는 우선적으로 난소화성 물질인 NSP의 함량이 감소되어야 하는데 이를 위해서는 선별한 균주의 NSP를 분해하는 효소의 발현을 최대한 유도하여야 한다. 따라서 발효 공정 후의 NSP 분해 지수로서 유리된 당의 함량을 기준으로 우선적으로 조건을 탐색하였다. 또한, 원료의 호화정도에 따라서도 가축에 급이 시 소화 및 영양소 이용성에 영향을 미치므로 증자 후 발효공정 중 원료의 수분함량에 따라 발효 과정 중 호화도 변화도 조사하였다. 이를 위해 발효 배지인 귀리의 초기 수분함량을 30~70%로 달리하여 수분함량에 따른 호화도, 유리 당, xylanase 활성 및 미생물 균수를 분석하여 도 5에 나타냈다. 도 5에서 보는 바와 같이 초기 수분함량이 높을수록 호화도는 증가하는 경향을 나타내었으며, 반면 xylanase 활성 및 유리당 함량은 초기수분함량이 45% 까지는 증가하였으나 그 이상의 조건에서는 오히려 감소하는 경향을 나타내었다. 호화도 증가를 위해서는 수분 함량이 70% 수준까지도 처리하여 가공을 할 수 있으나 과도한 수분 첨가는 대량 생산 공정에 적용 시 원료의 점성 증가, 원료의 뭉침 발생, 원료 이송중 막힘등의 문제가 예상될 수 있어 발효공정을 통한 NSP 분해 능력이 최대로 나타나는 수분 함량인 40~50%를 최적의 수분 조건으로 선정하였다. B. subtilis P11, B. subtilis 2-19CX aspeg illus oryzae GB-641, niger GB-124, A. niger In the second experiment using GB-X2, aerobic fermentation was carried out for 48 hours at an initial moisture content of 40%, a temperature of 33 ° C, which is a solid fermentation condition, and the results are shown in FIG. The number of microorganisms after fermentation was similar to the level of 10 8 CFU / g, but the liberated glucose content and xylanase activity were similar to A. niger GB-124 strain showed the best results with 42.7 mg / g and 140 U / g. A solid fermentation experiment was carried out using A. niger GB-124 strain to determine the optimum conditions of solid fermentation by different initial water content and number of inoculated bacteria. In order to increase the value as a feedstock, the content of NSP, which is an indigestible substance, should be decreased. To this end, the expression of the enzyme that degrades NSP of the selected strain should be maximally induced. Therefore, preference was sought on the basis of the content of free sugars as NSP degradation index after the fermentation process. Also, depending on the degree of liquefaction of the raw materials, the feeding of livestock affects digestion and nutrient availability, so the degree of liquefaction of fermentation process was also investigated according to the moisture content of the raw materials during the post fermentation process. For this purpose, the initial moisture content of oat, which is a fermentation medium, was varied from 30 to 70%, and the degree of gelatinization, free sugar, xylanase activity and microbial counts according to moisture content were analyzed and shown in FIG. As shown in FIG. 5, the higher the initial moisture content, the higher the degree of gelatinization. On the other hand, the xylanase activity and the free sugar content increased up to 45% in the initial moisture content, but decreased in the above conditions. In order to increase the degree of aging, it is possible to process up to 70% of the water content. However, excessive water addition may cause problems such as viscosity increase of raw materials, clustering of raw materials and clogging of raw materials when applied to mass production process The optimum moisture content was 40 ~ 50%, which is the maximum moisture content of NSP degradation ability through fermentation process.

또한, 고체발효에서 초기 균주 접종량은 발효에 있어서 중요한 factor로서 초기 균수가 너무 낮을 때에는 원하지 않는 다른 균에 의한 오염의 빈도가 증가할 수 있으며 반대로 단일 면적당 너무 높은 개체수로 존재 시에는 경쟁관계로 되어 증식 및 효소발현 보다는 개체를 유지하는 대사활동으로 energy flux가 진행되며 또한 대량생산시 종균 수급문제가 발생한다. 따라서 최적 종균 접종량을 결정하기 위해 초기 균주 접종량의 범위를 다른 균의 성장 및 대량 생산시의 종균 공급량 등을 고려하여 최소 1.0 × 103 cfu/g에서 최대 1.0 × 106 cfu/g으로 종균 접종량을 달리하여 발효실험을 진행하였고 그 결과를 도 6에 도시하였다. In addition, the amount of initial strain in solid fermentation is an important factor in fermentation. When the initial number of bacteria is too low, the frequency of contamination by unwanted other bacteria may increase. On the other hand, And metabolism activity that maintains the individual rather than the expression of enzymes. Therefore, in order to determine the optimum inoculum size, the range of inoculum size of the initial strain should be set at 1.0 × 10 3 cfu / g at the maximum and 1.0 × 10 6 cfu / g at the maximum, The fermentation experiment was carried out in different ways. The results are shown in Fig.

또한, 위에서 얻은 결과를 기초로 하여, pilot scale (200 ~ 500kg) 에서의 최적 고체발효조건을 확립하기 위해 적정 발효 시간을 조사하고 제조된 고상 발효제품은 사양시험용 사료원료로 사용하여 개발품의 생리적 기능성을 조사하였다. 즉, B. subtilis 2-19CX를 이용하되, 수분을 50%로 보정한 귀리원료 200kg을 30분간 침지한 후 121℃, 30분간 증자하여 35℃이하로 냉각하여 초기 균수가 1.0 X 103 cfu/g이 되게 접종하였다. 배양조건은 온도 35~40℃, 습도 55%, 48시간 호기조건으로 발효하였다. 발효용 귀리 원료의 두께는 2.5~3.0cm가 되게 하여 발효를 진행하였다. 이와 같이 얻어진 발효사료에 대해서, Xylanase 활성, Cellulase 활성, Amylase 활성, Protease 활성, 호화도 및 유리당 함량에 대해서 분석하였다. 그 결과를 도 7에 도시했다. 귀리 원료는 발효공정을 통해 기능성이 개선된 원료로 전환되었으며 최종 시제품은 호화도의 향상, 유리 당의 함량 증가, 유용 미생물 증가 및 효소활성(protease, amylase, xylanase, cellulase) 을 보유한 특성을 가지므로 가축에서의 영양소 이용성이 증대될 수 있는 사료 자원인 것으로 판단된다 (하기 표 7). Based on the results obtained above, the optimum fermentation time was investigated in order to establish the optimal solid fermentation condition on the pilot scale (200 ~ 500kg) and the solid fermented product was used as a feedstock for specification test, Respectively. That is, B. subtilis Using 2-19CX, 200kg of oat raw material adjusted to 50% moisture was immersed for 30 minutes, and then heated at 121 ° C for 30 minutes to cool to below 35 ° C to inoculate 1.0 x 10 3 cfu / g of the initial number of bacteria . The culture conditions were fermentation at 35 ~ 40 ℃, 55% humidity and 48 hours aerobic condition. The fermentation was carried out so that the thickness of the oat raw material for fermentation was 2.5 to 3.0 cm. Xylanase activity, cellulase activity, amylase activity, protease activity, degree of gelatinization and free sugar content were analyzed for the fermented diets thus obtained. The results are shown in Fig. The oat material has been converted to a raw material with improved functionality through the fermentation process. The final product has the characteristics of improving the degree of gelatinization, increasing the free sugar content, increasing the number of useful microorganisms, and possessing the enzyme activity (protease, amylase, xylanase, cellulase) (See Table 7 below).

귀리oat 가공전Before processing 가공후After processing 차이점 (비율 %)Difference (percentage%) 호화도(%)Luxury (%) 23.123.1 80.180.1 346.8346.8 유리당(mg/g)Free sugar (mg / g) 6.36.3 18.218.2 288.9288.9 미생물 (Log cfu/g)Microbes (Log cfu / g) -- 9.09.0 효소활성 (U/g)Enzyme activity (U / g) -- Protease 385.7
Amylase 78.3
Cellulase 788.0
Xylanase 51.0
Protease 385.7
Amylase 78.3
Cellulase 788.0
Xylanase 51.0

추가적으로, 발효가공전후의 화학적특성의 변화를 AOAC 및 Weende 방법을 이용하여 일반성분을 분석하였으며, 총에너지를 Mclean과 Tobin의 방법에 따라 bomb calorimetry로 분석하였다. 그 결과를 하기 표 8및 9에 나타냈다.In addition, the changes of chemical properties before and after the fermentation process were analyzed by AOAC and Weende method, and total energy was analyzed by bomb calorimetry according to Mclean and Tobin method. The results are shown in Tables 8 and 9 below.

(%)(%) 가공전Before processing 가공후After processing 수분moisture 7.157.15 7.907.90 조단백질Crude protein 13.04
(12.64)
13.04
(12.64)
14.66
(14.33)
14.66
(14.33)
조섬유소Crude fiber 2.35
(2.28)
2.35
(2.28)
1.88
(1.84)
1.88
(1.84)
조지방Crude fat 6.75
(6.54)
6.75
(6.54)
8.29
(8.10)
8.29
(8.10)
회분
(DM basis)
Ash
(DM basis)
1.781.78 2.012.01
NFE**
(가용무질소물)
NFE **
(Free nitrogen-free water)
68.9368.93 65.2665.26

총에너지 (Kcal/Kg)Total energy (Kcal / Kg) 가공전Before processing 42934293 가공후After processing 43804380

실시예 4 : 효소처리조건의 설정
Example 4: Setting of enzyme treatment conditions

본 발명의 효소처리공정조건을 설정하기 위하여, Arabanase, Cellulase, Beta-glucanase, Hemicellulase, Xylanase, Endo-glucanase, Alpha-amylase 및 glucoamylase로 이루어지는 군으로부터 선택되는 효소를 사용하였다. 구체적으로, Arabanase, Cellulase, Beta-glucanase, Hemicellulase, Xylanase을 포함하는 효소제(이하 NSP-VS라 한다,Viscozyme (Novozyme)), Endo-glucanase를 포함하는 효소제(이하 NSP-CE라 한다Celluclast 1.5L (Novozyme)), Beta-glucanase, Cellulase, Alpha-amylase, Xylanase를 포함하는 효소제(이하 NSP-VF라 한다Viscoflow MG (Novozyme)) 및 Glucoamylase를 포함하는 효소제(이하 NSP-SP라한다Sprizyme (Novozyme))를 사용하였다. 가공을 위해 사용한 효소제의 최적 온도범위를 NSP-CE (50~60℃), NSP-VS & NSP-VF (40~50℃), NSP-SP (65~75℃)로 단독 혹은 복합 처리를 위한 최적의 온도로 55℃를 설정하였다. 효소처리 조건은 초기 가수량을 원료대비 70% 수준에서 실시하고 효소반응을 위해 온도를 60℃까지 올린 후 효소제를 첨가수준별로 단독 혹은 복합으로 첨가하고 1시간동안 반응을 실시하였다. 반응 종료 후 110℃에서 40분간 증자를 실시하였다. 가공 샘플에 대한 건조 종료 후 호화도, 소화율 분석 및 외관변화의 확인을 통해 적정 효소처리 공정을 확립하였다. 효소제 첨가수준 및 처리조건을 표 10에 나타내었다. Enzymes selected from the group consisting of Arabanase, Cellulase, Beta-glucanase, Hemicellulase, Xylanase, Endo-glucanase, Alpha-amylase and glucoamylase were used to set the enzyme treatment process conditions of the present invention. Specifically, enzymes containing Arabanase, Cellulase, Beta-glucanase, Hemicellulase and Xylanase (hereinafter referred to as NSP-VS, Viscozyme (Novozyme) ) and Endo-glucanase (hereinafter referred to as NSP-CE Celluclast 1.5 L Novozyme)), and Beta-glucanase, La Cellulase, Alpha-amylase, is referred to as an enzyme containing the Xylanase (less than NSP-VF enzyme containing Viscoflow MG (Novozyme)) and Glucoamylase (less than NSP-SP Sprizyme (Novozyme)) Were used. The optimum temperature range of the enzymes used for processing is NSP-CE (50 ~ 60 ℃), NSP-VS and NSP-VF (40~50 ℃) and NSP-SP (65~75 ℃) The optimum temperature was set at 55 캜. The enzymatic treatment was carried out at an initial water content of 70% relative to the raw materials. After the temperature was raised to 60 ° C for the enzyme reaction, the enzymatic agent was added to the reaction mixture, either singly or in combination, for 1 hour. After completion of the reaction, the reaction was carried out at 110 DEG C for 40 minutes. After completion of the drying on the processed samples, the enzymatic treatment process was established through analysis of the degree of hydrolysis, digestibility analysis and confirmation of appearance changes. The level of enzyme addition and treatment conditions are shown in Table 10.

효소제Enzyme 첨가수준(%)Addition level (%) 가수량(%, w/v)Amount of water (%, w / v) 반응온도, 시간Reaction temperature, time 증자조건Conditions for capital increase NSP-CENSP-CE 0.15, 0.3, 0.45, 0.60.15, 0.3, 0.45, 0.6 7070 60℃, 1hr60 ° C, 1 hr 110℃, 40 min110 ° C, 40 min NSP-SPNSP-SP 0.15, 0.3, 0.45, 0.60.15, 0.3, 0.45, 0.6 7070 75℃, 1hr75 ° C, 1 hr 110℃, 40 min110 ° C, 40 min NSP-CE +
NSP-SP
NSP-CE +
NSP-SP
각각 0.1,
0.2, 0.3
0.1,
0.2, 0.3
7070 65℃, 1hr65 ° C, 1 hr 110℃, 40 min110 ° C, 40 min

이하에 효소제 단독처리에 따른 유리당 함량 및 호화도(표 11)와 효소제 복합처리에 따른 유리당 함량 및 호화도를 나타냈다.(표 12)The free sugar content and the degree of gelatinization (Table 11) and the free sugar content and the degree of gelatinization according to the enzyme-enzyme complex treatment were shown below.

  유리당 (%)Free sugar (%) 호화도 (%)Luxury (%) 사료원료Feedstuff 0.1 0.1 23.123.1 NSP-VF 0.1%NSP-VF 0.1% 0.7 0.7 75.175.1 NSP-VF 0.3%NSP-VF 0.3% 1.6 1.6 76.576.5 NSP-CE 0.1%NSP-CE 0.1% 0.4 0.4 74.274.2 NSP-CE 0.3%NSP-CE 0.3% 0.7 0.7 75.175.1 NSP-VS 0.1%NSP-VS 0.1% 0.4 0.4 74.574.5 NSP-VS 0.3%NSP-VS 0.3% 0.8 0.8 77.277.2 NSP-SP 0.1%NSP-SP 0.1% 3.1 3.1 81.281.2 NSP-SP 0.3%NSP-SP 0.3% 5.2 5.2 83.383.3

조성 (%)Furtherance (%) 유리당(%)
Free sugar (%)
호화도 (%)
Luxury (%)
효소 1Enzyme 1 효소 2Enzyme 2 NSP-SPNSP-SP NSP-VFNSP-VF 0.1
0.1
0.10.1 1.6 1.6 82.282.2
0.20.2 3.8 3.8 85.585.5 0.2
0.2
0.10.1 2.0 2.0 86.186.1
0.20.2 5.5 5.5 89.289.2 NSP-SPNSP-SP NSP-VSNSP-VS 0.1
0.1
0.10.1 1.5 1.5 78.478.4
0.20.2 2.22.2 80.880.8 0.2
0.2
0.10.1 1.71.7 81.981.9
0.20.2 2.92.9 85.785.7

실시예 5 최적의 가공조건의 설정
Example 5 Setting of optimum processing conditions

실시예 1 내지 4에서 얻어진 가공조건을 토대로 하여서, 귀리를 가공하기 위한 최적의 가공조건을 설정하였다. 효소제로서 glucoamylase(SCAZYME)을 사용하였고, A. niger GB-124를 발효균으로 이용하였다. 상기 효소 및 발효에 의한 가공조건의 최적 기준은 다음과 같이 확립하였다. 일반적으로 사료원료의 영양소 이용성을 저해하는 성분으로 알려져 있는 NSP(Non starch polysaccharide)를 분해하는 지표로서 발효 후 유리되는 glucose 함량을 분석하여 상대적으로 높은 유리된 glucose 함량을 나타내는 공정을 조사하였다. 각각의 원료별로 효소처리와 발효처리 공정 순서를 달리하여 사료원료의 최적 가공조건을 확립하였다. Based on the processing conditions obtained in Examples 1 to 4, optimum processing conditions for processing oats were set. Glucoamylase (SCAZYME) was used as an enzyme, A. niger GB-124 was used as the fermenting bacteria. The optimum standards for the enzymes and processing conditions by fermentation were established as follows. As a measure to decompose NSP (Non Starch polysaccharide), which is known to inhibit the nutrient utilization of feed materials, we analyzed glucose content liberated after fermentation and investigated the relatively high glucose content. Optimal processing conditions of feed materials were established by varying the order of enzyme treatment and fermentation treatment for each raw material.

최적의 가공조건을 확인하기 위해서 표 13의 공정 순서대로 가공하였다.In order to confirm the optimum processing conditions, processing was carried out in the order of Table 13.

공정 종류Process type Step 1Step 1 Step 2Step 2 Step 3Step 3 비교항목Compare 공정 1 Process 1 증자Increase 효소반응Enzyme reaction 발효Fermentation Released glucose, Xylanase, 미생물 균수Released glucose, Xylanase, microorganism 공정 2Step 2 증자Increase 발효Fermentation 효소 반응Enzyme reaction 공정 3Step 3 효소반응Enzyme reaction 증자Increase 발효Fermentation

표 13에 있어서, 증자조건은 110℃에서 30분간, 효소반응조건은 0.2% 첨가 후 40℃에서 30분 반응 및 발효조건은 35℃에서 24 시간 또는 48시간으로 하였다. 수분을 40%로 보정한 사료원료를 30분간 침지한 후 110℃, 30분간 증자하여 35℃이하로 냉각된 사료 원료에 균주를 접종 후 초기 균수가 1.2 X 106 cfu/g이 되도록 접종하였다. 총 발효시간을 48시간으로 설정하고 배양온도 33~35℃, 습도 55%의 조건으로 원료 두께를 1~1.5cm가 되게 하여 호기발효를 진행하였다. Xylanase 활성 및 유리당의 함량을 측정하였으며, 그 결과를 도 8에 나타냈다. 도 8에 나타낸 바와 같이 유리된 glucose 함량과 xylanase의 활성을 고려하여 평가하였을 때 39.24 ± 0.4 mg/g, 248.38 ± 3.7 U/g으로 공정 2-48시간 발효조건이 가장 우수한 결과를 나타내었다. In Table 13, the conditions for the fermentation were 110 ° C for 30 minutes, the enzyme reaction conditions were 0.2%, 40 ° C for 30 minutes, and fermentation conditions at 35 ° C for 24 hours or 48 hours. The feedstuffs adjusted to 40% moisture were immersed for 30 minutes and then inoculated at a temperature of 110 ° C for 30 minutes to inoculate the feedstuffs cooled to below 35 ° C so that the initial number of bacteria was 1.2 × 10 6 cfu / g. The total fermentation time was set to 48 hours, and the raw material was allowed to have a thickness of 1 to 1.5 cm under the condition of a temperature of 33 to 35 DEG C and a humidity of 55%, and the aerobic fermentation was carried out. Xylanase activity and free sugar content were measured, and the results are shown in FIG. As shown in FIG. 8, when the glucose content and the activity of xylanase were considered, 39.24 ± 0.4 mg / g and 248.38 ± 3.7 U / g were the best results for 2-48 hours fermentation.

실시예 6 : 대량생산에 있어서의 최적의 가공조건 설정
Example 6: Setting of optimum processing conditions in mass production

대량생산에서의(10ton) 최적 가공조건들을 확립하고자 하였다. 도 9와 같은 공정으로 대량 생산을 진행하였다. 사용균주로서 A. niger GB-124를 이용하였고, 발효조건으로서, 수분을 45%로 보정한 귀리원료 10 ton을 30분간 침지한 후 110℃, 30분간 증자하여 35℃이하로 냉각하여 초기 균수가 1.0 X 104 ~105 cfu/g이 되게 접종하였다. 배양조건은 온도 30~35℃, 습도 55%, 48시간 호기조건으로 발효하였다. 발효기기는 제국기(한성테크, 15on 용적)를 사용하였고 귀리 원료의 두께는 18~20 cm가 되게 하여 발효를 진행하였다. 이어서, xylanase 활성, cellulase활성, Amylase 활성, Protease 활성, 호화도 분석, 유리당 함량등을 측정하였다. 도 10에 그 결과를 나타냈다. (10 ton) in mass production. Mass production was carried out by the process shown in Fig. A. niger GB-124 was used as a strain to be used. As a fermentation condition, 10 tons of oat raw material adjusted to 45% of water was immersed for 30 minutes, and then heated at 110 DEG C for 30 minutes. 1.0 x 10 4 to 10 5 cfu / g. The culture conditions were fermentation at 30 ~ 35 ℃, 55% humidity and 48 hours aerobic condition. The fermentation device was emulsion (Hansung Tech, 15on volume) and the oat material was 18 ~ 20 cm thick. Next, xylanase activity, cellulase activity, amylase activity, protease activity, degree of hydrolysis, and free sugar content were measured. The results are shown in Fig.

도 10로부터 알 수 있는 바와 같이, 발효 귀리의 가공 시에는 초기 수분함량 45%, 배양 온도 35~40℃, 종균 A. niger GB-124의 초기 접종 수준 1.0 X 104 ~105 cfu/g 조건에서 발효 시간을 30~36시간으로 하는 것이 바람직한 것으로 확인되었다. 귀리는 발효공정을 통해 생리적 기능성이 개선된 원료로 전환되었으며 최종 시제품은 호화도의 향상, 유리 당 함량 증가, 유용 미생물 증식, protease, amylase, xylanase, cellulase 효소활성을 보유한 특성을 가지므로 가축의 이용성이 증대된 사료 자원으로 활용 될 수 있을 것으로 판단된다. (표 14)As can be seen from Fig. 10, in the processing of fermented oats, the initial moisture content was 45%, the incubation temperature was 35 to 40 ° C, the initial inoculation level of A. niger GB-124 was 1.0 × 10 4 to 10 5 cfu / g It was confirmed that the fermentation time was preferably 30 to 36 hours. The oat has been converted into a raw material with improved physiological function through fermentation process. The final product has characteristics of improving the degree of gelatinization, free sugar content, useful microorganism growth, protease, amylase, xylanase and cellulase enzyme activity. Could be utilized as an increased feed resource. (Table 14)

귀리oat 가공전Before processing 가공후After processing 차이 (비율 %)Difference (%%) 호화도(%)Luxury (%) 23.123.1 81.081.0 350.64350.64 유리당(mg/g)Free sugar (mg / g) 6.36.3 27.727.7 439.68439.68 균주 (Log cfu/g)The strain (Log cfu / g) -- 7.87.8 효소활성 (U/g)Enzyme activity (U / g) -- Protease 8145.6
Amylase 1347.1
Cellulase 1420.7
Xylanase 233.3
Protease 8145.6
Amylase 1347.1
Cellulase 1420.7
Xylanase 233.3

또한, 최종 제품내에 발현되는 효소의 종류를 확인하였다. 효소의 종류를 apiZYM(Biomerieux, France)으로 조사하였는데, 이는 정제되지 않은 혼합시료에서의 효소의 활성을 검사할 수 있도록 제작되어 고체발효시 발현되는 여러 종류의 효소 활성을 조사하는데 적합하다. 실험방법은 제조사에서 제공되는 manual에 따라 진행하였다. 그 결과를 하기 표 15에 나타냈다.In addition, the kinds of enzymes expressed in the final product were confirmed. The type of enzyme was investigated with apiZYM (Biomerieux, France), which is designed to examine the activity of enzymes in untreated mixed samples and is suitable for investigating various enzyme activities expressed in solid fermentation. The experimental procedure was carried out according to the manual provided by the manufacturer. The results are shown in Table 15 below.

No.No. 효소enzyme 기질temperament pHpH 결과result 1One Alkaline phosphataseAlkaline phosphatase 2-naphthyl phosphate2-naphthyl phosphate 8.58.5 ++ 22 Esterase(C4)Esterase (C4) 2-naphthyl butyrate2-naphthyl butyrate 6.56.5 -- 33 Esterase(C8)Esterase (C8) 2-naphthyl caprylate2-naphthyl caprylate 7.57.5 -- 44 Lipase(C14)Lipase (C14) 2-naphthyl myristate2-naphthyl myristate 7.57.5 -- 55 Leucine arylamidaseLeucine arylamidase L-leucyl-2-naphthylamideL-leucyl-2-naphthylamide 7.57.5 -- 66 Valine arylamidaseValine arylamidase L-valyl-2-naphthylamideL-valyl-2-naphthylamide 7.57.5 -- 77 Crystine arylamidaseCrystine arylamidase L-cystyl-2-naphthylamideL-cystyl-2-naphthylamide 7.57.5 ++ 88 TrypsinTrypsin N-benzoyl-DL-arginine-2-
naphthylamide
N-benzoyl-DL-arginine-2-
나프thylamide
8.58.5 ++
99 α-chymotrypsinalpha-chymotrypsin N-glutaryl-phenylanine-2-
naphthylamide
N-glutaryl-phenylalanine-2-
나프thylamide
7.57.5 --
1010 Acid phosphataseAcid phosphatase 2-naphtyl phophate2-naphtyl phophate 5.45.4 -- 1111 Naphtol-AS-BI-phosphohydrolaseNaphtol-AS-BI-phosphohydrolase Naphthol-AS-BI-phosphateNaphthol-AS-BI-phosphate 5.45.4 ++ 1212 α-galactosidasealpha -galactosidase 6-Br-2-naphthyl-α D-galactopyranoside6-Br-2-naphthyl- [alpha] -D-galactopyranoside 5.45.4 -- 1313 β-glucuronidaseβ-glucuronidase 2-naphtyl-β D-galactopyranoside2-naphthyl- [beta] -galactopyranoside 5.45.4 -- 1414 β-glucosidaseβ-glucosidase Naphthol-AS-BI-β D-glucuronideNaphthol-AS-BI-? D-glucuronide 5.45.4 -- 1515 α-glucosidaseα-glucosidase 2-naphthyl-α D-glucopyranoside2-naphthyl- [alpha] -D-glucopyranoside 5.45.4 -- 1616 β-glucosidaseβ-glucosidase 6-Br-2-naphthyl-β D-glucopyranoside6-Br-2-naphthyl- [beta] -D-glucopyranoside 5.45.4 -- 1717 N-acetyl-β-glucosaminidaseN-acetyl-β-glucosaminidase 1-naphthyl-N-acetyl-β D-glucosaminide1-naphthyl-N-acetyl- [beta] -D-glucosaminide 5.45.4 ++ 1818 α-mannosidasealpha-mannosidase 6-Br-2-naphthyl-α D-mannopyranoside6-Br-2-naphthyl- [alpha] -D-mannopyranoside 5.45.4 -- 1919 α-fucosidasealpha-fucosidase 2-naphthyl-α L-fucopyranoside2-naphthyl-a L-fucopyranoside 5.45.4 --

또한, 가공전후의 화학적특성의 변화를 AOAC 및 Weende 방법을 이용하여 일반성분을 분석하였다. 사료원료에 대한 gross energy는 Mclean과 Tobin의 방법에 따라 bomb calorimetry로 분석하였다. 그 결과를 하기 표 16에 나타냈다. The changes of chemical properties before and after processing were analyzed by AOAC and Weende method. The gross energy of feed materials was analyzed by bomb calorimetry according to Mclean and Tobin 's method. The results are shown in Table 16 below.

(%)(%) 귀리oat 가공전Before processing 가공후After processing 수분moisture 4.934.93 13.3413.34 조단백질Crude protein 12.73
(13.39)
12.73
(13.39)
14.32
(16.52)
14.32
(16.52)
조지방Crude fat 7.86
(8.27)
7.86
(8.27)
7.57
(8.74)
7.57
(8.74)
조섬유Crude fiber 1.36
(1.43)
1.36
(1.43)
2.46
(2.84)
2.46
(2.84)
조회분Views min 1.61
(0.94)
1.61
(0.94)
1.8
(2.08)
1.8
(2.08)
NFE**NFE ** 71.5171.51 60.5160.51 총에너지
(Kcal/Kg)
Total energy
(Kcal / Kg)
45884588 45484548

표 16에서 알 수 있는 바와 같이, 발효 처리한 사료자원의 일반성분은 기존 사료업계에서 사용하고 있는 원료들의 일반성분 범위(Feedstuffs, 2009)에 들어가 정상적인 일반성분 수준을 나타내고 있다. 특히 발효공정을 거친 사료원료들은 일반 사료원료에 비해 조지방 함량이 높고, 조섬유소는 낮아져 어린 일령에 사용 시 효과적일 것으로 생각된다. 그리고 높은 조섬유소의 함량 때문에 사용량이 제한되는 원료들은 발효공정을 통해 조섬유소의 함량을 감소시키게 되면 사용량을 늘릴 수 있을 것으로 판단된다. 또한 귀리와 소맥에서는 발효 공정을 통해 조단백질 함량과 조지방의 함량이 높아져 가용무질소물(NFE)이 감소함을 확인하였다. 이는 미생물에 의해 조섬유소가 일부 단당류로 분해되고 미생물의 대사활동에 사용되어 사료 자원의 carbon flow가 이산화탄소로 소모됨으로서 조단백질의 함량이 증가한 것과 미생물의 지방 생산(polyunsaturated fatty acid)에 의한 것으로 생각된다.
As can be seen in Table 16, the general composition of fermented feed stocks is within the normal composition range (Feedstuffs, 2009) of the raw materials used in the existing feed industry, indicating a normal level of normal composition. Especially, fermented feedstuffs have higher crude fat content and lower crude fiber content than conventional feedstuffs, which may be effective for use in younger ages. And because of the high crude fiber content, the raw materials whose usage is limited can be increased if the content of crude fiber is reduced through the fermentation process. In addition, the fermentation process of oats and wheat increased the crude protein content and crude fat content, indicating that NFE was reduced. It is thought that the crude fiber content is increased and the polyunsaturated fatty acid is used because carbon fiber is decomposed into some monosaccharides by microorganisms and used for metabolism of microorganisms.

실험예 1 : 발효처리된 귀리 사료가 육성돈의 생산성에 미치는 영향
Experimental Example 1: Effect of Fermented Oat Diets on Productivity of Growth Donors

실시예 3에서 B.subtilis 2-19CX를 이용해서 발효처리된 귀리 사료가 육성돈의 생산성에 미치는 영향을 알아보기 위해서 하기와 같은 실험하였다.
In order to investigate the effect of fermented oat feed on the productivity of breeding pigs using B. subtilis 2-19CX in Example 3, the following experiment was conducted.

가. 재료 및 방법
end. Materials and methods

① 시험동물 및 시험설계① Test animals and test design

3원 교잡종([Landrace×Yorkshire]×Duroc) 125두를 공시하였으며 시험 개시시의 체중은 7.31±1.54 kg이었고, 4주간 사양시험을 실시하였다. 2단계 (1~3주) 처리구는 1) T1(basal diet; 15% dehulled oat), 2) T2 (3.7% fermented oat+11.3% dehulled oat) 3) T3 (7.5% fermented oat+7.5% dehulled oat), 4) T4 (11.3% fermented oat+3.7% dehulled oat) 및 5) T5 (15% fermented oat)이고, 3단계(3~5주) 처리구는 1) T1 (basal diet; 7% dehulled oat) 2) T2 (1.7% fermented oat+5.3% dehulled oat) 3) T3 (3.5% fermented oat+3.5% dehulled oat) 4) T4 (5.3% fermented oat+1.7% dehulled oat) 5) T5 (7% fermented oat)로 5개 처리를 하여 처리당 5반복, 반복당 5두씩 완전임의 배치하였다.
A total of 125 triplicate (Landrace × Yorkshire × Duroc) dogs were weighed and weighed 7.31 ± 1.54 kg at the start of the study and tested for 4 weeks. 2) T2 (3.7% fermented oat + 11.3% dehulled oat) 3) T3 (7.5% fermented oat + 7.5% dehulled oat) ), 4) T4 (11.3% fermented oat + 3.7% dehulled oat) and 5) T5 (15% fermented oat) 2) T2 (1.7% fermented oat + 5.3% dehulled oat) 3) T3 (3.5% fermented oat + 3.5% dehulled oat) ), 5 replicates per treatment and 5 replicates per replicate.

② 시험사료 및 사양관리
② Test feed and specification management

사양시험은 단국대학교 시험농장에서 실시하였고, 시험에 사용된 사료배합비는 표 18에 나타내었다. 사료는 자유 채식토록 하였으며, 물은 자동급수기를 이용하여 자유로이 마실 수 있게 하였다.
Specification tests were conducted at Dankook University test farms and the feed ratios used in the tests are shown in Table 18. The feed was free vegetarian, and the water was freely drinkable using an automatic water dispenser.

③ 조사항목 및 방법
③ Survey items and methods

a. 생산성a. productivity

체중 및 사료 섭취량은 시험 개시시, 3주 및 종료 시(6주)에 각각 측정하여 일당증체량, 일당사료섭취량 및 사료효율을 계산하였다.
Body weight and feed intake were measured at the beginning of the test, at 3 weeks and at the end (6 weeks), respectively, and the daily gain, daily feed intake and feed efficiency were calculated.

b. 영양소 소화율b. Nutrient digestibility

영양소 소화율을 측정하기 위하여 종료시 7일전에 표시물로서 산화크롬(Cr2O3)을 사료내 0.2% 첨가하였다. 크롬사료 급여 4일 후 분을 채취하였고, 채취한 분은 60℃ 열풍건조기에서 72시간 건조 시킨 후 Wiley mill로 분쇄하여 분석에 이용하였다. 사료의 일반성분과 표시물로 혼합된 Cr은 AOAC(1995)에 제시된 방법에 의해 분석하였다.
In order to measure the digestibility of nutrients, chromium oxide (Cr 2 O 3) was added as a labeling substance in the feed at a rate of 0.2% 7 days before the end. After 4 days of chrome feeding, the samples were collected for 72 hours in a 60 ° C hot air drier and then pulverized using a Wiley mill. Cr mixed with the general components of the feed and labeling was analyzed by the method described in AOAC (1995).

c. 분내 미생물 균수c. Number of microorganisms in the mouth

돈분의 채취는 종료시 처리구별 8마리를 선발하여 항문 마시지법으로 분을 채취한 뒤, 실험실까지 -20℃에서 냉동보관 하였으며, 이후 멸균된 생리식염수에 현탁하여 균질화 시킨 다음 103에서 107까지 계단 희석하여 생균 수 측정용 시료로 사용하였다. 실험처리에 의한 돈분 내의 미생물 균수를 측정하기 위해 Lactobacillus에는 MRS agar, Coliforms에는 MacConkey agar (Difco, USA), Salmonella, Bacillis 에는 Nutrient broth를 사용하였고, 37℃에서 38시간 배양 후 균수를 측정하였다.Recovery of pig manure is stairs then the selection process at the end of the 8 minutes distinction collected by law drink anus, were frozen at -20 until laboratory ℃, homogenized and suspended in a sterilized physiological saline after the next 10 3 to 10 7 And used as a sample for measuring viable cell count. MRS agar was used for Lactobacillus, MacConkey agar (Difco, USA) for Coliforms, Nutrient broth for Salmonella and Bacillis, and the number of bacteria was measured after incubation at 37 ℃ for 38 hours.

성분ingredient 5~10kg BW5 ~ 10kg BW 10~20kg BW10 ~ 20kg BW 옥수수  corn 39.2239.22 53.1253.12 대두박Soybean meal 35.0035.00 35.0035.00 귀리oat 15.0015.00 7.007.00 Fish mealFish meal 4.004.00 3.003.00 동물성 지방Animal fat 4.504.50 -- 인산이칼슘Calcium phosphate 1.001.00 -- 석회lime 0.700.70 -- L-라이신L-lysine 0.260.26 -- DL-메티오닌  DL-methionine 0.020.02 -- 인산이칼슘Calcium phosphate -- 0.100.10 석회lime -- 1.151.15 소금Salt -- 0.500.50 미네랄 premixMineral premix 0.100.10 0.050.05 비타민 premixVitamin premix 0.200.20 0.080.08 합계Sum 100100 100100 산출된 조성 The calculated composition ME, kcal/kg  ME, kcal / kg 3,4113,411 3,2903,290 조 단백질, %  Crude protein,% 24.3424.34 23.7323.73 라이신, %  Lysine,% 1.6141.614 1.3671.367 메티오닌, %  Methionine,% 0.4250.425 0.3930.393 칼슘, %  calcium, % 0.820.82 0.730.73 인, %  sign, % 0.700.70 0.520.52

d. 분내 악취물질d. Odorant substance in the mouth

분내 발생하는 유해가스물질 측정은 시험 종료시 각 처리구에서 동일한 시간 동안 배설된 분을 처리당 5마리로부터 채취한 후, 신선한 분 100g을 취하여 1000 mL의 밀봉된 플라스틱 용기에 넣고 실온에서 24시간 동안 발효 시킨 후, 1일, 3일 및 5일 동안 실온에 보관하면서 Gastec(Model GV-100, GASTEC, Japan)을 사용하여 발생하는 ammonia, mercaptan 및 hydrogen sulfide을 측정하였다.
At the end of the test, the excreted materials were collected from 5 animals per treatment at the end of the experiment, and 100 g of fresh water was taken into a 1000 mL sealed plastic container and fermented at room temperature for 24 hours Ammonia, mercaptan and hydrogen sulfide were measured using Gastec (Model GV-100, GASTEC, Japan) while keeping at room temperature for 1 day, 3 days and 5 days.

e. 분내 휘발성 지방산e. Volatile fatty acids

분내 발생하는 유해가스물질 측정은 시험 종료시 각 처리구에서 동일한 시간 동안 배설된 분을 처리당 5마리로부터 채취한 후, 신선한 분 100g을 취하여 1000 mL의 밀봉된 플라스틱 용기에 넣고 실온에서 24시간 동안 발효 시킨 후, 1일, 3일, 5일 및 7일동안 실온에 보관하면서 Gastec (Model GV-100, GASTEC, Japan)을 사용하여 발생하는 acetic acid, propionic acid 및 butyric acid을 측정하였다.
At the end of the test, the excreted materials were collected from 5 animals per treatment at the end of the experiment, and 100 g of fresh water was taken into a 1000 mL sealed plastic container and fermented at room temperature for 24 hours Acetic acid, propionic acid and butyric acid were measured using Gastec (Model GV-100, GASTEC, Japan) while keeping at room temperature for 1 day, 3 days, 5 days and 7 days.

④ 통계처리④ Statistical processing

모든 자료는 SAS (1996)의 General Linear Model procedure를 이용하여 Duncan’s multiple range test (Duncan, 1955)로 처리하여 평균간의 유의성을 검정하였다.
All data were analyzed by Duncan's multiple range test (Duncan, 1955) using the General Linear Model procedure of SAS (1996).

나. 사양시험 결과
I. Specification Test Result

① 생산성① Productivity

발효한 귀리를 사용하여 사료 내 귀리를 0, 25, 50, 75, 100% 대체했을 때 생산성에 미치는 영향은 표 18에서 보는 바와 같다. 일당증체량은 3주차에 T3 처리구가 T1 및 T2 처리구에 비해 유의적으로 높은 것으로 나타났고 (P>0.05), 5주차 및 전기간 동안에는 T3 및 T4 처리구가 T1 및 T2 처리구에 비해 유의적으로 높은 것으로 나타났다 (P<0.05). 사료효율은 3주차에 T3 처리구가 T1, T2 및 T5 처리구에 비해 유의적으로 높게 나타났고 (P<0.05), 전기간 동안 T3 및 T4 처리구가 T1 및 T2 처리구에 비해 유의적으로 높게 나타났다 (P<0.05). 사료섭취량은 기간 및 처리구간 유의적인 차이가 나타나지 않았다 (P>0.05).The effects of fermented oats on 0, 25, 50, 75 and 100% oats in the feed are shown in Table 18. T3 and T4 treatments were significantly higher than those of T1 and T2 treatments at 3 weeks of gestation (P> 0.05), whereas T3 and T4 treatments were significantly higher at 5th week of gestation (P < 0.05). Feed efficiency was significantly higher at T3 than at T1, T2 and T5 treatments at 3 weeks (P <0.05). T3 and T4 treatments were significantly higher than those of T1 and T2 treatments (P < 0.05). Feed intake was not significantly different between the periods and treatments (P> 0.05).

항목Item T1T1 T2T2 T3T3 T4T4 T5T5 SE2 SE 2 3 주3 weeks ADG, g  ADG, g 351b 351 b 349b 349 b 419a 419 a 393ab 393 ab 378ab 378 ab 1515 ADFI, g  ADFI, g 457457 440440 452452 454454 471471 3737 Gain:Feed  Gain: Feed 0.768b 0.768 b 0.793b 0.793 b 0.927a 0.927 a 0.866ab 0.866 ab 0.803b 0.803 b 0.0360.036 5 주5 weeks ADG, g  ADG, g 521b 521 b 534b 534 b 554a 554 a 556a 556 a 549ab 549 ab 1212 ADFI, g  ADFI, g 890890 881881 878878 889889 879879 4646 Gain:Feed  Gain: Feed 0.5860.586 0.6060.606 0.6310.631 0.6250.625 0.6250.625 0.0450.045 OverallOverall ADG, g  ADG, g 436b 436 b 442b 442 b 487a 487 a 475a 475 a 464ab 464 ab 1111 ADFI, g  ADFI, g 674674 661661 668668 672672 675675 2929 Gain:Feed  Gain: Feed 0.647b 0.647 b 0.669b 0.669 b 0.729a 0.729 a 0.707a 0.707 a 0.687ab 0.687 ab 0.0330.033 1Abbreviation: T1, basal diet=15% dehulled oat (phase 2), 7% dehulled oat (phase 3); T2, 3.7% fermented oat+11.3% dehulled oat (phase 2), 1.7% fermented oat+5.3% dehulled oat (phase 3); T3, 7.5% fermented oat+7.5% dehulled oat (phase 2), 3.5% fermented oat+3.5% dehulled oat (phase 3); T4, 11.3% fermented oat+3.7% dehulled oat (phase 2), 5.3% fermented oat + 1.7% dehulled oat (phase 3); T5, 15% fermented oat (phase 2), 7% fermented oat (phase 3).
2Standard error.
a, bMeans in the same row with different superscripts differ (P<0.05).
1 Abbreviation: T1, basal diet = 15% dehulled oat (phase 2), 7% dehulled oat (phase 3); T2, 3.7% fermented oat + 11.3% dehulled oat (phase 2), 1.7% fermented oat + 5.3% dehulled oat (phase 3); T3, 7.5% fermented oat + 7.5% dehulled oat (phase 2), 3.5% fermented oat + 3.5% dehulled oat (phase 3); T4, 11.3% fermented oat + 3.7% dehulled oat (phase 2), 5.3% fermented oat + 1.7% dehulled oat (phase 3); T5, 15% fermented oat (phase 2), 7% fermented oat (phase 3).
2 Standard error.
a, b Means in the same row with different superscripts differ (P <0.05).

② 영양소 소화율② Nutrient digestibility

유자돈 사료 내 귀리를 발효한 귀리로 대체 (0, 25, 50, 75, 100%) 했을 때 영양소 소화율에 미치는 영향을 조사한 결과 (표 20), 건물, 단백질 및 에너지 소화율 모두 처리구간 유의적 차이를 나타내지는 않았으나 (P>0.05), 영양소별로 일반 탈피귀리를 사용한 대조구 (T1) 대비 발효한 귀리를 사용한 처리구 (T2~T5)에서는 다소간 소화율이 개선되는 경향을 나타내기도 하였다. 에너지와 단백질에 대한 소화율에서는 모든 처리구에서 차이를 찾아보기 어려웠으나 건물 소화율에 있어 2단계에서는 T3, T4 처리구, 3 단계에서는 T3, T4, T5 처리구가 높은 소화율이 높은 경향을 나타내고 있다.The effects of nutrient digestibility on the nutrient digestibility of oat meal were compared with those of fermented oats (0, 25, 50, 75, 100%) (Table 20) (T> 0.05). However, the digestibility was slightly improved in the treatments (T2 ~ T5) using fermented oats compared to the control (T1) using the general peeled oats for each nutrient. In the digestibility of energy and protein, the difference in digestibility was not found in all treatments. However, the digestibility of T3, T4 and T4 treatments was higher in stage 2 and T3, T4 and T5, respectively.

Items,%Items,% T1T1 T2T2 T3T3 T4T4 T5T5 SE2 SE 2 3 week3 week Dry matter  Dry matter 80.580.5 80.680.6 82.682.6 82.982.9 81.181.1 1.91.9 Nitrogen  Nitrogen 78.978.9 80.280.2 80.280.2 79.679.6 80.480.4 1.81.8 Energy  Energy 79.779.7 80.880.8 80.980.9 81.381.3 79.879.8 1.51.5 5 week5 week Dry matter  Dry matter 80.680.6 82.482.4 81.881.8 82.182.1 82.282.2 1.71.7 Nitrogen  Nitrogen 79.779.7 80.380.3 80.280.2 79.179.1 80.480.4 1.81.8 Energy  Energy 79.779.7 80.780.7 80.980.9 81.381.3 80.280.2 1.91.9 1Abbreviation: T1, basal diet=15% dehulled oat (phase 2), 7% dehulled oat (phase 3); T2, 3.7% fermented oat+11.3% dehulled oat (phase 2), 1.7% fermented oat+5.3% dehulled oat (phase 3); T3, 7.5% fermented oat+7.5% dehulled oat (phase 2), 3.5% fermented oat+3.5% dehulled oat (phase 3); T4, 11.3% fermented oat+3.7% dehulled oat (phase 2), 5.3% fermented oat + 1.7% dehulled oat (phase 3); T5, 15% fermented oat (phase 2), 7% fermented oat (phase 3).
2Standard error.
1 Abbreviation: T1, basal diet = 15% dehulled oat (phase 2), 7% dehulled oat (phase 3); T2, 3.7% fermented oat + 11.3% dehulled oat (phase 2), 1.7% fermented oat + 5.3% dehulled oat (phase 3); T3, 7.5% fermented oat + 7.5% dehulled oat (phase 2), 3.5% fermented oat + 3.5% dehulled oat (phase 3); T4, 11.3% fermented oat + 3.7% dehulled oat (phase 2), 5.3% fermented oat + 1.7% dehulled oat (phase 3); T5, 15% fermented oat (phase 2), 7% fermented oat (phase 3).
2 Standard error.

③ 분내 미생물 균수③ Number of microorganisms per minute

발효한 귀리를 사용했을 때 분내 미생물 균총 (Lactobacillus, Bacillus, Coliforms 및 Salmonella)에 미치는 영향을 조사한 결과 (표 20) 모든 처리구에서 유의적인 차이를 나타내지 않은 것으로 나타났다 (P>0.05).The effects of fermented oats on microbial microflora (Lactobacillus, Bacillus, Coliforms and Salmonella) were not significantly different in all treatments (Table 20) (P> 0.05).

발효한 귀리를 원료로 사용함에 따라 원료로부터 이행된 생균 (Bacillus)이 분내 미생물총에 영향을 미칠 수는 있으나 이는 사료를 통해 공급된 생균이 장내에 머무르지 못하고 소화물과 같이 이행하여 분으로 이행되었을 때를 전제로 하기 때문에 많지는 않지만 일정량 이상의 생균이 소화기관 내에 머물러 있다고 판단해도 될 것으로 보여진다.As a result of using fermented oats as raw materials, the live bacteria (Bacillus) transferred from the raw materials may affect the microbial mass in the intramuscular cavity, but the live bacteria fed through the feeds did not stay in the intestines, This is because it is premised on time, but it may be judged that more than a certain amount of live bacteria remains in the digestive organs.

분내 미생물의 분포가 하부장기 (대장)의 미생물 분포를 어느 정도 대표한다고 보았을 때 전반적으로 각 균주별로 균수를 일정하게 유지하고 특히 Salmonella의 경우 현저히 낮은 균수를 유지하고 있어 대사이상 또는 설사를 유발하는 기전은 거의 영향을 미치지 못했을 것으로 판단할 수 있다.When the distribution of microorganisms in the premotor represents the distribution of the microorganisms in the lower organs (large intestine) to some degree, the microorganisms are kept constant in each strain, and in particular, Salmonella maintains a remarkably low number of bacteria, Can be considered to have had little effect.

항목, log10cfu/gItem, log 10 cfu / g T1T1 T2T2 T3T3 T4T4 T5T5 표준오차Standard error LactobacillusLactobacillus 1 주  1 week 6.56.5 6.46.4 6.56.5 6.46.4 6.66.6 0.60.6 2 주  2 weeks 6.96.9 6.66.6 7.17.1 6.76.7 7.07.0 0.50.5 3 주  3 weeks 6.96.9 6.66.6 7.47.4 6.96.9 7.07.0 0.60.6 4 주  4 weeks 7.07.0 7.17.1 7.67.6 7.47.4 7.27.2 0.60.6 BacillusBacillus 1 주  1 week 6.16.1 6.56.5 6.46.4 5.85.8 6.56.5 0.60.6 2 주  2 weeks 6.06.0 6.66.6 6.66.6 6.26.2 6.06.0 0.90.9 3 주  3 weeks 6.56.5 6.56.5 7.07.0 6.46.4 6.36.3 0.70.7 4 주  4 weeks 7.27.2 7.47.4 7.27.2 6.66.6 6.86.8 0.60.6 ColiformsColiforms 1 주  1 week 6.16.1 6.56.5 6.56.5 6.16.1 6.66.6 0.60.6 2 주  2 weeks 6.36.3 6.56.5 6.46.4 6.26.2 6.46.4 0.50.5 3 주  3 weeks 6.26.2 6.46.4 6.36.3 6.06.0 6.46.4 0.70.7 4 주  4 weeks 6.16.1 6.46.4 6.26.2 6.16.1 6.36.3 0.60.6 Salmonella Salmonella 1 주  1 week 2.32.3 2.32.3 2.92.9 2.72.7 2.32.3 0.60.6 2 주  2 weeks 2.22.2 2.62.6 3.03.0 2.72.7 2.72.7 0.50.5 3 주  3 weeks 3.03.0 2.12.1 2.72.7 2.82.8 2.62.6 0.70.7 4 주  4 weeks 2.42.4 2.22.2 3.03.0 2.92.9 2.32.3 0.70.7

④ 분내 가스 생성량④ Gas production rate

악취를 유발하는 분뇨내 암모니아, 황화수소 및 멜캅탄 등 그 원인물질의 함량을 분석한 결과 (표 21) 모든 처리구에서 유의적인 효과는 나타나지 않았다 (P>0.05). 이는 앞서 조사한 미생물총과도 무관하지 않은데, 발효한 귀리를 상당량 사용함에 따라 단일균주를 고농도로 발효한 생균제를 미량 사용한 효과만큼 악취물질을 생산하는 세균류의 증식을 상당부분 제어할 수 있었던 결과로 판단된다. 즉 발효한 귀리를 사용함에 따라 생균과 그 대사물질의 추가적인 공급이 장내 미생물총 특히 악취물질을 생산하는 세균류의 증식에 영향을 미치지는 않아 가스의 생성은 안정하게 유지되었던 것으로 보여진다.The contents of ammonia, hydrogen sulfide, and mercaptan in the manure causing odor (Table 21) were not significantly different (P> 0.05). This is not related to the total number of microorganisms investigated previously. As a result of using a large amount of fermented oats, it was possible to control the proliferation of bacteria producing odorous substances as much as the effect of using a microbial agent that fermented a single strain at a high concentration. do. In other words, with the use of fermented oats, the additional supply of live bacteria and its metabolites did not affect the growth of intestinal microbial counts, especially the fungus producing odorous substances, so that the production of gas seemed to be kept stable.

항목, ppmItem, ppm T1T1 T2T2 T3T3 T4T4 T5T5 표준오차Standard error NH3 NH 3 1 일 1 day 15.915.9 15.115.1 18.718.7 17.517.5 15.415.4 2.12.1 3 일 3 days 16.416.4 15.915.9 19.719.7 19.019.0 17.117.1 1.91.9 5 일 5 days 18.018.0 19.319.3 20.720.7 17.717.7 18.818.8 2.42.4 7 일 7 days 17.117.1 19.419.4 16.416.4 18.018.0 19.619.6 2.42.4 H2SH 2 S 1 일 1 day NDND NDND NDND NDND NDND NDND 3 일 3 days 13.313.3 11.611.6 14.914.9 13.413.4 14.614.6 2.02.0 5 일 5 days 21.421.4 22.122.1 24.624.6 23.723.7 24.024.0 3.03.0 7 일 7 days 26.126.1 24.924.9 24.124.1 25.425.4 28.028.0 2.82.8 MercaptansMercaptans 1 일 1 day 9.69.6 8.78.7 9.39.3 10.310.3 8.08.0 1.31.3 3 일  3 days 24.924.9 25.325.3 26.326.3 23.623.6 22.122.1 3.53.5 5 일 5 days 27.427.4 23.123.1 26.426.4 24.924.9 22.422.4 2.32.3 7 일 7 days 19.419.4 22.922.9 17.717.7 25.025.0 24.024.0 3.23.2

⑤ 분내 휘발성 지방산⑤ Volatile fatty acids

발효한 귀리의 사용에 따라 분내 휘발성 지방산 (acetic acid, propionic acid 및 butyric acid) 생성에 미치는 영향을 조사한 결과 각 처리구간 유의적인 차이가 나타나지 않았는데, 이 또한 앞서 조사된 악취물질의 생성 및 미생물 균총에서 조사결과에서 나타난 바와 같이 장내 특히 하부장기 (대장) 내에서의 세균 발효가 정상적인 범위 내에서 이루어졌음을 알 수 있다(표 22). 즉, 장내 미생물 균총을 정상적인 범위내에서 유지함으로써 이에 따른 영향으로 공존하고 있는 세균류들의 발효/대사 과정이 정상적으로 유지됨에 따라 가스의 생성은 물론 휘발성 지방산의 생성도 일정하게 유지되고 있음을 알 수 있다. The effects of fermented oats on the production of acetic acid, propionic acid and butyric acid were not significantly different among the treatments, but the production of odorous substances and microorganisms As shown in the results, it was found that the bacterial fermentation in the intestines, especially in the lower organs (colon), was within the normal range (Table 22). That is, by maintaining the intestinal microflora in the normal range, the fermentation / metabolism of the coexisting bacteria can be maintained normally, and the formation of the volatile fatty acid as well as the generation of the gas can be maintained constantly.

항목, ppmItem, ppm T1T1 T2T2 T3T3 T4T4 T5T5 표준오차Standard error Acetic acidAcetic acid 1 일 1 day 16.116.1 14.314.3 18.618.6 14.314.3 17.317.3 4.74.7 3 일 3 days 16.916.9 18.018.0 16.916.9 15.115.1 17.317.3 1.61.6 5 일 5 days 30.630.6 36.636.6 31.631.6 29.329.3 33.633.6 3.43.4 7 일 7 days 18.918.9 20.120.1 18.418.4 21.921.9 17.417.4 2.52.5 Propionic acidPropionic acid 1 일 1 day 11.711.7 9.99.9 10.310.3 9.69.6 11.411.4 1.31.3 3 일 3 days 17.017.0 15.115.1 17.617.6 19.919.9 16.916.9 3.43.4 5 일 5 days 30.330.3 26.126.1 30.130.1 27.027.0 28.628.6 1.41.4 7 일 7 days 28.628.6 22.122.1 24.424.4 22.722.7 25.325.3 3.33.3 Butyric acidButyric acid 1 일 1 day 13.613.6 12.012.0 12.412.4 16.716.7 13.613.6 2.12.1 3 일 3 days 28.328.3 29.929.9 26.626.6 25.425.4 28.928.9 3.23.2 5 일 5 days 32.132.1 27.127.1 26.126.1 27.927.9 30.430.4 3.13.1 7 일 7 days 21.921.9 25.725.7 20.320.3 19.319.3 23.123.1 2.62.6

실험예 2 : 효소처리된 귀리 사료가 육성돈의 생산성에 미치는 영향Experimental Example 2: Effect of enzyme-treated oat feed on productivity of breeding pigs

실시예 4(NSP-SP 및 NSP-VF를 각각 0.2% 첨가군)의 효소처리된 귀리 사료가 육성돈의 생산성에 미치는 영향을 하기와 같이 실험하였다.
The effect of the enzyme-treated oats of Example 4 (0.2% of each of NSP-SP and NSP-VF) on the productivity of breeding pigs was examined as follows.

가. 재료 및 방법
end. Materials and methods

① 시험동물 및 시험설계① Test animals and test design

3원 교잡종([Landrace×Yorkshire]×Duroc) 125두를 공시하였으며 시험 개시시의 체중은 20.48±0.82kg이었고, 2주간 사양시험을 실시하였다. 처리구는 1) CON (20% oat diet), 2) O25 (oat treated with enzyme 25% 대체), 3) O50 (oat treated with enzyme 50% 대체), 4) O75 (oat treated with enzyme 75% 대체) 및 5) O100 (oat treated with enzyme 100% 대체) 5개 처리를 하여 처리당 5반복, 반복당 5두씩 완전임의 배치하였다.
A total of 125 triplicate (Landrace × Yorkshire × Duroc) dogs were weighed and weighed 20.48 ± 0.82 kg at the start of the study. The treatment group consisted of 1) CON (20% oat diet), 2) O25 (oat treated with enzyme 25%), 3) O50 (oat treated with enzyme 50% And 5) O100 (oat treated with enzyme 100% substitution).

② 시험사료 및 사양관리② Test feed and specification management

사양시험은 단국대학교 시험농장에서 실시하였고, 시험에 사용된 사료배합비는 표 23에 나타내었다. 사료는 자유 채식토록 하였으며, 물은 자동급수기를 이용하여 자유로이 마실 수 있게 하였다.The specimens were tested at Dankook University test farms and the feed ratios used in the tests are shown in Table 23. The feed was free vegetarian, and the water was freely drinkable using an automatic water dispenser.

Item
Item
Basal diet
Basal diet
Ingredients, %Ingredients,% Corn  Corn 46.6646.66 Soybean meal  Soybean meal 22.6522.65 Oat  Oat 20.0020.00 Fish meal  Fish meal 3.463.46 Tallow  Tallow 4.344.34 DCP  DCP 1.001.00 Limestone  Limestone 0.600.60 Salt  Salt 0.300.30 L-lysine-HCl (98%)  L-lysine-HCl (98%) 0.470.47 DL-methionine (98%)  DL-methionine (98%) 0.120.12 Antibiotic  Antibiotic 0.100.10 Mineral premix1 Mineral premix 1 0.100.10 Vitamin premix2 Vitamin premix 2 0.200.20 Total  Total 100.00100.00 Calculated compositionCalculated composition ME, kcal/kg  ME, kcal / kg 3,4003,400 Crude protein, %  Crude protein,% 19.00 19.00 Lysine, %  Lysine,% 1.40 1.40 Methionine, %  Methionine,% 0.47 0.47 Calcium, %  Calcium,% 0.70 0.70 Phosphorus, %  Phosphorus,% 0.60 0.60 1Provided per kilogram of complete diet: Fe (as FeSO4·7H2O), 80mg; Cu(asCuSO4·5H2O), 12mg; Zn(asZnSO4), 85mg; Mn(asMnO2), 8mg; I(asKI), 0.28mg; and Se(asNa2SeO3·5H2O), 0.15mg.
2Provided per kilogram of complete diet: vitamin A, 11,025 IU; vitamin D3, 1,103IU; vitamin E, 44IU; vitamin K, 4.4mg; riboflavin, 8.3mg; niacin, 50mg; thiamine, 4mg; d-pantothenic, 29mg; choline, 166mg; and vitaminB12, 33μg.
1 Provided per kilogram of complete diet: Fe (as FeSO 4 .7H 2 O), 80 mg; Cu (asCuSO 4 · 5H 2 O ), 12mg; Zn (as ZnSO 4 ), 85 mg; Mn (as MnO 2 ), 8 mg; I (asKI), 0.28 mg; and Se (as Na 2 SeO 3 .5H 2 O), 0.15 mg.
2 Provided per kilogram of complete diet: vitamin A, 11,025 IU; vitamin D 3 , 1,103 IU; vitamin E, 44 IU; vitamin K, 4.4 mg; riboflavin, 8.3 mg; niacin, 50mg; thiamine, 4mg; d-pantothenic, 29mg; choline, 166 mg; and vitamin B 12 , 33 μg.

사료 내 귀리를 효소처리 귀리로 0, 25, 50, 75, 100% 대체가 생산성에 미치는 영향은 표 24에 나타내었다. 일당증체량, 일당사료섭취량 및 사료효율에 있어 처리구간 유의적인 차이를 보이지 않았다 (P>0.05). 그러나 효소 처리한 귀리를 25% 수준으로 대체했을 경우 다른 처리구에 비해 일당 증체가 높게 나타났다.The effect of 0, 25, 50, 75, 100% substitution on the productivity of oats fed with enzyme-treated oats is shown in Table 24. There was no significant difference in daily gain, daily feed intake and feed efficiency (P> 0.05). However, when the enzyme treated oats were replaced with 25% level, the daily gain was higher than the other treatments.

Nature, %Nature,% 100100 7575 5050 2525 00 SE1 SE 1 Treated with Enzyme, %Treated with Enzyme,% 00 2525 5050 7575 100100 ADG, g ADG, g 696696 707707 705705 694694 692692 24.024.0 ADFI, g ADFI, g 1,0701,070 1,0741,074 1,0791,079 1,0691,069 1,0681,068 15.115.1 Gain/Feed Gain / Feed 0.6500.650 0.6580.658 0.6530.653 0.6490.649 0.6480.648 0.0220.022

사료내 효소처리 귀리가 자돈의 영양소 소화율에 미치는 영향을 하기표 25에 나타냈다. The effects of oats on the nutrient digestibility of the piglets are shown in Table 25 below.

Nature, %Nature,% 100100 7575 5050 2525 00 SESE Treated with Enzyme, %Treated with Enzyme,% 00 2525 5050 7575 100100 DM, % DM, 74.9974.99 77.9577.95 82.9482.94 77.9877.98 73.3073.30 1.9461.946 N, % N,% 74.8374.83 75.7775.77 76.7776.77 74.6374.63 72.4772.47 0.9930.993 Energy, % Energy,% 73.8473.84 76.7876.78 81.7481.74 76.3276.32 71.8471.84 1.5021.502

사료내 효소처리 귀리가 자돈의 혈액특성에 미치는 영향을 하기표 26에 나타냈다.The effects of oats on the blood characteristics of piglets are shown in Table 26 below.

Nature, %Nature,% 100100 7575 5050 2525 00 SE1 SE 1 Treated with Enzyme, %Treated with Enzyme,% 00 2525 5050 7575 100100 Glucose, mg/dl Glucose, mg / dl 95.295.2 96.296.2 97.497.4 96.896.8 99.899.8 2.692.69 RBC, 106/RBC, 10 6 / 6.546.54 6.586.58 7.097.09 6.876.87 7.077.07 0.250.25 WBC, 103/WBC, 10 3 / 19.8919.89 18.5418.54 18.7218.72 19.9019.90 20.2320.23 1.051.05 Lymphocyte, % Lymphocyte,% 57.8257.82 58.3458.34 58.2258.22 59.0859.08 60.9760.97 2.122.12

사료내 효소처리 귀리가 자돈의 분내 악취에 미치는 영향을 하기표 27에 나타냈다.The effects of oats on the odor in the feed of piglets are shown in Table 27 below.

Nature, %Nature,% 100100 7575 5050 2525 00 SE1 SE 1 Treated with Enzyme, %Treated with Enzyme,% 00 2525 5050 7575 100100 H2S, ppmH 2 S, ppm 1 day1 day 0.00.0 0.00.0 0.00.0 0.00.0 0.00.0 0.000.00 3 day3 day 2.62.6 2.32.3 2.22.2 2.22.2 2.32.3 0.150.15 5 day5 day 2.72.7 2.62.6 2.52.5 2.62.6 2.42.4 0.070.07 Acetic acid, ppmAcetic acid, ppm 1 day1 day 16.316.3 15.615.6 15.915.9 16.716.7 16.116.1 1.081.08 3 day3 day 25.325.3 22.522.5 21.321.3 20.120.1 21.121.1 1.371.37 5 day5 day 18.418.4 16.616.6 15.915.9 16.516.5 17.617.6 0.970.97 NH3, ppmNH 3, ppm 1 day1 day 57.757.7 49.549.5 54.054.0 53.553.5 52.852.8 2.472.47 3 day3 day 78.378.3 71.771.7 72.672.6 72.572.5 77.377.3 2.842.84 5 day5 day 68.068.0 61.261.2 60.560.5 60.260.2 61.861.8 2.632.63

실험예 3 : 효소처리 및 발효처리된 귀리 사료가 육성돈의 생산성에 미치는 영향Experimental Example 3: Effect of enzyme treatment and fermented oat feed on productivity of breeding pigs

실시예 5에서 제조한 효소처리 및 발효처리에 의해 가공된 귀리 사료가 육성돈의 생산성에 미치는 영향을 하기와 같은 방법으로 실험하였다.
The effect of the oat feed processed by the enzyme treatment and the fermentation treatment prepared in Example 5 on the productivity of breeding pigs was examined by the following method.

가. 시험동물 및 시험설계end. Test animals and test design

3원교잡종 [(Landrace × Yorkshire) × Duroc] 이유자돈 125두를 공시하였고, 시험 개시시 체중은 8.01 ± 0.74 kg 이었으며, 사양시험은 6주간 실시하였다. 시험설계는 1) HCO [고영양소 사료 + (phase 1, 10% 일반귀리), + (phase 2, 5% 일반귀리)], 2) HCFO [고영양소 사료 + (phase 1, 5% 일반귀리 + 5% 발효/효소처리귀리), + (phase 2, 2.5% 일반귀리 + 2.5% 발효/효소처리귀리)], 3) LCO [저영양소 사료 + (phase 1, 10% 일반귀리), + (phase 2, 5% 일반귀리)], 4) LCFO [저영양소 사료 + (phase 1, 5% 일반귀리 + 5% 발효/효소처리귀리), + (phase 2, 2.5% 일반귀리 + 2.5% 발효/효소처리귀리)] 및 5) HCOP (고영양소 사료 + 0.04%) 로 5처리, 처리당 5반복, 반복당 5두씩 완전 임의 배치하였다. 하기 표 28에 각 사료의 원료성분함량을 나타냈다.[Landrace × Yorkshire × Duroc] Weighed 125 dogs were weighed and weighed 8.01 ± 0.74 kg at the start of the experiment. The test design consists of 1) HCO [phase 1, 10% general oats, + (phase 2, 5% general oats)], 2) HCFO [high nutrient feed + 5% fermentation / enzyme treated oats), + (phase 2, 2.5% general oats + 2.5% fermentation / enzyme treated oats), 3) LCO [low nutrient feed + (phase 1, 2%, 5% general oats), 4) LCFO [low nutrient feed + (phase 1, 5% general oats + 5% fermentation / enzyme treated oats) Treated oats) and 5) HCOP (high nutrient feed + 0.04%), 5 replicates per treatment and 5 replicates per replicate. Table 28 shows the content of raw materials of each feed.

Ingredients, %Ingredients,% Phase 1Phase 1 Phase 2Phase 2 HCOHCO HCFOHCFO LCOLCO LCFOLCFO CornCorn 44.2244.22 45.3245.32 52.1252.12 53.2253.22 Soybean meal, 48%Soybean meal, 48% 35.0035.00 35.0035.00 35.0035.00 35.0035.00 OatsOats 5.005.00 10.0010.00 2.502.50 5.005.00 Fermented oatFermented oat 5.005.00 2.502.50 Fish meal (Menhaden)Fish meal (Menhaden) 4.004.00 4.004.00 3.003.00 3.003.00 Animal fatAnimal fat 4.504.50 3.403.40 3.003.00 1.901.90 Dicalcium PhosphateDicalcium Phosphate 1.001.00 1.001.00 -- -- LimestoneLimestone 0.700.70 0.700.70 -- -- L-LysineL-Lysine 0.260.26 0.260.26 -- -- DL-MethionineDL-Methionine 0.020.02 0.020.02 -- -- Dicalcium PhosphateDicalcium Phosphate -- -- 0.100.10 0.100.10 LimestoneLimestone -- -- 1.151.15 1.151.15 SaltSalt -- -- 0.500.50 0.500.50 Mineral premix1 Mineral premix 1 0.100.10 0.100.10 0.050.05 0.050.05 Vitamin premix2 Vitamin premix 2 0.200.20 0.200.20 0.080.08 0.080.08 TotalTotal 100.00100.00 100.00100.00 100.00100.00 100.00100.00 Calculated compositionCalculated composition ME, kcal/kgME, kcal / kg 3,4463,446 3,3963,396 3,3043,304 3,2543,254 Crude protein, %Crude protein,% 24.2024.20 24.2024.20 23.7023.70 23.7023.70 Lysine, %Lysine,% 1.601.60 1.601.60 1.361.36 1.361.36 Methionine, %Methionine,% 0.430.43 0.430.43 0.390.39 0.390.39 Calcium, %Calcium,% 0.820.82 0.820.82 0.730.73 0.730.73 Phosphorus, %Phosphorus,% 0.700.70 0.700.70 0.520.52 0.520.52 1 Provided per kilogram of complete diet: Fe (as FeSO4·7H2O),80mg;Cu(asCuSO4·5H2O),12mg;Zn(asZnSO4),85mg;Mn(asMnO2),8mg;I(asKI),0.28mg;andSe(asNa2SeO3·5H2O),0.15mg.
2 Provided per kilogram of complete diet: vitamin A, 11,025 IU; vitamin D3,1,103IU;vitaminE,44IU;vitaminK,4.4mg;riboflavin,8.3mg;niacin,50mg;thiamine,4mg;d-pantothenic,29mg;choline,166mg;andvitaminB12,33μg.
1 Provided per kilogram of complete diet: Fe (as FeSO 4 · 7H 2 O), 80mg; Cu (asCuSO 4 · 5H 2 O), 12mg; Zn (asZnSO 4), 85mg; Mn (asMnO 2), 8mg; I (asKI), 0.28 mg; andSe (as Na 2 SeO 3 .5H 2 O), 0.15 mg.
2 Provided per kilogram of complete diet: vitamin A, 11,025 IU; vitamin D 3, 1,103IU; vitaminE, 44IU; vitaminK, 4.4mg; riboflavin, 8.3mg; niacin, 50mg; thiamine, 4mg; d-pantothenic, 29mg; choline, 166mg; andvitaminB 12, 33μg.

나. 시험사료와 사양관리I. Test feed and specification management

사양시험은 단국대학교 시험농장에서 실시하였다. 시험사료는 NRC (1998) 요구량에 따라 배합한 귀리-대두박 위주의 가루형태 사료를 자유 채식토록 하였으며, 물은 자동급수기를 이용하여 자유로이 먹을 수 있도록 조절하였다.
The test was conducted at Dankook University test farm. The test diets were fed free from vegetable oil based oat - soybean meal based on the requirements of NRC (1998) and water was freely fed using an automatic water dispenser.

다. 조사항목 및 방법All. Survey items and methods

(1) 일당증체량, 일당사료섭취량 및 사료효율증체량은 개시시 및 종료시 (6주)에 처리구 별로 체중을 측정하였다. 사료섭취량은 체중측정시 사료급여량에서 잔량을 제하여 계산하였고, 사료효율은 증체량을 사료섭취량으로 나누어 산출하였다.
(1) Body weight gain, daily feed intake and feed efficiency gain were measured by treatment at initiation and termination (6 weeks). The feed intake was calculated by subtracting the remaining amount from the feed intake during body weight measurement. The feed efficiency was calculated by dividing the body weight gain by the feed intake.

(2) 영양소 소화율은 2주 및 종료시 (6주)에 산화크롬 (Cr2O3)을 표시물로서 0.2% 첨가하여 7일간 급여 후 항문 마사지법으로 분을 채취하였다. 채취한 분은 60℃의 건조기에서 72시간 건조시킨 후 Willey mill로 분쇄하여 분석에 이용하였다. 사료의 일반성분과 표시물로 혼합 된 Cr은 AOAC (2000)의 방법에 준하여 분석하였다.
(2) Nutrient digestibility was obtained by adding 0.2% of chromium oxide (Cr 2 O 3 ) as an indicator at the end of 2 weeks and at the end of 6 weeks. The samples were dried in a dryer at 60 ° C for 72 hours, and then pulverized with a Willey mill. Cr mixed with the general components of the feed and labeling was analyzed according to the method of AOAC (2000).

(3) 혈액 채취는 개시시, 2주 및 종료시 (6주)에 각각 경정맥 (Jugular vein)에서 K3EDTA Vacuum tube(Becton Dicknson Vacutainer Systems, Franklin Lakes, NJ)를 이용하여 혈액을 2 mL 채취하여 분석하였고, 자동혈액분석기 (ADVID 120, Bayer, USA)를 이용하여 WBC (white blood cell), RBC (red blood cell) 및 lymphocyte 조사하였다. 혈청 생화학적 검사는 시험 개시시, 2주 및 종료시 (6주)에 각각 경정맥에서 Vacuum tube (Becton Dickinson Vacutainer Systems, Franklin Lakes, NJ)를 이용하여 혈액 5mL 채취 후 4℃에서 3,000 rpm으로 15분간 원심분리하여 얻은 혈청을 자동 생화학 분석기 (HITACHI 747, Japan)를 이용하여 혈액내 glucose를 측정하였다.
(3) Blood sampling was performed by taking 2 mL of blood from the Jugular vein using a K 3 EDTA Vacuum tube (Becton Dickson Vacutainer Systems, Franklin Lakes, NJ) at the start, at 2 weeks, (White blood cell), red blood cell (RBC) and lymphocyte using an automated blood analyzer (ADVID 120, Bayer, USA). Serum biochemical tests were performed by collecting 5 mL of blood using a Vacuum tube (Becton Dickinson Vacutainer Systems, Franklin Lakes, NJ) from the jugular vein at 2 weeks and at the end of the study (6 weeks), centrifuging at 3,000 rpm The separated serum was measured for glucose in blood using an automatic biochemical analyzer (HITACHI 747, Japan).

(4) 분변지수는 전체시험기간동안 매일 측정하여 다음과 같은 지수로 (Score = 1 hard, dry pellet; 2 firm, formed stool; 3 soft, moist stool that retains shape; 4 soft, unformed stool that assumes shape of container; 5 watery liquid that can be poured) 수시화하였다. 분내 악취물질 분석을 위해 종료시 (6주)에 각 처리구에서 동일한 시간동안 배설된 분을 채취한 후, 신선한 분 100g을 취하여 1,000mL의 밀봉된 플라스틱용기에 넣고 실온에서 24시간동안 발효시킨 후 7일동안 실온에 보관하면서 7일차에 Gastec (Model GV-100, GASTEC, Japan)을 사용하여 분으로부터 발생하는 ammonia, total mercaptans, hydrogen sulfide 및 acetic acid를 측정하였다.
(4) The fecal index was measured daily during the entire study period, and the score was calculated as follows (Score = 1 hard, dry pellet; 2 firm; formed stool; 3 soft; moist stool that retains shape; 4 soft, unformed stool that assumes shape of container; 5 watery liquid that can be poured). For the analysis of malodorous substances at the end of the experiment, at the end (6 weeks), the excreted materials were sampled at each treatment for the same period of time, and 100 g of fresh milk was taken into 1,000 mL sealed plastic containers, (Gastec, Model GV-100, GASTEC, Japan) were used to measure ammonia, total mercaptans, hydrogen sulfide and acetic acid from the flour at 7 days.

라. 통계처리la. Statistical processing

모든 자료는 SAS (1999)의 General Linear Model procedure를 이용하여 Duncan’s multiple range test (Duncan, 1955)로 처리하여 평균간의 유의성을 검정하였다. 또한, 처리간의 평균을 orthogonal contrast를 이용하여 1) 고저 영양소 차이 및 2) 미처리원료와 가공원료 차이의 요인분석을 검정하였다.
All data were analyzed using the Duncan's multiple range test (Duncan, 1955) using the General Linear Model procedure of SAS (1999). Also, using the orthogonal contrast between the mean values of the treatments, 1) the difference of high and low nutrients and 2) the factor analysis of the difference between raw and raw materials.

실험결과는 다음과 같다.
The experimental results are as follows.

사료내 발효/효소처리귀리의 대체가 이유자돈의 생산성에 미치는 영향은 표 29에 나타내었다. 0-2주에 있어 일당증체량은 HCFO 처리구가 LCO 처리구보다 유의적으로 높게 나타났고 (P<0.05), 발효/효소처리귀리 급여시 일반귀리보다 유의적으로 높게 나타났다 (P<0.05). 사료효율은 HCFO 처리구가 LCO 처리구보다 유의적으로 높게 나타났고 (P<0.05), 고영양소 사료 및 발효/효소처리귀리 대체 급여시 높게 나타났다 (P<0.05). 그러나 일당사료섭취량은 처리구간 유의적인 차이를 나타내지 않았다 (P>0.05). 2-6주에 있어 일당증체량, 일당사료섭취량 및 사료효율은 처리구간 유의적인 차이를 나타내지 않았다 (P>0.05). 전체시험기간동안에 있어 일당증체량은 0-2주의 일당증체량과 동일하게 HCFO 처리구가 LCO 처리구보다 유의적으로 높게 나타났다 (P<0.05). 그러나 일당사료섭취량 및 사료효율은 처리구간 유의적인 차이를 나타내지 않았다 (P>0.05).The effects of fermentation / enzymatic treatment of oats on the productivity of weaned pigs are shown in Table 29. In the 0-2 week, the daily gain of HCFO was significantly higher (P <0.05) than that of LCO (P <0.05) and significantly higher than that of Oats fed fermented / enzyme treated oats. Feed efficiency was significantly higher in HCFO (P <0.05) than in LCO (P <0.05) and high nutrient feed and fermented / enzyme treated oat substitute. However, daily dietary intakes did not show significant differences (P> 0.05). Daily body weight gain, daily feed intake and feed efficiency were not significantly different between two treatment weeks (P> 0.05). During the whole test period, the daily gain was significantly (p <0.05) higher than the LCO treatment in the HCFO treatment group, which was the same as the daily gain in the 0-2 week. However, daily dietary intakes and feed efficiency did not show significant differences (P> 0.05).

ItemsItems HCOHCO HCFOHCFO LCOLCO LCFOLCFO SE2 SE 2 ContrastContrast N3 N 3 F4 F 4 Phase 1 (0-2 week)Phase 1 (0-2 week) ADG, g  ADG, g 300ab 300 ab 322a 322 a 275b 275 b 306ab 306 ab 1010 NSNS 0.0230.023 ADFI, g  ADFI, g 354354 356356 360360 364364 44 NSNS NSNS G/F  G / F 0.847ab 0.847 ab 0.904a 0.904 a 0.764b 0.764 b 0.841ab 0.841 ab 0.0270.027 0.0190.019 0.0350.035 Phase 2 (2-6 week)Phase 2 (2-6 weeks) ADG, g  ADG, g 579579 599599 564564 576576 1313 NSNS NSNS ADFI, g  ADFI, g 904904 915915 904904 884884 2222 NSNS NSNS G/F  G / F 0.6400.640 0.6550.655 0.6240.624 0.6520.652 0.0190.019 NSNS NSNS Overall (0-6 week)Overall (0-6 week) ADG, g  ADG, g 479ab 479 ab 499a 499 a 460b 460 b 479ab 479 ab 1111 NSNS NSNS ADFI, g  ADFI, g 707707 714714 709709 698698 1313 NSNS NSNS G/F  G / F 0.6780.678 0.6990.699 0.6490.649 0.6860.686 0.018 0.018 NSNS NSNS 1Abbreviation: HCO, high nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); HCFO, high nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); LCO, low nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat).
2 Standard error.
3 High nutrient density diet vs. low nutrient density diet.
4 Raw oat vs. fermented oat.
a,bMeans in the same row with different superscripts differ (P<0.05).
1 Abbreviation: HCO, high nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); HCFO, high nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); LCO, low nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat).
2 Standard error.
3 High nutrient density diet vs. low nutrient density diet.
4 Raw oats etc. fermented oat.
a, b Means in the same row with different superscripts differ (P <0.05).

사료내 발효/효소귀리의 대체가 이유자돈의 영양소 소화율에 미치는 영향은 표 30에 나타내었다. 2주차에 있어 건물 소화율은 HCO, HCFO 및 LCFO 처리구가 LCO 처리구보다 유의적으로 높게 나타났고 (P<0.05), 질소 소화율은 HCFO 처리구가 LCO 및 LCFO 처리구보다 유의적으로 높게 나타났다 (P<0.05). 에너지 소화율에 있어서는 HCFO 및 LCFO 처리구가 LCO 처리구보다 유의적으로 높게 나타났다 (P<0.05). 고영양소 사료 급여시에는 건물 및 질소 소화율이 유의적으로 높게 나타났고 (P<0.01), 발효귀리 대체 급여에는 일반귀리 급여보다 에너지 소화율이 높게 나타났다 (P<0.01).The effect of dietary fermentation / enzyme oats substitution on nutrient digestibility of weaned piglets is shown in Table 30. The digestibility of HCO, HCFO and LCFO was significantly higher (P <0.05) than that of LCO (P <0.05) . The energy digestibility of HCFO and LCFO was significantly higher than that of LCO (P <0.05). Nutrient digestibility was significantly higher in high nutrient diets (P <0.01), and the energy digestibility of fermented oat substitutes was higher than general oat diets (P <0.01).

6주차에 있어 건물 소화율은 HCFO 처리구가 LCO 처리구보다 유의적으로 높게 나타났고 (P<0.05), 에너지 소화율은 HCFO 및 LCFO 처리구가 LCO 처리구보다 유의적으로 높게 나타났다 (P<0.05). 그러나 질소 소화율은 처리구간 유의적인 차이를 나타내지 않았다 (P>0.05). 발효귀리 대체 급여시 일반귀리 급여보다 에너지 소화율이 높게 나타났다 (P<0.05). The digestibility of HCFO and LCFO were significantly higher (P <0.05) than those of LCO (P <0.05). Nitrogen digestibility did not show significant difference (P> 0.05). The energy digestibility of fermented oats was higher than that of general oats (P <0.05).

Items, %Items,% HCOHCO HCFOHCFO LCOLCO LCFOLCFO SE2 SE 2 ContrastContrast N3 N 3 F4 F 4 2 wk2 wk Dry matter  Dry matter 84.17a 84.17 a 83.69a 83.69 a 81.44b 81.44 b 83.19a 83.19 a 0.400.40 0.0010.001 NSNS Nitrogen  Nitrogen 84.87ab 84.87 ab 85.61a 85.61 a 82.82c 82.82 c 83.71bc 83.71 bc 0.470.47 <0.001<0.001 NSNS Energy  Energy 78.19ab 78.19 ab 79.02a 79.02 a 77.08b 77.08 b 79.69a 79.69 a 0.570.57 NSNS 0.0060.006 6 wk6 wk Dry matter  Dry matter 81.42ab 81.42 ab 83.26a 83.26 a 80.16b 80.16 b 80.56ab 80.56 ab 0.970.97 NSNS NSNS Nitrogen  Nitrogen 82.9882.98 84.4884.48 81.8581.85 82.7382.73 0.870.87 NSNS NSNS Energy  Energy 82.36ab 82.36 ab 84.29a 84.29 a 80.76b 80.76 b 83.90a 83.90 a 0.910.91 NSNS 0.0110.011 1Abbreviation: HCO, high nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); HCFO, high nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); LCO, low nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat).
2 Standard error.
3 High nutrient density diet vs. low nutrient density diet.
4 Raw oat vs. fermented oat.
a,bMeans in the same row with different superscripts differ (P<0.05).
1 Abbreviation: HCO, high nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); HCFO, high nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); LCO, low nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat).
2 Standard error.
3 High nutrient density diet vs. low nutrient density diet.
4 Raw oats etc. fermented oat.
a, b Means in the same row with different superscripts differ (P <0.05).

사료내 발효/효소처리귀리의 대체가 이유자돈의 혈액특성에 미치는 영향은 표 31에 나타내었다. 혈액내 lymphocyte, RBC, WBC 및 glucose 함량에 있어 전체시험기간동안 처리구간 유의적인 차이를 나타내지 않았다 (P>0.05). 고영양소 사료 급여시 혈액내 WBC 수가 증가하였다 (P<0.05).Fermentation / Enzyme treatment in feed The effect of oat substitution on the blood characteristics of weaned piglets is shown in Table 31. There was no significant difference in blood lymphocyte, RBC, WBC and glucose during the whole test period (P> 0.05). The number of WBCs in the blood increased during high nutrient feeding (P <0.05).

ItemsItems HCOHCO HCFOHCFO LCOLCO LCFOLCFO SE2 SE 2 Contrast
Contrast
N3 N 3 F4
F 4
Lymphocyte, %Lymphocyte,%
0 wk  0 wk 52.66 52.66 51.44 51.44 53.76 53.76 53.32 53.32 5.915.91 NSNS NS
NS
2 wk  2 wk 47.58 47.58 49.34 49.34 45.52 45.52 48.02 48.02 4.254.25 NSNS NS
NS
6 wk  6 wk 53.22 53.22 55.18 55.18 53.96 53.96 54.30 54.30 4.734.73 NSNS NS
NS
RBC, 106/RBC, 10 6 /
0 wk  0 wk 6.28 6.28 6.26 6.26 6.24 6.24 6.32 6.32 0.140.14 NSNS NS
NS
2 wk  2 wk 6.14 6.14 6.24 6.24 6.66 6.66 6.70 6.70 0.320.32 NSNS NS
NS
6 wk  6 wk 6.746.74 6.686.68 6.326.32 6.546.54 0.170.17 NSNS NS
NS
WBC, 103/WBC, 10 3 /
0 wk  0 wk 15.30 15.30 15.64 15.64 15.62 15.62 15.68 15.68 1.951.95 NSNS NS
NS
2 wk  2 wk 23.82 23.82 25.80 25.80 18.80 18.80 19.16 19.16 2.612.61 0.0460.046 NS
NS
6 wk  6 wk 19.36 19.36 19.72 19.72 20.38 20.38 21.58 21.58 1.401.40 NSNS NS
NS
Glucose, mg/dLGlucose, mg / dL
0 wk  0 wk 124.2 124.2 119.4 119.4 120.2 120.2 118.8 118.8 4.4 4.4 NSNS NS
NS
2 wk  2 wk 109.0 109.0 110.2 110.2 105.4 105.4 110.4 110.4 4.4 4.4 NSNS NS
NS
6 wk  6 wk 126.6 126.6 116.8 116.8 105.4 105.4 107.0 107.0 9.49.4 NSNS NS
NS
1Abbreviation: HCO, high nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); HCFO, high nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); LCO, low nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat).
2Standard error.
3 High nutrient density diet vs. low nutrient density diet.
4 Raw oat vs. fermented oat.
a, bMeans in the same row with different superscripts differ (P<0.05).
1 Abbreviation: HCO, high nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); HCFO, high nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); LCO, low nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat).
2 Standard error.
3 High nutrient density diet vs. low nutrient density diet.
4 Raw oats etc. fermented oat.
a, b Means in the same row with different superscripts differ (P <0.05).

사료내 발효/효소처리귀리의 대체가 이유자돈의 분변지수에 미치는 영향은 표 32에 나타내었다. 전체시험기간동안 분변지수에 있어서 처리구간 유의적인 차이를 나타내지 않았다 (P>0.05).The effects of in-feed fermentation / enzyme-treated oats substitution on fecal indices of weaned piglets are shown in Table 32. There was no significant difference in the fecundity index during the whole test period (P> 0.05).

ItemsItems HCOHCO HCFOHCFO LCOLCO LCFOLCFO SE2 SE 2 Contrast
Contrast
N3 N 3 F4
F 4
Fecal score5 Fecal score 5 3.35 3.35 3.32 3.32 3.33 3.33 3.28 3.28 0.030.03 NSNS NS
NS
1Abbreviation: HCO, high nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); HCFO, high nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); LCO, low nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); LCFO, low nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); HCOP, high nutrient diet + 0.04% .
2Standard error.
3 High nutrient density diet vs. low nutrient density diet.
4 Raw oat vs. fermented oat.
5Fecal scores were determined at 08:00 and 20:00 using the following fecal scoring system: 1 hard, dry pellet; 2 firm, formed stool; 3 soft, moist stool that retains shape; 4 soft, unformed stool that assumes shape of container; 5 watery liquid that can be poured.
1 Abbreviation: HCO, high nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); HCFO, high nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); LCO, low nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); LCFO, low nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); HCOP, high nutrient diet + 0.04%.
2 Standard error.
3 High nutrient density diet vs. low nutrient density diet.
4 Raw oats etc. fermented oat.
5 Fecal scores were determined at 08:00 and 20:00 using the following fecal scoring system: 1 hard, dry pellet; 2 firm, formed stool; 3 soft, moist stool that retains shape; 4 soft, unformed stool that assumes shape of container; 5 watery liquid that can be poured.

사료내 발효/효소처리귀리의 대체가 이유자돈의 분내 악취물질 발생에 미치는 영향은 표 33에 나타내었다. 분내 ammonia, total mercaptans 및 hydrogen sulfide의 발생은 처리구간 유의적인 차이를 나타내지 않았지만 (P>0.05), 분내 acetic acid 발생은 LCO, LCFO 및 HCOP 처리구가 HCFO 처리구보다 유의적으로 낮게 나타났고 (P<0.05), 저영양소 사료 급여시 감소하였다 (P<0.01).Effect of fermentation / enzymatic treatment of feed on the production of odorous substances in the intramuscular injection of weaned pigs is shown in Table 33. LCO, LCFO and HCOP were significantly lower than those of HCFO (P <0.05). However, there was no significant difference in the production of ammonia, total mercaptans and hydrogen sulfide ) And low nutrient feed (P <0.01).

Items, ppmItems, ppm HCOHCO HCFOHCFO LCOLCO LCFOLCFO SE2 SE 2 ContrastContrast N3 N 3 F4 F 4 NH3 NH 3 19.44 19.44 19.70 19.70 18.42 18.42 18.78 18.78 1.64 1.64 NSNS NSNS Total mercaptansTotal mercaptans 1.08 1.08 0.78 0.78 0.92 0.92 0.98 0.98 0.12 0.12 NSNS NSNS H2SH 2 S 0.66 0.66 0.78 0.78 0.72 0.72 0.62 0.62 0.07 0.07 NSNS NSNS Acetic acidAcetic acid 0.88ab 0.88 ab 1.00a 1.00 a 0.56b 0.56 b 0.54b 0.54 b 0.12 0.12 0.0020.002 NSNS 1Abbreviation: HCO, high nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); HCFO, high nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); LCO, low nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); LCFO, low nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); HCOP, high nutrient diet + 0.04% .
2Standard error.
3 High nutrient density diet vs. low nutrient density diet.
4 Raw oat vs. fermented oat.
a,bMeans in the same row with different superscripts differ (P<0.05).
1 Abbreviation: HCO, high nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); HCFO, high nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); LCO, low nutrient diet + (phase 1, 10% oat), + (phase 2, 5% oat); LCFO, low nutrient diet + (phase 1, 5% oat + 5% fermented oat), + (phase 2, 2.5% oat + 2.5% fermented oat); HCOP, high nutrient diet + 0.04%.
2 Standard error.
3 High nutrient density diet vs. low nutrient density diet.
4 Raw oats etc. fermented oat.
a, b Means in the same row with different superscripts differ (P <0.05).

본 발명은 귀리를 사료원료로 하는 단미사료를 제조함에 있어서 최적의 효소처리 및 발효처리 조건을 밝힌 것으로서, 호화도 및 유리당의 함량이 증가되고, 가축에서의 소화율 및 성장을 개선하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료에 관한 것이며, 이를 배합사료에 혼합하여 급이할 수 있으므로, 사료분야에 있어서의 산업상 이용가능성이 있다.
The present invention discloses optimal enzymatic treatment and fermentation treatment conditions in preparing a dietary feedstuff containing oats as feedstuffs, and is characterized in that the content of starch and free sugars is increased and digestibility and growth in livestock are improved It is about oat grain feed, and it can be mixed with the compounded feed, so that there is possibility of industrial use in the feed field.

Claims (8)

가축에서의 소화율 및 성장을 개선하는 귀리 곡물사료를 가공하는 방법으로서, 상기 방법은 고체발효를 이용하며, 하기의 (a) 내지 (f) 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료의 가공방법.
(a) 원료사료로서 수분함량 40~50%의 귀리를 제공하는 단계;
(b) 귀리를 침지하는 단계;
(c) 증자하는 단계;
(d) Bacilluse subtilis 1-6CX, B. subtilis 1-12CX, B. subtilis 2-19CX, B. subtilis P11, Aspergillus oryzae GB-641, A. niger GB-124 및 A. niger GB-X2로 이루어지는 군으로부터 선택되는 균주를 접종하여 발효하는 단계;
(e) Arabanase, Cellulase, Beta-glucanase, Hemicellulase, Xylanase, Endo-glucanase, Alpha-amylase 및 glucoamylase로 이루어지는 군으로부터 선택되는 효소를 이용해서 효소처리를 행하는 단계; 및
(f) 건조하는 단계
A method of processing oat grain feed to improve digestibility and growth in livestock, said method comprising using solid fermentation and comprising the following steps (a) to (f): .
(a) providing oats having a moisture content of 40-50% as a feedstuff;
(b) immersing the oats;
(c) a step of capitalizing;
(d) a group consisting of Bacillus subtilis 1-6CX, B. subtilis 1-12CX, B. subtilis 2-19CX, B. subtilis P11, Aspergillus oryzae GB-641, A. niger GB-124 and A. niger GB- And inoculating the strain to ferment;
(e) performing an enzyme treatment using an enzyme selected from the group consisting of Arabanase, Cellulase, Beta-glucanase, Hemicellulase, Xylanase, Endo-glucanase, Alpha-amylase and glucoamylase; And
(f) drying step
제 1항에 있어서, (c) 귀리를 증자하는 단계는 80~150℃에서 20~60분간 증자하는 것을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 1, wherein the step (c) of growing oats is carried out at 80 to 150 ° C for 20 to 60 minutes. 삭제delete 제 3항에 있어서, (d) 발효하는 단계는, 20~40℃에서 24~48시간 발효하는 것을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 3, wherein (d) fermentation is performed at 20 to 40 ° C for 24 to 48 hours. 삭제delete 제 1항, 제 2항 또는 제 4항 중 어느 한 항에 의하여 제조된 귀리 곡물사료로서, 유리당의 함량이 14.0mg/g 이상인 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료.The oat grain feed according to any one of claims 1, 2 and 4, wherein the free sugar content is 14.0 mg / g or more. 제 6항에 있어서, 상기 귀리 곡물사료는 알칼린 포스파타아제, 크리스틴아릴아미다아제, 트립신, 산성 포스파타아제, 나프톨-AS-BI-포스포하이드롤라아제, α-갈락토시다아제, β-글루코시다아제, N-아세틸-β-글루코사민다아제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 효소를 포함하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료.The method according to claim 6, wherein the oat grain feed is selected from the group consisting of alkaline phosphatase, cristin arylamidase, trypsin, acid phosphatase, naphthol-AS-BI-phosphohydrolase,? -Galactosidase,? -Glucosidase, N-acetyl-beta-glucosamine diacid, and the like. 제 6항에 있어서, 상기 귀리 곡물사료는 Bacilluse subtilis 1-6CX, B. subtilis 1-12CX, B. subtilis 2-19CX, B. subtilis P11, Aspergillus oryzae GB-641, A. niger GB-124 및 A. niger GB-X2으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 균주가 원료표면에 존재하는 것을 특징으로 하는 귀리 곡물사료.
The method of claim 6, wherein the oat grain feed Bacilluse subtilis 1-6CX, B. subtilis 1-12CX, B. subtilis 2-19CX, B. subtilis P11, Aspergillus oryzae GB-641, A. niger GB-124 , and A and niger GB-X2 is present on the surface of the raw material.
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