KR101449577B1 - 가르시니아 캄보지아 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물 - Google Patents

가르시니아 캄보지아 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 가르시니아 캄보지아(Garcinia cambogia) 추출물을 유효 성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물에 관한 것으로, 멜라닌 생성과정 중의 일부 반응을 저해함으로써, 멜라닌 생성을 억제하여 미백에 효과가 있다.

Description

가르시니아 캄보지아 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물 {Cosmetic composition for skin whitening comprising the extract of Garcinia cambogia as active ingredient}
본 발명은 가르시니아 캄보지아(Garcinia cambogia) 추출물을 유효 성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부의 흑화는 내적, 외적 요인에 대한 피부세포의 반응에 의하여 발생하는 것으로, 대표적인 요인은 피부가 자외선에 노출됨으로 인한 것이다. 즉, 피부가 자외선에 노출되면 티로시나제가 활성화되고, 이것은 피부조직에 존재하는 아미노산의 일종인 티로신에 작용하여 도파(dopa)를 생성시키고, 다시 도파퀴논(dopaquinone)을 생성시키는 산화과정을 통해 피부 색소세포인 멜라노사이트(Melanocyte)내의 멜라노좀(Melanosome)에서 멜라닌이라는 중합체가 합성된다. 이 멜라닌은 피부의 각질형성 세포인 케라티노사이트(Keratinocyte)로 전달되며, 각질화 과정에 의해 피부 표면에 도달하여 자외선으로부터 피부를 보호하게 된다.
멜라닌은 우리 인체에 없어서는 안 되는 자외선 방어제이며, 단백질, 지질, 핵산 등과 같은 생체성분을 변형시키는 다양한 라디칼을 제거하는데 효과적인 프리 라디칼 소거제의 역할을 담당한다. 하지만, 멜라닌이 국소적으로 과도하게 합성되거나 피부병변 및 노화에 따른 피부의 생리기능이 떨어지게 되면, 멜라닌이 피부 표면에 침착되어 기미, 주근깨 및 다양한 색소침착을 유발하게 된다.
피부 흑화의 원인과 기작이 밝혀지면서, 피부 흑화 과정에 관여하는 티로시나제(Tyrosinase)의 활성 저해효과를 갖는 물질들을 화장료에 배합하거나, 멜라닌 생성과정 중의 일부 반응을 저해함으로써 멜라닌의 생성을 감소시키는 방법이 피부 흑화를 방지하기 위해 일반적으로 사용되고 있다. 이러한 목적으로 사용되고 있는 대표적인 물질로는 알부틴, 아스코르빈산, 히드로퀴논, 상백피추출물 및 감초추출물 등의 식물 추출물이 있다.
그런데, 알부틴의 경우, 우수한 티로시나제 활성 저해작용을 갖는 반면, 화장품에 배합시 변색 및 경시변화에 따른 역가 저하 등 안정성에 문제점이 있으며, 피부자극이 커 사용상 한계가 있다. 아스코르빈산은 티로시나제 활성 저해효과가 낮고, 분자 자체의 안정성이 낮아 멜라닌 생성 억제제로 적합하지 않은 문제가 있다. 히드로퀴논은 피부에 대한 자극이 높아 안전성 문제로 현재 화장품 배합시에 그 사용성이 제한되는 문제가 있다. 또한, 대부분의 식물 추출물들은 고농도에서만 비교적 높은 티로시나제 활성 저해 효과를 나타내며, 저농도에서는 저해 효과가 거의 나타나지 않는 등의 문제점을 갖고 있다. 특히, 기존 멜라닌 생성 억제제들은, 실제 사람 피부에 대한 임상적인 실험시 미백효과가 미약하다는 가장 큰 문제점이 있다.
한편, 가르시니아 캄보지아(Garcinia cambogia)는 인도와 남부 아시아 지역에서 수세기 동안 돼지고기 및 생선의 산미제(souring agent) 및 카레 등의 향신료로 사용되어 왔으며, 국내에서 가르시니아 캄보지아 추출물은 '식품공전'에 따라 체중조절용 조제식품에 부원료(최소량 5% 이하를 사용하여야 하나, 1일 섭취량 6 g을 초과할 수 없음)로 사용되고 있다. 또한, 미국 등 외국에서는 500~4500 ㎎/일의 섭취량 수준에서 식이보충제 또는 식품원료 등으로 판매되고 있다.
가르시니아 캄보지아를 이용한 특허문헌으로는, 대한민국 등록특허 제10-1211067호 (발명의 명칭: 가르시니아 캄보지아 껍질추출물을 함유하는 안정한 다이어트용 젤리 조성물 및 그 제조방법)에, 가르시니아 캄보지아 껍질추출물과 겔화제를 포함하는 젤리형태의 체중감량을 위한 다이어트용 건강기능식품의 조성물에 대해 기재되어 있다. 그러나, 가르시니아 캄보지아 추출물을 함유하는 피부미백용 화장료 조성물에 대해서는 기재되어 있지 않다. 또한, 대한민국 등록특허 제10-1045279호 (발명의 명칭: 비만억제효능을 갖는 기능성 식품의 조성물)에는 치커리 추출물(이눌린), 가르시아캄보지아 추출물(HCA) 및 보이차의 비만억제효능에 대해 기재되어 있다. 그러나, 가르시니아 캄보지아 추출물을 함유하는 피부미백용 화장료 조성물에 대해서는 기재되어 있지 않다.
본 발명은 천연 소재 추출물을 이용한 피부미백용 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다. 좀 더 구체적으로, 멜라닌 생성과정 중의 일부 반응을 저해하고, 멜라닌 생성을 억제하여 미백효능이 우수하며, 피부자극이 없는 미백용 화장료 조성물을 개발하여 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 제1형태로, 가르시니아 캄보지아 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 가르시니아 캄보지아 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉 통상적인 온도와 압력의 조건 하에서 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있다. 다만, 바람직하게는 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매를 이용한 용매 추출법, 초임계 추출법 및 초음파 추출법 중 선택되는 어느 하나의 추출법을 통해 수득되는 것이 좋다. 더욱 바람직하게는 에탄올, 70%(v/v) 에탄올 또는 물을 사용하여 추출된 것이 좋고, 가장 바람직하게는 70%(v/v) 에탄올을 사용하여 추출된 것이 좋다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 초임계 추출법은 초임계 유체 추출법(supercritical fluid extraction)을 의미하는 것으로, 일반적으로 초임계 유체는 기체가 고온 고압 조건에서 임계점에 도달하였을 때, 액체 및 기체의 성질을 지니고 있으며, 화학적으로 비극성 용매와 유사한 극성을 지니고 있다. 이러한 특성으로 인해 초임계 유체는 지용성 물질의 추출에 사용되고 있다. 초임계 유체로 사용되는 이산화탄소는 초임계 유체기기의 작동으로 압력 및 온도가 임계점까지 이르는 과정을 거치면서 액체 및 기체 성질을 동시에 지닌 초임계 유체가 되고 그 결과 지용성 용질에 대한 용해도가 증가한다. 초임계 이산화탄소가 일정량의 시료를 함유한 추출 용기를 통과하게 되면 시료에 함유된 지용성 물질은 초임계 이산화탄소에 추출되어 나온다.
또한, 상기 초임계 추출법은 일 예로 이산화탄소 또는 이산화탄소에 추가적으로 공용매를 혼합한 혼합유체를 초임계 유체로 사용함으로써 유효 성분을 추출할 수 있다. 상기 공용매는 일 예로 클로로포름, 에탄올, 메탄올, 물, 에틸아세테이트, 헥산 및 디에틸에테르로 이루어진 군에서 선택되는 하나 또는 그 이상의 혼합물을 사용할 수 있다. 초임계 이산화탄소를 통해 지용성 물질을 추출한 후 추출 용기에 남아있는 시료에 다시 소량의 공용매가 함유된 초임계 이산화탄소를 흘려 통과시키면 순수한 초임계 이산화탄소만으로는 추출되지 않았던 성분들이 추출되어 나오게 할 수 있다.
초임계 이산화탄소를 이용하여 추출된 시료는 이산화탄소를 함유하고 있는데 이산화탄소는 실온에서 공기 중으로 휘발되므로 쉽게 제거할 수 있고, 공용매는 감압증발기로 제거할 수 있다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 초음파 추출법은 초음파 진동에 의해 발생되는 에너지를 이용하는 추출방법으로, 수용성 용매 속에서 초음파가 시료에 포함된 불용성인 물질을 파괴시킬 수 있다. 초음파를 가하게 되면, 발생하는 높은 국부온도로 인하여 주위에 위치하는 반응물 입자들의 운동에너지가 커져 반응에 필요한 충분한 에너지를 얻게 된다. 또한, 초음파 에너지의 충격효과로 높은 압력을 유도하여 시료에 함유된 물질과 용매의 혼합 효과를 높여주어 추출효율을 증가시킬 수도 있다. 상기 초음파 추출법에 사용할 수 있는 추출용매는 클로로포름, 에탄올, 메탄올, 물, 에틸아세테이트, 헥산 및 디에틸에테르로 이루어진 군에서 선택되는 하나 또는 그 이상의 혼합물을 사용할 수 있다. 이때, 추출된 시료는 용매를 제거하기 위해, 일 예로 진공 여과하여 여과액을 회수한 후 감압증발기를 사용할 수 있고, 동결 건조하는 방법을 사용할 수도 있다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 가르시니아 캄보지아 추출물은 다양한 기관(잎, 뿌리, 줄기, 가지, 껍질, 열매, 열매의 껍질 및 종자 등)으로부터 추출하여 얻은 것을 의미하고, 바람직하게는 잎, 줄기, 가지, 껍질, 열매, 열매의 껍질 또는 뿌리로부터 추출하여 얻는 것이 좋다. 가장 바람직하게는 열매의 껍질로부터 추출하여 얻는 것이 좋다.
한편, 본 발명은 제2형태로, 가르시니아 캄보지아를 발효시켜 수득한 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물을 제공한다. 이때, 상기 발효는 일 예로 효모 또는 유산균을 발효균으로 사용할 수 있으며, 100~500 메쉬로 파쇄된 가르시니아 캄보지아가 첨가된 배지를 사용할 수 있다. 이때, 첨가되는 가르시니아 캄보지아는, 상기의 가르시니아 캄보지아 추출물을 배지 중에 첨가하거나, 가르시니아 캄보지아의 잎, 뿌리, 줄기, 가지, 껍질, 열매, 열매의 껍질 및 종자 중 선택되는 어느 하나를 파쇄하여 배지 중에 직접 첨가할 수 있다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 가르시니아 캄보지아 추출물 또는 가르시니아 캄보지아 발효물은, 바람직하게 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.001~30.0중량% 함유되는 것이 좋다. 가장 바람직하게는 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.01~10중량% 함유되는 것이 좋다. 상기 추출물의 함량이 0.001중량% 미만인 경우에는 피부 미백 개선 효과가 나타나지 않으며, 30.0중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 대한 피부 미백 개선 효과 증대 정도가 미미하고, 제형상의 안전 및 안정성에 문제가 있으며, 경제적이지 않다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물은 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 일 예로 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 일 예로 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 일 예로 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라가칸트 등이 이용될 수 있다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 계면활성제 함유된 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형 또는 비누일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 일 예로, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물은 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.
본 발명의 가르시니아 캄보지아(Garsinia cambogia) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물은 멜라닌 생성과정 중의 일부 반응을 저해함으로써, 멜라닌 생성을 억제하여 피부 미백에 효과를 발휘한다.
이하, 본 발명의 내용에 대해 하기 실시예에서 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
[실시예 1: 가르시니아 캄보지아( Garcinia cambogia ) 추출물의 제조]
세절하여 음건한 가르시니아 캄보지아(Garcinia cambogia) 열매와 껍질 100 g을 분쇄하여 분쇄물을 제조하였다. 상기 분쇄물에 70% 에탄올 5 L를 첨가한 후, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서, 80℃ 온도로 3시간 동안 가열하여 추출하였다. 상기 추출물을 300메쉬(mesh) 여과포로 여과한 후, 와트만 2번 여과지로 다시 한번 여과하였다. 그 후, 칼슘을 넣고, 냉각콘덴서가 달린 증류장치로 60℃ 온도에서 감압 농축하여 13 g의 추출물을 수득하였다.
[ 실시예 2~19: 가르시니아 캄보지아 ( Garcinia cambogia ) 추출물의 제조]
추출용매를 달리한 것을 제외하고는, 실시예 1에서와 동일한 방법으로 추출하여 가르시니아 캄보지아 추출물을 얻었다.
그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
추출용매 최종 추출물의 건조중량(단위:g)
실시예2 정제수 8.8
실시예3 10% 에탄올 9.2
실시예4 20% 에탄올 10.4
실시예5 30% 에탄올 13.1
실시예6 40% 에탄올 12.7
실시예7 50% 에탄올 14.9
실시예8 60% 에탄올 14.0
실시예9 80% 에탄올 10.3
실시예10 90% 에탄올 10.7
실시예11 100% 에탄올 9.5
실시예12 메탄올 9.6
실시예13 n-프로판올 6.9
실시예14 이소프로판올 8.9
실시예15 2-부탄올 8.0
실시예16 아세톤 6.3
실시예17 클로로포름 5.8
실시예18 에틸아세테이트 6.3
실시예19 1,3-부틸렌글리콜 6.7
[ 실시예 20: 가르시니아 캄보지아 ( Garcinia cambogia ) 발효물의 제조]
상기 실시예 1에서 수득한 가르시니아 캄보지아 추출물에 10배의 정제수를 가하여 희석한 후, 효모 배양용 배지에 30 g/L가 되도록 첨가하였다. 첨가 후, 효모 균주 (사카로마이세스 세레비지애)를 50,000 CFU/L(colony forming unit/L)의 양으로 첨가했다.
이후, 배양 온도 30℃, pH 6 및 호기적 조건에서 10일간 배양하고, 배양을 완료하였다. 배양 완료 후, 발효액으로부터 멸균 후, 균체를 제거하고, 가르시니아 캄보지아 발효물을 수득하였다.
[실험예 1: 티로시나제 활성 저해효과 분석]
본 실험예에서는 상기 실시예 1의 가르시니아 캄보지아 추출물과 실시예 20의 가르시니아 캄보지아 발효물의 티로시나제 활성 저해효과를 확인하고자 하였다. 이때, 미백제로 잘 알려진 상지추출물과 알부틴을 비교 샘플로 사용하였다.
티로시나제는 생체 내에서 티로신(tyrosine)이라는 물질의 산화과정을 촉진하여 멜라닌이 생성되도록 하는 효소이다. 티로시나제는 버섯에서 분리 및 정제된 것으로 Sigma 사에서 구입하여 사용하였다. 기질인 L-티로신은 0.05 M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 용해하여 0.1 ㎎/㎖ 용액으로 만들고, 가르시니아 캄보지아 추출물은 0.05 M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 적당한 농도로 조절하여 용해한 후 사용하였다. L-티로신 용액 0.5 ㎖를 시험관에 넣고 여기에 가르시니아 캄보지아 추출물 시료액과 가르시니아 캄보지아 발효물 0.5 ㎖를 각각 가하고 37℃ 항온기에서 10분간 방치하였다. 그 후, 200 unit/㎖ 티로시나제 0.5 ㎖를 첨가하고 37℃에서 10분간 반응시켰다. 이 반응액이 든 두 시험관을 얼음 위에 놓아 급냉시켜 반응을 중지시킨 후, 분광광도계를 파장 475 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 가르시니아 캄보지아 추출물 대신 완충용액 0.5 ㎖를 넣은 것을 사용하였다. 이때, 티로시나제에 대한 활성 저해율(%)은 하기 수학식 1에 의하여 계산하였으며, 티로시나제 활성이 50% 저해될 때의 IC50의 값을 각 미백물질에 대해 측정하였다. 그 결과를 하기의 표 2에 나타내었다.
Figure 112014049891673-pat00001
미백물질 IC50(ug/ml)(티로시나제 활성 50%저해시 필요한 농도)
실시예 1 18.4
실시예 20 11.4
상지추출물 240.7
알부틴 200.5
상기 표 2에서 알 수 있는 바와 같이, 티로시나제 활성을 50% 저해하는 가르시니아 캄보지아 추출물의 농도(실시예 1)는 18.4 ug/ml이고, 발효물(실시예 20)의 농도는 11.4 ug/ml으로 나타났다. 상지추출물이 240.7 ug/ml, 알부틴이 200.5 ug/ml인 것과 비교할 때, 가르시니아 캄보지아 추출물과 그 발효물의 티로시나제 활성 억제효과가 월등히 뛰어난 것을 확인할 수 있었다.
[실험예 2: B16F1 멜라닌 형성 세포를 이용한 멜라닌 생성 억제효과 분석]
본 실험예에서는 가르시니아 캄보지아 추출물과 가르시니아 캄보지아 발효물의 미백 효과를 확인하기 위해 B16F1 멜라닌 형성 세포에 대한 멜라닌 생성 억제 정도를 알아보고자 하였다. 이때, 미백제로 잘 알려진 알부틴을 비교샘플로 사용하였다.
본 실험예에서 사용한 B16F1 멜라닌 형성 세포는 마우스에서 유래한 세포균으로, ATCC(American Type Culture Collection)로부터 분양받아 사용하였다. B16F1 멜라닌 형성 세포를 6웰 플레이트에 각 웰당 2×105 농도로 분주하고, 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 분주하고, 상기 실시예 1에서 수득된 가르시니아 캄보지아 추출물과 실시예 20에서 수득된 가르시니아 발효물을 각각 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양 후, 세포를 트립신-EDTA로 떼어내고, 세포수를 측정한 다음 원심분리하여 세포를 회수하였다. 세포 내 멜라닌의 정량은 로탄(Lotan: Cancer Res., 40: 3345-3350, 1980)의 방법을 변형하여 실시하였다. 셀 펠릿을 PBS로 1회 세척한 후 균질화 버퍼액(50 mM 소듐 포스페이트, pH6.8, 1% Triton X-100, 2 mM PMSF) 1 ml를 첨가하여 5분간 와류하여 세포를 파쇄하였다. 원심분리(3,000rpm, 10분)하여 얻은 세포 여액에 1N NaOH(10% DMSO)를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해한 후, 마이크로 플레이트 판독기로 405 nm에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌 생성 저해율(%)을 측정하였다. B16F1 멜라닌 형성 세포의 멜라닌 생성 저해율(%)은 하기 수학식 2에 의하여 계산하였으며, 그 결과를 표 3에 나타내었다.
Figure 112014049891673-pat00002
A: 시료를 첨가하지 않은 웰의 멜라닌 양
B: 시료를 첨가한 웰의 멜라닌 양
처리 농도(ug/ml) 멜라닌 함량(pg/cell)
가르시니아 캄보지아 추출물
(실시예 1)		 가르시니아 캄보지아 발효물
(실시예 20)		 알부틴처리
무처리군 4.41 4.41 4.41
10 2.61 2.51 2.37
50 2.08 1.44 2.16
100 1.18 0.78 2.04
200 0.79 0.55 1.97
실험 결과, 표 3에서 보는 바와 같이, 가르시니아 캄보지아 추출물과 가르시니아 캄보지아 발효물의 농도가 50 ug/ml 이상이 되면서부터 멜라닌 생성 억제능이 알부틴보다 우수하게 나타나는 것을 확인할 수 있었다.
[제조예 1: 가르시니아 캄보지아 추출물을 함유하는 미백 화장료 조성물 제조]
상기 실시예 1의 가르시니아 캄보지아 추출물을 5 g, 글리세린 10 g, 베타인 5 g, PEG 1500 2g, 알란토인 0.1 g, DL-판테놀 0.3 g, EDTA-2Na 0.02 g, 벤조페논-9 0.04 g, 히드록시에틸 셀룰로오스 0.1 g, 소듐히아루로네이트 8 g, 카르복시비닐폴리머 0.2 g, 트리에탄올아민 0.18 g, 옥틸도데칸올 0.3 g, 옥틸도데세스-16 0.4 g, 에탄올 6 g, 향 0.2 g, Germall 115 0.3 g, 정제수 61.86 g 를 혼합하여 미백용 화장료 조성물을 제조하였다.
[제조예 2: 가르시니아 캄보지아 발효물을 함유하는 미백 화장료 조성물 제조]
상기 제조예 1에서 가르시니아 캄보지아 추출물(실시예 1) 대신 가르시니아 캄보지아 발효물(실시예 20)을 사용하는 것을 제외한 나머지는 동일한 성분을 혼합하여 미백용 화장료 조성물을 제조하였다.
[비교예 1: 알부틴을 함유하는 미백 화장료 조성물 제조]
알부틴 2 g, 글리세린 10 g, 베타인 5 g, PEG 1500 2g, 알란토인 0.1 g, DL-판테놀 0.3 g, EDTA-2Na 0.02 g, 벤조페논-9 0.04 g, 히드록시에틸 셀룰로오스 0.1 g, 소듐히아루로네이트 8 g, 카르복시비닐폴리머 0.2 g, 트리에탄올아민 0.18 g, 옥틸도데칸올 0.3 g, 옥틸도데세스-16 0.4 g, 에탄올 6 g, 향 0.2 g, Germall 115 0.3 g, 정제수 64.86 g 를 혼합하여 에센스 제형의 미백용 화장료 조성물을 제조하였다.
[실험예 3: 피부미백 화장료 조성물의 미백 효능 분석]
본 실험예에서는 상기 제조예 1의 가르시니아 캄보지아 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물과, 제조예 2의 가르시니마 캄보지아 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물과, 비교예 1의 알부틴을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물의 미백 효능을 알아보고자 하였다.
임상 실험을 위하여, 색소침착증을 가지고 있는 건강한 성인 여성 60명을 무작위로 20명씩 3개 그룹(A, B 및 C)으로 나눈 후, A 그룹을 대상으로 제조예 1의 화장료 조성물을, B 그룹을 대상으로 제조예 2, C 그룹을 대상으로 비교예 3의 화장료 조성물을 각각 1일 2회씩 8주간 도포하였다. 이후, 피부색의 변화를 분광광도계(spectrophotometer, Minolta CM600-d)를 이용하여 색의 밝기 변화(ΔL)를 측정하고, 복수의 숙련자에 의한 객관적 육안관찰과 피검자에 의한 주관적 육안관찰을 실시하여 미백효과를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다. 이때, 미백 효능 정도를 다음의 미백 효능 평가 기준에 따라 분류하여 평가하였다.
<미백효능 평가 기준>
-3: 매우악화 -2: 악화 -1: 약간 악화 0: 변화 없음
1: 약간 개선 2: 개선 3: 매우 개선
피검자 피부색의밝기변화
(ΔL)		 숙련자의 객관적 평가
(ΔL)		 피검자의 주관적 평가
(ΔL)
A 그룹 B 그룹 C 그룹 A 그룹 B 그룹 C 그룹 A 그룹 B 그룹 C 그룹
1 3.4 3.4 1.7 2 2 0 2 1 0
2 2.0 3.1 1.9 0 1 1 1 2 1
3 2.9 2.9 1.5 1 1 0 1 2 0
4 3.2 2.8 1.7 2 2 0 1 1 0
5 3.7 3.5 2.1 2 2 1 2 1 1
6 3.1 3.6 2.0 1 1 1 1 2 1
7 4.0 3.4 2.4 2 2 1 2 2 1
8 3.4 3.2 1.7 1 1 0 1 0 0
9 2.8 3.7 1.1 1 1 0 0 1 0
10 3.1 3.0 1.8 1 1 0 1 2 0
11 4.2 2.9 2.4 2 2 1 2 2 1
12 2.7 4.4 2.1 1 2 1 0 1 1
13 3.5 4.3 2.3 2 2 1 1 1 1
14 3.7 4.2 1.9 2 1 0 2 1 0
15 3.1 2.9 1.8 1 1 0 1 2 0
16 4.3 3.0 2.7 2 2 2 2 2 2
17 2.1 3.5 1.9 0 2 0 0 1 0
18 3.8 3.4 2.3 2 0 1 1 2 0
19 3.4 3.2 2.4 1 1 1 0 1 1
20 3.6 2.9 2.9 2 2 1 1 1 2
평균 3.30 3.37 2.03 1.4 1.45 0.6 1.1 1.40 0.6
실험 결과, 가르시니아 캄보지아 추출물을 함유하는 피부미백 화장료 조성물을 도포한 A 그룹의 평균 ΔL 값은 3.30(p<0.05)이었고, 가르시니아 캄보지아 발효물을 함유하는 피부미백 화장료 조성물을 도포한 B 그룹의 평균 ΔL 값은 3.37(p<0.05)이었고, 알부틴을 함유한 피부미백 화장료 조성물을 도포한 C그룹의 평균 ΔL 값은 2.03(p<0.05)이었다.
한편, 숙련자에 의한 미백 평가에서 숙련자에 의한 미백 평가에서 A그룹은 1.4, B그룹은 1.45, C그룹은 0.60이었으며, 피검자에 의한 미백 평가에서는 A그룹은 1.1, B그룹은 1.4, C그룹은 0.6으로 나타났다.
이를 통해, 본 발명의 가르시니아 캄보지아 추출물 및 가르시니아 캄보지아 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부미백 화장료 조성물의 미백효능이 더 우수한 것을 확인할 수 있었다.
[실험예 4: 제형의 안정성 실험]
본 실험예는 상기 제조예 1의 가르시니아 캄보지아 추출물과, 제조예 2의 가르시니아 캄보지아 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물 및 비교예 1의 알부틴을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물 제형의 안정성을 알아보고자 하였다.
상기 제조예 1의 가르시니아 캄보지아 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물과, 제조예 2의 가르시니아 캄보지아 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물 및 비교예 1의 알부틴을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물을 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 불투명 초자 용기에 각각 담아 2주 동안 보관하고, 또한 4℃로 일정하게 유지되는 완전히 차광된 냉장고 내에서 불투명 초자용기에 담아 2주 동안 보관한 후, 변색 정도를 비교측정하였다.
실험 결과를 하기 표 5에 나타내었다. 이때, 제품 변색 정도는 다음의 제품 변색 평가 기준에 따라 분류하여 평가하였다.
<제품 변색 평가 기준>
0: 변화없음 1: 극히 조금 변함 2: 조금 변함 3: 조금 심하게 변함
4: 심하게 변함 5: 극히 심하게 변함
온도 실험물질의 변색 정도
제조예 1 제조예 2 비교예 1
45 ℃ 0.5 0.4 4.5
4 ℃ 0 0 1.5
실험 결과, 본 발명의 가르시니아 캄보지아 추출물을 함유하는 미백화장료와 가르시니아 캄보지아 발효물을 함유하는 미백화장료는 변색이 거의 일어나지 않아, 제형의 안정성이 훨씬 우수함을 알 수 있었다.
[실험예 5: 피부 자극 실험]
본 실험예는 상기 제조예 1의 가르시니아 캄보지아 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물과 제조예 2의 가르시니아 캄보지아 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물 및 비교예 1의 알부틴을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물의 피부자극 정도를 알아보고자 성인 남,녀 20명을 대상으로 등부위에 5×20 cm 크기로 각 시료의 일정량(20 ㎕)을 각각 24시간 동안 첩포한 후, 제거하고, 1시간, 24시간 경과후, 육안으로 피부상태 변화를 판독하였으며, 그 결과를 표 6에 나타내었다. 이때, 피부상태의 변화 정도는 다음의 피부상태 평가 기준에 따라 분류하여 평가하였다.
<피부 상태 평가 기준>
0: 변화없음 1: 극히 조금 변함 2: 조금 변함 3: 조금 심하게 변함
4: 심하게 변함 5: 극히 심하게 변함
경과시간 피부상태 변화
제조예 1 제조예 2 비교예1
1 시간 0.27 0.00 0.41
24 시간 0.00 0.00 0.00
실험 결과, 본 발명의 가르시니아 캄보지아 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물과 가르시니아 캄보지아 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물이 비교예 1의 조성물에 비해 피부 자극이 적은 것으로 나타났다.

Claims (6)

  1. 가르시니아 캄보지아(Garcinia cambogia)의 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부미백용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 가르시니아 캄보지아 추출물은,
    (a) 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매를 이용한 용매 추출법, (b) 초임계 추출법 및 (c) 초음파 추출법 중 선택되는 어느 하나의 추출법을 통해 추출된 것을 특징으로 하는 피부미백용 화장료 조성물.
  3. 가르시니아 캄보지아(Garcinia cambogia)를 발효시켜 수득한 발효물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부미백용 화장료 조성물.
  4. 제3항에 있어서,
    상기 발효는,
    효모 또는 유산균을 발효균으로 사용하는 것을 특징으로 하는 피부미백용 화장료 조성물.
  5. 제3항에 있어서,
    상기 발효는,
    100~500 메쉬로 파쇄된 가르시니아 캄보지아가 첨가된 배지를 사용하는 것을 특징으로 하는 피부미백용 화장료 조성물.
  6. 제1항 또는 제3항에 있어서,
    상기 가르시니아 캄보지아 추출물 또는 가르시니아 캄보지아 발효물은,
    화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.001~30.0 중량% 함유되는 것을 특징으로 하는 피부미백용 화장료 조성물.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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US20040146539A1 (en) 2003-01-24 2004-07-29 Gupta Shyam K. Topical Nutraceutical Compositions with Selective Body Slimming and Tone Firming Antiaging Benefits
US20040208902A1 (en) 2003-04-18 2004-10-21 Gupta Shyam K. Controlled-release nano-diffusion delivery systems for cosmetic and pharmaceutical compositions
US20060110415A1 (en) 2004-11-22 2006-05-25 Bioderm Research Topical Delivery System for Cosmetic and Pharmaceutical Agents

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