KR101426257B1 - 톡소플라빈을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리용 배지 조성물 및 이의 용도 - Google Patents

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Abstract

본 발명의 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속(Fusarium species) 곰팡이 균주의 선택적 분리용 조성물은 기존의 발암물질인 PCNB 물질을 기반으로 한 선택 배지를 대체할 수 있고, 푸자리움 속 곰팡이를 단시간 내에 분리할 수 있어 식물 병을 신속·정확하게 진단할 수 있을 뿐만 아니라, 병역학, 분자생물학, 집단 유전학 분야에서 병원균 연구를 위한 효과적인 균주 분리가 가능할 것이다.

Description

톡소플라빈을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리용 배지 조성물 및 이의 용도{Medium composition for selective isolation of Fusarium species comprising toxoflavin as effective component and uses thereof}
본 발명은 톡소플라빈을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리용 배지 조성물 및 이의 용도에 관한 것으로, 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속(Fusarium species) 곰팡이 균주의 선택적 분리용 조성물, 선택적 분리용 배지 조성물, 선택적 분리용 배지, 상기 배지에 푸자리움 속 균주를 포함하는 곰팡이 시료를 도입하여 배양하는 단계를 포함하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리 방법 및 시료 중의 푸자리움 속 균주를 스크리닝하는 방법, 톡소플라빈을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속 균주 이외의 곰팡이 균주 성장 억제용 조성물 및 푸자리움 속 균주 이외의 곰팡이 균주 성장 억제용 배지 조성물을 제공한다.
푸자리움 속(Fusarium species)의 곰팡이는 약 100여 종으로 식물에 감염되면 심각한 병을 야기하게 되고 이로 인하여 경제적인 손실이 발생한다. 특히 붉은곰팡이(Fusarium graminearum)는 벼, 밀 및 보리의 이삭마름병과 옥수수의 이삭썩음병을 일으켜 작물의 수량감소를 야기하는 주요 병원균이다. 뿐만 아니라 붉은곰팡이는 트리코세신이나 제랄레논과 같은 곰팡이 독소를 생성하여 이에 오염된 곡류를 섭취한 인축에 치명적인 중독증을 야기하기도 한다.
세균성 벼알마름병균의 병징이 푸자리움에 의한 곰팡이 이삭마름병의 병징과 매우 유사하다는 보고가 있으며, 이러한 병징을 보이는 벼이삭으로부터 세균성 벼알마름병균의 원인균인 벌크홀데리아 글루메(Burkholderia glumae)와 곰팡이 이삭마름병균의 원인균인 푸자리움 그라미네아룸(Fusarium graminearum)이 함께 분리되는 경우가 빈번하다는 보고가 있다. 이는 벼알마름병균이 생산하는 이차대사산물인 톡소플라빈(toxoflavin)에 의해 주위에 존재하는 타 미생물이 생존할 수 없고 벼알마름병징을 보이는 이삭에는 원인균인 벌크홀데리아 글루메만이 존재할 것이라는 가설에 위배되는 결과이다. 이러한 정황으로 타 미생물은 톡소플라빈에 감수성인 반면, 특이적으로 푸자리움 속 곰팡이는 톡소플라빈에 저항성인 것을 알 수 있다.
공기, 토양 및 물과 같은 자연환경 및 병든 식물체로부터 병원균을 분리하는 것은 정확한 진단뿐만 아니라, 병역학, 분자생물학 및 집단유전학 분야에서 병원균 연구를 위한 균주 확보에 있어 매우 중요하다. 특히 선택 배지를 이용하여 분리하는 것은 다른 부생균 및 병원균의 생장은 억제시키고 목적 병원균을 정확히 분리할 수 있어 가장 효과적인 방법이라 할 수 있다. 푸자리움 속 곰팡이를 분리하기 위한 많은 노력은 지난 반세기 동안 이루어져 왔으며, 현재 푸자리움 속 곰팡이를 분리하기 위해 사용되는 선택 배지는 PCNB(pentachloronitrobenzene)라는 농약을 함유하는 것을 이용으로 하고 있다. PCNB는 다양한 접합균류의 생장을 억제하는 반면, 푸자리움 속 곰팡이는 고농도의 PCNB에서도 생존할 수 있고 비록 느리긴 하지만 지속적인 생장이 가능한 특성을 이용하여 선택 배지로 사용되고 있다. 하지만 PCNB가 잠재적인 발암물질로 알려지면서 농약으로서의 등록이 취소되고, 현재는 그 생산이 중단된 상태로 연구용으로만 활용되고 있다. PCNB를 지속적으로 사용하게 되면 연구자들은 유해 물질에 지속적으로 노출되므로, PCNB를 대체할 푸자리움 속 곰팡이 균주의 선택 배지 개발이 시급한 실정이다.
한국공개특허 제2008-0051316호에는 '벌크홀데리아 글루메 유래 톡소플라빈 제초제 및 이의 분리방법'이 개시되어 있으나, 본 발명의 톡소플라빈을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리용 배지 조성물 및 이의 용도와는 상이하다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 안출된 것으로서, 본 발명에서는 타 미생물의 생장은 억제하고 푸자리움 속 곰팡이만이 생존 및 생장이 가능하여 푸자리움 속 곰팡이 균주를 더욱 효율적으로 선택·분리할 수 있고, 기존에 사용되어 왔던 인체에 유해한 PCNB를 대체할 수 있는 배지 첨가물인 벌크홀데리아 글루메 유래의 톡소플라빈을 개발함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주의 선택적 분리용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주의 선택적 분리용 배지 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 배지 조성물로 제조된 푸자리움 속(Fusarium species) 균주의 선택적 분리용 배지를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 배지에 푸자리움 속(Fusarium species) 균주를 포함하는 곰팡이 시료를 도입하여 배양하는 단계를 포함하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 배지에 곰팡이를 포함하는 시료를 도입하여 배양하는 단계를 포함하는 시료 중의 푸자리움 속 균주를 스크리닝하는 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주 이외의 곰팡이 균주 성장 억제용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주 이외의 곰팡이 균주 성장 억제용 배지 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 조성물을 곰팡이를 포함하는 시료에 처리하는 단계를 포함하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주 이외의 곰팡이 균주의 성장을 억제하는 방법을 제공한다.
본 발명에 따르면, 푸자리움 속(Fusarium species)의 식물병원성 곰팡이를 분리하기 위해 세균성 벼알마름병균인 벌크홀데리아 글루메가 생산하는 2차 대사산물인 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 선택 배지는, 다른 부생균 및 타 병원균의 생장을 억제시키는 반면, 푸자리움 속 곰팡이만이 생존 및 정상적인 생장이 가능하므로, 기존의 발암물질인 PCNB 물질을 기반으로 한 선택 배지를 대체할 수 있다. 또한, 푸자리움 속 곰팡이를 단시간 내에 분리할 수 있어 식물 병을 신속·정확하게 진단할 수 있을 뿐만 아니라, 병역학, 분자생물학, 집단 유전학 분야에서 병원균 연구를 위한 효과적인 균주 분리가 가능할 것이다.
도 1은 본 발명의 선택적 분리용 배지에서 배양된 곰팡이 균주 종류별 균사 생장 정도를 나타낸 사진이다. MO: 도열병균인 마그나포르테 오리자(Magnaporthe oryzeae), CG: 탄저병균인 콜레토트리쿰 글로에오스포리오이데스(Colletotrichum gloeosporioides), PS: 부생균인 페니실린(Penicillium sp.), FG: 푸자리움 그라미네아룸(Fusarium graminearum), FO: 푸자리움 옥시스포룸(Fusarium oxysporum), 0: 0ppm, 5: 5ppm, 10: 10ppm, 20: 20ppm, 40: 40ppm, 80: 80ppm.
도 2는 본 발명의 선택적 분리용 배지에 벼 낟알을 거치하여 식물 시료로부터 도입된 곰팡이 발생 양상을 나타낸 사진이다. 0: 0ppm, 80: 80ppm.
도 3은 본 발명의 선택적 분리용 배지를 1시간 동안 공기에 노출시켜 공기 시료로부터 도입된 곰팡이 발생 양상을 나타낸 사진이다. 0: 0ppm, 20: 20ppm, 80: 80ppm.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주의 선택적 분리용 조성물을 제공한다.
세균성 벼알마름병균의 원인균인 벌크홀데리아 글루메(Burkholderia glumae)가 생산하는 산물인 톡소플라빈은 세포내에서 활성산소의 생산을 촉진함으로써 미생물 뿐만 아니라 식물 세포에 독성이 있는 것으로 알려져 있다. 반면, 세균성 벼알마름병균의 원인균인 벌크홀데리아 글루메와 곰팡이 이삭마름병균의 원인균인 푸자리움 그라미네아룸(Fusarium graminearum)이 함께 분리되므로 푸자리움 속 곰팡이 균주가 톡소플라빈에 저항성인 것을 알 수 있다. 따라서 본 발명에 따라 톡소플라빈을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속 곰팡이 균주의 선택 배지를 유용하게 이용할 수 있다.
또한, 본 발명은 톡소플라빈을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리용 배지 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 조성물에서, 상기 푸자리움 속 균주는 푸자리움 그라미네아룸(Fusarium graminearum) 또는 푸자리움 옥시스포룸(Fusarium oxysporum)일 수 있으나, 이에 제한하지 않는다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 조성물에서, 상기 톡소플라빈은 배지 조성물 중에 20~100ppm이 함유될 수 있고, 더욱 바람직하게는 80~100ppm이 함유될 수 있으나, 이에 제한하지 않는다.
일 구현예에서, 푸자리움 속 균주의 선택적 분리용 배지의 조제에 있어, 톡소플라빈을 제외한 배지 조성물을 고압멸균시킨 다음 여과살균한 톡소플라빈을 첨가, 더욱 바람직하게는 고압멸균시킨 배지가 50℃ 이하로 식은 다음 여과살균한 톡소플라빈 80~100ppm을 첨가하는 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 톡소플라빈을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리용 배지를 제공한다.
상기 푸자리움 속 균주의 선택적 분리용 배지는 당업계에 공지된 균주 배양용 배지 제조 방법에 따라 제조되며, 유효성분으로 본 발명의 톡소플라빈을 함유하는 배지이다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 상기 배지는 액체 배지 또는 고체 배지일 수 있으나, 이에 제한하지 않는다.
또한, 본 발명은 톡소플라빈을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리용 배지에 푸자리움 속 균주를 포함하는 곰팡이 시료를 도입하여 배양하는 단계를 포함하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리 방법을 제공한다.
본 발명에 따른 푸자리움 속 균주의 선택적 분리 방법은 본 발명의 배지에 푸자리움 속 균주를 포함하는 곰팡이 시료를 도입하여 배양하면 푸자리움 속 균주 이외의 곰팡이는 성장이 억제되어 사멸하는 반면, 푸자리움 속 균주는 생존하므로 푸자리움 속 균주를 선택적으로 분리할 수 있는 것이다.
본 발명에 따른 푸자리움 속 균주의 선택적 분리 방법의 경우, 기존의 발암물질인 PCNB 물질을 기반으로 한 선택 배지를 사용한 분리 방법을 대체하여 인체 유해성 문제를 극복할 수 있고, 푸자리움 속 곰팡이를 단시간내에 분리할 수 있어 식물 병을 신속하고 정확하게 진단할 수 있다.
또한, 본 발명은 톡소플라빈을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리용 배지에 곰팡이를 포함하는 시료를 도입하여 배양하는 단계를 포함하는 시료 중의 푸자리움 속 균주를 스크리닝하는 방법을 제공한다.
본 발명에 따른 푸자리움 속 균주의 스크리닝 방법은 본 발명의 배지에 푸자리움 속 균주를 포함하는 곰팡이 시료를 도입하여 배양하면 푸자리움 속 균주 이외의 곰팡이는 성장이 억제되어 사멸하는 반면, 푸자리움 속 균주는 생존하므로 푸자리움 속 균주를 스크리닝할 수 있는 것이다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 스크리닝하는 방법에서, 상기 시료는 공기, 토양, 물(수돗물, 하천수, 빗물, 생수 등) 또는 식물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명은 톡소플라빈을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속 균주 이외의 곰팡이 균주 성장 억제용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주 이외의 곰팡이 균주 성장 억제용 배지 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 톡소플라빈을 유효성분으로 포함하는 조성물을 곰팡이를 포함하는 시료에 처리하는 단계를 포함하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주 이외의 곰팡이 균주의 성장을 억제하는 방법을 제공한다.
본 발명에서 곰팡이 균주들의 톡소플라빈에 대한 저항성을 검사한 결과, 푸자리움 속 균주의 생장에는 영향을 끼치지 않고 다른 곰팡이 균주의 생장을 억제하는 효과를 갖는 바, 푸자리움 속 균주 이외의 곰팡이 균주의 생장 억제 및 방제 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다. 따라서 본 발명에 따른 톡소플라빈을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속 균주 이외의 곰팡이 균주 성장 억제용 배지 조성물은 푸자리움 속 균주의 순수배양용 또는 계대배양용 배지로도 유용하게 이용될 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
재료 및 방법
(1) 곰팡이 균주의 톡소플라빈에 대한 저항성 검사
곰팡이 균주의 톡소플라빈(toxoflavin)에 대한 저항성을 검정하기 위하여, 푸자리움 속 균주인 푸자리움 그라미네아룸(Fusarium graminearum) 및 푸자리움 옥시스포룸(F. oxysporum), 도열병균인 마그나포르테 오리자(Magnaporthe oryzeae), 탄저병균인 콜레토트리쿰 글로에오스포리오이데스(Colletotrichum gloeosporioides), 부생균인 페니실린(Penicillium sp.)을 효모 맥아 한천배지(yeast malt agar), 감자 한천배지, 최소배지 및 완전배지에 배양하였다. 각 균주들의 톡소플라빈에 대한 저항성 정도를 확인하기 위하여 각 배지를 고압멸균 후 배지를 50℃ 정도로 식힌 다음 톡소플라빈을 0, 5, 10, 20, 40 및 80ppm을 첨가한 후에 각 균주의 균사부위를 접종하여 25℃에서 5일 동안 배양한 후 균사 생장 정도를 관찰하였다.
(2) 식물 시료에서 푸자리움 속 곰팡이 균주 분리
식물 시료에서 푸자리움 속 균주 분리 여부를 알아보기 위하여, 벼 종자를 1% 차아염소산 나트륨으로 2분 동안 표면살균 후 증류수에 2분 동안 침지한 것을 재료로 사용하였다. 표면살균 후 벼 종자를 카나마이신 50mg/ℓ와 톡소플라빈 80mg/ℓ를 함유하는 감자 한천배지에 치상하였다. 음성 대조구로 톡소플라빈을 함유하지 않는 감자 한천배지를 사용하였다. 벼 낟알을 치상한 후 25℃에서 4일 동안 배양하였다. 4일 후 배양된 곰팡이 균주는 새로운 감자 한천배지로 옮겨 단포자 분리를 통해 순화시켰다.
(3) 공기 시료에서 푸자리움 속 곰팡이 균주 분리
공기 중에 있는 푸자리움 속 균주를 분리하기 위하여, 카나마이신 50mg/ℓ와 톡소플라빈 0, 20 및 80 mg/ℓ를 함유하는 최소배지를 지름 90mm 페트리디쉬에 만들었다. 경상남도 김해시 대저면 소재 동아대학교 농장에서 페트리 디쉬 뚜껑을 열고 1시간 동안 배지를 노출시킴으로써 공기 중에 있는 미생물 포자가 배지에 안착하도록 유도하였다. 배지를 25℃에서 3일간 배양한 후 곰팡이 균주를 관찰하였다. 배양된 곰팡이 균주는 새로운 감자 한천배지에 옮겨 각각으로부터 단포자를 분리하였다.
(4) 식물 및 공기 시료로부터 분리된 곰팡이 균주의 동정
식물 및 공기 시료로부터 분리된 각 곰팡이 균주는 균총의 색소, 균사 생장, 포자 모양 등의 형태적 특징과 TEF(translation elongation factor 1-alpha) 유전자의 염기서열 분석을 통해 동정되었다. 분리된 곰팡이 균주로부터 DNA를 추출하고, 상기 유전자의 증폭을 위하여 20μM 농도의 ef1(5'-ATGGGTAAGGA(A/G)GACAAGAC-3'; 서열번호 1)과 ef2(5'-GGA(G/A)GTACCAT(G/C)ATCATGTT-3'; 서열번호 2) 프라이머를 사용하였다. 증폭된 PCR 산물은 QIAquick PCR 정제 키트(Qiagen)를 이용하여 순수 분리한 후 코스모텍에서 염기서열을 분석하였다. 최종 분석된 염기서열은 NCBI의 데이터베이스에 있는 염기서열과 비교·분석하였다.
실시예 1. 곰팡이 균주의 톡소플라빈에 대한 저항성 검사
푸자리움 속 균주인 푸자리움 그라미네아룸(Fusarium graminearum) 및 푸자리움 옥시스포룸(F. oxysporum), 도열병균인 마그나포르테 오리자(Magnaporthe oryzeae), 탄저병균인 콜레토트리쿰 글로에오스포리오이데스(Colletotrichum gloeosporioides), 부생균인 페니실린(Penicillium sp.) 곰팡이 균주의 톡소플라빈에 대한 저항성을 검정한 결과는 도 1과 같다.
대조구인 0ppm의 톡소플라빈과 비교하였을 때 5~10ppm의 저농도 톡소플라빈에서 푸자리움 속 곰팡이 균주를 제외한 마그나포르테 오리자, 콜레토트리쿰 글로에오스포리오이데스 및 페니실린 곰팡이 균주의 생장이 억제되고, 20~40ppm의 톡소플라빈에서는 50% 이상 생장이 억제되는 것을 확인할 수 있다. 또한 80ppm의 고농도 톡소플라빈에서는 푸자리움 속 곰팡이 균주의 생장이 다소 지연되는 반면, 다른 곰팡이 균주의 생장은 전혀 생장하지 못한 것을 확인할 수 있다.
실시예 2. 식물 및 공기 시료로부터 푸자리움 속 곰팡이 균주의 분리
식물 시료(벼 낟알) 및 경상남도 김해시 대저면 소재 동아대학교 농장의 공기 시료를 각각 배양한 결과는 도 2 및 도 3과 같다. 톡소플라본을 함유하지 않는 대조구(톡소플라빈 0ppm)의 경우, 두 시료 모두에서 푸자리움 속 곰팡이 균주뿐만 아니라 타 균주의 포자 모양 및 균총의 색소 등이 관찰되었다. 반면, 톡소플라본을 유효성분으로 함유하는 선택 배지에서는 타 균주는 포자생성이 억제되어 증식이 이루어지지 못한 것을 확인할 수 있었고, 대조구와 비교하였을 때 그 개체수가 확연히 줄어든 반면, 푸자리움 속 균주의 형태적 특성을 가지는 곰팡이 균주들은 분리할 수 있을 정도로 생장한 것을 확인할 수 있다.
실시예 3. 식물 및 공기 시료로부터 분리된 푸자리움 속 균주
식물 및 공기 시료로부터 분리된 각 곰팡이 균주는 단포자 분리 후 감자한천배지에서 배양했을 때 붉은곰팡이(Fusarium)의 전형적인 특징인 붉은색 색소를 생성하였으며 4-6개의 격벽을 가진 초생달 모양의 분생포자를 형성하였다. ef1과 ef2 프라이머를 이용하여 각 균주의 DNA로부터 TEF 유전자를 증폭한 결과, 643-646bp의 DNA 절편이 증폭되었으며 염기서열을 NCBI 데이터베이스에서 검색한 결과 붉은곰팡이의 Elongation factor 1-alpha 유전자와 99%의 상동성을 보였다. 이러한 결과는 선택배지에서 생장하여 분리된 균주가 붉은곰팡이(Fusarium)임을 보여주고 있다.
<110> Dong-A University Research Foundation For Industry-Academy Cooperation <120> Medium composition for selective isolation of Fusarium species comprising toxoflavin as effective component and uses thereof <130> PN13103 <160> 2 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 1 atgggtaagg argacaagac 20 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 2 ggargtacca tsatcatgtt 20

Claims (12)

  1. 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주의 선택적 분리용 조성물.
  2. 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주의 선택적 분리용 배지 조성물.
  3. 제2항에 있어서, 상기 푸자리움 속 균주는 푸자리움 그라미네아룸(Fusarium graminearum) 또는 푸자리움 옥시스포룸(Fusarium oxysporum)인 것을 특징으로 하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리용 배지 조성물.
  4. 제2항에 있어서, 상기 톡소플라빈은 배지 조성물 중에 20~100ppm이 함유된 것을 특징으로 하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리용 배지 조성물.
  5. 제2항 내지 제4항 중 어느 한 항의 조성물로 제조된 푸자리움 속(Fusarium species) 균주의 선택적 분리용 배지.
  6. 제5항에 있어서, 액체 배지 또는 고체 배지인 것을 특징으로 하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주의 선택적 분리용 배지.
  7. 제5항의 배지에 푸자리움 속(Fusarium species) 균주를 포함하는 곰팡이 시료를 도입하여 배양하는 단계를 포함하는 푸자리움 속 균주의 선택적 분리 방법.
  8. 제5항의 배지에 곰팡이를 포함하는 시료를 도입하여 배양하는 단계를 포함하는 시료 중의 푸자리움 속 균주를 스크리닝하는 방법.
  9. 제8항에 있어서, 상기 시료는 공기, 토양, 물 또는 식물인 것을 특징으로 하는 방법.
  10. 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주 이외의 곰팡이 균주 성장 억제용 조성물.
  11. 톡소플라빈(toxoflavin)을 유효성분으로 함유하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주 이외의 곰팡이 균주 성장 억제용 배지 조성물.
  12. 제1항의 조성물을 곰팡이를 포함하는 시료에 처리하는 단계를 포함하는 푸자리움 속(Fusarium species) 균주 이외의 곰팡이 균주의 성장을 억제하는 방법.
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