KR101403112B1 - Peptide for suppression of cancer cell - Google Patents

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KR101403112B1 KR1020120024164A KR20120024164A KR101403112B1 KR 101403112 B1 KR101403112 B1 KR 101403112B1 KR 1020120024164 A KR1020120024164 A KR 1020120024164A KR 20120024164 A KR20120024164 A KR 20120024164A KR 101403112 B1 KR101403112 B1 KR 101403112B1
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Abstract

본 발명은 암세포 억제용 펩타이드에 대한 것으로, 특히 암의 예방 및/또는 치료용으로 사용되는 펩타이드 화합물의 용도에 대한 것이며, 특히 펩타이드 Glu-Val-Tyr-Tyr-Met-Tyr 를 함유하여 유방암 세포의 증식을 억제할 수 있는 약제학적 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a peptide for inhibiting cancer cells, and more particularly to the use of a peptide compound for use in the prevention and / or treatment of cancer, and more particularly to a peptide compound containing a peptide Glu-Val-Tyr-Tyr-Met- To a pharmaceutical composition capable of inhibiting proliferation.

Description

암세포 억제용 펩타이드{Peptide for suppression of cancer cell}[0001] The present invention relates to a peptide for suppressing cancer cells,

본 발명은 암의 예방 및/또는 치료용으로 사용되는 펩타이드 화합물의 용도에 대한 것으로, 특히 펩타이드 Glu-Val-Tyr-Tyr-Met-Tyr 를 함유하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to the use of peptide compounds for use in the prevention and / or treatment of cancer, and more particularly to pharmaceutical compositions containing the peptide Glu-Val-Tyr-Tyr-Met-Tyr.

최근, 전 세계적으로 운동부족, 비만, 육식, 여성호르몬 에스트로젠에 대한 노출기간 확대 등의 생활 패턴과 식단의 서구화의 영향으로 유방암 발병율이 10년 사이에 2배 이상으로 급증하고 있다. In recent years, the worldwide incidence of breast cancer has doubled over a decade due to a lack of exercise, obesity, meat consumption, widespread exposure to female hormone estrogen, and westernization of the diet.

유방암은 에스트로젠 의존성과 비의존성으로 분류된다. Breast cancer is classified as estrogen-dependent and non-dependent.

그리고, 유방암 치료에는 수술, 방사선, 항암, 항호르몬 치료가 일반적이다. 항호르몬 치료제로는 항에스트로젠 계열인 타목시펜, 폐경기 이후 환자에게는 아로마타제 억제제인 레트로졸, 황체형성 호르몬 분비 억제효과가 있는 졸라덱스 등이 개발되어 있다. 또한 상피세포 성장인자 수용체인 Her2/Neu에 대응하는 표적치료제 허셉틴이 전이성 유방암 치료에 좋은 효과가 있는 것으로 알려져 있다. And surgery, radiation, anticancer, and antihormone treatment are common in breast cancer treatment. Tamoxifen, an antiestrogenic agent, has been developed as an antihormonal agent, and retrosol, an aromatase inhibitor, and Zolradex, an inhibitor of luteinizing hormone secretion, have been developed in postmenopausal patients. In addition, Herceptin, the target therapeutic agent corresponding to the epithelial growth factor receptor Her2 / Neu, is known to be effective for the treatment of metastatic breast cancer.

이와 같이 많은 유방암 치료제가 개발되어 있으나, 유방암의 유형은 다양하고, 어느 한 약제를 계속 사용하게 되면 결국 내성이 생기게 된다. 따라서, 다양한 유방암 세포에 대응할 수 있는 새로운 치료제의 개발이 필요한 실정이다.
이와 관련하여, 최근에는 대한민국 공개특허 2010-0075439(발명의 명칭 : 치료제로서의 감마 1 단독 또는 펜타가스트린과의 배합물)와 대한민국 공개특허 2009-0027227(발명의 명칭 : 항-4 항체 및 이의 사용 방법)호가 공개되었다.
Many breast cancer therapies have been developed, but the types of breast cancer are variable, and the continued use of any one drug will eventually lead to tolerance. Therefore, it is necessary to develop a new therapeutic agent capable of responding to various types of breast cancer cells.
In this connection, recently, Korean Patent Publication No. 2010-0075439 (entitled "Gamma 1 as a Therapeutic Agent or Compound with Penta-Gastrin as a Therapeutic Agent)" and Korean Patent Publication No. 2009-0027227 The call was released.

본 발명은 상기한 문제점을 해결하기 위한 것으로, 암의 예방 및/또는 치료용으로 사용되는 펩타이드 화합물의 용도를 제공하고, 특히 유방암 세포의 증식을 억제할 수 있는 약제학적 조성물을 제공하는 것이 목적이다.
The object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition which is capable of inhibiting the proliferation of breast cancer cells by providing a use of a peptide compound used for prevention and / or treatment of cancer .

상기한 목적을 달성하기 위한 본 발명에 따른 암 세포 억제용 펩타이드는, 글루타메이트(Glutamate, Glu)-발린(Valine, Val) -타이로신(Tyrosine, Tyr)-타이로신(Tyrosine, Tyr)-메티오닌(Methionine, Met)-타이로신(Tyrosine, Tyr)의 아미노산 서열로 이루어진 것이 특징이다. In order to accomplish the above object, the present invention provides a cancer cell inhibiting peptide comprising at least one of Glutamate, Glu-Valine, Val-Tyrosine, Tyr-Tyrosine-Methionine, Met) -tyrosine (Tyrosine, Tyr).

여기서, 상기 암 세포는 유방암 세포인 것이 바람직하다. Here, the cancer cell is preferably a breast cancer cell.

그리고, 상기 암 세포는 여성호르몬 에스트로젠 의존성 암 세포일 수 있으며, 상기 여성호르몬 에스트로젠의 효과는 다이드제인(daidzein)에서도 가능하다. The cancer cell may be a female hormone estrogen-dependent cancer cell, and the effect of the female hormone estrogen may be also in a daidzein.

또한, 본 발명은 NH2-Glu-Val-Tyr-Tyr-Met-Tyr-COOH 의 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 암세포 억제용 펩타이드일 수 있다.Also, the present invention can be a cancer cell inhibiting peptide, which comprises a sequence of NH 2 -Glu-Val-Tyr-Tyr-Met-Tyr-COOH.

또한, 본 발명에 따른 암세포 억제용 펩타이드는 힘옥시게나제(heme oxygenase) 유전자의 발현을 증가시키는 것이 바람직하다.
In addition, the cancer cell suppressing peptide according to the present invention preferably enhances the expression of the heme oxygenase gene.

한편, 본 발명의 다른 실시형태는, 상기한 암세포 억제용 펩타이드와, 다이드제인(daidzein)을 포함하는 것을 특징으로 하는 암세포 억제용 조성물 또는 키트일 수 있다.On the other hand, another embodiment of the present invention may be a cancer cell suppressing composition or kit comprising the above cancer cell suppressing peptide and daidzein.

여기서, 상기 암세포 억제용 펩타이드 1000중량부에 대하여 다이드제인은 1~10중량부 범위 내로 포함되는 것이 바람직한데, 상기 범위를 벗어나면 펩타이드에 의한 증식억제 효과가 미약하기 때문이다.
Herein, it is preferable that daidzein is contained in the range of 1 to 10 parts by weight with respect to 1000 parts by weight of the cancer cell suppressing peptide, and the effect of inhibiting the proliferation by the peptide is weak if it is out of the above range.

기타 실시예들의 구체적인 사항들은 상세한 설명 및 도면들에 포함되어 있다.
The details of other embodiments are included in the detailed description and drawings.

이러한 본 발명은 펩타이드 Glu-Val-Tyr-Tyr-Met-Tyr 를 함유하는 것을 특징으로 하여, 암 세포의 증식을 억제함으로써, 암의 예방 및/또는 치료용으로 사용될 수 있으며, 특히 유방암 세포의 증식을 억제할 수 있는 효과를 가진다.
The present invention is characterized by containing the peptide Glu-Val-Tyr-Tyr-Met-Tyr and can be used for prevention and / or treatment of cancer by inhibiting the proliferation of cancer cells. Can be suppressed.

도 1은 본 발명의 바람직한 일 실시예에 따른 펩타이드를 이용한 MCF7 유방암 세포의 배양 실험 결과를 나타내는 그래프이고,
도 2 내지 도 5는 본 발명의 바람직한 일 실시예에 따른 펩타이드를 이용해서 배양된 MCF7 유방암 세포의 현미경 사진이고(도 2는 대조구, 도 3은 다이드제인(daidzein), 도 4는 본 발명에 따른 펩타이드, 도 5는 다이드제인+본 발명에 따른 펩타이드를 이용한 것임),
도 6은 본 발명의 바람직한 일 실시예에 따른 펩타이드를 이용한 힘옥시게나제(heme oxygenase)의 PCR 증폭 실험 결과를 나타내는 전기영동 사진이다(M; marker, C; 대조구(control), D; 다이드제인(daidzein), D+P; 다이드제인+본 발명에 따른 펩타이드(peptide), P; 본 발명에 따른 펩타이드). FIG. 1 is a graph showing the results of culturing of MCF7 breast cancer cells using a peptide according to a preferred embodiment of the present invention,
FIGS. 2 to 5 are micrographs of MCF7 breast cancer cells cultured using a peptide according to a preferred embodiment of the present invention (FIG. 2 is a control, FIG. 3 is a daidzein, FIG. 5 shows the peptide using the daidzein + peptide according to the present invention)
6 is an electrophoresis image showing the result of PCR amplification of heme oxygenase using a peptide according to a preferred embodiment of the present invention (M; marker; C; control; D; daidzein, D + P, daidzein + peptide according to the present invention, P, peptide according to the present invention).

본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시 예를 가질 수 있는 바, 특정 실시 예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에서 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS The present invention is capable of various modifications and various embodiments, and specific embodiments are illustrated in the drawings and will be described in detail in the detailed description. It is to be understood, however, that the invention is not to be limited to the specific embodiments, but includes all modifications, equivalents, and alternatives falling within the spirit and scope of the invention. DETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings.

본 출원에서 사용한 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 출원에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
The terminology used in this application is used only to describe a specific embodiment and is not intended to limit the invention. The singular expressions include plural expressions unless the context clearly dictates otherwise. In the present application, the terms "comprises" or "having" and the like are used to specify that there is a feature, a number, a step, an operation, an element, a component or a combination thereof described in the specification, But do not preclude the presence or addition of one or more other features, integers, steps, operations, elements, components, or combinations thereof.

본 발명은 암세포 억제용 펩타이드에 대한 것으로, 특히 암의 예방 및/또는 치료용으로 사용되는 펩타이드 화합물을 제공하는 것이다. The present invention relates to a peptide for inhibiting cancer cells, and in particular, to provide a peptide compound for use in the prevention and / or treatment of cancer.

일반적으로, 대두에는 제니스테인(genistein), 다이드제인(daidzein)과 같은 isoflavone이 들어 있어 성인병 예방, 혈관 관련 질환 예방 등 다양한 효과가 있다고 알려져 있다. 제니스테인, 다이드제인은 구조적으로 여성호르몬인 에스트로젠과 구조적으로 유사하여 다이드제인은 세포 내에서 에스트로젠의 역할을 수행하기도 한다. 에스트로젠은 MCF7과 같은 유방암세포의 증식을 촉진하며 다이드제인도 5 μM와 같이 비교적 낮은 농도에서는 유방암세포의 증식 효과를 발휘한다. 이와 같이, 다이드제인은 인체 건강에 미치는 유용한 효과에도 불구하고 유방암세포의 증식을 촉진시킬 수 있는 단점이 있다. Generally, isoflavones such as genistein and daidzein are contained in soybeans, and it is known that soybean has various effects such as prevention of adult diseases and prevention of vascular diseases. Genistein and daidzein are structurally similar in structure to estrogen, a female hormone, and daidzein also plays a role in the cell as an estrogen. Estrogen promotes the proliferation of breast cancer cells such as MCF7 and daidzein also exerts a proliferating effect of breast cancer cells at a relatively low concentration, such as 5 μM. Thus, the daidzein has the disadvantage of promoting the proliferation of breast cancer cells despite its beneficial effects on human health.

이를 해결하기 위하여, 본 발명자들이 수년간 연구하고 노력한 끝에, 다이드제인의 유방암 증식 효과를 상쇄할 수 있는 펩타이드를 청국장 유래 펩타이드의 변형물에서 찾아내었다. 그 펩타이드의 sequence는 NH2-Glutamate-Valine-Tyrosine-Tyrosine-Methionine-Tyrosine-COOH (EVYYMY)의 6mer이다. 이에 따라, 본 발명에 따른 암 세포 억제용 펩타이드는, 글루타메이트(Glutamate, Glu)-발린(Valine, Val) -타이로신(Tyrosine, Tyr)-타이로신(Tyrosine, Tyr)-메티오닌(Methionine, Met)-타이로신(Tyrosine, Tyr)의 서열을 포함하는 것이 특징이다. 이러한 peptide는 peptide 자동 합성기에 의해 용이하게 제조될 수 있다.In order to solve this problem, the present inventors have studied and tried for many years and found a peptide capable of offsetting the breast cancer proliferation effect of daidzein in a modification of the peptide derived from chungkukjang. The sequence of the peptide is 6-mer of NH 2 -Glutamate-Valine-Tyrosine-Tyrosine-Methionine-Tyrosine-COOH (EVYYMY). Accordingly, the cancer cell-inhibiting peptide according to the present invention can be used as a cancer cell-inhibiting peptide, such as glutamate (Glu) -valine (Val) -tyrosine (Tyr) -tyrosine (Tyr) -methionine (Tyrosine, Tyr). These peptides can be easily prepared by an automatic peptide synthesizer.

후술하는 실시예에 나타난 바와 같이, Isoflavone의 일종인 다이드제인을 유방암 세포 MCF7에 같이 넣어 주고 배양하면 증식을 촉진하였다. 반면에 본 발명에 따른 펩타이드(EVYYMY)를 넣어 주면 유방암 세포의 증식이 감소하였고, 특히 다이드제인과 본 발명에 따른 펩타이드(EVYYMY)을 같이 넣어 주면 다이드제인에 의해 촉진되었던 유방암 세포의 증식률 130%를 79%까지 떨어뜨리는 유방암세포 증식억제 효과가 있었으며, 이는 다이드제인만 처리한 경우와 비교하여 유의한 차이임을 확인하였다. 이는 배양된 세포를 현미경으로 관찰하였을 때도 다이드제인과 펩타이드를 함께 넣어주면 유방암세포의 증식이 뚜렷하게 억제함을 확인하였다.
As shown in the following examples, when daidzein, a kind of isoflavone, was added to MCF7 breast cancer cells and cultured, the proliferation was promoted. On the other hand, when the peptide according to the present invention (EVYYMY) was added, the proliferation of breast cancer cells was decreased. In particular, when the peptide of the present invention and EVYYMY were added together, the proliferation rate of breast cancer cells % To 79%, which is a significant difference compared to the case of only the daidzein treatment. It was confirmed that when the cultured cells were observed with a microscope, the addition of the daidzein and the peptide significantly inhibited the proliferation of the breast cancer cells.

이에 따라, 본 발명은 펩타이드 Glutamate-Valine-Tyrosine-Tyrosine-Methionine-Tyrosine 의 용도, 예를 들어 암 세포의 증식 또는 종양, 증식성 질환, 악성 종양 및 이들의 전이를 포함하는 암 질환, 특히 유방암의 치료 및/또는 예방을 위해 사용되는 용도에 관한 것이다. 나아가 자가면역 질환, 섬유성 질환, 염증성 질환, 신경 변성 질환, 감염성 질환, 폐질환, 심장 혈관 질환 및 대사성 질환의 약물 요법의 치료제 및 예방 및/또는 치료용 치료제로서의 용도도 가능하다. 본 발명은 바람직하게는 상기 펩타이드를 함유하는 동결건조물 또는 액상 완충액 또는 인공 모유 제제 형태의 약제학적 제제, 조성물 또는 키트도 가능하다. Accordingly, the present invention provides the use of the peptide Glutamate-Valine-Tyrosine-Tyrosine-Methionine-Tyrosine, for example, cancer cell proliferation or cancer, proliferative diseases, malignant tumors and cancer diseases including metastasis thereof, / RTI > and / or < RTI ID = 0.0 > prevention. ≪ / RTI > Furthermore, it can be used as a therapeutic agent for the treatment of autoimmune diseases, fibrotic diseases, inflammatory diseases, neurodegenerative diseases, infectious diseases, pulmonary diseases, cardiovascular diseases and metabolic diseases, and as a therapeutic agent for prevention and / or treatment. The present invention is preferably applicable to pharmaceutical preparations, compositions or kits in the form of lyophilizates or liquid buffers or artificial breast milk preparations containing the peptides.

이러한 약제학적 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제, 결합제, 붕괴제, 글리덴트(glident), 희석제, 윤활제, 착색제, 감미제, 향미제, 방부제 등과 함께, 활성 성분으로서의 펩타이드 또는 펩타이드 배합물을 포함한다. 본 발명의 약제학적 조성물은 공지된 방법으로 적절한 용량 레벨로 통상적인 고체 또는 액체 담체 또는 희석제 및 통상적인 약제학적으로 제조된 애주번트 중에서 제조될 수 있다. Such a pharmaceutical composition may comprise a peptide or peptide combination as an active ingredient together with at least one pharmaceutically acceptable carrier, excipient, binder, disintegrant, glident, diluent, lubricant, colorant, sweetener, flavoring, preservative, . The pharmaceutical compositions of the present invention can be prepared in conventional manner in conventional solid or liquid carriers or diluents and conventional pharmaceutically-acceptable adjuvants, at the appropriate dosage levels by known methods.

바람직하게, 상기 펩타이드 또는 펩타이드 배합물은 정맥내 투여에 적합하거나, 경구 투여에 적합하거나, 흡입 투여에 적합하다. 투여 형태로는 예를 들면, 환약, 정제, 필름 정제, 코팅 정제, 캡슐, 리포좀 제제, 마이크로 및 나노 제제, 분말 및 침착물을 들 수 있다. 또한, 본 발명은 또한 피부, 피내, 위내, 피부내 (intracutan), 혈관내, 정맥내, 근육내, 복강내, 비강내, 질내, 구강내, 경피적 (percutan), 직장, 피하, 설하, 국소, 또는 경피 투여를 포함한 비경구 투여용 약제학적 제제를 포함하며, 제제는 전형적인 비히클 및/또는 희석제 이외에도, 본 발명의 펩타이드 또는 펩타이드 배합물을 함유한다.Preferably, the peptide or peptide combination is suitable for intravenous administration, is suitable for oral administration, or is suitable for inhalation administration. Dosage forms include, for example, pills, tablets, film tablets, coated tablets, capsules, liposomal preparations, micro and nano preparations, powders, and deposits. The present invention also encompasses the use of a compound of formula (I) as described herein for the manufacture of a medicament for the treatment of a disease or condition selected from the group consisting of skin, intradermal, intragastric, intracutaneous, intravascular, intravenous, intramuscular, intraperitoneal, intranasal, intrathecal, intraoral, percutaneous, , Or transdermal administration, the preparations containing the peptides or peptide formulations of the present invention, in addition to the typical vehicles and / or diluents.

본 발명은 또한 약제학적 제제 및/또는 영양 보조 식품으로서 신생아 (newborn), 유아 (toddler), 및 소아(infant)에게 펩타이드 배합물을 경구 투여하기 위한 제제로서 포유동물 밀크, 인공 포유동물 밀크, 및 포유동물 밀크 대용품을 포함한다.The present invention also relates to pharmaceutical formulations and / or nutritional supplements which are formulated for oral administration of peptide formulations to newborn, toddler, and infant, such as mammalian milk, artificial mammalian milk, Includes animal milk substitutes.

본 발명의 펩타이드 또는 펩타이드 배합물은 또한 이의 약제학적으로 활성인 염의 형태로 투여될 수 있다. 적절한 약제학적으로 활성인 염은 산부가염 및 알칼리염 또는 알칼리 토금속염을 포함한다. 예를 들면, 나트륨, 칼륨, 리튬, 마그네슘 또는 칼슘 염이 얻어질 수 있다. 본 발명의 펩타이드 또는 펩타이드 배합물은 유기산 및 무기산과 약제학적으로 허용가능한 염을 생성한다.The peptide or peptide combination of the present invention may also be administered in the form of its pharmaceutically active salts. Suitable pharmaceutically active salts include acid addition salts and alkali salts or alkaline earth metal salts. For example, sodium, potassium, lithium, magnesium or calcium salts may be obtained. The peptide or peptide combination of the present invention produces organic and inorganic acids and pharmaceutically acceptable salts.

본 발명의 약제학적 조성물은 전형적으로 원하는 투여 형태에 대하여, 즉, 정제, 캡슐 (고체, 반고체 또는 액체 충전), 구성용 분말, 통상적인 약무와 일치하는 에어로졸 제제 형태의 경구 투여를 위해 선택된 적절한 담체 물질과 함께 투여될 수 있다.The pharmaceutical compositions of the present invention are typically formulated for a desired dosage form, that is, tablets, capsules (solid, semi-solid or liquid), powders for constitution, suitable carriers selected for oral administration in the form of aerosol preparations, ≪ / RTI >

본 발명의 또 하나의 측면은 영양 보조 식품으로서의 개시된 펩타이드 및 펩타이드 배합물의 용도에 관한 것이다. 영양 보조 식품은 경구 투여용으로 바람직하고, 특히 신생아, 유아, 및/또는 소아에로의 투여에 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 영양 보조 식품은 일상의 음식물을 보충하는데 사용된다. 이들 제품의 "식이 성분"은 또한 비타민, 미네랄, 허브 또는 다른 식물 성분, 아미노산, 및 물질, 예컨대 효소, 장기 조직, 선 (glandular), 및 대사 산물을 포함할 수 있다. 영양 보조 식품은 예컨대, 정제, 캡슐, 소프트젤, 젤캡, 액체, 또는 분말 형태로 제조될 수 있다.Another aspect of the present invention relates to the use of the disclosed peptides and peptide formulations as nutritional supplements. Nutritional supplements are preferred for oral administration, and are preferred, but not exclusively, for administration to neonates, infants, and / or children. Nutritional supplements are used to supplement daily food. The "dietary components" of these products may also include vitamins, minerals, herbs or other plant components, amino acids, and substances such as enzymes, organ systems, glands, and metabolites. Nutritional supplements may be prepared, for example, in the form of tablets, capsules, soft gels, gel caps, liquids, or powders.

본 발명의 또 하나의 측면은 본 발명의 펩타이드 또는 펩타이드 배합물을 포함하는 약제학적 조성물을 후술하는 질환을 치료하는데 효과적인 치료적 유효량으로 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 암, 자가면역질환, 섬유성 질환, 염증성 질환, 신경 변성 질환, 감염성 질환, 폐질환, 심장 혈관 질환 또는 대사성 질환 또는 본 명세서에 개시된 다른 질환의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것이다.Another aspect of the invention is a pharmaceutical composition comprising a peptide or a peptide combination of the invention, which comprises administering to a patient in need thereof a therapeutically effective amount effective to treat a disease, , Fibrotic diseases, inflammatory diseases, neurodegenerative diseases, infectious diseases, pulmonary diseases, cardiovascular diseases or metabolic diseases or other diseases described herein.

한편, 펩타이드 또는 펩타이드 배합물은 a) 내지 g)에 열거된 하기 활성 중 어느 하나를 증명한다면, 치료 활성을 갖는 것으로 간주된다:On the other hand, the peptide or peptide combination is considered to have therapeutic activity if it proves any of the following activities listed in a) to g):

a) 펩타이드는 과잉으로 활동하는 생물학적 경로의 활성을 억제할 수 있다.a) Peptides can inhibit the activity of an overactive biological pathway.

b) 펩타이드는 과잉으로 생산된 생체 분자의 생산을 억제할 수 있다.b) Peptides can inhibit the production of biomolecules produced in excess.

c) 펩타이드는 과잉으로 생산된 생체 분자의 활성을 억제할 수 있다.c) Peptides can inhibit the activity of biomolecules produced in excess.

d) 펩타이드는 활성이 저하된 생물학적 경로의 활성을 증가시킬 수 있다.d) Peptides can increase the activity of degraded biological pathways.

e) 펩타이드는 불충분하게 생산된 생체 분자의 생산을 증가시킬 수 있다.e) Peptides can increase the production of biomolecules that are poorly produced.

f) 펩타이드는 불충분하게 생산된 생체 분자의 활성을 모방할 수 있다.f) Peptides can mimic the activity of biomolecules that are poorly produced.

g) 펩타이드는 암, 감염성 질환, 자가면역질환, 섬유성 질환, 염증성 질환, 신경 변성 질환, 또는 심장 혈관 질환 또는 본 명세서에 기재된 다른 질환의 증상 및/또는 진행을 예방, 억제, 또는 저지할 수 있다.
g) Peptides can prevent, inhibit, or inhibit the symptoms and / or progression of cancer, infectious diseases, autoimmune diseases, fibrotic diseases, inflammatory diseases, neurodegenerative diseases, or cardiovascular diseases or other diseases described herein have.

본 발명은 하기의 실시예에 의하여 보다 더 잘 이해 될 수 있으며, 하기의 실시예는 본 발명의 예시 목적을 위한 것이며, 첨부된 특허청구범위에 의하여 한정되는 보호범위를 제한하고자 하는 것은 아니다.
The present invention may be better understood by the following examples, which are for the purpose of illustrating the invention and are not intended to limit the scope of protection defined by the appended claims.

실시예Example 1: 세포 증식 억제 실험 1: Cell proliferation inhibition experiment

먼저, MCF7 유방암 세포를 High-Glucose Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) (4 mM L-glutamine, 4500 mg/L glucose, 110 mg/L sodium pyruvate) 배지에서 배양하였다. 상기 DMEM 배지에는 항생제 Antimycotic solution (100 units/ml penicillin, 100 μg/ml streptomycin, 0.25 μg/ml amphotericin)과 fetal bovine serum (FBS) 10%를 첨가하여 사용하였다. First, MCF7 breast cancer cells were cultured in High-Glucose Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) (4 mM L-glutamine, 4500 mg / L glucose, 110 mg / L sodium pyruvate) medium. Antimicrobial antimycotic solutions (100 units / ml penicillin, 100 μg / ml streptomycin, 0.25 μg / ml amphotericin) and 10% fetal bovine serum (FBS) were added to the DMEM medium.

그리고, 상기 MCF7 유방암 세포에 대해 아무 처리를 하지 않은 것을 대조구(control)로 하고, 각각 5 μM의 다이드제인(daidzein) 처리, 5 μM daidzein + 1 mM 본 발명에 따른 펩타이드(EVYYMY peptide) 처리, 1 mM EVYYMY 펩타이드를 처리한 다음, 37℃의 5% CO2 incubator에서 48 시간 동안 배양하였다. 그 후, 각각의 처리구에서 상기 MCF7 유방암 세포의 증식 정도를 알아보고자 하였다.
The MCF7 breast cancer cells were treated with no treatment and treated with 5 μM of daidzein, 5 μM of daidzein + 1 mM of the peptide according to the present invention, After treatment with 1 mM EVYYMY peptide, the cells were cultured in a 5% CO 2 incubator at 37 ° C for 48 hours. Then, the degree of proliferation of the MCF7 breast cancer cells was examined at each treatment.

그 결과는 도 1 및 도 2~도 5에 나타난 바와 같다. The results are shown in FIG. 1 and FIGS. 2 to 5.

도 1은 본 발명의 바람직한 일 실시예에 따른 펩타이드를 이용한 MCF7 유방암 세포의 배양 실험 결과를 나타내는 그래프이다. 즉, 배양 후 Dojindo사의 Cell Counting Kit (CCK)-8를 이용하여 450 nm에서 흡광도 측정을 통해 처리구별 생존 세포의 숫자를 결정하였는데, 도 1에 나타난 바와 같이, 대조구(control)와 비교하여 다이드제인(daidzein) 처리구는 암 세포가 증가하였고, 이와 비교하여 본 발명에 따른 펩타이드(peptide) 처리구에서는 암 세포 수가 감소하였다. 1 is a graph showing the results of culturing of MCF7 breast cancer cells using peptides according to one preferred embodiment of the present invention. That is, after the incubation, the number of viable cells was determined by measuring the absorbance at 450 nm using Dojindo's Cell Counting Kit (CCK) -8. As shown in Fig. 1, The cancer cells were increased in the daidzein treatment, and the number of cancer cells was decreased in the peptide treated according to the present invention.

도 2 내지 도 5는 본 발명의 바람직한 일 실시예에 따른 펩타이드를 이용해서 배양된 MCF7 유방암 세포의 현미경 사진이다(도 2는 대조구, 도 3은 다이드제인, 도 4는 본 발명에 따른 펩타이드, 도 5는 다이드제인+본 발명에 따른 펩타이드를 이용한 것임). 2 to 5 are micrographs of MCF7 breast cancer cells cultured using a peptide according to a preferred embodiment of the present invention (Fig. 2 is a control, Fig. 3 is a daidzein, Fig. 4 is a peptide according to the present invention, Figure 5 shows the use of daidzein + peptides according to the invention).

다이드제인과 본 발명에 따른 펩타이드를 같이 처리해 준 처리구가 펩타이드만 처리한 처리구에 비하여 더욱 현저히 높은 유방암 세포 억제효과를 가지고 있음을 확인하였으며(도 1), 이는 배양된 세포를 현미경으로 관찰하였을 때도 다이드제인과 본 발명에 따른 펩타이드를 함께 넣어주면 유방암세포의 증식이 뚜렷하게 억제함을 확인하였다(도 5). 즉, 유방암 세포에 다이드제인과 본 발명에 따른 펩타이드를 같이 처리해 주면, 세포의 증식율을 130%(다이드제인만 처리한 경우)에서 79%까지 떨어뜨릴 수 있다. It was confirmed that the treatment group treated with the daidzein and the peptide according to the present invention had a significantly higher inhibitory effect on the breast cancer cells than the treatment group treated with the peptide alone (Fig. 1). When the cultured cells were observed with a microscope It was confirmed that when daidzein and the peptide according to the present invention were added together, the proliferation of breast cancer cells was significantly inhibited (FIG. 5). That is, when the daidzein and the peptide according to the present invention are treated in the breast cancer cells, the cell growth rate can be reduced to 79% in the case of 130% (when only daidzein is treated).

이에 따르면, 본 발명에 따른 펩타이드는 기본적으로 유방암 세포의 증식 억제를 가지고 있고, 특별히 상기 펩타이드는 다이드제인 혹은 estrogen 의존성 유방암 세포의 증식억제에 더욱 효과적인 것으로 사료된다.
According to the present invention, the peptide according to the present invention has basically inhibited the proliferation of breast cancer cells, in particular, the peptide is more effective in inhibiting the proliferation of daidzein or estrogen-dependent breast cancer cells.

실시예Example 2: 증식이 억제된 암세포에서의 유전자 발현 실험 2: Gene Expression Experiment in Proliferating Cancer Cells

본 실험에서는 다이드제인과 펩타이드가 유방암세포 MCF7의 증식을 억제하는 데 관여하는 유전자를 찾아내고자 하였다. In this experiment, we tried to find genes involved in the inhibition of proliferation of breast cancer cell MCF7 by daidzein and peptides.

이를 위하여, 유방암 세포를 상기 실시예 1의 각 처리구에서 배양하고, RNA를 추출하여 cDNA를 합성한 다음 PCR을 수행하여 힘옥시게나제(heme oxygenase) 유전자의 발현을 확인하였다. 즉, 유방암 세포 MCF7에 예를 들어 5 μM 다이드제인과 1 mM 펩타이드 EVYYMY를 같이 넣어 주어 배양한 다음, QIAGEN의 RNEasy kit에 의해 RNA를 분리한 후, 0.2 mM dNTP, oligo (dT)18, 1× M-MLV RT buffer (50 mM Tris-HCl (pH 8.3), 30 mM MgCl2, 10 mM DTT, 0.01 mM EDTA, 0.01% NP40, 5% glycerol) 4 unit RNase 저해제, 10 unit M-MLV 역전사 효소를 집어넣고 효소반응을 시켜 cDNA를 합성하였다. 그런 다음, 여기에 힘옥시게나제(heme oxygenase) 유전자의 일부인 primer A : 5'AGGAGGAGA TTGAGCGCA3', primer B : 5'TGGCACTGGCAATGTTGG3'를 넣어 주고 95℃에서 30초 (denaturation), 62℃에서 30초 (annealing), 72℃에서 60초 (elongation)를 한 cycle로 하여 PCR (Polymerase Chain Reaction)을 30 cycle수행하였다. 그에 따른 PCR산물을 가지고 1% agarose gel에서 전기영동을 수행하여 DNA 밴드를 확인하였다.For this purpose, breast cancer cells were cultured in each treatment of Example 1, RNA was extracted, cDNA was synthesized, and PCR was performed to confirm the expression of the heme oxygenase gene. For example, 5 μM dideoxyne and 1 mM peptide EVYYMY were added to the MCF7 breast cancer cell line, and the cells were incubated with 0.2 mM dNTP, oligo (dT) 18 , M-MLV RT buffer (50 mM Tris-HCl (pH 8.3), 30 mM MgCl 2 , 10 mM DTT, 0.01 mM EDTA, 0.01% NP40, 5% glycerol) 4 units RNase inhibitor, 10 units M-MLV reverse transcriptase And the cDNA was synthesized by enzymatic reaction. Then, primer A: 5'AGGAGGAGA TTGAGCGCA3 ', primer B: 5'TGGCACTGGCAATGTTGG3', which is a part of the heme oxygenase gene, was added thereto, denaturation at 95 ° C for 30 seconds, annealing at 62 ° C for 30 seconds ) And 72 cycles of elongation at 72 ° C for 30 cycles of polymerase chain reaction (PCR). The resulting DNA fragments were analyzed by electrophoresis on 1% agarose gel.

그 결과는 도 6에 나타난 바와 같다. 도 6은 본 발명의 바람직한 일 실시예에 따른 펩타이드를 이용한 힘옥시게나제(heme oxygenase)의 PCR 증폭 실험 결과를 나타내는 전기영동 사진이다(M; marker, C; 대조구(control), D; 다이드제인(daidzein), D+P; 다이드제인+본 발명에 따른 펩타이드(peptide), P; 본 발명에 따른 펩타이드). 여기에 도시된 바와 같이, 본 발명에 따른 펩타이드와 다이드제인을 함께 처리한 처리구(D+P)에서는 힘옥시게나제(342 bp)가 2배 이상 증가함을 확인할 수 있었다(도 6). 힘옥시게나제는 세포 내에서 산화, 환원을 조절하여 유전자 발현에 중대한 영향을 미치는 것인데, 이에 따르면 본 발명에 따른 펩타이드 효소는 유방암 세포에서 항산화 시스템을 활성화시켜서 유방암 세포의 증식을 억제하는 것으로 사료된다.
The results are shown in Fig. 6 is an electrophoresis image showing the result of PCR amplification of heme oxygenase using a peptide according to a preferred embodiment of the present invention (M; marker; C; control; D; daidzein, D + P, daidzein + peptide according to the present invention, P, peptide according to the present invention). As shown in the figure, in the treatment (D + P) treated with the peptide according to the present invention and daidzein, it was confirmed that the stressor (342 bp) was increased more than 2 times (FIG. 6). It is believed that the peptide enzyme according to the present invention activates the antioxidant system in breast cancer cells and inhibits the proliferation of breast cancer cells.

한편, 상기에서는 본 발명을 특정의 바람직한 실시예에 관련하여 도시하고 설명하였지만, 이하의 특허청구범위에 의해 마련되는 본 발명의 기술적 특징이나 분야를 이탈하지 않는 한도 내에서 본 발명이 다양하게 개조 및 변화될 수 있다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 명백한 것이다.
While the present invention has been particularly shown and described with reference to preferred embodiments thereof, it is to be understood that the invention is not limited to the disclosed embodiments, but, on the contrary, It will be apparent to those skilled in the art that changes may be made.

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Claims (9)

글루타메이트(Glutamate, Glu)-발린(Valine, Val) -타이로신(Tyrosine, Tyr)-타이로신(Tyrosine, Tyr)-메티오닌(Methionine, Met)-타이로신(Tyrosine, Tyr)의 아미노산 서열로 이루어진 암 세포 억제용 펩타이드.
For the inhibition of cancer cells consisting of the amino acid sequence of glutamate (Glutamate, Glu) -valine (Valine) -Tyrosine (Tyr) -Tyrosine (Tyr) -Methionine, Met) -Tyrosine Peptides.
제1항에 있어서,
상기 암 세포는 유방암 세포인 것을 특징으로 하는 암 세포 억제용 펩타이드.
The method according to claim 1,
Wherein the cancer cell is a breast cancer cell.
제1항에 있어서,
상기 암 세포는 여성호르몬 에스트로젠 의존성 암 세포인 것을 특징으로 하는 암 세포 억제용 펩타이드.
The method according to claim 1,
Wherein the cancer cell is a female hormone estrogen-dependent cancer cell.
제3항에 있어서,
상기 여성호르몬 에스트로젠은 다이드제인(daidzein)인 것을 특징으로 하는 암세포 억제용 펩타이드.
The method of claim 3,
Wherein the female hormone estrogen is daidzein.
제1항에 있어서,
NH2-Glu-Val-Tyr-Tyr-Met-Tyr-COOH 의 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 암세포 억제용 펩타이드.
The method according to claim 1,
NH 2 -Glu-Val-Tyr-Tyr-Met-Tyr-COOH.
제1항에 있어서,
힘옥시게나제(heme oxygenase) 유전자의 발현을 증가시키는 것을 특징으로 하는 암세포 억제용 펩타이드.
The method according to claim 1,
A peptide for inhibiting cancer cells, characterized in that the expression of the heme oxygenase gene is increased.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 암세포 억제용 펩타이드와,
다이드제인(daidzein)을 포함하는 것을 특징으로 하는 암세포 억제용 조성물.
A cancer-suppressing peptide according to any one of claims 1 to 6,
A composition for suppressing cancer cells, which comprises daidzein.
제7항에 있어서,
상기 암세포 억제용 펩타이드 1000중량부에 대하여 다이드제인은 1~10중량부 범위 내로 포함되는 것을 특징으로 하는 암세포 억제용 조성물.
8. The method of claim 7,
Wherein the zidene is contained in an amount of 1 to 10 parts by weight based on 1000 parts by weight of the cancer-suppressing peptide.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 암세포 억제용 펩타이드와,
다이드제인(daidzein)을 포함하는 것을 특징으로 하는 암세포 억제용 키트.
A cancer-suppressing peptide according to any one of claims 1 to 6,
A kit for suppressing cancer cells, which comprises daidzein.
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Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100808921B1 (en) 2002-05-03 2008-03-03 주식회사 뉴젝스 - agonists and antagonists of gonadotropin-releasing hormone-2 and use thereof
KR20110053128A (en) * 2009-11-13 2011-05-19 경북대학교 산학협력단 Composition for prevention, treatment or theranosis of apoptosis-related diseases comprising liposome containing apoptotic cell-targeting peptide, imaging agents and drug as an active ingredient
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