KR101359528B1 - Radiation protective composition comprising effective bee-venom and royal jelly - Google Patents

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Abstract

본 발명은 봉독과 로얄제리를 유효성분으로 함유하는 방사선 방호용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 방사선 방호용 조성물은 벌 유래 물질을 유효성분으로 함유하며, 특히 상기 벌 유래 물질로 봉독 또는 로얄제리 또는 봉독과 로얄제리 모두가 포함되는 것이 특징이다.
본 발명에 의해, 뛰어난 방사선 방호효과를 갖는 봉독과 로얄제리를 유효성분으로 함유하는 방사선 방호용 조성물이 제공된다.
The present invention relates to a radiation protection composition containing bee venom and royal jelly as an active ingredient.
The radiation protection composition of the present invention contains a bee-derived substance as an active ingredient, and in particular, the bee-derived substance includes bee venom or royal jelly or both bee venom and royal jelly.
According to this invention, the composition for radiation protection which contains bee venom and royal jelly as an active ingredient which have the outstanding radiation protection effect is provided.

Description

봉독과 로얄제리를 유효성분으로 함유하는 방사선 방호용 조성물{RADIATION PROTECTIVE COMPOSITION COMPRISING EFFECTIVE BEE-VENOM AND ROYAL JELLY}Radiation protection composition containing bee venom and royal jelly as active ingredient {RADIATION PROTECTIVE COMPOSITION COMPRISING EFFECTIVE BEE-VENOM AND ROYAL JELLY}

본 발명은 봉독과 로얄제리를 유효성분으로 함유하는 방사선 방호용 조성물에 관한 것으로서, 특히 뛰어난 방사선 방호효과를 갖는 봉독과 로얄제리를 유효성분으로 함유하는 방사선 방호용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a radiation protection composition containing bee venom and royal jelly as an active ingredient, and more particularly to a radiation protection composition containing bee venom and royal jelly as an active ingredient having excellent radiation protection effect.

방사선 장해 방호 물질에 대한 연구는 1949년 치올기를 함유한 치올(thiol) 복합제가 방사선 방호효과를 갖는다는 보고가 있은 후에, 치올기를 함유한 유기합 성물인 WR시리즈의 방호효과에 관한 연구에 집중되었으나 그 독성 때문에 실제 응용에는 한계를 보였다. 1990년 이후에는 미국, 이스라엘, 일본 등에서 디피리다몰(dipyridamole), 아데노신모노포스페이트(adenosine monophosphate), 테트라사클로데카옥사이드(tetracychlorodecaoxide), 아데투론(adeturon), 데옥시스퍼구알린(deoxyspergualin) 등 화학합성제의 효과를 연구하였으나 자체의 심각한 독성 때문에 역시 실제 적용에는 한계를 보였다. The study on the radiation-inhibiting substance focused on the protective effect of the WR series of organic compounds containing thiols after the fact that the thiol complex containing thiols had a radioprotective effect in 1949. Because of its toxicity, practical applications have been limited. Since 1990, the United States, Israel, Japan and other chemicals such as dipyridamole, adenosine monophosphate, tetratracychlorodecaoxide, adeturon, deoxyspergualin The effectiveness of the synthesis was studied, but due to its serious toxicity, it also showed limitations in practical applications.

이러한 방사선에 의한 장해는 피폭된 선량에 따라 다르게 나타난다. 즉, 초고선량(100 ~ 300 Gy)피폭 시에는 중추신경계 장해로 인하여 수시간 내지 1 ~ 2 일 안에 대부분 사망하게 되고, 고선량(10 ~ 30 Gy)피폭 시에는 위장관장해(위장관 점막손상)로 1 ~ 2 주 안에 많은 수가 사망하게 되며, 중간선량(4 ~ 8 Gy)피폭 시에는 골수장해로 조혈 및 면역기능 지하를 초래하게 되어 30일 안에 일부가 사망하게 되고, 저선량(1 ~ 2 Gy)피폭 시에는 저선량장해가 만성적으로 나타나게 된다.These radiation-induced disturbances vary with the doses exposed. In other words, during high doses (100 to 300 Gy), most of them die within a few hours to 1 to 2 days due to central nervous system disorders, and during high doses (10 to 30 Gy), gastrointestinal disorders (gastrointestinal mucosa damage) A large number of deaths occur within one to two weeks, and during intermediate doses (4 to 8 Gy), bone marrow disorders lead to hematopoietic and immune function undergrounds, causing some to die within 30 days, and low doses (1 to 2 Gy). Low dose disturbances are chronic in exposure.

이러한 방사선에 의한 장해를 방호하기 위해서 독성이 없고, 부작용이 적어 인체에 안전한 방사선 방호용 조성물에 대한 연구가 많이 이루어지고 있는 실정이다.In order to protect against the obstacles caused by radiation, many studies have been conducted on radiation-protective compositions that are safe for humans because of no toxicity and fewer side effects.

한국등록특허공보 제10-0791108호(방사선 방호효과를 갖는 담팔수 분획농축물과 그 제조방법)에는, 뛰어난 방사선 방호효과를 나타내는 담팔수 분획농축물을 유효성분으로 포함한 조성물에 관한 것이 공개되어 있다.Korean Patent Publication No. 10-0791108 (a light absorbing fraction concentrate having a radiation protection effect and a method for manufacturing the same) discloses a composition containing a light absorbing fraction concentrate having an excellent radiation protection effect as an active ingredient.

한국공개특허공보 제10-2004-0050030호(방사선 방호용 조성물)에는, 천궁 추출물 또는 비타민 E를 포함하여 독성이 없고, 부작용이 적어 인체에 안전한 방사선 방호용 조성물에 관한 것이 공개되어 있다.Korean Laid-Open Patent Publication No. 10-2004-0050030 (Radiation Protection Composition) discloses a composition for radiation protection that is safe for humans, including no toxic and less side effects, including a celery extract or vitamin E.

상기와 같은 발명은, 여러 한방제에 대한 방사선 방호용 조성물 제조에 관한 연구만 이루어져 있을 뿐, 벌 유래 물질을 대상으로 방사선 방호효과에 대한 연구는 시행된 바가 없다. The invention as described above only consists of studies on the production of a radiation protection composition for a variety of herbal medicines, research on the radiation protection effect on the bee-derived material has not been carried out.

한국등록특허공보 제10-0791108호 "방사선 방호효과를 갖는 담팔수 분획농축물과 그 제조방법"Korean Registered Patent Publication No. 10-0791108 "Freshwater fraction concentrate with radiation protection effect and its manufacturing method" 한국공개특허공보 제10-2004-0050030호 "방사선 방호용 조성물"Korean Laid-Open Patent Publication No. 10-2004-0050030 "Composition for Radiation Protection"

본 발명의 목적은 세포독성이 없어 인체에 안전하며, 세포증식 효과도 함께 나타내는 봉독과 로얄제리를 유효성분으로 함유하는 방사선 방호용 조성물을 제공하는데 있다.An object of the present invention is to provide a radiation protection composition containing bee venom and royal jelly as an active ingredient that is safe for the human body without cytotoxicity, and also has a cell proliferation effect.

본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제들은 이상에서 언급한 기술적 과제들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 다른 기술적 과제들은 아래의 기재로부터 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.Technical problems to be achieved by the present invention are not limited to the above-mentioned technical problems, and other technical problems not mentioned above may be clearly understood by those skilled in the art from the following description. There will be.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 방사선 방호용 조성물은 벌 유래 물질을 유효성분으로 함유하며, 특히 상기 벌 유래 물질로 봉독 또는 로얄제리 또는 봉독과 로얄제리 모두가 포함되는 것이 특징이다.The radiation protection composition of the present invention for achieving the above object contains a bee-derived material as an active ingredient, and in particular, the bee-derived material includes bee venom or royal jelly or bee venom and royal jelly.

상기 로얄제리는 상기 봉독의 중량대비 100~1000 배가 함유되는 것이 특징이다.The royal jelly is characterized in that it contains 100 to 1000 times the weight of the bee venom.

상기의 본 발명의 방사선 방호용 조성물은 세포독성이 없으면서 세포증식효과를 갖는 것이 특징이다.The radiation protection composition of the present invention is characterized by having a cell proliferation effect without cytotoxicity.

이러한 본 발명의 방사선 방호용 조성물은 방사선 방호를 위한 약학적 조성물의 유효성분으로 포함되거나, 방사선 방호를 위한 기능성 식품의 유효성분으로 포함되기도 한다.Such a radiation protection composition of the present invention may be included as an active ingredient of a pharmaceutical composition for radiation protection, or may be included as an active ingredient of a functional food for radiation protection.

본 발명의 방사선 방호용 조성물의 제조방법은 벌에서 분리된 봉독을 물로 용해한 후 원심분리한 후 나온 상등액을 동결건조하여 봉독건조물을 제조하는 단계, 생로얄제리를 동결건조하여 로얄제리건조물을 제조하는 단계 및, 상기 봉독건조물과 로얄제리건조물을 혼합하는 단계를 포함한다.Method for producing a composition for radiation protection of the present invention comprises the steps of dissolving bee venom separated from a bee with water and lyophilizing the supernatant obtained after centrifugation to prepare bee venom dried, lyophilizing the royal royal jelly to prepare a royal jelly dried And mixing the bee venom dried product with the royal jelly dried product.

상기 혼합단계시, 로얄제리건조물을 봉독건조물의 중량대비 100~1000 배로 넣고 혼합한다.In the mixing step, the royal jelly dried into 100 ~ 1000 times the weight of the bee venom dried and mixed.

본 발명에 의해, 세포증식 효과가 있고, 또한 독성이 없고 부작용이 적어 인체에 안전한 봉독과 로얄제리를 유효성분으로 포함하는 방사선 방호용 조성물이 제공됨으로써, 이를 이용한 방사선 방어 식품 및 의약품 개발 등 다양한 소재 개발을 통해 방사선 직업종사자나 암치료시 환자의 방사선 피폭감소와 같이 방사선에 대한 안전성 확보에 기여할 수 있다.According to the present invention, there is provided a radiation protection composition comprising bee venom and royal jelly as an active ingredient, which has a cell proliferation effect, and is non-toxic and has less side effects. The development can contribute to securing safety for radiation, such as reducing radiation exposure of radiation occupational workers or patients during cancer treatment.

또한, 봉독과 로얄제리의 다양한 제품개발을 통한 농가소득 증대효과도 얻을수 있다.In addition, it is possible to increase farm income by developing various products of bee venom and royal jelly.

도 1은 봉독과 로얄제리를 유효성분으로 함유하는 방사선 방호용 조성물 처리시 방사선에 의한 세포 생존율을 나타낸 그래프이다.
1: 실시예 1(봉독 0.1㎍ + 로얄제리 1 mg)
2: 실시예 2(봉독 1㎍ + 로얄제리 1 mg)
3: 실시예 3(봉독 10㎍ + 로얄제리 1 mg)
4: 실시예 4(봉독 0.1㎍ + 로얄제리 10 mg)
5: 실시예 5(봉독 1㎍ + 로얄제리 10 mg)
6: 실시예 6(봉독 10㎍ + 로얄제리 10 mg)
도 2는 봉독과 로얄제리를 유효성분으로 함유하는 방사선 방호용 조성물 처리시 산화적 스트레스에 의한 세포 생존율을 나타낸 그래프이다.
1: 실시예 1(봉독 0.1㎍ + 로얄제리 1 mg)
2: 실시예 2(봉독 1㎍ + 로얄제리 1 mg)
3: 실시예 3(봉독 10㎍ + 로얄제리 1 mg)
4: 실시예 4(봉독 0.1㎍ + 로얄제리 10 mg)
5: 실시예 5(봉독 1㎍ + 로얄제리 10 mg)
6: 실시예 6(봉독 10㎍ + 로얄제리 10 mg)
1 is a graph showing the cell survival rate by radiation during treatment with a radiation protection composition containing bee venom and royal jelly as an active ingredient.
1: Example 1 (0.1 μg bee venom + 1 mg royal jelly)
2: Example 2 (1 microgram of bee venom + 1 mg of royal jelly)
3: Example 3 (10 μg bee venom + 1 mg royal jelly)
4: Example 4 (0.1 μg Bee Venom + Royal Jelly 10 mg)
5: Example 5 (1 μg bee venom + royal jelly 10 mg)
6: Example 6 (10 μg bee venom + Royal Jelly 10 mg)
Figure 2 is a graph showing the cell survival rate due to oxidative stress upon treatment with a radiation protection composition containing bee venom and royal jelly as an active ingredient.
1: Example 1 (0.1 μg bee venom + 1 mg royal jelly)
2: Example 2 (1 microgram of bee venom + 1 mg of royal jelly)
3: Example 3 (10 μg bee venom + 1 mg royal jelly)
4: Example 4 (0.1 μg Bee Venom + Royal Jelly 10 mg)
5: Example 5 (1 μg bee venom + royal jelly 10 mg)
6: Example 6 (10 μg bee venom + Royal Jelly 10 mg)

이하, 본 발명을 상세히 설명하면 다음과 같다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 벌 유래 물질을 유효성분으로 포함하는 방사선 방호용 조성물을 제공하기 위한 것으로서, 상기 벌 유래 물질로는 벌에서 유래된 물질은 모두 가능하며, 그 중 봉독 또는 로얄제리 또는 봉독과 로얄제리 모두를 포함하는 경우 방사선 방호효과가 뛰어난 조성물을 제조하게 된다.The present invention is to provide a radiation protection composition comprising a bee-derived material as an active ingredient, the bee-derived material can be any material derived from the bee, among them bee venom or royal jelly or bee venom and royal jelly When it comprises a to prepare a composition excellent in radiation protection effect.

상기 봉독은 벌의 독낭에 들어있는 것으로, 약 40여 가지의 물질로 이루어져 있으며 기원전부터 인체의 질병치료에 이용되어 왔다. The bee venom, which is contained in a bee venom sac, consists of about 40 substances and has been used to treat diseases of the human body since BC.

현재 봉독 성분에 따른 작용과 기전, 봉독의 과민성과 독성, 면역요법 및 관절염, 단순포진, 다발성 경화증, 종양 등의 질병 치료 등에 대한 연구가 보고되고 있으나 민간적으로 전해내려 올 뿐 임상적인 연구 및 기초적, 과학적 연구는 많지 않은 편이다.Currently, studies on the action and mechanism of bee venom components, hypersensitivity and toxicity of bee venom, immunotherapy and arthritis, herpes simplex, multiple sclerosis, and treatment of diseases such as tumors have been reported. However, there is not much scientific research.

상기 로얄제리는 벌들이 다량의 화밀과 화분을 먹고 만들어 낸 물질로, 단백질, 지방, 탄수화물 및 각종 미량 원소를 고루 함유한 영양 물질이다.The royal jelly is a substance produced by bees eating a large amount of nectar and pollen, and is a nutritional substance containing protein, fat, carbohydrates and various trace elements.

로얄제리 중에는 비타민류나 풍부한 영양소가 많이 함유되어 있으며, 특히, 여성의 피부를 윤택하게 하는 아세틸콜린의 신경전달물질과 근육, 뼈 및 치아 등을 젊게 하며 노화방지를 하는 타액선 호로몬인 파로틴 유사물질이 다량 함유되어 있다.Royal jelly contains a lot of vitamins and rich nutrients. Especially, acetylcholine neurotransmitter that makes women's skin moisturize, and parotin-like substance, salivary gland hormone, which prevents aging and rejuvenates muscles, bones and teeth. It is contained.

또한, 로얄제리에는 암세포의 성장을 억제하는 10-HAD의 성분이 함유되어 있어 정신불안, 갱년기 장애, 혈압 이상 등에 탁월한 효과가 있는 것으로 보고되어있다.In addition, Royal Jelly contains 10-HAD, which inhibits the growth of cancer cells, and has been reported to have an excellent effect on mental anxiety, menopausal disorders, and abnormal blood pressure.

본 발명은 상기와 같은 벌 유래 물질을 포함하는 조성물을 이용하여 방사선 및 산화적 손상에 의해 손상된 세포에 대해 예방 및 치료효과를 확인하였다, The present invention confirmed the prophylactic and therapeutic effect on cells damaged by radiation and oxidative damage by using a composition comprising a bee-derived material as described above.

즉, 방사선에 의한 CHO 세포의 세포독성에 대하여 봉독 1 ㎍ + 로얄제리 10 mg이 포함된 조성물에서 가장 높은 보호 효과를 나타내며, 과산화수소에 의한 CHO세포의 세포독성에 대해서도 봉독과 로얄제리가 포함된 조성물(봉독 1 ㎍ + 로얄제리 10 mg)이 세포독성을 유의적으로 감소시킴을 확인하였다.That is, the composition containing bee venom 1 μg + royal jelly 10 mg showed the highest protective effect against the cytotoxicity of CHO cells by radiation, and the composition containing bee venom and royal jelly also on the cytotoxicity of CHO cells by hydrogen peroxide. (1 μg of bee venom + 10 mg of royal jelly) was found to significantly reduce cytotoxicity.

이에, 봉독과 로얄제리를 이용한 방사선 방어를 필요로 하는 기능성 식품 및 약학적 조성물 개발 등 다양한 소재 개발을 통해 방사선 직업종사자나 암치료시 환자의 방사선 피폭감소와 같이 방사선에 대한 안전성 확보에도 기여할 수 있게 된다.Therefore, through the development of various materials such as functional foods and pharmaceutical compositions that require radiation protection using bee venom and royal jelly, it is possible to contribute to securing safety for radiation such as reducing radiation exposure of radiation workers and patients during cancer treatment. do.

비록 하기 구체적인 실시예로 제시되지는 않았지만 상기와 같이 본 발명의 방사선 방호용 조성물이 약학적 조성물의 유효성분으로 포함되어 사용될 경우, 약학적으로 허용되는 담체가 추가로 함유될 수도 있는데 이때, 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. Although not shown in the following specific examples, when the radioprotective composition of the present invention is used as an active ingredient of the pharmaceutical composition as described above, a pharmaceutically acceptable carrier may be further contained, wherein the pharmaceutical Acceptable carriers are those commonly used in the preparation, such as lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, acacia rubber, calcium phosphate, alginate, gelatin, calcium silicate, microcrystalline cellulose, polyvinylpi Ralidone, cellulose, water, syrup, methyl cellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil, and the like.

또한, 상기 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수도 있다.In addition, the pharmaceutical composition may further include lubricants, wetting agents, sweeteners, flavoring agents, emulsifiers, suspending agents, preservatives, and the like, in addition to the above components.

이렇게 생성된 상기 약학적 조성물은 비경구로 투여할 수 있고, 피하 주입 또는 피부를 통한 국소 투여(경피 투여)로 투여할 수도 있다.The pharmaceutical composition thus produced may be administered parenterally, or may be administered by subcutaneous infusion or topical administration through the skin (transdermal administration).

이때, 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있으며, 경구 투여일 경우 그 함량은 바람직하게는 1일 당 0.001-100 mg/kg(체중)이다.Appropriate dosages can be variously prescribed by such factors as formulation method, mode of administration, patient's age, weight, sex, morbidity, food, time of administration, route of administration, rate of excretion and response sensitivity. If administered, the content is preferably 0.001-100 mg / kg body weight per day.

본 발명의 약학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. The pharmaceutical compositions of the present invention may be prepared in unit dosage form by formulating with a pharmaceutically acceptable carrier and / or excipient according to methods which can be easily carried out by those skilled in the art. Or may be prepared by incorporation into a multi-dose container.

이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
The formulations may be in the form of solutions, suspensions or emulsions in oils or aqueous media, or in the form of excipients, powders, granules, tablets or capsules, and may additionally contain dispersing or stabilizing agents.

본 발명의 방사선 방호용 조성물은 기능성 식품의 유효성분으로도 포함되어 사용하기도 하는데, 비록 하기 구체적인 실시예로 제시되지는 않았지만, 본 발명에 의해 뛰어난 방사선 방호효과를 나타내는 벌 유래 물질을 유효성분으로 포함하는 조성물을 기능성 식품의 유효성분으로도 포함할 수 있음이 당업자에게는 당연할 것이다.The radiation protection composition of the present invention may be used as an active ingredient of a functional food, although not shown in the following specific examples, but includes a bee-derived material exhibiting excellent radiation protection effect by the present invention as an active ingredient. It will be apparent to those skilled in the art that the composition may be included as an active ingredient of a functional food.

상기 기능성 식품은, 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 주 효과의 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 포함할 수도 있으며, 예를 들어 물성개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류, 유화제, 합성 고분자 물질 등의 첨가제를 더 포함할 수도 있을 뿐만 아니라, 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당 및 해초 엑기스 등의 보조 성분을 더 포함할 수도 있다. The functional food, may include other ingredients that can give a synergistic effect of the main effect within the range that does not impair the main effect for the purpose of the present invention, for example, fragrances, pigments, fungicides for physical properties improvement It may further include additives such as antioxidants, preservatives, humectants, thickeners, inorganic salts, emulsifiers, synthetic polymers, and supplementary ingredients such as water-soluble vitamins, oil-soluble vitamins, polymer peptides, polymer polysaccharides, and seaweed extracts. It may further include.

상기 성분들은 제형 또는 사용 목적에 따라서 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 그 첨가량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위내에서 선택될 수 있다.The above ingredients may be appropriately selected and blended by those skilled in the art according to the dosage form or purpose of use, and the amount may be selected within a range that does not impair the object and effect of the present invention.

또한, 상기 기능성 식품의 제형 역시 용액, 유화물, 점성형 혼합물, 타블렛, 분말 등의 다양한 형태일 수 있으며, 이는 단순 음용 등의 다양한 방법으로 섭취될 수 있다.
In addition, the formulation of the functional food may also be in various forms such as solutions, emulsions, viscous mixtures, tablets, powders, etc., which may be ingested by various methods such as simple drinking.

이하, 본 발명에 대하여 실시예 및 실험예를 통하여 상세히 설명하나, 이들이 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples and Experimental Examples, but the scope of the present invention is not limited thereto.

<실시예 1 내지 6> 본 발명의 방사선 방호용 조성물 제조<Examples 1 to 6> Preparation of the composition for radiation protection of the present invention

1) 봉독1) Bee Venom

서양종꿀벌(Apis meliffera L.)을 봉독채집장치를 이용하여 봉독을 채집하고, 채집한 건조봉독을 증류수로 용해한 후, 원심분리시킨 다음, 이를 여과한 후 동결건조하여 순수한 봉독을 분리해 내었다.The honey bee ( Apis meliffera L.) was collected by using a bee venom collecting device, and the collected bee venom was dissolved with distilled water, centrifuged, filtered, and lyophilized to separate the pure bee venom.

2) 로얄제리2) Royal Jelly

원액을 채취한 자연 그대로의 상태인 젤리형태의 생로얄제리 100g을 동결건조한 후 분쇄하여 건조 분말형태의 로얄제리를 제조하였다.The raw solution was taken in the natural state of the raw jelly in the form of jelly in the form of jelly, lyophilized and pulverized to prepare a royal powder in the form of a dry powder.

3) 방사선 방호용 조성물 제조3) Preparation of Radiation Protection Composition

하기 표 1과 같은 조합비율로 봉독과 로얄제리를 제조하여 하기의 실험들을 실행하였다. To prepare a bee venom and royal jelly in the combination ratio as shown in Table 1 to carry out the following experiments.


봉독(BV, ㎍) Bee venom (BV, μg)
0.10.1 1One 1010 로얄제리(RJ, mg)
Royal Jelly (RJ, mg)
1One 실시예1Example 1 실시예2Example 2 실시예3Example 3
1010 실시예4Example 4 실시예5Example 5 실시예6Example 6

<실험예 1> 방사선의 CHO세포에 대한 세포독성 확인Experimental Example 1 Checking Cytotoxicity of Radiation to CHO Cells

(1) 시험방법(1) Test method

1) CHO세포 배양 및 세포증식률 1) CHO Cell Culture and Cell Proliferation Rate

: 한국세포주은행에서 구입하였으며, CHO-K1 세포는 암컷 햄스터(hamster)의 난소유래 세포로서 RPMI배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 배양기에서 계대배양하여 실험에 사용하였다. : CHO-K1 cells were purchased from Korea Cell Line Bank and used for experiments by passage in 37 ° C., 5% CO 2 incubator using RPMI medium as ovarian-derived cells of female hamsters.

배양세포가 바닥 면적의 90% 가량 차도록 자라면 계대배양을 하고 대수 성장기의 세포를 실험에 사용하였다. When cultured cells were grown to 90% of the floor area, subcultures were used and the cells of logarithmic growth phase were used for the experiment.

CHO-k1 세포를 96 웰 플레이트(well plate)에 5×105 cell/㎖로 하여 분주하여 하루 동안 배양하여 부착시키고 새로운 배지로 교환한 다음 다양한 농도의 봉독과 로얄제리를 처리하였다. CHO-k1 cells were seeded at 5 × 10 5 cells / ml in a 96 well plate, cultured for one day, attached, replaced with fresh medium, and treated with various concentrations of bee venom and royal jelly.

37℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 배양한 후 세포 생존율을 MTT시약 (methylthiazol-2-yl-2.5-diphenyl tetrazolium bromide)으로 처리하여 ELISA리더기(reader)로 540 nm에서 흡광도를 측정하여 봉독과 로얄제리의 세포 증식률을 평가하였다.
37 ° C, 5% CO 2 After 24 hours of incubation, the cell viability was treated with MTT reagent (methylthiazol-2-yl-2.5-diphenyl tetrazolium bromide) and the absorbance at 540 nm was measured by ELISA reader to evaluate the cell proliferation rate of bee venom and royal jelly. It was.

(2) 시험결과(2) Test result

CHO세포에 대한 봉독과 로얄제리에 대한 세포독성을 MTT 어세이(assay)로 측정한 결과, 도시되어 있지 않지만 세포독성을 보이지 않고 세포증식에 효과를 보이는 봉독과 로얄제리 함량을 확인하여 상기 표 1과 같은 비율로 조합하여 하기 실험에 사용하였다.
As a result of measuring the cytotoxicity of bee venom and royal jelly to CHO cells by MTT assay, it was confirmed that the bee venom and royal jelly content was not shown but showed no effect on cell proliferation without showing cytotoxicity. It was used in the following experiment in combination in the same ratio.

<실험예 2> CHO세포에서 방사선에 대한 세포 생존률 확인Experimental Example 2 Confirmation of Cell Viability to Radiation in CHO Cells

상기 실시예 1 내지 6에 대한 조성물을 준비하고, 이들의 세포독성에 대한 방사선 조사 및 세포 생존률을 측정하였다.The compositions for Examples 1-6 were prepared and their irradiation against cell toxicity and cell viability were measured.

1) 시험방법1) Test method

: 방사선 조사 실험은 대학병원의 방사선 조사시설을 이용하였다. 방사선 발생원으로부터 100 cm거리에 CHO-k1세포를 놓고 조사하였으며, 방사선 조사량은 2 Gy를 사용하였다. : Irradiation experiments were conducted at the university hospital. CHO-k1 cells were placed at a distance of 100 cm from the radiation source and irradiated with 2 Gy.

방사선 조사 전에 각각 봉독과 로얄제리를 처리하여 1시간 동안 배양한 후 방사선을 조사하였다. Before irradiation, bee venom and royal jelly were treated and incubated for 1 hour, and then irradiated.

이후 RPMI 1640 배지로 세척하여 37℃, 5% CO2 배양기에서 48시간 배양하였으며, 생성된 콜로니를 알코올로 고정한 뒤 염기성 염료(크리스탈 바이올렛 사용, crystal violet)로 염색하여 콜로니 수(colony forming efficiency, CFE)를 계산하였다
After washing with RPMI 1640 medium 37 ℃, 5% CO 2 After 48 hours of incubation, the resulting colonies were fixed with alcohol and stained with basic dye (crystal violet) to calculate colony forming efficiency (CFE).

2) 시험결과2) Test result

도 1에 나타나 있듯이, 방사선 조사에 의한 세포독성에 대한 봉독과 로얄제리 조성물의 보호효과를 측정하였다. 봉독과 로얄제리 조성물의 처리는 방사선 조사 1시간 전에 농도별로 처리하였다. 방사선 선량은 예비실험 조건에서 선택한 2Gy로 조사하였다. 도 1에서 보는 바와 같이 4번 조성물(실시예4, 봉독 1 ㎍ + 로얄제리 10 mg)에서 약 3배 정도 세포 생존율이 증가하였다.
As shown in Figure 1, the protective effect of bee venom and royal jelly composition against cytotoxicity by irradiation was measured. Treatment of bee venom and royal jelly composition was carried out concentration by 1 hour before irradiation. The radiation dose was irradiated with 2Gy selected under preliminary experimental conditions. As shown in FIG. 1, cell viability was increased by about three times in composition 4 (Example 4, bee venom 1 μg + royal jelly 10 mg).

<실시예 3> 산화적 스트레스에 의한 세포 생존률 측정Example 3 Measurement of Cell Viability by Oxidative Stress

1) 실험방법1) Experimental method

: CHO-k1 세포를 5×105 cell/㎖로 분주한 후 봉독과 로얄제리를 처리하여 24시간 동안 배양 한 후, 0.1 mM의 과산화수소(H2O2)에 30분간 노출시켜 산화적 스트레스를 유발하였다. 이후 정상배지인 RPMI 1640 배지로 교환하여 48시간 배양하한 후 세포 생존율을 MTT 분석하였다.
: Disperse CHO-k1 cells at 5 × 10 5 cells / ml, incubate for 24 hours with bee venom and royal jelly, and then expose to 0.1 mM hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) for 30 minutes to reduce oxidative stress. Induced. Thereafter, the cells were exchanged with normal medium of RPMI 1640 for 48 hours, and then cell viability was analyzed by MTT.

2) 실험결과2) Experimental results

세포에 H2O2 처리하기 24시간 전에 도 2에서와 같이 봉독과 로얄제리 조성물로 처리한 경우 세포보호 효과가 확인되었다.
H 2 O 2 on cells When treated with bee venom and royal jelly composition as shown in Figure 2 24 hours before the treatment was confirmed a cytoprotective effect.

즉, 방사선과 산화적 스트레스에 의해 손상된 세포의 재생은 봉독과 로얄제리의 실시예 5의 조성물에서 가장 효과적이었다. 봉독 단독으로 처리했을 경우 0.1 이하에서 또는 10 이상에서는 효과가 매우 약하였으나, 로얄제리를 함께 처리했을 경우에는 상승효과를 갖는 것으로 확인되었다. 또한 로얄제리의 경우 1mg 이하에서는 방사선 차단 효과가 확인되지 않았으나 봉독과의 조합에서는 방사선 차단효과가 있었다. 즉, 봉독과 로얄제리 단독으로 처리할 경우도 효과는 있으나, 그 효과가 약하였으며, 두 물질을 조합했을 경우에는 그 효과가 크게 상승하는 것으로 확인되었다.
That is, the regeneration of cells damaged by radiation and oxidative stress was most effective in the composition of Example 5 of bee venom and royal jelly. When treated with bee venom alone, the effect was very weak at below 0.1 or above 10, but when royal jelly was treated together, it was confirmed to have a synergistic effect. In addition, in the case of royal jelly, the radiation blocking effect was not confirmed at 1 mg or less, but in combination with bee venom, there was a radiation blocking effect. In other words, the treatment with bee venom and royal jelly alone was effective, but the effect was weak, when the combination of the two were confirmed that the effect is significantly increased.

상기의 결과를 토대로 본 발명에 의해, 세포증식 효과가 있고, 또한 독성이 없고 부작용이 적어 인체에 안전한 봉독과 로얄제리를 유효성분으로 포함하는 방사선 방호용 조성물이 제공됨으로써, 이를 이용한 방사선 방어 식품 및 의약품 개발 등 다양한 소재 개발을 통해 방사선 직업종사자나 암치료시 환자의 방사선 피폭감소와 같이 방사선에 대한 안전성 확보에 기여할 수 있으며, 봉독과 로얄제리의 다양한 제품개발을 통한 농가소득 증대효과도 얻을 수 있음을 알 수 있다.
Based on the above results, the present invention provides a radiation protection composition comprising a bee venom and royal jelly as an active ingredient, which has a cell proliferation effect, and is nontoxic and has low side effects, which is safe for humans. Through the development of various materials, such as drug development, it can contribute to securing radiation safety, such as reducing the radiation exposure of radiation occupational workers or patients during cancer treatment, and can also increase farm income by developing various products of bee venom and royal jelly. It can be seen.

상기의 본 발명은 바람직한 실시예 및 시험예를 중심으로 살펴보았으며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 본질적 기술 범위 내에서 상기 본 발명의 상세한 설명과 다른 형태의 실시예들을 구현할 수 있을 것이다. 여기서 본 발명의 본질적 기술범위는 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the invention is not limited to the disclosed exemplary embodiments. You can implement the examples. The scope of the present invention is defined by the appended claims, and all differences within the scope of the claims are to be construed as being included in the present invention.

Claims (11)

삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete Apis meliffera L.의 서양종 꿀벌로부터 봉독채집장치로 봉독을 채집한 후, 이를 증류수로 용해하고 원심분리한 후 나온 상등액을 동결건조하여 봉독건조물을 제조하는 단계;
생로얄제리를 동결건조하여 로얄제리건조물을 제조하는 단계; 및
상기 봉독건조물과 로얄제리건조물을 혼합하되, 상기 봉독건조물 1㎍당 상기 로얄제리건조물 10mg을 넣고 혼합하는 단계를 포함하는,
방사선 방호용 조성물의 제조방법.
Collecting bee venom from bees by a bee venom collecting device from a Western bee of Apis meliffera L., dissolving the bee venom with distilled water, centrifuging and preparing a bee venom dried bean by freeze-drying the supernatant;
Preparing a royal jelly dried product by lyophilizing the raw royal jelly; And
Mixing the bee venom dried product with the royal jelly dried, and adding and mixing 10 mg of the royal jelly dried per 1 μg of the bee venom dried,
Method for producing a composition for radiation protection.
삭제delete 제9항의 제조방법에 의해 제조되어,
Apis meliffera L.의 서양종 꿀벌 유래 상기 봉독 건조물 1㎍당 상기 로얄제리건조물 10mg이 함유되는 것이 특징인,
방사선 방호용 조성물.
Prepared by the manufacturing method of claim 9,
Characterized by containing 10 mg of the royal jelly dried per 1 μg of the bee venom dried from the Western bee of Apis meliffera L.,
Radiation protection composition.
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JP2005247789A (en) * 2004-03-05 2005-09-15 Sugarlady Honsha:Kk Royal jelly preparation
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Protective Effects of Royal Jelly and Nutrients on Radiation Injury, Acta Universitatis Medicinalis Nanjing(Natural Science), Vol. 4(1990년) *
Protective Effects of Royal Jelly and Nutrients on Radiation Injury, Acta Universitatis Medicinalis Nanjing(Natural Science), Vol. 4(1990년)*
골관절염의 통증과 염증에 대한 봉독의 약효 - 동물실험을 중심으로 고찰, 포천중문 의과대학교 대체의학 대학원 석사학위 논문(2006년 12월) *
골관절염의 통증과 염증에 대한 봉독의 약효 - 동물실험을 중심으로 고찰, 포천중문 의과대학교 대체의학 대학원 석사학위 논문(2006년 12월)*

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