KR101348965B1 - 자색고구마 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 자색고구마 추출물을 유효성분으로 하는 의약 조성물 및 건강기능식품에 관한 것으로, 아지방세포의 지방세포로의 전환과 지방축적을 강하게 억제함은 물론, 고지방식이에 의한 체중 증가를 억제하고, 피하지방의 양을 감소시키며, 혈중 렙틴 농도, 트리글리세라이드 및 콜레스테롤 함량을 낮추어, 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증, 고트리글리세라이드혈증 등의 치료 및 예방용 의약 조성물 및 건강기능식품으로 활용될 수 있다.

Description

자색고구마 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물{Composition comprising extract of purple sweet potato as active ingredient}
본 발명은 자색고구마 추출물을 유효성분으로 하는 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증, 고트리글리세라이드혈증 등의 치료 및 예방용 의약 조성물 및 건강기능식품에 관한 것이다.
최근 식생활의 서구화에 따라 영양과다 등의 원인으로 비만이 증가하고 있는데 비만은 동맥경화증의 위험인자의 하나이고, 또한 당뇨병이나 고혈압 등과도 관련이 있어, 심각한 문제가 되고 있다. 비만은 신체에 지방이 과잉되게 축적된 상태이며, 지방이 체내에 축적되는 원인은 당질의 과잉섭취 또는 지방을 과잉섭취 함으로써 음식물 중에 함유되는 당질이 소화되어 단당이 되고 소장을 통해 체내로 흡수되며, 혈당이 상승하여 그 자극으로 분비되는 인슐린이 지방세포에 작용해서 혈액 중의 단당을 지방세포에 받아들이게 해서 지방으로 바꾸는 것이다. 또한 식품성분 중에서 가장 고칼로리인 지방은 췌장 리파아제에 의해 분해되어 소장을 통해 흡수되는 것이며, 섭취 칼로리의 과잉은 저장 칼로리를 증가하도록 작용하여, 저장 칼로리가 증가되는 결과 과잉 지방섭취에 의해 비만에 달하게 된다.
이러한 비만을 억제하기 위해서, 비만에 달하는 경로의 일부분을 저해함으로써, 항비만 작용을 발생시키려는 생각을 바탕으로 현재 각종 항비만제에 관한 연구가 진행되고 있다. 즉, 당질 과잉섭취로 비만에 달하는 경로를 저해하는, 당질분해 소화요소 저해작용, 혈당상승 억제작용, 또는 단당흡수 억제작용에 의해, 혹은 지방 과잉 섭취에 의해 비만에 달하는 경로를 저해하는, 콜산 흡착 배설작용, 콜레스테롤 지하작용, 혈중 트리글리세리드 저하작용, 또는 리파아제 저해작용에 의해 비만을 예방, 개선할 수 있다고 생각되어, 이들 작용을 가지는 의약성분의 연구가 수 없이 행해지고 있다.
포화지방산과 콜레스테롤의 섭취량이 많은 구미제국이면서도, 프랑스 사람은 다른 구미제국의 사람들보다 심장질환 발병률이 낮으며, 이 현상을 프렌치 파라독스로 알려져 있다. 프렌치 파라독스 요인의 하나는 프랑스 사람에게서 볼 수 있는 적와인의 높은 섭취량에 의한다는 것이 제기되어 그 성분의 탐색이 활발하게 행하여졌다. 동맥경화와 밀접하게 관련하는 LDL의 산화가 적와인에 함유된 폴리페놀에 의하여 억제된다는 것이 발견되어 백와인에 비하여 적와인의 높은 폴리페놀 함량이 LDL 의 산화억제와 밀접하게 관련된 것이 발견되었다. 나아가서 폴리페놀로서의 안토시아닌 그중 마루빈, 델피니딘, 사이니딘, 페라루고니딘 등이 LDL 산화를 억제한다는 것이 발견되어 지금까지 거의 상세한 연구가 행하여지지 않은 안토시아닌의 생체 내에서의 생리기능에 많은 관심이 모아지고 있다.
한편, 자색고구마(자미고구마; Purple-Fleshed sweet potato)는 1993년 가공용 다수성 품종 건미를 모본으로하고 자색 색소를 함유한 야마까와무라사끼를 부본으로 인공 교배하여 생산력검정시험과 지역적응시험에서 다수성이 확인되어 품종교배를 통해 지난 1998년 자미, 2000년 보라미, 2001년에 신자미 등 3가지 신품종으로 육성되었다. 이들 신품종은 야생 고구마의 고유 성분은 모두 간직하고 있으면서 크기는 일반 고구마와 비슷한 반면 수확량은 야생보다 2배 이상 많고, 고구마 고유의 당질과 섬유소를 가지고 있다는 장점을 지니고 있다. 자색고구마는 색소추출물을 다량 함유하고 있어 표피층뿐만 아니라 육질 전체가 진한 자색을 띠고 있는데, 이 기능성 색소함량이 크린베리 보다는 10 ~ 60배, 포도보다는 5 ~ 7배 높아 천연 기능성 색소 원뿐만 아니라 기능성 식품소재로서 가치가 우수하다.
이러한 자색고구마의 주요 활성성분은 플라보노이드계의 색소인 안토시아닌으로 항산화작용 (J Agric. Food Chem. 51, pp 628-633, 2003; J Nat. Prod. 62, p 802, 1999; J Med. Food. 4 pp 211-218, 2001), 항당뇨(J Agric Food Chem. 49, pp 1948-1951, 2001), 항암작용(Cancer Lett. in press pp 1-12, 2005) 효과 등이 있는 것으로 보고되어 있다. 또한 최근 아세트아미노펜과 같은 간 손상을 유발하는 화학물질의 대사에 관여된 간의 약물대사 효소인 시토크롬 P450의 효소들 (P450 1A1, P450 2E1)의 활성을 억제하고, 간손상을 유발시키는 화학물질의 대사체의 포합반응을 통한 체외 방출을 촉진하는 해독효소를 증가시킴으로써, 간질환의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다는 보고도 있다(한국공개특허 제2007-0079637호).
본 발명자들은 자색고구마 추출물의 페놀성화합물 분획물이 자색고구마 추출물의 안토시아닌 색소 분획물과 동등한 지방 축적 억제 효과를 나타내며, 특히 자색고구마 추출물의 페놀성화합물 분획물과 안토시아닌 색소 분획물이 혼합된 조성물에서 안토시아닌 색소 분획물에 비해 오히려 지방 축적 억제에 있어서 상승효과를 나타냄을 확인하였고, 따라서 지금까지의 연구나 제품개발에서는 색소에만 중점을 두에 제품이 개발되었으나 자색고구마 추출물에서 안토시아닌 색소만를 사용하는 것보다 자색고구마 추출물의 페놀성화합물 분획물과 안토시아닌 색소 분획물이 동시에 다량으로 포함하도록 추출하여 제품으로 개발하는 것이 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증, 고트리글리세라이드혈증 등의 치료 및 예방용에 유용함을 확인하게 되어 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 자색고구마 추출물을 유효성분으로 하는 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증, 고트리글리세라이드혈증 등의 치료 및 예방용 의약 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 자색고구마 추출물을 유효성분으로 하는 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증, 고트리글리세라이드혈증 등의 개선용 건강기능식품을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 지방 축적 억제를 통한 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증 및 고트리글리세라이드혈증으로 구성되는 질환으로부터 선택되는 어느 하나의 질환 예방 및 치료용 의약 조성물은 자색고구마 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 지방 축적 억제를 통한 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증 및 고트리글리세라이드혈증으로 구성되는 질환으로부터 선택되는 어느 하나의 질환 예방 및 치료용 의약 조성물에서, 상기 자색고구마 추출물은 열수추출물 또는 탄소수 2 ~ 4의 저급 알코올 수용액의 추출물인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 지방 축적 억제를 통한 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증 및 고트리글리세라이드혈증으로 구성되는 질환으로부터 선택되는 어느 하나의 질환 예방 및 치료용 의약 조성물에서, 상기 열수추출물은 80 ~ 105 ℃에서 0.5 ~ 24 시간 추출한 것을 특징으로 한다.
본 발명의 지방 축적 억제를 통한 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증 및 고트리글리세라이드혈증으로 구성되는 질환으로부터 선택되는 어느 하나의 질환 예방 및 치료용 의약 조성물에서, 상기 자색고구마는 야마까와무라사끼, 아야무라사끼, 연자미, 보라미 및 신자미 중에서 선택된 어느 하나 이상의 품종의 고구마인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 지방 축적 억제를 통한 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증 및 고트리글리세라이드혈증으로 구성되는 질환으로부터 선택되는 어느 하나의 질환 개선용 건강기능식품은, 자색고구마 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 자색고구마 추출물을 유효성분으로 하는 조성물은 아지방세포의 지방세포로의 전환과 지방축적을 강하게 억제함은 물론, 고지방식이에 의한 체중 증가를 억제하고, 피하지방의 양을 감소시키며, 혈중 렙틴 농도, 트리글리세라이드 및 콜레스테롤 함량을 낮춘다.
도 1은 본 발명의 제조예 1, 제조예 2를 첨가하여 아지방세포를 지방세포로 분화시킨 후 지방세포를 오일레드-O 염색하고, 탈색시켜 500 nm에서 상대 흡광도를 비교한 그래프이다.
도 2는 발명의 실험예 2의 고지방식이 마우스에서의 항비만 효과를 확인하는 실험 과정의 개략도이다.
도 3은 본 발명의 실험예 2의 각 실험군의 8주 후 마우스의 체중 변화를 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 실험예 2의 각 실험군의 8주 후 마우스의 피하지방의 총량을 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 실험예 2의 각 실험군의 8주 후 마우스의 혈중 트리글리세라이 함량을 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 실험예 2의 각 실험군의 8주 후 마우스의 혈중 총 콜레스테롤 함량을 나타낸 그래프이다.
도 7은 본 발명의 실험예 2의 각 실험군의 8주 후 마우스의 혈중 랩틴 함량을 나타낸 그래프이다.
본 발명의 지방 축적 억제를 통한 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증 및 고트리글리세라이드혈증으로 구성되는 질환으로부터 선택되는 어느 하나의 질환 예방 및 치료용 의약 조성물, 또는 상기 질환 개선용 건강기능식품은 자색고구마 추출물을 유효성분으로 함유한다.
본 발명에서 자색고구마는 야마까와무라사끼, 아야무라사끼, 연자미, 보라미 또는 신자미가 바람직하고, 더욱 바람직하게는 야마까와무라사끼, 아야무라사끼 또는 신자미가 바람직하며, 가장 바람직하게는 신자미이다. 신자미 품종의 자색고구마는 안토시아닌 조성에서 시아니딘 함량 및 페오니딘 함량이 상대적으로 낮은 특성을 나타낸다.
본 발명의 "자색고구마 추출물"은 상기 자색고구마에 용매를 가하여 추출함으로써 얻어진 추출물을 의미하는 것으로, 본 발명의 "자색고구마 추출물"은 자색고구마의 안토시아닌 및 페놀성화합물을 포함하고 있다.
본 발명의 자색고구마 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물을 추출 용매로 이용하여 자색고구마로부터 추출된 것이다.
본 명세서에서 사용되는 "추출물"은 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다. 따라서 자색고구마 추출물은 상기 추출 용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제과정을 추가적으로 적용하여 얻은 안토시아닌 색소 분획물 또는 페놀성화합물 분획물도 포함한다. 예를 들어 안토시아닌 색소 분획물 또는 페놀성화합물 분획물을 얻기 위해서, 유기용매에 의한 추출 또는 침전, 한외여과 등의 분자량 분획, 또는 크기, 전하, 소수성 또는 친수성에 따른 크로마토그래피에 의한 분리 및 정제가 이용될 수 있다.
본 발명의 하나의 실시예로서 자색고구마 추출물은 열수추출물이 바람직하다. 예를 들어, 80 ~ 105 ℃, 바람직하게는 90 ~ 100 ℃의 물에서 0.5 ~ 24 시간, 바람직하게는 1 ~ 6 시간 추출할 수 있다. 상기 추출온도 하한치 미만에서는 본 발명의 의약 활성을 나타낸는 유효성분인 안토시아닌 및 페놀성 화합물의 추출효율이 저하되고 잡균에 대한 살균 효과를 충분히 달성할 수 없고, 이로 인하여 추출시간을 길게하면 오히려 잡균이 증식할 수 있다는 문제가 있고, 상기 추출온도 상한치를 초과하면 잡균의 살균 효율은 증대되지만 안토시아닌이 파괴되어 추출물의 색이 탁해진다. 자색고구마의 본 발명의 의약 활성을 나타내기 위한 유효성분 중 안토시아닌 추출효율을 증대시키기 위하여 산을 첨가하여 물의 pH를 2 ~ 6, 바람직하게는 pH 3 ~ 5 정도의 산성화시키는 것이 바람직하다. 물의 pH를 낮추기 위하여 특별히 한정하지는 않지만 구연산, 젖산, 호박산, 사과산, 말산, 초산 등의 유기산을 사용할 수 있다.
본 발명의 다른 실시예로서 자색고구마 추출물로 탄소수 2 ~ 4의 저급 알코올 수용액에 의한 추출물이 사용될 수 있다. 예를 들어, 에탄올, 메탄올, 이소프로판올 등의 알코올 수용액, 바람직하게는 20 ~ 80 중량%의 알코올 수용액, 더욱 바람직하게는 50 ~ 70 중량%의 알코올 수용액으로 추출한다. 상기 알코올 수용액의 안토시아닌 추출 효율을 증대시키기 위해 열수추출과 마찬가지로 알코올에 산을 첨가할 수 있다.
본 발명의 다른 실시예로서, 자색고구마 추출물은 자색고구마 추출물의 페놀성화합물의 분획물일 수 있다. 자색고구마 추출물에서 페놀성화합물의 분획물을 분리하기 위하여 안토시아닌을 흡착하는 흡착수지를 이용하는 크로마토그래피를 이용할 수 있고, 안토시아닌과 페놀성화합물의 용매에 대한 용해성 차이를 이용하여 안토시아닌 색소 분획과 페놀성화합물 분획을 분리할 수 있다.
예를 들어, 안토시아닌을 흡착하는 흡착수지 크로마토그래피 컬럼에 자색고구마 추출물을 첨가하고(loading), 충분한 물을 통과시켜 수용해성 물질을 제거하고 에틸아세테이트로 용출시킬 경우, 안토시아닌 색소는 흡착수지에 흡착되어 있고, 에틸아세테이트에 페놀성화합물이 용출되므로 페놀성화합물 분획물을 얻을 수 있다.
예를 들어 안토시아닌 흡착수지로는 특별히 한정하지 않지만 ODS(C18) 수지, 엠벌라이트 XAD-7 등을 사용할 수 있다.
한편 상기 안토시아닌 흡착수지에 안토시아닌 색소를 흡착시킨 후 수용해성 물질과 페놀성화합물을 용출시켜 제거한 후, 에탄올을 크로마토그래피 컬럼에 흘려보내면 적색의 안토시아닌 색소 분획물이 용출된다.
또한 자색고구마 추출물에서 페놀성화합물 분획과 안토시아닌 색소 분획을 분리하기 위해, 자색고구마 추출물을 메탄올과 에틸에테르의 혼합 용매에 넣고 혼합한 후 원심분리하여 침전물과 상등액으로 분리하면, 침전물에 함유된 안토시아닌 색소 분획물과 상등액의 페놀성화합물 분획물을 각각 얻을 수 있다.
본 발명은 페놀성화합물과 안토시아닌 색소를 모두 포함하는 자색고구마 추출물, 또는 자색고구마 추출물의 페놀성화합물 분획물과 안토시아닌 색소 분획물의 혼합물에서 지방 축적 저해 활성이 현저히 증진되면서 상승효과를 나타낸다. 페놀성화합물 분획물과 안토시아닌 색소 분획물의 혼합비율은 지방 축적 억제 상승효과를 위하여 1 : 9 내지 8 : 2 중량비가 바람직하다.
본 발명은 자색고구마 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증 및 고트리글리세라이드혈증으로 구성되는 질환으로부터 선택되는 어느 하나의 질환 예방 및 치료용 의약 조성물을 제공한다.
본 발명의 의약 조성물은, 의약 총 중량에 대하여 상기 자색고구마 추출물을 0.1 내지 50% 중량(고형분 기준)으로 포함한다. 그러나 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니고, 환자의 상태 및 질환의 종류 및 진행 정도에 따라 변할 수 있다.
본 발명의 의약 조성물은 의약품의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 의약 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 의약에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 의약 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 자색고구마 추출물 고형분을 기준으로 1일 0.01 mg/kg 내지 10 g/kg으로, 바람직하게는 1 mg/kg 내지 1 g/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 의약 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 자색고구마 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증 및 고트리글리세라이드혈증 등의 질환 개선용 건강기능식품으로 다양하게 이용될 수 있다. 본 발명의 자색고구마 추출물을 유효성분으로 포함하는 건강기능식품은 각종 식품류 예를 들어, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 분말, 과립, 정제, 캡슐 등의 형태로 사용할 수 있다.
본 발명의 자색고구마 추출물이 건강기능식품에 포함될 때 그 양은 건조물 또는 고형인 경우 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 음료인 경우 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 10 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다.
본 발명의 건강기능식품이 음료 형태로 제조되는 경우 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 자색고구마 추출물을 함유하는 것 외에 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등의 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등)) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 음료 100 ㎖당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.
상기 외에 본 발명의 건강기능식품으로 사용되는 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 건강기능식품으로 사용되는 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명의 조성물은 식용으로 사용하는 자색고구마의 추출물로 독성 및 부작용이 거의 없이 예방 또는 치료 목적으로 장기간 복용 시에도 안심하고 사용할 수 있다.
이하, 본 발명을 제조예, 실험예 및 제제예를 통하여 보다 상세히 설명한다. 하기 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 예시적인 것일 뿐 이에 의해 본 발명의 기술적 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다.
제조예 1: 자색고구마 물추출물의 제조
수확 후 1개월 이내의 신자미 품종의 자색고구마를 1 cm 두께로 절단한 후, 자색고구마 중량 4배의 물로 90 ℃, 60분간 추출하고, 추출물을 25 ℃로 냉각시킨 후 여과하여 여액과 잔사를 분리하여 얻어진 추출 여액은 냉각흡입기가 장착된 진공농축기를 사용하여 35℃에서 감압 농축하여 농축물을 얻고, 농축물을 냉동진공건조기를 사용하여 자색고구마 물추출물 분말을 제조하였다.
제조예 2: 자색고구마 물추출물로부터 분획의 제조
상기 제조예1 에서 얻어진 자색고구마 물추출물 분말 100 g을 물에 녹여, 원심분리를 실시하여 얻어진 상등액을 ODS(octadecyl silica) C18 컬럼에 통과시키고, 물(0.5 중량% 트리플로로아세트산 함유)로 충분히 세척하여 수용해성 당류를 제거한 후, 에틸아세테이트를 통과시켜 페놀성화합물 분획물을 얻었다. 상기 페놀성화합물 분획물 520 nm에서 흡광도가 0.1 미만으로 투명한 액이었고, 냉각흡입기가 장착된 진공농축기를 사용하여 35℃에서 감압 농축하여 농축물을 얻고, 농축물을 냉동진공건조기를 사용하여 건조하여 페놀성화합물 분획물(EtOAc 획분) 분말 2.5 g을 얻었다.
상기 페놀성화합물 분획물을 얻은 후 ODS C18 컬럼에 95중량%의 에탄올 수용액(0.5 중량% 트리플로로아세트산 함유)을 통과시켜 520 nm에서 적색으로 발색하는 안토시아닌 색소 분획물을 얻었다. 상기 분획물을 페놀성화합물 분획물과 동일한 방식으로 농축 및 건조하여 안토시아닌 색소 분획물(EtOH 획분) 분말 4 g을 얻었다.
실험예 1: 3T3-L1을 이용한 지방축적 억제 효과
마우스 배아에서 유래된 3T3-L1 아지방 세포는 항비만 효과 확인을 위한 생체 외 실험에서 가장 많이 이용되고 있는 세포로서 4.5g/L, 10% 우태혈청, 페니실린 및 스트렙토마이신(100㎍/㎕㎖ penicillin and 100㎍/㎕㎖ streptomycin in 0.85% saline), 1% 100 μM 소디움 파루베이트를 함유한 DMEM으로 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였다. 3T3-L1 아지방 세포의 지방세포로의 유도는 100% 합류(confluent)시키고서, 이틀 후 100 μM 3-이소부틸-1-메틸잔신, 250 μM 덱사메타손, 170 μM 인슐린을 함유한 MDI 배지로 유도하였으며, 3일 후에 MDI 배지는 10% 우태혈청과 170 nM 인슐린을 함유한 DMEM배지로 각 실험 날짜까지 이틀에 한번 교환하였다.
제조예 1의 시료와 제조예 2의 색소를 함유한 EtOH 획분(안토시아닌 색소 분획물)과 색소를 함유하지 않은 EtOAc 획분(페놀성화합물 분획물), 그리고 EtOH 획분과 EtOAc 획분을 동량으로 혼합한 시료를 각각 일정량씩 MDI 배지에 첨가하여(0일째), 3T3-L1 아지방 세포의 지방 세포로의 분화를 유도하였고 7일 째 되는 날 오일레드-O 용액으로 세포의 지방을 염색시키고 100% 이소프로판올로 탈색시켜 500 nm에서 흡광도를 측정한 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1에 나타난 것과 같이 제조예 1의 자색고구마 물 추출물에서 안토시아닌 색소를 함유한 분획물을 분리한 결과, 제조예 2의 EtOH 획분은 제조예 1에 비해 지방 축적 억제 활성에 있어서 오히려 효과가 저해됨을 확인하였다. 이로부터 자색고구마 추출물의 지방 축적 저해 활성은 색소 분획물만의 효과가 아닐 가능성이 제시되었다. 따라서 제조예 2의 EtOAc 분획과 제조예 2의 EtOH 획분을 비교한 결과 EtOAc 분획과 EtOH 분획은 유사한 수준의 동등한 지방 축적 억제 활성을 나타내었고, 이들 각각은 제조예 1의 추출물에 비해 낮은 지방 축적 억제활성을 나타내었다.
이로부터 페놀성화합물 분획물(EtOAc 분획)과 안토시아닌 색소 분획물(EtOH)을 혼합하여 다시 지방 축적 억제 활성을 살펴본 결과 제조예 1의 자색고구마 추출물과 유사한 수준으로 지방 축적 억제 활성의 상승효과를 나타냄을 확인하게 되어, 페놀성화합물 분획물에 포함된 폴리페놀류 등의 유효성분과 안토시아닌 색소 분획물에 포함된 안토시아닌 색소 등의 유효성분이 결합되었을 때 지방 축적 억제에 있어서 증진된 상승효과를 나타냄을 확인하였다.
이 후의 실험은 EtOAc 분획과 EtOH 분획을 모두 포함하는 분획 전의 자색고구마 물추출물을 이용하여 실시하였다.
실험예 2: 고지방식이 마우스에서의 항비만 효과
5주령의 수컷 C57BL/6J mice를 3 그룹, 즉 음성대조군: 일반식이(normal diet control(NC)), 양성 대조군: 고지방식이(positive control(PC)), 고지방식이에 제조예 1의 자색고구마 물추출물 200 mg/kg 첨가한 실험군(PSP 200)으로 나누어 8주 동안 구강 투여하고, 각 실험군 당 8마리를 사용하였다. 도2 에 실험 과정의 개략도를 나타내었다.
마우스의 체중의 변화를 살펴본 결과, 고지방식이에 의해 체중이 현저히 증가되었으나, 제조예 1을 투여한 경우 마우스의 체중이 현저히 감소함을 확인할 수 있었다(도 3).
마우스의 지방 축적 정도를 살펴본 결과, 고지방식이에 의해 피하지방이 현저히 증가하였음을 확인할 수 있고, 제조예1을 투여한 경우 피하지방의 양이 현저히 감소했음을 확인할 수 있었다(도 4).
마우스의 혈중 트리글리세라이드 함량을 살펴본 결과, 고지방식이에 의해 혈중 트리글리세라이드 함량이 현저히 증가하였다가, 제조예1을 투여한 경우 일반식이와 같은 수준으로 트리글리세라이드 함량이 현저히 감소했음을 확인할 수 있었다(도 5).
마우스의 혈중 총 콜레스테롤 함량을 살펴본 결과, 고지방식이에 의해 혈중 총 콜레스테롤 함량이 현저히 증가하였다가, 제조예1을 투여한 경우 현저히 감소했음을 확인할 수 있었다(도 6).
마우스의 혈중 leptin 농도를 살펴본 결과, 고지방식이에 의해 혈중 leptin 농도가 현저히 증가하였다가, 제조예1을 투여한 경우 혈중 leptin 농도가 현저히 감소했음을 확인할 수 있었다(도 7).
하기에 본 발명의 자색고구마 추출물을 함유하는 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1. 산제의 제조(단위: 중량%)
제조예 1 또는 2의 자색고구마 추출물 66.0
유당 34.0
상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예 2. 정제의 제조(단위: 중량%)
제조예 1 또는 2의 자색고구마 추출물 33.0
유당 33.0
옥수수전분 33.3
스테아린산 마그네슘 0.7
상기의 성분을 혼합한 후 통상의 정제 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예 3. 선식의 제조(단위: 중량%)
현미 40%, 보리 30%, 율무 20%, 알파미분 10%를 배전한 후 분쇄기로 입도 110메쉬의 곡물류 분말을 만든다. 검정콩 40%, 검정깨 30%, 들깨 30%를 배전한 후 분쇄기로 입도 110메쉬의 종실류 분말을 만든다. 상기 곡물류 75%, 종실류 20% 및 제조예 1 또는 2의 자색고구마 추출물 분말 5%를 배합후 과립화하여 선식을 제조한다.
제제예 4. 츄잉검의 제조(단위: 중량%)
껌 베이스 20%, 설탕 76%, 향료 1.5% 및 물 2%와 제조예 1 또는 2의 자색고구마 추출물 분말 0.5%를 배합하여 통상의 방법으로 츄잉껌을 제조한다.
제제예 5. 음료의 제조(단위: 중량%)
꿀 5중량%, 과당 3%, 염산리보플라빈나트륨 0.0001%, 염산피리독신 0.0001%, 및 물 91.9998%와 제조예 1의 제조예 1 또는 2의 자색고구마 추출물 분말 1%를 배합하여 통상의 방법으로 건강 음료를 제조한다.

Claims (7)

  1. 삭제
  2. 삭제
  3. 삭제
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  5. 삭제
  6. 자색고구마 열수추출물 또는 탄소수 2 ~ 4의 저급 알코올 수용액의 추출물을 흡착수지 크로마토그래피 컬럼에 주입한 후, 상기 컬럼에 물을 통과시켜 수용해성 물질을 제거하고 에틸아세테이트로 용출시킨, 자색고구마 추출물에서 안토시아닌 색소를 제거한 비색소 분획물을 유효성분으로 함유하는 지방 축적 억제를 통한 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증 및 고트리글리세라이드혈증으로 구성되는 질환으로부터 선택되는 어느 하나의 질환 예방 및 치료용 의약 조성물.
  7. 제 6 항에 있어서, 상기 흡착수지는 옥타데실 실리카(octadecyl silica) C18 수지 또는 엠벌라이트 XAD-7 수지인 것을 특징으로 하는 지방 축적 억제를 통한 비만, 고지질혈증, 고콜레스테롤혈증 및 고트리글리세라이드혈증으로 구성되는 질환으로부터 선택되는 어느 하나의 질환 예방 및 치료용 의약 조성물.
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