KR101328470B1

KR101328470B1 - 골관절염 치료 방법 및 조성물

Info

Publication number: KR101328470B1
Application number: KR1020077030130A
Authority: KR
Inventors: 데이비드 디. 와델
Original assignee: 카로신 파마, 인코포레이티드
Priority date: 2005-05-25
Filing date: 2006-05-04
Publication date: 2013-11-13
Also published as: WO2006127249A1; ES2396976T3; IL187531A0; IL187531A; JP2013018793A; EP1890727A1; JP5240925B2; CA2613434A1; AU2006249552A1; KR20080056690A; AU2006249552B2; JP2009506980A; CA2613434C; EP1890727B1

Abstract

본 발명은 이온-채널 조절제에 의해 골관절염을 치료하는 방법 및 조성물에 관한 것이다. 이온-채널 조절제는 단독으로, 또는 예컨대 점도 보충제 및 스테로이드와 같은 주입가능한 약제를 포함하는 제한적이지 않은 다른 골관절염 치료제와 조합하여 사용된다. 하나 이상의 이온-채널 조절제 및 하나 이상의 골관절염 치료제를 포함하는 조성물도 기재되어 있다.

Description

골관절염 치료 방법 및 조성물{METHOD AND COMPOSITION FOR TREATING OSTEOARTHRITIS}

본 발명은 체조직내 통증 및 염증의 치료에 관한 것이다. 특히, 본 발명 이온-채널 조절제를 이용한 골관절염의 치료 방법 및 조성물에 관한 것이다.

골관절염은 연골 및 뼈에 걸리는 퇴행성 관절 질환이다. 골관절염은 특히 노인들에게 흔하고, 일반적으로 신체의 한쪽 관절에 영향을 미친다. 골관절염에 걸리면, 통증, 부종 및 관절 운동 기능의 상실을 초래하면서, 연골이 파손되고 마모된다. 보다 상세한 내용은 본 발명의 참고문헌[Osteoarthritis, National Institute of Arthritis and Musculoskeletal and Skin Diseases, National Institutes of Health, NIH Publication No. 02-4617, July, 2002 ]에 기재되어 있다.

류머티스성 관절염이 관절에 나타났을 때, 주로 활액막에 영향을 미친다. 류머티스성 관절염은 골관절염보다 더 젊은 나이에 시작되고, 일반적으로 관절 양쪽에 나타나며, 가끔 질병, 피로, 및 열 증상을 일으킨다. 보다 상세한 내용은 본 발명의 참고문헌[Rheumatoid Arthritis, National Institute of Arthritis and Musculoskeletal and Skin Diseases, National Institutes of Health, N3[Eta] Publication No. 04-4179, May, 2004]에 기재되어 있다.

염증은 물리적, 화학적 또는 생물학적 약제에 의해 야기되는 손상 또는 비정상 자극에 반응하여 감염된 혈관 및 인접 조직에서 일어나는 세포학적 및 화학반응의 동적 복합체로 이루어진 기본 생물학적 과정이다. 염증과정은 1) 국부 조직 반응 및 이로 인한 형태학적 변화; 2) 유해 물질의 파괴 및 제거; 및 3) 회복 및 치유 반응을 포함한다. 염증의 소위 "주요 증상"은 홍조, 열(온기), 부종, 통증 및 기능 감소 또는 기능 상실이다. 이러한 모든 증상은 특정한 경우에 관찰될 수 있으나, 어느 것도 언제나 필수적으로 나타나는 증상은 아니다. 본 명세서에 있어서, 염증을 수반하는 질환은 "염증 질환"으로 지칭한다.

시토킨으로 알려진 단백질은 염증의 발병 및 유지의 중요한 인자이다. 활액 내층 세포(synovial lining cell), 연골 세포, 그리고 다른 유형의 세포에 의해 생성되는 시토킨은, 세포 성장, 및 세포에 의해 만들어지는 단백질의 성질 및 정도를 포함하여, 무수한 생물학적 반응을 조절한다. 시토킨은 인터페론(IFNs), 집락자극인자(colony stimulating 인자 (CSFs)), 인터로이킨 (ILs), 및 종양괴사인자(tumor necrosis 인자 (TNFs))를 포함한다. 염증성 시토킨 (IL-I, IL-8, TNF)의 존재는 점착 분자의 발현, 2차 염증성 매개체의 생성 (프로스타글란딘, 류코트리엔), 및 성장 인자의 생성을 포함하여, 일련의 복합 세포성 및 분자성 현상을 개시하는 것으로 알려져 있다.

관절염은 활액 조직 및 막을 포함하는 관절의 염증이 특징인 염증성 질환이다. 골관절염 (비후성 또는 퇴행성 관절염), 류머티스성 관절염, 감염성 관절염 [결핵, 라임병(Lyme desease), 류머티스성 열 등], 화농성 관절염, 연소성 관절염, 및 통풍성 관절염을 포함하여, 한정되지 않는 여러 유형의 관절염이 있다. 관절염 및 다른 염증성 상태에서, IL-I, IL-8, 및 TNF의 조직 레벨이 상승하였음이 발견되었다.

골관절염에 있어서, 관절을 형성하는 뼈의 끝 부분을 감싸는 연골은, 다양한 효소, 특히 여러 염증 유발성 시토킨, 특히 IL-I 및 TNF에 의한 자극에 대한 반응으로, 활액 내층 세포에 의해 관절 활액유로 분비되는 매트릭스 금속단백자극분해효소(matrix metallo단백질ases (MMP))의 작용으로 서서히 분해된다. MMP에 의한 연골의 파괴는 염증성 반응이 멈추지 않게 하고, 골관절염과 관련한 관절 통증을 일으킨다. 더욱 상세한 내용은 본 발명의 참고문헌["Biochemistry and Metabolism of Articular Cartilage in Osteoarthritis", HJ. Mankin and K.D. Brant, in Osteoarthritis: Diagnosis and Medical/Surgical Management, 2nd Ed., R. W. Moskowitz, D. S. Howell, V.M. Goldberg, 및 HJ. Mankin, W.B. Saunders Co., Philadelphia (1992)]에 기재되어 있다.

이온 채널은 세포막 내에 위치한 당단백질 구조로서, 이온, 특히 1가 및 2가 양이온 및 음이온이 막을 통과할 수 있게 하는 활액 세포 및 연골 세포를 포함한다. 이온 채널에는 칼슘-이온 채널, 나트륨-이온 채널, 칼륨-이온 채널, 염소-이온 채널, 양이온-이온 채널, 음이온-이온 채널, 결합(connexon) 채널 및 비-선택성 이온 채널이 포함되나, 제한적인 것은 아니다.

이온-채널 조절제는 특정 이온의 농도가 세포 내에서 더 큰지 또는 세포 외에서 더 큰지 여부 및 세포의 내외에 존재하는 전위차에 따라, 특정 이온의 세포 및 세포 기관으로의 출입을 변경하는, 일반적으로 성질상 화학 물질인 공지의 시약들이다. 농도차와 전위차의 결합 효과는 소위 전기화학 기울기로 지칭한다. 이온 채널의 게이트가 열리는 경우, 이온은 예컨대, 화학적 이온-채널 조절제에 의해 저지되지 않는 한, 그 전기화학 기울기 아래로 흐른다. 발생하게 될 이온 유동을 감소시키는 이온-채널 조절제를 "이온-채널 차단제"로 지칭한다. 발생하게 될 이온 유동을 증가시키는 이온-채널 조절제를 "이온-채널 활성제"로 지칭한다.

이온-채널 조절제는 편두통뿐 아니라 심방 세동, 심실상성빈맥, 비후성 심근증 및 고혈압과 같은 심장병을 포함하는 여러 증상의 치료, 뇌손상 방지, 및 다른 질병을 치료하는 데, 흔히 사용되고 있다. 특정 이온-채널 조절제 및 관련 화합물이 염증성 질환의 치료에 유용하다는 것이 기술분야에 공지되어 있다. 예컨대, 참조문헌[Thorpe 등 (미국 특허 제6,416,758호)]은 두 가지 VEGF 수용체 중 하나(VEGFR2)에만 결합하는 VEGF를 선택적으로 억제하기 위한 항체 결합 킷(antibody conjugate kit)에 대하여 기재하고 있다. 항체는 혈관형성을 억제하고, 종양 퇴화를 유발하며, 혈관형성이 중요 인자가 되는 모든 증상(관절염 포함)의 치료에 사용될 수 있다. 상기 참조문헌(Thorpe 등)은 CAI, 액틴 재건, 내피 세포 이동 및 콜라겐 IV 상의 분산을 방지하는 칼슘-채널 조절제로서 작용하는 혈관형성 억제제를 언급하고 있다.

참조문헌[Stamler 등 (미국 특허 제6,359, 182호)]은 공지의 칼슘 채널 조절제 (베라파밀, 딜티아젬 등)을 포함하여, 광범위한 약제로부터 유도되는 C 니트로조 화합물에 대하여 기재하고 있다. 이러한 유도체는 이완 및 혈소판 억제 효과를 제공하며, NO 공여 기능으로 인하여, 관절염 치료에 유용하다고 한다.

참조문헌[Schonharting 등 (미국 특허 제6,337,325호)]는 포스포디에스테라제 억제 작용을 하는 화합물, 및 생물학적으로 유효한 세포 내 Ca²⁺ 함량을 감소시키는 화합물(예를 들어, 베라파밀)을 포함하는 복합 조제를 제공한다. 이러한 복합조제는 류머티스성 관절염 치료에 사용될 수 있다.

참조문헌[Medford 등 (미국 특허 제5,811,449호)]는 아테롬성 동맥 경화 및 VCAM 1["혈관 세포 점착 분자(vascular cell adhesion molecule ) 1"]에 의해 매개되는 다른 심장 혈관 염증성 질환의 치료방법을 기재하고 있다. 질환의 예로는 류머티스성 관절염 및 골관절염이 있다. 상기 방법에 사용되는 디티오카르복실레이트 및 다른 화합물로는 칼슘-채널 조절제(베라파밀, 디티아젬, 니페디핀)을 포함하여, 다수의 제약학적 활성 화합물이 있다.

염증성 질환과 관련하여 통증 완화를 위한 공지의 특정 조성물은 이온-채널 조절제 및 관련 화합물을 포함할 수 있다. 예컨대, 참조문헌[Breault (미국 특허 제6,365,603호 및 제6,100,258호)]은 E-타입 프로스타글란딘의 통증 증가 효과를 억제하는 데 유용한 방향족/페닐 화합물을 기재하고 있다. 이 화합물은 류머티스성 관절염, 골관절염, 및 골다공증에 관련된 통증을 치료하는 데 유용하며, 예를 들어, 칼슘-채널 조절제와 같은 부가적인 약제가 포함될 수 있다.

참조문헌[Mak (미국 특허 제6,190,691호)]은 TNF 생성에 의해 매개되는 몇 가지 염증성 증상(류머티스성 관절염 포함)을 치료하는 방법을 기재하고 있다. 치료는 베라파밀, 니카르디핀 또는 이스라디핀과 같은 칼슘-채널 조절제와 같은 임의의 수의 화합물을 치료학적으로 유효량 투여함으로써 행해진다. 상기 참조문헌(Mak)은 류머티스성 관절염 치료를 위하여 다량의 (+)-베라파밀(lOmg/mL 용액 내 20-40 mg)을 관절에 직접 주입하는 것에 대하여 개시하고 있다.

골관절염 치료에 대하여는 알려져 있지 않으며, 이의 치료를 목적으로 하는 지속적인 임상적 노력은 통증의 증상 완화를 지향하여 이루어지고 있다. 종래의 치료법으로는 스테로이드, 항생제, 글루코사민, 콘드로이틴, 면역조절제, 및 페니실라민의 사용뿐 아니라, 진통제 또는 비-스테로이드계 항염증제 (아스피린, 이부프로펜, 나프록센, COX2 억제제 예를 들어, CELEBREX 및 VIOXX 등), 코르티코스테로이드의 관절간 주입 및 비변형 또는 변형 히알루로난 (소위 점도 보충 치료)에 의한 치료가 있다. 예를 들어, 일시적, 국부 통증 완화를 위한 열의 적용과 같은 전통적인 치료로는 일부 환자에게 도움이 되며, 적절한 운동 및 물리적 치료 프로그램이 관절의 운동성을 유지하는 데 도움이 될 수 있다. 심한 경우 관절 대체 수술이 권유될 수 있다.

일반적으로, 상기와 같은 관절염 및 염증성 질환을 위한 광범위한 약물치료 및 치료양식의 유용성에도 불구하고, 골관절염에 완전히 만족스러운 것으로 밝혀지지 않았다. 특히, 골관절염, 예컨대 MMP의 생성과 같은 골관절염의 근본적 원인을 대상으로 하고, 골관절염의 진행(뼈 부식, 연골 부식, 염증, 부종, 비정상 신혈관형성 등의 징후로 나타나는)을 감소, 제거 또는 늦추는 혁신적인 치료법에 대한 필요성이 있다.

발명의 간단한 요약

본 발명의 주요 관점 하에서 광범위하게 언급하면, 본 발명은 이온 채널이라 칭하는 세포막 내에 박혀있는 구조물을 통하여 세포 내외 이온의 이동을 조정할 수 있는 특정 시약을 사용하여, 골관절염과 관련한 통증, 염증 및 기능저하를 치료하기 위한 방법 및 조성물을 제공한다. 앞서 간단히 언급한 바와 같이, 이러한 시약을 본 명세서에서 "이온-채널 조절제"라 칭한다.

본 발명에 따른 일 실시 태양은 치료학상으로 유효량의 하나 이상의 이온-채널 조절제를, 단독 또는 다른 골관절염 치료제와 조합으로, 영향받은 관절에 직접 투여, 바람직하게는 관절의 밀폐 캐비티("관절 내 주입")에 직접 주입하는 골관절염 치료 방법을 포함한다.

본 발명에 따른 방법은 직접적으로 골관절염과 관련하여 조직 파괴 및 통증을 야기하는 근본적인 세포 과정을 다루고 있다. 일 실시태양에 있어서, 본 발명은 유효량의 이온-채널 조절제; 즉, 이온-채널 조절제의 과량 복용으로부터 야기되는 임의의 바람직하지 못한 부작용, 예를 들어, 조직사 또는 손상 관절 부종 등을 일으키지 않으면서, 임의의 또는 모든 골관절염 증상을 감소시키기에 충분한 량의 이온-채널 조절제를 활액 조직에 투여하는 과정을 포함한다. 본 발명은 골관절염과 관련한 주요 염증성 시토킨인 시토킨 IL- 1에 의한 세포 신호를 방해하고, 이로 인해 MMP 레벨 낮추며, 이에 상응하게 연골 파괴 및 이로 인한 통증을 낮추게 하기 위한 수단을 제공한다. 이러한 방법은 필수적으로 IL-1의 생성에는 영향을 미치지 않으며, 오히려 세포 표면의 수용체에 IL-1이 결합하는 지점에서 MMP의 합성을 방해함으로써 그 결과를 변경하는 것으로 여겨지며, 이는 합성 과정에서의 제 1 단계로서 당업자에게 공지되어 있다. 이러한 방법은 예컨대, 체계적인 염증성 질환 류머티스성 관절염의 치료(전술한 참조문헌(Mak) 참고)에 있어서, 시토킨 TNF의 생성을 방해하는 수단으로서, 특정 이온-채널 조절제의 사용에 대비된다.

본 발명에 있어서 유용한 이온-채널 조절제에는 칼슘-채널 조절제, 나트륨-채널 조절제, 칼륨-채널 조절제, 염소-채널 조절제, 양이온-이온 채널 조절제, 음이온-이온 채널 조절제, 비-선택성 이온 채널 조절제 및 결합-채널 조절제 (즉, 코넥신 43으로 알려진 단백질로 이루어진 활액 세포 내의 결합을 통해 이온 및 분자의 이동을 조절하는 화학 약제)이 포함되며, 제한적인 것은 아니다.

이온-채널 조절제를 투여하는 바람직한 방법은 관절염이 있는 관절의 밀폐 캐비티로 하나 이상의 이온-채널 조절제를 포함하는 제약학적으로 수용가능한 조성물을 직접적으로 주입하는 것이다. 이온-채널 조절제는 단독 또는 다른 의약약품, 바람직하게 다른 골관절염을 치료하기 위하여 사용될 수 있는 다른 화학 약품(본 명세서에서, "골관절염 치료제"라 칭함)과 함께 투여될 수 있다. 골관절염 치료제에는 제약학적으로 수용가능한 점도 보충제, 스테로이드계 및 비-스테로이드계 항-염증성 약제, 글루코사민, 콘드로이틴 등이 있으며, 제한적인 것은 아니다.

다른 실시 태양에 있어서, 본 발명은 본 발명에 따라 골관절염의 치료에 유용한 신규 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 조성물은 하나 이상의 이온-채널 조절제 및 하나 이상의 다른 골관절염 치료제를 포함한다. 본 발명의 바람직한 일 실시 태양에 있어서, 조성물은 하나 이상의 이온- 채널 조절제 및 하나 이상의 주입가능한 골관절염 치료제, 가장 바람직하게는 점도 보충제를 포함한다. 본 발명에 따른 조성물은 또한 다른 물질, 예를 들어, 충진제, 안정화제, 피복제, 착색제 및 풍미제, 방부제, 방향제, 및 기술분야의 공지의 다른 첨가제를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 다양한 실시 태양에 있어서, 본 발명은 이용자에게 수개의 치료 형태를 제공한다. 본 발명에 따른 치료 방법은 유효량의 하나 이상의 이온-채널 조절제, 바람직하게는 하나 이상의 이러한 화합물을 포함하는 제약학적으로 수용가능한 조성물을 포함하는 조성물의 형태로 투여하는 과정을 포함한다. 택일적으로, 본 발명에 따른 치료 방법은 하나 이상의 이온-채널 조절제를 하나 이상의 다른 골관절염 치료제와 함께, 바람직하게는 이온-채널 조절제 및 다른 골관절염 치료제를 모두 포함하는 조성물의 형태로 투여하는 과정을 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 치료 방법은 개별 환자의 필요에 따라 용이하게 맞추어 질 수 있으며, 물리 치료를 포함하고 제한적이지 않은 다른 치료 형태, 국부 통증을 완화하는 치료 (가온, 마사지, 도포제의 도포 등), 및 무기력증을 저하하고, 통증을 완화하며 환자 생명의 질적 향상에 도움을 주는 다른 의약품을 대신하거나, 또는 이와 병행하여 적용될 수 있다.

이하의 본 발명에 따른 바람직한 실시예를 통하여, 본 발명에 따른 다른 특징 및 이점들이 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게 명백하게 될 것이다.

발명의 상세한 설명

본 발명은 이온-채널 조절제를 사용하여 골관절염과 관련한 염증, 통증 및 조직 파괴를 치료하는 방법 및 조성물을 제공한다.

이론에 의해 제한하는 것은 아니나, 관절 내의 염증성 시토킨의 존재는 특정 세포 이온, 예컨대, 칼슘, 나트륨, 칼륨, 염소 이온 등을 관절 내 세포, 특히 활액 내층 세포로 출입할 수 있도록 하여, 소위 세포 신호 또는 세포 전달을 개시하는 것으로 간주된다. 본 명세서에 있어 사용된 용어들은 대체가능하다. 신호 처리 과정에서, 단백질 키나아제 C의 활성화, 세포간 전달에 있어서의 변화, 및 세포에 의한 단백질 발현의 변경을 포함하여, 다른 현상들이 발생한다. 만일 이러한 과정이 적절히 조절되지 않을 경우, 결국 통증, 염증, 비정상 신혈관 형성, 뼈 및 연골 부식, 기능저하를 포함하는 증상으로 특징 되는 골관절염이 유발되며, 이는 궁극적으로, 영향받은 관절의 퇴화를 유발한다.

특정 이온, 특히 칼슘 및 나트륨 이온의 유입은 MMP를 분비하는 세포의 능력에 매우 중요한 것으로 밝혀졌다. 상기한 바와 같이, MMP는 골관절염과 관련하여 관절 통증을 일으키는 관절 연골의 파괴의 주원인이 되는 것으로 간주된다. 일반적으로 MMP 분비의 원인이 되는 가장 중요한 인자는 인터로이킨-1(IL-I)이다[참고문헌("Biochemistry and Metabolism of Articular Cartilage in Osteoarthritis", HJ. Mankin 및 K.D. Brant) 참조].

관절 유액 내의 MMP 레벨은 IL-1에 의해 조절되며, 그 조절곤란이 골관절염의 발현을 매개하는 특정 MMP의 예로는, 콜라게나제-1로도 알려진 MMP-I; 젤라티나제로 A로도 알려진 MMP-2; 스트로멜리신-1로 알려진 MMP-3; 콜라게나제-2로 알려진 MMP-8; 및 콜라게나제-3로 알려진 MMP-13이 있다. 골관절염을 앓고 있는 환자로부터 얻어진 활액 조직에 의해 생성된 MMP 활성화 레벨이 골관절염을 가지지 않는 환자로부터의 증가된 레벨 보다 더 크다[참고문헌("Increased Intercellular Communication through Gap Junctions May Contribute to Progression of Osteoarthritis", A.A. Marino, D.D, Waddell, O.V. Kolomytkin, W.D. Meek., R. Wolf, K.K. Sadasivan, 및 J.A. Albright; Clinical Orthopaedics & Related Research 422:224-232 (2004)) 참조].

이온-채널 조절제, 특히 예를 들어, 베라파밀 및 니페디핀과 같은 칼슘-채널 조절제는 활액 세포에 대한 IL-1의 영향을 방해할 수 있다는 것이 발견되었다[참고문헌("Interleukin IB Switches Electrophysiological States of Synovial Fibroblasts"; O. V. Kolomytkin, A.A. Marino, K.K. Sadasivan, R.E. Wolf, and J. A. Albright, American Journal of Physiology, 273 (Regulatory Integrative Comp. Physiol. 42):R1822-Rl828 (1997)) 참조]. 이론에 의해 제한하는 것은 아니나, 본 발명에 따른 이온-채널 조절제에 의해 골관절염을 치료하는 유익한 효과의 원인이 되는 메카니즘은, 이를 억제하지 않으면 MMP 레벨의 상승(계속해서, 골관절염과 관련한 만성 염증, 연골 파괴, 통증 및 관절 운동성의 상실을 유발함)을 일으키는 IL-1의 염증 유발 효과를 억제하는 능력을 포함하는 것으로 간주한다.

이온-채널 조절제의 투여를 통해, 막 이온 전류(제한적인 것은 아니나, 막 칼슘 이온 전류 포함) 레벨에서 신호 경로를 조절하거나 차단하는 능력은 임상적 이점으로 간주된다. 예컨대, 칼슘 이온이 영향받은 활액 세포로 들어오면, 염증 및 연골 파괴에 이르게 되는 세포 내 현상을 방지하여, 칼슘 신호 경로가 파괴된다.

상기한 바와 같이, 이온-채널 조절제는 당해 기술분야에서 이온 유동에 대한 영향에 따라, 이온-채널 차단제 또는 이온-채널 활성제로 지칭된다. 이들 용어들이 동일한 화학적 약제에 대하여 사용될 수 있으나, 본 명세서에 있어서는, "이온- 채널 조절제"라는 용어가 보다 정확한 표현이 된다. 채널을 통과하는 이온이 과정(예컨대, MMP 제조)을 자극할 수 있으나, 먼저 위치에 전개된 이온 채널은 과정을 촉진하기 위한 것이기 때문에, 이들 과정은 언제나 정상적 과정이다. 병리학은 조절의 레벨에 대한 것으로, 다시 말해, 골관절염은 채널을 통해 통과하는 이온의 량이 부적절할 때 나타난다. 따라서, 본 발명은 이러한 채널을 차단하여, 막을 통과하는 이온의 량을 적게 하고 정상에 보다 더 가깝게 함으로써 골관절염을 치료하는 것이라 할 수 있다. 반드시 적은 이온이 정상이고, 많은 이온이 비정상인 것은 아니며, 어떤 경우에는 많은 이온이 정상이고 적은 이온이 비정상인 경우도 있다. 이 경우, 본 발명은 이온채널을 "차단"함으로써 골관절염을 치료하는 것이 아니고, 이를 "자극"함으로써 치료하게 된다. 따라서, 용어 "이온- 채널 조절제"는 양 기능을 수행하는 화학 약제를 모두 포함하는 것이다.

이온-채널 조절제는 편두통뿐 아니라 심방 세동, 심실상성빈맥, 비후성 심근증 및 고혈압과 같은 심장병을 포함하는 여러 증상의 치료, 뇌손상 방지, 및 다른 질병을 치료하는 데, 흔히 사용되고 있다. 이러한 화학 약제는 당해 의료기술 분야에 널리 알려져 있으며, 모든 공지 및 앞으로 발견될 이온-채널 조절제가 본 발명에 있어 유용할 것임이 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게 잘 알려져 있다.

이온-채널 조절제의 구체적인 예로는 칼슘- 채널 조절제, 나트륨-채널 조절제, 칼륨-채널 조절제, 염소- 채널 조절제, 양이온-채널 조절제, 음이온-채널 조절제, 결합-채널 조절제 및 비-선택성 이온-채널 조절제, 그리고 채널에 대한 특정 항체가 있으나 제한적인 것은 아니다. 명칭에서 알 수 있는 바와 같이, 칼슘-, 나트륨-, 칼륨-, 염소-, 양이온- 및 음이온- 채널 조절제는 세포 막내의 이온 채널을 통해 각각 칼슘 이온, 나트륨 이온, 칼륨 이온, 염소 이온, 음이온 및 양이온의 이동을 조절한다. 비-선택성 이온 채널이 음이온 및 양이온의 임의의 조합이 세포막을 통해 통과하도록 하며, 비-선택성 이온-채널 조절제들이 이온의 이동을 조절하는 이온 채널이다. 결합-채널 조절제는 결합을 통해 이온의 이동을 조절한다. 결합은 활액 조직 내에 존재하고, 관절염이 있는 관절에서 그 량이 증가하는 것으로 알려져 있는 단백질 코넥신 43으로 이루어진 이온 채널 부류이다. 분자량이 300 미만인 모든 유형의 이온은 결합을 통해 통과할 수 있는 것으로 간주된다. 코넥신 43의 아미노 서열은 P 17302로 정의되는 범용 단백질 공급원(Universal Protein Resource)에 나열되어 있다. "채널에 대한 특정 항체"는 항원 결정자에 항체가 결합하는 경우 이온 채널의 기능을 차단할 수 있는 이온-채널 단백질의 항원 결정자에 대한 항체를 의미한다.

대표적인 칼슘-채널 조절제의 예로는 암로디핀, 베프리딜, 디티아젬 아염소산염, 펠로디핀, 갈로파밀, 이스라디핀, 니카르디핀, 니페디핀, 니모디핀, 니트렌디핀, 베라파밀, 및 이들의 혼합물, 그리고 채널에 대한 구체적인 항체가 있다. 대표적인 나트륨 채널 조절제의 예로는 퀴니딘, 엔카이니드, 멕시틸, 디소피라미드, 프로카인아미드, 테트로도톡신, 및 그 혼합물, 그리고 채널에 대한 구체적인 항체가 있다. 대표적인 칼륨 채널 조절제의 예로는 데디사밀, 글리벤클라미드, 도페틸리드, 아미오다론, 아지밀리드, 톨부타미드, 프로판올롤 및 이들의 혼합물, 그리고 채널에 대한 구체적인 항체가 있다. 대표적인 염소 채널 조절제의 예로는 5-니트로-2-(3-페닐프로필아미노)벤조산, 클로로톡신, 피크로톡신, 및 9-안트라센카르복실산 및 그 혼합물, 그리고 채널에 대한 구체적인 항체가 있다. 본 발명에 적합하게 사용될 수 있는 칼슘- 및 나트륨-채널 조절제의 광범위한 예가 상술한 참고문헌[Mak, 미국 특허 제6,190,691호]에 나열되어 있다.

대표적인 결합-채널 조절제의 예로는 린데인, 옥탄올, 18[알파]-글리시르헤틴산, 칼슘-이온 농도, pH, 모사 펩티드, 및 특정 항체가 있다. 특정 모사 펩티드가 결합을 차단하는 데 사용될 수 있으며, 따라서 본 발명에 따른 적합한 결합 채널 조절제로서 사용될 수 있다. 예컨대, 합성 트리데카펩티드 VCYDKSFPISHVR (잔기수 63-75), 및 운데카펩티드 SRPTEKTIFII (잔기수 204-214)가 참고문헌[Leybaert, L., Braet, K., Vandamme, W., Cabooter, L., Martin, P.E.M. and Evans, W.H., "Connexin channels, connexin mimetic peptide and ATP release". Cell Comrnun. Adhesion. 10:251-257, 2003]에 기재된 바와 같이 코넥신 43을 차단하는 데 사용될 수 있다. 2 이상의 아미노산으로 이루어진 모사 펩티드는 코넥신 43의 아미노산 서열의 임의의 부분을 적용하여 유사하게 형성될 수 있으며, 이러한 펩티드는 결합을 통한 이온의 이동을 조절함에 있어서, 다른 것들에 비하여 보다 효과적이다. 코넥신 43의 막 또는 세포 외 도메인 내에 위치한 아미노산으로 이루어진 펩티드가 특히 유효한 결합 채널 조절제이다.

또한, 결합은 결합의 막 또는 세포 외 도메인에 대하여 유도된 항체에 의해 조절될 수 있음을 예측할 수 있다. 이러한 경우, 합성 펩티드는 펩티드에 위치한 항원요소에 대한 항체로 이루어진 면역반응을 이끌어낼 목적으로 주입될 수 있다. 항체를 수득하고 정화하는 데 적합한 과정은 참고문헌[Harlow, E. and Lane, D., "Antibodies: A Laboratory Manual." Woodbury, NY: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1988]에 기재되어 있는 바와 같다.

본 발명의 일 실시태양에 있어서, 골관절염 치료 방법은 유효량의 하나 이상의 이온-채널 조절제를 관절에 직접 투여하는 과정을 포함한다. 이온-채널 조절제의 투여는 바람직하게 하나 이상의 이온-채널 조절제를 포함하는 조성물을 관절염이 있는 관절로 직접 (관절 내) 주입함으로써 행해진다. 관절 내 주입은 이온- 채널 조절제 투여를 위한 다른 방법과 상이하며, 다른 투여 기술에서 요구되는 높은 이온- 채널 조절제의 농도로 인하여 일어날 수 있는 바람직하지 못한 부작용을 발생시키는 위험 없이, 영향받는 혈액조직에 이온- 채널 조절제를 공급하기에 생물학적으로 충분한 농도가 되도록 한다. 주입 기술은 당해 기술분야에 공지되어 있다. 예컨대, 무릎 관절 주입에 대하여는 참고문헌["Viscosupplementation Under Fluoroscopic Control," D. Waddell, D. Estey, D. C. Bricker, 및 A. Marsala, American Journal of Medicine in Sports, 4:237-241 and 249, 2001]에 유용하게 기재되어 있다.

본 발명에 따른 일 실시 태양에 있어서, 유효량의 하나 이상의 이온- 채널 조절제는 골관절염이 있는 관절에 제약학적으로 수용가능한 조성물의 형태로 주입된다. "유효량"은 이온-채널 조절제의 과다복용으로 인한 바람직하지 못한 부작용, 예를 들어, 조직사 또는 손상, 관절 부종 등을 일으키지 않으면서, 염증, 통증, 경화 및/또는 기능저하와 같은 치료될 관절에 있어서의 골관절염 증상의 임의의 일부 또는 모든 증상을 감소시키기에 충분한 량을 의미한다. 유효량이 어느 정도인지는 이온 채널, 투여방법 및 치료될 관절에 따라 달라진다. 일부 실시 태양에 있어서, 이온- 채널 조절제의 조합, 예컨대, 칼슘-채널 조절제 및 나트륨-채널 조절제가 효과적일 것이다.

본 발명에 따라 관절 내 주입법을 이용하여 골관절염을 치료하기 위한 이온-채널 조절제의 유효량은 0.00001-2.0 mg이며, 생리 식염수 또는 신체에 주입되기에 적합한 다른 부형제에 용해 또는 현탁시킨 형태가 바람직하다. 바람직한 조성물은 0.00001-2.0 mg/mL의 하나 이상의 이온- 채널 조절제를 포함한다. 전형적으로 한번에 1-4 mL의 조성물이 관절에 주입될 수 있다. 관절 내 주입에 의해 전체 투여량이 2.0 mg 보다 많은 량의 이온-채널 조절제를 관절에 투여하는 경우, 혈액 조직에 대한 적절한 연구에 근거하여, 그 정도 레벨에서는 관절 조직에 대한 이온-채널 조절제의 독성 영향으로 인하여 바람직하지 않은 부작용을 발생하는 것으로 나타났다. 본 발명에 사용된 이온-채널 조절제의 유효량은 관절 내 주입에 의해 류머티스성 관절염 치료를 위해 유효한 것으로 선행 기술에 알려진 (+)-베라파밀의 량의 정도 보다 적은 량이다. 참고문헌[Mak 미국 특허 번호 제6,190,691호, col. 83, lines 35-54] 참조.

본 발명의 다른 실시 태양에 있어서, 하나 이상의 이온-채널 조절제는 다른 골관절염 치료제와 조합으로, 별도의 조성물 또는 동일 조성물로 투여될 수 있다. 바람직하게, 다른 골관절염 치료제는 주입가능한 조성물, 즉 영향받은 관절(관절 내 주입)로 직접 주입되기에 적합한 조성물이다. 본 발명에 따른 치료 방법은 개별 환자의 필요에 따라 용이하게 맞추어 질 수 있으며, 예로써 물리 치료를 포함하고 제한적이지 않은 다른 치료 형태, 국부 통증을 완화하는 치료 (가온, 마사지, 도포제의 도포 등), 및 무기력증을 저하하고, 통증을 완화하며 환자 생명의 질적 향상에 도움을 주는 다른 의약품을 대신하거나, 또는 이와 병행하여 적용될 수 있다.

따라서, 본 발명에 따른 치료 방법의 예로는 하나 이상의 이온-채널 조절제를 포함하는 조성물의 관절 내 주입과 그에 후속하여 예컨대, 점도 보충제, 스테로이드 또는 다른 주입가능한 골관절염 치료제와 같은 다른 골관절염 치료제의 관절 내 주입; 이온-채널 조절제 조성물의 관절 내 주입과 그에 후속하여 예를 들어, 비-스테로이드계 항염증성 약제와 같은 다른 골관절염 치료제 구강 또는 정맥주사 투여; 하나 이상의 이온-채널 조절제 및 하나 이상의 점도 보충제, 스테로이드 또는 다른 주입가능한 골관절염 치료제를 포함하는 단일 조성물의 관절 내 주입 등이 있다.

본 발명의 일 실시 태양에 따른 치료 조성물은 하나 이상의 이온-채널 조절제 및 하나 이상의 다른 골관절염 치료제를 포함한다. 이온-채널 조절제 및 다른 골관절염 치료제의 각 농도는 영향받은 관절에 각 성분이 유효량이 되기에 충분한 농도이다. 바람직하게, 조성물은 0.00001-2.0 mg/mL의 이온-채널 조절제 및 0.01-25mg/mL의 다른 골관절염 치료제를 포함한다.

본 발명의 다양한 실시 태양에 있어서, 조성물은 본 발명에 따른 방법에 의한 관절 내 주입(주사)에 적합하며, 이온-채널 조절제 및 다른 골관절염 치료제 모두 "주입가능(injectable)"하다. 본 명세서에서 "주입가능하다"는 관절 내 주입에 적합한 유형의 임의의 골관절염 치료제를 의미한다. 본 발명의 일 실시태양에 있어서, 주입가능한 다른 골관절염 치료제는 하나 이상의 코르티코스테로이드 예를 들어, 글루코코르티코이드이다. 제한적이지 않은 하나의 구체적 예로서, 본 발명에 따른 조성물은 1-25 mg/mL의 주입가능한 스테로이드 골관절염 치료제 메틸프레드니솔론 아세테이트를 포함할 수 있다.

본 발명의 다른 실시 태양에 있어서, 주입가능한 다른 골관절염 치료제는 하나 이상의 점도 보충제를 포함한다. 본 명세서 및 기술분야에 있어서, "점도 보충제"는 관절 내 주입에 의해 관절염이 있는 활액 유체의 쿠션닝 및 윤활을 회복 및/또는 증가시키는 임의의 물질을 지칭한다. 바람직한 점도 보충제에는 힐란, 히알루론산 및 다른 히알루로난 (나트륨 히알루로네이트)화합물이 있으며, 이는 글리코사민글리칸계의 천연 복합당이다. 히알루로난은 특히, Na-글루코로네이트-N-아세틸글루코사민의 반복 이당류 단위를 포함하는 장쇄 중합체이다. 예로서, 상업적으로 이용가능한 히알루로난 점도 보충제로는 신비스크(Synvisc)^ⓡ, 히알간(Hyalgan)^ⓡ, 수파츠(Supartz)^ⓡ, 및 오르토비스크(Orthovisc)^ⓡ가 있다. 제한적이지 않은 하나의 구체적 예로서, 본 발명에 따른 조성물은 1-15 mg/mL의 히알루로논 화합물을 포함한다.

본 발명에 따른 조성물을 포함하는 다른 골관절염 치료제는 또한 임의의 관절염 치료 태양에 사용되는 것, 예를 들어, 구강 투여, 정맥주사 투여 등을 포함할 수 있다. 다른 골관절염 치료제의 예로는 예를 들어, 이부프로펜, 나프록센, 및 COX-2 억제제와 같은 비-스테로이드계 항염증제 (NSAIDS); 예를 들어, 아스피린 및 아세트아미노펜과 같은 진통제; 예컨대, 글루코사민 술페이트 및 글루코사민 염산염과 같은 글루코사민을 포함하는 글리칸; 및 예를 들어, 콘드로이틴 화합물과 같은 프로테오글리칸, 그리고, 여러 다른 공지의 마취제, 스테로이드, 항생제, 면역조절제, 페니실라민 등이 있으나, 제한적인 것은 아니다.

본 발명에 따른 조성물은 또한 특정 다른 물질, 예를 들어, 충진제, 안정화제, 피복제, 착색제, 방부제, 방향제, 및 기술분야에 공지된 다른 첨가제를 포함할 수 있다. 조성물은 액체 또는 겔 유형이 될 수 있으며, 지효성 제형(time-release formulation)으로 제공될 수 있다.

본 발명은 이하의 실시예에 의해 설명될 수 있으나, 제한적인 것은 아니다.

실시예 1

환자 M.L.은 무릎 관절의 골관절염을 앓고 있는 57세의 여성[켈그렌-로렌스 스케일(Kellgren-Lawrence scale) 등급 IV]이다. 통증 및 관절 기능이 통증에 대한 시각적 상사 척도(Visual Analogue Scale, VAS), 및 관절염이 있는 관절의 통증, 기능 및 경화를 평가하는 웨스턴 온타리오 앤드 맥마스터 유니버시티[Western Ontario and McMaster Universities (WOMAC)] 골관절염 인덱스를 사용하여, 치료 직전과 치료 후 수회에 걸쳐 평가되었다. 이들의 임상적 종점의 특성 및 사용에 관한 보다 상세한 사항은 참고문헌["Clinical Development Programs for Drugs, Devices, and Biological Products Intended for the Treatment of Osteoarthritis, U.S. Dept. of Health and Human Services, Food and Drug Administration, July 1999"]에 제공되어 있다.

최초 VAS 및 WOMAC 측정 직후, 환자의 오른쪽 무릎에 하기 기본 주입 과정에 따라, 0.2 mg의 칼슘-채널 조절제 베라파밀을 포함하는 1 mL의 염수가 주입되었다:

환자를 표준 치과용 의자에 앉히고, 무릎을 30-40도 굽히게 한다. 무릎을 무균 베타딘 제제로 처치한다. 에틸클로라이드 스프레이에 의해 플레인 크실로카인을 주입하기 위하여 피부 마취하며, 이는 피부 및 피하 조직으로 주입한다. 임의의 유체가 무릎에 주입되지 않도록 주의를 기울인다. 환자에게 큰 통증은 없을 것이나, 활액 내층을 통해 바늘이 통과할 때 어느 정도의 통증이 있을 것이라는 점을 주의하여야 한다. 효과적인 국부 마취가 이루어지도록 충분한 시간이 지난 후, 슬개골 도면을 얻기 위한 측면 위치 및 경골의 고평부(plateau)를 가지는 대퇴 관절구의 접촉 영역에서 형광 투시법 유닛을 활성화하는 것이 유용하다. 21-게이지 주입 바늘에 대한 삽입 지점은 무릎의 측면도 및 표준 전방측면 관절경검사 포털의 기준 지점을 사용하여 선택된다. 주입 위치는 1 내지 1½ 센티미터에 의해 정상 포털 위치에 근접한다. 이를 가이드로 사용하여, 바늘을 대퇴골 관절구 및 경골 고평부의 앞면 접촉 지점에서의 관절 내 공간 안쪽으로 진행시킨다. 이 지점에서, 연조직을 주입하지 않으면서, 베라파밀의 주입이 자유롭게 허용된다. 상기 과정은 상기 참고문헌["Viscosupplementation Under Fluoroscopic Control" ]에 더욱 상세히 기재되어 있다.

이하 표 1은 주입 후, 여러 시점 전 및 그 시점에서 얻어지는 VAS 및 WOMAC 스코어를 요약한 것이다.

표 1

시간	환자 M.L.의 관절염 스코어
시간	의사 VAS	환자 VAS	WOMAC
주입 전	72	67	57
주입 후 1주	44	43	47
주입 후 2주	20	25	38.5
주입 후 3주	20	33	46
주입 후 8주	20	33	34
주입 후 12주	20	28	41
주입 후 16주	28	34	33
주입 후 20주	15	27	37

표 1에서 알 수 있는 바와 같이, 치료 직전, 환자는 의사 VAS 스코어가 72이며, 환자 VAS 스코어가 67이고, WOMAC 스코어가 57이었다. 주입 1주 후, VAS 스코어가 44 및 43으로, 환자의 통증은 현저히 감소하였으며, WOMAC 스코어가 47로 감소한 것으로부터 알 수 있는 바와 같이 환자의 전반적인 기능이 개선되었다. 환자는 주기적으로 20주까지 후속 주입되었으며, 통증에 있어서 감소하였고 기능 개선이 계속하여 관찰되었다.

실시예 2

환자 O.B.는 왼쪽 무릎에 골관절염을 앓고 있는 73세의 남성[켈그렌-로렌스 스케일 등급 IV]이다. 이하의 표 2에 바나타낸 바와 같이, 치료 전, 환자는 의사 VAS 스코어가 50이며, 환자 VAS 스코어가 46이고, WOMAC 스코어가 30이었다. 실시 예 1 에서와 같이, 0.2 mg의 베라파밀을 포함하는 1 mL의 염수가 주입되었다. 주입 후, VAS 스코어 및 환자의 WOMAC 스코어가 현저히 개선되었다. 이하의 표2에 그 결과를 요약하였다:

표 2

시간	환자 O.B.의 관절염 스코어
시간	의사 VAS	환자 VAS	WOMAC
주입 전	50	46	30
주입 후 1주	12	28	12
주입 후 2주	11	25	10
주입 후 3주	10	10	6
주입 후 8주	12	17	4

실시예 3

환자 R.R.는 왼쪽 무릎 관절에 골관절염을 앓고 있는 41세의 남성[켈그렌-로렌스 스케일 등급 II]이다. 치료 전, 환자의 주 불평은 통증이었으며, 환자 VAS 스코어가 55이었다. 실시예 1에서와 동일한 기본 주입 과정을 적용하여 1 mL의 염수내 0.5 mg의 베라파밀로 치료 후, 환자의 통증이 감소하였으며, 데이터가 수집되는 전체 기간 동안 낮게 유지되었다. 이하의 표3에 그 결과를 요약하였다:

표 3

시간	환자 R.R.의 관절염 스코어
시간	의사 VAS	환자 VAS	WOMAC
주입 전	35	55	17
주입 후 1주	10	12	8
주입 후 2주	6	26	7
주입 후 3주	10	16	6
주입 후 8주	11	20	6
주입 후 12주	12	20	6
주입 후 16주	10	10	6

실시예 4

환자 A.W.는 처음 의사 진료를 받은 56세의 여성이며, 의사 VAS 스코어 및 환자 VAS 스코어가 각각 50 및 59이며, WOMAC 스코어가 43으로 제한된 관절기능을 가지고 있었다. 실시예 1 에서와 동일한 기본 주입 과정을 적용하여 1 mL의 염수내 0.2 mg의 베라파밀로 치료 후, 이하의 표 4에 나타낸 바와 같이, 환자의 임상학적 상태가 현저히 개선되었다. 치료 전, 환자는 의사 VAS 스코어가 50이며, 환자 VAS 스코어가 46이고, WOMAC 스코어가 30이었다. 실시예 1에서와 같이, 0.2 mg의 베라파밀을 포함하는 1 mL의 염수가 주입되었다. 주입 후, VAS 스코어 및 환자의 WOMAC 스코어가 현저히 개선되었다:

표 4

시간	환자 A.W.의 관절염 스코어
시간	의사 VAS	환자 VAS	WOMAC
주입 전	50	59	43
주입 후 1주	0	5	12
주입 후 2주	7	3	7
주입 후 3주	8	6	13
주입 후 8주	2	2	15

MMP의 파괴 작용 및 이러한 파괴 활동을 차단하기에 잠재적으로 유용한 약제가, 무릎 관절로부터 얻어지는 활액 조직, 조직이 MMP를 분비하게 하는 친염증성 약제, 및 MMP 생성을 감소시키기에 유용한 것으로 평가되는 약제를 포함하는 모델 시스템에서 연구될 수 있다. 이러한 분석을 수행하기 위한 적절한 과정이 참고문헌[Kolomytkin, O. V., Marino, A.A., Waddell, D.D., Mathis, J.M., Wolf, R.E., Sadasivan, K.K. & Albright, J.A., "IL-l[beta]-induced production of metalloproteinases by synovial cells depends on gap-junction conductance during the early stage of signal transduction. " Am. J. Physiol: Cell Physiol. 282:C1254-C1260, 2002]에 보다 상세히 기재되어 있다.

상기의 과정에 따른 이하의 시험 결과는 본 발명에 따라, 활액 조직에 이온-채널 조절제를 투여하여, 치료되는 활액조직에 의한 MMP의 생성 및 분비를 현저히 감소시키고 있음을 확인시켜 주었다. 상술한 바와 같이, 이러한 MMP의 감소는 예컨대, 실시예 1 내지 4와 같은 본 발명에 따른 방법에 의해 얻어지는 통증 및 기능의 개선을 유도하는 것으로 간주된다.

실시예 5

약 20 mg의 활액 조직이 골관절염이 있는 78세의 여성[켈그렌-로렌스 스케일 등급 IV]으로 부터 얻어진 겨우, 상기 과정을 이용하여, 칼슘-채널 조절제 베라파밀가 0.005mg/mL의 농도(전체 부피 1 mL)로 적용된 경우, 표준 인큐베이션 상태하에서 생성되는 MMP의 량이 60% 감소하였으며; 베라파밀의 농도가 0.05mg/mL(전체 부피 동일)로 증가된 경우, MMP의 활성이 63% 감소하였다. 다른 환자, 61 세의 여성의 경우, 베라파밀 농도가 0.005mg/mL인 경우(전체 부피 1 mL) MMP 활성이 63%까지 감소하고, 베라파밀 농도가 0.05mg/mL인 경우(전체 부피 1 mL) 77% 까지 감소하였다. 골관절염을 앓고 있는 69세의 남성 및 70세의 여성[켈그렌-로렌스 스케일 등급 IV]으로 부터 얻어진 활액 조직을 사용하여, 유사한 결과를 얻었다.

실시예 6

베라파밀 대신 칼슘-채널 조절제 니페디핀을 사용하는 것을 제외하고 상기한 바와 동일한 과정을 사용하여 실험이 수행되었다. 골관절염[켈그렌-로렌스 스케일 등급 IV]을 가지는 73세의 여성으로부터 얻어진 약 20 mg의 활액 조직에 의해 표준 상태에서 생성된 MMP의 량이 0.015 mg/mL의 니페디핀 존재(전체 부피 1 mL)하에서, 69%까지 감소하였으며; 니페디핀 농도가 0.03 mg/mL(전체 부피 1 mL)인 경우, 73%까지 감소하였음이 밝혀졌다. 골관절염을 앓고 있는 59세의 여성[켈그렌-로렌스 스케일 등급 IV]으로부터의 활액 조직을 이용한 반복 실험에 있어서, 표준 상태에서 생성된 MMP의 활성이 0.015 mg/mL 및 0.03 mg/mL(전체 부피 1 mL)의 니페디핀 존재하에서, 각각 64% 및 71% 까지 감소하였다. 50세의 남성 및 68세의 여성[켈그렌-로렌스 스케일 등급 IV]으로 부터의 활액 조직을 이용하여, 유사한 결과가 얻어졌다.

실시예 7

칼슘-채널 조절제 대신 나트륨-채널 조절제 프로카인아미드를 사용하는 것을 제외하고 상기한 바와 동일한 과정을 사용하여 실험이 수행되었다. 골관절염[켈그렌-로렌스 스케일 등급 IV]을 가지는 77세의 남성으로부터 얻어진 약 20 mg의 활액조직에 의해 표준 상태에서 생성된 MMP의 량이 0.01 mg/mL의 농도(전체 부피 1 mL)하에서, 67%까지 감소하였다.

실시예 8

나트륨-채널 조절제 테트로도톡신을 사용하여 동일한 과정을 사용하여 실험이 수행되었다. 골관절염[켈그렌-로렌스 스케일 등급 IV]을 가지는 64세의 남성으로부터 얻어진 약 20 mg의 활액조직에 의해 표준 상태에서 생성된 MMP의 량이 0.00002 mg/mL의 농도(전체 부피 1 mL)하에서, 100%까지 감소하였다.

트리판 블루 배제 시험(trypan blue exclusion test)가 흔히 세포가 살았는지 죽었는지 평가하는 데 사용된다. 시험은 세포 환경에 적정량의 트리판 블루 염료를 가하는 과정으로 이루어진다. 세포가 건강한 경우 염료를 배제할 수 있으나, 손상되거나 죽은 경우에는 염료가 세포에 들어가 색깔을 청색으로 염색시킨다. 트리판 블루 배제 시험에 의해, 이하의 실시예 9에서 기해하는 바와 같이, 이온-채널 조절제가 류머티스성 관절염을 치료하기 위하여 선행기술에 개시된 농도로 골관절염 치료를 위해 사용되는 경우, 세포에 유해하고 치명적인 영향을 주는 것으로 밝혀졌다.

실시예 9

인간 무릎 관절로부터 얻어진 약 20 mg의 활액 조직을, 10 mg/mL의 이온-채널 조절제 베라파밀(전체 부피 1 mL)에 노출하고, 트리판 블루 배제 시험으로 평가하였다. 조직 내의 활액 내층 세포가 죽은 것으로 밝혀졌다. 일부 세포사는 수 시간의 노출 후 일어났으며, 조직 내 모든 세포가 12-16시간 동안의 노출 후 사멸하였다. 유사한 시험이 여러 농도의 상이한 이온- 채널 조절제를 사용하여 부가적인 인간 활액 조직 샘플에 대해 수행되었다.

상기한 시험에 의해, 베라파밀, 니페디핀, 프로카인아미드, 및 본 발명에 따른 조성물에 사용되는 다른 이온-채널 조절제의 농도는 2.0 mg/mL 이하이어야 하며, 전체 이온- 채널 차단제의 투여량은 2.0 mg 이하로 되어야 함이 발견되었다. 본 발명에 있어 실제 사용된 매우 낮은 농도 및 투여량은 종래 기술에 기재된 농도 및 투여량, 예컨대, 참고문헌[Mak, 류머티스성 관절염 치료를 위한 미국 특허 제6,190,691호]에 기재된 바와 같은 10 mg/mL 수용액 내의 20-40 mg의 베라파밀에서 발생할 것으로 예상할 수 있는 조직적 부작용을 완전히 방지할 수 있는 추가의 탁월한 이점을 갖는 것이다. .

상기의 기재는 본 발명의 요지만을 설명하기 위한 것이다. 또한, 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명에 대하여 무수한 변형 및 변경이 가능할 것이므로, 본 발명을 본 명세서의 상세한 기재 및 예시에 한정하는 것은 아니며, 따라서, 본 발명의 범주 내의 모든 가능한 적합한 변형 및 균등물은 본 발명의 범주로 분류되어 본 발명에 내에 편입된다. 따라서, 첨부되는 특허청구범위에 의해 한정되는 본 발명의 사상 및 범주를 벗어나지 않는 범위에서 본 명세서에 기재된 바람직한 실시태양에 대한 변경이 가능하고 및 균등물로 대체할 수 있을 것임은 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게 명백할 것이다.

Claims

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유효량의 베라파밀; 및 유효량의 하나 이상의 다른 골관절염 치료제를 포함하는 골관절염(osteoarthritis) 치료 조성물.
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제 11 항에 있어서, 다른 골관절염 치료제가 점도 보충제, 코르티코스테로이드, 스테로이드계 및 비-스테로이드계 항염증제, 진통제, 글루코사민 및 다른 글리칸, 콘드로이틴 및 다른 프로테오글리칸, 마취제, 스테로이드, 항생제, 면역조절제, 및 페니실라민로 이루어진 군에서 선택된 조성물.
제 13 항에 있어서, 다른 골관절염 치료제가 주입가능한 조성물.
제 14 항에 있어서, 주입가능한 다른 골관절염 치료제가 힐란 및 히알루로난(나트륨 히알루로네이트) 분자를 포함하는 다른 화합물로 이루어진 군에서 선택되는 점도 보충제인 조성물.
제 14 항에 있어서, 주입가능한 다른 골관절염 치료제가 스테로이드인 조성물.
제 11 항에 있어서, 베라파밀의 농도가 0.00001-2.0 mg/mL인 조성물.
제 17 항에 있어서, 다른 골관절염 치료제의 농도가 0.01-25 mg/mL인 조성물.
제 18 항에 있어서, 다른 골관절염 치료제가 1-15 mg/ml 농도의 히알루로논 화합물인 조성물.
제 18 항에 있어서, 다른 골관절염 치료제가 1-25 mg/mL 농도의 메틸프레드니솔론 아세테이트인 조성물.
제 11 항에 있어서, 충진제, 안정화제, 피복제, 착색제, 방부제, 방향제, 및/또는 다른 첨가제를 더 포함하는 조성물.
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유효량의 베라파밀을 포함하며, 골관절염이 있는 관절의 밀폐 캐비티(closed cavity)에 주입되는, 골관절염 치료 조성물.
제 23 항에 있어서, 유효량의 베라파밀이 1-4 mL의 조성물 내에 전달되는 0.00001-2.0 mg의 베라파밀인 조성물.
제 23 항에 있어서, 0.00001-2.0 mg/mL의 베라파밀을 포함하는 조성물이 무릎 관절에 주입되는 조성물.