KR101225664B1 - 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법에 관한 것으로서, 혈액속에서 혈소판이 풍부한 혈장의 성분을 항온 응고시켜서 피브린을 생성하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법은 분리키트에 혈액을 주입하는 단계와, 항온장치에서 온도를 섭씨 35 내지 40도로 유지하면서 분리키트의 원심분리를 수행하는 단계 및 분리키트로부터 생성된 피브린을 추출하는 단계를 포함하여 구성된다.

Description

피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법{Fibrin forming method using platelet rich plasma clot}

본 발명은 혈액을 원심분리할 때에 생겨나는 혈소판이 풍부한 혈장을 항온에서 원심분리하는 과정에서 응고시켜서 피브린을 생성하는 방법에 관한 것이다.

인체에서 혈액을 채취하여 그 안에 있는 혈소판, 혈장 등을 분리하여 피부재생에 효과적인 혈소판을 이용하여 피부질활에 폭넓게 활용하는 시술이 확산되는 추세에 있다.

이러한 시술은 혈액을 이용하는 것이기 때문에 인체에 거부반응이 거의 없어서 부작용이 적고 환자들의 거부감이 적은 장점이 있다.

피브린은 혈액응고반응의 최종산물로 생성되는 경단백질의 일종으로서, 탄력성 있는 섬유상 중합체로서 혈구(血球)에 휘감겨 혈병(血餠)을 발생시킨다. 섬유소라고도 하며, 그 아미노산 배열이 결정되어 있다. 피브리노겐에 단백질분해효소 트롬빈이 작용하여 피브리노펩티드 A 및 B가 유리되어 생성된다. 혈장(血漿) 속에서는 다시 다른 혈액응고인자의 작용으로 피브린 분자간에 다리걸침이 형성되어 섬유상 중합체가 안정된다. 혈장에서 생긴 해면상의 피브린은 수술에 의한 절단 부위의 충전용으로 이용되어 왔다.

피브린이 보습제 또는 피부재생에 뛰어난 효과를 가지므로 피브린을 생성하여 미용 또는 치료에 사용하고자 하는 시도가 증가하고 있다.

따라서 위생적이면서 최대한 효과적으로 피브린을 생성하는 방법에 대한 요구과 관심이 커지고 있다.

본 발명은 혈액속에 포함된 혈소판이 풍부한 혈장인 피알피를 적혈구와 분리시킨 상태에서 피알피를 항온 응고시킴으로써 피브린을 생성하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 본 발명의 목적은 분리키트에 채취된 혈액을 주입하는 단계와, 항온장치에서 온도를 섭씨 35 내지 40도로 유지하면서 분리키트의 원심분리를 수행하는 단계 및 분리키트로부터 생성된 피브린을 추출하는 단계를 포함하는 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법에 의해 달성된다.

상기 목적을 달성하기 위해, 분리키트를 원심분리하는 단계는 분리키트를 3000rpm의 속도로 9분간 원심분리를 수행하는 것이 바람직하다.

또한 상기 목적을 달성하기 위해, 분리키트의 상부수용공간의 하단은 역원추형으로 형성되어 응고된 피브린이 폐쇄봉의 하단에 부착되는 길이가 길어짐으로써 피브린이 폐쇄봉에 견고하게 부착되도록 하였다.

또한 상기 목적을 달성하기 위해, 분리키트를 원심분리하는 단계의 이전에 분리키트의 하부수용공간의 부피를 분리키트에 주입된 혈액에 포함된 적혈구의 양에 맞게 조절하는 단계를 더 포함시켰다.

본 발명에 따른 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법에 의하면 피알피층을 적혈구층과 분리시키면서 피알피가 응고되도록 함으로써 피브린을 생성한다. 즉 적혈구가 섞이지 않은 피알피층만으로 피브린을 생성할 수 있는 효과가 있다.

또한 분리키트의 상부수용공간에 형성되는 응고된 피브린이 분리키트의 패쇄봉의 하단에 부착되어 응고되므로 분리키트의 상부마개를 열어서 들어올리면 응고된 피브린을 부수지 않고 전체 덩어리를 쉽게 꺼낼 수 있다.

도 1은 본 발명에 따른 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법에 사용되는 새롭게 고안된 분리키트를 도시한 사시도이고,
도 2는 본 발명에 따른 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법에 사용되는 새롭게 고안된 분리키트를 도시한 단면도이고,
도 3은 도 2의 분리키트의 원심분리를 수행할 때에 병목부의 통로를 열어둔 상태에서 원심분리를 수행하여 하부수용공간에 적혈구의 층이 내려가고 상부수용공간에 피알피층이 위치한 상태를 도시한 사용상태도이고,
도 4는 본 발명에 따른 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법에서 폐쇄봉의 하단에 응고된 피브린이 딸려서 나오는 것을 도시한 사용상태도이고,
도 5는 본 발명에 따른 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법의 각 단계의 흐름을 도시한 흐름도이고,
도 6은 본 발명에 따른 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법에서 튜브형 시험관을 사용하여 원심분리를 수행한 이후 응고된 피브린이 시험관 내벽에 부착된 것을 도시한 사용상태도이다.

이하에서는 첨부된 도면을 참조하여 본 발명에 따른 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법에 대하여 설명한다.

본 발명에 따른 피알피 클롯(platelet rich plasma(PRP) clot)을 이용한 피브린 생성방법을 설명하기에 앞서 상기 피브린 생성방법에 사용되는 분리키트의 대하여 설명한다.

도 1은 본 발명에 따른 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법에 사용되는 새롭게 고안된 분리키트(1)를 도시한 사시도이고, 도 2는 본 발명에 따른 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법에 사용되는 새롭게 고안된 분리키트(1)를 도시한 단면도이다. 도 1 및 도 2에 도시된 바와 같이, 분리키트(1)는 상부와 하부에 각각 수용공간을 갖는 본체부(10)와 본체부(10)의 상부공간을 덮는 상부덮개(20)와 본체부(10)의 하부공간을 덮는 하부덮개(30)를 포함하여 구성된다.

본체부(10)는 대략 원통형의 상부수용공간(12)과 하부수용공간(13)을 가지며, 상부수용공간(12)과 하부수용공간(13)은 폭이 좁은 통로(16)가 형성된 병목부(15)에 의해 연결된다. 상부수용공간(12)은 하단에 인접한 부분이 아래방향으로 갈수록 폭이 좁아지고 하부수용공간(13)은 상단에 인접한 부분이 위방향으로 갈수록 폭이 좁아진다.

상부덮개(20)는 본체부(10)의 상부에 나사결합되어 본체부(10)의 상부를 덮는 마개이다. 상부덮개(20)의 저면 중앙에는 본체부(10)의 병목부(15)의 통로(16)를 막을 수 있도록 아래방향으로 연장된 폐쇄봉(21)이 형성된다. 상부덮개(20)에는 2개의 노출공(23)들이 형성되고 각각의 노출공(23)은 노출공마개(24)를 구비한다.

하부덮개(30)는 본체부(10)의 하부에 나사결합되며, 하부덮개(30)의 하단에는 본체부(10)의 하부수용공간(13)으로 삽입될 수 있는 하부덮개(30)의 하단에서 위로 돌출되도록 원형관구조의 지지부(32)가 형성된다. 지지부(32)의 상단에는 본체부(10)의 하부수용공간(13)을 밀폐하는 패킹부(33)가 형성된다.

본체부(10)에 상부덮개(20)가 결합된 상태에서, 상부덮개(20)를 돌려서 본체부(10)의 위로 상부덮개(20)를 상승시키면 상부덮개(20)에 형성된 폐쇄봉(21)이 상부덮개(20)와 함께 상승하면서 병목부(15)의 통로(16)는 열려지게 된다. 상부덮개(20)를 반대방향으로 돌려서 상부덮개(20)를 하강시키면 폐쇄봉(21)이 함께 하강하여 병목부(15)의 통로(16)를 막게된다.

본체부(10)에 하부덮개(30)가 결합된 상태에서 하부덮개(30)에 형성된 패킹부(33)는 본체부(10)의 하부수용공간(13)을 아래방향에서 밀폐하고 있다. 하부덮개(30)를 회전시켜서 하부덮개(30)를 본체부(10)에 대하여 상승시키면 하부덮개(30)와 함께 패킹부(33)가 상승하여 본체부(10)의 하부수용공간(13)의 부피를 감소시킨다. 하부덮개(30)를 반대방향으로 회전시키면 하부덮개(30)와 함께 패킹부(33)가 하강하여 본체부(10)의 하부수용공간(13)의 부피가 증가한다. 즉 하부덮개(30)에 의해 본체부(10)의 하부수용공간(13)의 부피가 조절된다.

이하에서는 본 발명에 따른 분리키트(1)를 사용하여 수행되는 본 발명에 따른 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법에 대하여 상세히 설명한다.

도 5는 본 발명에 따른 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법의 각 단계의 흐름을 도시한 흐름도이다.

도 5에 도시된 바와 같이, 먼저 주사기를 사용하여 혈액을 채취한다(S1).

혈액을 체취한 주사기의 주사바늘이 형성된 부분을 분리키트(1)의 상부덮개(20)의 하나의 노출공(23)을 열고서 그 노출공(23)에 밀착시킨 상태에서 다른 하나의 노출공(23)을 열고 주사기로 분리키트(1)의 내부로 혈액을 주입한다(S2).

이 때 하나의 노출공(23)에 주사바늘부분을 밀착시키는 것은 주사기에서 분출되는 혈액이 분리키트(1)의 외부로 잘못 새어나가는 것을 방지하기 위한 것이며, 다른 하나의 노출공(23)을 열어주는 것은 혈액이 분리키트(1)의 내부로 주입될 때에 분리키트(1)의 내부에 있던 공기가 빠져나가서 혈액이 원활하게 분리키트(1) 내부로 주입되도록 하기 위한 것이다.

다음으로 분리키트(1)의 노출공(23)을 하나만 열어놓은 상태에서 항온장치의 내부에서 온도를 약 37℃로 유지한 상태에서 원심분리기를 사용하여 3000rpm의 속도로 약 9분간 분리키트(1)의 혈액에 대한 항온원심분리를 수행한다(S3).

원심분리시 항온장치 내부의 온도를 약 37℃로 유지하는 이유는 피브린 자체가 섬유성 단백질이기 때문에, 원심분리과정에서 발생할 수 있는 단백질 변성을 방지하기 위해 체내(인체)와 유사한 온도를 유지하는 것이다. 또한 원심분리를 통해 피브린을 생성하는 과정에서 혈장에 존재하는 단백질의 활성을 유지시키는 역할을 한다.

이 때 노출공(23)을 하나 열어놓는 이유는 원심분리의 과정에서 상부수용공간(12)의 혈액이 아래로 내려가려할 때에 위쪽에 진공이 발생하면 혈액이 아래로 내려가기 어려우므로 공기가 흡입되고 빠져나갈 수 있도록 함으로써 항온원심분리의 과정에서 적혈구가 분리키트(1)의 아래로 원활하게 내려가도록 하기 위한 것이다.

도 3에 도시된 바와 같이, 항온원심분리의 과정에서는 항응고제가 첨가되지 않은 혈액에서 적혈구(6)가 분리키트(1)의 하부수용공간(13)으로 내려가고 병목부(15)의 위쪽에는 혈소판이 풍부한 혈장성분인 PRP(Platelet Rich Plasma)(7)가 위치하면서 응고하게 된다. 즉 PRP 덩어리(clot)가 생겨나게 된다.

특히 분리키트(1)의 상부수용공간(12)은 상부덮개(20)의 폐쇄봉(21)이 분리키트(1)의 상부수용공간(12)의 하단인 병목부(15)까지 연장되어 있기 때문에, 상부수용공간(12)에서 피알피가 응집되어 생성되는 피브린은 폐쇄봉(21)의 하단부를 둘러싼 상태에서 응고되게 된다.

도 4에 도시된 바와 같이, 항온 원심분리가 완료되면 분리키트(1)의 상부덮개(20)를 열어서 응고된 피브린(8)을 추출한다(S4). 응고된 피브린(8)은 폐쇄봉(21)의 하단을 둘러싼 상태에서 응고되어 있기 때문에 분리키트(1)의 상부덮개(20)를 열어서 들어올리면 폐쇄봉(21)에 응고되어 부착된 피브린이 함께 딸려서 나오게 된다.

이렇게 생성되어 추출된 피브린은 보습제 등의 용도로 사용될 수 있다.

이하에서는 튜브형 시험관을 사용하는 본 발명에 따른 피알피 클롯을 이용한 피브린의 생성방법에 대하여 설명한다.

주사기를 통해서 채취한 혈액을 튜브형 시험관(50)에 주입한다.

항온장치의 내부에서 온도를 약 37℃로 유지한 상태에서 원심분리기를 사용하여 3000rpm의 속도로 약 9분간 튜브형 시험관(50)의 혈액에 대한 항온원심분리를 수행한다. 혈액의 항온원심분리의 과정에서 적혈구(6)는 튜브형 시험관(50)의 아래로 내려가고 피알피(PRP)(7)가 적혈구(6)의 위쪽에 위치하며 피알피(PRP)(7)의 일부가 응고되어 피브린(8)이 생성된다.

항온원심분리가 완료된 튜브형 시험관(50)에서 피브린을 추출한다. 도 6에 도시된 바와 같이, 이 때 튜브형 시험관(50)에 생성된 피브린은 시험관(50)의 내벽에 응고되어 부착되기 때문에 핀셋 등을 사용하여 피브린을 쪼개고 부수어서 시험관(50)의 내벽에서 피브린을 떨어뜨린 후 시험관(50)의 내용물을 모두 용기에 쏟아낸 후에 핀셋을 사용하여 피브린 덩어리들을 채취한다.

튜브형 시험관(50)을 사용하여 피브린을 추출하는 방법은 시험관(50)의 내부에 응고되어 부착된 피브린을 쪼개어 부수어서 시험관(50)의 내벽에서 떼어내고, 시험관(50)의 내용물을 모두 쏟아낸 다음에 핀셋으로 부서진 피브린 덩어리들을 채취해야 하므로 분리키트(1)를 사용하는 방식에 비해 작업과정이 느리고 번거로운 단점이 있다.

1 : 분리키트
10 : 본체부
12 : 상부수용공간 13 : 하부수용공간
15 : 병목부 16 : 통로
20 : 상부덮개
21 : 폐쇄봉 23 : 노출공
24 : 노출공마개
30 : 하부덮개
32 : 지지부 33 : 패킹부
50 : 튜브형 시험관

Claims (4)

1. 분리키트에 채취된 혈액을 주입하는 단계;
   항온장치에서 온도를 섭씨 35 내지 40도로 유지하면서 분리키트의 원심분리를 수행하는 단계; 및
   분리키트로부터 생성된 피브린을 추출하는 단계를 포함하는 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법.
   
2. 제1항에 있어서, 분리키트를 원심분리하는 단계는 분리키트를 3000rpm의 속도로 9분간 원심분리를 수행하는 것을 특징으로 하는 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법.
   
3. 제1항에 있어서, 분리키트의 상부수용공간의 하단은 역원추형으로 형성되어 응고된 피브린이 폐쇄봉의 하단에 부착되는 길이가 길어짐으로써 피브린이 폐쇄봉에 견고하게 부착되도록 한 것을 특징으로 하는 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법.
   
4. 제1항에 있어서, 분리키트를 원심분리하는 단계의 이전에 분리키트의 하부수용공간의 부피를 분리키트에 주입된 혈액에 포함된 적혈구의 양에 맞게 조절하는 단계를 더 포함시킨 것을 특징으로 하는 피알피 클롯을 이용한 피브린 생성방법.
   

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