KR101192673B1 - Method for fermentation of mixed grains using fermentation micro-organisms (fm) and mass production of fermented grains - Google Patents

Method for fermentation of mixed grains using fermentation micro-organisms (fm) and mass production of fermented grains Download PDF

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Abstract

PURPOSE: A fermenting method of mixed grains using fermentation microorganisms, and a mass producing method of the fermented grains are provided to enable users to easily intake the grains having high functionality. CONSTITUTION: A fermenting method of mixed grains using fermentation microorganisms comprises the following steps: individually seed culturing Lactobacillus paracasei, Saccharomyces cerevisiae, and Bacillus subtilis in liquid media; inserting 1-3%(v/v) of each culture liquid into a liquid medium containing 0.1-0.5wt% of molasse, and main-culturing the medium at 32-38 deg C for 7-10 days; and mixing 2-20 parts of main cultured liquid by weight with 100 parts of mixed grains by weight including rice, and culturing the mixture at 30-40 deg C for 3-10 days. The mixed grains include brown rice, glutinous barley, glutinous rice, glutinous brown rice, glutinous black rice, and other grains. [Reference numerals] (AA) Non-fermented rice; (BB) Fermented rice; (CC) After settling for 2 days at room temperature; (DD) After settling for 12 days at room temperature

Description

복합유용발효미생물(FM)을 이용한 혼합곡의 발효 방법 및 대량 생산 방법{Method for fermentation of mixed grains using fermentation micro-organisms(FM) and mass production of fermented grains}Method for fermentation of mixed grains using fermentation micro-organisms (フ M) and mass production of fermented grains}

본 발명은 복합유용발효미생물(FM)을 이용한 혼합곡의 발효 방법 및 대량 생산 방법에 관한 것으로, 구체적으로 유산균, 효모 및 바실러스로 혼합곡을 발효하여 발효혼합곡을 제조하는 방법에 관한 것이다.
The present invention relates to a fermentation method and a mass production method of mixed grains using a composite useful fermentation microorganism (FM), and more particularly to a method for producing a fermented mixed grain by fermenting the mixed grains with lactic acid bacteria, yeast and Bacillus.

미생물과 관련된 자연계의 현상은 발효와 부패로 나타나며, 이는 동시에 일어나지 않는다. 발효란 미생물이 유기물을 분해하여 에너지를 얻는 과정으로 이때 인간에게 유용한 물질을 생성하는 현상을 말한다. 미생물의 존재를 알기 이전부터 인류는 이러한 미생물의 도움으로 존재하여 왔으며 이를 적극적으로 활용하여 왔다. 특히, 각종 식품을 보존하기 위한 방법으로 활용하여 왔다.Natural phenomena associated with microorganisms appear as fermentation and decay, which do not occur at the same time. Fermentation is a process in which microorganisms decompose organic materials to obtain energy and produce substances useful to humans at this time. Before knowing the existence of microorganisms, human beings have existed with the help of these microorganisms and have actively used them. In particular, it has been utilized as a method for preserving various foods.

최근에 미생물에 의한 발효식품이 건강에 매우 유용하고 수명에 영향을 미치는 것으로 알려져 선호도가 높아지고 있다. 미생물 발효기술의 활용 범위는 더욱 확대되어 미생물을 식품의 발효에만 이용하는 것이 아니고 화장품의 제조에도 활용하고 있다.Recently, microbial fermented foods are known to be very useful for health and affect the lifespan, and the preference is increasing. The scope of application of microbial fermentation technology has been further expanded, and microorganisms are not only used for fermentation of food but also for the manufacture of cosmetics.

일반적으로 자연발효를 이용하여 제조하는 전통적인 장류나 김치, 막걸리 등과 식물성 천연 발효액 등을 제외하고 대부분의 발효 제품들은 각각의 단종 미생물을 이용하여 발효하는 경우가 많다. 이는 제품의 표준화가 가능하나 그 효능이 떨어진다. 그러나 복합미생물을 이용한 발효는 현장성이 우수하고, 다양하고도 우수한 발효효과를 나타낸다. 따라서 단종 미생물을 이용한 발효제품보다는 복합미생물을 이용한 발효제품의 기능성이 우수하다. 또한 활용 범위도 매우 다양하며 이를 구성하는 미생물 각각을 배양하는 기술은 배양에 관한 일반적 지식을 소유하면 쉽게 배양할 수 있는 통상적인 기술이다. 그러나 각각의 단종 미생물을 이용한 복합미생물의 배양은 특별한 지식과 기술을 요한다.In general, most fermentation products are often fermented using individual microorganisms, with the exception of traditional jangjang, kimchi, makgeolli, and vegetable natural fermentation broth. It is possible to standardize the product but its efficacy is low. However, fermentation using complex microorganisms is excellent in situ and shows various and excellent fermentation effects. Therefore, the functionality of fermentation products using complex microorganisms is superior to that of fermentation products using discontinuous microorganisms. In addition, there is a wide range of applications and the technology for culturing each of the microorganisms constituting it is a common technique that can be easily cultured if you have general knowledge about the culture. However, the cultivation of complex microorganisms using individual microorganisms requires special knowledge and skills.

사람의 중요한 에너지원인 곡류는 껍질을 제거하지 않은 완전 곡물이 가장 좋다. 대부분의 중요한 영양소, 항산화물질, 미네랄 등이 외피에 함유되어 있기 때문이다. 예를 들면 철저히 도정한 백미를 섭취하면 탄수화물만 지나치게 먹게 되어 건강에는 유용하지 않다. 현미에는 외피 및 배아가 부착되어 있어 균형있는 영양 상태가 되어 있는 것이다. 다른 곡물류도 마찬가지다. 외피와 눈이 부착된 곡물류의 섭취가 건강에 유용하다. 이는 일반적으로 많이 알고 있는 사실이지만, 그럼에도 불구하고 대부분의 사람들은 완전곡물의 섭취를 기피한다. 이의 원인으로는 외피가 부착된 곡물은 취반을 해도 거칠어 먹기 힘들고 맛이 없으며 소화가 잘 되지 않기 때문이다. 완전 곡물을 기피하는 생활 습관으로 당뇨병, 비만, 고혈압 등의 생활 습관병이 갈수록 증가하고 있다. 이러한 질병으로 고생하는 사람들은 잡곡을 섭취하려고 노력을 하지만 소화 흡수력이 낮아 그 효과는 적다.Cereals, which are an important source of energy for humans, are best with unshelled whole grains. This is because most of the important nutrients, antioxidants and minerals are contained in the skin. For example, if you consume thoroughly white rice, you will eat too much carbohydrate, which is not good for your health. Brown rice has an outer shell and embryos that are in balanced nutrition. The same is true for other grains. Eating cereals with skin and eyes is useful for your health. This is a common knowledge, but nevertheless, most people avoid eating whole grains. The reason for this is that the grains attached to the outer skin is rough even when cooked, difficult to eat, tasteless and difficult to digest. As a lifestyle that avoids whole grains, lifestyle diseases such as diabetes, obesity, and high blood pressure are increasing. People suffering from these diseases try to eat more grains, but their digestive absorption is less effective.

잡곡류의 섭취 시 다양한 질병 치유 효과가 있는 것으로 보고되어 있다. 율무를 섭취하면 항암활성이 있으며(Chen HH, et al,. Antimutagenic constituents of adlay(Coix lachryma-jobi L. var. ma-yuen Stapf) with potential cancer chemopreventive activity. J Agric Food Chem. 2011 Jun 22;59(12):6444-52), 특히 율피는 유방암세포를 억제한다(Chung CP, et al., Antiproliferative lactams and spiroenone from adlay bran in human breast cancer cell lines. J Agric Food Chem. 2011 Feb 23;59(4):1185-94). 보리, 치커리 및 셀러리 혼합물은 다이어트에 효과가 있으며 지방대사를 조절한다(El-Mageed NM.. Hepatoprotective effect of feeding celery leaves mixed with chicory leaves and barley grains to hypercholesterolemic rats. Pharmacogn Mag. 2011 Apr;7(26):151-6.).Ingestion of grains has been reported to have various disease healing effects. Ingestion of yulmu has anti-cancer activity (Chen HH, et al, Antimutagenic constituents of adlay (Coix lachryma-jobi L. var. Ma-yuen Stapf) with potential cancer chemopreventive activity.J Agric Food Chem. 2011 Jun 22; 59 (12): 6444-52), especially Yulpi, inhibits breast cancer cells (Chung CP, et al., Antiproliferative lactams and spiroenone from adlay bran in human breast cancer cell lines.J Agric Food Chem. 2011 Feb 23; 59 ( 4): 1185-94). Barley, chicory and celery mixtures are effective in dieting and regulate fat metabolism (El-Mageed NM .. Hepatoprotective effect of feeding celery leaves mixed with chicory leaves and barley grains to hypercholesterolemic rats. ): 151-6.).

더욱이 바실러스로 발효된 율무는 지방대사, 항산화 활성, 장내미생물 총의 변화에 영향을 미친다(Wang CY, et al., Influence of dietary supplementation with Bacillus-fermented adlay on lipid metabolism, antioxidant status and intestinal microflora in hamsters. J Sci Food Agric. 2011 Sep;91(12):2271-6). 이는 잡곡 섭취가 매우 중요함을 시사하며 더욱 중요한 것은 발효잡곡이 각종 생리대사, 항산화력 증대, 특히 장내미생물총에 중대한 영향을 미칠 수 있음을 나타낸다는 것이다.Furthermore, Bacillus fermented barley has an effect on fat metabolism, antioxidant activity, and intestinal microflora (Wang CY, et al., Influence of dietary supplementation with Bacillus-fermented adlay on lipid metabolism, antioxidant status and intestinal microflora in hamsters) J Sci Food Agric. 2011 Sep; 91 (12): 2271-6). This suggests that grain intake is very important and, more importantly, that fermented grains can have a significant effect on various physiological metabolism, antioxidant activity, and especially intestinal microbiota.

잡곡류를 섭취하는 것은 건강을 위해서 매우 중요한 일이다. 효율적인 섭취로 각종 성인병을 예방하고 소화효율을 높이는 것은 더욱 중요한 과제이다. 현대인들은 각종 인스턴트 식품의 섭취와 각종 화학 약제의 음용으로 위의 기능이 약화되어 있으며 장내 유용미생물의 수도 급격히 감소되어 있는 상태이다. 이를 위해서는 유용한 미생물의 섭취가 매우 중요하다.Eating cereals is very important for good health. Efficient intake is to prevent various adult diseases and increase digestive efficiency is a more important task. In modern times, the stomach function is weakened by the intake of various instant foods and the use of various chemical drugs, and the number of useful microorganisms in the intestine is rapidly decreasing. To do this, the intake of useful microorganisms is very important.

대부분의 발효식품은 액상발효로 제조된다. 고형발효로 제조되는 식품은 거의 없다. 곡물 발효식품인 된장, 고추장 등도 슬러지 상태의 발효이다. 주식으로 항상 섭취하는 곡물을 고형상태에서 발효하여 발효 효과를 나타내게 하는 것은 중요한 과제이다. 곡물 발효에서 단종 미생물을 이용할 경우에 곡물 상태에 거의 영향을 미치지 못한다.Most fermented foods are made by liquid fermentation. Few foods are produced by solid fermentation. Grains fermented soybean paste and red pepper paste are also sludge fermented. It is an important task to ferment grains which are always consumed as stocks to have a fermentation effect in a solid state. The use of discontinued microorganisms in grain fermentation has little effect on grain condition.

이에, 본 발명자들은 상기와 같은 종래기술들의 문제점들을 극복하기 위하여 예의 연구 노력한 결과, 미생물 발효의 개념을 전환하여 복합미생물로 혼합곡을 개방 발효하여 발효혼합곡을 경제적으로 대량 생산하고 기능성을 향상시킬 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
Therefore, the present inventors have made diligent research efforts to overcome the problems of the prior art as described above, by switching the concept of microbial fermentation to open fermentation of mixed grains into complex microorganisms to economically mass-produce fermented mixed grains and improve functionality. It was confirmed that the present invention can be completed.

따라서 본 발명의 주된 목적은 영양성이 높고 섭취가 용이하며 기능성이 우수한 발효혼합곡의 제조방법을 제공하는데 있다.Therefore, the main object of the present invention is to provide a method for producing fermented mixed grains having high nutritional properties, easy intake and excellent functionality.

본 발명의 다른 목적은 상기 발효혼합곡 제조방법으로 제조된 발효혼합곡을 제공하는데 있다.
Another object of the present invention is to provide a fermented mixed grain prepared by the fermented mixed grain manufacturing method.

본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei), 사카로마이세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae) 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 액체배지에서 개별 종배양하는 단계; 상기 개별 종배양된 각 균주의 배양액을 0.1 내지 5중량%의 당밀이 포함된 액체배지에 각각 1 내지 3%(v/v)로 첨가하고, 32 내지 38℃에서 7 내지 10일간 본배양하는 단계; 및 상기 본배양된 배양액 2 내지 20중량부를 쌀과 잡곡들의 혼합물 100중량부에 첨가하여 혼합하고 30 내지 40℃에서 3 내지 10일간 배양하는 단계;를 포함하는 발효혼합곡 제조방법을 제공한다.According to one aspect of the invention, the present invention comprises the steps of individually culturing Lactobacillus paracasei , Saccharomyces cerevisiae and Bacillus subtilis in liquid medium ; Adding the culture medium of each individual strain cultured in a liquid medium containing 0.1 to 5% by weight of molasses in 1 to 3% (v / v), respectively, and main culture at 32 to 38 ℃ for 7 to 10 days ; And adding 2 to 20 parts by weight of the cultured culture solution to 100 parts by weight of a mixture of rice and grains and incubating at 30 to 40 ° C. for 3 to 10 days.

본 발명의 발효혼합곡 제조방법에 있어서, 상기 쌀과 잡곡들의 혼합물은 다음 a) 내지 f) 중에서 선택된 혼합물인 것이 바람직하다.In the fermented mixed grains manufacturing method of the present invention, the mixture of rice and grains is preferably a mixture selected from the following a) to f).

a) 현미 48 내지 51중량부, 찰보리 4 내지 6중량부, 찹쌀 13 내지 17중량부, 찰현미 8 내지 12중량부, 찰흑미 4 내지 6중량부, 보리쌀 1.5 내지 1.7중량부, 찰수수 1.5 내지 1.7중량부, 율무 1.5 내지 1.7중량부, 메밀 1.5 내지 1.7중량부, 서리태 1.5 내지 1.7중량부, 팥 1.5 내지 1.7중량부, 약콩 1.5 내지 1.7중량부, 밀쌀 1.5 내지 1.7중량부, 백태 1.5 내지 1.7중량부 및 늘보리쌀 1.5 내지 1.7중량부로 이루어진 혼합물;a) 48 to 51 parts by weight of brown rice, 4 to 6 parts by weight of barley, 13 to 17 parts by weight of glutinous rice, 8 to 12 parts by weight of brown rice, 4 to 6 parts by weight of brown rice, 1.5 to 1.7 parts by weight of barley rice, 1.5 to 1.7 weight of wheat water 1.5 parts by weight 1.5 to 1.7 parts by weight, 1.5 to 1.7 parts by weight of buckwheat, 1.5 to 1.7 parts by weight of frost, 1.5 to 1.7 parts by weight of red beans, 1.5 to 1.7 parts by weight of weak beans, 1.5 to 1.7 parts by weight of wheat, 1.5 to 1.7 parts by weight of white rice And a mixture consisting of 1.5 to 1.7 parts by weight of barley rice;

b) 백미 48 내지 51중량부, 찰보리 4 내지 6중량부, 찹쌀 13 내지 17중량부, 찰현미 8 내지 12중량부, 찰흑미 4 내지 6중량부, 보리쌀 1.5 내지 1.7중량부, 찰수수 1.5 내지 1.7중량부, 율무 1.5 내지 1.7중량부, 메밀 1.5 내지 1.7중량부, 서리태 1.5 내지 1.7중량부, 팥 1.5 내지 1.7중량부, 약콩 1.5 내지 1.7중량부, 밀쌀 1.5 내지 1.7중량부, 백태 1.5 내지 1.7중량부 및 늘보리쌀 1.5 내지 1.7중량부로 이루어진 혼합물;b) 48 to 51 parts by weight of white rice, 4 to 6 parts by weight of barley, 13 to 17 parts by weight of glutinous rice, 8 to 12 parts by weight of brown rice, 4 to 6 parts by weight of black rice, 1.5 to 1.7 parts by weight of barley rice, 1.5 to 1.7 weight of wheat water 1.5 parts by weight 1.5 to 1.7 parts by weight, 1.5 to 1.7 parts by weight of buckwheat, 1.5 to 1.7 parts by weight of frost, 1.5 to 1.7 parts by weight of red beans, 1.5 to 1.7 parts by weight of weak beans, 1.5 to 1.7 parts by weight of wheat, 1.5 to 1.7 parts by weight of white rice And a mixture consisting of 1.5 to 1.7 parts by weight of barley rice;

c) 현미 48 내지 51중량부, 찰보리 3내지 7중량부, 찹쌀 13 내지 17중량부, 찰현미 8 내지 12중량부, 찰흑미 3 내지 7중량부, 보리쌀 1 내지 3중량부, 찰수수 1 내지 3중량부, 율무 1 내지 3중량부, 메밀 1 내지 3중량부, 서리태 1 내지 3중량부, 팥 1 내지 3중량부, 약콩 1 내지 3중량부 및 밀쌀 1 내지 3중량부로 이루어진 혼합물;c) 48 to 51 parts by weight brown rice, 3 to 7 parts by weight of barley, 13 to 17 parts by weight of glutinous rice, 8 to 12 parts by weight of brown rice, 3 to 7 parts by weight of black rice, 1 to 3 parts by weight of barley rice, 1 to 3 parts by weight A mixture of 1 to 3 parts by weight, 1 to 3 parts by weight of buckwheat, 1 to 3 parts by weight, 1 to 3 parts by weight of frost, 1 to 3 parts by weight of red beans, 1 to 3 parts by weight of soybeans and 1 to 3 parts by weight of wheat;

d) 백미 48 내지 51중량부, 찰보리 3내지 7중량부, 찹쌀 13 내지 17중량부, 찰현미 8 내지 12중량부, 찰흑미 3 내지 7중량부, 보리쌀 1 내지 3중량부, 찰수수 1 내지 3중량부, 율무 1 내지 3중량부, 메밀 1 내지 3중량부, 서리태 1 내지 3중량부, 팥 1 내지 3중량부, 약콩 1 내지 3중량부 및 밀쌀 1 내지 3중량부로 이루어진 혼합물;d) 48 to 51 parts by weight of white rice, 3 to 7 parts by weight of barley, 13 to 17 parts by weight of glutinous rice, 8 to 12 parts by weight of brown rice, 3 to 7 parts by weight of black rice, 1 to 3 parts by weight of barley rice, 1 to 3 parts by weight of cornmeal A mixture of 1 to 3 parts by weight, 1 to 3 parts by weight of buckwheat, 1 to 3 parts by weight, 1 to 3 parts by weight of frost, 1 to 3 parts by weight of red beans, 1 to 3 parts by weight of soybeans and 1 to 3 parts by weight of wheat;

e) 현미 50 내지 60중량부, 찰보리 8 내지 12중량부, 찹쌀 16 내지 21중량부, 찰현미 13 내지 17중량부 및 찰흑미 2 내지 4중량부로 이루어진 혼합물;e) a mixture consisting of 50 to 60 parts by weight of brown rice, 8 to 12 parts by weight of barley, 16 to 21 parts by weight of glutinous rice, 13 to 17 parts by weight of brown rice, and 2 to 4 parts by weight of brown black rice;

f) 백미 50 내지 60중량부, 찰보리 8 내지 12중량부, 찹쌀 16 내지 21중량부, 찰현미 13 내지 17중량부 및 찰흑미 2 내지 4중량부로 이루어진 혼합물;f) a mixture of 50 to 60 parts by weight of white rice, 8 to 12 parts by weight of barley, 16 to 21 parts by weight of glutinous rice, 13 to 17 parts by weight of brown rice, and 2 to 4 parts by weight of waxy black rice;

g) 현미 48 내지 51중량부, 찰보리 4 내지 8중량부, 찹쌀 12 내지 16중량부, 찰현미 5 내지 7중량부, 찰흑미 4 내지 6중량부, 보리쌀 1 내지 3중량부, 찰수수 1 내지 3중량부, 율무 1 내지 3중량부, 메밀 1 내지 3중량부, 서리태 1 내지 3중량부, 팥 1 내지 3중량부, 약콩 1 내지 3중량부, 밀쌀 1 내지 3중량부, 백태 1 내지 3중량부 및 늘보리쌀 1 내지 3중량부로 이루어진 혼합물;g) 48 to 51 parts by weight of brown rice, 4 to 8 parts by weight of barley, 12 to 16 parts by weight of glutinous rice, 5 to 7 parts by weight of brown rice, 4 to 6 parts by weight of black rice, 1 to 3 parts by weight of barley rice, 1 to 3 parts by weight of cornmeal 1 to 3 parts by weight, 1 to 3 parts by weight of buckwheat, 1 to 3 parts by weight, 1 to 3 parts by weight of frost, 1 to 3 parts by weight of red beans, 1 to 3 parts by weight of weak beans, 1 to 3 parts by weight of wheat, 1 to 3 parts by weight of white beans And a mixture consisting of 1 to 3 parts by weight of evergreen barley;

h) 현미 35 내지 45중량부, 찰보리 16내지 24중량부, 찰현미 8 내지 12중량부, 찰흑미 8 내지 12중량부, 율무 8 내지 12중량부 및 약콩 8 내지 12중량부로 이루어진 혼합물; 및h) a mixture of 35 to 45 parts by weight brown rice, 16 to 24 parts by weight of barley, 8 to 12 parts by weight of brown rice, 8 to 12 parts by weight of black rice, 8 to 12 parts by weight of radish and 8 to 12 parts by weight of soybeans; And

i) 현미 15 내지 25중량부, 찰보리 8내지 12중량부, 찹쌀 15 내지 25중량부, 찰현미 8 내지 12중량부, 율무 8 내지 12중량부, 메밀 8 내지 12중량부, 약콩 8 내지 12중량부 및 밀쌀 8 내지 12중량부로 이루어진 혼합물.i) 15 to 25 parts by weight brown rice, 8 to 12 parts by weight of barley, 15 to 25 parts by weight of glutinous rice, 8 to 12 parts by weight of brown rice, 8 to 12 parts by weight of barley, 8 to 12 parts by weight of buckwheat, 8 to 12 parts by weight of soybean And a mixture consisting of 8 to 12 parts by weight of wheat.

상기와 같은 구성의 혼합곡을 사용할 경우, 상기 균주에 제공되는 성분의 상관관계 등으로 인해 발효 시 영양성분 및 기능성이 우수한 발효혼합곡을 제조할 수 있다.When using the mixed grains of the above configuration, due to the correlation between the components provided in the strain and the like can be produced fermented mixed grains excellent nutritional properties and functionality during fermentation.

본 발명의 발효혼합곡 제조방법에 있어서, 상기 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei)의 개별 종배양은 MRS 액체배지 또는 포도당(glucose), 효모추출물(yeast extract) 및 초산나트륨이 포함된 액체배지를 사용하며, 30 내지 38℃에서 24 내지 48시간 이루어지고, 상기 사카로마이세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae)의 개별 종배양은 포도당(glucose), 효모추출물(yeast extract) 및 말트추출물(Malt extract)이 포함된 액체배지를 사용하며, 25 내지 32℃에서 24 내지 48시간 이루어지고, 상기 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)의 개별 종배양은 소고기추출물(beef extract)이 포함된 액체배지를 사용하며, 25 내지 32℃에서 24 내지 48시간 이루어지는 것이 바람직하다.In the fermentation mixed grain production method of the present invention, the individual species culture of the Lactobacillus paracasei ( Mactobacillus paracasei ) is a liquid medium containing MRS liquid medium or glucose (glucose), yeast extract (yeast extract) and sodium acetate 24 to 48 hours at 30 to 38 ℃, the individual species culture of Saccharomyces cerevisiae (glucose), yeast extract (yeast extract) and malt extract (Malt extract) This containing liquid medium is used, it is made 24 to 48 hours at 25 to 32 ℃, the individual species culture of the Bacillus subtilis ( Bacillus subtilis ) using a liquid medium containing beef extract (beef extract), It is preferable to make it for 24 to 48 hours at 25-32 degreeC.

개별 종배양은 각 균주의 활성상태를 높이고 균수를 조절하기 위한 것으로, 상기 조건에 따라 종배양을 실시하면 본배양에 적합한 상태의 배양액을 수득할 수 있다.Individual species culture is to increase the active state of each strain and to control the number of bacteria, by carrying out the species culture in accordance with the above conditions can obtain a culture medium suitable for the main culture.

본 발명의 발효혼합곡 제조방법에 있어서, 상기 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei)의 개별 종배양된 배양액의 균주 농도는 1×108 내지 1×1010 cfu/㎖이며, 상기 사카로마이세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae)의 개별 종배양된 배양액의 균주 농도는 1×106 내지 1×109 cfu/㎖이고, 상기 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)의 개별 종배양된 배양액의 균주 농도는 1×106 내지 1×109 cfu/㎖인 것이 바람직하다.In the method of producing fermented mixed grains of the present invention, the strain concentration of the individual cultured culture of Lactobacillus paracasei is 1 × 10 8 to 1 × 10 10 cfu / ml, and the Saccharomyces The strain concentration of the individual cultured culture of Saccharomyces cerevisiae is 1 × 10 6 to 1 × 10 9 cfu / ml, and the strain concentration of the individual cultured culture of Bacillus subtilis is It is preferred that it is 1 × 10 6 to 1 × 10 9 cfu / ml.

상기와 같은 균수의 배양액을 본배양에 첨가하면 발효혼합곡 제조에 적합한 상태의 본배양액을 제조할 수 있다.When the culture solution of the above-mentioned bacteria is added to the main culture, the main culture solution in a state suitable for producing fermented mixed grains can be prepared.

상기 본배양액을 혼합곡에 첨가하여 혼합할 때에는 배양액을 안개분사하는 것이 바람직하며, 혼합기 등을 사용하여 혼합할 수 있다.When the main culture solution is added to the mixed grains and mixed, it is preferable to spray the culture solution, and the mixture may be mixed using a mixer or the like.

배양액과 혼합곡을 혼합한 다음 일정량을 포대에 담은 상태로 발효시킬 수 있으며, 발효가 완료된 후 질소를 충진하여 포장하면 바로 상품화 할 수 있다.After mixing the culture solution and mixed grains, it can be fermented in a state in a bag. After fermentation is completed, packed with nitrogen can be commercialized immediately.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 제조방법으로 제조된 발효혼합곡을 제공한다.
According to another aspect of the present invention, the present invention provides a fermented mixed grain prepared by the above production method.

본 발명에 따르면 소화가 어렵고 거친 조직감 등으로 인한 일반잡곡의 단점을 보완하여, 섭취 및 소화가 용이하고 기능성이 우수한 발효혼합곡을 제조할 수 있다.According to the present invention, by supplementing the shortcomings of general grains due to difficult digestion and rough texture, it is possible to prepare fermented mixed grains that are easy to ingest and digest and have excellent functionality.

또한 건강에 유익함에도 불구하고 상기와 같은 문제점으로 기피되던 잡곡을 보다 용이하게 섭취할 수 있어, 현대인의 건강을 개선할 수 있을 것으로 기대된다.
In addition, despite the health benefits it is expected to be able to more easily ingest the grains avoided by the above problems, thereby improving the health of modern people.

도 1은 본 발명에서 사용하는 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei)의 콜로니 양상을 나타내는 사진이다.
도 2는 본 발명에서 사용하는 사카로마이세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae)의 콜로니 양상을 나타내는 사진이다.
도 3은 본 발명에서 사용하는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)의 콜로니 양상을 나타내는 사진이다.
도 4는 본배양한 복합미생물 배양액에 함유된 각 균주의 콜로니 양상을 나타내는 사진이다.
도 5는 본배양한 복합미생물 배양액에 함유된 각 균주를 현미경으로 관찰한 사진이다.
도 6은 본 발명의 복합미생물 배양액의 방청효과를 나타내는 사진이다.
도 7은 발효 현미 13곡에서 발견된 미생물 양상을 나타내는 사진이다.
도 8은 미발효 현미13곡에서 발견된 미생물 양상을 나타내는 사진이다(특히, 우측의 MRS 배지에서 유산균이나 효모는 관찰되지 않는다).
도 9는 발효 현미13곡을 구성하고 있는 수수의 발효상태를 나타내는 사진이다.
도 10은 발효 현미13곡을 4개월 실온 보존 후 미생물 상태를 나타내는 사진이다.
도 11은 발효쌀과 미발효쌀을 외관상 비교하여 나타내는 사진이다.
도 12는 유산균만으로 발효한 발효 현미 13곡에서 유산균의 감소양상을 나타내는 사진이다.
도 13은 발효 현미 13곡 밥의 보존성 비교하여 나타낸 사진이다.
도 14는 발효 혼합곡밥의 밥솥 보온상태에서 5일후 양상을 나타내는 사진이다.
1 is a photograph showing a colony of Lactobacillus paracasei ( Lactobacillus paracasei ) used in the present invention.
Figure 2 is a photograph showing the colony of Saccharomyces cerevisiae ( Saccharomyces cerevisiae ) used in the present invention.
Figure 3 is a photograph showing the colony of Bacillus subtilis ( Bacillus subtilis ) used in the present invention.
Figure 4 is a photograph showing the colony pattern of each strain contained in the cultured microorganism culture.
Figure 5 is a photograph of the microscopic observation of each strain contained in the cultured microbial culture medium.
Figure 6 is a photograph showing the rust prevention effect of the composite microbial culture of the present invention.
Figure 7 is a photograph showing the microbial pattern found in 13 grains of fermented brown rice.
8 is a photograph showing the microbial pattern found in 13 grains of unfermented brown rice (in particular, lactic acid bacteria and yeast are not observed in the right MRS medium).
9 is a photograph showing the fermentation state of sorghum constituting 13 grains of fermented brown rice.
10 is a photograph showing microbial state after storage of 13 grains of fermented brown rice for 4 months at room temperature.
11 is a photograph showing the appearance of fermented rice and unfermented rice in appearance.
Figure 12 is a photograph showing the reduction pattern of lactic acid bacteria in 13 grains of fermented brown rice fermented only with lactic acid bacteria.
It is a photograph showing the preservation comparison of 13 grain rice with fermented brown rice.
Figure 14 is a photograph showing the aspect after 5 days in a cooker warm state of fermented mixed grain rice.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These examples are only for illustrating the present invention, and the scope of the present invention is not to be construed as being limited by these examples.

실시예 1. 개별 종배양Example 1 Individual Speciation

1-1. 1-1. 락토바실러스Lactobacillus 파라카제이의Paracaze 종배양Cultivation

한국생명공학연구원 생명자원센터(Korean Collection for Type Culture, KCTC)로부터 구입한 유산균 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei, KCTC5546)를 적당량 취하여 상업적으로 제조하여 판매하고 있는 MRS 고체배지(Beef Extract 10.0g, Yeast Extract 5.0g, Dextrose 20.0g, Sorbitan Monooleate 1.0g, Ammonium Citrate 2.0g, Sodium Acetate 5.0g, MnSO4.H2O 0.05g, Na2HPO4 2.0g, Agar 15g; 55g/ℓ)에 도말하여 38℃에서 1일 정도 배양한 다음, 단일 콜로니(colony)를 취하여 한천을 제외한 동일한 구성의 MRS 액체배지 300㎖에 접종하였다. 이를 38℃에서 2일 배양한 후 종균으로 사용하였다. 콜로니 양상은 도 1과 같으며 균수는 9.84×108 cfu/㎖였다.Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology Biological Resource Center, a lactic acid bacterium Lactobacillus casei Farah (Lactobacillus purchased from (Korean Collection for Type Culture, KCTC ) paracasei, KCTC5546) a MRS solid medium that is manufactured and sold commercially by taking an appropriate amount (Beef Extract 10.0g, Yeast Extract 5.0g , Dextrose 20.0g, Sorbitan Monooleate 1.0g, Ammonium Citrate 2.0g, Sodium Acetate 5.0g, MnSO 4. Stain in H 2 O 0.05g, Na 2 HPO 4 2.0g, Agar 15g; 55g / ℓ) and incubate at 38 ° C for about 1 day, take a single colony (colony), MRS liquid medium of the same composition except agar 300 Inoculated in ml. This was incubated at 38 ° C. for 2 days and used as a seed. Colonies were shown in Figure 1 and the number of bacteria was 9.84 × 10 8 cfu / ㎖.

1-2. 1-2. 사카로마이세스Saccharomyces 세레비시아의Serbian 종배양Cultivation

한국생명공학연구원 생명자원센터로부터 구입한 사카로마이세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae, KCTC 7904)를 포도당(glucose) 10g, 효모추출물(yeast extracts) 3g, 펩톤(peptone) 5g, 엿기름추출물(malt extracts) 3g 및 한천(agar) 15g(물 1ℓ당 첨가량)으로 구성된 고체배지에 도말하여 28℃에서 1일 배양한 후 단일 콜로니를 선발하였고, 이를 한천을 제외한 동일한 구성의 액체배지 300㎖에 접종하여 28℃에서 1일간 현탁 배양하여 종균으로 사용하였다. 콜로니 양상은 도 2와 같으며 균수는 5.7×107 cfu/㎖였다. Saccharomyces cerevisiae (KCTC 7904) purchased from Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, 10 g of glucose, 3 g of yeast extracts, 5 g of peptone, malt extracts ) A single colony was selected after plating on a solid medium consisting of 3 g and 15 g of agar (added amount per 1 liter of water), incubating at 28 ° C. for 1 day, and inoculating it in 300 ml of the same liquid medium except for agar. Suspension culture for 1 day at ℃ was used as a seed. Colonies were shown in Figure 2 and the number of bacteria was 5.7 × 10 7 cfu / ㎖.

1-3. 1-3. 바실러스Bacillus 서브틸리스의Subtilis 종배양Cultivation

한국생명공학연구원 생명자원센터로부터 구입한 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis, KCTC 3239)를 소고기추출물(Beef extract) 3g, 펩톤(peptone) 5g 및 한천(agar) 15g(물 1ℓ당 첨가량)으로 구성된 고체배지에 도말하여 30℃에서 1일 배양한 후 단일 콜로니를 선발하였고, 이를 한천을 제외한 동일한 구성의 액체배지 300㎖에 접종하여 30℃에서 1일간 현탁 배양하였다. 콜로니 양상은 도 3과 같으며 균수는 3.2×107 cfu/㎖였다.
Bacillus subtilis (KCTC 3239) purchased from the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, a solid consisting of 3 g of beef extract, 5 g of peptone and 15 g of agar (added amount per 1 liter of water) After plating on the medium and incubated at 30 ° C. for 1 day, a single colony was selected and inoculated in 300 ml of a liquid medium having the same composition except for agar and suspended in culture at 30 ° C. for 1 day. Colonies were shown in Figure 3 and the number of bacteria was 3.2 × 10 7 cfu / ㎖.

실시예 2. 복합미생물 본배양Example 2 Complex Microbial Main Culture

복합미생물의 대량 배양액은 상기 실시예 1에서 제조된 각 균주배양액을 종균으로 사용하여 제조하였다. 복합미생물을 대량으로 배양하기 위하여 10ℓ의 수도수에 60g의 식용당밀을 충분히 녹이고 여기에 상기 실시예 1-1, 1-2 및 1-3의 종배양액을 각각 200㎖씩 첨가하였다. 이어서 수도수를 첨가하여 최종 20ℓ가 되도록 하였다. 이 미생물 혼합액을 35℃에서 10일간 배양하였다.Mass culture of the composite microorganism was prepared using each strain culture solution prepared in Example 1 as a seed. In order to culture the complex microorganisms in a large amount, 60 g of edible molasses was sufficiently dissolved in 10 L of tap water, and 200 ml of the seed culture solutions of Examples 1-1, 1-2, and 1-3 were added thereto. Tap water was then added to make a final 20 liter. This microbial mixed solution was incubated at 35 ° C for 10 days.

배양된 복합미생물 배양액의 산도는 3.2였으며, 각 균주의 콜로니 양상은 도4와 같고, 현미경 상에서의 양상은 도 5와 같다. 락토바실러스 파라카제이의 균수는 1.5×107 cfu/㎖, 사카로마이세스 세레비시아의 균수는 2.5×106 cfu/㎖, 바실러스 서브틸리스의 균수는 1.3×105 cfu/㎖였다.
The acidity of the cultured microorganism culture medium was 3.2, and the colony pattern of each strain was as shown in FIG. 4, and the pattern on the microscope was shown in FIG. 5. The number of bacteria of Lactobacillus paracasei was 1.5 × 10 7 cfu / ml, the number of bacteria of Saccharomyces cerevisiae was 2.5 × 10 6 cfu / ml, and the number of bacteria of Bacillus subtilis was 1.3 × 10 5 cfu / ml.

실시예 3. 복합미생물 배양액의 방청실험Example 3 Antirust Test of Complex Microbial Culture Solution

상기 실시예 2에서 제조한 복합미생물 배양액의 항산화력을 비교하기 위하여 방청실험을 하였다(도 6 참조).In order to compare the antioxidant power of the microorganism culture medium prepared in Example 2 was subjected to rust prevention experiment (see Fig. 6).

수도수와 복합미생물 배양액에 못을 넣고 녹이 스는 양상을 비교하였다. 수도수에서는 못을 넣고 1시간이 지나면 녹이 슬면서 시간이 갈수록 녹이 스는 정도가 증가하였다. 그러나 가열을 하지 않은 배양액 50배 및 30분 동안 끓인 배양액 50배에 못을 넣고 실온에 방치하였으나, 3개월 이상 방치하여도 배양액에서는 전혀 못에 녹이 슬지 않았다. 이는 복합미생물 배양액은 강력한 항산화 물질을 함유하고 있다는 것을 의미한다. 특히, 일반적으로 항산화물질은 열에 약하나 복합미생물 배양액은 열을 가하여도 항산화력이 소실되지 않음을 알 수 있다.
We compared the patterns of rust in the tap water and the mixed microbial culture. In tap water, after 1 hour after the nail was put, the degree of rust increased with time. However, the nail was placed in a culture medium 50 times unheated and 50 times boiled in a culture medium for 30 minutes, and left at room temperature. This means that the microbial culture contains powerful antioxidants. In particular, antioxidants are generally weak in heat, but the complex microbial culture solution can be seen that the antioxidant power is not lost even if the heat.

실시예 4. 발효혼합곡의 대량 제조 및 발효곡물에서 미생물 추적Example 4 Mass Production of Fermented Mix Grains and Microbial Tracking in Fermented Grains

혼합곡을 발효하기 위하여 각종 곡물을 표 1과 같이 구성하였다. 각각의 곡물을 비율에 맞추어 혼합기에 넣고 혼합을 하였다. 혼합곡의 중량을 기준으로 10%의 복합미생물 배양액을 안개분사로 분사하면서 20분간 혼합하였다. 충분히 혼합된 혼합곡을 15㎏씩 포대에 넣어 38℃의 배양실에서 3일간 발효하였다. 발효가 완성되면 각각을 판매용 포장지에 질소를 충진하면서 포장하였다. 발효 5일 후에 현미13곡 발효 곡식에서 추적된 균주의 콜로니 양상은 도 7과 같으며, 각 균수는 락토바실러스 파라카제이가 5.4×104 cfu/g, 사카로마이세스 세레비시아가 3.1×104 cfu/g, 바실러스 서브틸리스가 2.1×104 cfu/g으로 나타났다(표 2 참조).Various grains were composed as shown in Table 1 to ferment mixed grains. Each grain was put into the mixer in proportion and mixed. 10% of the mixed microbial culture based on the weight of the mixed grains was mixed for 20 minutes while spraying the mist spray. 15 kg of mixed grains were sufficiently mixed into bags and fermented in a culture chamber at 38 ° C. for 3 days. When the fermentation was completed, each was packed with nitrogen in a sales wrapper. After 5 days of fermentation, the colony pattern of the traces traced from 13 grains of brown rice fermented grains is shown in Fig. 7, and the number of bacteria was Lactobacillus paracasei 5.4 × 10 4 cfu / g, Saccharomyces cerevisiae 3.1 × 10 4 cfu / g, Bacillus subtilis was 2.1 × 10 4 cfu / g (see Table 2).

원료명Raw material name 현미15곡15 pieces brown rice 백미15곡15 pieces of white rice 현미13곡13 brown rice 백미13곡13 pieces of white rice 현미5곡5 brown rice 백미5곡5 pieces of white rice 백미White rice 현미Brown rice 찰보리Waxy barley 찹쌀Glutinous rice 찰현미Brown rice 찰흑미Black beauty 압맥Wort 찰수수Chimney 율무Yulmu 메밀buckwheat 서리태Seo tae red bean 약콩Medicinal beans 밀쌀Wheat 백태various phases 늘보리쌀Barley rice

한편 혼합곡은 무균상태로 처리되지 않았으므로 자연 상태에서 다양한 미생물이 곡물 외피에 부착이 되어 있을 것으로 예상된다. 이를 확인하고 발효혼합곡과 비교하기 위하여 발효를 하지 않은 현미 13곡의 미생물 양상을 조사하였다. 도 8과 같이 효모나 유산균은 발견되지 않았으며, 주로 바실러스 양상의 미생물이 관찰되었다. 바실러스 양상의 미생물 숫자는 6×102 cfu/g이었다. 이외에도 다양한 미생물의 콜로니가 추적되었다. 발효혼합곡에서는 유용 발효 미생물로 구성된 복합미생물을 처리함으로서 자연 상태에서 부착된 미생물이 유용 발효 미생물로 대체되어 곡물의 미생물 환경이 인간에게 유익한 발효 환경으로 변화되었음을 의미한다. 발효 현미 13곡과 미발효 현미 13곡에서 발견된 미생물의 수를 비교하면 표 2와 같다.On the other hand, because the mixed grains are not treated aseptically, it is expected that various microorganisms will be attached to the grain shell in nature. In order to confirm this and compare with fermented mixed grains, microbial patterns of 13 brown rice without fermentation were investigated. As shown in FIG. 8, no yeast or lactic acid bacteria were found, and the microorganisms of the Bacillus phase were observed. The microbial count of the Bacillus phase was 6 × 10 2 cfu / g. In addition, colonies of various microorganisms were traced. In fermented mixed grains, by treating complex microorganisms composed of useful fermentation microorganisms, the microorganisms attached in the natural state are replaced with useful fermentation microorganisms, which means that the microbial environment of grain is changed into a fermentation environment beneficial to humans. Table 2 shows the comparison of the number of microorganisms found in 13 fermented brown rice and 13 unfermented brown rice.

미생물 종류Microorganism types 발효 13곡(발효5일후)13 grains (5 days after fermentation) 미발효 13곡13 unfermented 유산균Lactobacillus 5.4×104 cfu/g5.4 × 10 4 cfu / g -- 효모leaven 3.1×104 cfu/g3.1 × 10 4 cfu / g -- 바실러스Bacillus 2.1×104 cfu/g2.1 × 10 4 cfu / g 6×102 cfu/g6 × 10 2 cfu / g

발효혼합곡의 발효 상태를 현미경으로 관찰하였다. 발효가 되면 약간 하얀색을 띠게 된다. 예를 들면 수수의 경우 도 9와 같이 미발효의 대조구에서 곡물 표면 양상을 보면 표피가 매끈한 것을 알 수 있다. 도정한 상태 그대로 이다. 반면 발효된 것은 표피 부분과 특히 눈이 있는 부위가 하얗게 되어 있는 것을 확인할 수 있다. 이는 일반적으로 복합미생물로 고형발효를 유도할 경우에 나타나는 현상과 동일하였다. 복합미생물로 고형발효를 유도하면 발효 환경이 되면서 자연 상태에서 유용한 방선균이나 사상균의 생장을 유도한다. 따라서 곡물 표피에서 관찰된 이러한 현상은 유용한 미생물이 곡물의 표피 환경을 발효 상태로 변화시켰음을 시사하고 있다. 발효를 유도한 모든 곡물에서 이러한 현상이 공통적으로 관찰되었다.
The fermentation state of the fermented mixture was observed under a microscope. When fermented, it becomes slightly white. For example, in the case of sorghum, as seen in the unfermented control surface of the grain surface as shown in Figure 9 it can be seen that the epidermis is smooth. As it is, On the other hand, fermentation can be seen that the epidermis and especially the area with eyes are white. This is generally the same phenomenon that occurs when inducing solid fermentation into complex microorganisms. Inducing solid fermentation with complex microorganisms leads to fermentation environment and induces growth of actinomycetes or filamentous fungi in nature. Thus, this phenomenon observed in grain epidermis suggests that useful microorganisms have changed the epidermal environment of grains to fermentation. This phenomenon was common in all grains that induced fermentation.

실시예 5. 발효 후 저장에 따른 발효혼합곡의 미생물 구성 변화Example 5 Microbial Composition Changes of Fermented Mix Grains with Storage after Fermentation

다양한 조합 상태의 혼합곡을 발효시킨 후 상품화하여 유통하여야 하므로 유통 기간 중에 구성 미생물이 유지되는 것은 매우 중요하다. 발효시킨 혼합곡을 질소 충진하여 상품화된 제품을 4개월 간 실온에서 보존한 후의 발효미생물의 구성 상태를 조사하였다. 초기에 발견된 미생물들이 생존하고 있음이 입증되었다(도 10 참조). 발효 혼합곡의 4개월 간 실온 보존 후 유산균의 숫자는 3.7×104 cfu/g이었고, 효모는 2.5×104 cfu/g이었다. 바실러스의 숫자는 1.9×104 cfu/g이었으며 초기 상태의 균수와 비교하면 표 3과 같다. 우수한 발효 상태의 액상 미생물 배양액의 경우에도 장기간 보존하면 구성 미생물수가 당연히 감소한다. 발효후의 혼합곡은 거의 건조 상태이므로 미생물이 일부 사멸하여 감소하게 된다. 발효혼합곡에서도 미생물의 수가 약간 감소되었으나 대부분이 휴면상태로 생존하여 있음이 입증되었다. 또한 발효 13곡의 외관상의 상태도 변화가 없었다. 미발효 13곡은 실온에 보관 시 변색되는 현상이 있었으나 발효 13곡은 장기간 보관 시에도 변색이 일어나지 않았다(도 11 참조). 이는 발효 혼합곡은 실온에서 장기간 보관해도 변색될 가능성이 매우 낮음을 의미한다.It is very important to maintain the constituent microorganisms during the distribution period because it must be commercialized and distributed after fermenting mixed grains of various combinations. The composition of fermented microorganisms was investigated after nitrogen-filling the fermented mixed grains and storing the commercialized products at room temperature for 4 months. Initially found microorganisms proved to be alive (see FIG. 10). After 4 months of storage at room temperature for fermented mixed grains, the number of lactic acid bacteria was 3.7 × 10 4 cfu / g, and the yeast was 2.5 × 10 4 cfu / g. The number of Bacillus was 1.9 × 10 4 cfu / g and is shown in Table 3 compared with the number of bacteria in the initial state. Even in the case of a liquid fermentation broth in good fermentation state, the number of constituent microorganisms is naturally reduced after long-term storage. After fermentation, the mixed grains are almost dry, so that some microorganisms are killed and reduced. In fermented mixed grains, the number of microorganisms decreased slightly, but most of them survived dormant state. In addition, the apparent state of the 13 fermented grains did not change. The unfermented 13 grains were discolored when stored at room temperature, but the 13 fermented grains did not discolor even after long term storage (see FIG. 11). This means that fermented mixed grains are very unlikely to discolor even after long-term storage at room temperature.

미생물 종류Microorganism types 발효 5일 후 5 days after fermentation 4개월 후4 months later 유산균Lactobacillus 5.4×104 cfu/g5.4 × 10 4 cfu / g 3.7×104 cfu/g3.7 × 10 4 cfu / g 효모leaven 3.1×104 cfu/g3.1 × 10 4 cfu / g 2.5×104 cfu/g2.5 × 10 4 cfu / g 바실러스Bacillus 2.1×104 cfu/g2.1 × 10 4 cfu / g 1.9×104 cfu/g1.9 × 10 4 cfu / g

실시예 6. 복합미생물과 단종 미생물 발효혼합곡의 미생물 구성 비교Example 6 Comparison of Microbial Composition of Mixed Microorganisms and Discontinued Microbial Fermentation Mixtures

각종 곡물은 재배 상태, 수확시기 및 방법, 관리 보관 상태, 날씨, 재배 지역, 품종 등에 따라 곡물의 질, 맛 등의 상태에서 많은 차이가 난다. 특히 곡물 외피에 부착된 미생물상은 현저한 차이가 있으며 어떠한 미생물상을 이루는지 예측하거나 조사한다는 것은 거의 불가능할 정도로 어렵다. 도 8에서와 같이 미발효 혼합곡에서도 다양한 미생물이 추적되는 것으로 보아도 알 수 있다.Varieties of grains vary greatly in terms of grain quality, taste, etc., depending on cultivation conditions, harvesting time and methods, management and storage conditions, weather, cultivation areas, and varieties. In particular, microbial phases attached to grain hulls are markedly different, and it is almost impossible to predict or investigate which microbial phases form. It can be seen that various microorganisms are traced in the unfermented mixed grain as shown in FIG. 8.

곡물 외피의 자연 상태에서의 미생물상을 파악하고 발효혼합곡을 제조, 생산한다는 것도 매우 어려운 일이다. 따라서 어떠한 정보도 없는 상태에서는 발효를 유도하는데 특정한 미생물을 사용하여 이 미생물이 발효 후에 얼마나 검출이 되는가를 파악하는 방법 밖에는 없다. 자연상태 곡물외피의 미생물상이 발효 유도로 발효미생물상으로 변화되었는가를 추적하는 것이 중요하다. 이를 위해서는 발효 유도에 사용된 미생물이 현장성이 강해야하는 것이다. 즉, 배양된 미생물이 자연 상태에서 잘 유지되어야 하고 발효의 방향으로 미생물상을 변화시키는 것이 중요하다. 상기와 같은 복합미생물은 이러한 능력이 뛰어나다는 것이 입증되었다. 이를 더욱 확인하기 위하여 유산균 단종 배양액을 사용하여 혼합곡의 발효를 유도하였다. 발효 5일 후에 추적된 유산균의 수는 1.1×103 cfu/g이었고 1개월 후에는 3.6×10 cfu/g로 유산균수가 현저히 감소함을 나타냈으며 2개월 후에는 전혀 추적이 되지 않았다(도 12 및 표 4 참조). 이는 단종 미생물로 혼합곡의 발효는 거의 유도되지 않으며 복합미생물을 사용하여 발효를 유도하여야 발효혼합곡을 제조할 수 있음을 강하게 시사하는 것이다. 유산균만으로 발효된 현미 13곡으로 취반한 밥과 복합미생물 배양액으로 발효한 현미 13곡밥을 비교 조사한 결과, 유산균만으로 발효를 유도한 곡물이 현저히 조직감이 떨어져 거칠고 먹기에 매우 불편하였다. 이는 단종 미생물은 현장성이 낮아 곡물의 발효를 잘 유도하지 못한다는 것을 시사한다.It is also very difficult to identify the microbial state of the grain envelope and to produce and produce fermented mixtures. Therefore, in the absence of any information, the only way to induce fermentation is to use a specific microorganism to determine how much of the microorganism is detected after fermentation. It is important to track whether the microbial phase of the natural grain envelope has been changed to fermentation microorganisms by induction of fermentation. For this purpose, the microorganisms used to induce fermentation should be strong in situ. That is, it is important that the cultured microorganisms are well maintained in their natural state and change the microbial phase in the direction of fermentation. Such microorganisms have proven to be excellent in this ability. In order to further confirm this, the fermentation of mixed grains was induced using lactic acid bacteria discontinuation medium. After 5 days of fermentation, the number of lactic acid bacteria traced was 1.1 × 10 3 cfu / g, and after 1 month, the number of lactic acid bacteria was markedly decreased to 3.6 × 10 cfu / g, and after 2 months there was no trace (Fig. 12 and See Table 4). This suggests that fermentation of mixed grains is rarely induced by the endogenous microorganisms, and that fermentation mixed grains can be prepared only by inducing fermentation using composite microorganisms. The comparison of rice cooked with 13 grains of brown rice fermented only with lactic acid bacteria and 13 grains of rice with fermented complex microbial culture showed that grains induced fermentation only with lactic acid bacteria had a poor texture and were very uncomfortable to eat. This suggests that endogenous microorganisms do not induce low fermentation of grains due to their low field site.

미생물 종류Microorganism types 복합미생물 발효Compound Microbial Fermentation 유산균 단종 발효Lactobacillus Discontinued Fermentation 5일후 5 days later 4개월 후4 months later 5일후5 days later 1개월 후After 1 month 2개월 후Two months later 유산균Lactobacillus 5.4×104 cfu/g5.4 × 10 4 cfu / g 3.7×104 cfu/g3.7 × 10 4 cfu / g 1.1×103 cfu/g1.1 × 10 3 cfu / g 3.6×10 cfu/g3.6 × 10 cfu / g 불검출Not detected

실시예Example 7. 발효  7. Fermentation 현미13곡으로To 13 pieces of brown rice 취반한Cooked 밥의 조사 Survey of rice

7-1. 7-1. 발효밥의Fermented rice 저장성 조사 Hypotonic investigation

발효 현미13곡으로 취반한 밥의 저장성을 조사하기 위하여, 별도로 멸균하지 않은 용기에 발효 현미13곡과 미발효 현미13곡을 취반하여 적당량을 각각 담고 실온에 방치하면서 관찰하였다.In order to investigate the shelf life of the rice cooked with 13 fermented brown rice, 13 fermented brown rice and 13 unfermented brown rice were collected in a container which was not sterilized separately and placed in room temperature.

미발효 현미13곡으로 취반한 밥은 2일후부터 곰팡이가 발생하기 시작하면서 12일 후에는 다양한 미생물이 밥에 나타났고 악취가 발생하였다. 그러나 발효 현미13곡 밥은 12일이 지나도 미생물이 발생하지 않았으며 악취도 발생하지 않았다(도 13 참조). 이는 곡물을 발효하여 밥을 하게 되면 밥의 저장성이 길어진다는 것을 의미한다. 이러한 원인은 발효밥이 미발효 밥보다 항산화력이 높아 유해 미생물의 발생을 억제하였기 때문이라고 판단된다. 가정에서 취반을 하여 보온 상태에서 보관하는 경우에도 동일한 현상을 나타내었다. 발효혼합곡으로 압력밥솥에 가득 취반하여 보온상태로 보존하면서 필요시 섭취를 하여도 밥이 쉬지 않고 굳지 않으며 오히려 부드럽고 맛이 더욱 우수해지는 현상이 관찰되었다(도 14 참조).Rice cooked in 13 grains of unfermented brown rice began to develop mold after 2 days, and after 12 days, various microorganisms appeared in rice and odor occurred. However, the fermented brown rice 13 grain rice did not generate microorganisms even after 12 days and no odor (see Fig. 13). This means that fermenting grains and rice increases the shelf life of the rice. The reason for this is that fermented rice has higher antioxidant power than unfermented rice, which suppresses the generation of harmful microorganisms. The same phenomenon was observed when cooked at home and kept in a warm state. The fermented mixed grains were cooked in a pressure cooker, preserved in a warm state, and the rice was not hardened without stopping even when ingested when necessary, but rather, a tender taste was observed (see FIG. 14).

7-2. 7-2. 발효밥의Fermented rice 관능검사 Sensory test

발효 현미13곡으로 취반한 밥의 기호성, 풍미, 맛의 차이를 관능평가 방법으로 조사하였다. 2종류의 시료를 비교하면서 속성이나 기호도의 차이를 나타내는 방법인 2점 시험법(pair test)을 이용하여 관능검사를 실시하였다(食品大百科事典, 日本(獨)食品綜合硏究所, 2001, 420-436pp). 여성이 주로 취반을 담당하며, 냄새나 맛에 민감하므로 소비자를 대표하는 소비자 패널로 35세에서 45세 사이의 여성 5인을 선발하였다. 두 시료를 비교하면서 7단계척도(seven point scale)법을 이용하여 수치로 나타내었다. 두 시료가 동일한 경우에는 0, 약간 좋다 1, 상당히 좋다 2, 매우 좋다 3, 약간 나쁘다 1, 꽤 나쁘다 2, 매우 나쁘다 3 으로 나타내었다. 결과는 표 5와 같다. 발효 현미13곡 밥의 맛이 모든 조사 항목에서 우수함을 나타내었다. 맛을 나타내는 항목에서는 발효 13곡 밥이 매우 우수함을 나타내었다. 발효 현미13곡 밥이 약간의 단맛을 내므로 한번 섭취하면 지속적으로 입맛을 당기게 하는 현상이 있는데 이를 반영한 것으로 생각된다. 일반 백미와는 달리 혼합곡밥에서 발생하는 특유의 풍미는 유사하게 나타났다. 발효 13곡 밥에서 특징적인 현상인 조직감은 매우 우수한 것으로 나타났다. 발효 현미13곡밥은 미발효 현미13곡밥보다 현저히 부드러워 먹기에 좋음을 나타내고 있다. 이는 혼합곡의 외피 조직이 발효로 저분자화되어 있음을 나타내는 것으로 먹은 후에도 소화 흡수력이 뛰어남을 시사한다. 기호성면에서도 발효 현미13곡 밥이 우수함을 나타내었는데 미발효 현미13곡밥에서도 약간의 기호성이 나타난 것은 혼합곡밥이 거칠어서 먹기에 거부감이 있음에도 불구하고 건강에 유용하다는 일반적 생각이 작용한 것으로 해석된다.Differences in palatability, flavor and taste of rice cooked with 13 fermented brown rice were investigated by sensory evaluation method. Sensory tests were carried out using a two-point test, a method of expressing differences in properties and preferences, comparing two samples (食品 大 百科 事 典, 日本 食品 綜合 硏 究 所, 2001, 420-436pp). Since women are mainly responsible for cooking and are sensitive to smells and tastes, we selected five women between the ages of 35 and 45 as representative consumer panels. The two samples were compared and expressed numerically using a seven point scale method. If the two samples are the same, 0, slightly good 1, quite good 2, very good 3, slightly bad 1, pretty bad 2, very bad 3 are indicated. The results are shown in Table 5. The taste of 13 grains of fermented brown rice was excellent in all survey items. In the item indicating taste, the fermented 13 grain rice showed very good. Fermented brown rice 13 grains rice has a slightly sweet taste, so once ingested, the taste is continuously drawn. Unlike regular white rice, the unique flavor that occurs in mixed grain rice appeared similar. Tissue texture, a characteristic phenomenon in fermented 13 grain rice, was found to be very good. The fermented brown rice 13 grain rice is significantly softer than the unfermented brown rice 13 grain rice, which is good to eat. This indicates that the outer shell tissue of the mixed grains is low molecular weight in fermentation, suggesting that the digestive absorption is excellent even after eating. In terms of palatability, the fermented brown rice 13 grains rice was excellent, but in the unfermented brown rice 13 grain rice, some palatability was shown that the general idea that it is useful for health even though the mixed grain rice is coarse to eat.

항목Item 미발효13곡밥13 fermented rice 발효13곡밥Fermented 13 grain rice flavor -0.2-0.2 2.22.2 풍미zest 1.21.2 2.02.0 조직감Texture -2.0-2.0 2.42.4 기호성Palatability 1.41.4 2.62.6

7-3. 7-3. 발효밥의Fermented rice 임상조사 Clinical investigation

혼합곡밥은 일반적으로 거칠고 소화 흡수력이 낮아 건강에 유용함을 알면서도 기피하는 경향이 있다. 섭취하는 데에도 표피가 단단하여 장시간 씹어야 하므로 먹기에 매우 불편하다.Mixed grain rice tends to be avoided even though it is generally rough and has low digestive absorption and is useful for health. It is very inconvenient to eat because the epidermis is too hard to ingest and chew for a long time.

따라서 발효13곡밥을 먹었을 경우 소화력과 변비 해소에 도움이 되는 가를 조사하였다(표 6 참조). 소화력이 좋지 않아 밥을 먹으면 속이 더부룩하고 위에 부담을 느끼는 사람 10인과 변비로 배변이 어려운 사람 9인을 선발하여 2개월간 발효13곡밥을 섭취하도록 하였다. 발효 13곡밥을 2개월 간 섭취한 결과 10인 중 8인이 식사 후 위의 부담이 없었으며, 오히려 소화가 잘되어 식사 후 몇 시간이 지나면 공복감을 느꼈다. 변비의 경우에는 78%가 배변상태가 좋아졌으며 숙변이 배출되어 건강이 양호해지고 복통이 현저히 감소하였다.Therefore, the fermented 13 grain rice to eat if the digestive power and constipation relief was investigated whether (see Table 6). 10 people who feel bloated and stomach burden when eating because of poor digestive power and 9 people who have difficulty in defecation due to constipation were selected to eat 13 grain fermented rice for 2 months. After fermenting 13 grain rice for 2 months, 8 out of 10 people had no burden on stomach after meal. Rather, they digested well and felt hunger after hours. In constipation, 78% had better bowel movements and stool was excreted, resulting in better health and abdominal pain.

항목 Item 소화력Digestive power 변비Constipation 호전Improvement 8인(80%)8 people (80%) 7(78%)7 (78%) 무변Unchanged 2인(20%)2 people (20%) 2(22%)2 (22%) 악화worse 00 00

Claims (5)

락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei), 사카로마이세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae) 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 액체배지에서 개별 종배양하는 단계;
상기 개별 종배양된 각 균주의 배양액을 0.1 내지 5중량%의 당밀이 포함된 액체배지에 각각 1 내지 3%(v/v)로 첨가하고, 32 내지 38℃에서 7 내지 10일간 본배양하되, 락토바실러스 파라카제이의 개별 종배양된 배양액의 균주 농도는 1×108 내지 1×1010 cfu/㎖이며, 사카로마이세스 세레비시아의 개별 종배양된 배양액의 균주 농도는 1×106 내지 1×109 cfu/㎖이고, 바실러스 서브틸리스의 개별 종배양된 배양액의 균주 농도는 1×106 내지 1×109 cfu/㎖인 것을 특징으로 하는 본배양 단계; 및
상기 본배양된 배양액 2 내지 20중량부를 쌀과 잡곡들의 혼합물 100중량부에 첨가하여 혼합하고 30 내지 40℃에서 3 내지 10일간 배양하는 단계;를 포함하는 발효혼합곡 제조방법.
Individually culturing Lactobacillus paracasei , Saccharomyces cerevisiae and Bacillus subtilis in liquid medium;
The culture medium of each individual strain cultured is added to the liquid medium containing 0.1 to 5% by weight of molasses in 1 to 3% (v / v), respectively, and main culture at 32 to 38 ℃ for 7 to 10 days, The strain concentrations of the individual cultured cultures of Lactobacillus paracasei were 1 × 10 8 to 1 × 10 10 cfu / ml, and the strain concentrations of the individual cultured cultures of Saccharomyces cerevisiae were 1 × 10 6. To 1 × 10 9 cfu / ml, and the strain concentration of the individual cultured culture of Bacillus subtilis is 1 × 10 6 to 1 × 10 9 cfu / ml; And
2 to 20 parts by weight of the culture medium is added to 100 parts by weight of a mixture of rice and grains, mixed and incubated for 3 to 10 days at 30 to 40 ℃; fermented mixed grain production method comprising a.
제 1항에 있어서,
상기 쌀과 잡곡들의 혼합물은 다음 a) 내지 f) 중에서 선택된 혼합물인 것을 특징으로 하는 발효혼합곡 제조방법.
a) 현미 48 내지 51중량부, 찰보리 4 내지 6중량부, 찹쌀 13 내지 17중량부, 찰현미 8 내지 12중량부, 찰흑미 4 내지 6중량부, 보리쌀 1.5 내지 1.7중량부, 찰수수 1.5 내지 1.7중량부, 율무 1.5 내지 1.7중량부, 메밀 1.5 내지 1.7중량부, 서리태 1.5 내지 1.7중량부, 팥 1.5 내지 1.7중량부, 약콩 1.5 내지 1.7중량부, 밀쌀 1.5 내지 1.7중량부, 백태 1.5 내지 1.7중량부 및 늘보리쌀 1.5 내지 1.7중량부로 이루어진 혼합물;
b) 백미 48 내지 51중량부, 찰보리 4 내지 6중량부, 찹쌀 13 내지 17중량부, 찰현미 8 내지 12중량부, 찰흑미 4 내지 6중량부, 보리쌀 1.5 내지 1.7중량부, 찰수수 1.5 내지 1.7중량부, 율무 1.5 내지 1.7중량부, 메밀 1.5 내지 1.7중량부, 서리태 1.5 내지 1.7중량부, 팥 1.5 내지 1.7중량부, 약콩 1.5 내지 1.7중량부, 밀쌀 1.5 내지 1.7중량부, 백태 1.5 내지 1.7중량부 및 늘보리쌀 1.5 내지 1.7중량부로 이루어진 혼합물;
c) 현미 48 내지 51중량부, 찰보리 3내지 7중량부, 찹쌀 13 내지 17중량부, 찰현미 8 내지 12중량부, 찰흑미 3 내지 7중량부, 보리쌀 1 내지 3중량부, 찰수수 1 내지 3중량부, 율무 1 내지 3중량부, 메밀 1 내지 3중량부, 서리태 1 내지 3중량부, 팥 1 내지 3중량부, 약콩 1 내지 3중량부 및 밀쌀 1 내지 3중량부로 이루어진 혼합물;
d) 백미 48 내지 51중량부, 찰보리 3내지 7중량부, 찹쌀 13 내지 17중량부, 찰현미 8 내지 12중량부, 찰흑미 3 내지 7중량부, 보리쌀 1 내지 3중량부, 찰수수 1 내지 3중량부, 율무 1 내지 3중량부, 메밀 1 내지 3중량부, 서리태 1 내지 3중량부, 팥 1 내지 3중량부, 약콩 1 내지 3중량부 및 밀쌀 1 내지 3중량부로 이루어진 혼합물;
e) 현미 50 내지 60중량부, 찰보리 8 내지 12중량부, 찹쌀 16 내지 21중량부, 찰현미 13 내지 17중량부 및 찰흑미 2 내지 4중량부로 이루어진 혼합물;
f) 백미 50 내지 60중량부, 찰보리 8 내지 12중량부, 찹쌀 16 내지 21중량부, 찰현미 13 내지 17중량부 및 찰흑미 2 내지 4중량부로 이루어진 혼합물;
g) 현미 48 내지 51중량부, 찰보리 4 내지 8중량부, 찹쌀 12 내지 16중량부, 찰현미 5 내지 7중량부, 찰흑미 4 내지 6중량부, 보리쌀 1 내지 3중량부, 찰수수 1 내지 3중량부, 율무 1 내지 3중량부, 메밀 1 내지 3중량부, 서리태 1 내지 3중량부, 팥 1 내지 3중량부, 약콩 1 내지 3중량부, 밀쌀 1 내지 3중량부, 백태 1 내지 3중량부 및 늘보리쌀 1 내지 3중량부로 이루어진 혼합물;
h) 현미 35 내지 45중량부, 찰보리 16내지 24중량부, 찰현미 8 내지 12중량부, 찰흑미 8 내지 12중량부, 율무 8 내지 12중량부 및 약콩 8 내지 12중량부로 이루어진 혼합물; 및
i) 현미 15 내지 25중량부, 찰보리 8내지 12중량부, 찹쌀 15 내지 25중량부, 찰현미 8 내지 12중량부, 율무 8 내지 12중량부, 메밀 8 내지 12중량부, 약콩 8 내지 12중량부 및 밀쌀 8 내지 12중량부로 이루어진 혼합물.
The method of claim 1,
The mixture of rice and grains is fermented mixed grain production method characterized in that the mixture selected from a) to f).
a) 48 to 51 parts by weight of brown rice, 4 to 6 parts by weight of barley, 13 to 17 parts by weight of glutinous rice, 8 to 12 parts by weight of brown rice, 4 to 6 parts by weight of brown rice, 1.5 to 1.7 parts by weight of barley rice, 1.5 to 1.7 weight of wheat water 1.5 parts by weight 1.5 to 1.7 parts by weight, 1.5 to 1.7 parts by weight of buckwheat, 1.5 to 1.7 parts by weight of frost, 1.5 to 1.7 parts by weight of red beans, 1.5 to 1.7 parts by weight of weak beans, 1.5 to 1.7 parts by weight of wheat, 1.5 to 1.7 parts by weight of white rice And a mixture consisting of 1.5 to 1.7 parts by weight of barley rice;
b) 48 to 51 parts by weight of white rice, 4 to 6 parts by weight of barley, 13 to 17 parts by weight of glutinous rice, 8 to 12 parts by weight of brown rice, 4 to 6 parts by weight of black rice, 1.5 to 1.7 parts by weight of barley rice, 1.5 to 1.7 weight of wheat water 1.5 parts by weight 1.5 to 1.7 parts by weight, 1.5 to 1.7 parts by weight of buckwheat, 1.5 to 1.7 parts by weight of frost, 1.5 to 1.7 parts by weight of red beans, 1.5 to 1.7 parts by weight of weak beans, 1.5 to 1.7 parts by weight of wheat, 1.5 to 1.7 parts by weight of white rice And a mixture consisting of 1.5 to 1.7 parts by weight of barley rice;
c) 48 to 51 parts by weight brown rice, 3 to 7 parts by weight of barley, 13 to 17 parts by weight of glutinous rice, 8 to 12 parts by weight of brown rice, 3 to 7 parts by weight of black rice, 1 to 3 parts by weight of barley rice, 1 to 3 parts by weight A mixture of 1 to 3 parts by weight, 1 to 3 parts by weight of buckwheat, 1 to 3 parts by weight, 1 to 3 parts by weight of frost, 1 to 3 parts by weight of red beans, 1 to 3 parts by weight of soybeans and 1 to 3 parts by weight of wheat;
d) 48 to 51 parts by weight of white rice, 3 to 7 parts by weight of barley, 13 to 17 parts by weight of glutinous rice, 8 to 12 parts by weight of brown rice, 3 to 7 parts by weight of black rice, 1 to 3 parts by weight of barley rice, 1 to 3 weight of wheat water A mixture of 1 to 3 parts by weight, 1 to 3 parts by weight of buckwheat, 1 to 3 parts by weight, 1 to 3 parts by weight of frost, 1 to 3 parts by weight of red beans, 1 to 3 parts by weight of soybeans and 1 to 3 parts by weight of wheat;
e) a mixture consisting of 50 to 60 parts by weight of brown rice, 8 to 12 parts by weight of barley, 16 to 21 parts by weight of glutinous rice, 13 to 17 parts by weight of brown rice, and 2 to 4 parts by weight of brown black rice;
f) a mixture of 50 to 60 parts by weight of white rice, 8 to 12 parts by weight of barley, 16 to 21 parts by weight of glutinous rice, 13 to 17 parts by weight of brown rice, and 2 to 4 parts by weight of waxy black rice;
g) 48 to 51 parts by weight of brown rice, 4 to 8 parts by weight of barley, 12 to 16 parts by weight of glutinous rice, 5 to 7 parts by weight of brown rice, 4 to 6 parts by weight of black rice, 1 to 3 parts by weight of barley rice, 1 to 3 parts by weight of cornmeal 1 to 3 parts by weight, 1 to 3 parts by weight of buckwheat, 1 to 3 parts by weight, 1 to 3 parts by weight of frost, 1 to 3 parts by weight of red beans, 1 to 3 parts by weight of weak beans, 1 to 3 parts by weight of wheat, 1 to 3 parts by weight of white beans And a mixture consisting of 1 to 3 parts by weight of evergreen barley;
h) a mixture of 35 to 45 parts by weight brown rice, 16 to 24 parts by weight of barley, 8 to 12 parts by weight of brown rice, 8 to 12 parts by weight of black rice, 8 to 12 parts by weight of radish and 8 to 12 parts by weight of soybeans; And
i) 15 to 25 parts by weight brown rice, 8 to 12 parts by weight of barley, 15 to 25 parts by weight of glutinous rice, 8 to 12 parts by weight of brown rice, 8 to 12 parts by weight of barley, 8 to 12 parts by weight of buckwheat, 8 to 12 parts by weight of soybean And a mixture consisting of 8 to 12 parts by weight of wheat.
제 1항에 있어서,
상기 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei)의 개별 종배양은 MRS 액체배지 또는 포도당(glucose), 효모추출물(yeast extract) 및 초산나트륨이 포함된 액체배지를 사용하며, 30 내지 38℃에서 24 내지 48시간 이루어지고,
상기 사카로마이세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae)의 개별 종배양은 포도당(glucose), 효모추출물(yeast extract) 및 말트추출물(Malt extract)이 포함된 액체배지를 사용하며, 25 내지 32℃에서 24 내지 48시간 이루어지고,
상기 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)의 개별 종배양은 소고기추출물(beef extract)이 포함된 액체배지를 사용하며, 25 내지 32℃에서 24 내지 48시간 이루어지는 것을 특징으로 하는 발효혼합곡 제조방법.
The method of claim 1,
The individual species culture of the Lactobacillus paracasei ( Mactobacillus paracasei ) is a liquid medium containing MRS liquid glucose or glucose (glucose), yeast extract (yeast extract) and sodium acetate, 24 to 48 at 30 to 38 ℃ Time is done,
The individual species culture of Saccharomyces cerevisiae ( Saccharomyces cerevisiae ) is a liquid medium containing glucose, yeast extract (yeast extract) and malt extract (Malt extract), 24 to 25 to 32 ℃ To 48 hours,
The individual species culture of Bacillus subtilis ( Bacillus subtilis ) using a liquid medium containing beef extract (beef extract), fermented mixed grain production method, characterized in that made for 24 to 48 hours at 25 to 32 ℃.
삭제delete 제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항의 제조방법으로 제조된 발효혼합곡.
Fermented mixed grains prepared by the method of any one of claims 1 to 3.
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