KR101172839B1 - Method of Preparing of Coated Lactic Acid Bacteria and Method of Preparing of Boiled Meats for a Bossam comprising the Coated Lactic Acid Bacteria - Google Patents

Method of Preparing of Coated Lactic Acid Bacteria and Method of Preparing of Boiled Meats for a Bossam comprising the Coated Lactic Acid Bacteria Download PDF

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Abstract

PURPOSE: A method for manufacturing lactic acid bacteria coated with carnauba wax or olive wax is provided to ensure useful activation of the bacteria in the human body. CONSTITUTION: A method for manufacturing coated acid bacteria comprises: a step of inoculating lactic acid bacteria to a MRS medium and culturing to 10^10 -10^11 CFU/ml of lactic acid bacteria; a step of collecting the lactic acid bacteria by centrifugation and washing with a saline solution; a step of adding skim milk stabilizing agent to the lactic acid bacteria and stirring by 10^10 CFU/ml of the lactic acid bacteria; a step of freezing the lactic acid bacteria and vacuum-drying; and a step of pulverizing the lactic acid bacteria and dispersing in a floating state; a step of dissolving carnauba wax or olive wax at 90-130 Deg.C. and filtering with a screen filter to prepare fats and fatty oils for coating; a step of filtering by a microfilter and heating at 70-110 Deg.C. to prepare pressed air for transferring; a step of transferring the fats and fatty oils to a tube for transferring coating agent; and a step of spraying the fats and fatty oils to the lactic acid bacteria powder of floating state for coating.

Description

코팅 유산균의 제조방법 및 상기 코팅 유산균을 포함하는 보쌈용 수육의 제조방법{Method of Preparing of Coated Lactic Acid Bacteria and Method of Preparing of Boiled Meats for a Bossam comprising the Coated Lactic Acid Bacteria}Method of Preparing Lactic Acid Bacteria and Method of Preparing Lactic Acid Bacteria containing Coated Lactic Acid Bacteria

본 발명은 유산균이 열, 위액, 담즙 등의 외부 환경으로부터 보호되는 코팅 유산균의 제조방법, 상기 방법에 의해 제조된 코팅 유산균, 상기 코팅 유산균을 함유하는 보쌈용 수육의 제조방법 및 상기 방법에 의해 제조된 보쌈용 수육에 관한 것이다.The present invention is a method for producing a coated lactic acid bacteria, lactic acid bacteria is protected from the external environment such as heat, gastric juice, bile, coated lactic acid bacteria prepared by the above method, a method for producing a boiled beef for containing the coated lactic acid bacteria and prepared by the method It is about the fleshed beef noodle.

일반적으로, 유산균은 장에 정착하여 장관운동 활성화, 유해균 억제, 비타민 및 면역증강 물질 촉진 등 다양한 생리활성 효과를 발휘하는데, 인체의 구조상 사람이 유산균 섭취 시 장까지 도달하기까지에는 위를 거치게 되어 있어 위에서 분비되는 위산으로 인해 유산균이 사멸하여 유산균 본래의 생리활성 기능을 발휘하지 못하게 되는 경우가 많다.In general, lactic acid bacteria settle in the intestines and exert various physiological effects such as activating intestinal motility, inhibiting harmful bacteria, promoting vitamins and immune-enhancing substances, and the human body goes through the stomach until reaching the intestines when ingesting lactic acid bacteria. Gastric acid secreted from the stomach is lactic acid bacteria are often killed, lactic acid bacteria are often unable to exert the original biological activity.

특히, 종래의 비코팅 유산균 원말의 제조공정은 유산균 발효, 균체 회수, 동결 건조의 과정으로 이루어지는데, 이러한 비코팅 유산균 분말은 공기, 수분, 온도조건에 민감하게 반응하므로 저장 및 유통안정성과 2차 제품 제조시의 가공안정성을 확보하기에 어려움이 있다. 또한, 사람 및 동물의 섭취 시에는 위산 및 담즙산과의 직접적인 접촉에 의해 급격히 사멸하므로 장내정착성 및 유산균 고유의 효능, 효과를 보장할 수 없는 문제점이 있었다.In particular, the conventional uncoated lactic acid bacteria production process of the raw material consists of the process of fermentation of lactic acid bacteria, cell recovery, freeze-drying, these uncoated lactic acid bacteria powder is sensitive to air, moisture, temperature conditions, storage and distribution stability and secondary It is difficult to secure processing stability in manufacturing products. In addition, when ingested in humans and animals, there is a problem in that it is rapidly killed by direct contact with gastric acid and bile acid, thereby preventing intestinal fixation and inherent efficacy and effect.

이러한 문제점을 해결하기 위해 유산균을 코팅하여 사용하게 되었는데, 유산균 코팅 기술로는 대한민국 공개특허 제2002-0069862호에서는 유산균 제품에 단백질성분을 코팅하는 단백질 코팅 유산균의 제조방법에 대해 개시되어 있고, 대한민국 공개특허 제2002-0069863호에는 유산균에 단백질과 다당류를 이중 코팅하는 단백질 및 다당류를 이용한 이중코팅 유산균 원말의 제조방법에 대해 개시되어 있으며, 대한민국 공개특허 제2009-0082035호에는 단백질, 다당류 및 나노입자로 3중 코팅된 유산균의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 3중 코팅된 유산균 및 이를 포함하는 제품에 대해 개시되어 있고, 대한민국 공개특허 제2006-0118037호에는 김치 발효액을 구아검과 젤란검으로 1차 코팅, 카제인 단백질을 가해 2차 코팅 처리하고 동결 건조시킨 다음 다시마분말을 액화시켜 만든 용액을 가지고 3차 코팅 처리하는 기술이 개시되어 있다.
In order to solve this problem, the lactic acid bacteria were coated and used. As a lactic acid bacterium coating technology, Korean Laid-Open Patent Publication No. 2002-0069862 discloses a method for preparing a protein-coated lactic acid bacterium for coating a protein component on a lactic acid bacteria product. Patent No. 2002-0069863 discloses a method for preparing double-coated lactic acid bacteria using proteins and polysaccharides that double coat proteins and polysaccharides on lactic acid bacteria, and Korean Patent Publication No. 2009-0082035 for proteins, polysaccharides and nanoparticles Method for producing a tri-coated lactic acid bacteria, tri-coated lactic acid bacteria prepared by the above method and a product comprising the same are disclosed, Korean Patent Laid-Open No. 2006-0118037 primary kimchi fermentation broth with guar gum and gellan gum Coating, casein protein, secondary coating, lyophilization and kelp powder It has a screen made by solution discloses a technique for handling the third coating.

그러나, 본 발명자들은 상술한 코팅 기술과 달리 간단한 방법으로 코팅 유산균을 제조하고, 상기 코팅 유산균이 열, 위액, 담즙 등의 외부 환경으로부터 보호되어 상기 코팅 유산균을 함유하는 보쌈용 수육을 제조하더라도 체내에서 유산균을 이용할 수 있는 기술 개발의 필요성을 인식하였다.
However, the present inventors produce coated lactobacillus by a simple method, unlike the above-described coating technique, and the coated lactobacillus is protected from the external environment such as heat, gastric juice, bile, and the like, even if it is used to prepare a boiled pork meat containing the coated lactobacillus. We recognized the need to develop technology that can use lactic acid bacteria.

대한민국 공개특허 제2002-0069862호Republic of Korea Patent Publication No. 2002-0069862 대한민국 공개특허 제2002-0069863호Republic of Korea Patent Publication No. 2002-0069863 대한민국 공개특허 제2009-0082035호Republic of Korea Patent Publication No. 2009-0082035 대한민국 공개특허 제2006-0118037호Republic of Korea Patent Publication No. 2006-0118037

본 발명자들은 체내에서 우수한 생존율을 보이고 열에 대해서도 안정성(stability)을 보일 수 있는 코팅 유산균 및 이를 이용한 보쌈용 수육을 개발하고자 노력하였다. 그 결과, 카나우바 왁스(carnauba wax) 또는 올리브 왁스(olive wax)를 부유 상태의 유산균 분말에 분사하여 코팅을 한 결과, pH 2.1의 인공위액에서, 0.5%의 옥스갈(oxgall)용액에서 그리고, 40℃, 상대습도 70%에서 내산성 및 내담즙성 그리고 가속시험에 대해 우수한 생존율을 보였고, 상기 코팅된 유산균을 염지액에 포함시켜 보쌈용 수육을 제조한 결과, 1.5x104-1.7x104 cfu/g의 생존율을 보여 체내에서 유용할 활성을 보일 것으로 기대함으로써, 본 발명의 완성하였다.The present inventors endeavored to develop a coating lactic acid bacterium that can show excellent survival rate in the body and show stability against heat, and bosing for bossam using the same. As a result, carnauba wax or olive wax was sprayed onto the lactobacillus powder in a suspended state and coated, resulting in 0.5% oxgall solution in artificial gastric juice at pH 2.1, 40 ℃, showed the excellent survival rates for the acid resistance and resistance to bile and an acceleration test at a relative humidity of 70%, by including the coated lactic acid bacteria in the salting solution a result of preparing a suyuk for Bossam, 1.5x10 4 -1.7x10 4 cfu / The present invention was completed by expecting g survival rate to show useful activity in the body.

따라서, 본 발명의 목적은 코팅 유산균의 제조방법을 제공하는데 있다.Accordingly, it is an object of the present invention to provide a method for producing coated lactic acid bacteria.

본 발명의 다른 목적은 상술한 방법으로 제조된 코팅 유산균을 제공하는데 있다.Another object of the present invention to provide a coated lactic acid bacteria prepared by the above-described method.

본 발명의 또 다른 목적은 상술한 코팅 유산균을 함유하는 보쌈용 수육의 제조방법을 제공하는데 있다.Still another object of the present invention is to provide a method of preparing bosaeng meat containing the above-described coated lactic acid bacteria.

본 발명의 다른 목적은 상술한 방법으로 제조된 보쌈용 수육을 제공하는데 있다.
Another object of the present invention is to provide a braised pork meat prepared by the above-described method.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명 및 청구범위에 의해 보다 명확하게 된다.Other objects and advantages of the present invention will become apparent from the following detailed description and claims.

본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 다음의 단계를 포함하는 코팅 유산균의 제조방법을 제공한다: (a) 준비된 유산균 분말을 유동층 혼합을 통해 공기 중에 분산시켜 부유 상태로 준비하는 단계; (b) 카나우바 왁스(carnauba wax) 또는 올리브 왁스(olive wax)를 90-130℃에서 용해하고 스크린필터를 이용하여 여과하여 코팅용 유지를 준비하는 단계; (c) 압축공기를 냉각한 후 마이크로 필터로 여과하고, 이를 70-110℃의 온도로 가열하여 이송용 압축공기를 준비하는 단계; (d) 상기 단계 (c)의 준비된 압축공기를 이용하여 상기 단계 (b)의 여과된 코팅용 유지를 코팅제 이송용 튜브로 이송하는 단계; 및 (e) 상기 단계 (a)의 부유 상태의 유산균 분말에 상기 단계 (d)의 이송된 코팅용 유지를 분사하여 코팅(Coating)하는 단계.
According to one aspect of the present invention, the present invention provides a method for producing a coated lactic acid bacterium comprising the steps of: (a) dispersing the prepared lactic acid bacteria powder in air through fluid bed mixing to prepare in a suspended state; (b) dissolving carnauba wax or olive wax at 90-130 ° C. and filtering using a screen filter to prepare a coating oil; (c) cooling the compressed air and then filtering it with a micro filter, and heating it to a temperature of 70-110 ° C. to prepare compressed air for transportation; (d) transferring the filtered coating oil of step (b) to the coating material delivery tube using the prepared compressed air of step (c); And (e) spraying (Coating) by spraying the transported coating oil of step (d) to the suspended lactic acid powder of step (a).

본 발명자들은 체내에서 우수한 생존율을 보이고 열에 대해서도 안정성(stability)을 보일 수 있는 코팅 유산균 및 이를 이용한 보쌈용 수육을 개발하고자 노력하였다. 그 결과, 카나우바 왁스(carnauba wax) 또는 올리브 왁스(olive wax)를 부유 상태의 유산균 분말에 분사하여 코팅을 한 결과, pH 2.1의 인공위액에서, 0.5%의 옥스갈(oxgall)용액에서 그리고, 40℃, 상대습도 70%에서 내산성 및 내담즙성 그리고 가속시험에 대해 우수한 생존율을 보였고, 상기 코팅된 유산균을 염지액에 포함시켜 보쌈용 수육을 제조한 결과, 1.5x104-1.7x104 cfu/g의 생존율을 보여 체내에서 유용할 활성을 보일 것으로 기대된다.
The present inventors endeavored to develop a coating lactic acid bacterium that can show excellent survival rate in the body and show stability against heat, and bosing for bossam using the same. As a result, carnauba wax or olive wax was sprayed onto the lactobacillus powder in a suspended state and coated, resulting in 0.5% oxgall solution in artificial gastric juice at pH 2.1, 40 ℃, showed the excellent survival rates for the acid resistance and resistance to bile and an acceleration test at a relative humidity of 70%, by including the coated lactic acid bacteria in the salting solution a result of preparing a suyuk for Bossam, 1.5x10 4 -1.7x10 4 cfu / The survival rate of g is expected to show useful activity in the body.

본 발명에 이용되는 유산균은 당업계에 공지된 다양한 유산균을 포함한다. 본 명세서에서 용어 “유산균(lactic acid bacteria)”은 탄수화물 대사의 주산물로서 유산을 생산하는 박테리아 군을 의미한다. 바람직하게는, 본 발명에서 이용되는 유산균은, 락토코커스(Lactococcus), 락토바실러스(Lactobacillus), 류코노스톡(Leuconostoc), 프로리오니박테리움(Propionibacterium), 엔테로코커스(Enterococcus), 비피도박테리움(Bifidobacterium), 스트렙토코커스(Streptococcus) 및 페디오코커스(Pediococcus)로 구성된 군으로부터 선택되는 유산균이다. 보다 바람직하게는, 본 발명에서 이용되는 유산균은 락토바실러스 알리멘타리우스(Lactobacillus alimentarius), 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 델브루엑키(Lactobacillus delbrueckii), 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 류코노스톡 멘센테로이드스(Leuconostoc mensenteroides), 스트렙토코커스 서모필러스(Streptococcus thermophilus), 스트렙토코커스 락티스(Streptococcus lactis), 엔테로코커스 파에시엄(Enterococcus faecium), 엔테로코커스 파에칼리스(Enterococcus faecalis), 비피도박테리엄 비피덤(Bifidobacterium bifidum), 비피도박테리엄 인판티스(Bifidobacterium infantis), 비피도박테리엄 브라베(Bifidobacterium brave) 및 비피도박테리엄 롱검(Bifidobacterium longum)으로 구성된 군으로부터 선택되는 유산균이다. 보다 더 바람직하게는 락토바실러스 알리멘타리우스(Lactobacillus alimentarius), 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 델브루엑키(Lactobacillus delbrueckii), 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus) 또는 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus)이고, 보다 더욱 더 바람직하게는 락토바실러스 카세이 (Lactobacillus casei)이다. Lactic acid bacteria used in the present invention include various lactic acid bacteria known in the art. As used herein, the term “lactic acid bacteria” refers to a group of bacteria that produce lactic acid as the main product of carbohydrate metabolism. Preferably, the lactic acid bacteria used in the present invention, Lactococcus, Lactobacillus, Leuconostoc, Propionibacterium, Enterococcus, Bifidobacterium ( Bifidobacterium), Streptococcus and Pediococcus are lactic acid bacteria selected from the group consisting of. More preferably, the lactic acid bacteria used in the present invention is Lactobacillus alimentarius ( Lactobacillus) alimentarius ), Lactobacillus sakei ), Lactobacillus acidophilus ), Lactobacillus casei ), Lactobacillus gasseri ), Lactobacillus delbrueckii ), Lactobacillus fermentum , Lactobacillus bulgaricus ), Lactobacillus helveticus , Leuconostoc mensenteroides ), Streptococcus thermophilus ), Streptococcus lactis ), Enterococcus faecium ), Enterococcus faecalis ), Bifidobacterium bifidum ), Bifidobacterium infantis ), Bifidobacterium brave ) and Bifidobacterium longum . Even more preferably, Lactobacillus alimentarius ), Lactobacillus sakei ), Lactobacillus acidophilus ), Lactobacillus casei ), Lactobacillus gasseri ), Lactobacillus delbrueckii ), Lactobacillus fermentum , Lactobacillus bulgaricus), or Lactobacillus helveticus (Lactobacillus helveticus), still more preferable is a Lactobacillus Kasei (Lactobacillus casei ).

본 발명에 따르면, 유산균은 상술한 유산균의 1종 또는 1종 이상의 혼합 유산균을 이용할 수 있다.
According to the present invention, lactic acid bacteria may use one or more kinds of mixed lactic acid bacteria of the above-mentioned lactic acid bacteria.

이하, 코팅 유산균을 제조하기 위한 본 발명의 방법을 단계별로 상세하게 설명하면 다음과 같다:Hereinafter, described in detail step by step the method of the present invention for producing a coating lactic acid bacteria:

(a) 준비된 유산균 분말의 부유 상태로 준비 (a) preparation of the prepared lactic acid bacteria powder in a suspended state

우선, 본 발명의 방법은 준비된 유산균 분말을 유동층 혼합을 통해 공기 중에 분산시켜 부유 상태로 준비하는 단계를 거친다.First, the method of the present invention is prepared by dispersing the prepared lactic acid bacteria powder in air through fluid bed mixing to prepare a suspended state.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 단계 (a)의 유산균 분말의 준비는 다음의 단계를 포함한다:According to a preferred embodiment of the invention, the preparation of the lactic acid bacteria powder of step (a) comprises the following steps:

(a-1) 유산균의 배양 (a-1) Culture of Lactic Acid Bacteria

먼저, 유산균을 MRS 배지에 접종하여 유산균의 농도가 1010-1011 CFU/㎖가 되도록 배양한다.First, the lactic acid bacteria are inoculated in MRS medium and cultured so that the concentration of lactic acid bacteria is 10 10 -10 11 CFU / mL.

본 발명에서 유산균을 배양하기 위한 배지는 당업계에 공지된 다양한 배지를 이용할 수 있으며, 예컨대 MRS 브로스(deMan Rogosa Sharpe broth), APT(All Purpose with Tween) 배지 또는 BHI(Brain Heart Infusion) 배지를 이용할 수 있으나, 가장 바람직하게는 MRS 브로스 배지이다.The medium for culturing the lactic acid bacteria in the present invention may use a variety of media known in the art, such as MRS broth (deMan Rogosa Sharpe broth), APT (All Purpose with Tween) medium or BHI (Brain Heart Infusion) medium But most preferably MRS broth medium.

이러한 배지에서 유산균을 30-37℃에서 12-30시간 동안 배양하여, 유산균의 농도가 1010-1011 CFU/㎖가 되도록 한다.In this medium, lactic acid bacteria were incubated at 30-37 ° C. for 12-30 hours, so that the concentration of lactic acid bacteria was 10 10 -10 11 CFU / mL.

상기 배지에 포함되는 탄소원으로 적합한 것은, 글루코오스, 수크로스, 말토오스, 프럭토오스, 락토오스, 자일로오스, 갈락토오스, 아라비노스 및 그의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되며, 바람직하게는, 수크로스, 프럭토스, 글루코오스, 갈락토오스, 아라비노스 및 락토오스이고, 보다 바람직하게는 수크로스, 프럭토스 및 글루코스이며, 가장 바람직하게는 글루코스이다.Suitable carbon sources included in the medium are selected from the group consisting of glucose, sucrose, maltose, fructose, lactose, xylose, galactose, arabinose and combinations thereof, preferably sucrose, fructose , Glucose, galactose, arabinose and lactose, more preferably sucrose, fructose and glucose, and most preferably glucose.

탄소원의 사용량은 바람직하게는 배지의 0.1-20 중량% 이고, 보다 바람직하게는 0.5-10 중량%이며, 가장 바람직하게는 1-3 중량%이다.
The amount of carbon source used is preferably 0.1-20% by weight of the medium, more preferably 0.5-10% by weight, most preferably 1-3% by weight.

(a-2) 상기 배양된 유산균의 수집 및 생리식염수로 세척 (a-2) Collection of the cultured lactic acid bacteria and washing with physiological saline

그 다음, 상기 단계 (a-1)의 배양된 유산균을 원심 분리하여 유산균을 수집하고 생리식염수로 세척한다.Next, the lactic acid bacteria cultured in step (a-1) are centrifuged to collect lactic acid bacteria and washed with physiological saline.

구체적으로, 6,000 rpm으로 10분간 원심 분리하여 배양된 유산균을 수집하였으며, 이를 생리식염수(0.8% 염화나트륨)로 두 번 세척한다.Specifically, the cultured lactic acid bacteria were collected by centrifugation at 6,000 rpm for 10 minutes and washed twice with physiological saline (0.8% sodium chloride).

미생물의 배양의 상세한 내용은 Kubitschek, H. E., Introduction to Research with Continuous Cultures. Englewood Cliffs, N.J.:Prentice-Hall, Inc., 1970; Mandelstam, J., et al., Biochemistry of Bacterial Growth, 3rd ed. Oxford:Blackwell, 1982; Meynell, G.G., et al., Theory and Practice in Experimental Bacteriology, 2nd ed. Cambridge: Cambridge University Press, 1970; Gerhardt, P., ed., Manual of Methods for General Bacteriology , Washington: Am. Soc. Microbiol, 1981에 개시되어 있으며, 상기 문헌들은 본 명세서에 참조로서 삽입된다.
For details of the culture of microorganisms, see Kubitschek, HE, Introduction. to Research with Continuous Cultures . Englewood Cliffs, NJ: Prentice-Hall, Inc., 1970; Mandelstam, J., et al., Biochemistry of Bacterial Growth , 3rd ed. Oxford: Blackwell, 1982; Meynell, GG, et al., Theory and Practice in Experimental Bacteriology , 2nd ed. Cambridge: Cambridge University Press, 1970; Gerhardt, P., ed., Manual of Methods for General Bacteriology , Washington : Am. Soc. Microbiol, 1981, which is incorporated herein by reference.

(a-3) 상기 세척된 유산균에 탈지유 안정제의 첨가 및 교반 (a-3) Addition and stirring of skim milk stabilizer to the washed lactic acid bacteria

그리고, 본 발명의 방법은 유산균의 농도가 1010 CFU/㎖가 되도록 상기 단계 (a-2)의 세척된 유산균에 탈지유 안정제를 첨가하고 교반한다.
In the method of the present invention, a skim milk stabilizer is added to the washed lactic acid bacteria of step (a-2) and stirred so that the concentration of lactic acid bacteria is 10 10 CFU / ml.

(a-4) 상기 (a-3)의 결과물인 유산균의 동결 및 진공 건조 (a-4) Freezing and vacuum drying of the lactic acid bacteria resulting from (a-3)

그 다음, 상기 단계 (a-3)의 결과물인 유산균을 동결하고 최종 수분함량이 2.0-3.0%가 되도록 진공상태에서 건조한다.Then, the resulting lactic acid bacteria of step (a-3) are frozen and dried in vacuo so that the final moisture content is 2.0-3.0%.

구체적으로, 배양된 유산균을 -42℃에서 동결한 후, 진공상태에서 18℃에서 진공 건조하여 최종 수분함량이 2.0-3.0%가 되도록 한다.Specifically, the cultured lactic acid bacteria are frozen at -42 ° C, and then vacuum dried at 18 ° C in a vacuum state so that the final moisture content is 2.0-3.0%.

상기의 수분함량이 3.0%를 초과한 경우, 입자화되지 않고, 수분함량이 2.0% 미만인 경우에는 유산균이 쉽게 사멸하는 단점이 있다.
If the moisture content is more than 3.0%, the particles are not granulated, when the moisture content is less than 2.0% there is a disadvantage that the lactic acid bacteria are easily killed.

(a-5) 상기 동결 및 진공 건조된 유산균의 분쇄 (a-5) grinding of the freeze and vacuum dried lactic acid bacteria

마지막으로, 상기 단계 (a-4) 동결 및 진공 건조된 유산균을 60-100 메쉬의 망이 달린 분쇄기를 이용하여 분쇄한다.Finally, the step (a-4) freeze and vacuum dried lactic acid bacteria are ground using a grinder with a mesh of 60-100 mesh.

바람직한 구현예로서, 동결 및 진공 건조된 유산균 고형분을 80 메쉬의 망이 달린 분쇄기를 이용하여 입자를 고르게 하여 총 40kg(수득률 : 20%)의 유산균 분말을 수득한다.In a preferred embodiment, the frozen and vacuum dried lactic acid bacteria solids are uniformly dispersed using an 80 mesh net grinder to obtain a total of 40 kg (yield: 20%) of lactic acid bacteria powder.

이러한 방법으로 코팅재료로 이용되는 유산균 분말을 제조할 수 있다.
In this way it can be produced lactic acid bacteria powder used as a coating material.

(b) 코팅용 유지의 준비 (b) Preparation of oils for coating

그 다음, 본 발명의 방법은 카나우바 왁스(carnauba wax) 또는 올리브 왁스(olive wax)를 90-130℃에서 용해하고 스크린필터를 이용하여 여과하여 코팅용 유지를 준비한다.The method of the present invention then dissolves carnauba wax or olive wax at 90-130 ° C. and filtered using a screen filter to prepare a coating oil.

본 명세서에서 용어 “코팅(coating)”은 물질의 외부를 둘러싸는 것을 말하는 것으로서, 특정 조건하에서 조절된 속도로 코어물질(내용물)을 방출할 수 있도록 코어물질의 외부를 피복하는 것을 의미하고, 특히 본 발명에서는 코어물질인 유산균이 열, 위액, 담즙 등의 외부 환경으로부터 보호되기 위한 목적으로 실시한다.As used herein, the term “coating” refers to surrounding the exterior of the material, and means covering the exterior of the core material to release the core material (content) at a controlled rate under certain conditions, in particular In the present invention is carried out for the purpose of protecting the core material lactic acid bacteria from the external environment such as heat, gastric juice, bile.

이러한 코팅을 위하여 본 발명에서는 유지를 채택하였으며, 가장 바람직하게는 카나우바 왁스(carnauba wax) 또는 올리브 왁스(olive wax)를 이용한다.For this coating, the present invention employs fats and oils, most preferably using carnauba wax or olive wax.

바람직한 구현예로서, 카나우바 왁스(carnauba wax) 또는 올리브 왁스(olive wax)를 110℃에서 완전히 용해하여 80 메쉬 스크린필터로 여과하여 준비한다.
In a preferred embodiment, carnauba wax or olive wax is completely dissolved at 110 ° C. and prepared by filtration with an 80 mesh screen filter.

(c) 이송용 압축공기의 준비 (c) Preparation of compressed air for transportation

그리고, 본 발명의 방법은 압축공기를 냉각한 후 마이크로 필터로 여과하고, 이를 70-110℃의 온도로 가열하여 이송용 압축공기를 준비한다.In the method of the present invention, the compressed air is cooled and then filtered by a micro filter, and heated to a temperature of 70-110 ° C. to prepare compressed air for transportation.

구체적으로, 압축공기를 전(前)냉각 및 본(本)냉각하고 1㎛ 및 0.1㎛의 마이크로필터를 이용하여 순차적으로 여과한 다음, 여과한 압축공기를 90℃에서 가열한 다음 코팅제 이송용 2중 튜브로 이동시킨다.
Specifically, pre-cooling and pre-cooling the compressed air, and sequentially filtered by using a micro filter of 1㎛ and 0.1㎛, and then heated the filtered compressed air at 90 ℃ 2 2 Move to the tube.

(d) 상기 준비된 압축공기를 이용하여 상기 여과된 코팅용 유지를 코팅제 이송용 튜브로 이송 (d) transfer the filtered coating oil to a tube for coating agent transfer using the prepared compressed air

이어, 본 발명의 방법은 상기 단계 (c)의 준비된 압축공기를 이용하여 상기 단계 (b)의 여과된 코팅용 유지를 코팅제 이송용 튜브로 이송하는 단계를 거친다.Then, the method of the present invention is subjected to the step of transferring the filtered coating oil of step (b) to the coating tube for transport using the compressed air prepared in step (c).

구체적으로 준비한 여과된 카나우바 왁스(carnauba wax) 또는 올리브 왁스(olive wax)를 각각 이송용 2중 튜브에 주입하여 이송용 압축공기에 의해 유산균 분말이 있는 챔버로 이송시킨다.
Specifically, the prepared carnauba wax or olive wax is injected into the transfer double tube and transferred to the chamber containing the lactic acid bacteria powder by the transfer compressed air.

(e) 상기 유산균 분말에 상기 코팅용 유지를 분사하여 코팅( coating ) (e) The coating by spraying the coating oil on the lactic acid bacteria powder ( coating )

마지막으로, 본 발명의 방법은 상기 단계 (a)의 부유 상태의 유산균 분말에 상기 단계 (d)의 이송된 코팅용 유지를 분사하여 코팅(coating)하는 단계를 포함한다.Finally, the method of the present invention comprises the step of spraying and coating (coating) the oil for the transferred coating of step (d) to the suspended lactic acid powder of step (a).

구체적으로, 유산균 분말은 유동층 혼합을 통해 유산균의 미립자가 공기 중에 분산되어 부유 상태를 유지하고, 이송된 왁스를 60분 동안 분사하여 유산균 분말의 외부에 유지를 코팅한다.Specifically, the lactic acid bacteria powder is dispersed in the air through the fluidized bed mixing to maintain the suspended state, and the sprayed wax for 60 minutes to coat the oil on the outside of the lactic acid bacteria powder.

이러한 방법으로 코팅된 유산균 분말은 코팅 수율이 95% 이상의 결과를 얻었다.The lactic acid bacteria powder coated in this way yielded a coating yield of 95% or more.

본 발명의 다른 바람직한 구현예에 따르면, 상기 단계 (e) 코팅용 유지는 코팅 유산균의 총 중량을 기준으로 하여 20-40 중량%로 포함하고, 보다 바람직하게는 25-35 중량%이며, 가장 바람직하게는 최종 제조된 코팅 유산균 분말에 대하여 코팅용 유지(왁스)가 30 중량%가 되도록 코팅된다.
According to another preferred embodiment of the present invention, the step (e) oil for coating comprises 20-40% by weight based on the total weight of the coating lactic acid bacteria, more preferably 25-35% by weight, most preferably Preferably, the coating oil (wax) is coated to 30% by weight relative to the final prepared coating lactic acid bacteria powder.

이러한 방법으로 제조된 코팅 유산균은 실시예에서 명확히 입증된 바와 같이, pH 2.1의 인공위액에서, 0.5%의 옥스갈(oxgall)용액에서 그리고, 40℃, 상대습도 70%에서 내산성 및 내담즙성 그리고 가속시험에 대해 우수한 생존율을 보였다.
The coated lactic acid bacteria produced in this way are acid and bile resistant and in acidic solution at pH 2.1, in 0.5% oxgall solution and at 40 ° C., 70% relative humidity, as clearly demonstrated in the examples. Excellent survival rate was shown for the accelerated test.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상술한 본 발명의 방법에 의해 제조된 코팅 유산균을 제공한다.According to another aspect of the present invention, the present invention provides a coated lactic acid bacteria produced by the method of the present invention described above.

본 발명의 코팅 유산균은 상술한 본 발명의 방법에 의해 제조된 것으로서, 이 둘 사이에 공통된 내용은 반복 기재에 따른 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여, 그 기재를 생략한다.
The coated lactic acid bacteria of the present invention are prepared by the above-described method of the present invention, and the contents common between the two are omitted in order to avoid excessive complexity of the specification according to the repeated description.

본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 다음의 단계를 포함하는 보쌈용 수육의 제조방법을 제공한다: (ⅰ) 상술한 본 발명의 방법으로 제조된 코팅 유산균을 준비하는 단계; (ⅱ) 상기 단계 (ⅰ)의 코팅 유산균, 정제염, 정백당, L-글루타민산나트륨, 마늘분말, 양파분말, 후추분말, 포도당, 소주 및 정제수를 혼합하여 염지액을 준비하는 단계; (ⅲ) 상기 단계 (ⅱ)의 염지액에 돈육을 침지하여 숙성시킨 다음 돈육 표면의 수분을 건조시키는 단계; 및 (ⅳ) 상기 단계 (ⅲ)의 결과물인 돈육을 90-100℃의 물에서 가열하는 단계.
According to still another aspect of the present invention, the present invention provides a method for producing a boiled pork meat, comprising the steps of: (i) preparing a coated lactic acid bacterium prepared by the method of the present invention; (Ii) preparing a salt solution by mixing the coated lactic acid bacteria, purified salt, white sugar, sodium L-glutamate, garlic powder, onion powder, pepper powder, glucose, shochu, and purified water of step (iii); (Iii) immersing the pork in the salt solution of step (ii) to mature and then drying the moisture on the surface of the pork; And (iii) heating the pork resulting from the step (iii) in water at 90-100 ° C.

이하, 보쌈용 수육을 제조하기 위한 본 발명의 방법을 단계별로 상세하게 설명하면 다음과 같다:Hereinafter, the step-by-step detail of the method of the present invention for producing a beef meat for bossam as follows:

(ⅰ) 코팅 유산균의 준비 (Iii) Preparation of coated lactic acid bacteria

우선, 본 발명의 방법은 상술한 본 발명의 방법으로 제조된 코팅 유산균을 준비한다.First, the method of the present invention prepares the coated lactic acid bacteria prepared by the method of the present invention described above.

보쌈용 수육에 이용되는 코팅 유산균은 상술한 본 발명의 방법에 의해 제조된 것으로서, 이 둘 사이에 공통된 내용은 반복 기재에 따른 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여, 그 기재를 생략한다.
The coated lactic acid bacteria used in the flesh for the sacks are manufactured by the method of the present invention described above, and the contents common between the two are omitted in order to avoid excessive complexity of the specification according to the repeated description.

(ⅱ) 염지액의 준비 ( Ii ) preparation of dye solution

그 다음, 본 발명의 방법은 상기 단계 (ⅰ)의 코팅 유산균, 정제염, 정백당, L-글루타민산나트륨, 마늘분말, 양파분말, 후추분말, 포도당, 소주 및 정제수를 혼합하여 염지액을 준비한다.Then, the method of the present invention is to prepare a salt solution by mixing the coating lactic acid bacteria, purified salt, white sugar, L- glutamate, garlic powder, onion powder, pepper powder, glucose, shochu and purified water of the above step (iii).

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 염지액은 정제수 100 중량부에 대하여 코팅 유산균 5-50 중량부, 정제염 5-20 중량부, 정백당 5-20 중량부, L-글루타민산나트륨 5-15 중량부, 마늘분말 15-35 중량부, 양파분말 1-15 중량부, 후추분말 0.5-5 중량부, 포도당 1-10 중량부 및 소주 5-15 중량부를 포함하고, 보다 바람직하게는 정제수 100 중량부에 대하여 코팅 유산균 10-48 중량부, 정제염 7-17 중량부, 정백당 7-17 중량부, L-글루타민산나트륨 6-13 중량부, 마늘분말 17-33 중량부, 양파분말 3-12 중량부, 후추분말 1-4 중량부, 포도당 2-7 중량부 및 소주 7-13 중량부를 포함하며, 보다 더 바람직하게는 정제수 100 중량부에 대하여 코팅 유산균 15-46 중량부, 정제염 8-13 중량부, 정백당 8-13 중량부, L-글루타민산나트륨 7-10 중량부, 마늘분말 19-33 중량부, 양파분말 4-9 중량부, 후추분말 1-3 중량부, 포도당 3-6 중량부 및 소주 8-12 중량부를 포함한다.According to a preferred embodiment of the present invention, the salt solution is based on 100 parts by weight of purified water 5-50 parts by weight of coated lactic acid bacteria, 5-20 parts by weight of purified salt, 5-20 parts by weight per white spirit, 5-15 parts by weight of sodium L- glutamate 15-35 parts by weight of garlic powder, 1-15 parts by weight of onion powder, 0.5-5 parts by weight of pepper powder, 1-10 parts by weight of glucose and 5-15 parts by weight of soju, more preferably 100 parts by weight of purified water 10-48 parts by weight of coated lactic acid bacteria, 7-17 parts by weight of refined salt, 7-17 parts by weight per white sugar, 6-13 parts by weight of sodium L-glutamate, 17-33 parts by weight of garlic powder, 3-12 parts by weight of onion powder, pepper 1-4 parts by weight of powder, 2-7 parts by weight of glucose and 7-13 parts by weight of soju, and even more preferably 15-46 parts by weight of coated lactic acid bacteria, 8-13 parts by weight of purified salt, and white sugar per 100 parts by weight of purified water. 8-13 parts by weight, sodium L- glutamate 7-10 parts by weight, garlic powder 19-33 parts by weight, onion powder 4-9 parts by weight, pepper It includes words 1-3 parts by weight, 3-6 parts by weight of glucose, and 8-12 parts by weight of shochu.

상기 염지액에 성분들이 상기 함량을 가지는 경우에 가열 시에도 체내에서 활성을 보일 수 있는 유산균의 생존율을 나타내고, 보쌈 수육의 맛 및 향 등에 영향을 주어 보쌈용 수육의 전체적인 기호도가 우수한 효과를 보인다.When the components have the content in the salt solution shows the survival rate of lactic acid bacteria that can be active in the body even when heated, affecting the taste and aroma of Bossa beef, the overall acceptability of Bossa meat shows excellent effects.

상기 염지액에 이용되는 마늘분말, 양파분말 및 후추분말은 당업계에 공지된 다양한 방법으로 물리적으로 잘게 부수는 예컨대, 전단(shearing), 밀링(milling) 또는 그라인딩방법을 포함하고, 밀, 나이프 커터 또는 믹서기를 이용하여 분말로 제조하여 이용할 수 있다.
Garlic powder, onion powder and pepper powder used in the salt solution include, for example, shearing, milling or grinding methods that are physically crushed by various methods known in the art, and include wheat and knife cutters. Alternatively, the powder may be prepared using a blender.

(ⅲ) 상기 염지액에 돈육의 침지 및 숙성 그리고 돈육 표면의 수분 건조 (Ⅲ) drying of the water-immersing and aging of pork and pork surface to the curing solution

그 다음, 본 발명의 방법은 상기 단계 (ⅱ)의 염지액에 돈육을 침지하여 숙성시킨 다음 돈육 표면의 수분을 건조시키는 단계를 거친다.Then, the method of the present invention is subjected to the step of immersing the pork in the saline solution of step (ii) to mature and then drying the moisture on the surface of the pork.

구체적으로, 상기 염지액에 돈육(삼겹살) 15 kg을 2시간 동안 침지하여 숙성을 시킨 후 실온에서 30분 동안 방치하여 돈육 표면의 수분을 건조한다.
Specifically, 15 kg of pork (samgyeopsal) immersed in the salt solution for 2 hours to mature, and then left for 30 minutes at room temperature to dry the moisture on the surface of the pork.

(ⅳ) 상기 단계 (ⅲ)의 결과물인 돈육의 가열 (Iii) heating the pork as a result of step (iii)

마지막으로, 본 발명의 방법은 상기 단계 (ⅲ)의 결과물인 돈육을 90-100℃의 물에서 가열하는 단계를 포함한다.Finally, the method of the present invention comprises heating the resulting pork from step (iii) in water at 90-100 ° C.

구체적으로, 본 발명의 방법은 수분을 건조시킨 상기 돈육을 90-100℃의 물에서 상태를 보면서 약 90분 정도 가열하여 보쌈용 수육을 제조한다.Specifically, the method of the present invention is heated to about 90 minutes while watching the state in the water of the dried pork in the water of 90-100 ℃ to prepare a braised beef meat.

이러한 방법으로 보쌈용 수육을 제조할 수 있고, 상기 수육에 함유되어 있는 코팅 유산균은 90-100℃의 물에서 가열을 하여도 1.5x104-1.7x104 cfu/g의 생존율을 보임을 하기 실시예에서 명확히 확인하였다.Can be prepared for the suyuk Bossam In this way, the exemplary coating lactic acid bacteria contained in the suyuk is an also show the survival rate of 1.5x10 4 -1.7x10 4 cfu / g to heating in water, for example 90-100 ℃ Clearly confirmed in

그리고, 가열에 의해 생존한 코팅 유산균은 내산성, 내담즙성 및 가속시험에 대한 안정성을 보인 결과, 체내에서 유용할 활성을 보일 것으로 기대된다.
In addition, the coating lactic acid bacteria survived by heating showed stability against acid resistance, bile resistance, and accelerated test, and is expected to show useful activity in the body.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상술한 본 발명의 방법에 의해 제조된 보쌈용 수육을 제공한다.According to another aspect of the present invention, the present invention provides a braised beef meat prepared by the above-described method of the present invention.

본 발명의 보쌈용 수육은 상술한 본 발명의 방법에 의해 제조된 것으로서, 이 둘 사이에 공통된 내용은 반복 기재에 따른 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여, 그 기재를 생략한다.The braised pork meat of the present invention is manufactured by the above-described method of the present invention, and the contents common between the two are omitted in order to avoid excessive complexity of the specification according to the repeated description.

본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:The features and advantages of the present invention are summarized as follows:

(ⅰ) 본 발명은 카나우바 왁스(carnauba wax) 또는 올리브 왁스(olive wax)로 코팅 처리된 코팅 유산균의 제조방법, 상기 방법에 의해 제조된 코팅 유산균을 함유하는 보쌈용 수육의 제조방법에 관한 것이다.(Iii) The present invention relates to a method for producing coated lactobacillus coated with carnauba wax or olive wax, and to a method for producing boiled pork meat containing the coated lactobacillus prepared by the above method. .

(ⅱ) 본 발명의 코팅 유산균은 pH 2.1의 인공위액에서, 0.5%의 옥스갈(oxgall)용액에서 그리고, 40℃, 상대습도 70%에서 내산성 및 내담즙성 그리고 가속시험에 대해 우수한 생존율을 보였다.(Ii) The coated lactic acid bacteria of the present invention showed excellent survival rate against acid and bile resistance and accelerated test in artificial gastric juice of pH 2.1, 0.5% oxgall solution, and 40 ° C, 70% relative humidity. .

(ⅲ) 또한, 본 발명의 코팅 유산균을 함유하는 보쌈용 수육을 제조하는 과정에서 90-100℃의 온도의 물에서 가열하였음에도, 보쌈용 수육에 존재하는 유산균은 1.5x104-1.7x104 cfu/g의 생존율을 보였다.(Ⅲ) In addition, though in the process of manufacturing the Bossam suyuk for containing a coating lactic acid bacteria of the present invention is heated at a temperature of 90-100 ℃ water, lactic acid bacteria present in suyuk for Bossam is 1.5x10 4 -1.7x10 4 cfu / g survival rate was shown.

(ⅳ) 따라서, 본 발명의 코팅 유산균은 열, 위액, 담즙 등의 외부 환경으로부터 보호되어 상기 코팅 유산균을 함유하는 보쌈용 수육을 제조하더라도 체내에서 유산균의 유용할 활성을 보일 것으로 기대된다.(Iii) Therefore, the coated lactic acid bacteria of the present invention are expected to show useful activity of lactic acid bacteria in the body even when the brackish meat containing the coated lactic acid bacteria is protected from heat, gastric juice, bile and the like.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are only for describing the present invention in more detail and that the scope of the present invention is not limited by these embodiments in accordance with the gist of the present invention .

실시예Example

본 명세서 전체에 걸쳐, 특정 물질의 농도를 나타내기 위하여 사용되는 “%“는 별도의 언급이 없는 경우, 고체/고체는 (중량/중량) %, 고체/액체는 (중량/부피) %, 그리고 액체/액체는 (부피/부피) %이다.
Throughout this specification, "%" used to denote the concentration of a particular substance is intended to include solids / solids (wt / wt), solid / liquid (wt / The liquid / liquid is (vol / vol)%.

제조예 1: 코팅 유산균 분말의 제조Preparation Example 1 Preparation of Coated Lactobacillus Powder

본 발명에서는 유산균으로 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei, Cell Biotech)를 사용하였으며, 증류수 1 L, 프로테오스 펩톤 10 g, 우육추출물 10 g, 효모추출물 5 g, 포도당 20 g, 트윈 80 1 g, 구연산암모늄 2 g, 초산나트륨 5 g, 황산마그네슘 0.1 g, 황산망간 0.05 g 및 인산나트륨 2 g을 포함하는 MRS 배지에 접종한 후 37℃에서 12시간 동안 정치 배양하여 유산균의 농도가 1010-1011 CFU/㎖가 되도록 하였다. 이어, 6,000 rpm으로 10분간 원심 분리하여 배양된 유산균을 수집하였으며, 이를 생리식염수(0.8% 염화나트륨)로 두 번 세척하였다. 유산균의 농도가 1010 CFU/㎖가 되도록 탈지유 안정제를 첨가한 후 교반기를 이용하여 균일하게 교반하였다.In the present invention, Lactobacillus casei ( Lactobacillus casei , Cell Biotech) was used as lactic acid bacteria, distilled water 1 L, proteose peptone 10 g, beef extract 10 g, yeast extract 5 g, glucose 20 g, twin 80 1 g, citric acid After inoculation into MRS medium containing 2 g of ammonium, 5 g of sodium acetate, 0.1 g of magnesium sulfate, 0.05 g of manganese sulfate, and 2 g of sodium phosphate, the cells were incubated at 37 ° C. for 12 hours, and the concentration of lactic acid bacteria was 10 10 -10 11 CFU / mL was made. Subsequently, the cultured lactic acid bacteria were collected by centrifugation at 6,000 rpm for 10 minutes, which were washed twice with physiological saline (0.8% sodium chloride). The skim milk stabilizer was added so that the concentration of lactic acid bacteria might be 10 10 CFU / ml, and then uniformly stirred using a stirrer.

그리고, 배양된 유산균을 -42℃에서 동결한 후, 진공상태에서 18℃에서 진공 건조하여 최종 수분함량이 2.0-3.0% 미만으로 하였다. 동결 및 진공 건조된 유산균 고형분을 80 메쉬의 망이 달린 분쇄기를 이용하여 입자를 고르게 하여 총 40kg(수득률 : 20%)의 유산균 분말을 수득하였다The cultured lactic acid bacteria were frozen at −42 ° C., and then vacuum dried at 18 ° C. under vacuum to obtain a final water content of less than 2.0-3.0%. The frozen and vacuum dried lactic acid bacteria solids were uniformly dispersed in an 80-mesh net grinder to obtain a total of 40 kg (yield: 20%) of lactic acid bacteria powder.

한편, 카나우바 왁스(carnauba wax) 또는 올리브 왁스(olive wax)를 약 110℃에서 완전히 용해하여 80 메쉬 스크린필터로 여과하여 준비하였다. 그리고, 압축공기를 전(前)냉각 및 본(本)냉각하고 1㎛ 및 0.1㎛의 마이크로필터를 이용하여 순차적으로 여과한 다음, 여과한 압축공기를 90℃에서 가열한 다음 코팅제 이송용 2중 튜브로 이동시켰다. 준비한 여과된 카나우바 왁스(carnauba wax) 또는 올리브 왁스(olive wax)를 각각 이송용 2중 튜브에 주입하여 이송용 압축공기에 의해 유산균 분말이 있는 챔버로 이송시켰다. 이때, 유산균 분말은 유동층 혼합을 통해 유산균의 미립자가 공기 중에 분산되어 부유 상태를 유지하고, 이송된 왁스를 60분 동안 분사하여 최종 제조된 코팅 유산균 분말에 대하여 각각의 왁스가 30 중량%가 되도록 코팅하였다. 이때, 코팅 수율은 96%를 얻었으며, 상기 방법으로 반복적으로 코팅을 3회 실시한 결과, 모두 코팅 수율은 95% 이상의 결과를 얻었다.
Meanwhile, carnauba wax or olive wax was completely dissolved at about 110 ° C. and filtered by an 80 mesh screen filter. Then, the compressed air is pre-cooled and main-cooled and sequentially filtered using a micro filter of 1 μm and 0.1 μm, and then the filtered compressed air is heated at 90 ° C., followed by a double coating for conveying the coating agent. Moved to the tube. The prepared filtered carnauba wax or olive wax was respectively injected into a transfer double tube and transferred to a chamber containing lactic acid bacteria powder by transfer compressed air. At this time, the lactic acid bacteria powder is dispersed so that the particles of lactic acid bacteria are suspended in the air through fluidized bed mixing, and the wax is sprayed for 60 minutes to coat each wax to 30% by weight with respect to the final lactic acid bacteria powder coated. It was. At this time, the coating yield was obtained 96%, the coating was repeatedly performed three times by the above method, the coating yield was all obtained more than 95%.

실험예 1: 코팅 유산균 분말의 내산성, 내담즙성 및 가속 시험Experimental Example 1: Acid resistance, bile resistance and accelerated test of the coated lactic acid bacteria powder

상기 제조예 1에서 준비한 코팅 유산균 분말(카나우바 왁스-코팅 유산균 분말(실시예 1) 또는 올리브 왁스-코팅 유산균 분말(실시예 2)) 및 코팅되지 않은 유산균 분말(락토바실러스 카세이)(비교예 1)에 대하여 내산성, 내담즙성 및 가속시험 안정성을 시험하였다. 구체적으로, 내산성 시험은 유산균 3.2x109 cfu/g을 pH 2.1의 인공위액에서, 그리고 내담즙성 시험은 3.4x109 cfu/g을 0.5%의 옥스갈(oxgall)용액에서 30, 60, 90 및 120분 동안 각각 반응시키고 생리식염수를 사용하여 십진 희석법으로 희석한 후, 고체 배지(agar plate)에 도말하여 유산균의 수를 계수하고, 그 결과는 아래 표 1에 정리하였다. 그리고, 가속시험은 유산균 3.5x109 cfu/g을 40℃, 상대습도 70%에서 10, 20, 30 및 40일 동안 보존하고, 생리식염수를 사용하여 십진 희석법으로 희석한 후, 고체 배지(agar plate)에 도말하여 유산균의 수를 계수하고, 그 결과를 아래 표 2에 나타내었다. 한편, 비교예 1의 코팅되지 않은 유산균 분말은 상기 제조예 1에서 유산균을 배양하는 조건과 동일한 방법으로 배양하였으며, 배양된 유산균을 -42℃에서 동결한 후, 진공상태에서 18℃에서 진공 건조하여 최종 수분함량이 2.0-3.0% 미만으로 하여 이용하였다.Coated lactic acid bacteria powder prepared in Preparation Example 1 (Canauba wax-coated lactic acid bacteria powder (Example 1) or olive wax-coated lactic acid bacteria powder (Example 2)) and uncoated lactic acid bacteria powder (Lactobacillus casei) (Comparative Example 1 ), Acid resistance, bile resistance, and accelerated test stability were tested. Specifically, the acid resistance test showed lactic acid bacteria 3.2x10 9 cfu / g in artificial gastric juice of pH 2.1, and the bile resistance test 3.4x10 9 cfu / g in 0.5% oxgall solution in 30, 60, 90 and After each reaction for 120 minutes and diluted with physiological saline by the decimal dilution method, the resultant was plated on a solid medium (agar plate) to count the number of lactic acid bacteria, the results are summarized in Table 1 below. In addition, the accelerated test is lactic acid bacteria 3.5x10 9 cfu / g was stored for 10, 20, 30 and 40 days at 40 ℃, relative humidity 70%, diluted with physiological saline using a dilution method, a solid medium (agar plate) ) To count the number of lactic acid bacteria, and the results are shown in Table 2 below. On the other hand, the uncoated lactic acid bacteria powder of Comparative Example 1 was cultured in the same manner as the conditions for culturing lactic acid bacteria in Preparation Example 1, after culturing the cultured lactic acid bacteria at -42 ℃, vacuum dried at 18 ℃ in a vacuum state The final moisture content was used at less than 2.0-3.0%.

내산성 시험Acid resistance test 내담즙성 시험Bile Resistance Test 노출시간
(분)
Exposure time
(minute)
실시예1
(cfu/g)
Example 1
(cfu / g)
실시예2
(cfu/g)
Example 2
(cfu / g)
비교예1
(cfu/g)
Comparative Example 1
(cfu / g)
노출시간
(분)
Exposure time
(minute)
실시예1
(cfu/g)
Example 1
(cfu / g)
실시예2
(cfu/g)
Example 2
(cfu / g)
비교예1
(cfu/g)
Comparative Example 1
(cfu / g)
00 3.2x109 3.2 x 10 9 3.2x109 3.2 x 10 9 3.2x109 3.2 x 10 9 00 3.4x109 3.4 x 10 9 3.4x109 3.4 x 10 9 3.3x109 3.3 x 10 9 3030 3.2x109 3.2 x 10 9 3.1x109 3.1 x 10 9 3.0x109 3.0 x 10 9 3030 3.2x109 3.2 x 10 9 3.3x109 3.3 x 10 9 2.6x109 2.6 x 10 9 6060 3.0x109 3.0 x 10 9 3.0x109 3.0 x 10 9 2.4x109 2.4 x 10 9 6060 3.1x109 3.1 x 10 9 3.2x109 3.2 x 10 9 2.1x109 2.1 x 10 9 9090 2.8x109 2.8 x 10 9 2.7x109 2.7 x 10 9 1.8x109 1.8 x 10 9 9090 2.8x109 2.8 x 10 9 2.9x109 2.9 x 10 9 1.7x109 1.7 x 10 9 120120 2.5x109 2.5 x 10 9 2.4x109 2.4 x 10 9 1.0x109 1.0 x 10 9 120120 2.6x109 2.6 x 10 9 2.7x109 2.7 x 10 9 1.2x109 1.2 x 10 9 생존율
(%)
Survival rate
(%)
7878 7575 3131 생존율
(%)
Survival rate
(%)
7676 7979 3636

가속시험Accelerated test 노출시간
(분)
Exposure time
(minute)
실시예1
(cfu/g)
Example 1
(cfu / g)
실시예2
(cfu/g)
Example 2
(cfu / g)
비교예1
(cfu/g)
Comparative Example 1
(cfu / g)
00 3.5x109 3.5 x 10 9 3.5x109 3.5 x 10 9 3.4x109 3.4 x 10 9 1010 3.3x109 3.3 x 10 9 3.2x109 3.2 x 10 9 2.1x109 2.1 x 10 9 2020 3.0x109 3.0 x 10 9 2.9x109 2.9 x 10 9 1.5x109 1.5 x 10 9 3030 2.8x109 2.8 x 10 9 2.8x109 2.8 x 10 9 0.8x109 0.8 x 10 9 4040 2.3x109 2.3 x 10 9 2.4x109 2.4 x 10 9 0.2x109 0.2 x 10 9 생존율
(%)
Survival rate
(%)
6666 6767 66

상기 표 1 및 2에서 볼 수 있듯이, 실시예 1 및 2의 코팅된 유산균은 코팅되지 않은 유산균(비교예 1)에 비해서 내산성, 내담즙성 및 가속시험의 안정성에 있어 우수한 생존율을 보임을 알 수 있었다.
As can be seen in Tables 1 and 2, it can be seen that the coated lactic acid bacteria of Examples 1 and 2 showed excellent survival rate in acid resistance, bile resistance and stability of the accelerated test compared to the uncoated lactic acid bacteria (Comparative Example 1). there was.

제조예Manufacturing example 2:  2: 코팅유산균Coating Lactobacillus 분말을 포함하는  Powder containing 염지액의Salt solution 제조 Produce

다음 표 3과 같은 조성으로 각 성분을 칭량하여 코팅 유산균을 포함하는 염지액 3 L를 제조하였다:Next, 3 L of the salt solution containing the coated lactic acid bacteria was prepared by weighing each component in the composition shown in Table 3 below:

-- 실시예 3
(중량%)
Example 3
(weight%)
실시예 4
(중량%)
Example 4
(weight%)
실시예 5
(중량%)
Example 5
(weight%)
실시예 6
(중량%)
Example 6
(weight%)
비교예 2
(중량%)
Comparative Example 2
(weight%)
비교예 3
(중량%)
Comparative Example 3
(weight%)
실시예 1의 유산균 분말Lactic Acid Bacteria Powder of Example 1 1010 2020 -- -- -- -- 실시예 2의 유산균 분말Lactic Acid Bacteria Powder of Example 2 -- -- 1010 2020 -- -- 비교예 1의 유산균 분말Lactobacillus powder of Comparative Example 1 -- -- -- -- 1010 2020 정제염Purified salt 55 55 55 55 55 55 정백당White sugar 55 55 55 55 55 55 L-글루타민산나트륨
(향미증진제)
Sodium L-Glutamate
(Flavor enhancer)
44 44 44 44 44 44
마늘가루Garlic Powder 1515 1010 1515 1010 1515 1010 양파가루Onion Powder 33 33 33 33 33 33 후추가루Black pepper 1One 1One 1One 1One 1One 1One 포도당glucose 22 22 22 22 22 22 소주Soju 55 55 55 55 55 55 정제수Purified water 5050 4545 5050 4545 5050 4545 합계Sum 100100 100100 100100 100100 100100 100100

제조예Manufacturing example 3: 보쌈용 수육의 제조 3: Manufacture of bastard

상기 제조예 2에서 준비한 염지액에 돈육(삼겹살, 오스트리아산) 15 kg을 2시간 동안 침지하여 숙성을 시킨 후 실온에서 30분 동안 방치하여 돈육 표면의 수분을 건조하였다. 수분을 건조시킨 상기 돈육을 95℃의 온도의 물에서 상태를 보면서 약 90분 정도 삶아 보쌈용 수육을 제조하였다. 상기 제조예 2에서 준비한 염지액으로 제조한 각각의 보쌈용 수육을 각각 실시예 3 내지 6 그리고 비교예 2 및 3으로 이용하였다.
15 kg of pork (samgyeopsal, Austrian) was immersed in the saline solution prepared in Preparation Example 2 for 2 hours to mature, and then dried at room temperature for 30 minutes to dry the moisture on the surface of the pork. The dried pork was then boiled for about 90 minutes while watching the state in water at a temperature of 95 ° C. to prepare a pork meat. Each of the fish paste for the sauerkraut prepared with the salt solution prepared in Preparation Example 2 was used in Examples 3 to 6 and Comparative Examples 2 and 3, respectively.

실험예Experimental Example 2: 보쌈용 수육의 유산균 수 측정 2: Determination of Lactic Acid Bacteria in Fish Sauce

상기 제조예 3에서 준비한 보쌈용 수육의 유산균의 수는 생리식염수를 사용하여 십진 희석법으로 희석한 후, 고체 배지(agar plate)에 도말하여 유산균의 수를 계수하였다. 그 결과는 아래 표 4에 정리하였다:The number of lactic acid bacteria of Bossam for carcass prepared in Preparation Example 3 was diluted by physiological saline using a decimal dilution method, and then plated on a solid medium (agar plate) to count the number of lactic acid bacteria. The results are summarized in Table 4 below:

-- 실시예 3
(cfu/g)
Example 3
(cfu / g)
실시예 4
(cfu/g)
Example 4
(cfu / g)
실시예 5
(cfu/g)
Example 5
(cfu / g)
실시예 6
(cfu/g)
Example 6
(cfu / g)
비교예 2
(cfu/g)
Comparative Example 2
(cfu / g)
비교예 3
(cfu/g)
Comparative Example 3
(cfu / g)
가열 전Before heating 2.8x107 2.8 x 10 7 2.8x107 2.8 x 10 7 2.9x107 2.9 x 10 7 2.9x107 2.9 x 10 7 2.3x107 2.3 x 10 7 2.3x107 2.3 x 10 7 가열 후After heating 1.5x104 1.5 x 10 4 1.7x104 1.7 x 10 4 1.6x104 1.6 x 10 4 1.7x104 1.7 x 10 4 3.8x103.8x10 3.6x103.6x10

상기 표 4에서 볼 수 있듯이, 실시예 3 내지 6의 보쌈용 수육은 비교예 2 및 3의 보쌈용 수육에 비해서 가열 후에도 우수한 생존율을 보임을 알 수 있어, 카나우바 왁스 또는 올리브 왁스로 코팅된 유산균 분말을 이용하여 보쌈용 수육을 제조하면 생존율 및 안정성(stability)이 우수한 코팅 유산균을 체내에서 이용할 수 있다고 판단된다.
As can be seen in Table 4, it is understood that the Bossam meat of Examples 3 to 6 shows excellent survival rate even after heating, compared to the Bossam meat of Comparative Examples 2 and 3, lactic acid bacteria coated with carnauba wax or olive wax. It is determined that the coated lactic acid bacteria having excellent survival rate and stability can be used in the body when the fish meat for the sacks is prepared using the powder.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the same is by way of illustration and example only and is not to be construed as limiting the scope of the present invention. Thus, the substantial scope of the present invention will be defined by the appended claims and equivalents thereof.

Claims (6)

다음의 단계를 포함하는 코팅 유산균의 제조방법:
(a) (a-1) 유산균을 MRS 배지에 접종하여 유산균의 농도가 1010-1011 CFU/㎖가 되도록 배양하는 단계; (a-2) 상기 단계 (a-1)의 배양된 유산균을 원심 분리하여 유산균을 수집하고 생리식염수로 세척하는 단계; (a-3) 유산균의 농도가 1010 CFU/㎖가 되도록 상기 단계 (a-2)의 세척된 유산균에 탈지유 안정제를 첨가하고 교반하는 단계; (a-4) 상기 단계 (a-3)의 결과물인 유산균을 동결하고 최종 수분함량이 2.0-3.0%가 되도록 진공 건조하는 단계; 및 (a-5) 상기 단계 (a-4) 동결 및 진공 건조된 유산균을 60-100 메쉬의 망이 달린 분쇄기를 이용하여 분쇄하여 준비된 유산균 분말을 유동층 혼합을 통해 공기 중에 분산시켜 부유 상태로 준비하는 단계;
(b) 카나우바 왁스(carnauba wax) 또는 올리브 왁스(olive wax)를 90-130℃에서 용해하고 스크린필터를 이용하여 여과하여 코팅용 유지를 준비하는 단계;
(c) 압축공기를 냉각한 후 마이크로 필터로 여과하고, 이를 70-110℃의 온도로 가열하여 이송용 압축공기를 준비하는 단계;
(d) 상기 단계 (c)의 준비된 압축공기를 이용하여 상기 단계 (b)의 여과된 코팅용 유지를 코팅제 이송용 튜브로 이송하는 단계; 및
(e) 상기 단계 (a)의 부유 상태의 유산균 분말에 상기 단계 (d)의 이송된 코팅용 유지를 분사하여 코팅(coating)하는 단계.
Method for preparing a coated lactic acid bacterium comprising the following steps:
(a) (a-1) inoculating the lactic acid bacteria in MRS medium and culturing the concentration of lactic acid bacteria to be 10 10 -10 11 CFU / ml; (a-2) collecting the lactic acid bacteria by centrifuging the cultured lactic acid bacteria of step (a-1) and washing with physiological saline; (a-3) adding and stirring the skim milk stabilizer to the washed lactic acid bacteria of step (a-2) so that the concentration of lactic acid bacteria is 10 10 CFU / ㎖; (a-4) freezing the resulting lactic acid bacteria of step (a-3) and vacuum drying the final water content to 2.0-3.0%; And (a-5) the lactic acid bacteria powder prepared by pulverizing the frozen and vacuum dried lactic acid bacteria in the step (a-4) using a 60-100 mesh net grinder to be dispersed in the air through fluidized bed mixing to prepare a suspended state. Doing;
(b) dissolving carnauba wax or olive wax at 90-130 ° C. and filtering using a screen filter to prepare a coating oil;
(c) cooling the compressed air and then filtering it with a micro filter, and heating it to a temperature of 70-110 ° C. to prepare compressed air for transportation;
(d) transferring the filtered coating oil of step (b) to the coating material delivery tube using the prepared compressed air of step (c); And
(e) coating (coating) by spraying the transported coating oil of step (d) to the suspended lactic acid powder of step (a).
제 1 항에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 알리멘타리우스(Lactobacillus alimentarius), 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 델브루엑키(Lactobacillus delbrueckii), 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 류코노스톡 멘센테로이드스(Leuconostoc mensenteroides), 스트렙토코커스 서모필러스(Streptococcus thermophilus), 스트렙토코커스 락티스(Streptococcus lactis), 엔테로코커스 파에시엄(Enterococcus faecium), 엔테로코커스 파에칼리스(Enterococcus faecalis), 비피도박테리엄 비피덤(Bifidobacterium bifidum), 비피도박테리엄 인판티스(Bifidobacterium infantis), 비피도박테리엄 브라베(Bifidobacterium brave) 및 비피도박테리엄 롱검(Bifidobacterium longum)으로 구성된 군으로부터 선택되는 유산균인 것을 특징으로 하는 방법.
The method of claim 1 wherein the lactic acid bacteria is Lactobacillus Ali menta Julius (Lactobacillus alimentarius), Lactobacillus four K (Lactobacillus sakei ), Lactobacillus acidophilus ), Lactobacillus casei ), Lactobacillus gasseri ), Lactobacillus delbrueckii , Lactobacillus fermentum , Lactobacillus bulgaricus , Lactobacillus helgaricus , Lactobacillus helveticus , Leuconos toxin mensenteroides ), Streptococcus thermophilus , Streptococcus lactis , Enterococcus faecium , Enterococcus faecalis , Bifidobacterium bifiderum bifidum bifiddo Bifidobacterium infantis , Bifidobacterium brave and Bifidobacterium longum , characterized in that the lactic acid bacteria selected from the group consisting of Bifidobacterium longum .
삭제delete 제 1 항에 있어서, 상기 단계 (e) 코팅용 유지는 코팅 유산균의 총 중량을 기준으로 하여 20-40 중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는 방법.
According to claim 1, wherein the step (e) the coating oil is characterized in that it comprises 20 to 40% by weight based on the total weight of the coating lactic acid bacteria.
다음의 단계를 포함하는 보쌈용 수육의 제조방법:
(ⅰ) 상기 제 1 항, 제 2항, 또는 제 4 항 중 어느 한 방법으로 제조된 코팅 유산균을 준비하는 단계;
(ⅱ) 상기 단계 (ⅰ)의 코팅 유산균, 정제염, 정백당, L-글루타민산나트륨, 마늘분말, 양파분말, 후추분말, 포도당, 소주 및 정제수를 혼합하여 염지액을 준비하는 단계;
(ⅲ) 상기 단계 (ⅱ)의 염지액에 돈육을 침지하여 숙성시킨 다음 돈육 표면의 수분을 건조시키는 단계; 및
(ⅳ) 상기 단계 (ⅲ)의 결과물인 돈육을 90-100℃의 물에서 가열하는 단계.
A method of preparing bosaeng meat, comprising the following steps:
(Iii) preparing a coated lactic acid bacterium prepared by any one of claims 1, 2, or 4;
(Ii) preparing a salt solution by mixing the coated lactic acid bacteria, purified salt, white sugar, sodium L-glutamate, garlic powder, onion powder, pepper powder, glucose, shochu, and purified water of step (iii);
(Iii) immersing the pork in the salt solution of step (ii) to mature and then drying the moisture on the surface of the pork; And
(Iii) heating the resulting pork from step (iii) in water at 90-100 ° C.
제 5 항에 있어서, 상기 단계 (ⅱ)의 염지액은 정제수 100 중량부에 대하여 코팅 유산균 5-50 중량부, 정제염 5-20 중량부, 정백당 5-20 중량부, L-글루타민산나트륨 5-15 중량부, 마늘분말 15-35 중량부, 양파분말 1-15 중량부, 후추분말 0.5-5 중량부, 포도당 1-10 중량부 및 소주 5-15 중량부를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.The salt solution of step (ii) is 5-50 parts by weight of coated lactic acid bacteria, 5-20 parts by weight of purified salt, 5-20 parts by weight per white sugar, 5-15 parts by weight of sodium L-glutamate, based on 100 parts by weight of purified water. Part by weight, garlic powder 15-35 parts by weight, onion powder 1-15 parts by weight, pepper powder 0.5-5 parts by weight, glucose 1-10 parts by weight and shochu 5-15 parts by weight.
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