KR20090071020A - A kimchi lactic-acid-bateria powder prepared by liquid double coated formulation - Google Patents

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Abstract

A Kimchi lactic acid powder through liquid double coating process is provided to enhance viability rate and efficiency of the lactic acid by improving the resistance. A method for manufacturing Kimchi lactic acid comprises: a step of isolating and identifying Kimchi lactic acid; a step of fermenting fermentation liquid; a step of fermenting lactic acid producing GABA(Gamma-amino butyric acid) in the fermentation liquid; a step of coating the fermentation liquid with protein; and a step of rapid-freezing and vacuum-drying. The ingredients comprising Kimchi lactic acid contains 60-80% of cabbage kimchi, 2-20% of fat-removed powdered milk, 5-20% of fructo oligosaccharide, 2-20% of soybean peptide, 2-20% of glucose, 0,01-10% of sodium alginate, 0.01-10% of glycerin, 0.01-10% of gellan gum, 0.01-10% of guar gum, 0.1-10% of soybean milk, 0.1-10% of sugar fatty acid ester, and 0.001-10% of Lactobacillus plantarum.

Description

액상더블코팅으로 제조된 김치 유산균 분말{A Kimchi lactic-acid-bateria powder prepared by liquid double coated formulation}A Kimchi lactic-acid-bateria powder prepared by liquid double coated formulation}

본 발명의 목적은 가바(GABA, Gamma-aminobutylic acid)를 생성할 수 있는 김치유산균 및 정장작용이 있는 김치유산균을 김치에서 분리, 동정하고 김치에 배양하여 액상더블코팅 제조공정으로 위산과 담즙산에 저항성을 가지며, 장내에서는 유산균의 발육과 정장작용을 돕는 김치 유산균에 관한 것이다. An object of the present invention is to isolate and identify kimchi lactic acid bacteria that can produce GABA (GABA, Gamma-aminobutylic acid) and kimchi lactic acid bacteria having a formal function in kimchi, and cultured in kimchi to resist double acid and bile acids in liquid double coating manufacturing process. It has a, in the intestines lactic acid bacteria and kimchi lactic acid bacteria to help the work function.

[문헌 1] Berrada et al., J. Dairy Sci ., vol74, NO2, pp.409-413, 1991[Reference 1] Berrada et al., J. Dairy Sci . , vol74, NO2, pp. 409-413, 1991

[문헌 2] 석문호 et al., 식품기술, 제권15호, 제1호, pp.81-85, 2002[Document 2] Seokmunho et al., Food Technology, Vol. 15, No. 1, pp.81-85, 2002

[문헌 3]Han et al., J.Microbiol&Biotechol, 제17권, 제10호, pp.1661-1669, 2007Han et al., J. Microbiol & Biotechol, Vol. 17, No. 10, pp.1661-1669, 2007

[문헌 4] JUNG et al., 한국응용생물학회지, 제13권, pp.165-173, 2005[Reference 4] JUNG et al., Korean Journal of Applied Biology, Vol. 13, pp. 165-173, 2005

[문헌 5] Dr. Cherl-Ho lee, International Symposium on fermented foods Oct. 2003. International fermented food expo[Document 5] Cherl-Ho lee, International Symposium on fermented foods Oct. 2003.International fermented food expo

본 발명은 김치내 가바물질을 생성하는 김치유산균, 다른 김치유산균의 제조방법과 인체내 정장효과 및 보존기간을 연장하기 위한 더블 코팅된 김치 유산균에 제조방법에 관한 것이다. The present invention relates to a method for producing kimchi lactic acid bacteria, other kimchi lactic acid bacteria to produce a gab material in kimchi, and a method for producing double-coated kimchi lactic acid bacteria for prolonging intestinal effect and shelf life in the human body.

김치는 예전에는 김치를 지(漬(덧말:지))라고 불렀다. 고려시대 이규보의 (동국이상국집)에서 김치 담그기를 감지(監(덧말:감)漬(덧말:지))라고 했다. 1600년대 요리서인 주방문(酒(덧말:주)方(덧말:방)文(덧말:문))에서는 김치를 지히라 했다. 지히가 팀채가 되고 다시 딤채로 변하고 딤채는 구개음화하여 짐채가 되었으며, 다시 구개음화 역현상이 일어나서 김채로 변하여 오늘날의 김치가 된 것이다. 1715년 홍만선의 산림경재에서는 지히와 저를 합하여 침저라 했고, 지금도 남부지방 특히 전라도 지방에서는 고려시대 명칭을 따서 보통의 김치를 지라고 한다. 그리고 무와 배추를 양념하지 않고 통으로 소금에 절여서 묵혀두고 먹는 김치를 짠지라고 하는데 황해도와 함남지방에서는 보통 김치사제를 짠지라고 한다.     Kimchi was previously called Kimchi (덧 (지: 지)). In the Goryeo Dynasty, Kyubo's (Dongguk Sangguk House) called Kimchi (감지 (덧): 감) 漬 (덧: 지)). In the 1600's cookbook, the kitchen door (酒 (덧: :) 方 (덧: 방) 文 (덧: 文)) was called Kimchi. Ji-hi became a team bond and turned into a dim-chae, and the dim-chae became palatalized and became a burden. In 1715, the forest hardwood of Hong Man-sun called Ji Hye and me, and it is still called "Jimchi" in the southern region, especially Jeolla-do. And Kimchi is known as salty kimchi, which is eaten with salt in a barrel without seasoning radish and cabbage.

국제적으로 일본의 경우 특유의 맛과 관련된 유산균을 찾아내어 일본식 김치인 쯔께모노를 만드는데 첨가함으로써 깊은 맛을 내는 김치를 개발한바 있으며, 미국의 경우는 정부 차원에서 김치박물관을 건립하고 있다고 전해진다.     Internationally, Japan has developed a kimchi that has a deep taste by finding lactic acid bacteria related to its unique taste and adding it to make Japanese kimchi, Tsukemono. In the US, it is reported that the Kimchi Museum is constructed at the government level.

김치는 특유 맛과 향이 있고 한국인의 전통적인 식습관으로 인해 필수적인 식품이 되었다. 최근에 와서 김치에 대한 많은 연구가 진행되어 왔고 김치에 대한 건강가치가 재인식 되며 덧붙여 국가신인도가 높아짐에 따라 세계적인 관심 대상의 식품으로 변화되어 가고 있다.     Kimchi has a unique taste and aroma and has become an essential food because of the traditional Korean eating habits. Recently, many researches have been conducted on kimchi, and the health value of kimchi has been re-recognized, and as national confidence increases, it is becoming a food of global interest.

김치의 유용성은 발효된 김치의 대사산물 및 김치의 유산균을 섭취함으로써 장내 유익한 유산균을 섭취함으로서 정장작용에 있다고 할 것이다. 따라서 발효된 김치에 유산균을 누구나 섭취가 용이하도록 간편식으로 개발하고자 하는 노력은 계속되어 왔다.      The usefulness of kimchi will be said to be in intestinal action by ingesting beneficial lactic acid bacteria in the intestine by ingesting fermented metabolites of kimchi and lactic acid bacteria of kimchi. Therefore, efforts have been made to develop fermented kimchi in a simple manner so that anyone can easily consume lactic acid bacteria.

일반적으로 인체의 구조상 유산균 섭취시 장까지 도달하기 위하여 위를 거치게 되는데 위에서 분비되는 위산으로 인해 유산균이 사멸하여 유산균 본래의 생리활성 기능을 발휘하지 못하게 되는 경우가 많다. 1990년 Nabil Berrada 등은 위통과시 생존이란 제목하에 비피더스균의 위통과시 사멸하는 문제점 등을 지적하였다(Berrada et al., J. Dairy Sci ., vol.74, NO.2, pp.409-413, 1991). 그 이후로 젤라틴을 코팅한 유산균에 대한 기술이 있었으나 섭씨 20℃도 보관시, 6개월 후 1%, 12개월 후 0.2%를 함유하는 단점이 있다.In general, the human body goes through the stomach to reach the intestine when ingesting lactic acid bacteria, lactic acid bacteria are killed by the gastric acid secreted in the stomach is often unable to exhibit the original physiological activity of lactic acid bacteria. In 1990, Nabil Berrada et al. Pointed out the problem of dying of bifidus bacteria under the heading of surviving gastric pain (Berrada et al., J. Dairy). Sci . , vol. 74, NO. 2, pp. 409-413, 1991). Since then, there has been a technology for gelatin-coated lactic acid bacteria, but when stored at 20 ℃ Celsius, there is a disadvantage that contains 1% after 6 months, 0.2% after 12 months.

또한 대한민국 특허등록 10-0387245에서 밝힌 자료를 보면 시판제품들 중 지방, 유화제로 미세캅셀화 시킨 제품은 위액이든 장액이든 30분 이내에 붕해되는 문제가 있다고 지적하였고, 단백질 코팅 유산균이 위액 및 장액에서 10시간 이상 경과되어도 붕해되지 않는 단점 등을 지적한 바 있다.     In addition, the data revealed in Korean Patent Registration 10-0387245 pointed out that among the commercially available products, microcapsules with fats and emulsifiers disintegrate within 30 minutes, either gastric or intestinal fluids. It has been pointed out that the disadvantage does not disintegrate over time.

가바(γ-aminobutyric acid GABA)는 자연계에 널리 분포하는 비단백질 아미노산의 일종으로 흥분 억제성 신경전달물질이다. 중추신경계 전체 신경전달물질 중 약 30%를 차지하며 다른 신경전달물질에 비하여 약 200 ~ 1000배 고농도로 존재한다. 동물의 경우 뇌, 신장, 심장, 폐 등에서 발견되며 식물의 경우 발아현미를 비 롯한 발아곡류, 녹차, 배추뿌리 등에서 많이 검출되고 있다. 가바는 항스트레스, 항불안, 혈압상승억제, 항경련, 시력증진등 인체에 많은 생리적인 메카니즘의 조절에 관여하는 것으로 알려져 있고, 성장호르몬의 분비 조절에서 관련하며, 통증완화에도 효과가 있는 것으로 알려져 있어 약리적으로 주목 받는 물질이다(석문호 et al., 식품기술, 제권15호, 제1호, pp.81-85, 2002; Han et al., J.Microbiol&Biotechol, 제17권, 제10호, pp.1661-1669, 2007; JUNG et al., 한국응용생물학회지, 제13권, pp.165-173, 2005).      Γ-aminobutyric acid GABA is a non-protein amino acid widely distributed in nature and is an excitatory inhibitory neurotransmitter. It accounts for about 30% of the total neurotransmitters of the central nervous system and is present at about 200-1000 times higher concentration than other neurotransmitters. Animals are found in the brain, kidneys, heart, lungs, etc. Plants are widely detected in germinated grains, green tea, and cabbage roots, including germinated brown rice. Gaba is known to be involved in the regulation of many physiological mechanisms in the human body, such as antistress, anti-anxiety, blood pressure suppression, anticonvulsion, and vision enhancement. It is a pharmacologically interesting substance (Sukmunho et al., Food Technology, Vol. 15, No. 1, pp.81-85, 2002; Han et al., J. Microbiol & Biotechol, Vol. 17, 10, pp.1661-1669, 2007; JUNG et al., Korean Journal of Applied Biology, Vol. 13, pp.165-173, 2005).

이에 본 발명자들은, 가바를 생산하는 김치유산균 및 정장작용이 있는 김치유산균들을 더블코팅을 함으로, 섭취 후 위에서 위산 및 펩신에 대한 저항성 부여, 섭취 후 십이지장에서 담즙산에 대한 저항성 부여, 장내분해로 유산균의 발육 및 번식을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다. Therefore, the present inventors, by double coating the kimchi lactic acid bacteria and the kimchi lactic acid bacteria having a formal action to produce Gabba, giving resistance to gastric acid and pepsin from the stomach after ingestion, resistance to bile acids in the duodenum after ingestion, lactic acid bacteria by intestinal decomposition The present invention has been completed by confirming development and reproduction.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 김치를 발효시켜 김치유산균을 분리, 동정하는 제 1단계; 1차 유산균을 김치 발효액에서 발효하는 제 2단계; 상기 제 2단계의 김치 발효액에 가바를 생산하는 2차 유산균을 김치 발효액에서 발효하는 제 3단계; 상기 제 3단계에서 제조된 김치 발효액을 단백류로 1차 코팅 및 2차 코팅하는 제 4단계; 상기 제 4단계의 코팅 된 김치 발효액을 급속동결, 진공건조 하는 제 5단계의 공정을 포함하는 김치 유산균의 제조방법을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention comprises the first step of separating and identifying kimchi lactic acid bacteria by fermenting kimchi; A second step of fermenting the first lactic acid bacteria in kimchi fermentation broth; A third step of fermenting the secondary lactic acid bacteria producing Gabba in the kimchi fermentation broth of the second step in the kimchi fermentation broth; A fourth step of firstly coating and secondly coating the kimchi fermentation broth prepared in the third step with proteins; It provides a method for producing kimchi lactic acid bacteria comprising the fifth step of the step of fast freezing, vacuum drying the coated kimchi fermentation broth of the fourth step.

본원에서 정의되는 김치 유산균을 구성하는 재료들의 성분 배합 비율은 배추 김치 배추김치 60~80%, 탈지분유 2~20%, 프락토올리고당 5~20%, 대두펩타이드 2~20%, 포도당 2~20%, 알긴산나트륨 0.01~10%, 글리세린 0.01~10%, 젤란검 0.01~10%, 구아검 0.01~10%, 대두유 0.1~10%, 자당지방산에스테르 0.1~10%, 락토바실러스 플랜타럼(Lactobacillus plantarum) 0.001~10%, 락토바실러스 액시도필러스(Lactobacillus acidophillus) 0.001~10%, 락토바실러스 부시너리(Lactobacillus buchneri) 0.001~10% 로, 바람직하게는 배추김치 69.988%, 탈지분유 10%, 프락토올리고당 8%, 대두펩타이드 5%, 포도당 2%, 알긴산나트륨 1%, 글리세린 1%, 젤란검 0.5%, 구아검 0.1%, 대두유 1.1%, 자당지방산에스테르 1.3%, 락토바실러스 플랜타럼(Lactobacillus plantarum) 0.004%, 락토바실러스 액시도필러스(Lactobacillus acidophillus) 0.004%, 락토바실러스 부시너리(Lactobacillus buchneri) 0.004%인 것을 특징으로 한다.      The composition of the ingredients constituting the kimchi lactic acid bacteria as defined herein is Chinese cabbage kimchi cabbage kimchi 60-80%, skim milk powder 2-20%, fructooligosaccharide 5-20%, soybean peptide 2-20%, glucose 2-20 %, Sodium alginate 0.01-10%, glycerin 0.01-10%, gellan gum 0.01-10%, guar gum 0.01-10%, soybean oil 0.1-10%, sucrose fatty acid ester 0.1-10%, Lactobacillus plantarum ) 0.001 ~ 10%, Lactobacillus acidophillus 0.001 ~ 10%, Lactobacillus buchneri 0.001 ~ 10%, preferably cabbage kimchi 69.988%, skim milk powder 10%, fructose Oligosaccharide 8%, soybean peptide 5%, glucose 2%, sodium alginate 1%, glycerin 1%, gellan gum 0.5%, guar gum 0.1%, soybean oil 1.1%, sucrose fatty acid ester 1.3%, Lactobacillus plantarum 0.004%, Lactobacillus acidophillus 0.004%, Lactobacillus bushner (Lactobacillus buchneri) characterized in that 0.004%.

상기 제 1단계의 김치를 구성하는 재료들의 성분 배합비율은, 배추 60~80%, 무 10~15%, 쪽파 1~5%, 설탕 1~5%, 고춧가루 1~5%, 밀가루풀 1~5%, 마늘 1~5%, 생강 1~5%, 멸치액젓 1~5%, 새우젓 2~5%, 소금 0.1~0.5%로, 바람직하게는 배추 75%, 무 10.7%, 쪽파 2%, 설탕 2%, 고춧가루 2%, 밀가루풀 2%, 마늘 1.5%, 생강 1%, 멸치액젓 1.5%, 새우젓 2%, 소금 0.3%인 것을 특징으로 한다.      The compounding ratio of the ingredients constituting the kimchi of the first step is 60 ~ 80% cabbage, 10 ~ 15% radish, 1 ~ 5% chives, 1 ~ 5% sugar, 1 ~ 5% red pepper powder, 1 ~ wheat flour paste 5%, garlic 1-5%, ginger 1-5%, anchovy sake 1-5%, shrimp salt 2-5%, salt 0.1-5%, preferably cabbage 75%, radish 10.7%, chives 2%, Sugar 2%, red pepper powder 2%, wheat grass paste 2%, garlic 1.5%, ginger 1%, anchovy sake 1.5%, shrimp chopsticks 2%, salt 0.3%.

본 발명은 상기 제 2단계의 1차 유산균은 김치 발효액에 일반세균 및 병원균을 제거하기 위해 락토바실러스 플랜타륨(Lactobacillus plantarum) 균주와 락토바실러스 액시도필러스(Lactobacillus acidophillus) 균주를 접종하는 것을 특징으로 한다.       The present invention is characterized in that the primary lactic acid bacteria of the second step is inoculated with Lactobacillus plantarum strain and Lactobacillus axidophilus (Lactobacillus acidophillus) strain in order to remove common bacteria and pathogens in the kimchi fermentation broth. do.

본 발명의 상기 제 3단계의 2차 유산균은 가바를 생성하기 위한 단계로 김치 발효액에 락토바실러스 부시너리(Lactobacillus buchneri)균주를 접종하는 것을 특징으로 한다.       The secondary lactic acid bacteria of the third step of the present invention is characterized by inoculating Lactobacillus buchneri strain in the kimchi fermentation broth as a step for producing gaba.

상기 제 4단계의 검류코팅은 알긴산나트륨과 젤란검및 글리세린의 구성 배합비(w/w)가 0.1~10%, 0.1~10%, 0.1~10%의 비율로, 바람직하게는 7 : 1 : 5의 비율로 혼합됨을 특징으로 한다.       In the fourth step of galvanic coating, the compositional ratio (w / w) of sodium alginate, gellan gum and glycerin is 0.1 to 10%, 0.1 to 10%, and 0.1 to 10%, preferably 7: 1: 5. It is characterized by mixing in the ratio of.

상기 제 4단계의 2차 코팅액은 대두펩타이드, 탈지분유, 자당지방산에스테르, 대두유, 구아검의 구성 배합비(w/w)가 대두펩타이드 2~20%, 탈지분유 2~20%, 자당지방산에스테르0.1~10%, 대두유 0.1~10%, 구아검 0.1~10%의 비율로, 바람직하게는 10 : 5 : 1 : 1 : 0.1의 비율로 혼합됨을 특징으로 한다.       The secondary coating solution of the fourth step is soybean peptide, skim milk powder, sucrose fatty acid ester, soybean oil, guar gum composition ratio (w / w) of soybean peptide 2-20%, skim milk powder 2-20%, sucrose fatty acid ester 0.1 ~ 10%, soybean oil 0.1 ~ 10%, guar gum is characterized in that the mixture of 0.1 to 10%, preferably in a ratio of 10: 5: 1: 1: 1.

또한 본 발명은 상기 제조방법으로 제조된 김치 유산균 분말을 제공한다.       In another aspect, the present invention provides kimchi lactic acid bacteria powder prepared by the above method.

본 발명의 제법으로 제조된 김치 유산균은 기존의 방식인 2차 코팅을 카제인 단백질로 하였을 경우, 유동층 건조 코팅기를 사용하는데에 있어서 열을 가하여 균이 손상되기 쉽고 또한 경제성이 떨어지며, 제품에 열을 가하면 단백질이 변성되어 알레르기의 발생가능성이 있는 단점을 보완하였으며, 기존방식인 열에 의해 유산균이 손실되는 다시마 분말을 이용한 3중 코팅과정을 포함하지 않아, 기존의 발명보다 경제적이며 김치 유산균의 높은 생존율 및 효율성을 나타냄을 특징으로 한다. Kimchi lactic acid bacteria prepared by the method of the present invention, when the secondary coating, which is a conventional method, using casein protein, when the fluidized bed dry coater is used, heat is applied to the bacteria, and the economical efficiency is lowered. The protein is denatured to compensate for the potential for allergies, and does not include the triple coating process using kelp powder, which is lost by conventional heat, and is more economical than the existing invention. It is characterized by.

상기와 같이 본 발명의 기억력 증진 등의 효과를 기대 할 수 있는 가바( γ-amino butylic acid)를 생성하는 김치 유산균 및 정장작용이 뛰어난 김치 유산균들을 분리, 동정하여 이를 액상더블코팅 공정으로 위산, 십이지장내 담즙액에 대한 저항성 및 소장, 대장내에 정착되어 정장작용의 효과를 확인함으로써, 김치 유산균의 생존율 및 효율성을 높여 경제적이고 섭취가 용이하고, 김치내에서 발효시키는 과정을 통하여 안정적인 생산이 가능하도록 하였다. As described above, the kimchi lactic acid bacteria that produce Gab (γ-amino butylic acid) which can be expected to improve the memory of the present invention and the kimchi lactic acid bacteria having excellent intestinal action are isolated and identified, and this is a liquid double coating process. The resistance to the bile solution and settled in the small intestine and the large intestine confirmed the effects of intestinal action, thereby increasing the survival rate and efficiency of lactic acid bacteria, making it economical and easy to consume, and allowing stable production through fermentation in kimchi. .

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by the following Examples and Experimental Examples.

단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.However, the following Examples and Experimental Examples are merely illustrative of the present invention, and the content of the present invention is not limited by the following Examples and Experimental Examples.

실시예Example 1.  One. 김치유산균Kimchi lactic acid bacteria 분말의 제조 Manufacture of powder

김치를 발효시켜 김치유산균을 분리, 동정하여, 1차 유산균인 락토바실러스 플랜타륨 및 락토바실러스 액시도필러스를 김치 발효액에서 발효하고, 가바를 생산하는 2차 유산균인 락토바실러스 부시너리를 발효시켜 제조된 김치 발효액을 단백류로 1차 코팅 및 2차 코팅을 한 후, 급속동결 및 진공건조 하는 공정을 포함하는 김치 유산균 분말을 제조하였다(도 1참조).Kimchi lactic acid bacteria are isolated and identified by fermenting kimchi, and lactobacillus plantarium and lactobacillus axidophyllus, which are primary lactic acid bacteria, are fermented in kimchi fermentation broth, and lactobacillus bushery, which is a secondary lactic acid bacterium that produces Gabba, is fermented. After the first and second coating of the kimchi fermented broth with proteins, the kimchi lactic acid bacteria powder was prepared, including the process of rapid freezing and vacuum drying (see FIG. 1).

실시예Example 2. 김치의 제조 2. Manufacturing of Kimchi

우수품질로 선정된 배추(화원농협), 무, 마늘, 쪽파, 생강 등을 정제수에 세 척하여 물기를 제거하였다. 물기가 제거된 배추에 정제염을 골고루 가하여 6시간동안 방치하여 절이고, 3~4차례의 세정작업을 시행하고 물기를 체(Seave)를 이용하여 제거하였다. 이 때 염도는 0.2% ~ 0.3%이하로 하여, 마늘, 쪽파, 생강, 멸치액젓, 새우젓, 소금, 설탕, 고춧가루, 밀가루풀을 혼합기에 혼합하였다. 물기가 제거된 김치에 상기에서 제조된 파쇄된 양념을 고루고루 묻혀서 김치를 제조한 후, 제조된 김치를 유산균이 영양소를 골고루 섭취할 수 있도록 파쇄기를 이용하여 우선 약 5m/m 정도의 메쉬를 이용하여 1차 파쇄 후, 1차 파쇄된 김치를 2m/m의 망을 이용하여 파쇄하였고, 하기 실시예 3의 시료로 사용하였다.      Chinese cabbage (Hwawon Nonghyup), radish, garlic, chives, ginger, etc. selected as excellent quality were washed in purified water to remove water. Purified salt was evenly added to the cabbage, which had been drained, left for 6 hours to be pickled, washed three to four times, and water was removed using a sieve. At this time, the salinity was 0.2% to 0.3% or less, and garlic, chives, ginger, anchovy sauce, shrimp chop, salt, sugar, red pepper powder, and wheat flour were mixed in a mixer. After the kimchi is removed, the kimchi is made by applying the crushed seasoning evenly to the dried kimchi, and then using the shredder so that lactic acid bacteria can ingest the nutrients evenly using a shredder. After the first shredding, the first shredded kimchi was shredded using a network of 2 m / m and used as a sample of Example 3 below.

실시예Example 3.  3. 김치유산균Kimchi lactic acid bacteria 분리 및 동정 Separation and Identification

상기 실시예 2에서 제조된 파쇄된 김치를 37℃에서 48시간동안 숙성 발효하였다. 발효된 김치액을 LBS 아가(Lactos Brooths agar) 배지를 이용하여 김치 관련균을 평판배양 하여, 평판배양된 콜로니(colony)를 LBS 아가 배지에 순수 배양하였다. 배양된 균주를 그램(Gram)염색법에 의하여 그램양성을 확인하여 균주를 간균(락토바실라이)임을 확인한다. 균주를 글리세린을 20%투입하여 동결하고 5~7℃에서 저온 보관하였다. 보관된 균주를 한국미생물보존센터에 의뢰하여 A(Lactobacillus plantarum), B(Lactobacillus acidophillus) 및 C(Lactobacillus buchneri)균주를 동정하여 하기의 표 1 내지 6에 분석결과를 나타내었다(표 1 내지 6 참조).       The crushed kimchi prepared in Example 2 was fermented for 48 hours at 37 ℃. The fermented kimchi solution was plated with Kimchi-related bacteria using LBS agar (Lactos Brooths agar) medium, and plated colonies (colony) were purely cultured in LBS agar medium. The cultured strains were identified by Gram staining by Gram staining to confirm that the strains are bacillus (lactobacilli). The strain was frozen by injecting 20% glycerin and stored at low temperature at 5-7 ° C. The stored strains were commissioned by the Korea Microorganism Conservation Center to identify strains A (Lactobacillus plantarum), B (Lactobacillus acidophillus) and C (Lactobacillus buchneri), and the analysis results are shown in Tables 1 to 6 below (see Tables 1 to 6). ).

Lactobacillus plantarum 균주의 분석 Analysis of Lactobacillus plantarum Strains strain  strain AA strain strain AA API CHLAPI CHL API CHLAPI CHL 00 controlcontrol -- 2525 EsculineEsculine ++ 1One GlycerolGlycerol -- 2626 SalicineSalicine ++ 22 ErtythritolErtythritol -- 2727 CellobioseCellobiose ++ 33 D-ArabinoseD-Arabinose -- 2828 MaltoseMaltose ++ 44 L-ArabinoseL-Arabinose ++ 2929 LactoseLactose ++ 55 RiboseRibose ++ 3030 MelibioseMelibiose ++ 66 D-XyloseD-Xylose -- 3131 SaccharoseSaccharose ++ 77 L-XyloseL-Xylose -- 3232 TrehaloseTrehalose ++ 88 AdonitolAdonitol -- 3333 InulineInuline -- 99 β Methyl-xylosideβ Methyl-xyloside -- 3434 MelezitoseMelezitose ++ 1010 GalactoseGalactose ++ 3535 D-RaffinoseD-Raffinose ++ 1111 D-GlucoseD-Glucose ++ 3636 AmidonAmidon -- 1212 D-FructoseD-Fructose ++ 3737 GlycogeneGlycogene -- 1313 D-MannoseD-Mannose ++ 3838 XylitolXylitol -- 1414 L-sorboseL-sorbose -- 3939 β Gentiobioseβ Gentiobiose ++ 1515 RhamnoseRhamnose -- 4040 D-TuranoseD-Turanose ++ 1616 DulcitolDulcitol -- 4141 D-LyxoseD-Lyxose -- 1717 InositolInositol -- 4242 D-TagatoseD-Tagatose -- 1818 MannitolMannitol ++ 4343 D-FucoseD-Fucose -- 1919 SorbitolSorbitol ++ 4444 L-FucoseL-Fucose -- 2020 α ethyl-D-mannosideα ethyl-d-mannoside ++ 4545 D-ArabitolD-Arabitol -- 2121 α Methyl-D-glucosideα Methyl-D-glucoside -- 4646 L-ArabitolL-Arabitol -- 2222 N Acetyl glucosamineN Acetyl glucosamine ++ 4747 GluconateGluconate ++ 2323 AmygdalineAmygdaline ++ 4848 2 Keto-gluconate2 Keto-gluconate -- 2424 ArbutineArbutine ++ 4949 5 Keto-gluconate5 Keto-gluconate --

Lactobacillus plantarum 균주의 동정  Identification of Lactobacillus plantarum Strains 동정결과Identification result % ID% ID T IndexT Index Lactobacillus plantarumLactobacillus plantarum 99.999.9 1.01.0

Lactobacillus acidophillus 균주의 분석  Analysis of Lactobacillus acidophillus Strains strainstrain AA strain strain AA API CHLAPI CHL API CHLAPI CHL 00 controlcontrol -- 2525 EsculineEsculine ++ 1One GlycerolGlycerol -- 2626 SalicineSalicine ++ 22 ErtythritolErtythritol -- 2727 CellobioseCellobiose ++ 33 D-ArabinoseD-Arabinose -- 2828 MaltoseMaltose ++ 44 L-ArabinoseL-Arabinose -- 2929 LactoseLactose ++ 55 RiboseRibose -- 3030 MelibioseMelibiose -- 66 D-XyloseD-Xylose -- 3131 SaccharoseSaccharose ++ 77 L-XyloseL-Xylose -- 3232 TrehaloseTrehalose ++ 88 AdonitolAdonitol -- 3333 InulineInuline -- 99 β Methyl-xylosideβ Methyl-xyloside -- 3434 MelezitoseMelezitose -- 1010 GalactoseGalactose ++ 3535 D-RaffinoseD-Raffinose -- 1111 D-GlucoseD-Glucose ++ 3636 AmidonAmidon -- 1212 D-FructoseD-Fructose ++ 3737 GlycogeneGlycogene -- 1313 D-MannoseD-Mannose ++ 3838 XylitolXylitol -- 1414 L-sorboseL-sorbose -- 3939 β Gentiobioseβ Gentiobiose ++ 1515 RhamnoseRhamnose -- 4040 D-TuranoseD-Turanose -- 1616 DulcitolDulcitol -- 4141 D-LyxoseD-Lyxose -- 1717 InositolInositol -- 4242 D-TagatoseD-Tagatose -- 1818 MannitolMannitol -- 4343 D-FucoseD-Fucose -- 1919 SorbitolSorbitol -- 4444 L-FucoseL-Fucose -- 2020 α ethyl-D-mannosideα ethyl-d-mannoside -- 4545 D-ArabitolD-Arabitol -- 2121 α Methyl-D-glucosideα Methyl-D-glucoside -- 4646 L-ArabitolL-Arabitol -- 2222 N Acetyl glucosamineN Acetyl glucosamine ++ 4747 GluconateGluconate -- 2323 AmygdalineAmygdaline ++ 4848 2 Keto-gluconate2 Keto-gluconate -- 2424 ArbutineArbutine -- 4949 5 Keto-gluconate5 Keto-gluconate --

Lactobacillus acidophillus 균주의 동정 Identification of Lactobacillus acidophillus Strains 동정결과Identification result % ID% ID T IndexT Index Lactobacillus acidophillusLactobacillus acidophillus 90.190.1 0.970.97

Lactobacillus buchneri 균주의 분석 Analysis of Lactobacillus buchneri Strains Running Time(min)Running Time (min) 지방산종류Fatty acid types 함량(%)content(%) 1One 4.5574.557 12:0  12: 0 Lauric acid Lauric acid 0.390.39 22 7.0397.039 14:0  14: 0 Myristic acid Myristic acid 9.639.63 33 9.8979.897 16:1(w7c)  16: 1 (w7c) Palmitoleic Palmitoleic 3.413.41 44 9.9569.956 16:1(w7c)  16: 1 (w7c) Palmitoleic Palmitoleic 3.303.30 55 10.19710.197 16:0  16: 0 Palmitic acid Palmitic acid 20.7120.71 66 13.25413.254 18:1(w9c)  18: 1 (w9c) Oleic acid Oleic acid 29.2929.29 77 13.34813.348 18:1(w7c)  18: 1 (w7c) Oleic acid Oleic acid 15.4715.47 88 13.65713.657 18:0  18: 0 Stearic acid Stearic acid 2.622.62 99 15.16515.165 19:0(w10c)  19: 0 (w10c) CYCLO CYCLO 1010 15.22715.227 19:0  19: 0 CYCLO w8c CYCLO w8c 3.343.34 1111

Lactobacillus buchneri 균주의 동정Identification of Lactobacillus buchneri Strains 동정결과Identification result % ID % ID Lactobacillus buchneriLactobacillus buchneri 51.2   51.2

실시예Example 4. 유산균 김치 발효액 제조 4. Preparation of Lactic Acid Bacteria Kimchi Fermentation Solution

4-1. 1차 유산균 김치 발효액의 제조4-1. Preparation of Primary Lactic Acid Bacteria Kimchi Fermentation Solution

살균된 탱크에 상기 실시예 2에서 얻은 파쇄된 김치를 넣고 10시간동안 통성 혐기상태에서 자연발효 후, A균주 및 B균주를 투입하여 37℃에서 36시간동안 1차 배양하였다. 배지구성은 김치 2Kg, 프락토올리고당 140g, 대두펩타이드 70g, 포도당 70g, 탈지분유 52g, 정제수 2kg이다. 기존문헌에 기재되어 있는 바와 같이(Dr. Cherl-Ho lee, International Symposium on fermented foods Oct. 2003. International fermented food expo), 1차 배양은 1차 종균이 배양됨으로서 타 일반세균 및 병원균등을 제거되어 주균인 C 균주가 잘자랄 수 있는 유익한 환경을 만들었다.The crushed kimchi obtained in Example 2 was put into a sterilized tank and then fermented naturally in aerobic anaerobic state for 10 hours. Then, strain A and strain B were added thereto, followed by primary culture at 37 ° C. for 36 hours. Medium composition is 2Kg of kimchi, 140g of fructooligosaccharide, 70g of soybean peptide, 70g of glucose, 52g of skim milk powder, 2kg of purified water. As described in the existing literature (Dr. Cherl-Ho lee, International Symposium on fermented foods Oct. 2003. International fermented food expo), the primary culture is the primary seed is cultured to remove other common bacteria and pathogens The main strain, strain C, has created a beneficial environment for growth.

4-2. 2차 4-2. Secondary 가바균Gaba 김치 발효액의 제조 Preparation of Kimchi Fermentation Broth

상기 실시예 4-1의 배지에 가바(GABA)를 생성하는 C균주를 투입하고 37℃에서 3시간 간격으로 잘 저어주며 24시간 내지 48시간 동안 배양하였다.      C strain producing GABA was added to the medium of Example 4-1, and stirred at 37 ° C. for 3 hours and incubated for 24 to 48 hours.

실시예Example 5. 더블 코팅 5. Double coating

상기 실시예 4의 유산균을 코팅을 하기위해서, 60℃~ 70℃인 정제수에 알긴산나트륨 및 젤란검을 용해시킨 후, 보습제인 글리세린을 첨가하여 1차 코팅 용액을 제조히였다. 이들의 비율은 정제수 40kg에 알긴산나트륨, 젤란검 및 글리세린을 7 : 1 : 5로 각각 2,000g 및 300g, 1,500g으로 혼합하였다. 필요시 카제인 나트륨을 투입하여도 동일한 효과가 발생한다.       In order to coat the lactic acid bacteria of Example 4, after dissolving sodium alginate and gellan gum in purified water of 60 ℃ ~ 70 ℃, glycerin as a moisturizer was added to prepare a primary coating solution. In the ratio of 40 kg of purified water, sodium alginate, gellan gum, and glycerin were mixed at 7: 1: 5 at 2,000 g, 300 g, and 1,500 g, respectively. The same effect occurs when sodium casein is added if necessary.

상기 실시예 4의 김치발효액에 제조된 코팅액을 투입하여 60분정도 혼합하여 코팅을 형성시킨다. 전통적으로 사용되어온 검류에 의한 코팅은 이자에서 분비되는 단백질 분해요소가 소장 내 십이지장에서 유산균이 사멸되는 것을 방지 할 수 있다.       The coating solution prepared in the Kimchi fermentation solution of Example 4 was mixed for about 60 minutes to form a coating. The conventional coating by gum can prevent the proteolytic secretion of interest from lactic acid bacteria in the duodenum in the small intestine.

2차 코팅액은 먼저 대두유와 자당지방산에스테르를 서서히 혼합하고, 대두펩타이드, 탈지분유 및 구아검을 혼합 후, 소량의 정제수를 첨가하여 30분동안 혼합하였다. 이때 이들의 비율은 대두펩타이드, 탈지분유, 자당지방산에스테르, 대두유, 구아검을 10 : 5 : 1 : 1 : 0.1로 혼합하였다.        The secondary coating solution was slowly mixed with soybean oil and sucrose fatty acid ester, and then mixed with soybean peptide, skim milk powder and guar gum, and then mixed with a small amount of purified water for 30 minutes. At this time, the ratio of these was mixed soybean peptide, skim milk powder, sucrose fatty acid ester, soybean oil, guar gum to 10: 5: 1: 1: 1: 0.1.

2차 코팅액은 위에서 분비되는 위산액(pH는 1~2)에 대하여 단백질은 pH가 낮아짐에 따라 막을 형성하여 유산균이 사멸되는 것을 방지 할 수 있다. The secondary coating solution may prevent the lactic acid bacteria from being killed by forming a film as the pH of the protein decreases with respect to the gastric acid solution (pH 1 to 2) secreted from the stomach.

상기 1차 및 2차 코팅으로 제조된 김치 유산균을 코팅되지 않은 유산균과 비교하여 도 2에 나타내었다(도 2 참조).The kimchi lactic acid bacteria prepared by the primary and secondary coatings are shown in FIG. 2 in comparison with the uncoated lactic acid bacteria (see FIG. 2).

실시예Example 6. 동결 및 건조 6. Freeze and dry

상기 실시예 4에서 2차 코팅된 김치액을 -42℃에서 동결한 후, 동결된 김치를 진공상태에서 18℃에서 진공 건조하여 최종 수분함량을 2.0%~3.0% 미만으로 한다. 상기의 수분은 수분함량이 높을 경우 입자화 되지 않고, 수분 함량이 적을 경우에는 균이 쉽게 사멸하는 것을 방지하기 위함이다. 동결 및 진공 건조된 김치 고형분을 80메쉬의 망이 달린 분쇄기를 이용하여 입자를 고르게 하여 총 40kg(수득률 : 20%)의 김치 유산균을 수득하였다.      After freezing the second coated kimchi solution in Example 4 at -42 ° C, the frozen kimchi is vacuum dried at 18 ° C in a vacuum state to make the final moisture content less than 2.0% ~ 3.0%. The moisture is not granulated when the moisture content is high, and when the moisture content is low, the bacteria are easily killed. The frozen and vacuum dried kimchi solids were uniformly dispersed using a 80-mesh mesh grinder to obtain a total of 40 kg (yield: 20%) of kimchi lactic acid bacteria.

실험예Experimental Example 1.  One. 김치유산균의Lactic acid bacteria 가바Gava 생성 확인 실험 Generation verification experiment

상기 4-2 실시예의 김치유산균에서의 가바 생성을 확인하기 위해 HPLC를 이용하여 가바 표준품(SIGMA, A-5853)과 비교 분석 하였다In order to confirm the production of Gaba in the Kimchi Lactobacillus of Example 4-2, it was compared with Gaba standard (SIGMA, A-5853) using HPLC.

실험 결과, 도 3 및 도 4에서 나타내는 바와 같이, 가바의 표준품을 HPLC를 이용하여 분석한 후, 김치 유산균으로부터 생성된 가바를 확인한 결과, 같은 물질임을 확인하였다(도 3 및 도 4 참조).As a result of the experiment, as shown in Figure 3 and 4, after analyzing the standard of Gaba using HPLC, it was confirmed that the Gaba produced from the kimchi lactic acid bacteria, the same material (see Figs. 3 and 4).

또한, 표 7에서 나타내는 바와 같이, 숙성 되지 않은 김치일때와 본원발명의 김치 유산균으로 숙성된 김치를 비교분석한 결과 본원발명의 김치내 가바 함량은 약 23배 높은 수준으로 포함하고 있음을 확인하였다(도 5 참조).In addition, as shown in Table 7, when comparing the kimchi aged with kimchi lactic acid bacteria of the present invention when the kimchi and not aged, it was confirmed that the Gaba content in the kimchi of the present invention contained about 23 times higher ( 5).

구분division 가바함량Gab content 숙성하지 않은 김치Unripe Kimchi 0.0996 mg/ml0.0996 mg / ml 김치 유산균의 캡슐Kimchi Lactobacillus Capsules 23.2635 mg/g23.2635 mg / g

실험예Experimental Example 2. 코팅된  2. Coated 김치유산균의Lactic acid bacteria 위산 내성실험 Gastric resistance test

상기 실시예 6의 김치유산균이 위에서 위산 또는 펩신 등에 의하여 사멸되는지를 알아보기 위해 실험군은 하기 표 8과 같이 설정하였다.      In order to determine whether the kimchi lactic acid bacteria of Example 6 were killed by gastric acid or pepsin, the experimental group was set as shown in Table 8 below.

건조방법Drying method 온도 및 조건Temperature and conditions aa 김치 발효물을 열에 의한 건조Drying Kimchi Ferment by Heat 인입온도 65℃, 출구온도 40℃, 코팅액 분사속도 11ml/min, 상하운동 300RPMInlet temperature 65 ℃, outlet temperature 40 ℃, coating liquid spraying speed 11ml / min, vertical movement 300RPM bb 김치 발효물을 동결 및 진공건조Freeze and vacuum dry kimchi fermentation 동결온도 -40℃, 진공 0.5TOR, 온도 15~35℃Freezing temperature -40 ℃, vacuum 0.5TOR, temperature 15 ~ 35 ℃ cc 코팅된 김치발효물을 동결 및 진공건조Freeze and vacuum dry the coated kimchi fermentation

상기의 표 8에 나타낸 바와 같이 실험군 a b, c군을 각각 1g씩 채취하여 현탁액(묽은염산, pH 1.2)에 현탁시킨 다음 항온수조(37℃)상에 설치된 1분간 29~32왕복, 진폭 53 ~ 57mm 운동 장치가 부착된 캅셀붕해기 내에 넣고 120분동안 진탕한 후 MRS 평판 배지에 도말하여 배양한 다음 나타난 콜로니를 비교평가하여 그 결과를 하기 표 9에 나타내었다. As shown in Table 8 above, 1g of each of the experimental groups ab and c was collected and suspended in suspension (dilute hydrochloric acid, pH 1.2), followed by 29 ~ 32 round trips, amplitude 53 ~ 1 minute, installed in a constant temperature water bath (37 ℃). In a capsule disintegrator attached to a 57mm exercise device, shaken for 120 minutes, plated, cultured, and cultured on an MRS plate medium. The results were shown in Table 9 below.

구 분division 균수/g (제조공정 처리후)Number of bacteria / g (after manufacturing process) 균수/g (제조 후 1년경과)Number of bacteria / g (1 year after manufacture) 가바(GABA)GABA 대조군: 초기김치발효물Control: Initial Kimchi Fermentation 7 × 109 7 × 10 9 22mg/g22mg / g a: 김치발효물 열풍건조a: Kimchi fermented product hot air drying 6 × 10³6 × 10³ 2 × 10²  2 × 10² 22mg/g22mg / g b: 김치발효물 동결건조b: freeze-dried kimchi fermentation 3 × 10³3 × 10³ 4 × 10²4 × 10² 22mg/g22mg / g c: 김치발효물 코팅동결건조c: freeze-dried coating of kimchi fermentation 4 × 104 × 10 2 × 102 x 10 22mg/g22mg / g

상기 표 9에 나타낸 바와 같이, 코팅을 하지 않은 김치발효물은 위산액에 의하여 대부분 사멸하는 것으로 나타났으며, 초기 김치발효물의 균수/g가 7× 10에서 일부 유산균은 파쇄되었으나 코팅된 김치발효물을 동결건조한 제품은 위산에서도 균수/g가 4× 10으로 뛰어난 위산에 대한 생존율을 나타냈으며, 제조 후 1년이 경과되어도 균수/g이 2× 10으로 다른 군에 비해서 본 발명의 김치유산균이 위산 또는 펩신에 대한 저항성이 높은 것을 확인할 수 있었다. As shown in Table 9, the kimchi fermented without coating was mostly killed by gastric acid, and the number of bacteria / g of the initial kimchi fermented was 7 × 10, but some lactic acid bacteria were crushed, but the coated kimchi fermented. The freeze-dried product showed excellent survival rate for gastric acid with 4 × 10 of bacteria / g in gastric acid, and the kimchi lactic acid bacterium of the present invention compared to other groups with bacterial count / g of 2 × 10 even after 1 year of manufacture. Or it was confirmed that the resistance to pepsin is high.

실험예 3. 코팅된 김치 유산균의 십이지장내 담즙액에 의한 사멸 실험Experimental Example 3. Killing test of coated kimchi lactic acid bacteria in the duodenal bile

본 발명의 김치 유산균이 십이지장내 담즙액에 의하여 사멸되는지를 확인하기 위해 하기와 같이 실험을 수행하였다.      In order to determine whether the kimchi lactic acid bacteria of the present invention are killed by the bile solution in the duodenum, experiments were performed as follows.

상기 표 8에서 나타낸 것과 같은 실험군 a, b, c 군을 각각 1g씩 채취하여 증류수로 완충용액(pH 5.8)에 현탁시킨 다음 담즙액 500ug/g(w/w)를 혼합하고 pH를 7.5로 보정한 다음 항온수(37℃)상에 설치된 왕복운동 장치가 부착된 캅셀붕해기 내에 넣고 120분 동안 진탕한 후 MRS 평판 배지에 도말하여 배양한 다음 나타난 콜로니를 비교 평가하여 그 결과를 하기 표 10에 나타내었다.       1 g of each of the experimental groups a, b, and c as shown in Table 8 were collected, suspended in buffer solution (pH 5.8) with distilled water, mixed with bile solution 500 ug / g (w / w), and adjusted to pH 7.5. Then, put in a capsule disintegrator attached to a reciprocating device installed on a constant temperature water (37 ℃) and shaken for 120 minutes and then incubated by incubating in MRS plate medium and compared the resulting colonies and the results are shown in Table 10 Shown in

구 분division 균수/g(제조공정 처리후)Number of bacteria / g (after manufacturing process) 균수/g(제조 후 1년경과)Number of bacteria / g (1 year after manufacture) 가바물질/gGABA substance / g 대조군: 초기 김치발효물Control: Initial Kimchi Fermentation 7 × 109 7 × 10 9 22mg22mg A: 김치발효물 열풍건조A: Kimchi fermented product hot air drying 5 × 10⁴  5 x 10⁴ 4 × 10²  4 × 10² 22mg22mg B: 김치발효물 동결건조B: Kimchi Fermented Freeze Dried 1 × 10  1 × 10 4 × 10³  4 × 10³ 22mg22mg C: 김치발효물 코팅 동결건조C: Kimchi Fermented Coating Lyophilized 9 × 10 9 × 10 3 × 10  3 × 10 22mg22mg

실험결과, 상기의 표 10에 나타낸 바와 같이 코팅을 하지 않은 김치 발효물은 담즙액(효소등)에 의하여 대부분 사멸하는 것으로 나타났으며, 초기 김치발효물의 균수/g가 7× 109 에서 코팅된 김치발효물을 동결 건조한 제품은 담즙액에서도 균수/g가 9× 108으로 뛰어난 담즙액에 대한 생존율을 나타냈으며, 제조 후 1년이 경과되어도 균수/g이 3× 108으로 다른 군에 비해서 본 발명의 김치유산균이 십이지장내 담즙액에 대한 저항성이 높은 것을 확인할 수 있었다. As a result, as shown in Table 10, the kimchi fermented without coating was mostly killed by bile (enzyme, etc.), and the bacterial count / g of the initial kimchi fermentation was coated at 7 × 10 9 . freezing the kimchi fermented dry product showed the viability of the bacteria / g with excellent bile solution was 9 × 10 8 in the bile fluid, even one year after the production with bacteria / g is 3 × 10 8 compared to the other groups Kimchi lactic acid bacteria of the present invention was confirmed that the high resistance to bile in the duodenum.

실험예 4. 코팅된 김치유산균의 소장 및 대장내 코팅액 제거효과 실험Experimental Example 4. Effect of Coated Kimchi Lactic Acid Bacteria Removal Effect

김치유산균이 대장에서 코팅액이 제거되어 유산균이 장내에서 서식할 수 있는지를 알아보기 위해 하기와 같이 실험을 수행하였다.       Kimchi lactobacillus was carried out as follows to determine whether the coating solution is removed from the large intestine and lactic acid bacteria can live in the intestine.

상기 표 8에서의 실험군 c를 1g씩 채취하여 0.2N 인산이수소칼륨 시액 25ml에 0.2N 수산화나트륨 시약 118ml 및 물을 가해 1L로 맞추어 pH 약 6.8로 조절하여 제조한 제 2액에 현탁시킨 다음 왕복운동 장치가 부착된 캅셀붕해기 내에 넣고 120분동안 진탕한 후 MRS평판배지에 도말하여 배양한 다음 나타난 콜로니를 비교평가하여 그 결과를 하기 표 11 나타내었다.      Take 1g each of the experimental group c in Table 8, add 118ml of 0.2N sodium hydroxide reagent and water to 25ml of 0.2N potassium dihydrogen phosphate solution, adjust the pH to about 6.8 and suspend it in the prepared second solution. Put in a capsule disintegrator attached to the exercise device and shaken for 120 minutes and then plated and cultured on MRS plate medium and compared to the resulting colonies are shown in Table 11 below.

구 분division 균수/g (제조공정 처리후)Number of bacteria / g (after manufacturing process) 균수/g (제조후 1년경과)Number of bacteria / g (1 year after manufacture) 가바물질/gGABA substance / g 대조군: 초기김치발효물Control: Initial Kimchi Fermentation 7 × 109 7 × 10 9 22mg22mg c: 김치발효물 코팅동결건조c: freeze-dried coating of kimchi fermentation 8 × 108 × 10 3 × 103 × 10 22mg22mg

실험결과, 상기 표 11에 나타낸 바와 같이 코팅된 김치 발효물을 동결건조한 제품은 균수/g가 3× 108로 장액에서 코팅제가 용해되어 배양율이 높게 나타났으며, 또한 가바물질도 변함이 없었다(21mg/g). 제조 후 1년이 경과되어도 균수/g 가 3× 108로 감소율이 낮아 코팅된 발효김치 분말 유산균은 김치의 유용물질 섭취는 물론 유산균이 소장 및 대장에 정착되어 정장작용이 뛰어남을 확인할 수 있었다. As a result, as shown in Table 11, the freeze-dried product of the coated kimchi fermented product showed a high culture rate by dissolving the coating agent in the serous solution with a bacterial count / g of 3 × 10 8 . (21 mg / g). Even after one year of manufacture, the fermented kimchi powder lactic acid bacteria with low bacterial count / g decreased to 3 × 10 8 , and the lactic acid bacteria settled in the small intestine and large intestine as well as the consumption of useful materials of kimchi.

도 1은 김치유산균을 함유한 분말을 제조하는 제조공정도를 나타낸 도이며, 1 is a view showing a manufacturing process for producing a powder containing kimchi lactic acid bacteria,

도 2는 코팅되지 않은 김치유산균(A) 및 액상더블코팅 된 김치유산균을 나타낸 도이고, 2 is a view showing the uncoated kimchi lactic acid bacteria (A) and the liquid double coated kimchi lactic acid bacteria,

도 3은 가바의 표준품 HPLC로 분석한 도이며, 3 is a diagram analyzed by Gabba standard HPLC,

도 4는 김치유산균에서 생성된 가바를 HPLC로 분석한 도이고, Figure 4 is a diagram analyzing the Gava produced in kimchi lactic acid bacteria by HPLC,

도 5는 숙성되지 않은 김치와 김치유산균에 의해 숙성된 김치의 가바 함유량을 나타낸 도이다. Figure 5 is a diagram showing the Gab content of kimchi aged by kimchi and kimchi lactic acid bacteria not aged.

Claims (8)

김치를 발효시켜 김치유산균을 분리, 동정하는 제 1단계; 1차 유산균을 김치 발효액에서 발효하는 제 2단계; 상기 제 2단계의 김치 발효액에 가바를 생산하는 2차 유산균을 김치 발효액에서 발효하는 제 3단계; 상기 제 3단계에서 제조된 김치 발효액을 단백류로 1차 코팅 및 2차 코팅하는 제 4단계; 상기 제 4단계의 코팅 된 김치 발효액을 급속동결, 진공건조 하는 제 5단계의 공정을 포함하는 김치 유산균의 제조방법.Fermenting kimchi to separate and identify kimchi lactic acid bacteria; A second step of fermenting the first lactic acid bacteria in kimchi fermentation broth; A third step of fermenting the secondary lactic acid bacteria producing Gabba in the kimchi fermentation broth of the second step in the kimchi fermentation broth; A fourth step of firstly coating and secondly coating the kimchi fermentation broth prepared in the third step with proteins; Method of producing a kimchi lactic acid bacteria comprising the fifth step of the step of fast freezing, vacuum drying the coated kimchi fermentation broth of the fourth step. 제 1항에 있어서, 김치 유산균을 구성하는 재료들의 성분 배합 비율은 배추김치 60~80%, 탈지분유 2~20%, 프락토올리고당 5~20%, 대두펩타이드 2~20%, 포도당 2~20%, 알긴산나트륨 0.01~10%, 글리세린 0.01~10%, 젤란검 0.01~10%, 구아검 0.01~10%, 대두유 0.1~10%, 자당지방산에스테르 0.1~10%, 락토바실러스 플랜타럼(Lactobacillus plantarum) 0.001~10%, 락토바실러스 액시도필러스(Lactobacillus acidophillus) 0.001~10%, 락토바실러스 부시너리(Lactobacillus buchneri) 0.001~10% 것을 특징으로 하는 제조방법.      According to claim 1, the composition of the ingredients constituting the kimchi lactic acid bacteria cabbage kimchi 60 ~ 80%, skim milk powder 2 ~ 20%, fructooligosaccharide 5 ~ 20%, soybean peptide 2 ~ 20%, glucose 2 ~ 20 %, Sodium alginate 0.01-10%, glycerin 0.01-10%, gellan gum 0.01-10%, guar gum 0.01-10%, soybean oil 0.1-10%, sucrose fatty acid ester 0.1-10%, Lactobacillus plantarum ) 0.001 ~ 10%, Lactobacillus acidophillus (Lactobacillus acidophillus) 0.001 ~ 10%, Lactobacillus bushneri (Lactobacillus buchneri) 0.001 ~ 10% characterized in that the manufacturing method. 제 1항에 있어서, 상기 제 1단계의 김치를 구성하는 재료들의 성분 배합비 율은, 배추 60~80%, 무 10~15%, 쪽파 1~5%, 설탕 1~5%, 고춧가루 1~5%, 밀가루풀 1~5%, 마늘 1~5%, 생강 1~5%, 멸치액젓 1~5%, 새우젓 2~5%, 소금 0.1~0.5%인 것을 특징으로 하는 제조방법.        According to claim 1, wherein the ingredient ratio of the ingredients constituting the kimchi of the first step, Chinese cabbage 60 ~ 80%, Radish 10 ~ 15%, Scallion 1 ~ 5%, Sugar 1 ~ 5%, Red pepper 1 ~ 5 %, Wheat flour 1-5%, garlic 1-5%, ginger 1-5%, anchovy sake 1-5%, shrimp 2-5%, salt production method characterized in that 0.1 to 0.5%. 제 1항에 있어서, 상기 제 2단계의 1차 유산균은 김치 발효액에 일반세균 및 병원균을 제거하기 위해 락토바실러스 플랜타륨(Lactobacillus plantarum) 균주와 락토바실러스 액시도필러스(Lactobacillus acidophillus) 균주를 접종하는 것을 특징으로 하는 제조방법.         The method of claim 1, wherein the first lactic acid bacteria of the second step is inoculated with Lactobacillus plantarum strain and Lactobacillus acidophillus strain to remove common bacteria and pathogens in kimchi fermentation broth. Manufacturing method characterized in that. 제 1항에 있어서, 상기 제 3단계의 2차 유산균은 가바를 생성하기 위한 단계로 김치 발효액에 락토바실러스 부시너리(Lactobacillus buchneri)균주를 접종하는 것을 특징으로 하는 제조방법.       The method according to claim 1, wherein the secondary lactic acid bacteria of the third step are inoculated with Lactobacillus buchneri strain to the kimchi fermentation broth as a step for producing gabba. 제 1항에 있어서, 상기 제 4단계의 검류코팅은 알긴산나트륨과 젤란검및 글리세린의 구성 배합비(w/w)가 0.1~10%, 0.1~10%, 0.1~10%의 비율로 혼합됨을 특징으로 하는 제조방법.      According to claim 1, wherein the galvanic coating of the fourth step is characterized in that the mixing ratio (w / w) of sodium alginate, gellan gum and glycerin in a ratio of 0.1 to 10%, 0.1 to 10%, 0.1 to 10% The manufacturing method to make. 제 1항에 있어서, 상기 제 5단계의 2차 코팅액은 대두펩타이드, 탈지분유, 자당지방산에스테르, 대두유, 구아검의 구성 배합비(w/w)가 대두펩타이드 2~20%, 탈지분유 2~20%, 자당지방산에스테르0.1~10%, 대두유 0.1~10%, 구아검 0.1~10%의 비율로 혼합됨을 특징으로 하는 제조방법.      According to claim 1, wherein the second coating solution of the fifth step is soybean peptide, skim milk powder, sucrose fatty acid ester, soybean oil, guar gum composition ratio (w / w) of soybean peptide 2-20%, skim milk powder 2-20 %, Sucrose fatty acid ester 0.1 ~ 10%, soybean oil 0.1 ~ 10%, guar gum 0.1 ~ 10% of the manufacturing method characterized in that the mixing. 제 1항의 제조방법으로 제조된 김치 유산균 분말.       Kimchi lactic acid bacteria powder prepared by the method of claim 1.
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