KR101012125B1 - Label for estimating of saprogenic bacteria's growth by cumulative storage temperature' change - Google Patents

Label for estimating of saprogenic bacteria's growth by cumulative storage temperature' change Download PDF

Info

Publication number
KR101012125B1
KR101012125B1 KR1020080072323A KR20080072323A KR101012125B1 KR 101012125 B1 KR101012125 B1 KR 101012125B1 KR 1020080072323 A KR1020080072323 A KR 1020080072323A KR 20080072323 A KR20080072323 A KR 20080072323A KR 101012125 B1 KR101012125 B1 KR 101012125B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
label
medium
storage
corruption
accumulation
Prior art date
Application number
KR1020080072323A
Other languages
Korean (ko)
Other versions
KR20100011202A (en
Inventor
김은기
엄지민
Original Assignee
인하대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 인하대학교 산학협력단 filed Critical 인하대학교 산학협력단
Priority to KR1020080072323A priority Critical patent/KR101012125B1/en
Publication of KR20100011202A publication Critical patent/KR20100011202A/en
Application granted granted Critical
Publication of KR101012125B1 publication Critical patent/KR101012125B1/en

Links

Images

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/02Food
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/75Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
    • G01N21/77Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
    • G01N21/78Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a change of colour
    • G01N21/80Indicating pH value
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N31/00Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods
    • G01N31/22Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods using chemical indicators
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G01N2021/6439Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" with indicators, stains, dyes, tags, labels, marks

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Plasma & Fusion (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

본 발명은 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨에 관한 것으로, 구체적으로 동결건조된 표지균 및 배지 분말을 포함하는 혼합분말(1), pH 지시약을 포함하는 혼합액(2) 및 상기 혼합분말과 혼합액을 분리하는 파쇄용 분리막(3)을 포함하는 라벨 또는 동결건조된 표지균, pH 표지물질 및 배지 분말을 포함하는 혼합분말(1), 증류수(2) 및 상기 혼합분말과 혼합액을 분리하는 파쇄용 분리막(3)을 포함하는 라벨에 관한 것으로, 상기 라벨은 식품 저장 용기의 외부에 접착가능 하며, 저장물질과 같은 온도변화를 받은 표지균이 성장하면 색이 변하게 되어, 상기 색 변화를 관찰함으로써 저장물질의 부패 여부 판단에 유용하게 이용될 수 있다.The present invention relates to a label for determining the decay potential of a storage material according to the accumulation of storage temperature changes, specifically, a mixed powder (1) comprising a lyophilized label bacterium and a medium powder, and a mixed liquid (2) containing a pH indicator. And a mixed powder (1), distilled water (2), and the mixed powder comprising a label or lyophilized labeling bacteria, a pH labeling substance, and a medium powder comprising a pulverizing membrane 3 separating the mixed powder and the mixed liquid. It relates to a label comprising a crushing separation membrane (3) for separating the mixed solution, the label is adhesive to the outside of the food storage container, the color is changed when the label bacteria subjected to temperature changes such as the storage material is grown, Observing the color change can be useful for determining whether the storage material is corrupt.

온도변화 누적, 부패가능성 판단, pH 변화 Accumulation of temperature change, judgment of corruption, pH change

Description

저장 온도변화의 누적에 따른 식품 부패균 성장 판단용 라벨{Label for estimating of saprogenic bacteria's growth by cumulative storage temperature' change}Label for estimating of saprogenic bacteria's growth by cumulative storage temperature 'change}

본 발명은 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨에 관한 것이다.The present invention relates to a label for determining the perishability of a storage material according to the accumulation of storage temperature changes.

식품과 같이 부패하기 쉬운 물질은 냉장상태로 보관되거나 운반된다. 이때, 저장온도가 변하거나 식품이 외부에 노출될 경우 부패가 발생할 수 있다. 상기 식품이 방출 이후 최종 사용되기 전까지 제대로 냉장 등의 보관상태가 유지되었는지를 판단할 수 있다면 부패균의 성장에 따른 식중독 등을 사전에 예방할 수 있고 식품의 안전관리에 많은 도움이 될 수 있다.Perishable substances such as foods are stored or transported refrigerated. At this time, if the storage temperature is changed or the food is exposed to the outside may cause corruption. If the food can be determined whether the storage state, such as refrigeration properly maintained until the final use after release can prevent food poisoning due to the growth of decay bacteria in advance and can help a lot in food safety management.

식품 저장시의 외부 공기의 시간에 따른 변화의 이력을 측정 및 표시하는 방법은 화학적 및 물리적으로 가능하여, 이미 일부 기술이 보고되어 있다(대한민국 특허 2002-0086597; 미국등록특허 6,866,863). 그러나, 외부 환경의 온도 변화(시간 및 정도 등)를 물리적으로 측정하는 것은 가능하지만, 저장용기 내의 물질, 예 를 들면 액상의 식품의 온도가 어떻게 변했는가를 개별적으로 측정하는 것은 저장공간의 상태, 보관용기의 열전달 정도 등의 다양한 인자 때문에 더욱 힘들다. Methods of measuring and displaying the history of changes over time of outside air in food storage are chemically and physically possible, and some techniques have already been reported (Korean Patent 2002-0086597; US Patent 6,866,863). However, it is possible to physically measure the temperature change (time and degree, etc.) of the external environment, but to individually measure how the temperature of a substance in a storage container, for example a liquid food, has changed. It is more difficult because of various factors such as the degree of heat transfer of the vessel.

또한, 저장된 식품의 부패 여부를 측정 및 판단하기 위해 저장 온도 및 노출 시간 등을 판단하는 것은 더욱더 어렵다. 구체적으로, 상기 물리적인 온도 변화의 측정보다 더욱 어려운 것은, 다양한 형태의 온도변화에 의해 궁극적으로 부패균이 성장하였는지를 생물학적으로 판단하기는 쉽지 않다. 즉, 부패균 성장에 소요되는 시간 및 온도 등은 예측할 수 있지만, 실제 식품 저장 공간에서의 지속적으로 변화하는 온도의 상태와 각각 다른 노출시간에 의해 상기 부패균이 실제 성장할지를 물리, 화학적으로 예측할 수는 없다.In addition, it is more difficult to determine the storage temperature and exposure time, etc. to measure and determine whether the stored food is corrupt. Specifically, it is more difficult than the measurement of the physical temperature change, it is difficult to biologically determine whether the decay bacteria ultimately grew by various types of temperature change. In other words, it is possible to predict the time and temperature required for the growth of decayed bacteria, but it is not possible to predict physically and chemically whether the decayed bacteria will actually grow due to the continuously changing temperature conditions and the different exposure times in the actual food storage space. .

이에, 본 발명자들은 동결건조된 표지균 및 배지 분말, 및 pH 지시약 및 증류수를 포함하는, 식품 저장 용기의 외부에 접착될 수 있는 형태의 라벨을 제작하고, 상기 라벨이 온도변화 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단에 유용하게 사용될 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the present inventors produce a label in a form that can be adhered to the outside of the food storage container, including the lyophilized label bacteria and medium powder, and a pH indicator and distilled water, and the label is stored in accordance with the accumulated temperature change The present invention has been completed by confirming that it can be usefully used for determining the possibility of corruption.

본 발명의 목적은 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a label for determining the perishability of a storage material according to the accumulation of storage temperature changes.

본 발명의 다른 목적은 상기 라벨을 이용한 저장물질의 부패가능성 판단 방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention to provide a method for determining the corruption of the storage material using the label.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 동결건조된 표지균 및 배지 분말을 포함하는 혼합분말(1), pH 지시약을 포함하는 혼합액(2) 및 상기 혼합분말과 혼합액을 분리하는 파쇄용 분리막(3)을 포함하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention is a mixed powder (1) comprising a lyophilized label bacteria and medium powder, a mixed liquid (2) containing a pH indicator and a separation membrane for crushing separating the mixed powder and the mixed liquid (3) Labels for determining the perishability of the storage material resulting from the accumulation of changes in storage temperature, including

또한, 본 발명은 동결건조된 표지균, pH 표지물질 및 배지 분말을 포함하는 혼합분말(1), 증류수(2) 및 상기 혼합분말과 증류수를 분리하는 파쇄용 분리막(3)을 포함하는 라벨을 포함하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨을 제공한다.In addition, the present invention is a label comprising a mixed powder (1) comprising a lyophilized label, pH labeling material and medium powder, distilled water (2) and a separation membrane (3) for separating the mixed powder and distilled water It provides a label for determining the perishability of the storage material due to the cumulative storage temperature change.

또한, 본 발명은 상기 라벨을 이용한 저장물질의 부패가능성 판단 방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for determining the corruption of the storage material using the label.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 동결건조된 표지균 및 배지 분말을 포함하는 혼합분말(1), pH 지시약을 포함하는 혼합액(2) 및 상기 혼합분말과 혼합액을 분리하는 파쇄용 분리막(3)을 포함하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨을 제공한다.The present invention relates to a storage temperature change comprising a mixed powder (1) comprising a lyophilized label bacterium and a medium powder, a mixed liquid (2) containing a pH indicator, and a separation membrane (3) for separating the mixed powder and the mixed liquid. Provide a label for determining the perishability of the storage material as a result of

또한, 본 발명은 동결건조된 표지균, pH 표지물질 및 배지 분말을 포함하는 혼합분말(1), 증류수(2) 및 상기 혼합분말과 증류수를 분리하는 파쇄용 분리막(3)을 포함하는 라벨을 포함하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨을 제공한다.In addition, the present invention is a label comprising a mixed powder (1) comprising a lyophilized label, pH labeling material and medium powder, distilled water (2) and a separation membrane (3) for separating the mixed powder and distilled water It provides a label for determining the perishability of the storage material due to the cumulative storage temperature change.

본 발명의 구체적인 실시예에서, 표지균으로써 유산균인 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus)를 여러 배지에서 0 내지 21일간 배양한 결과, 성장과 동시에 젖산 등의 생성으로 pH가 낮아졌으며, 한번 낮아진 pH는 3주까지도 유지되는 것을 확인하고(표 1 참조), 상기 표지균을 pH 지시약, 금속비누 입자 및 pH 민감성 고분자입자 등의 pH 표지물질과 함께 배양한 결과, 표지균의 성장으로 pH가 떨어짐과 동시에 배지의 색이 변하여 산성임을 나타내었다(표 2 참조). 이때, 금속비누 입자나 pH 민감성 고분자 입자의 경우 배지를 중성으로 조정하여도, 산성의 색을 유지하였다. 본 발명의 라벨을 냉동 보존할 경우, 상기 라벨이 효과적으로 사용되려면 냉동온도(예; -20℃)에서도 균이 살아 있다가 온도가 오를 경우 성장할 수 있어야 한다. 또한 상기 라벨을 저장공간에서 사용하는 중 온도가 빙점 이하로 내려가는 경우, 라벨이 제대로 작동하기 위해서는 빙점 이하에서도 균 이 생존해 있어야 한다. 무엇보다도 장기간 저온상태에서 저장하는 경우에 표지균이 성장은 하지 않더라도 생존해 있어야 한다. 이에, 상기 표지균이 냉동저장 후 배양하여도 냉동저장 없이 배양한 균 또는 냉장저장 후 배양한 균과 마찬가지로 배양이 가능하며, 배양과 동시에 배양액의 pH를 떨어뜨린 것을 확인하였다. 또한 상기 표지균을 동결건조한 후 접종농도를 달리하여 배양함으로써, 동결건조된 표지균은 0.1%(W/V)이하를 사용하여야 다른 물질에 의한 탁도 등으로 색의 판단에 영향이 없고(표 3 참조), CFU는 10,000 CFU/㎖ 이상이 되어야 균의 성장이 1-2일 내에 이루어지는 것을 확인하였다. 아울러, 상기 동결건조된 표지균과 pH 지시약을 포함하도록 제조된 라벨을 다양한 온도에 노출한 후, 상기 미생물의 배양상태에 따른 pH 지시약의 색상을 비교함으로써, 저장 물질의 부패판단을 수행할 수 있었다(표 4 참조). 이에, 본 발명의 라벨은 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨로 유용하게 사용될 수 있다.In a specific embodiment of the present invention, the Lactobacillus acidophilus ( lactobacillus acidophilus ) as a label bacterium was cultured in various media for 0 to 21 days, and as a result, the pH was lowered due to the growth of lactic acid and the like, and was lowered once. It was confirmed that the pH was maintained up to 3 weeks (see Table 1), and the incubation of the labeled bacteria with pH indicators such as pH indicators, metal soap particles, and pH sensitive polymer particles resulted in a drop in pH due to growth of the labeled bacteria. At the same time the color of the medium was changed to indicate that it is acidic (see Table 2). At this time, in the case of metal soap particles or pH sensitive polymer particles, the acidic color was maintained even when the medium was adjusted to neutral. When the label of the present invention is cryopreserved, in order for the label to be effectively used, the bacterium is alive at a freezing temperature (for example, -20 ° C) and must be able to grow when the temperature rises. In addition, if the temperature falls below the freezing point while the label is used in the storage space, the bacteria must survive below the freezing point for the label to work properly. Above all, if stored at low temperature for a long time, the labeled bacteria should survive even though they do not grow. Thus, even if the labeled bacteria were cultured after freezing storage, it was possible to culture the same as bacteria cultured without freezing storage or cultured after cold storage, and it was confirmed that the pH of the culture solution was dropped at the same time as the culture. In addition, by lyophilizing the labeled bacteria after incubation at different inoculation concentrations, the freeze-dried labeled bacteria should use 0.1% (W / V) or less without affecting the judgment of color due to turbidity by other substances (Table 3). CFU should be 10,000 CFU / ml or more to confirm that the growth of the bacteria occurs within 1-2 days. In addition, the label prepared to include the lyophilized label and the pH indicator was exposed to various temperatures, and by comparing the color of the pH indicator according to the culture state of the microorganisms, it was possible to perform the decay determination of the storage material (See Table 4). Thus, the label of the present invention can be usefully used as a label for determining the corruption of the storage material according to the accumulation of storage temperature changes.

상기 표지균은 대표적인 부패 식중독균인 대장균 O-157, 살모넬라 등과 성장패턴이 유사하고, 성장시 유기산을 형성하여 pH를 떨어뜨리고, 인체 및 환경에 해가 없는 미생물은 무엇이든 사용가능하며, 바람직하게는 유산균, 효모, 곰팡이균 등이 있으며, 가장 바람직하게는 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus)를 사용가능하다.The bacterium has a growth pattern similar to E. coli O-157, Salmonella, etc., which is a representative decaying food poisoning bacterium. Lactic acid bacteria, yeast, fungi, etc., and most preferably Lactobacillus acidophilus ) can be used.

상기 배지는 표지균의 성장과 동시에 발생하는 유기산에 의해서 배지의 pH가 낮아지도록 배지 조성을 결정하였고, 바람직하게는 MRS, MRS 배지가 25%로 희석된 배지, 최소배지 및 포도당 100 g/ℓ를 포함하는 최소배지 등이 이용될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 MRS 배지가 25%로 희석된 배지가 이용될 수 있다. 구체적으로는 표지균이 성장하지 않는 경우의 배지 pH는 중성이 되도록 하며, 또한 배지 내에 아미노산 성분이 많을 경우, 표지균에 의해 분해되면서 발생하는 암모니아로 pH가 오르기 때문에 이를 하향 조절하였다. 그러나 표지균이 성장 정도와 비례하여 유기산을 생성하게 되고, 이 유기산은 배지의 pH를 떨어뜨려 산성이 된다. 즉, pH가 낮아지면 색이 변화되는 지시약을 배지에 첨가해 놓으면 저장물질과 같은 온도변화를 받은 표지균이 성장하면서 색이 변하게 되고 이것은 저장물질 내에 부패균이 있다면 성장할 수 있다는 것을 보여주는 것이다.The medium composition was determined so that the pH of the medium is lowered by the organic acid generated at the same time as the growth of the label bacteria, preferably containing MRS, medium diluted with 25% MRS medium, minimum medium and 100 g / L of glucose Minimal medium may be used, and more preferably, a medium in which MRS medium is diluted to 25% may be used. Specifically, the pH of the medium when the labeled bacteria do not grow is neutral, and when the amount of amino acids in the medium is large, the pH is increased by ammonia generated while being degraded by the labeled bacteria. However, the marker bacteria produce organic acids in proportion to the growth rate, and these organic acids drop the pH of the medium to become acidic. In other words, when the pH is lowered, the color change indicator is added to the medium, and the change in color is caused by the growth of the labeled bacterium such as the storage material, which shows that it can grow if there are decayed bacteria in the storage material.

상기 혼합분말은 동결건조된 표지균 및 배지 분말을 0.01 ~ 0.1 : 99.9 ~ 99.99의 비율, 바람직하게는 0.05 ~ 0.1 : 99.9 ~ 99.95의 비율, 가장 바람직하게는 0.1:99.9의 비율로 혼합하여 사용하는 것이 바람직하다.The mixed powder is used by mixing the lyophilized label bacteria and the medium powder in a ratio of 0.01 to 0.1: 99.9 to 99.99, preferably in a ratio of 0.05 to 0.1: 99.9 to 99.95, most preferably in a ratio of 0.1: 99.9 It is preferable.

본 발명의 라벨 제조시, 무균상황을 유지할 필요를 없게 하기 위해서 상기 표지균은 동결건조된 분말형태로, 배지 분말과 같이 미리 혼합하고 물과는 분리된 상태로 제작한다. 이 경우, 잡균의 배양을 억제할 수 있으나, 무균상황이 아니어서 곰팡이가 혼입되어 표지균 배양시 곰팡이가 성장하면서 유기산을 분해하고, pH가 증가하여 색이 변하는 것을 방지키 위해서 본 발명의 혼합분말(1)에 곰팡이 성장 저해제를 추가로 첨가할 수 있고, 상기 곰팡이 성장 저해제로는 항진균성 폴리엔(polyene antifungals), 니스타틴(nystatin), 암포테리신 B(amphotericin B), 피마리신(pimaricin) 등이 사용될 수 있다.In the preparation of the label of the present invention, in order to avoid the need to maintain a sterile condition, the label bacteria are prepared in the form of lyophilized powder, premixed with the medium powder, and separated from water. In this case, the culture of the various bacteria can be suppressed, but it is not a sterile situation, the fungus is mixed, and the mixed powder of the present invention in order to decompose the organic acid while growing the fungus when cultivating the labeled bacteria, and to increase the pH to prevent color change. A fungal growth inhibitor may be additionally added to (1), and the fungal growth inhibitor may be antifungal polyene (polyene antifungals), nystatin, amphotericin B, pimaricin And the like can be used.

상기 pH 지시약은 중성과 산성에서 색의 변화가 뚜렷한 지시약은 모두 사용가능하며, 바람직하게는 메틸레드, 메틸블루, 브로모크레솔 그린-메틸 레드(Bromocresol Green-Methyl Red), 브로모크레솔 그린(Bromocresol Green), 브레모페놀 블루(Bromophenol Blue) 등을 사용 가능하다.The pH indicator can be used both in the neutral and acidic color change indicators, preferably methyl red, methyl blue, bromocresol Green-Methyl Red, bromocresol green (Bromocresol Green), Bremophenol Blue, etc. can be used.

그러나 표지균 성장으로 발생한 유기산으로 배양액의 pH가 낮아졌더라도, 다른 오염균의 성장 등의 이유로 pH가 다시 상승하는 경우, pH가 중성으로 될 수 있으므로, pH가 오를 경우에도 색이 변해서는 안 된다. 즉, 한 번 낮은 pH에 의해 색이 변하면 그 색이 유지되도록 하는 방법이 필요하다. 이에, 하기 본 발명의 금속비누 입자와 pH 민감성 고분자 입자가 더욱 유용하게 이용될 수 있다.However, even if the pH of the culture solution is lowered with the organic acid generated by the growth of the labeled bacteria, when the pH rises again due to growth of other contaminants, the pH may become neutral, and therefore, the color should not change even when the pH rises. That is, there is a need for a method of maintaining the color once the color is changed by the low pH. Thus, metal soap particles and pH sensitive polymer particles of the present invention can be used more usefully.

상기 pH 표지물질에는 pH 지시약, 금속비누 입자 및 pH 민감성 고분자입자 등이 이용될 수 있다. 상기 금속비누 입자는 안료와 올레인산 등을 칼슘 등의 2가 이온과 비누화 반응을 시켜서 금속비누 알갱이 형태를 만든 것으로, 표지균이 성장하여 유기산의 발생으로 배양액의 pH가 낮아지면 금속비누는 다시 분해되어 함유되어 있던 염료가 배지내로 분산되면서 라벨이 전체적으로 상기 안료의 색을 띠게 된다. 이 반응은 pH가 라벨 내의 성분이 시간이 지남에 따라 pH가 중성으로 변해도 자발적으로 염료가 다시 금속비누의 알갱이가 되지 않으므로 라벨 내의 색을 유지할 수 있게 된다(도 3 참조).As the pH labeling material, a pH indicator, metal soap particles, and pH sensitive polymer particles may be used. The metal soap particles are formed in the form of granulated metal soap by reacting pigments and oleic acid with divalent ions such as calcium, and when the pH of the culture medium decreases due to the generation of organic acids due to the growth of the labeled bacteria, the metal soap is decomposed again. As the dye contained therein is dispersed into the medium, the label becomes the color of the pigment as a whole. This reaction allows the dye to retain its color within the label spontaneously, even if the pH changes to neutral over time as the ingredients in the label change over time (see Figure 3).

상기 pH 민감성 고분자 입자는 안료를 낮은 pH에서 고분자가 팽창되는 염기성 고분자(basic polymer)로 포집하고 있는 형태로 제조되고, 유기산 생성으로 pH 가 낮아지면 고분자입자 안에 포집된 안료가 배지로 방출되어 안료의 색을 띠게 하고, 배지가 다시 중성이 되도 배지에 퍼진 안료가 수축된 고분자입자 내로 들어오지 않기 때문에 상기 안료의 색을 유지할 수 있다. 염기성 고분자에는 키토산, 폴리라이신(polylysine), 폴리에틸렌이민(polyethyleneimine; PEI), 디에틸아미노에틸-덱스트란(diethylaminoethyl-dextran; DEAE-dextran), 폴리(아마이도아민) 덴드리머[poly(amidoamine) (PAMAM) dendrimers] 등이 이용될 수 있다(도 4 참조).The pH-sensitive polymer particles are prepared in a form in which the pigment is collected as a basic polymer in which the polymer is expanded at a low pH. When the pH is lowered due to the generation of an organic acid, the pigment trapped in the polymer particles is released into the medium to form a pigment. The color of the pigment can be maintained because the pigment becomes colored and the pigment spread on the medium does not enter the shrinked polymer particles even when the medium is neutral again. Basic polymers include chitosan, polylysine, polyethyleneimine (PEI), diethylaminoethyl-dextran (DEAE-dextran), poly (amidoamine) dendrimers (poly (amidoamine) (PAMAM) dendrimers] and the like can be used (see FIG. 4).

또한, 상기 안료에는 D&C Red No.6 Barium-lake, 붉은 색 유기염료, 무기염료 등이 이용될 수 있다.In addition, D & C Red No. 6 Barium-lake, a red organic dye, an inorganic dye, and the like may be used for the pigment.

또한, 본 발명의 라벨은 식품 저장 용기의 외부에 접착될 수 있는 형태로 제작될 수 있다. 온도에 의해 부패하는 저장물질의 외부 용기에 직접 붙이는 라벨 형태로 제작됨으로써 저장, 수송 중 저장 공간의 온도가 아닌, 저장물질의 실제 온도의 변화를 측정할 수 있다.In addition, the label of the present invention can be produced in a form that can be adhered to the outside of the food storage container. It is manufactured in the form of a label that is directly attached to the outer container of the storage material that is perished by the temperature, thereby measuring the change in the actual temperature of the storage material, not the temperature of the storage space during storage and transportation.

본 발명의 구체화에서, 예를 들어 본 발명의 라벨을 부착 전에는 동결건조된 표지균과 배지 분말을 포함하는 혼합분말(1)과 pH 지시약을 포함하는 혼합액(2)이 파쇄용 분리막(3)으로 분리되어 있다. 접착부분을 벗기고 라벨을 부착시 라벨의 외부에서 가하는 압력으로 상기 파쇄용 분리막(3)이 깨지면서, 혼합분말과 혼합액이 섞여서 표지균이 배양할 수 있는 상태가 된다. 이때, 상기 파쇄용 분리막(3)은 쉽게 깨지도록 경화성 수지를 사용하며, 상기 경화성 수지에는 아크릴, 페놀수지, 요소 수지, 멜라민 수지 등이 있다. 또한, 상기 라벨 외부는 접착시 가하는 압력에 대해서 내부 물질을 보호할 수 있도록 PE(poly ethylene), PP(poly propylene), PS(Poly styrene), PET(Poly Ethylene Telephthalate) 등의 재질을 필름형태로 만들어 사용하며, 접착하단 면은 저장물질의 색과 혼돈되지 않도록 불투명 백색을 사용한다(도 1 참조).In the embodiment of the present invention, for example, before applying the label of the present invention, the mixed powder (1) containing the lyophilized label bacteria and the medium powder and the mixed liquid (2) containing the pH indicator are separated into the separation membrane (3). It is separated. When the adhesive part is peeled off and the label is attached, the crushing separation membrane 3 is broken by the pressure applied from the outside of the label, and the mixed powder and the mixed solution are mixed so that the labeled bacteria can be cultured. At this time, the crushing separator 3 uses a curable resin so as to be easily broken, and the curable resin includes acrylic, phenol resin, urea resin, melamine resin, and the like. In addition, the outside of the label in the form of a film such as PE (poly ethylene), PP (poly propylene), PS (poly styrene), PET (Poly Ethylene Telephthalate) to protect the inner material against the pressure applied during adhesion The opaque white is used so that the end surface is not confused with the color of the storage material (see FIG. 1).

또한, 본 발명은 In addition,

1) 상기 라벨을 저장물질의 외부 용기에 부착하면서 파쇄용 분리막(3)을 깨는 단계;1) breaking the separation membrane 3 for crushing while attaching the label to an outer container of the storage material;

2) 저장기간이 완료된 후, 라벨의 색을 관찰하여 산성 색인 경우, 부패 가능으로 판단하는 단계를 포함하는 저장물질의 부패가능성 판단 방법을 제공한다.2) After the storage period is completed, it provides a method for determining the perishability of the storage material, including the step of observing the color of the label to determine that in the case of acidic index, perishable.

본 발명의 구체적인 실시예에서 본 발명의 라벨을 다양한 온도에 노출한 후, 상기 미생물의 배양상태에 따른 pH 지시약의 색상을 비교함으로써, 저장 물질의 부패판단을 수행할 수 있었다(표 4 참조). 이에, 본 발명의 방법은 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단에 유용하게 사용될 수 있다.In a specific embodiment of the present invention, after exposing the label of the present invention to various temperatures, by comparing the color of the pH indicator according to the culture state of the microorganisms, it was possible to perform the decay determination of the storage material (see Table 4). Thus, the method of the present invention can be usefully used to determine the perishability of the storage material due to the accumulation of storage temperature changes.

저장 중 외부온도의 변화의 누적으로 저장물질의 온도가 상승하거나 변화할 경우, 저장물질의 외부 용기에 접착되어 있는 라벨 내의 표지균은 온도변화에 따라 표지균의 성장에 적합한 온도일 경우, 성장을 할 수 있게 된다. 이때, 상기 표지균의 성장에 따라 발생한 유기산에 의해 pH가 산성이 되면, pH 표지물질이 산성 색을 띠는지 여부를 확인함으로써 부패가능성을 판단할 수 있다.If the temperature of the storage material rises or changes due to the accumulation of changes in the external temperature during storage, the labeled bacteria in the label adhered to the outer container of the storage material will grow if the temperature is suitable for the growth of the labeled bacteria according to the temperature change. You can do it. At this time, when the pH is acidic due to the organic acid generated as the labeled bacteria grow, the possibility of corruption may be determined by checking whether the pH labeling substance has an acidic color.

본 발명의 라벨은 식품 저장 용기의 외부에 접착가능 하며, 저장물질과 같은 온도변화를 받은 표지균이 성장하면 색이 변하게 되어, 상기 색 변화를 관찰함으로써 저장물질의 부패 여부 판단에 유용하게 이용될 수 있다.The label of the present invention can be adhered to the outside of the food storage container, the color is changed when the label bacteria subjected to the temperature change, such as the storage material is changed, it is useful to determine whether the storage material decay by observing the color change Can be.

이하, 본 발명을 제조예 및 실시예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by production examples and examples.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.However, the following examples are illustrative of the present invention, and the present invention is not limited to the following examples.

<< 제조예Production Example > 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨 제작> Production of labels for judging the corruption of stored materials

<1> 배지 조성<1> medium composition

<1-1> 최소 배지(<1-1> Minimum badge ( perper literliter ))

K2HPO4 7.0 gK 2 HPO 4 7.0 g

KH2PO4 2.0 gKH 2 PO 4 2.0 g

(NH4)2SO4 1.0 g(NH 4 ) 2SO 4 1.0 g

Glucose 10.0 gGlucose 10.0 g

Sodium citrate 0.5 g0.5 g of sodium citrate

MgSO4.7H2O 0.1 gMgSO 4 .7H 2 O 0.1 g

<1-2> <1-2> MRSMRS 배지( badge( perper literliter ))

Proteose Peptone No. 3 10.0 gProteose Peptone No. 3 10.0 g

Beef Extract 10.0 gBeef Extract 10.0 g

Yeast Extract 5.0 gYeast Extract 5.0 g

Dextrose 20.0 gDextrose 20.0 g

Polysorbate 80 1.0 gPolysorbate 80 1.0 g

Ammonium Citrate 2.0 gAmmonium Citrate 2.0 g

Sodium Acetate 5.0 gSodium Acetate 5.0 g

Magnesium Sulfate 0.1 gMagnesium Sulfate 0.1 g

Manganese Sulfate 0.05 gManganese Sulfate 0.05 g

Dipotassium Phosphate 2.0 gDipotassium Phosphate 2.0 g

Agar 15.0 gAgar 15.0 g

<2> <2> pHpH 지시약 또는  Indicator or pHpH 표지물질 제작 Labeling material production

<2-1> <2-1> pHpH 지시약 Indicator

메틸레드(methyl red) 0.1 g, 메틸렌 블루(methylene blue) 0.1 g을 에탄올 190 ㎖에 용해하고 물을 채워 200 ㎖로 만든다. 이와 유사한 중성에서 산성으로 변할 경우 색이 변하는 지시약은 모두 적용될 수 있다.0.1 g of methyl red and 0.1 g of methylene blue are dissolved in 190 ml of ethanol and filled with water to make 200 ml. Similarly, any color change indicators that change from neutral to acidic can be applied.

<2-2> 금속비누<2-2> metal soap

상기 안료 및 올레인산을 칼슘 등의 2가 이온과 비누화 반응을 시켜서 금속비누 알갱이 형태를 제조하였다. 하기 조성으로 60℃에서 480 rpm으로 2.5 시간 동안 반응한 후, 잘게 분쇄하여 사용하였다.The pigment and oleic acid were subjected to a saponification reaction with divalent ions such as calcium to prepare a metal soap grain form. After the reaction for 2.5 hours at 480 rpm at 60 ℃ with the following composition, it was used by grinding finely.

D&C Red No.6 Barium-lake 10 ㎎D & C Red No.6 Barium-lake 10 mg

올레인산 15 g15 g oleic acid

Ca(OH)2 2.204 g2.204 g of Ca (OH) 2

H2O 5.67 gH 2 O 5.67 g

리파아제 0.0375 gLipase 0.0375 g

<2-3> <2-3> pHpH 민감성 고분자 Sensitive Polymer

pH 민감성 고분자에는 많은 종류가 있고 낮은 pH에서 팽창하는 염기성 고분자(basic polymer)는 모두 적용될 수 있다.There are many types of pH sensitive polymers and any basic polymer that expands at low pH can be applied.

0.5 g의 키토산을 0.1%(V/V)의 초산 50 ㎖에 용해시키고, 여기에 키토산의 3-80%(Wt%)까지 EDTA를 추가하여 강도를 높일 수 있다. 여기에 안료(D&C Red No.6 Barium-lake; Warner-Jenkinson, USA)를 1-5 ㎎ 첨가하고 5 M NaOH로 pH를 중화하였다. 여기에 EDAC[1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride; Sigma, USA]를 10-100 mM 되도록 첨가하였다. 상온에서 4시간 동안 교반한 후, 증류수로 2회 세척, 0.5 M NaCl, 0.025 M NaOH로 2회 세척 및 0.05 M NaOH로 2회 세척 후, 증류수로 1회 세척하여 냉장보관하였다.0.5 g of chitosan is dissolved in 50 ml of 0.1% (V / V) acetic acid, and EDTA can be added to 3-80% (Wt%) of chitosan to increase the strength. 1-5 mg of a pigment (D & C Red No. 6 Barium-lake; Warner-Jenkinson, USA) was added thereto, and the pH was neutralized with 5 M NaOH. EDAC [1-Ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride; Sigma, USA] was added to 10-100 mM. After stirring for 4 hours at room temperature, washed twice with distilled water, washed twice with 0.5 M NaCl, 0.025 M NaOH and twice with 0.05 M NaOH, and then washed once with distilled water to be refrigerated.

<3> 라벨 제작<3> label production

<3-1> <3-1> pHpH 지시약 포함 Including indicator

아크릴로 분리된 공간의 한쪽에는 동결건조된 락토바실러스 에시도필러스 및 동결건조된 MRS(25%) 배지를 각각 6 ㎎ 및 10 ㎎을 넣어주고, 다른 쪽에는 pH 지시약을 포함하는 증류수 0.6 ㎖을 넣어줌으로써, 온도변화 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨을 제작하였다(도 1 참조).6 mg and 10 mg of lyophilized Lactobacillus esidophilus and lyophilized MRS (25%) medium were added to one side of the acrylic separated space, and 0.6 ml of distilled water containing a pH indicator was added to the other side. By putting in, a label for determining the decay potential of the storage material according to the accumulation of temperature changes was prepared (see FIG. 1).

<3-2> <3-2> pHpH 표지물질 포함 Include labeling substance

아크릴로 분리된 공간의 한쪽에는 동결건조된 락토바실러스 에시도필러스, pH 금속비누입자 또는 pH 민감성 고분자 입자 및 동결건조된 MRS(25%) 배지를 각각 6 ㎎, 각각 1 ㎎ 및 10 ㎎을 넣어주고, 다른 쪽에는 증류수 0.6 ㎖을 넣어줌으로써, 온도변화 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨을 제작하였다(도 2 참조).On one side of the acrylic separated space, 6 mg, 1 mg and 10 mg, respectively, of lyophilized Lactobacillus esidophilus, pH metal soap particles or pH sensitive polymer particles, and lyophilized MRS (25%) medium were added. The other side was prepared by adding 0.6 ml of distilled water to prepare a label for judging the corruption of the storage material according to the accumulation of temperature change (see FIG. 2).

<< 실시예Example 1>  1> 표지균의Marker 성장에 따른  According to growth pHpH 변화 확인 Confirm change

유산균인 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus; ATCC 4356, USA)를 하루 저녁 배양한 후, MRS, MRS (25%)(MRS 배지가 25%로 희석된 배지), 최소배지 및 포도당 100 g/ℓ를 포함하는 최소배지에 각각 5%(v/v)의 비율로 접종하였다. 30℃에서 배양하면서, 0, 1일, 4일, 7일 및 21일에 OD값 및 pH를 측정하였다.Lactobacillus, Lactobacillus acidophilus ; ATCC 4356, USA) after one evening of incubation, 5% (v ) in MRS, MRS (25%) (media diluted 25% of MRS medium), minimal medium and minimal medium containing 100 g / l of glucose / v) at the rate of inoculation. While incubating at 30 ° C., OD values and pH were measured at 0, 1 day, 4 days, 7 days and 21 days.

그 결과, 표 1에서 나타난 바와 같이 락토바실러스 에시토필러스는 MRS 배지 및 최소배지 등에서 성장과 동시에 젖산 등의 생성으로 pH가 낮아졌으며, 한번 낮아진 pH는 3주까지도 유지되었다.As a result, as shown in Table 1, the Lactobacillus Etophyllus growth in MRS medium and minimal medium and the like, the pH was lowered by the production of lactic acid, etc., once lowered pH was maintained even up to 3 weeks.

이때, MRS 100% 배지는 배지색이 짙어서 pH 지시약의 색변화를 관찰에 어려움이 있기 때문에, MRS 배지를 25%로 희석하여 배지색이 옅게 함으로써 색변화에 관찰이 용이하도록 하였다.At this time, since the medium color of the MRS 100% medium is difficult to observe the color change of the pH indicator, it was easy to observe the color change by diluting the MRS medium to 25% to make the medium color lighter.

배지/ 배양시간Medium / incubation time 접종 직후Immediately after inoculation 1일1 day 4일4 days 7일7 days 21일21st ODOD pHpH ODOD pHpH ODOD pHpH ODOD pHpH ODOD pHpH MRSMRS 0.050.05 6.76.7 8.68.6 3.63.6 6.86.8 3.73.7 6.36.3 3.93.9 6.86.8 3.73.7 MRS(25%)MRS (25%) 0.010.01 6.76.7 3.73.7 3.63.6 2.72.7 3.63.6 2.62.6 3.83.8 2.72.7 3.83.8 최소배지Minimum badge 00 7.27.2 0.30.3 6.46.4 0.50.5 4.44.4 0.40.4 4.44.4 0.50.5 4.54.5 최소배지+포도당(100g/L)Minimum medium + glucose (100 g / L) 00 77 0.40.4 4.74.7 0.40.4 4.84.8 0.30.3 4.74.7 0.30.3 4.54.5

<< 실시예Example 2>  2> 표지균의Marker 성장에 따른  According to growth pHpH 변화 및  Change and pHpH 표지물질의 색 변화 확인 Check the color change of the label

유산균인 락토바실러스 에시도필러스를 pH 지시약, 금속비누 입자 및 pH 민감성 고분자 입자를 각각 0.0001%, 1% 및 1%의 농도로 포함하는 MRS(25%) 배지에 접종하여 30℃에서 배양하면서 0, 4일, 1주, 3주 및 6주에 pH 변화 및 pH 표지물질의 색변화를 확인하였다. 마지막에 pH를 중성으로 보정하고, 색변화를 확인하였다.Lactobacillus Escidophilus, a lactic acid bacterium, was inoculated in MRS (25%) medium containing pH indicator, metal soap particles, and pH sensitive polymer particles at concentrations of 0.0001%, 1%, and 1%, respectively, and cultured at 30 ° C. At 4 days, 1 week, 3 weeks, and 6 weeks, pH changes and color changes of pH markers were confirmed. Finally, the pH was corrected to neutral and the color change was confirmed.

그 결과, 표 2에서 나타난 바와 같이 pH 지시약의 경우, 처음 녹색이던 지시약은 자주색 및 적색으로 변하여 6주까지 색깔이 유지되었으며, 금속비누 입자나 pH 민감성 고분자 입자의 경우 배지를 중성으로 유지해도 색은 붉은 색을 유지하였다.As a result, as shown in Table 2, the pH indicator, which was initially green, turned purple and red to maintain color for up to 6 weeks, and in the case of metal soap particles or pH-sensitive polymer particles, the color was maintained even when the medium was kept neutral. Red color remained.

접종 직후Immediately after inoculation 4일4 days 1주1 week 3주3 weeks 6주6 weeks pHpH 6.76.7 3.83.8 3.63.6 3.83.8 3.83.8 pH 지시약pH indicator 녹색green 자주often 자주often 자주often 자주often 금속비누 입자Metal soap particles 무색Colorless 적색Red 적색Red 적색Red 적색Red pH 민감고분자 입자pH sensitive polymer particles 무색Colorless 적색Red 적색Red 적색Red 적색Red

<< 실시예Example 3> 냉동저장  3> frozen storage 표지균의Marker 생존 검사 Survival test

유산균인 락토바실러스 에시도필러스를 MRS(25%) 배지에 접종하여 30℃에서 24시간 배양한 후, 상기 배양액을 -10℃ 및 -20℃에서 48시간 저장하였다. 상기 저온에서 저장된 배양액을 30℃에서 24시간 배양한 후, OD값을 측정하였다.After inoculating Lactobacillus Escidophilus, which is a lactic acid bacterium, into the MRS (25%) medium and incubating at 30 ° C. for 24 hours, the culture solution was stored at −10 ° C. and −20 ° C. for 48 hours. After culturing the culture solution stored at low temperature for 24 hours at 30 ℃, the OD value was measured.

그 결과, 대조군(저장 없이 30℃에서 배양), -10℃ 실험군 및 -20℃ 실험군의 OD 값은 각각 3.8, 3.6 및 3.5로, 냉동 보관되었던 표지균도 배양가능함을 나타낸다.As a result, the OD values of the control group (cultivated at 30 ° C. without storage), the -10 ° C. experimental group, and the -20 ° C. experimental group were 3.8, 3.6, and 3.5, respectively, indicating that the labeled bacteria that had been stored frozen can also be cultured.

<< 실시예Example 4> 동결건조된 분말  4> Lyophilized Powder 표지균과Marker and 1일 배양된  Cultured for 1 day 접종균Inoculation 사용시 효과 비교 Comparison of effects when using

유산균인 락토바실러스 에시도필러스를 MRS(25%) 배지에 접종하여 30℃에서 24시간 배양한 후, 배양균을 원심분리하여 부영양제(10% Skim milk+1% glutamin산 나트륨 수용액)에 현탁 후 Eyela 동결건조기(일본)를 이용하여 동결건조하였다. 상기 동결건조된 분말 표지균과 상기 방법으로 배양된 액상의 배양액을 MRS(25%) 배지에 10%의 농도로 접종하여 30℃에서 24시간 배양하였다.Lactobacillus Escidophilus, a lactic acid bacterium, was inoculated in MRS (25%) medium and incubated at 30 ° C. for 24 hours, followed by centrifugation of the culture bacteria and suspended in a nutrient (10% Skim milk + 1% sodium glutamin solution). It was then lyophilized using Eyela lyophilizer (Japan). The lyophilized powder labeled bacteria and the culture medium of the liquid cultured by the above method were inoculated at a concentration of 10% in MRS (25%) medium and incubated at 30 ° C. for 24 hours.

그 결과, 동결건조된 표지균은 0.1%(W/V)이하를 사용하여야 다른 물질에 의한 탁도 등으로 색의 판단에 영향이 없고, CFU는 10,000 CFU/㎖ 이상이 되어야 균의 성장이 1-2일 내에 이루어진다.As a result, less than 0.1% (W / V) of the freeze-dried marker bacteria should not affect the judgment of color due to turbidity by other substances, and CFU should be 10,000 CFU / ml or higher. It takes place within two days.

분말균 접종비율(w/v)Powder bacteria inoculation rate (w / v) 1일1 day 3일3 days 10%10% 4.804.80 3.373.37 5%5% 5.205.20 4.714.71 1%One% 4.984.98 3.383.38 0.5%0.5% 4.074.07 4.434.43 0.1%0.1% 4.154.15 3.403.40 0.01%0.01% 4.74.7 3.823.82

<< 실시예Example 5> 저장온도 변화에 따른 색 변화 5> Color change by storage temperature

제조예 3에서 제조한 라벨을 표 4에서 정한 바와 같이 -10℃, 4℃, 15℃ 및 37℃ 등의 다양한 온도에 정해진 시간만큼 노출한 후, 각 구간(0~6, 6~20, 20~28, 28~42 및 42~48)에서의 색 변화를 관찰하였다.After the label prepared in Preparation Example 3 was exposed to various temperatures such as -10 ° C, 4 ° C, 15 ° C, and 37 ° C for a predetermined time, as defined in Table 4, each section (0-6, 6-20, 20). Color changes in ˜28, 28-42 and 42-48) were observed.

그 결과, 표 4에서 나타난 바와 같이 색 변화가 나타났으며, 상기 색변화를 바탕으로 부패 가능성을 판단할 수 있었다.As a result, a color change appeared as shown in Table 4, and the possibility of corruption could be determined based on the color change.

실험Experiment 0~6시간0-6 hours 6~206-20 20~2820-28 28~4228-42 42~4842-48 부패판단Corruption 1One 온도Temperature 3737 3737 3737 3737 3737 부패
가능
Corruption
possible
색깔Color 녹색green 자색Purple 자색Purple 자색Purple 자색Purple 22 온도Temperature 1515 1515 1515 1515 1515 부패
가능
Corruption
possible
색깔Color 녹색green 녹색green 녹색green 녹자색Green purple 자색Purple 33 온도Temperature 44 44 44 44 44 안전safety 색깔Color 녹색green 녹색green 녹색green 녹색green 녹색green 44 온도Temperature 44 1515 44 44 44 안전safety 색깔Color 녹색green 녹색green 녹색green 녹색green 녹색green 55 온도Temperature 44 44 1515 44 44 안전safety 색깔Color 녹색green 녹색green 녹색green 녹색green 녹색green 66 온도Temperature 44 3737 3737 44 44 부패
가능
Corruption
possible
색깔Color 녹색green 녹색green 자색Purple 자색Purple 자색Purple 77 온도Temperature -10-10 3737 3737 -10-10 -10-10 부패
가능
Corruption
possible
색깔Color 녹색green 녹색green 자색Purple 자색Purple 자색Purple 88 온도Temperature -10-10 3737 44 3737 3737 부패
가능
Corruption
possible
색깔Color 녹색green 녹색green 녹색green 자색Purple 자색Purple

도 1은 본 발명의 pH 지시약을 포함하는 부착형태 라벨의 구성도이다.1 is a block diagram of an adhesive label containing a pH indicator of the present invention.

도 2는 본 발명의 pH 표지물질을 포함하는 부착형태 라벨의 구성도이다.Figure 2 is a block diagram of an adhesive label containing a pH labeling material of the present invention.

도 3은 금속비누 입자의 발색 원리를 나타낸 도이다.3 is a view showing the color development principle of metal soap particles.

도 4는 pH 민감성 고분자의 발색 원리를 나타낸 도이다.Figure 4 is a diagram showing the color development principle of the pH sensitive polymer.

Claims (26)

동결건조된 표지균 및 배지 분말을 포함하는 혼합분말(1), pH 지시약을 포함하는 혼합액(2) 및 상기 혼합분말과 혼합액을 분리하는 파쇄용 분리막(3)을 포함하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.Accumulation of storage temperature changes includes a mixed powder (1) comprising a lyophilized label bacterium and a medium powder, a mixed liquid (2) containing a pH indicator, and a crushing separator (3) separating the mixed powder and the mixed liquid. Label for judging the corruption of the storage material according to 동결건조된 표지균, pH 표지물질 및 배지 분말을 포함하는 혼합분말(1), 증류수(2) 및 상기 혼합분말과 증류수를 분리하는 파쇄용 분리막(3)을 포함하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.Accumulation of storage temperature changes including a mixed powder (1) comprising a lyophilized label bacterium, a pH labeling substance and a medium powder, distilled water (2) and a separation membrane (3) separating the mixed powder and distilled water Label for judging the corruption of the stored material. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 표지균은 부패 식중독균과 성장패턴이 유사하고, 성장시 유기산을 형성하여 pH를 떨어뜨리고, 인체 및 환경에 해가 없는 미생물인 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.[Claim 3] The storage temperature change of claim 1 or 2, wherein the labeled bacterium is a microorganism having a growth pattern similar to that of the decaying food poisoning bacterium, which forms an organic acid upon growth, lowers the pH, and is harmless to humans and the environment. Label for judging the corruption of the stored material by accumulation of 제 3항에 있어서, 상기 부패 식중독균은 대장균 O-157 또는 살모넬라인 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.According to claim 3, wherein the decayed food poisoning bacteria E. coli O-157 or Salmonel line characterized in that the storage material according to the accumulation of storage temperature changes, the possibility of decay label. 제 3항에 있어서, 상기 표지균은 유산균, 효모, 곰팡이로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.According to claim 3, wherein the label is a label for judging the corruption of the storage material according to the accumulation of storage temperature changes, characterized in that selected from the group consisting of lactic acid bacteria, yeast, mold. 제 5항에 있어서, 상기 표지균은 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus)인 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.The method of claim 5, wherein the label is Lactobacillus Edophilus ( Lactobacillus acidophilus ) characterized in that the label for determining the corruption of the storage material according to the accumulation of storage temperature changes. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 배지는 표지균의 성장과 동시에 발생하는 유기산에 의해서 배지의 pH가 낮아지는 조성인 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.The method of claim 1 or 2, wherein the medium is a composition in which the pH of the medium is lowered by the organic acid generated at the same time as the growth of the label bacteria, the determination of the corruption of the storage material due to the accumulation of storage temperature changes label. 제 7항에 있어서, 상기 배지는 MRS, MRS 배지가 25%로 희석된 배지, 최소배지 및 포도당 100 g/ℓ를 포함하는 최소배지로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.8. The storage temperature change of claim 7, wherein the medium is any one selected from the group consisting of MRS, medium diluted with 25% MRS medium, a minimum medium and a minimum medium containing 100 g / l of glucose. Label for judging the corruption of the stored material by accumulation of 제 8항에 있어서, 상기 배지는 MRS 배지가 25%로 희석된 배지인 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.The method of claim 8, wherein the medium is a medium in which MRS medium is diluted 25%. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 혼합분말은 동결건조된 표지균 및 배지 분말을 0.01 ~ 0.1 : 99.99 ~ 99.9의 비로 혼합하여 사용하는 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.The method of claim 1 or 2, wherein the mixed powder is used by mixing the lyophilized label bacteria and the medium powder in a ratio of 0.01 ~ 0.1: 99.99 ~ 99.9 of the storage material according to the cumulative storage temperature change Perishable label. 제 10항에 있어서, 상기 혼합분말은 동결건조된 표지균 및 배지 분말을 0.05 ~ 0.1 : 99.95 ~ 99.9의 비율로 혼합하여 사용하는 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.11. The method of claim 10, wherein the mixed powder is used to mix the lyophilized label bacteria and the medium powder at a ratio of 0.05 ~ 0.1: 99.95 ~ 99.9 to determine the possibility of corruption of the storage material according to the accumulation of storage temperature changes Dragon label. 제 11항에 있어서, 상기 혼합분말은 동결건조된 표지균 및 배지 분말을 0.1:99.9의 비율로 혼합하여 사용하는 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.The label of claim 11, wherein the mixed powder is used by mixing the lyophilized label bacteria and the medium powder in a ratio of 0.1: 99.9. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 혼합분말은 추가로 곰팡이 성장 저해제를 포함하는 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.The label of claim 1 or 2, wherein the mixed powder further includes a fungus growth inhibitor. 제 13항에 있어서, 상기 곰팡이 성장 저해제는 항진균성 폴리엔(polyene antifungals), 니스타틴(nystatin), 암포테리신 B(amphotericin B), 피마리신(pimaricin)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.The method of claim 13, wherein the fungal growth inhibitor is selected from the group consisting of antifungal polyene (polyene antifungals), nystatin, amphotericin B (amphotericin B), pimaricin (pimaricin) Label for judging the decay of storage materials with accumulation of storage temperature changes. 제 1항에 있어서, 상기 pH 지시약은 중성과 산성에서 색의 변화가 뚜렷한 것 사용하는 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.According to claim 1, wherein the pH indicator is a label for judging the corruption of the storage material according to the cumulative storage temperature change, characterized in that the change in color is distinct from neutral and acidic. 제 15항에 있어서, 상기 pH 지시약은 메틸레드 및 메틸블루의 혼합액인 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.16. The label of claim 15, wherein the pH indicator is a mixture of methyl red and methyl blue. 제 2항에 있어서, 상기 pH 표지물질은 금속비누 입자 또는 pH 민감성 고분자입자인 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.The label for determining the corruption of the storage material according to the accumulation of storage temperature changes, characterized in that the pH labeling material is metal soap particles or pH sensitive polymer particles. 제 17항에 있어서, 상기 금속비누 입자는 안료와 올레인산을 2가 이온과 비누화 반응을 시켜서 금속비누 알갱이 형태로 만든 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.18. The label of claim 17, wherein the metal soap particles are formed in the form of metal soap particles by saponifying a pigment and oleic acid with divalent ions. 삭제delete 제 17항에 있어서, 상기 pH 민감성 고분자는 키토산, 폴리라이신(polylysine), 폴리에틸렌이민(polyethyleneimine; PEI), 디에틸아미노에틸-덱스트란(diethylaminoethyl-dextran; DEAE-dextran) 및 폴리(아마이도아민) 덴드리머[poly(amidoamine) (PAMAM) dendrimers]로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.18. The method of claim 17, wherein the pH sensitive polymer is chitosan, polylysine, polyethyleneimine (PEI), diethylaminoethyl-dextran (DEAE-dextran) and poly (amidoamine). Label for determining the corruption of the storage material according to the accumulation of storage temperature changes, characterized in that selected from the group consisting of dendrimers (poly (amidoamine) (PAMAM) dendrimers). 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 식품 저장 용기의 외부에 접착될 수 있는 형태로 제작되는 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.The label of claim 1 or 2, wherein the label is made in a form that can be adhered to the outside of the food storage container. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 파쇄용 분리막(3)은 경화성 수지인 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.The label of claim 1 or 2, wherein the shredding separator (3) is a curable resin. 제 22항에 있어서, 상기 경화성 수지는 아크릴, 페놀수지, 요소 수지 및 멜라민 수지로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.23. The label of claim 22, wherein the curable resin is selected from the group consisting of acrylic, phenolic resins, urea resins and melamine resins. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 라벨 외부는 PE(poly ethylene), PP(poly propylene), PS(Poly styrene) 및 PET(Poly Ethylene Telephthalate)로 이 루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.The method according to claim 1 or 2, wherein the label outside is selected from the group consisting of polyethylene (PE), poly (propylene), polystyrene (PS) and poly ethylene telephthalate (PET). Label for judging the decay of storage materials with accumulation of storage temperature changes. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 라벨의 접착하단 면은 불투명 백색인 것을 특징으로 하는 저장 온도변화의 누적에 따른 저장물질의 부패가능성 판단용 라벨.The label of claim 1 or 2, wherein the adhesive bottom surface of the label is opaque white. 1) 제 1항 또는 제 2항의 라벨을 저장물질의 외부 용기에 부착하면서 파쇄용 분리막(3)을 깨는 단계;1) breaking the crushing separator 3 while attaching the label of claim 1 to the outer container of the storage material; 2) 저장기간이 완료된 후, 라벨의 색을 관찰하여 산성 색인 경우, 부패 가능으로 판단하는 단계를 포함하는 저장물질의 부패가능성 판단 방법.2) after the storage period is completed, if the acid index by observing the color of the label, the method of determining the corruption of the storage material comprising the step of determining that the corruption is possible.
KR1020080072323A 2008-07-24 2008-07-24 Label for estimating of saprogenic bacteria's growth by cumulative storage temperature' change KR101012125B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020080072323A KR101012125B1 (en) 2008-07-24 2008-07-24 Label for estimating of saprogenic bacteria's growth by cumulative storage temperature' change

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020080072323A KR101012125B1 (en) 2008-07-24 2008-07-24 Label for estimating of saprogenic bacteria's growth by cumulative storage temperature' change

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20100011202A KR20100011202A (en) 2010-02-03
KR101012125B1 true KR101012125B1 (en) 2011-02-07

Family

ID=42085707

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020080072323A KR101012125B1 (en) 2008-07-24 2008-07-24 Label for estimating of saprogenic bacteria's growth by cumulative storage temperature' change

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101012125B1 (en)

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101463096B1 (en) * 2014-06-09 2014-11-20 한윤석 label
KR101463093B1 (en) * 2014-06-09 2014-11-20 한윤석 label
KR101463095B1 (en) * 2014-06-09 2014-11-20 한윤석 label
KR101463097B1 (en) * 2014-06-09 2014-11-20 한윤석 label
KR101463094B1 (en) * 2014-06-09 2014-12-04 한윤석 label
KR101477028B1 (en) * 2014-06-09 2014-12-29 한윤석 label
KR101477029B1 (en) * 2014-06-09 2014-12-30 한윤석 label
KR101477030B1 (en) * 2014-06-09 2014-12-30 한윤석 label
KR101485334B1 (en) * 2014-06-09 2015-01-26 한윤석 label
KR101485333B1 (en) 2014-06-09 2015-01-26 한윤석 label
KR101490134B1 (en) 2014-06-09 2015-02-10 한윤석 label
KR101490136B1 (en) 2014-06-09 2015-02-10 한윤석 label
KR101490135B1 (en) 2014-06-09 2015-02-10 한윤석 label

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20110136958A (en) * 2010-06-16 2011-12-22 한국표준과학연구원 Method for identification of proper storage of goods requiring storage at low temperature
KR101477031B1 (en) * 2014-06-09 2014-12-29 한윤석 label

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR19990025077U (en) * 1997-12-13 1999-07-05 김동규 Display board that easily indicates the degree of ripening of fermented foods in color
KR20020086597A (en) * 2000-03-02 2002-11-18 라이프라인스 테크놀러지, 인코포레이티드 Activatable time-temperature indicator system
JP2006522933A (en) 2003-03-07 2006-10-05 パクセンス インコーポレーティッド Electronic labels for perishable products
JP2007121017A (en) 2005-10-26 2007-05-17 Jiikuesuto:Kk Temperature indicating label changing with passage of time

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR19990025077U (en) * 1997-12-13 1999-07-05 김동규 Display board that easily indicates the degree of ripening of fermented foods in color
KR20020086597A (en) * 2000-03-02 2002-11-18 라이프라인스 테크놀러지, 인코포레이티드 Activatable time-temperature indicator system
JP2006522933A (en) 2003-03-07 2006-10-05 パクセンス インコーポレーティッド Electronic labels for perishable products
JP2007121017A (en) 2005-10-26 2007-05-17 Jiikuesuto:Kk Temperature indicating label changing with passage of time

Cited By (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101463096B1 (en) * 2014-06-09 2014-11-20 한윤석 label
KR101463093B1 (en) * 2014-06-09 2014-11-20 한윤석 label
KR101463095B1 (en) * 2014-06-09 2014-11-20 한윤석 label
KR101463097B1 (en) * 2014-06-09 2014-11-20 한윤석 label
KR101463094B1 (en) * 2014-06-09 2014-12-04 한윤석 label
KR101477028B1 (en) * 2014-06-09 2014-12-29 한윤석 label
KR101477029B1 (en) * 2014-06-09 2014-12-30 한윤석 label
KR101477030B1 (en) * 2014-06-09 2014-12-30 한윤석 label
KR101485334B1 (en) * 2014-06-09 2015-01-26 한윤석 label
KR101485333B1 (en) 2014-06-09 2015-01-26 한윤석 label
KR101490134B1 (en) 2014-06-09 2015-02-10 한윤석 label
KR101490136B1 (en) 2014-06-09 2015-02-10 한윤석 label
KR101490135B1 (en) 2014-06-09 2015-02-10 한윤석 label
WO2015190770A1 (en) * 2014-06-09 2015-12-17 한윤석 Functional label, having organic acid coating and using selective dissolution for detecting external temperature, for checking freshness of storage material
WO2015190772A1 (en) * 2014-06-09 2015-12-17 한윤석 Functional label, having lactobacillus coating for detecting external impact, for checking freshness of storage material
WO2015190771A1 (en) * 2014-06-09 2015-12-17 한윤석 Functional label, having dye coating and using selective dissolution for detecting external temperature, for checking freshness of storage material
WO2015190775A1 (en) * 2014-06-09 2015-12-17 한윤석 Functional label, having lactobacillus separator membrane and using selective dissolution for detecting external temperature, for checking freshness of storage material
WO2015190773A1 (en) * 2014-06-09 2015-12-17 한윤석 Functional label, having organic acid coating for detecting external impact, for checking freshness of storage material
US10161921B2 (en) 2014-06-09 2018-12-25 Youn Suk HAN Functional label, having lactobacillus separator membrane and using selective dissolution for detecting external temperature, for checking freshness of storage material

Also Published As

Publication number Publication date
KR20100011202A (en) 2010-02-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101012125B1 (en) Label for estimating of saprogenic bacteria&#39;s growth by cumulative storage temperature&#39; change
Skene et al. Characterization of tannin acylhydrolase activity in the ruminal bacterium Selenomonas ruminantium
US9770032B2 (en) Compositions for stabilizing bacillus spores and methods of use thereof
Connick Jr et al. Preparation of Stable, Granular Formulations ContainingFusarium oxysporumPathogenic to Narcotic Plants
US20200048679A1 (en) Rapid detection of e. coli in a thin film culture device
EP3607083B1 (en) Rapid detection of e. coli in a thin film culture device
RU2505599C2 (en) APPLICATION OF L casei ssp paracasei AS ANTIMYCOTIC AGENT
KR101463095B1 (en) label
US9476835B2 (en) Bioluminescent packaging
Bhai Preservation and long-term storage of Trichoderma spp. by sodium alginate encapsulation
KR101477030B1 (en) label
KR101485334B1 (en) label
KR101463094B1 (en) label
KR101485333B1 (en) label
KR101477031B1 (en) label
EP2511379A1 (en) Time and temperature monitoring device
US20030044882A1 (en) Composition and method for detecting and early and differentiated counting of gram-negative microorganisms
Ayal et al. Screening of Amylolytic Bacteria from Mina Padi Aquaculture in Panembangan Village, Cilongok District, Banyumas, Central Java.
EP3262939B1 (en) Soil-borne disease control method, soil for plant cultivation use, and soil-borne disease control agent
KR101477029B1 (en) label
KR101463093B1 (en) label
WO2021200927A1 (en) Medium for bacillus cereus group detection
Komninos et al. Tannin‐resistant α‐amylase from Calvatia gigantea
JP5476054B2 (en) Medium for detection of Bacillus cereus group
Toit et al. Identification of microbial contaminants present during the curing of honeybush tea (Cyclopia)

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20131217

Year of fee payment: 4

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20141204

Year of fee payment: 5

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160113

Year of fee payment: 6

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20161220

Year of fee payment: 7

LAPS Lapse due to unpaid annual fee