KR101003470B1 - Cosmetic composition for antioxidation containing the extract of ancient rice - Google Patents

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김영부
강인오
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Abstract

PURPOSE: A cosmetic composition for antioxidation containing ancient extract is provided to ensure whitening, anti-aging, skin cell protection and anti-inflammation. CONSTITUTION: A cosmetic composition for protecting skin cells contains ancient rice extract as an active ingredient. The cosmetic composition for protecting skin cells contains red rice extract as an active ingredient, which is isolated using 5% HCl/MeOH. The extract is isolated using methanol or ethanol. The red rice contains cyaniding-3-glucoside.

Description

고대미 추출물을 함유하는 항산화용 화장료 조성물{Cosmetic composition for antioxidation containing the extract of ancient rice}Cosmetic composition for antioxidation containing ancient rice extract {Cosmetic composition for antioxidation containing the extract of ancient rice}

본 발명은 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 고대미 추출물을 함유하는 항산화용 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a cosmetic composition, and more particularly to a cosmetic composition for antioxidants containing ancient rice extract.

피부는 외부 환경과 직접 접하면서 인체를 보호하며 생화학적, 물리적인 기능을 가지고 있는 아주 중요한 조직이다. 최근 날로 심각해지는 공기오염 문제와 함께 오존층의 파괴로 인한 자외선의 노출 등으로 피부가 손상될 우려가 매우 높아서, 화장품이나 또는 화장에 관련된 기능성 제품의 선택은 부작용에 대한 우려와 함께 피부 산화 방지의 관점에서 매우 중요한 문제로 대두되고 있다.Skin is a very important tissue that protects the human body while having direct contact with the external environment and has biochemical and physical functions. In recent years, there is a high risk of damage to the skin caused by exposure to ultraviolet rays due to the destruction of the ozone layer along with the serious air pollution problem. Therefore, the selection of functional products related to cosmetics or cosmetics is concerned with side effects and prevents skin oxidation. Is a very important issue in the world.

노화의 원인으로는 자외선, 정신적 스트레스, 외부 환경 등 다양하게 들 수 있는데, 이때 가장 중요한 역할을 하는 것이 활성 산소종이며 활성 산소종은 세포 및 조직을 손상시켜 성인병 및 노화를 촉진하게 된다. 좀 더 구체적으로 말하자면, 피부의 주요 구성물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등이 산화되어 피부세포 및 조직이 파괴되고, 결국 피부노화 현상이 생겨나는 것이다.The causes of aging include UV rays, mental stress, and the external environment. In this case, the most important role is reactive oxygen species, which in turn promotes adult disease and aging by damaging cells and tissues. More specifically, lipids, proteins, polysaccharides, and nucleic acids, which are major constituents of the skin, are oxidized to destroy skin cells and tissues, resulting in skin aging.

색소 침착에 의한 피부노화는 멜라닌, 멜라조이드, 카로틴, 헤모글로빈 등의 색소에 영향을 받는다. 이중 가장 중요한 것은 멜라닌으로, 특별한 최대흡수파장이 없으며 전 영역의 빛을 흡수한다. 또한, 활성 산소종을 제거하는 기능이 탁월하나, 때로는 멜라닌 자체가 활성산소를 발생시키기도 하며, 멜라닌 구조 내의 카테콜이나 퀴논에 의하여 다른 물질을 환원시키거나 산화시키고, 멜라닌 자체가 자유라디칼의 성질을 나타내기도 한다.Skin aging by pigmentation is affected by pigments such as melanin, melazoids, carotene, hemoglobin and the like. The most important of these is melanin, which has no special maximum absorption wavelength and absorbs light in all areas. In addition, the function of removing active oxygen species is excellent, but sometimes melanin itself generates free radicals, and other substances are reduced or oxidized by catechol or quinone in the melanin structure, and melanin itself free radicals. It may also be indicated.

멜라닌의 생합성은 아미노산의 일종인 티로신이 멜라노사이트의 멜라노좀에서 티로시나제에 의해 산화되어 디하이드록시 페닐알라닌(dihydroxy phenylalanine)으로 전환되는 것으로 시작된다. 계속되는 일련의 산화과정을 거쳐 갈색(pheomelanin), 흑색(eumelanin)의 중합체로 형성되고, 이러한 생합성 과정은 멜라노좀이라는 특수한 형태의 갈색 세포 내 소기관에서 진행된다. 멜라닌 과립을 포함한 멜라노좀은 핵 주변 부위에서 수지상 돌기 끝부분으로 이동, 케라티노사이트의 식세포작용에 의해 세포질 내로 이동하고 이들은 케라티노사이트의 핵 주변에 축적된다. The biosynthesis of melanin begins with the conversion of tyrosine, an amino acid, from melanocytes of melanocytes to oxidization by tyrosinase to dihydroxy phenylalanine. After a series of oxidation processes, it is formed into polymers of brown (pheomelanin) and black (eumelanin), and this biosynthesis process is carried out in a special type of brown intracellular organelles called melanosomes. Melanosomes, including melanin granules, migrate from the periphery of the nucleus to the end of the dendritic projections and into the cytoplasm by the phagocytosis of keratinocytes, which accumulate around the nucleus of keratinocytes.

한편, 이미 아스코르빈산(일본특개평 4-9320), 하이드로퀴논(일본특개평 6-192062), 코지산(일본특개소 56-7710), 알부틴(일본특개평 4-93150) 및 일부의 추출물 등이 티로시나제 저해 활성을 가지고 있어 미백 화장료로 이용되고 있으나, 화장품 제형 중에서의 안정성이 나빠 분해되어 착색되거나, 이취의 발생, 생체 레벨에서의 효능, 효과의 불분명 및 안전성 문제 등으로 그 사용이 제한되고 있는 실정이다. Meanwhile, ascorbic acid (JP-A 4-9320), hydroquinone (JP-A 6-192062), koji-san (JP-A 56-7710), arbutin (JP-A 4-93150) and some extracts It has been used as a whitening cosmetic because it has a tyrosinase inhibitory activity, but its use is limited due to poor stability in cosmetic formulations, discoloration, odor occurrence, efficacy at the biological level, unclear effect and safety issues, etc. There is a situation.

화장품은 부작용이 없어야 하고, 인체 친화적이어야 하며, 특이 체질이나 아토피 피부 또는 민감성 피부에도 안심하고 사용할 수 있어야 한다. 이에 식물성 천연물들은 안전성이 뛰어날 뿐만 아니라 인체에 유익한 여러 가지 성분들을 가지고 있어 보습, 미백, 노화방지 효과 등을 제공하는 성분으로서 선호되고 있다. 이에, 종래부터 피부 노화의 억제기능, 미백 기능 등을 가진 생약, 야채, 과일, 꽃 등으로부터 안전성이 뛰어나고 여러 가지 기능성을 제공하는 추출물을 찾고자 하는 노력이 있어 왔다.Cosmetics should be free of side effects, human-friendly, and safe to use on specific constitutions, atopic or sensitive skin. The plant natural products are not only excellent in safety, but also have various components beneficial to the human body, and thus are preferred as ingredients that provide moisturizing, whitening, and anti-aging effects. Thus, conventionally, there have been efforts to find extracts that provide excellent safety and provide various functionalities from herbals, vegetables, fruits, flowers, etc., which have a function of suppressing skin aging and whitening.

한편, 천연추출물에 관한 것으로는, 한국공개특허 제2003-0064059호(목단피추출물, 자귀나무추출물), 한국공개특허 제2003-0064059호(장미꽃잎추출물) 등이 개시되었으나, 한국공개특허 제2003-0064059호는 노화 방지 기능만이 있고, 한국공개특허 제2003-0064059호는 피부 미백 기능만이 있어, 한 가지 추출물이 항산화, 미백효과, 주름개선효과, 세포보호효과 등 여러 가지 효과를 동시에 나타내지 못한다는 한계가 있었다. On the other hand, as for natural extracts, Korean Patent Publication No. 2003-0064059 (bark extract, silk tree extract), Korean Patent Publication No. 2003-0064059 (rose petal extract) and the like have been disclosed, Korean Patent Publication No. 2003-00640 0064059 has only anti-aging function, and Korean Patent Laid-Open Publication No. 2003-0064059 has only skin whitening function, so one extract does not simultaneously exhibit various effects such as antioxidant, whitening effect, wrinkle improvement effect, and cellular protection effect. Was limited.

이에 본 발명의 발명자는 여러 식물 추출물을 토대로 예의 연구한 결과, 특히 고대미 추출물의 경우, 항산화 효과가 매우 뛰어날 뿐만 아니라 미백효과, 주름개선효과, 피부보호효과, 항염효과 등 여러 효과를 가지는 것을 발견하고 본 발명을 완성하게 된 것이다. Thus, the inventors of the present invention conducted a thorough study based on various plant extracts, in particular, the ancient rice extract, found that not only has an excellent antioxidant effect, but also has various effects such as whitening effect, wrinkle improvement effect, skin protection effect, anti-inflammatory effect. And to complete the present invention.

본 발명은 인체에 무해하여 안정성이 우수할 뿐만 아니라, 항산화 효과가 매우 뛰어난 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다. It is an object of the present invention to provide a cosmetic composition which is harmless to the human body and is excellent in stability as well as excellent in antioxidant effect.

또한, 본 발명은 항산화 효과가 매우 뛰어날 뿐만 아니라, 미백효과, 주름개선효과, 피부 세포 보호 효과 및 항염효과 등 여러 효과를 동시에 가지며, 또한 각각의 효과들이 매우 뛰어난 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다. In addition, the present invention is not only excellent in the antioxidant effect, but also has a number of effects, such as whitening effect, wrinkle improvement effect, skin cell protection effect and anti-inflammatory effect at the same time, and also aims to provide a cosmetic composition excellent in each effect very excellent. .

상기의 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 고대미 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 항산화용 화장료 조성물을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention provides a cosmetic composition for antioxidant, characterized in that it contains an ancient rice extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 적토미 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a cosmetic composition for whitening, characterized in that it contains red pepper extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 적토미 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 노화방지용 화장료 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides an anti-aging cosmetic composition, characterized in that it contains red pepper extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 적토미 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 세포 보호용 화장료 조성물을 제공한다. In another aspect, the present invention provides a cosmetic composition for protecting skin cells, characterized in that it contains red pepper extract as an active ingredient.

또한, 본 발명에 있어서, 상기 고대미 추출물의 추출용매는 메탄올 또는 에탄올을 포함하는 것이 바람직하다. In addition, in the present invention, the extraction solvent of the ancient rice extract preferably includes methanol or ethanol.

또한, 본 발명에 있어서, 상기 적토미 추출물의 추출용매는 메탄올 또는 에탄올을 포함하는 것이 바람직하다. In addition, in the present invention, it is preferable that the extraction solvent of the red Tommy extract contains methanol or ethanol.

이하, 본 발명의 과제의 해결 수단에 대해 상세히 설명하고자 한다. Hereinafter, the means for solving the problems of the present invention will be described in detail.

본 발명에 사용하는 고대미란 현재의 품종 개량된 쌀 이전의 야생벼 종자쌀로 휴면성, 탈립성의 성질이 있어, 인위적으로 재배하지 않고 잡초처럼 사람 손이 닿지 않게 자란 쌀을 말하며, 서리가 내린 이후에 재배된다는 특징이 있다. 이러한 고대미에는 적토미, 흑토미, 녹토미가 있으며, 특히 적토미의 경우에는 폴리페놀 함유량이 백미 대비 200배 이상이 된다는 특징이 있다. Ancient rice used in the present invention is a wild rice seed rice before the current varieties improved rice has a dormant, degranular properties, refers to rice that is not artificially grown and grown out of reach of humans like weeds, and after frost It is characterized by being cultivated. There are red clay, black clay, and green clay in the ancient rice, and especially in the case of red clay, the polyphenol content is 200 times higher than that of white rice.

적토미는 적갈색의 현미로, 과피나 종피부분에 붉은색 계통의 색소인 탄닌성분을 함유한 쌀을 말한다. 적토미는 백미와 유사하게 단백질이나 각종 비타민, 미네랄들을 많이 함유하며, 특히, 폴리페놀의 일종인 탄닌을 함유하고 있어 항균작용, 항산화작용이 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 적토미는 체내 당 수치와 콜레스테롤 수치를 낮춰주는 효능도 가지고 있는 것으로 알려져 있다. Red tomy is reddish brown brown rice, which refers to rice containing tannin, a pigment of red color, in the skin or seed skin. Red rice is similar to white rice and contains a lot of protein, vitamins and minerals. Especially, it contains tannin, a kind of polyphenol, which is known to have antibacterial and antioxidant activity. In addition, red meat is known to have the effect of lowering the body's sugar and cholesterol levels.

흑토미는 흑색의 현미로, 현대의 백미와 비교하여, 단백질, 비타민 B1, B2, 나이아신, 비타민 E, 철, 칼슘, 마그네슘 등을 풍부하게 함유하고 있으며, 특히 과피에 함유되어 있는 안토시아닌은 혈관을 보호하는 항산화 작용이 있는 것으로 알려져 있다. 불로장수의 쌀로 중국에서는 역대 황제에게 진상된 진상미로 잘 알려져 있다. Black rice is black brown rice, which is rich in protein, vitamin B1, B2, niacin, vitamin E, iron, calcium, magnesium, etc., compared with modern white rice, and especially anthocyanin contained in the skin It is known to have a protective antioxidant activity. It is a well-known rice that has been known by Chinese emperors in China.

녹토미는 동의보감에 청량미라 소개되어 있는 전통 토종종자로서, 보통의 찹쌀보다 찰기가 강하고 감미가 있으며, 크로로필, 아연, 마그네슘, 섬유질 등을 풍부하게 함유하고 있어, 혈당을 조절하는 기능이 높은 것으로 알려져 있다. Noktomi is a traditional indigenous seed introduced by soft rice in Dongbogam. It is more sticky and sweeter than ordinary glutinous rice, and contains abundant chromophyll, zinc, magnesium, and fiber. It is known.

본 발명의 발명자는 적토미의 성분에 대하여 예의 연구한 결과, 적토미에는 시아니딘-3-글루코시드(Cyanidin-3-glucoside)가 다량 함유되어 있는 것을 발견하였다. 시아니딘3-글루코시드(Cyanidin-3-glucoside)는 안토시안계 색소성분으로, 흑토미에 함유되어 있는 것으로 알려진 성분이다. 그런데, 본 발명의 발명자는 적토미도 흑토미와 유사한 함량으로 시아니딘-3-글루코시드(Cyanidin-3-glucoside)를 함유하는 것을 발견하였다. As a result of earnestly studying the components of red Tommy, the inventors of the present invention found that red Tommy contained a large amount of cyanidin-3-glucoside. Cyanidin-3-glucoside (Cyanidin-3-glucoside) is an anthocyanin-based pigment component, a component known to be contained in the black soil. However, the inventors of the present invention have found that cyanidin-3-glucoside is contained in a content similar to red clay and black clay.

본 발명에서 이용되는 고대미 추출물은 당업계에 공지된 다양한 방법을 통해 얻을 수 있으며, 바람직하게는 추출용매를 사용하여 추출되는 것이다. 이러한 추출용매의 바람직한 예로는 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (예: 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 1,3-부틸렌글리콜 또는 이들 중 2종 이상의 혼합물이 있으며, 보다 바람직하게는, 메탄올 또는 에탄올이며, 또한 메탄올 및 염산의 혼합용액을 사용할 수도 있다. 추출 용매로는 상기 언급된 것이 특히 적합하지만 반드시 이에 한정되는 것은 아니며, 상기 언급한 용매와 물리 화학적으로 성질이 유사한 다른 용매를 사용하여 고대미 추출물을 제조할 수 있다. The ancient rice extract used in the present invention may be obtained through various methods known in the art, and is preferably extracted using an extraction solvent. Preferred examples of such extractants are water, anhydrous or hydrous lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms (e.g. methanol, ethanol, propanol, butanol, etc.), acetone, ethyl acetate, chloroform, 1,3-butylene glycol or two of them. There are mixtures of species or more, more preferably methanol or ethanol, and a mixed solution of methanol and hydrochloric acid may be used. As the extraction solvent, the above-mentioned ones are particularly suitable but not necessarily limited thereto, and the ancient rice extract may be prepared using other solvents similar in physical and chemical properties to the above-mentioned solvents.

또한, 본 발명의 고대미 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 다른 방법으로 추출된 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리; 다양한 크로마토그래피, 예를 들어 크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 크로마토그래피에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 고대미 추출물에 포함되는 것이다.In addition, the ancient rice extract of the present invention includes not only the extract by the aforementioned extraction solvent, but also extract extracted by other methods. Separation using, for example, an ultrafiltration membrane having a constant molecular weight cut-off value; Fractions obtained through various purification methods additionally carried out, such as by chromatography prepared for separation according to various chromatography, for example, size, charge, hydrophobicity or affinity, are also included in the ancient rice extract of the present invention.

또한, 본 발명에 있어서, 추출의 재료가 되는 고대미는 이를 건조하여 사용하거나 또는 그대로 사용할 수 있으며, 바람직하게는 건조하여 사용하는 것이다. 건조법으로는 자연 건조 또는 열풍 건조법을 이용할 수 있다. 또한, 추출을 용이하게 하기 위하여 고대미를 분쇄하여 사용할 수도 있다. In addition, in the present invention, the ancient rice which is a material for extraction may be used by drying it or may be used as it is, and preferably used by drying. As a drying method, natural drying or a hot air drying method can be used. In addition, the ancient rice may be used by grinding in order to facilitate extraction.

또한, 본 발명의 고대미 추출물은 액체상태로 사용할 수 있지만, 감압 증류, 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조하여 사용할 수도 있다.In addition, the ancient rice extract of the present invention may be used in a liquid state, but may also be prepared and used in a powder state by an additional process such as distillation under reduced pressure, freeze drying or spray drying.

한편, 본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 일예로 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W)형 및 유중수(W/O)형으로 이루어진 기초화장료 제형과, 수중유형 및 유중수형 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이섀도, 치크칼라 및 아이브로우 펜슬류로 이루어진 색조화장료 제형과 바디로션, 바디오일, 바디에센스, 바디팩 등 바디용 제형 중에서 선택되는 어느 하나일 수 있다. On the other hand, the cosmetic composition of the present invention may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art. For example, a base cosmetic formulation consisting of a lotion, gel, water-soluble liquid, cream, essence, oil-in-water (O / W) and water-in-oil (W / O) type, oil-in-water and water-in-oil makeup base, foundation, skin cover, Lipstick, lip gloss, face powder, two-way cake, eye shadow, cheek color and eyebrow pencil formulations of the cosmetic composition and body lotion, body oil, body essence, body pack, such as any one can be selected from the body formulation. .

본 발명은 고대미 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 조성물은 항산화효과가 매우 뛰어날 뿐만 아니라, 미백효과, 주름개선효과, 손상된 세포의 보호 효과 및 항염효과도 매우 뛰어나다. 따라서, 본 발명의 화장료 조성물은 매우 탁월한 종합적인 피부개선효과를 나타낸다. The present invention relates to a cosmetic composition containing the ancient rice extract as an active ingredient, the composition of the present invention is not only very excellent in the antioxidant effect, but also excellent in the whitening effect, wrinkle improvement effect, protection of damaged cells and anti-inflammatory effect. Therefore, the cosmetic composition of the present invention shows a very excellent comprehensive skin improvement effect.

상기에서 살펴본 바와 같이 본 발명의 화장료 조성물은 고대미 추출물을 함유함으로써 항산화효과가 매우 뛰어날 뿐만 아니라, 미백효과, 주름개선효과, 손상된 세포의 보호 효과 및 항염효과 등도 매우 뛰어나다. 이에 본 발명의 화장료 조성물은 매우 탁월한 종합적인 피부개선효과를 발휘한다. As described above, the cosmetic composition of the present invention is not only excellent in the antioxidant effect by containing the ancient rice extract, but also excellent in the whitening effect, wrinkle improvement effect, protective effect of the damaged cells and anti-inflammatory effect. The cosmetic composition of the present invention exhibits a very excellent comprehensive skin improvement effect.

도 1은 표준품의 표준 곡선을 나타낸 도이다.
도 2는 표준품의 크로마토그램을 나타낸 도이다.
도 3은 적토미에 대한 크로마토그램을 나타낸 도이다.
도 4는 흑토미에 대한 크로마토그램을 나타내는 도이다.
1 is a view showing a standard curve of the standard product.
2 is a diagram showing a chromatogram of a standard product.
3 is a diagram showing a chromatogram for red soil.
4 is a diagram showing a chromatogram for black soil.

이하, 본 발명에 대해 하기 실시예에서 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples, but the scope of the present invention is not limited to the following examples, and includes modifications of equivalent technical ideas.

제조예Production Example 1:  One: 고대미Antiquity 추출물 제조 Extract manufacturer

고대미의 추출물은 메탄올, 5% HCl/MeoH, 95% 에탄올, 70% 에탄올을 추출용매로 첨가하여 추출기로 상온에서 5일간 추출하여 제조하였다. 상기 추출물을 400 메쉬 여과포로 여과한 후 0.45 필터로 재차 여과하여, 하기 표 1과 같은 적토미 추출물 1 내지 4, 흑토미 추출물, 녹토미 추출물을 제조하였다. 또한, 비교 제조예로 백미 추출물도 동일한 방법으로 제조하였다. The extract of ancient rice was prepared by adding methanol, 5% HCl / MeoH, 95% ethanol, 70% ethanol as an extraction solvent and extracting at room temperature for 5 days with an extractor. The extract was filtered with a 400 mesh filter cloth and filtered again with a 0.45 filter to prepare red tomy extracts 1 to 4, black tome extracts, and noctotomy extracts as shown in Table 1 below. In addition, white rice extract was prepared in the same manner as a comparative preparation.

추출물extract 추출용매Extraction solvent 백미 추출물White rice extract 70%EtOH70% EtOH 적토미 추출물 1Red Tommy Extract 1 MeOHMeOH 적토미 추출물 2Red Tommy Extract 2 5% HCl/MeOH5% HCl / MeOH 적토미 추출물 3Red Tommy Extract 3 95% EtOH95% EtOH 적토미 추출물 4Red Tommy Extract 4 70% EtOH70% EtOH 흑토미 추출물 Black Tome Extract 70% EtOH70% EtOH 녹토미 추출물Nocturne extract 70% EtOH70% EtOH

실험예Experimental Example 1:  One: 고대미Antiquity 추출물의 항산화 효과 측정 Antioxidant Effect of Extracts

고대미 추출물의 항산화 효과를 측정하기 위해, DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)의 환원성을 이용하여 고대미 추출물의 DPPH 라디칼(radical) 소거 효과를 측정하였다. In order to measure the antioxidant effect of the ancient rice extract, DPPH (radical) scavenging effect of the ancient rice extract was measured using the reducibility of DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl).

실험방법은 하기와 같은 방법으로 수행하였다. Experimental method was carried out in the following manner.

1) 메탄올에 용해시킨 0.1mM DPPH 용액 1mL에 상기 제조예 1에서 수득한 적토미 추출물 1 내지 4, 흑토미 추출물, 녹토미 추출물을 각 농도별로 희석하여 500㎕씩 넣어주고 혼합하였다. 1) To 1 mL of 0.1mM DPPH solution dissolved in methanol, red mule extract 1 to 4, black tome extract and noctomy extract obtained in Preparation Example 1 were diluted at each concentration, and 500 µl each were mixed and mixed.

2) 실온에서 10분간 반응시킨 후, 565nm에서 흡광을 측정하였다. 2) After reacting for 10 minutes at room temperature, the absorbance was measured at 565 nm.

시료sample IC50(㎍/mL)IC 50 (μg / mL) 백미추출물White Rice Extract 1,190.01,190.0 적토미 추출물 1Red Tommy Extract 1 279.8279.8 적토미 추출물 2Red Tommy Extract 2 128.6128.6 적토미 추출물 3Red Tommy Extract 3 88.288.2 적토미 추출물 4Red Tommy Extract 4 3030 흑토미 추출물Black Tome Extract 5050 녹토미 추출물Nocturne extract 960960

상기 표 2에 나타나는 바와 같이, 각 적토미 추출물과 흑토미 추출물에서 높은 DPPH 라디칼(radical) 소거능을 확인할 수 있었다. 특히 적토미 추출물 4의 경우에 가장 높은 항산화력을 나타냈는데, 이로부터 70% 에탄올 추출용매인 경우 항산화 성분의 용출이 가장 용이함을 의미함을 알 수 있었다. As shown in Table 2, it was confirmed that the high DPPH radical scavenging ability in each red and black extract. In particular, the red antioxidant extract 4 showed the highest antioxidant capacity, from which it can be seen that the extraction of the antioxidant component in the case of 70% ethanol extraction solvent is the easiest.

실험예Experimental Example 2:  2: 적토미Red Tommy 추출물의 미백효과 측정 Determination of Whitening Effect of Extracts

적토미 추출물의 미백효과를 측정하기 위해, 멜라로마 세포 라인(Melanoma cell line)을 이용하여, 적토미 추출물이 멜라노마 세포 라인(Melanoma cell line)에 의해 최종 생산되는 멜라닌의 양을 억제하는 정도를 측정하였다.In order to measure the whitening effect of red Tommy extract, the melanoma cell line was used to measure the extent to which red Tommy extract inhibits the amount of melanin that is finally produced by the melanoma cell line. .

적토미 추출물의 멜라닌(melanin) 정량 및 단백질 정량을 통하여 단백질(g)에 포함된 멜라닌(melanin, mg)의 양을 정량할 수 있었으며, 이를 토대로 '멜라닌 생성 저해능(melanogenesis inhibition rate(%))'를 구할 수 있었다. The amount of melanin (mg) contained in protein (g) was determined by quantifying melanin and protein quantification of red Tommy extract, and based on this, the melanogenesis inhibition rate (%) was determined. Could save.

실험 세포주로는 'B16F10 Melanoma cell line'을 사용하였고, 대조군으로는 알부틴(Arbutin)을 사용하였다. As the experimental cell line, 'B16F10 Melanoma cell line' was used, and arbutin was used as a control.

실험방법은 하기와 같은 방법으로 수행하였다.Experimental method was carried out in the following manner.

1) B16F10 세포를 페니실린(100U/mL), 스트렙토마이신(100μg/mL), 10% FBS(Fetal bovine serum)을 함유하는 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium)을 이용하여, 37℃에서 5% 이산화탄소를 포함하는 배양기에서 배양하였다.1) B16F10 cells containing 5% carbon dioxide at 37 ° C. using Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) containing penicillin (100 U / mL), streptomycin (100 μg / mL) and 10% Fetal bovine serum (FBS) The culture was carried out in an incubator.

2) 6-웰 플레이트(well plate)의 각 웰(well) 당 1x105 cells/mL로 접종하고 24 시간 배양하였다.2) Inoculated at 1 × 10 5 cells / mL per well of a 6-well plate and incubated for 24 hours.

3) 배양 후, 배지를 제거하고 혈청이 포함된 배지(α-MSH 50 nM)를 이용하여 상기 제조예 1에서 수득한 각각의 적토미 추출물 1을 50, 100μg/mL의 농도로 희석하여 각 웰에 넣어준 후, 48 시간 추가 배양하였다. 3) After incubation, the medium was removed and each red Tommy extract 1 obtained in Preparation Example 1 was diluted to a concentration of 50 and 100 μg / mL using a medium containing serum (α-MSH 50 nM). After the addition, further incubation for 48 hours.

4) 세포를 PBS 로 세척하고 Trypsin-EDTA 500μl를 처리하여 세포를 떼어내고 PBS 500μL를 첨가하여 세포를 회수하였다.4) The cells were washed with PBS and treated with 500 μl of Trypsin-EDTA to remove the cells, and 500 μL of PBS was added to recover the cells.

5) 회수된 세포는 12,000rpm으로 4℃에서 10분간 원심분리하여 상등액을 제거하고 펠렛(pellet)을 65℃에서 1시간 정도 건조하였다.5) The recovered cells were centrifuged at 12,000 rpm for 10 minutes at 4 ° C to remove the supernatant, and the pellets were dried at 65 ° C for about 1 hour.

6) 1M NaOH 수용액 120μL을 첨가하여 65℃에서 1시간 정도 반응시켜서 세포 내의 멜라닌(melanin) 을 수득하였다.6) 120 μL of an aqueous 1 M NaOH solution was added and reacted at 65 ° C. for 1 hour to obtain melanin in the cells.

7) 96-웰 플레이트(well plate)에 6)의 용해물(lysate)을 90μL씩 넣어준 후, ELISA리더로 490nm에서 흡광도를 측정하여 멜라닌(melanin)의 양을 측정하였다.7) After the lysate of 6) was put into each 96-well plate (90 μL), the absorbance was measured at 490 nm with an ELISA reader to measure the amount of melanin.

8) 6)의 용해물(lysate)을 이용하여 BCA 법으로 단백질 정량을 하여 단백질 양에 대한 멜라닌(melanin) 양을 구하고, 합성 멜라닌(Synthetic melanin)을 이용하여 표준 곡선을 구하여 멜라닌(melanin)의 양을 정량하여 하기 표 3에 나타내었다. 8) Using the lysate of 6) quantify the protein by the BCA method to determine the amount of melanin (melanin) for the amount of protein, using a synthetic melanin (Synthetic melanin) to obtain a standard curve of the melanin (melanin) The amount was quantified and shown in Table 3 below.

시료sample 농도(㎍/mL)Concentration (㎍ / mL) Melanogenesis Inhibition rate (%)Melanogenesis Inhibition rate (%) 알부틴Arbutin 5050 4.314.31 100100 14.3314.33 적토미 추출물 1Red Tommy Extract 1 5050 7.497.49 100100 29.2529.25

상기 표 3에 의하면, 농도가 100μg/mL인 적토미 추출물 1의 경우 멜라닌 생성 저해능이 약 29%로 양성 대조군인 알부틴에 비해 동일농도에서 2배 이상 높은 멜라닌(melanin) 생성 저해능을 나타냄을 확인할 수 있었다. According to Table 3, in the case of red Tommy extract 1 having a concentration of 100 μg / mL, the melanin production inhibitory activity was about 29%, which was 2 times higher than that of the arbutin positive control group. .

실험예Experimental Example 3:  3: 적토미Red Tommy 추출물의 미백 효과 측정 Determination of Whitening Effect of Extracts

티로시나제(Tyrosinase)가 기질을 이용하여 생성하는 도파크롬(dopachrome)의 생성량을 흡광으로 측정하여 상대적인 효소의 활성을 평가함으로써 적토미 추출물의 미백 효과를 측정하였다.The whitening effect of red tooth extract was determined by evaluating relative enzyme activity by measuring the amount of dopachrome produced by tyrosinase using a substrate by absorbance.

효소는 머쉬룸 티로시나제(Mushroom tyrosinase, SIGMA)를 사용하였고, 대조군는 코지산(Kojic acid)을 사용하였다. Enzyme was used as mushroom tyrosinase (SIGMA), and koji acid was used as a control.

실험 방법은 하기와 같은 방법으로 수행하였다. Experimental method was carried out in the following manner.

1) 1.5mM 티로신(Tyrosine, in 1 N HCl), 100U/mL 티로시나제(Tyrosinase) 및 0.1M 소디움 포스페이트 버퍼(Sodium Phosphate Buffer, pH 6.5)을 준비하였다.1) 1.5mM tyrosine (in 1 N HCl), 100U / mL Tyrosinase (0.1O) and 0.1M sodium phosphate buffer (Sodium Phosphate Buffer, pH 6.5) was prepared.

2) 상기 제조예 1에서 수득한 각각의 적토미 추출물 1 내지 4를 소디움 포스페이트 버퍼(Sodium Phosphate Buffer)를 사용하여 50㎍/mL의 농도로 희석하여 준비하였다(최종 시료 농도)2) Each red tomi extract 1 to 4 obtained in Preparation Example 1 was prepared by diluting to 50 µg / mL using sodium phosphate buffer (final sample concentration).

3) 96-웰 플레이트(well plate)에 준비한 1.5mM 티로신(tyrosine) 100μL, 시료 20μL 씩, 농도당 3 웰(well) 씩 넣어주고, 마지막으로 준비한 100U/mL 티로시나제(tyrosinase)를 80μL씩 넣어주고, 잘 섞어 37℃ 인큐베이터(incubator)에서 15분 동안 반응시켰다.3) Put 100μL of 1.5mM tyrosine prepared in a 96-well plate, 20μL of sample, 3 wells per concentration, and add 80μL of 100U / mL tyrosinase prepared last. Mix well, and react for 15 minutes in a 37 ℃ incubator (incubator).

4) 반응 후, ELISA 리더로 490nm에서 흡광값을 측정하여 표 4에 나타내었다. 4) After the reaction, the absorbance value was measured at 490 nm with an ELISA reader, and is shown in Table 4.

시료sample 농도(㎍/mL)Concentration (㎍ / mL) 티로시나제 활성 저해능
(% of control)
Inhibitory activity of tyrosinase
(% of control)
적토미 추출물 1Red Tommy Extract 1 5050 9.389.38 적토미 추출물 2Red Tommy Extract 2 5050 27.7327.73 적토미 추출물 3Red Tommy Extract 3 5050 6.036.03 적토미 추출물 4Red Tommy Extract 4 5050 3.353.35

상기 표 4에 의하면, 농도가 50μg/mL인 적토미 추출물 2의 경우 티로시나제 활성 저해능(Tyrosinase inhibition rate)이 약 27%로 가장 높은 티로시나제 활성 저해능을 가짐을 확인할 수 있었다.According to Table 4, it was confirmed that the tyrosinase inhibition rate (Tyrosinase inhibition rate) is the highest tyrosinase activity of about 27% in the case of red clay extract 2 having a concentration of 50μg / mL.

실험예Experimental Example 4 :  4 : 적토미Red Tommy 추출물의 세포 손상  Cell damage of extract 보호능Protection 평가 evaluation

활성 산소는 피부의 면역기능을 억제시키고, 염증을 유발하여 탄력 감소, 주름, 기미, 주근깨 등의 각종 피부 질환을 유발하고 결국 피부 노화를 가속화시키는 원인이 될 수 있어, 활성 산소로부터 세포를 보호하는 효과를 측정하여 손상된 피부 세포의 회복에 대한 평가를 하기와 같은 방법으로 수행하였다. Free radicals inhibit the immune function of the skin, induce inflammation and cause various skin diseases such as decreased elasticity, wrinkles, blemishes, and freckles, which in turn accelerate skin aging, thus protecting cells from free radicals. The effect was measured to evaluate the recovery of damaged skin cells in the following manner.

1) 사람 유래의 각질 형성 세포(HaCaT cell)을 배양접시의 바닥에 접종한 후, 페니실린(100U/mL), 스트렙토마이신(100㎍/mL), 10% FBS(Fetal Bovin Serum)을 함유하는 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium) 배지를 넣고 37℃에서 5%이산화탄소를 포함하는 배양기 내에서 배양하였다. 1) After inoculating human-derived keratinocytes (HaCaT cells) at the bottom of the culture dish, DMEM containing penicillin (100 U / mL), streptomycin (100 µg / mL), 10% FBS (Fetal Bovin Serum) (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) medium was added and cultured in an incubator containing 5% carbon dioxide at 37 ℃.

2)HaCaT 세포를 96-웰 플레이트에 1×105cells/mL의 농도로 희석하여 100㎕씩 접종한 후 24시간 동안 배양하였다. 2) HaCaT cells were inoculated at a concentration of 1 × 10 5 cells / mL in 96-well plates at 100 μl and incubated for 24 hours.

3) 배양 후, 배지를 모두 제거하고, 혈청이 포함되지 않은 배지를 이용하여 시료를 10, 50, 100㎍/mL로 희석하여 웰 당 100㎕씩, 3번씩 처리한 후, 24시간 동안 추가로 배양하였다. 3) After incubation, all of the medium was removed, and the sample was diluted to 10, 50, 100 µg / mL using a medium without serum, and treated with 100 µl per well three times, followed by an additional 24 hours. Incubated.

4) 배양된 세포에 세포 손상물질로 200μM의 과산화수소(H2O2)를 처리하고, 4시간 동안 37℃에서 5% 이산화탄소를 포함하는 배양기 내에서 배양하였다. 4) The cultured cells were treated with 200 μM of hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) as a cell damaging material, and cultured in an incubator containing 5% carbon dioxide at 37 ° C. for 4 hours.

5) 4시간 후, 배지를 제거하고 새로운 무혈청 배지를 100㎕씩 접종하고, PBS를 이용하여 5mg/mL의 농도로 녹여져 있는 MTT 시약을 20㎕씩 넣어주고 4시간 동안 배양하였다. 5) After 4 hours, the medium was removed, and 100 µl of fresh serum-free medium was inoculated, and 20 µl of MTT reagent dissolved at 5 mg / mL was added using PBS, followed by incubation for 4 hours.

6) MTT 시약과 시료가 포함된 배지를 모두 제거하고 각 웰에 이소프로판올을 100㎕씩 넣고 15~20분간 교반하여 준 후, ELISA 리더를 이용하여 570nm에서 흡광값을 측정하였다. 한편, 세포손상보호능은 하기와 같은 방법으로 측정하였다. 6) After removing all of the medium containing the MTT reagent and the sample, 100 μl of isopropanol was added to each well and stirred for 15 to 20 minutes, and the absorbance value was measured at 570 nm using an ELISA reader. On the other hand, cell damage protection was measured by the following method.

세포손상보호능 = 시료 처리시 세포 생존률(%) - H2O2 처리시 세포 생존률(%)Cell damage protection function = cell viability during sample handling (%) when H 2 O 2 treated cell survival rate (%)

시료sample 농도(/ml)Concentration (/ ml) 세포 손상 보호능(%)Cell damage protection (%) 케르세틴(Quercetin)Quercetin 1010 -- 2020 6.486.48 5050 12.7912.79 적토미 추출물 2
Red Tommy Extract 2
1010 31.9831.98
5050 31.6831.68 100100 31.4331.43

세포 보호 물질로 알려진 케르세틴(Quercetin)을 양성대조군으로 하여 비교 평가한 결과, 동일 농도인 50㎍/ml에서의 세포 손상 보호능이 적토미 추출물 2의 경우 양성대조군에 비하여 2배 이상의 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다. As a result of comparing and evaluating quercetin (Quercetin), which is known as a cell protective substance, as a positive control group, it was confirmed that the cell damage protection at the same concentration of 50 ㎍ / ml showed more than twice the effect of the red control extract 2 compared to the positive control group. there was.

실험예Experimental Example 5:  5: 적토미Red Tommy 추출물의 항염 효과 측정 Determination of Anti-inflammatory Effects of Extracts

RNS(Reactive nitric species)인 NO(Nitric Oxide)의 과도한 생성은 염증 반응을 유도하는데, 이를 위해 세포를 LPS(lipopoly-saccharide)로 자극하여 NO의 생성을 유도한 후, 적토미 추출물에 의한 NO 생성 저해 효과를 'Griess reagent' 법으로 측정하였다.Excessive generation of NO (Nitric Oxide), a reactive nitric species (RNS), induces an inflammatory response. To this end, the cells are stimulated with lipopoly-saccharide (LPS) to induce the production of NO. The effect was measured by the 'Griess reagent' method.

실험 세포주는 'Raw 264.7 cell line'을 사용하였고, 대조군은 L-NMMA(NG-methyl-L-arginine acetate salt) 50μM, NaNO2 (NO standard) 50 μM를 사용하였다. The experimental cell line was used as 'Raw 264.7 cell line', and the control group was 50 μM of NG-methyl-L-arginine acetate salt (L-NMMA) and NaNO 2. (NO standard) 50 μM was used.

실험 방법은 하기의 방법과 동일하게 수행하였다(실험에 앞서 MTT assay 방법을 이용하여 세포 독성을 확인한 후, 독성이 없는 농도를 선택하여 실험을 수행하였다).Experimental method was carried out in the same manner as the following method (prior to the experiment was carried out by checking the cytotoxicity by using the MTT assay method, and then select a non-toxic concentration).

1) 쥐 유래의 대식세포(Raw264.7)를 배양 접시의 바닥에 접종한 후, 페니실린(100U/mL), 스트렙토마이신(100μg/mL), 10% FBS(Fetal bovine serum)를 함유하는 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium) 배지를 넣고 37℃에서 5% 이산화탄소를 포함하는 배양기 내에서 배양하였다.1) After inoculating a mouse-derived macrophage (Raw264.7) to the bottom of the culture dish, DMEM containing penicillin (100U / mL), streptomycin (100μg / mL), 10% FBS (Fetal bovine serum) Dulbecco's modified Eagle's medium) was added and cultured in an incubator containing 5% carbon dioxide at 37 ° C.

2) Raw264.7 세포를 5x105 cells/mL의 농도로 96-웰 플레이트(well plate)에 접종하고 24시간 배양하였다.2) Raw264.7 cells were seeded in 96-well plates at a concentration of 5 × 10 5 cells / mL and incubated for 24 hours.

3) 배양 후, 배지를 제거하고 혈청이 포함된 배지(LPS 100 ng/mL)를 이용하여 상기 제조예 1에서 수득된 각각의 적토미 추출물 3, 4를 50μg/mL로 희석하여 각 웰(well)에 넣어준 후, 24시간 추가 배양하였다.3) After incubation, the medium was removed and each red Tommy extract 3, 4 obtained in Preparation Example 1 was diluted to 50 μg / mL using a medium containing serum (LPS 100 ng / mL), and then each well. After the addition, the cells were further incubated for 24 hours.

4) 배지를 회수하여 12,000rpm으로 4℃에서 10분간 원심분리시킨 후, 배지(medium)만 얻어서, 96-웰 플레이트(well plate)에 50μL씩 넣고, 동량의 'Griess reagent' 와 10분 동안 반응시켰다.4) The medium was recovered and centrifuged at 12,000 rpm for 10 minutes at 4 ° C. After that, only medium was obtained and 50 μL was added to a 96-well plate and reacted with the same amount of Griss reagent for 10 minutes. I was.

5) 반응 후, ELISA 리더를 이용하여 540nm 에서 흡광값을 측정하여 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다. 5) After the reaction, the absorbance value was measured at 540 nm using an ELISA reader, and the results are shown in Table 6 below.

시료sample 농도(㎍/mL)Concentration (㎍ / mL) NO 생성 저해능(%)NO production inhibition (%) 적토미 추출물 3Red Tommy Extract 3 5050 3.443.44 적토미 추출물 4Red Tommy Extract 4 5050 16.2816.28

인위적인 자극(LPS)을 통해 유도된 NO 생성에 대한 적토미 추출물의 생성 저해능을 측정하였으며 , 적토미 추출물 4는 약 16%로 NO 생성 저해능이 있음을 확인하였다. The production inhibition of red Tommy extracts against NO production induced by artificial stimulation (LPS) was measured, and the red Tommy extract 4 was found to have NO production inhibition rate of about 16%.

실험예Experimental Example 6:  6: 적토미Red Tommy 추출물의 주름 억제 효능 평가(세포  Evaluation of Wrinkle Inhibitory Effect of Extracts (Cells 증식능Proliferative capacity 평가) evaluation)

상기 제조예 2에서 수득한 적토미 추출물에 주름 억제 효능 평가를 실시하였다. Wrinkle inhibition efficacy evaluation was carried out to the red Tommy extract obtained in Preparation Example 2.

실험 방법은 하기 방법과 동일하게 수행하였고, 실험 수행 전 MTT assay를 통해 해당 세포에 독성 영향이 없는 농도를 결정하였다. Experimental methods were carried out in the same manner as the following method, and the concentration was determined to have no toxic effect on the cells by MTT assay before performing the experiment.

1) 사람 유래의 섬유아세포(CCD-986sk)를 배양접시의 바닥에 접종한 후, 페니실린 (100U/mL), 스트렙토마이신(100μg/mL), 10% FBS(fetal bovine serum)를 함유하는 IMDM 배지를 넣고 37℃에서 5% 이산화탄소를 포함하는 배양기 내에서 배양하였다.1) After inoculating human-derived fibroblasts (CCD-986sk) at the bottom of the culture dish, IMDM medium containing penicillin (100 U / mL), streptomycin (100 μg / mL) and 10% FBS (fetal bovine serum) Incubated at 37 ℃ incubator containing 5% carbon dioxide.

2) CCD-986sk 세포를 96 웰 플레이트(well plate)에 1×105 cells/mL의 농도로 희석하여 100㎕씩 접종한 후 24시간 배양하였다.2) CCD-986sk cells were diluted to a concentration of 1 × 10 5 cells / mL in a 96 well plate and inoculated with 100 μl and incubated for 24 hours.

3) 배양 후 배지를 모두 제거하고 혈청이 포함되지 않은 배지 90㎕씩을 각 웰에 넣어주었다.3) After incubation, all of the medium was removed and 90 μl of medium without serum was added to each well.

4) 최종농도 50, 200μg/ml의 농도가 되도록 혈청이 포함되지 않은 배지를 이용하여 희석한 제조예 2의 적토미 추출물을 10㎕씩 3)의 웰에 처리하여 주었다.4) The red Tommy extract of Preparation Example 2 diluted with a medium containing no serum so as to have a final concentration of 50 and 200 μg / ml was treated to 10 μl of wells 3).

5) 24시간 배양 후 PBS를 이용하여 5mg/mL의 농도로 녹여져 있는 MTT 시약을 20㎕씩 넣어주고 4시간 배양하였다.5) After 24 hours of incubation, 20 μl of MTT reagent dissolved at a concentration of 5 mg / mL was added using PBS and incubated for 4 hours.

6) MTT 시약과 시료가 포함된 배지를 모두 제거하고 각 웰에 이소프로파놀산(acid isopropanol; 0.04N HCl in iso-propanol) 100㎕을 첨가하여 30분간 교반하여 주고, ELISA 리더를 이용하여 570nm에서 흡광값을 측정하였다. 6) Remove all medium containing MTT reagent and sample, add 100µl of isopropanol acid (0.04N HCl in iso-propanol) to each well, stir for 30 minutes, and 570nm using ELISA reader. Absorbance value was measured at.

시료sample 농도(ug/ml)Concentration (ug / ml) 세포 증식능(%)Cell proliferation (%) 적토미 추출물 1Red Tommy Extract 1 5050 16.8416.84 적토미 추출물 2Red Tommy Extract 2 5050 16.1816.18 적토미 추출물 3Red Tommy Extract 3 200200 31.4331.43 적토미 추출물 4Red Tommy Extract 4 200200 14.5814.58

상기 표 7에 나타난 바와 같이, 각각의 적토미 추출물에서 세포 증식능을 확인하였으며, 이로부터 적토미 추출물은 피부노화로 인해 생긴 주름을 억제할 수 있는 효능이 있는 것으로 판단되었다. As shown in Table 7, the cell proliferation was confirmed in each red Tommy extract, from which the red Tommy extract was determined to have the effect of suppressing wrinkles caused by skin aging.

실험예Experimental Example 7:  7: 적토미Red Tommy  And 흑토미Black soil 내의  undergarment 시아니딘Cyanidin -3-글루코시드(-3-glucoside ( CyanidinCyanidin -3-glucoside) 함량 측정-3-glucoside) content determination

하기와 같은 방법으로 적토미 및 흑토미 내의 시아니딘-3-글루코시드(Cyanidin-3-glucoside) 함량을 측정하였다. Cyanidin-3-glucoside content in red and black soil was measured by the following method.

표준액은 큐로마닌 클로라이드(Kuromanin chloride) 표준품을 100ppm, 50ppm, 10ppm 의 농도로 에탄올에 희석하여 표준액으로 사용하였다.The standard solution was used as a standard solution by diluting the Kuromanin chloride standard in ethanol at a concentration of 100 ppm, 50 ppm, and 10 ppm.

시료는 흑토미, 적토미로 하였으며, HPLC(고성능 액체 크로마토그래피)을 사용하였는데 조건은 하기와 같다.Samples were black and red, and HPLC (high performance liquid chromatography) was used, and the conditions were as follows.

컬럼은 'Agilent Eclipse plus C18 (5㎛, 4.6mm id x 250mm)이고, 검출기는 '자외선/가시광선 분광광도계(UV/VIS Spectrophotometer)(280nm)'를 사용하였고, 유속은 1.0mL/min, 컬럼 온도는 40℃, 주입부피는 10㎕, 이동상은 아세틸나이트릴(Acetonitrile):5% 포름산(formic acid in MeOH):5% 포름산(formic acid in water)을 40:55:5로 사용하였다. The column is' Agilent Eclipse plus C18 (5㎛, 4.6mm id x 250mm), the detector is' UV / VIS Spectrophotometer (280nm) ', flow rate is 1.0mL / min, column The temperature was 40 ° C., the injection volume was 10 μl, and the mobile phase was acetylnitrile: 5% formic acid (MeOH): 5% formic acid (40: 55: 5).

먼저 표준품 농도에 따른 Area 값은 표 8과 같고, 표준 곡선은 도 1과 같으며, 크로마토그램은 도 2와 같다.First, the area values according to the standard concentration are shown in Table 8, the standard curve is shown in FIG. 1, and the chromatogram is shown in FIG. 2.

농도density AreaArea 10ppm10 ppm 237304237304 50ppm50 ppm 12059101205910 100ppm100 ppm 23735352373535

다음으로, 적토미 및 흑토미를 HPLC에 통과시킨 후, 그 크로마토그램은 도 3 및 도 4에 나타내었고, 이를 기초로 한 적토미 및 흑토미 내의 시아니딘-3-글루코시드(Cyanidin-3-glucoside) 함량은 표 9에 나타내었다. Next, after passing red and black soil through HPLC, the chromatograms are shown in Figs. 3 and 4, based on this, cyanidin-3-glucoside in red and black soil. The content is shown in Table 9.

시료sample 농도(%)density(%) 적토미Red Tommy 0.26730.2673 흑토미Black soil 0.25780.2578

일반적으로 시아니딘-3-글루코시드(Cyanidin-3-glucoside)는 흑토미에서 주로 발견되는 것으로 알려져 있었지만, 상기 도 3 및 표 9에 의하면, 시아니딘-3-글루코시드(Cyanidin-3-glucoside)는 흑토미보다 적토미에서 더 많이 발견됨을 확인할 수 있었다. 이에 본 발명에 사용된 적토미에는 상당히 많은 양으로 시아니딘-3-글루코시드(Cyanidin-3-glucoside)가 존재하는 것을 확인할 수 있었다.In general, cyanidin-3-glucoside is known to be found mainly in black soil, but according to FIG. 3 and Table 9, cyanidin-3-glucoside Was found more in red soil than in black soil. Therefore, it was confirmed that cyanidin-3-glucoside was present in a considerable amount of red Tommy used in the present invention.

실험예Experimental Example 8:  8: 적토미Red Tommy  And 흑토미Black soil 내의 총 폴리페놀( Total polyphenols in TotalTotal polyphenolpolyphenol ) 함량 측정Content measurement

적토미 및 흑토미의 총 폴리페놀 함량은 Folin-Denis법으로 분석하였으며, 실험방법은 하기와 같이 수행하였다. The total polyphenol content of red and black soil was analyzed by Folin-Denis method, and the experimental method was performed as follows.

시료로서 적토미, 흑토미, 백미를 사용하였으며, 각 시료에 30% MeOH 0.5mL와 Folin & Ciocalteau의 페놀 시약 0.5mL를 가해 혼합하고, Na2CO3 포화용액 0.5mL를 가해 암소에서 한시간 동안 방치한 후, 자외선/가시광선 분광광도계( UV/Vis spectrophotometer)로 700nm에서 흡광도를 측정하였다. 또한 표준물질로 갈산을 사용하여 동일한 방법으로 측정하여 작성된 표준 곡선을 이용하여 총 폴리페놀 함량을 환산하였다. Red, black and white rice were used as samples, and 0.5 mL of 30% MeOH and 0.5 mL of phenolic reagent of Folin & Ciocalteau were added to each sample, mixed, and 0.5 mL of saturated Na 2 CO 3 solution was added and left in the cow for 1 hour. Afterwards, the absorbance was measured at 700 nm with a UV / Vis spectrophotometer. In addition, the total polyphenol content was converted using a standard curve prepared by measuring the same method using gallic acid as a standard.

시료sample 총 폴리페놀 함량(mg/100g)Total Polyphenol Content (mg / 100g) 적토미Red Tommy 7145.24±54.567145.24 ± 54.56 흑토미Black soil 3145.24±54.533145.24 ± 54.53 백미White rice 34.76±2.0634.76 ± 2.06

기존 연구 결과에 의하면, 식물 성분 중 폴리페놀 성분은 항산화, 항염, 항암, 항노화 등의 효과를 나타내는 것으로 알려져 있는데, 상기 표 10에 의하면, 적토미에서 총 폴리페놀의 함량이 7145mg/100g으로, 흑토미 대비 2배 이상, 백미 대비 200배 이상으로 상당히 많은 양이 포함되어 있음을 확인할 수 있었다.According to the existing research results, the polyphenol component of the plant component is known to exhibit the effects of antioxidant, anti-inflammatory, anti-cancer, anti-aging, etc. According to Table 10, the total polyphenol content in red soil is 7145mg / 100g, black Two times more than Tommy and 200 times more than white rice was found to contain a significant amount.

Claims (6)

삭제delete 삭제delete 삭제delete 5% HCl/MeOH를 추출용매로 하여 추출된 적토미 추출물을 유효성분으로 함유하고, 활성산소로부터 피부 세포를 보호하는 것을 특징으로 하는 피부세포 보호용 화장료 조성물Cosmetic composition for skin cell protection, characterized in that it contains red tomy extract extracted with 5% HCl / MeOH as an extractant as an active ingredient, and protects skin cells from active oxygen 삭제delete 삭제delete
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