KR100980214B1 - 말디 이미징용 슬라이드 - Google Patents

Abstract

말디 이미징(MALDI imaging)용 슬라이드가 개시된다. 투명 플레이트의 일면에 도포되어 있는 전도성 물질이 존재하는 표면을 저항 측정없이 육안으로 쉽게 구별하는 앞뒤식별표지와 시료의 위치를 쉽게 지정할 수 있는 시료의 위치식별표지를 포함하는 말디 이미지용 슬라이드가 제공된다.

Description

말디 이미징용 슬라이드{MALDI imaging slide}

본 발명은 말디 이미징용 슬라이드에 관한 것으로서, 전도성이 있는 표면을 저항 측정없이 육안으로 쉽게 구별하고, 시료의 위치를 쉽게 지정할 수 있는 말디 이미징용 슬라이드에 관한 것이다.

1999년 Richard M. Caprioli에 의해서 개발된 Matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry imaging("말디 이미징"라 약칭)은 말디 이온화법을 이용한 이미징 질량분석방법이다. 말디 질량분석법은 기체상의 이온으로 생성하기 어려웠던 단백질 등과 같은 생체 고분자 물질(biopolymer)을 매트릭스(matrix) 물질과 함께 혼합하여 시료 플레이트에 결정(crystal)을 형성하고, 상기 시료 플레이트에 레이져를 조사하여 고분자 물질들의 깨어짐이 최대한 억제된 어미이온(parent ion) 상태로 이온을 생성시킨 후 이온화된 물질의 질량을 분석하는 방법으로 단백질, 펩타이드, DNA 등의 바이오 물질에 대한 매우 정확한 분자량 측정이 가능하다.

말디 이미징(imaging)은 분석하고자 하는 시료의 표면, 즉 세포/조직등의 생체 표면에 매트릭스를 도포하여 말디 이온화법을 적용하고 작은 크기로 잘 집광된 말디 레이져를 시료 표면에 스캔함으로써, 해상도가 높은 질량 분석 이미지를 얻는 것이다. 레이저 형광 혹은 공초점 현미경과 같은 광학적인 영상이나, bio-SEM/TEM 및 MRI등의 여타의 영상들이 컨트라스에 주로 의존하는 반면, 말디 이미징은 생체 조직에서 직접적으로 이온화된 생화학물질, 즉 단백질, 펩타이드. 지질, 소형 분자(small molecules)에 대한 질량분석 정보를 포함하는 케미컬 맵핑(chemical mapping)을 표지 물질을 사용하지 않고, 기존의 시간 소모가 많고 지루한 반복적인 과정, 분리(separation)와 추출(extraction)과정을 사용하지 않고, 실제 세포나 조직사이에서 생체 분자의 분포 및 이동 등에 관한 정보를 제공하는 분석방법이다.

일반적인 말디 질량분석에서는 전도성이 우수한 스태인레스 스틸(Stainless steel, SUS)의 시료 플레이트가 주로 사용되나, 생체 조직에 대한 말디 이미징에 사용되는 시료 플레이트는 광학적인 관찰이 가능한 빛의 투과성이 높고, 전기학상 전도성이 있는 표면을 갖는 Indium-tin-oxide (ITO) 글라스 슬라이드(glass slide)가 주로 사용되는데, 전도성 물질인 ITO가 도포된 표면(surface)에 분석하고자 하는 조직 섹션(tissue section)을 올려야 한다.

그러나, 도 1과 같이 일반적인 말디 이미징용 슬라이드는 전도성 물질이 도포된 면(앞면)과, 그렇지 않은 면(뒷면)을 포장이 개봉된 후에는 육안으로 구별할 수 없어, 사용자가 저항값을 측정하여 일일이 앞면과 뒷면을 구별할 수 있는 표식을 해야만 전도성이 없는 타면에 시료를 놓는 실수를 방지 할 수 있었다.

또한, 말디 이미징 질량분석을 하기 위해서는 말디 이미징용 슬라이드 상에 시료의 위치를 판단할 수 있는 위치식별표지를 일일이 실험자가 수작업으로 표시해야 하는데, 일반적인 펜을 사용하면 위치 식별 표지가 시료위에 도포되는 매트릭스(matrix) 용매에 의해서 지워지거나, 시료의 오염을 가져오게 되고, 수정액과 같은 것으로 마킹하게 되면 정교하게 표지되지 않아서 시료의 위치와 분석하고자하는 위치사이에 갭(gap)이 있어 분석하고자 하는 시료의 위치만을 정확히 분석하기 어려웠고, 기기의 오작동 가능성이 있었다.

본 발명은 어느 방향에 전도성 투명물질이 도포되어 있는지 육안으로 쉽게 구별할 수 있는 말디 이미징용 슬라이드를 제공하고자 한다.

또한, 본 발명은 시료의 위치를 사용자가 일일이 표지할 필요 없는 정교한 위치식별표지가 표시되어 있는 말디 이미징용 슬라이드를 제공하고자 한다.

또한, 본 발명은 앞뒤식별표지와 위치식별표지를 시료가 놓이지 않는 비전도성표면인 뒷면의 가장자리에 표지하여 시료 준비와 분석에 방해가 되지 않도록 하는 말디 이미징용 슬라이드를 제공하고자 한다.

본 발명의 일 측면에 따르면,

투명 플레이트와;

상기 투명 플레이트의 일면에 도포된 전도성 투명물질과;

상기 투명 플레이트에 표시되며, 중심을 지나는 가상의 수직선을 기준으로 좌우가 비대칭인 앞뒤식별표지를 포함하는 말디 이미징용 슬라이드가 제공된다.

또한, 상기 투명 플레이트에 표시되는 복수의 위치식별표지를 더 포함할 수 있다.

또한, 상기 앞뒤식별표지와 상기 위치식별표지는 상기 투명 플레이트의 가장자리에 표시되는 것이 좋다.

또한, 상기 전도성 투명물질은 다결정 ITO(Indium-Tin Oxide) 필름일 수 있다.

또한, 상기 앞뒤식별표지와 상기 위치식별표지는 상기 투명 플레이트의 타면에 형성될 수 있다.

이상과 같이, 본 발명은 앞뒤식별표지를 이용하여 어느 방향에 전도성 투명물질이 도포되어 있는지 육안으로 쉽게 구별할 수 있는 말디 이미징용 슬라이드를 제공할 수 있게 된다.

또한, 본 발명은 위치식별표지를 이용하여 시료의 위치를 일일이 표시해야하는 번거로움과 사용자 실수를 줄일 수 있는 말디 이미지용 슬라이드를 제공할 수 있게된다.

또한, 본 발명은 위치식별표지및 앞뒤식별표지를 전도성 물질이 도포되어 있지 않은 뒷면에 표지하고, 식별표지를 가장자리에 배치하므로써, 시료가 오염되거나 시료 분석에 방해가 되지 않도록 하는 말디 이미지용 슬라이드를 제공하고자 한다.

도 1은 종래 기술에 따른 말디 이미징용 슬라이드의 사시도.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 말디 이미징용 슬라이드의 사시도.
도 3내지 도 6은 앞뒤식별표지를 설명하기 위한 도면.

이하에는, 본 발명의 바람직한 실시예를 첨부도면을 참조로 상세하게 설명하되, 이는 본 발명에 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 본 발명을 용이하게 실시할 수 있을 정도로 상세하게 설명하기 위한 것이지, 이로써 본 발명의 사상 및 범주가 한정되는 것을 의미하지는 않는다.

도 2은 본 발명의 일 실시예에 따른 말디 이미징용 슬라이드에 관한 사시도이이다. 도 2를 참조하면, 말디 이미징용 슬라이드(20)는 투명 플레이트(21)와, 상기 투명 플레이트(21)의 일면에 도포된 전도성 투명물질(22)과, 상기 투명 플레이트(21)에 표시되며 중심을 지나는 가상의 수직선을 기준으로 좌우가 비대칭인 앞뒤식별표지(23)를 포함한다.

투명 플레이트(21)는 유리로 만들어 지는 것이 일반적이며, 플라스틱 재료를 사용할 수도 있다.

투명 플레이트(21)의 일면에는 전도성 투명물질(22)이 도포된다. 전도성 투명물질(22)은 다결정 ITO(Indium-Tin Oxide) 필름일 수 있다. 다결정 ITO(Indium-Tin Oxide) 필름은 우수한 도전성을 갖는 투명 전극 재료로서 사용될 뿐만 아니라, 가열 (heating), 열반사, 전자기파 차폐, 대정전 방지 (anti-electrostatic charges) 등 과 같은 다양한 역할을 수행한다.

ITO 필름의 증착방법은 스퍼터링 공정일 수 있다. 스퍼터링 공정에 의한 ITO 필름 증착방법은 ITO타겟으로부터 원자 및 분자단위로 물질을 때어낸 후, 투명 플레이트에 증착시키고, 이후 열처리를 통하여 비정질 상태의 ITO 필름을 결정화하는 단계를 포함한다.

스퍼터링 공정 이외에 제안되는 방법은 CVD법이며, 대한민국 특허출원 10-2005-0112951은 이러한 CVD법에 의한 ITO 투명 전도성 필름을 포함하는 기판 및 그 증착방법을 개시하고 있으며, 상기 인용기술은 ITO덩어리와 같은 ITO 소스시료를 직접 플라즈마 빔으로 가열, 증발시킨 후, 다시 이를 이온화하는 단계를 포함하는 ITO 투명 전도성 필름 증착방법을 개시한다.

이와 같이, 다양한 방법으로 투명 플레이트(21)에 전도성 투명물질(22)을 도포할 수 있게 된다. 전도성 투명물질(22)은 ITO 필름 이외에 가용한 물질을 사용할 수도 있다.

앞뒤식별표지(23)는 전도성 투명물질(22)이 도포되지 않은 투명 플레이트(21)의 타면에 형성되는 것이 좋다. 전도성 투명물질(22)에 앞뒤식별표지(23)를 형성할 경우 전도성에 악영항을 미칠 수 있기 때문이다.

앞뒤식별표지(23)는 잉크로 프린트될 수도 있고, 양각이나 음각으로 세겨질 수 있다.

앞뒤식별표지(23)는 중심을 지나는 가상의 수직선을 기준으로 좌우가 비대칭인 기호나 문자일 수 있다. 도 3을 보면 "2"라는 숫자를 기준으로 가상의 수직선(a)를 그으면 좌우가 비대칭이다. "2"라는 숫자를 투명 플레이트(21)에 표시되면, 도 2와 같이 정렬될 때, 위에서 보면 "2"가 올바르게 보인다. 그러나, 아래에서 보면, 도 4와 같이 좌우가 뒤바뀐 형태를 보게된다. 따라서, "2"를 통하여 말디 이미징용 슬라이드(20)의 앞뒤를 구별할 수 있으며, 어느 방향에 전도성 투명물질(22)이 도포되어 있는 지도 알 수 있다.

그러나, 도 5와 같이, "0"이라는 숫자는 중심을 지나는 가상의 수직선(c)를 기준으로 좌우로 대칭이므로, 아래에서 보더라도 도 6과 같은 형태가 된다. 따라서, 좌우가 대칭인 "0"은 앞뒤식별표지(23)로서 적합하지 않은 숫자이다.

한편, 투명 플레이트(21)에는 복수의 위치식별표지(24)가 표시될 수 있다. 위치식별표지(24)는 2개 일 수 있으나, 적어도 3개이상 표시되는 것이 좋다. 말디-TOF용 분석기기가 말디 이미징용 슬라이드(20)에 놓은 시료의 위치를 좌표적으로 해석하기 위해서 필요하다.

위치식별표지(24)는 전도성 투명물질(22)이 도포되지 않은 투명 플레이트(21)의 타면에 형성되는 것이 좋다. 전도성 투명물질(22)에 위치식별표지(24)를 형성할 경우 전도성에 악영항을 미칠 수 있기 때문이다.

이러한 위치식별표지(24)는 어떠한 형태로 가능하다. 바람직한 위치식별표지(24)의 형태는 선과 선이 직각으로 만나는 형태인 것이 좋다.

이상에서 본 발명의 실시예에 대해서 상세히 설명하였으나, 이는 하나의 실시예에 불과하며, 이로써 본 발명의 특허청구범위를 한정하는 것은 아니다. 본 실시예를 바탕으로 균등한 범위까지 당업자가 변형 및 추가하는 범위도 본 발명의 권리범위에 속한다 할 것이다.

말디 이미징용 슬라이드(20) 투명 플레이트(21)
전도성 투명물질(22) 앞뒤식별표지(23)

Claims (5)

1. 유리로 만들어진 투명 플레이트와;
   상기 투명 플레이트의 일면에 도포된 전도성 투명물질과;
   상기 투명 플레이트의 타면에 표시되며, 중심을 지나는 가상의 수직선을 기준으로 좌우가 비대칭인 앞뒤식별표지와;
   상기 투명 플레이트의 타면에 표시되는 복수의 위치식별표지를 포함하되,
   상기 전도성 투명물질은 다결정 ITO(Indium-Tin Oxide) 필름인 것을 특징으로 하는 말디 이미징용 슬라이드.
   
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