상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 하기 구조식 1의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 Hsp90 억제제 조성물을 제공한다.
상기 구조식 1에서,
X 및 Y는 동일하거나 상이하며, 독립적으로 수소, 할로겐, 나이트릴, C1-C20 알킬, 알킬 라디칼, 사이클로알킬, 사이클로알킬 라디칼, C1-C20 알콕시, 비치환 또는 치환된 페닐, 페닐 라디칼, 5 또는 6개의 고리 원자를 갖는 헤테로방향족 또는 헤테로방향족 라디칼, 비치환 또는 치환된 벤질, 나프탈레닐, 비치환 또는 치환된 인돌일(indolyl), 하이드록시, C1-C20 알킬설포닐, C1-C20 알킬티오, 니트로, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메틸 C1-C20 알콕시, 아미노, 1,3-벤조다이옥솔일메틸, 아 세트아미도, 카복시, 및 알킬 하이드록삼산으로 이루어진 그룹 중에서 선택된다.
본 발명은 하기 구조식 2로 대표되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 Hsp90 억제제 조성물을 제공한다.
상기 구조식 2에서,
R1 은 페닐, 알킬페닐, 알콕시페닐, 할로페닐, 하이드록시페닐, 및 2 이상의 치환기로 치환된 페닐로 이루어진 그룹 중에서 선택되며;
R2 는 수소 또는 벤질이다.
본 발명은 하기 구조식 3으로 대표되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 Hsp90 억제제 조성물을 제공한다.
상기 구조식 3에서,
R3 은 페닐, 알킬페닐, 알콕시페닐, 할로페닐, 하이드록시페닐, 및 2 이상의 치환기로 치환된 페닐로 이루어진 그룹 중에서 선택되며;
R4, R5, R6 는 수소, C1-C20 알킬, C1-C20 알콕시, 하이드록시, 옥살로, 및 카복실로 이루어진 그룹 중에서 선택된다.
본 발명은 하기 구조식 4로 대표되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 Hsp90 억제제 조성물을 제공한다.
상기 구조식 4에서,
R7 은 페닐, 알킬페닐, 알콕시페닐, 할로페닐, 하이드록시페닐, 및 2 이상의 치환기로 치환된 페닐로 이루어진 그룹 중에서 선택되며;
R8 는 수소, 알킬, 및 1,3-벤조다이옥솔-5-일메틸로 이루어진 그룹 중에서 선택된다.
본 발명은 상기 구조식 1에서,
X는 1-벤질-1H-인돌-3-일(1-Benzyl-1H-indol-3-yl:
)이고, Y는 2-플루오로페닐(2-Fluorophenyl:
)이며;
X는 1H-인돌-3-일(1H-Indol-3-yl:
)이고, Y는 4-메톡시페닐(4-Methoxyphenyl:
)이며;
X는 1,3-벤조다이옥솔-5-일메틸아미노(1,3-Benzodioxol-5-ylmethylamino:
)이고, Y는 2-플루오로페닐이며;
X는 2-옥살로페닐(2-oxalophenyl:
)이고, Y는 3-메틸페닐(3-Methylphenyl:
)이며;
X는 4-하이드록시-3-메톡시페닐(4-Hydroxy-3-methoxyphenyl:
)이고, Y는 벤질(
)인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 Hsp90 억제제 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기에 기재된 Hsp90 억제제 조성물들 중 어느 하나를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 항암제 조성물을 제공한다.
이하, 본 발명에 대해 더욱 상세히 설명하고자 한다.
본 발명자는 85,000개의 화학물질들을 대상으로 도킹 시뮬레이션을 통한 가상 스크리닝을 수행하여 300개의 화학물질들을 우선 선별하였다. 이 300개 중에서 285개의 화학물질들을 대상으로 효모 Hsp90를 이용한 ATPase 활성 조사를 통해 Hsp90 억제제를 선별하고자 하였다.
Hsp90 ATPase 활성은 말라카이트 그린(malachite green) 시약을 사용하여 방출되는 무기인산을 색의 변화로 검출하는 방법을 통해 96-웰 플레이트에서 측정하였다. 그 결과, 피리미딘-2,4,6-트라이온(Pyrimidine-2,4,6-trione) 유도체인 본 발명의 화합물에서 50 μM의 첨가 농도에서 Hsp90의 억제활성이 59% 이상으로 나타났다.
한편, 하기 표 1의 1번 화합물을 대상으로 하여 세포내(in vivo) 억제 효능을 테스트하였다. MCF-7 유방암 세포주에서의 Her2 분해효과를 조사하였는데, Hsp90 클라이언트 단백질 중 하나인 Her2 단백질의 분해와 함께 Hsp70의 유도를 관찰함으로써 Hsp90 억제 활성을 조사하였다. 열충격전사인자(Heat shock transcription factor: Hsf1)는 Hsp90에 의해 음성적으로 조절되므로, 겔다나마이신과 같은 대부분의 Hsp90 억제제들은 Hsp70을 포함한 Hsf1 타겟 유전자의 발현을 활성화시킨다. MCF-7 세포에서 각각의 화학물질을 30 μM의 농도로 24시간 동안 처리하였고, Her2와 Hsp70의 발현수준들을 웨스턴 블랏팅 방법으로 조사하였다(도 1). 대조군과 비교했을 때, 1번 화합물 처리군에서 Her2 단백질 수준이 50% 이상 감소하고, Hsp70의 발현이 유도됨을 확인하였다(도 1). 또한, 본 발명의 Hsp90 억제제 조성물의 세포성장저해 활성을, 상기 화합물을 4일간 노출시킨 뒤 술포로다민 B(Sulforhodamine B: SRB) 측정법으로 측정하였다(Skehan, P., et al., J. Natl . Cancer Inst ., 1990, 82, 1107. 참조). 1번 화합물이 18.1 μM 농도의 GI50 값을 나타내어 효과적으로 MCF-7 세포들의 성장을 저해함을 확인하였다(표 3).
한편, 본 발명은 본 발명의 화합물 중 하나를 포함하는 암 치료용 (더 넓은 의미로는 예방용) 약제, 즉 항암제 조성물을 제공한다. 본 발명의 항암제 조성물은 모든 종류의 암세포의 Hsp90를 타겟으로 할 수 있다.
본 발명의 항암제 조성물은 활성 성분으로서 본 발명의 화합물 또는 제약상 허용가능한 이들의 염을 유의한 양만큼 함유하고, 1종 이상의 무기 또는 유기의 고체 또는 액상의 제약상 허용가능한 담체를 포함하거나 혼합하는 혼합물이다.
본 발명에 따른 제약 조성물은 포유동물(특히, 인간)에게 경구 또는 비경구(예를 들어, 근육 내 또는 정맥 내 주사)로 투여할 수 있다. 활성 성분의 투여량은 포유동물의 종, 체중, 연령 및 개개의 상태에 따라 달라진다.
본 발명의 화합물 또는 제약상 허용가능한 이들의 염을 포유동물, 예를 들어 대략 70 kg 체중의 인간에게 투여할 때, 1인당 1일 투여량은 바람직하게는 대략 3 mg 내지 대략 10 g, 더욱 바람직하게는 대략 10 mg 내지 대략 1.5 g, 가장 바람직하게는 약 100 mg 내지 약 1000 mg이다. 투여횟수는 바람직하게 동일량을 2~3회로 나누어 하루에 투여하는 것이 좋다. 일반적으로 어린이에게는 성인 투여량의 절반을 적용한다.
본 발명의 항암제 조성물은 활성 성분(본 발명의 화합물)을 대략 1% 내지 대략 95%, 바람직하게는 대략 20% 내지 대략 90% 포함한다. 본 발명에 따른 제약 조성물은 앰플, 바이알, 좌제, 당제, 정제 또는 캡슐제 형태 등과 같은 단위 투여 형태일 수 있다.
본 발명의 항암제는 공지된 방식인 통상적인 용해, 동결건조, 혼합, 과립화 또는 당제화 공정 등을 통해 제조될 수 있고, 시판되는 것을 구입해서 사용할 수도 있다.
본 발명의 항암제는 부형제(예를 들어, 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 가용화제, 삼투압 조절을 위한 염 또는 완충액)를 포함할 수 있다. 또한, 점도 증가 물질(예를 들어, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 카르복시메틸셀룰로스, 덱스트란, 폴리비닐피롤리돈 또는 젤라틴)을 포함할 수도 있다.
본 발명의 주사 형태 항암제는 멸균 조건하에서 통상적인 방식으로 제조될 수 있으며, 상기 조성물을 앰플 또는 바이알에 도입하고 용기를 밀폐할 때에도 통상적인 방법을 사용할 수 있다.
본 발명의 경구 투여용 항암제로서 정제는 활성 성분을 고체 담체와 배합하고, 필요하다면 생성된 혼합물을 과립화하며, 필요에 따라서는 적절한 부형제를 첨가한 후에 상기 혼합물을 가공하여 제조할 수 있다. 적합한 담체로는 옥수수, 밀, 쌀 또는 감자 전분 등을 사용한 전분페이스트, 젤라틴, 메틸셀룰로스, 히드록시프 로필메틸셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 카르복시메틸 전분, 가교된 폴리비닐피롤리돈, 한천, 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등이 있다. 적합한 부형제로는 유동성 조절제(flow conditioner) 및 윤활제(예를 들어, 규산, 활석, 스테아르산 또는 그의 염-예를 들어 스테아르산마그네슘 또는 스테아르산칼슘 또는 폴리에틸렌 글리콜-) 등이 있다.
본 발명의 경구 투여용 항암제로서 캡슐제는 젤라틴으로 제조된 건조-충전된 캡슐제 및 젤라틴과 가소제(예를 들어, 글리세롤 또는 소르비톨)로 제조된 연질 밀봉된 것을 사용할 수 있다. 건조-충전된 캡슐제에는 과립 형태의 활성 성분에 충전제(예로서, 락토오스), 결합제 (예로서, 전분) , 유동화제 (예로서, 활석 또는 스테아르산마그네슘) 또는 안정화제가 함께 첨가될 수 있다. 연질 캡슐제에서 활성 성분은 적합한 오일성 부형제(예로서, 지방 오일, 파라핀 오일 또는 액체 폴리에틸렌 글리콜) 중에 용해되거나 현탁되는 것이 바람직하고, 안정화제 또는 항균제가 첨가될 수도 있다.