이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예 및 실험예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예 및 실험예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
[제조예 1] N-(((S)-3-(4-브로모-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 (N-(((S)-3-(4-bromo-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl) acetamide)(화합물 I)의 제조
2-((R)-3-(4-
브로모
-3-
플루오로페닐아미노
)-2-히드록시프로필)
이소인돌린
-1,3-디온 (2-((R)-3-(4-
bromo
-3-
fluorophenylamino
)-2-
hydroxypropyl
)
isoindoline
-1,3-dione)(화합물
VI
)의 제조
4-브로모-3-플루오로아닐린(5g, 25.53mmol), 2-(((S)-옥시란-2-닐)메틸)이소인돌린-1,3-디온(2-(((S)-oxiran-2-yl)methyl)isoindoline-1,3-dione)(37.95mmol)을 2-프로필알코올 75ml에 넣은 후 12시간 동안 환류 교반 한 후 생성돤 고체를 감압 여과하고, 다이에틸이써(diethylether) 30ml로 씻어주어 2-((R)-3-(4-브로모-3-플루오로페닐)-2-히드록시프로필)이소인돌린-1,3-디온(6g, 15.26mmol, 59.76%)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, chloroform-d1) δ 7.86-7.84 (m, 2H), 7.78-7.76 (m, 2H), 7.21-7.17 (m, 1H), 6.43 (dd, 1H, J 1 = 11.6 Hz, J 2 = 2.8 Hz), 6.35 (dd, 1H, J 1 = 8.6 Hz, J 2 = 2.6 Hz), 5.19 (t, 1H, J = 5.4 Hz), 5.03 (d, 1H, J = 5.2 Hz), 4.16-4.08 (m, 1H), 3.87-3.71 (m, 2H), 3.23-3.06 (m, 2H)
2-((R)-3-(4-
브로모
-3-
플루오로페닐
)-2-
옥소옥사졸리딘
-5-닐)
메틸
)
이소인돌린
-1,3-디온 (2-(((S)-3-(4-
bromo
-3-
fluorophenyl
)-2-
oxooxazolidin
-5-yl)methyl)isoindoline-1,3-dione)(화합물
VII
)의 제조
상기에서 얻은 2-((R)-3-(4-브로모-3-플루오로페닐아미노)-2-히드록시프로필) 이소인돌린-1,3-디온 6g(15.26mmol), 1,1-카보닐다이이미다졸 3.7g(22.9mmol), 디메틸아미노피리딘 0.93g(7.63mmol)을 순차적으로 테트라하이드로퓨란 60ml에 순차적으로 첨가 후 20시간 동안 환류교반 하였다. 상기 반응물을 감압농축하고 에틸아세테이트 100ml에 녹여서 1N-염산수용액 50ml, 중탄산나트륨수용액 50ml로 순차적으로 씻어주고 황산나트륨을 이용하여 탈수시켜 감압농축한 후 다이에틸이써 80ml로 씻어주어 2-((S)-3-(4-브로모-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)이소인돌린-1,3-디온(4.9g, 11.69mmol, 76.61%)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, chloroform-d1) δ 7.86-7.84 (m, 2H), 7.75-7.73 (m, 2H), 7.49-7.45 (m, 2H), 7.12-7.09 (m, 1H), 5.00-4.93 (m, 1H), 4.14-4.05 (m, 2H), 3.98-3.93 (m, 1H), 3.88-3.85 (m, 1H)
(S)-5-(
아미노메틸
)-3-(4-
브로모
-3-
플루오로페닐
)
옥사졸리딘
-2-온 ((S)-5-(aminomethyl)-3-(4-bromo-3-fluorophenyl)oxazolidin-2-one)(화합물
VIII
)의 제조
상기에서 얻은 2-((S)-3-(4-브로모-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)이소인돌린-1,3-디온 4.9g(11.69mmol), 하이드라진 1.17g(23.38mmol)을 순차적으로 에틸알코올 70ml에 녹인 후 1시간 동안 환류교반하고 반응물을 상온으로 냉각하여 여과하고 다이에틸이써 30ml로 씻어주어 (S)-5-(아미노메틸)-3-(4-브로모-3-플루오로페닐)옥사졸리딘-2-온(3.14g, 10.18mmol, 87.08%)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, chloroform-d1) δ 7.55-7.34 (m, 2H), 7.05 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 6.18 (t, 1H, J = 5.2 Hz), 4.32-4.12 (m, 1H), 4.00 (t, 1H, J = 9.2 Hz), 3.74 (dd, 1H, J 1 = 9.2 Hz, J 2 = 6.8 Hz), 3.67-3.49 (m, 2H), 1.99 (s, 3H)
N-(((S)-3-(4-
브로모
-3-
플루오로페닐
)-2-
옥소옥사졸리딘
-5-닐)
메틸
)
아세트아마이드
(N-(((S)-3-(4-
bromo
-3-
fluorophenyl
)-2-
oxooxazolidin
-5-yl)methyl)acetamide)(화합물 I)의 제조
상기에서 얻은 (S)-5-(아미노메틸)-3-(4-브로모-3-플루오로페닐 )옥사졸리딘-2-온 3.14g(10.18mmol)을 피리딘 30ml에 녹인 후 0℃로 냉각하여 아세틸클로라이드 1.45ml (20.36mmol) 서서히 적가하고 상온에서 2시간동안 교반하였다. 반응물을 감압농축하고 에틸아세테이트 80ml에 녹여서 1N-염산수용액 50ml, 중탄산나트륨수용액 50ml, 소금물 20ml로 순차적으로 씻어주고 황산나트륨을 이용하여 탈수시켜 감압농축하여 표제 화합물인 N-(((S)-3-(4-브로모-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 (3.3.g, 9.97mmol, 97.93%)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.77 (dd, 1H, J 1 = J 2 = 8.68 Hz), 7.62 (dd, 1H, J 1 = 11.6 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.32-7.29 (m, 1H), 4.62-4.55 (m, 1H), 4.03-3.99 (m, 1H,), 3.83-3.79 (m, 1H), 2.83-2.71 (m, 2H),
[제조예 2] N-(((S)-3-(4-(4-포밀페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 (N-(((S)-3-(4-(4-formylphenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide)(화합물 II)의 제조
상기 제조예 1에서 얻은 N-(((S)-3-(4-브로모-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸 리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 0.2g(0.604mmol)과 4-포밀페닐보로닉산 0.1g(0.604mmol)을 플라스크에 넣고 질소 가스로 치환 시킨 후 테트라하이드로퓨란 8ml로 용해시킨 후 교반하면서 팔라듐 테트라키스트리페닐포스핀 0.21g(0.18mmol)을 넣고 2M 탄산칼륨수용액 0.6ml를 첨가하였다. 20시간 동안 환류 교반 한 뒤 용매를 감압 농축하고 에틸 아세테이트로 컬럼하여 표제 화합물인 N-(((S)-3-(4-(4-포밀페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드(0.07g, 0.197mmol, 33%)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.01 (s, 1H), 8.23 (t, 1H, J = 5.8 Hz), 7.61 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.75 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.67-7.54 (m, 2H), 7.42 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 4.78-4.64 (m, 1H), 4.13 (t, 1H, J = 9.2 Hz), 3.75 (dd, 1H, J 1 = 9.2 Hz, J 2 = 6.4 Hz), 3.39 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 1.79 (s, 3H)
[제조예 3] N-(((S)-3-(4-(4-에톡시카보닐페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 (N-(((S)-3-(4-(4-ethoxycarbonylphenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide)(화합물 III)의 제조
상기 제조예 1에서 얻은 N-(((S)-3-(4-브로모-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 0.5g(1.51mmol)과 4-에톡시카보닐보로닉산 0.32g(1.66mmol)을 플라스크에 넣고 질소 가스로 치환한 뒤에 테트라하이드로퓨란 15ml로 녹인 후 팔라듐 테트라키스트리페닐포스핀 (0.052g, 0.045mmol)을 넣고 2M 탄산 칼륨 1.5ml를 넣고 5시간동안 환류 교반한다. 용매를 감압 농축하고 물을 넣어주고 여과한 뒤 헥산으로 씻어주어 갈색의 고체 상태로 표제 화합뮬 N-(((S)-3-(4-(4-에톡시카보닐페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드(0.42g, 0.168mmol, 69%)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, chloroform- d1) δ 8.11 (dd, 2H, J 1 = 8.4 Hz, J 2 = 1.6 Hz), 7.60 (dd, 2H, J 1 = 8.4 Hz, J 2 = 1.6 Hz), 7.56 (dd, 1H, J 1 = 12.8 Hz, J 2 = 2.0 Hz), 7.49-7.45 (m, 1H), 7.31 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 6.00 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 4.86-4.80 (m, 1H), 4.41 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 4.13-4.01 (m, 1H), 3.85-3.60 (m, 3H), 1.57 (s, 3H), 1.42 (t, 3H, J = 7.2 Hz)
[제조예 4] N-(((S)-3-(4-(4-시아노페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸) 아세트아마이드 (N-(((S)-3-(4-(4-cyanophenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 IV)의 제조
상기 제조예 1에서 얻은 N-(((S)-3-(4-브로모-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 1g(3.02mmol)과 4-시아노페닐 보로닉에시드 0.44g(3.02mmol)을 플라스크에 넣고 질소 가스로 치환 시킨 후 테트라하이드로퓨란 30ml로 녹인 후 팔라듐 테트라키스트리페닐포스핀 1g(0.906mmol)을 넣고 2M 탄산칼륨수용액 3ml를 넣고 5시간 동안 환류 교반하였다. 용매를 감압 농축하고 소금물로 씻어주고 에틸 아세테이트로 추출하여 무수 황산 나트륨으로 탈수, 여과 및 감압 농축한 뒤 에틸 아세테이트로 컬럼하여 표제 화합물인 N-(((S)-3-(4-(4-시아노페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸) 아세트아마이드 (1g, 2.83mmol, 94%)을 얻었다
1H NMR (400 MHz, chloroform-d1) δ 7.70 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 7.61 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 7.54 (dd, 1H, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.2 Hz), 7.41 (dd, 1H, J 1 = J 2 = 8.6 Hz), 7.29 (dd, 1H, J 1 = 8.4 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 6.01-5.98 (m, 1H), 4.82-4.76 (m, 1H), 4.09-4.04 (m, 1H), 3.82-3.78 (m, 1H), 3.69-3.59 (m, 2H), 2.00 (s, 3H)
[실시예 1] (S,E)-N-((3-(4-(4-(2-나이트로비닐)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S,E)-N-((3-(4-(4-(2-nitrovinyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide)(화합물 101)의 제조
상기 제조예 2에서 얻은 N-(((S)-3-(4-(4-포밀페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 100mg(0.28mmol), 암모늄아세테이트 300mg 및 나이트로메탄 1ml을 아세트산 5ml에 순차적으로 넣은 후 2시간 동안 환류 교반하였다. 반응완료 후 상온으로 냉각하여 감압 농축하고 에틸아세테이트 10ml에 녹인 후, 물 10ml로 세척하였다. 유기층을 황산 마그네슘으로 탈수, 여과 및 감압 농축하여 표제 화합물인 (S,E)-N-((3-(4-(4-(2-나이트로비닐)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드를 노란색의 고체 화합물 100mg(89%)로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, chloroform-d1) δ 8.01 (d, 1H, J = 13.6 Hz), 7.70-7.04 (m, 8H), 6.09-5.91 (m, 1H), 4.87-4.70 (m, 1H), 3.82-3.59 (m, 3H), 2.01 (s, 3H)
LCMS : C20H18FN3O5에 대해 400 (M+H+)
[실시예 2] (S,E)-메틸 3-(4-(2-플루오로-4-(5-(아세트아미도메틸)-2-옥소옥사졸리딘-3-일)페닐)페닐)아크릴레이트 ((S,E)-methyl 3-(4-(2-fluoro-4-(5-(acetamidomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl) phenyl)acrylate)(화합물 102)의 제조
나이트로메탄 5ml에 트라이메틸포스포노아세트산(trimethylphosphonoacetate) 0.05ml(0.34mmol)을 넣고 염화리튬 14mg(0.34mmol) 및 1,8-다이아자바이사이클로[5,4,0]운데-7-엔(1,8-diazabicyclo[5,4,0]undec-7-ene) 0.04ml(0.28mmol)을 넣고 상온에서 교반시킨 후 상기 혼합액에 상기 제조예 2에서 얻은 N-(((S)-3-(4-(4-포밀페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 100mg(0.28mmol)을 넣고 상온에서 2시간 동안 더 교반시켰다. 반응액을 감압농축 시킨 후 에틸아세테이트 30ml로 용해시키고 염화암모늄수용액 15ml로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨으로 탈수, 여과 및 감압 농축하여 표제 화합물인 (S,E)-메틸 3-(4'-(2'-플루오로바이페닐-4-일)아크릴레이트를 노란색의 고체 화합물 100mg(86%) 로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, chloroform-d1) δ 7.57 (d, 1H, J = 16 Hz), 7.51-6.94 (m, 7H), 6.34 (d, 1H, J = 16 Hz), 4.80-4.57 (m, 1H), 4.07-3.80 (m, 1H), 3.75-3.64 (m, 4H), 3.56-3.42 (m, 2H), 1.90 (s, 3H)
LCMS : C22H21FN2O5에 대해 413 (M+H+)
[실시예 3] (S)-N-((3-(4-(4-(N-하이드록시카바모일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드((S)-N-((3-(4-(4-(N-hydroxy carbamoyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 103)의 제조
하이드록시아민(2.4g, 34.55mmol)과 수산화칼륨(2.4g, 42.77mmol)을 각각 메탄올(30mL)에 녹인 후 수산화칼륨 용액을 하이드록시아민 용액에 첨가하고 염화칼 륨이 형성될때까지 교반시킨후 여과하였다. 여과한 여액을 상기 제조예 3에서 얻은 N-(((S)-3-(4-(4-에톡시카보닐페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 100mg(0.25mmol) 에 첨가하여 상온에서 1시간 동안 교반시켰다. 아세트산 2mL를 넣고 감압증류 한 뒤 증류수 30 ml 를 넣어 생긴 고체를 여과한 후 에틸에테르와 다이클로로 메탄으로 세척하여 표제 화합물인 (S)-N-((3-(4-(4-(N-하이드록시카바모일)페닐)-3-플루오로페닐)-2- 옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드를 20 mg(21%) 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 8.28 (s, 1H), 7.85 (d, J = 8.4 Hz), 7.69-7.57 (m, 4H), 7.44 9d, 1H, J = 8.4 Hz), 4.85-4.71 (m 1H), 4.18 (t, 1H, J = 9.2 Hz), 3.80 (t, 1H, J = 7.8 Hz), 3.50-3.40 (m, 2H), 1.84 (s, 3H)
LCMS calc. for C19H18FN3O5 (M+H+) : 387, found 388.
[실시예 4] (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-하이드록시카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-hydroxycarbam imidoyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 104)의 제조
상기 제조예 4에서 얻은 N-(((S)-3-(4-(4-시아노페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸) 아세트아마이드 500mg(1.415mmol)을 에탄올 20ml에 녹인 후 하이드록시 아민 295mg(4.245mmol)을 넣고, 탄산나트륨 225mg (2.122mmol) 및 물 5ml를 넣고 4시간 동안 환류 교반하였다. 용매를 감압 농축 한 후 에틸 아세테이트와 물의 혼합용액(v/v=1/1) 60ml을 넣고 교반을 하여 생성된 하얀색 고체를 여과하여 표제 화합물인 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-하이드록시카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드를 0.34g(63%)로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.65 (s, 1H), 8.21 (t, 1H, J = 5.8 Hz), 7.72 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.61-7.49 (m, 4H), 7.37 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 5.81 (br-s, 2H), 4.74-4.68 (m, 1H), 4.14-4.10 (m, 1H), 3.76-3.72 (m, 1H), 3.40-3.37 (m, 2H), 1.79 (s, 3H)
LCMS : C19H19FN4O4 에 대해 387 (M+H+)
[실시예 5] (S)-N-((3-(4-(4-(카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2- 옥 소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S)-N-((3-(4-(4-(carbamimidoyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide)(화합물 105)의 제조
상기 실시예 4에서 얻은 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-하이드록시카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 0.24g(0.621mmol)을 메탄올 20ml에 녹인 후 팔라듐 차콜(Pd/C) 촉매 50mg을 넣고 아세토 언하이드라이드 0.1ml를 넣고, 수소 가스를 주입하면서 출발물질인 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-하이드록시카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드을 환원 시키기 위해 밤새도록 교반하였다. 셀라이트 필터로 팔라듐을 제거하고, 용매를 감압 농축하여 표제 화합물인 (S)-N-((3-(4-(4-(카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2- 옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드를 0.14g(64%)로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.35 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 7.90 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 7.75 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 7.68-7.62 (m. 2H), 7.47 (dd, 1H, J 1 = 8.6 Hz, J 2 = 1.8 Hz), 4.80-4.76 (m, 1H), 4.21-4.16 (m, 1H), 3.83-3.79 (m, 1H), 3.46-3.43 (m, 2H), 1.85 (s, 3H)
LCMS : C19H19FN4O3 에 대해 371 (M+H+)
[실시예 6] (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-메톡시카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-methoxycarbam imidoyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide)(화합물 106)의 제조
상기 실시예 4에서 얻은 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-하이드록시카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 23mg(0.0595mmol)을 테트라하이드로퓨란 1ml로 녹인 후 포타슘 tert-부톡사이드(1M solution in THF) 0.06ml(0.0595mmol)넣고 메틸아이오다이드 (CH3I) 0.01ml(0.1785mmol)을 넣고 상온에서 3시간 동안 교반했다. 용매를 감압 농축하고 물로 씻어준 뒤 에틸 아세테이트로 추출하여 황산 나트륨으로 탈수, 여과 및 감압 농축하여 표제 화합물인 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-메톡시카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드를 15.7mg (66%)로 얻었 다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.24 (t, 1H, J = 5.8 Hz), 7.71 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.61-7.51 (m, 4H), 7.38 (dd, 1H, J 1 = 8.6Hz, J 2 = 2.2 Hz), 6.08 (s, 1H), 4.75-4.69 (m, 1H), 4.15-4.10 (m, 2H), 3.76-3.72 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 1.79 (s, 3H)
LCMS : C20H21FN4O4 에 대해 401 (M+H+)
[실시예 7] (S)-N-((3-(4-(4-(4,5-디하이드로-5,5-디메틸-1,2,4-옥사디아졸-3-일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S)-N-((3-(4-(4-(4,5-dihydro-5,5-dimethyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide)(화합물 107)의 제조
상기 실시예 4에서 얻은 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-하이드록시카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 23.8mg(0.0616mmol)을 아세톤 3ml에 녹인 후 아세트산 0.75ml를 넣고 48시간 교반했다. 용매를 감압 농축하고 메탄올 : 다이클로로메탄 = 1 : 9 비율의 용리액으로 컬럼을 하여 표제 화합물인 (S)-N-((3-(4-(4-(4,5-디하이드로-5,5-디메틸-1,2,4-옥사디아졸-3-일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드를 12.9mg (49%)로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.22 (t, 1H, J = 5.8 Hz), 7.69 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.60-7.55 (m, 4H), 7.46 (s, 1H ), 7.39 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.0 Hz), 4.75-4.69 (m, 1H), 4.15-4.10 (m, 1H), 3.76-3.72 (m, 1H), 3.40-3.37 (m, 1H), 1.79 (s, 3H), 1.40 (s, 6H)
LCMS : C22H23FN4O4 에 대해 427 (M+H+)
[실시예 8] (S)-N-((3-(4-(4-(5-옥소-1,2,4-옥사디아졸-3-일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S)-N-((3-(4-(4-(5-oxo-1,2,4-oxadiazol-3-yl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide)(화합물 108)의 제조
상기 실시예 4에서 얻은 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-하이드록시카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 23.3mg(0.0603mmol)을 피리딘 2ml로 녹인 후 메틸 클로로포르메이트 0.01ml(0.12mmol)을 넣고 3시간 동안 환류 교반했다. 용매를 감압 농축하고 메탄올 : 다이 클로로 메탄 = 1 : 9 비율의 용리액으로 컬럼을 하여 표제 화합물인 (S)-N-((3-(4-(4-(5-옥소-1,2,4-옥사디아졸-3-일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드를 8.1mg (33%)로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.22 (t, 1H, J = 5.8 Hz), 7.85 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 7.70 (d. 2H, J = 8.0 Hz), 7.63-7.57 (m, 2H), 7.40 (d. 1H, J = 8.0 Hz), 5.71 (s, 1H), 4.72 (m, 1H), 4.15-4.11 (m, 1H), 3.76-3.73 (m, 1H), 3.39 (m, 2H), 1.79 (s, 3H)
LCMS : C20H17FN4O5 에 대해 413 (M+H+)
[실시예 9] (S)-N-((3-(4-(4-(N-아미노카바모일)페닐)-3-플루오로페닐)-2- 옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 ((S)-N-((3-(4-(4-(N-aminocarbamoyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 109)의 제조
상기 실시예 3에서 하이드록시아민 대신에 하이드라진을 사용하여 실시예 3과 동일한 방법으로 (S)-N-((3-(4-(4-(N-아미노카바모일)페닐)-3-플루오로페닐)-2- 옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드(화합물 109)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.76 (s, 1H), 8.30 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 8.05-8.03 (m, 2H), 7.76-7.62 (m, 4H), 7.46 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 4.80-4.74 (m, 1H), 4.20-4.16 (m, 1H), 3.81-3.77 (m, 1H), 3.47-3.41 (m, 2H), 1.84 (s, 3H)
LCMS : C19H19F1N4O4 대해 387 (M+H+)
[실시예 10] (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-아미노카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-aminocarbam imidoyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 110)의 제조
상기 실시예 4에서 하이드록시아민 대신에 하이드라진을 사용하여 실시예 4와 동일한 방법으로 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-아미노카르밤이미도일)페닐)-3-플루오 로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 (화합물 110)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.29 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 8.05 (br s, 1H), 7.98-7.96 (m, 2H), 7.65-7.59 (m, 4H), 7.44 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 4.80-4.74 (m, 1H), 4.20-4.16 (m, 1H), 3.81-3.77 (m, 1H), 3.45-3.42 (m, 2H), 1.84 (s, 3H)
LCMS : C19H20F1N5O3 대해 386 (M+H+)
[실시예 11] (S,Z)-N-((3-(4-(4-(4,5-디하이드로-1-메틸-1H-이미다졸-2-일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S,Z)-N-((3-(4-(4-(4,5-dihydro-1-methyl-1H-imidazol-2-yl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 111)의 제조
상기 제조예 4에서 얻은 N-(((S)-3-(4-(4-시아노페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸) 아세트아마이드를 에탄올에서 염산 가스와 반응 시킨 후 감압 농축하고 에탄올에서 N-메틸에틸렌디아민과 반응시켜 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(4,5-디하이드로-1-메틸-1H-이미다졸-2-일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리 딘-5-일)메틸)아세트아마이드 (화합물 111)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.27 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 7.67-7.60 (m, 6H), 7.45 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 4.80-4.76 (m, 1H), 4.21-4.16 (m, 1H), 3.82-3.75 (m, 3H), 3.58-3.53 (m, 2H), 3.45-3.42 (m, 2H), 2.84 (s, 3H), 1.84 (s, 3H)
LCMS : C22H23F1N4O3 대해 411 (M+H+)
[실시예 12] (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-(메틸카보닐옥시)카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-(methyl carbonyloxy)carbam imidoyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide)(화합물 112)의 제조
실시예 6에서 메틸아이오다이드 (CH3I) 대신에 아세틸클로라이드를 사용하여 실시예 6과 동일한 방법으로 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N'-(메틸카보닐옥시)카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 (화합물 112)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.28 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 7.83-7.81 (m, 2H), 7.66-7.60 (m, 4H), 7.44 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 6.88 (br s, 2H), 4.80-4.74 (m, 1H), 4.20-4.16 (m, 1H), 3.81-3.77 (m, 1H), 3.45-3.43 (m, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.84 (s, 3H)
LCMS : C21H21F1N4O5 대해 429 (M+H+)
[실시예 13] (S,Z)-N-((3-(4-(4-(4,5-디하이드로-1H-이미다졸-2-일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S,Z)-N-((3-(4-(4-(4,5-dihydro-1H-imidazol-2-yl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 113)의 제조
상기 제조예 4에서 얻은 N-(((S)-3-(4-(4-시아노페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸) 아세트아마이드를 에탄올에서 염산 가스와 반응 시킨 후 감압 농축하고 에탄올에서 에틸렌디아민과 반응시켜 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(4,5-디하이드로-1H-이미다졸-2-일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세 트아마이드 (화합물 113)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.32 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 7.95 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.67-7.60 (m, 4H), 7.44 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 4.79-4.76 (m, 1H), 4.21-4.16 (m, 1H), 3.83-3.79 (m, 1H), 3.69 (s, 4H), 3.45-3.42 (m, 2H), 1.84 (s, 3H)
LCMS : C21H21F1N4O3 대해 397 (M+H+)
[실시예 14] (S,Z)-N-((3-(4-(4-(1,4,5,6-tetrahydro-pyrimidin-2-yl)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S,Z)-N-((3-(4-(4-(1,4,5,6-tetrahydro-pyrimidin-2-yl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 114)의 제조
상기 제조예 4에서 얻은 N-(((S)-3-(4-(4-시아노페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸) 아세트아마이드를 에탄올에서 염산 가스와 반응 시킨 후 감압 농축하고 에탄올에서 1,3-프로필렌디아민과 반응시켜 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(1,4,5,6-tetrahydro-pyrimidin-2-yl)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5- 일)메틸)아세트아마이드 (화합물 114)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.34 (t, 1H, J = 5.8 Hz), 7.88-7.86 (m, 2H), 7.80-7.77 (m, 2H), 7.70-7.62 (m, 2H), 7.47 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 4.80-4.76 (m, 1H), 4.21-4.16 (m, 1H), 3.84-3.80 (m, 1H), 3.52-3.42 (m, 6H), 1.99-1.97 (m, 2H), 1.84 (s, 3H)
LCMS : C22H23F1N4O3 대해 411 (M+H+)
[실시예 15] (S)-N-((3-(4-(4-(N-(디메틸아미노)카바모일)페닐)-3-플루오로페닐)-2- 옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 ((S)-N-((3-(4-(4-(N-(dimethylamino)carbamoyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 115)의 제조
상기 실시예 3에서 하이드록시아민 대신에 N,N-디메틸하이드라진을 사용하여 실시예 3과 동일한 방법으로 (S)-N-((3-(4-(4-(N-(디메틸아미노)카바모일)페닐)-3-플루오로페닐)-2- 옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 (화합물 115)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.47 (s, 1H), 8.28 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 7.87-7.85 (m, 2H), 7.69-7.60 (m, 4H), 7.44 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 4.80-4.74 (m, 1H), 4.20-4.16 (m, 1H), 3.81-3.77 (m, 1H), 3.45-3.43 (m, 2H), 2.60 (s, 6H), 1.84 (s, 3H)
LCMS : C21H23F1N4O4 대해 415 (M+H+)
[실시예 16] (S)-N-((3-(4-(4-(N-시아노카바모일)페닐)-3-플루오로페닐)-2- 옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 ((S)-N-((3-(4-(4-(N-cyanocarbamoyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 116)의 제조
상기 실시예 3에서 하이드록시아민 대신에 시아나마이드(cyanamide)을 사용하여 실시예 3과 동일한 방법으로 (S)-N-((3-(4-(4-(N-시아노카바모일)페닐)-3-플루오로페닐)-2- 옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 (화합물 116)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.23 (t, 1H, J = 5.8 Hz), 7.96-7.93 (m, 2H), 7.59-7.48 (m, 4H), 7.38 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 4.74-4.68 (m, 1H), 4.14-4.10 (m, 1H), 3.76-3.71 (m, 1H), 3.39-3.36 (m, 2H), 1.79 (s, 3H)
LCMS : C20H17F1N4O4 대해 397 (M+H+)
[실시예 17] (S,Z)-N-((3-(4-(4-(2,3-디하이드로-3,3-디메틸-1H-1,2,4-트리아졸-5-일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S,Z)-N-((3-(4-(4-(2,3-dihydro-3,3-dimethyl-1H-1,2,4-triazol-5-yl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 117)의 제조
화합물 110과 아세톤을 반응시켜 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(2,3-디하이드로-3,3-디메틸-1H-1,2,4-트리아졸-5-일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 (화합물 117)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.91-7.87 (m, 2H), 7.56-7.42 (m, 4H), 7.28-7.25 (m, 2H), 6.20 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 5.40 (br s, 2H), 4.85-4.78 (m, 1H), 4.10-4.06 (m, 1H), 3.84-3.79 (m, 1H), 3.71-3.62 (m, 2H), 2.13 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.04 (s, 3H)
LCMS : C22H24F1N5O3 대해 426 (M+H+)
[실시예 18] (S)-N-((3-(4-(4-(N-하이드록시-N-메틸카바모일)페닐)-3-플루오로페닐)-2- 옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 ((S)-N-((3-(4-(4-(N-hydroxy-N-methylcarbamoyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 118)의 제조
상기 실시예 3에서 하이드록시아민 대신에 N-메틸하이드록시아민을 사용하여 실시예 3과 동일한 방법으로 (S)-N-((3-(4-(4-(N-하이드록시-N-메틸카바모일)페닐)-3-플루오로페닐)-2- 옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 (화합물 118)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.0 (s, 1H), 8.21 (t, 1H, J = 5.8 Hz), 7.65 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.59-7.53 (m, 4H), 7.38 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 4.74-4.68 (m, 1H), 4.14-4.10 (m, 1H), 3.76-3.71 (m, 1H), 3.39-3.36 (m, 2H), 3.21 (s, 3H), 1.79 (s, 3H)
LCMS : C20H20F1N3O5 대해 402 (M+H+)
[실시예 19] (S)-N-((3-(4-(4-(N-하이드록시-N-메틸-카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S)-N-((3-(4-(4-(N-hydroxy-N-methyl-carbamimidoyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 119)의 제조
상기 실시예 4에서 하이드록시아민 대신에 N-메틸하이드록시아민을 사용하여 실시예 4와 동일한 방법으로 (S)-N-((3-(4-(4-(N-하이드록시-N-메틸-카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 (화합물 119)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.26 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 7.63-7.51 (m, 6H), 7.39 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 6.83 (br s, 2H), 4.74-4.68 (m, 1H), 4.15-4.11 (m, 1H), 3.77-3.72 (m, 1H), 3.39-3.36 (m, 2H), 3.27 (s, 3H), 1.79 (s, 3H)
LCMS : C20H21F1N4O4 대해 401 (M+H+)
[실시예 20] (S)-N-((3-(4-(4-(구아니디닐카보닐)페닐)-3-플루오로페닐)-2- 옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 ((S)-N-((3-(4-(4-(guanidinylcarbonyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide) (화합물 120)의 제조
상기 실시예 3에서 하이드록시아민 대신에 N-boc-구아니딘을 사용하여 실시예 3과 동일한 방법으로 반응시킨 후 염산으로 처리하여 (S)-N-((3-(4-(4-(구아니디닐카보닐)페닐)-3-플루오로페닐)-2- 옥소옥사졸리딘-5-닐)메틸)아세트아마이드 (화합물 120)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.40 (s, 1H), 8.51 (br s, 2H), 8.37 (br s, 2H), 8.28 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 8.07-8.04 (m, 2H), 7.83-7.81 (m, 2H), 7.71-7.63 (m, 2H), 7.47 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 4.80-4.75 (m, 1H), 4.21-4.16 (m, 1H), 3.82-3.78 (m, 1H), 3.67-3.41 (m, 2H), 1.84 (s, 3H)
LCMS : C20H20F1N5O4 대해 414 (M+H+)
[실시예 21] (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N-(아미노메틸카보닐옥시)카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S,Z)-N-((3-(4-(4-(N-(aminomethylcarbonyloxy)carbam imidoyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide)(화합물 121)의 제조
실시예 6에서 메틸아이오다이드 (CH3I) 대신에 N-boc-Glycine hydroxysuccinimide ester (boc-Gly-OSU) 을 사용하여 실시예 6과 동일한 방법으로 반응시킨 후 염산으로 처리하여 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N-(아미노메틸카보닐옥시)카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 (화합물 121)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.43 (br s, 2H), 8.31 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 8.18 (br s, 1H), 7.84-7.78 (m, 3H), 7.67-7.61 (m, 3H), 7.46 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.20 (br s, 1H), 4.81-4.77 (m, 1H), 4.21-4.16 (m, 1H), 4.11-3.98 (m, 1H), 3.82-3.79 (m, 1H), 3.67-3.41 (m, 3H), 1.85 (s, 3H)
LCMS : C21H22F1N5O5 대해 444 (M+H+)
[실시예 22] (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N-(아미노프로필카보닐옥시)카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 ((S,Z)-N-((3-(4-(4-(N-(aminopropylcarbonyloxy)carbam imidoyl)phenyl)-3-fluorophenyl)-2-oxooxazolidin-5-yl)methyl)acetamide)(화합물 122)의 제조
실시예 6에서 메틸아이오다이드 (CH3I) 대신에 boc-gamma-aminobutyric hydroxysuccinimide ester (boc-GABA-OSU)를 사용하여 실시예 6과 동일한 방법으로 반응시킨 후 염산으로 처리하여 (S,Z)-N-((3-(4-(4-(N-(아미노프로필카보닐옥시)카르밤이미도일)페닐)-3-플루오로페닐)-2-옥소옥사졸리딘-5-일)메틸)아세트아마이드 (화합물 122)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 7.88 (br s, 2H), 7.83-7.80 (m, 2H), 7.65-7.61 (m, 4H), 7.44 (dd, 1H, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 6.93 (br s, 1H), 4.81-4.77 (m, 1H), 4.21-4.16 (m, 1H), 3.82-3.79 (m, 2H), 3.45-3.42 (m, 2H), 2.89-2.83 (m, 2H), 2.62 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 1.88 (t, 2H, J = 7.2 Hz) 1.84 (s, 3H)
LCMS : C23H26F1N5O5 대해 472 (M+H+)
[
실험예
1] 시험관 내 항균활성 측정
상기 실시예 1 내지 22에서 합성한 본 발명에 따른 옥사졸리디논 유도체의 항균력을 알아보기 위하여 시험관 내 활성 검사를 하기와 같은 방법으로 수행하였다.
본 발명의 실시예 1 내지 22의 옥사졸리디논 유도체들의 시험관 내 항균 활성은 분광 측정에 의한 약물 비처리 대조군 성장과 비교하여 균의 성장을 90%까지 억제할 수 있는 항생제의 최소 농도인 90% 억제 농도(MIC90, ug/mL)를 측정하는 것으로 평가하였다. MIC90는 NCCLS 표준[참고: National Committee for Clinical Laboratory Standards.(2000) Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Test for Bacteria that Grow Aerobically-Fifth Edition:M7-A5. NCCLS,Villanova, PA]에 기초한 브로스 마이크로 희석법(Broth microdilution method)로 측정하였다.
1) 시험 균주
메티실린 감수성 스타필로코커스 아우레우스(MSSA, methicillin susceptible Staphylococcus aureus), 메티실린 내성 스타필로코커스 아우레우스(MRSA, methicillin resistant Staphylococcus aureus), 반코마이신 내성 엔테로코카이(VRE, Vancomycin resistant Enterococci), 해모필루스 인플루엔자(Haemophilus Influenzae)와 모락셀라(moraxella)등 모두 12개 균주를 사용하였으며 일부의 결과를 표 1 내지 표 3에 나타내었다.
2) 시험물질 제조법
시험물질(실시예 1 내지 22에서 합성한 본 발명에 따른 옥사졸리디논 유도체 화합물 101 내지 122)을 10240ug/mL의 농도로 DMSO에 녹인 후 2배(fold)씩 희석하여 멸균된 3차 증류수로 20배(fold) 희석하였다. 항균 실험 시 최종농도는 최고 128ug/mL에서 최저 0.0625ug/mL이었으며, 부형제로 사용된 DMSO의 농도는 최종적으로 2.5%(V/V)였다. 대조물질로는 파마시아 앤 업존의 리네졸리드(화학식 B)의 화합물을 사용하여 항균활성을 비교하여 그 결과를 하기 표 1 내지 표 3에 나타내었다.
[화학식 B]
[표 1]
[표 2]
[표 3]
상기 표 1 내지 표 3에 나타난 바와 같이, 본 발명의 옥사졸리디논 유도체는 대조물질인 리네졸리드에 비하여 훨씬 낮은 농도에서 기존 항생제에 내성을 갖는 스타필로코커스 아우레우스와 엔테로코쿠스 패칼리스 등의 그람 양성균 및 해모필루스 인플루엔재, 모락셀라 카타랄리스 등의 그람 음성균에 대해 강한 항균력을 나타내었다. 특히 리네졸리드 내성 엔테로코쿠스 패칼리스에 대해 탁월한 항균력을 보여준다.
따라서, 본 발명의 옥사졸리디논 유도체는 항생제로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있다.