KR100947643B1 - Composition comprising the distillate of rice husk as an active ingredient for preventing and treating allergy - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 왕겨초 증류액을 유효성분으로 함유하는 알러지 질환의 예방 및 치료용 약학조성물 및 건강기능식품에 관한 것이다.The present invention relates to a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of allergic diseases and health functional foods containing chaff distillate as an active ingredient.
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알러지(Allergy)란 선천적 또는 후천적으로 면역기능에 이상이 있어 무해한 항원, 즉 알레르겐(allergen)이라 불리는 외부 물질과의 접촉에 의하여 발생하는 과민한 반응을 나타내는 것으로, 이에 대한 질환으로는 과민증(anaphylaxis), 알러지성 비염(allergic rhinitis), 천식(asthma), 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 곤충 알러지, 식품 알러지, 약품 알러지 및 두드러기(urticaria)등이 있다(최병휘 외4, 알레르기, 4, pp2-48, 2001; Wuthrich B., Int. Arch. Allergy Appl. immunol ., 90, pp3-10, 1989).Allergy refers to a hypersensitivity reaction caused by contact with a harmless antigen, an allergen that is innate or acquired and impaired in immune function, such as anaphylaxis. there are, allergic rhinitis (allergic rhinitis), asthma (asthma), atopic dermatitis (atopic dermatitis), insect allergies, food allergies, drug allergies and hives (urticaria), etc. (4 choebyeonghwi others, allergies, 4, pp2-48 , 2001; Wuthrich B., Int. Arch. Allergy Appl. Immunol ., 90 , pp 3-10, 1989).
알러지 (Allergy)가 발생하는 데에는 유전학적 소인, 환경적 요인, 약리학적 이상, 면역학적 요인 등과 같이 여러 가지 인자간의 상호작용이 관여하게 되며, 이러한 생체의 면역기능 중 과민반응(hypersensitivity reaction)은 4가지의 유형으로 구분된다. 제1형 과민반응은 알레르겐(allergen)의 반복노출에 따라 과잉으로 생성된 IgE(immunoglobulin E)가 비만세포(mast cell)에 결합함으로서 일어나는 현상으로 히스타민 (histamine) 등을 함유한 과립이 유리되면서 전신성 아나필락틱 쇼크(anaphylatic shock) 또는 국소성 가려움증 및 염증을 일으키게 되는데 대표적인 질환으로 아토피 피부염(atopic dermatitis)과 천식(asthma)을 들 수 있다. Allergy is involved in the interaction of various factors, such as genetic predisposition, environmental factors, pharmacological abnormalities, immunological factors, etc. The hypersensitivity reaction of the immune function of the living body is 4 It is divided into the types of branches. Type I hypersensitivity reactions occur when IgE (immunoglobulin E), which is excessively produced by repeated exposure of allergens, binds to mast cells, resulting in the release of histamine-containing granules. Anaphylactic shock or local itching and inflammation are typical diseases, including atopic dermatitis and asthma.
제2형 과민반응은 항체가 적혈구, 백혈구, 혈소판 등의 정상세포에 결합함에 따라 Null (K) cells 등이 세포를 파괴함으로서 혈구감소증을 유발하는 현상으로 사이클로스포린(cyclosporin)에 의한 용혈성 빈혈(hemolytic anemia), 아미노피린 (aminopyrine)에 의한 백혈구 감소(leukopenia), 퀴니딘(quinidine)에 의한 혈소판 감소(thrombocytopenia) 등이 대표적이다. 제3형 과민반응은 항원-항체 복합체가 조직 중에 침착함으로서 PMN(polymorphonuclear) cells이 조직을 손상시키는 질환으로, 전신 홍반성 낭창(systemic lupus erythomatosis) 등을 예로 들 수 있다. 한편 제4형 과민반응은 지연형 과민반응으로, 감작된 T cells이 기억 세포(memory cells)로 분화하여 이후에 재감작 될 때 피부염증을 일으키는 것으로, 접촉성 피부염 (contact dermatitis)이라고 하며, 넓은 의미로는 접촉성 과민반응(contact hypersensitivity)의 범주에 속해 있다(Miller JS. et al., Curr . Opin . Immunol ., 1, pp637-642, 1989).Type II hypersensitivity reactions are caused by Null (K) cells, which destroy cells as antibodies bind to normal cells such as red blood cells, white blood cells, and platelets, resulting in thrombocytopenia. Hemolytic anemia caused by cyclosporin ), Leukocyte reduction by aminopyrine (leukopenia), platelet reduction by quinidine (thrombocytopenia), and the like. Type III hypersensitivity is a disease in which polymorphonuclear (PMN) cells damage tissues by the deposition of antigen-antibody complexes in tissues, such as systemic lupus erythomatosis. On the other hand,
접촉성 피부염은 외부 물질과의 접촉에 의해 발생하는 피부염으로 습진의 일종이다. 접촉성 피부염은 발생하는 기전에 따라 자극성 접촉 피부염과 알레르기성 접촉 피부염이 있으며, 한 가지 물질이 이러한 두 가지 반응을 동시에 일으킬 수 있다.Contact dermatitis is a dermatitis caused by contact with foreign substances and is a kind of eczema. Contact dermatitis has irritant contact dermatitis and allergic contact dermatitis depending on the mechanism in which it occurs, and one substance can cause these two reactions simultaneously.
알레르기성 접촉 피부염은‘특정’물질에 알레르기 체질을 가진(감작된) 경우에 그 원인 물질과 접촉했을 때 나타나는 증상으로, 어떤 특정 물질에 접촉하였을 때 감작된 반응이 일어나는 경우, 그 물질에 재접촉시 피부염이 발생하는 것을 알레르기성 접촉 피부염이라고 할 수 있다. 이러한 감작은 한번의 노출로도 일어나 피부염이 발생하기도 하지만, 대체로 수 개월이상 장기간 피부에 노출되어야 증상이 나타나는 것으로, 사람의 경우는 대체로 감작된 물질에 재노출 후 12시간에서 72시간 정도에 나타나는 피부반응이다. 대체로 그 원인 물질을 찾아내기가 어려운 경우가 많다.Allergic contact dermatitis is a symptom of contact with the causative agent when allergic to a 'specific' substance, and when a sensitized reaction occurs upon contact with a particular substance, re-contacting the substance. Occasional dermatitis can be referred to as allergic contact dermatitis. This sensitization may occur with a single exposure, causing dermatitis. However, symptoms usually occur after prolonged exposure to the skin for several months or more. In humans, skin appears within 12 to 72 hours after re-exposure to the sensitized substance. Reaction. It is often difficult to find the causative agent.
이러한 알레르기성 접촉 피부염을 일으킬 수 있는 물질은 생활 주변에 사용하는 물질들에 함유되어 있는 다양한 유기화합물, 금속들, 옻나무 등의 식물, 부제, 화장품, 향료, 합성수지 등 다양하다. 이 중 가장 흔하게 알레르기를 일으키는 물질은 금속이며, 이러한 금속 알레르기의 원인은 대부분 니켈로, 니켈에 의한 알레르기성 접촉 피부염은 인구의 7~10%가 가지고 있다. 또한 염색약이나 고무에 의한 알레르기성 접촉 피부염도 흔히 발생하며, 옻나무에 의한 알레르기성 접촉 피부염도 흔히 발생한다. The substances that can cause allergic contact dermatitis are various organic compounds, metals, lacquer and other plants, additives, cosmetics, fragrances, and synthetic resins contained in substances used around life. Among the most common allergens are metals, the most common cause of metal allergy is nickel, and allergic contact dermatitis caused by nickel is present in 7-10% of the population. In addition, allergic contact dermatitis caused by dyes or rubber is common, and allergic contact dermatitis caused by lacquer trees is also common.
접촉성 피부염의 또 다른 자극성 접촉 피부염은 알레르기성 접촉 피부염과는 달리 일정한 농도의 자극을 주면 모든 경우에 피부염을 일으키는 원인 물질에 의해 발생되는 피부염이다. 즉, 일정한 농도 이상의 자극제로 자극을 받으면 모든 사람에게서 발생될 수 있다. 자극제의 자극 정도가 큰 경우에는 한 두 번의 접촉으로도 화학물질에 의해 화상을 입거나 피부에 붉은 반점이 생기고 붓고 물집이 생길 수 있으며, 약한 자극 물질에 의해 반복해서 계속적으로 피부가 자극을 받을 경우에는 가렵고 피부각질이 두꺼워지게 된다. 따라서, 발생 빈도가 알레르기성 접촉 피부염에 비해 훨씬 높은 편이다.Another irritant of contact dermatitis Contact allergic dermatitis, unlike allergic contact dermatitis, is a dermatitis caused by a substance that causes dermatitis in all cases when given a certain concentration of irritation. In other words, if stimulated with a certain concentration of stimulant may occur in all people. The stimulus level of the stimulant In large cases, even one or two touches may cause chemical burns, red spots, swelling, and blisters on the skin, and iterative and itchy skin if repeatedly irritated by weak irritants. Thickening. Therefore, the incidence is much higher than that of allergic contact dermatitis.
자극성 접촉 피부염의 원인은 강산, 강알칼리, 물세제, 만성적으로 방출되는 진물, 기저귀, 직업적으로 사용하는 물질이 될 수 있다. 이러한 원인에 따른 피부발진의 유형을 보면, 강산이나 강알칼리와 접촉하여 발생하는 화학적 화상, 주부나 식당과 같은 곳에서 일하는 종업원의 경우에 물, 세제, 비누 등에 반복해서 장기간 접촉되어 흔히 생기는 주부 습진, 기저귀를 차는 어린이의 사타구니에 습기와 마찰에 의해 유발되는 기저귀 피부염, 각종 사업장에서 화학물질에 노출되어 발생하는 직업성 피부염 등이 자극성 접촉 피부염에 속한다.Causes of irritant contact dermatitis can be strong acids, strong alkalis, water detergents, chronically released oozes, diapers, and professionally used substances. The types of skin rashes caused by these causes include chemical burns caused by contact with strong acids or strong alkalis, housewives eczema, which is frequently caused by repeated long-term contact with water, detergents, soaps, etc. Irritant contact dermatitis includes diaper dermatitis caused by moisture and friction in the groin of children wearing diapers and occupational dermatitis caused by exposure to chemicals in various workplaces.
접촉성 피부염은 접촉 물질에 따라서는 일광 접촉성 피부염, 수은 접촉성 피부염 또는 금속 접촉성 피부염 등으로 구분하고 있다. Contact dermatitis is classified into sun contact dermatitis, mercury contact dermatitis, or metal contact dermatitis depending on the contact material.
식물성으로 접촉성 피부염을 일으키는 물질은 와루시 오일(망고에서 추출됨), 알로에, 키위, 샐러리, 레몬 등이 있으나 봄철에는 산행 후 옻에 접촉되어 발생하는 경우가 가장 많다. 식품에 의한 접촉성 피부염은 접촉 부위에 수포를 동반하는 홍반성 병변이 일자로 관찰되는 것이 특징이다. Plant-causing contact dermatitis includes warsi oil (extracted from mango), aloe, kiwi, celery and lemon, but it is most often caused by contact with lacquer after hiking in spring. Contact dermatitis caused by food is characterized by erythematous lesions accompanied by blisters at the contact site.
금속 접촉성 피부염은 시계나 장식품 등의 도금이 땀에 의해 용출되어 발생하는 경우가 많으며 섬유 염색제의 재료로 사용되는 금속이나 고무의 가류에 사용되는 금속 또는 시멘트에 혼합되는 금속인 니켈크롬 등과 해독제로 사용되는 유기 수은, 태메오살, 가죽 가동에 사용되는 중크롬산 칼리 등이 포함된다. Metal contact dermatitis is often caused by the plating of watches, ornaments, etc. by elution by sweat, and is used as an antidote such as nickel chromium, a metal mixed with metal used for vulcanization of metal or rubber used as a material for textile dyes, or rubber. Organic mercury used, tameosal, kali dichromate used in leather operation, and the like.
DNCB(Dinitrochlorobenzene)는 지연형 접촉성 피부염을 일으키는 대표적인 물질로 DNCB의 반복 노출시 CD4+ 및 CD8+ T 세포 매개성 염증세포의 침윤에 의한 피부 부종과 피부 조직의 비후가 초래되는 것으로 알려져 있으며, DNCB 유발 접촉성 피부염 동물모델은 현재 가장 널리 이용되고 있는 동물 모델 중 하나이다 (Nakagawa et al., J. Invest . Dermatol ., 57, pp369-377, 1971; Oka et al., Dermatologica., 172, pp12-17, 1986; Friedmann, Adv . Dermatol ., 5, pp175-195, 1990; Upadhye and Maibach, Contact Dermatitis, 27, pp281-286, 1992; Bronaugh et al., Food Chem . Toxicol ., 32, pp113-117, 1994; Kolde, Exp . Dermatol ., 3, pp269-275, 1994). 조직학적으로 현저한 염증세포 침윤을 동반한 피부 조직의 비후가 관찰되는 것으로 알려져 있다(Jet al., Vet . Pathol ., 36, pp42-50, 1999).DNCB (Dinitrochlorobenzene) is a representative substance that causes delayed contact dermatitis. It is known that repeated exposure of DNCB causes skin swelling and thickening of skin tissue due to infiltration of CD4 + and CD8 + T cell mediated inflammatory cells. Sexual dermatitis animal models are currently one of the most widely used animal models (Nakagawa et al., J. Invest . Dermatol . , 57, pp 369-377, 1971; Oka et al., Dermatologica ., 172, pp 12-17, 1986; Friedmann, Adv . Dermatol ., 5, pp 175-195, 1990; Upadhye and Maibach, Contact Dermatitis , 27, pp 281-286, 1992; Bronaugh et al., Food Chem . Toxicol ., 32, pp 113-117, 1994; Kolde, Exp . Dermatol ., 3 , pp 269-275, 1994). Thickening of skin tissue with histologically significant inflammatory cell infiltration is known (J et al., Vet . Pathol ., 36 , pp42-50, 1999).
알레르겐이 IgE에 의해 인식되면 랑겔한스세포(Langerhans cell) 표면 IgE부착 Fc수용체에 유착되어 T림프구에 항원을 전달함으로써 T림프구가 활성화되게 된다. 이때 자가펩타이드나 포도상구균(staphylococcus aureus)의 초항원(superantigen)에 의해서도 T림프구가 활성화될 수 있다. 다른 피부질환과 달리 아토피 피부염의 피부병변에 침윤되는 염증세포는 주로 Th2세포로서 IL-4, IL-5 등의 사이토카인을 생성하여 혈중 IgE의 상승을 촉진하고 호산구의 증가를 유도하며, cAMP 포스포디에스터라아제(phosphodiesterase)가 상승되어 있는 아토피 피부염의 비정상적인 단구에 의해 프로스타글란딘(PGE)의 생성이 증가하게 되고 이로 인해 Th1 림프구의 침윤이 억제된다. 또한 Th1 림프구는 아토피 피부염에서 쉽게 활성화되는 비장세포로부터 유리된 TNF(tumor necrosis factor)에 의해서도 억제된다. 결국 아토피 피부염에서 Th1 증식을 억제하고, 세포매개성 면역의 저하를 초래한다. 각종 사이토카인(cytokines)은 혈관 내피세포를 활성화하여 여러 세포유착분자의 발현을 유도하거나 증가시켜 기억 T림프구의 복귀를 촉진시킴으로서 습진성 병변을 유발한다(최병휘 외4, 알레르기, 4, pp2-48, 2001). When allergens are recognized by IgE, they are adhered to Langerhans cell surface IgE-attached Fc receptors, and T lymphocytes are activated by delivering antigens to T lymphocytes. At this time, auto peptide or staphylococcus T lymphocytes can also be activated by superantigens of aureus ). Unlike other skin diseases, inflammatory cells infiltrating skin lesions of atopic dermatitis are mainly Th2 cells, which produce cytokines such as IL-4 and IL-5, which promote blood IgE elevation and eosinophils, and cAMP force Abnormal monocytes of atopic dermatitis with elevated phosphodiesterase increase the production of prostaglandins (PGE), thereby inhibiting infiltration of Th1 lymphocytes. Th1 lymphocytes are also inhibited by the tumor necrosis factor (TNF) released from splenocytes that are readily activated in atopic dermatitis. Eventually it inhibits Th1 proliferation in atopic dermatitis and leads to a decrease in cell mediated immunity. Cytokines induce ectopic lesions by activating vascular endothelial cells to induce or increase the expression of various cell adhesion molecules, thereby facilitating the return of memory T lymphocytes (CHO Byung-Hwi et al. 4, allergy, 4 , pp2-48). , 2001).
최근 도시인들은 생활환경이 변화함에 따라 집안의 카펫에서 서식하는 진드기, 습도 저하에 따라 증가하는 먼지, 애완견의 털, 꽃가루, 새로운 과일 및 음식 등 다양한 알레르겐(allergens)에 노출될 기회가 점차 커지고 있다. 이중 제1형 과민반응인 천식과 아토피 피부염은 최근 크게 증가하여 사회적인 문제로 대두됨에 따라 많은 연구자들이 천연물로부터 면역과민반응을 완화시켜 줄 수 있는 물질의 탐색에 관심이 집중 되고 있다. In recent years, urban people are increasingly exposed to various allergens, such as mites living on carpets in their homes, dust that increases with humidity, pet hair, pollen, new fruits and food. As a result, asthma and atopic dermatitis,
또한, 천연물로부터의 새로운 기능성 물질의 탐색은 기능성식품 및 기능성화장품의 유효성 및 안전성 평가기준과 허가절차에 대한 식품의약품안전청의 고시가 제정되면서 가속화되고 있으며(한국보건공정서연구회, 2004년 고시), 이러한 사회적 현상을 반영하여 최근 고도의 산업화 사회에서 천연물의 과학화를 통한 보다 효과적인 신약의 개발은 국가경쟁력 확보에 중요한 요인으로 인식됨에 따라 다양한 천연물 유래 생약이 기존의 질병치료나 보약으로써의 한방처방에서 벗어나 각종 식품 감미료, 향료, 건강기능성 식품, 기능성 화장품, 천연 살충제 등의 원료로 다양하게 개발되고 있으나 아직 체계적인 연구가 미흡한 실정이다.In addition, the exploration of new functional substances from natural products is accelerating with the establishment of the Korea Food and Drug Administration's notification on the evaluation of the efficacy and safety of functional foods and functional cosmetics and the approval procedure (Korean Health Procedures Research Association, 2004). Reflecting these social phenomena, the development of more effective new drugs through the scientification of natural products in a highly industrialized society has been recognized as an important factor in securing national competitiveness. Various food sweeteners, flavorings, functional foods, functional cosmetics, natural pesticides, etc. have been developed in various ways, but the systematic research is still insufficient.
왕겨는 벼의 껍질로, 쌀 가공과정에서 생겨나는 가장 많은 양의 부산물로서 벼 중량의 20%를 차지한다. 국내 왕겨 생산량은 ‘07년 벼 총생산량인 5,961,693톤을 기준할 때, 약 20% 정도인 연간 약 120만톤의 왕겨가 생산이 되고 있다. 종래에는 소규모 미곡가공공장에서 생산되어 활용방법에 제한을 받았으나 현재는 대규모 도정공장이 2010년까지 설치될 계획으로 미곡 부산물 왕겨는 미곡 주산단지를 중심으로 집중적으로 생산이 된다. 이러한 왕겨의 효율적인 활용방안은 매우 중요한 부분이다. Rice husks are the husks of rice, the largest by-product of rice processing, accounting for 20% of the weight of rice. Domestic rice husk production is estimated at 5,961,693 tons of rice in 2007, and about 1.2 million tons of rice husk are produced annually, which is about 20%. Conventionally, it was produced in a small rice mill processing plant and limited in its utilization method, but now a large-scale milling plant is planned to be installed by 2010, and rice grain by-product chaff will be concentrated in the rice mill juksan complex. The efficient use of this rice hull is very important.
왕겨는 에너지원으로서 적당한 특성을 가지고 있지만, 현재 폐기물로 분류되 고 있다. 왕겨는 내외피가 규소로 치밀하게 피복되어 있으므로 부식이나 소화 효율이 낮기 때문에 퇴비나 가축의 사료로도 부적합한 것으로 알려져 있다. 이러한 왕겨의 주요 구성성분은 가용 탄수화물이 27~30%, 조섬유질 35~46%, 조회분 13~21%, 조단백 2~3% 그리고 조지방 0.3~0.8% 들어 있으며, 조회분의 주성분은 규소로 알려져 있다(강대갑, 농산물활용 신기능 천연물 소재탐색 및 이용기술, 벼의 규소체를 이용한 세라믹 원료 및 공업재료 개발, 한국원자력연구소).Chaff has the proper characteristics as an energy source, but is currently classified as a waste. Chaff is known to be inadequate for compost and livestock feed due to its low internal corrosion and low digestion efficiency because it is heavily coated with silicon. The main components of these rice hulls are 27-30% of soluble carbohydrates, 35-46% crude fiber, 13-21% crude ash, 2-3% crude protein, and 0.3-0.8% crude fat. It is known (Kang Dae Gap, new functional natural material search and utilization technology for agricultural products, development of ceramic raw materials and industrial materials using silicon bodies of rice, Korea Atomic Energy Research Institute).
상기와 같은 특징을 지닌 왕겨는 현대에 들어서면서 왕겨는 쓰임새도 없고 마땅한 처리방법도 없어 폐기물로 분류되어 있어, 왕겨의 효율적인 이용 및 폐기물을 이용하여 가치 있는 것으로 만드는 것이 중대한 일 중의 하나이다.As chaff has such characteristics, it is classified as a waste because it has no use and proper treatment in modern times, and it is one of the important things to make the chaff efficient and use the waste to make it valuable.
이에 본 발명자들은 이 왕겨를 재료로 하여 왕겨초 증류액을 제조한 후에 이 왕겨초 증류액이 DNCB에 의해 유발되는 접촉성 피부염 알러지 질환 동물 모델을 이용하여 환부조직에서 알레르기 반응의 주된 항체인 IgE의 생성을 억제하고, 진피, 상피 및 피부의 전체 두께를 감소시킴을 확인함으로서 항알러지 효과를 확인하여 본 발명을 완성하였다.Therefore, the present inventors prepared the chaff herb distillate with this chaff as a material, and then, using this animal model of contact dermatitis allergic disease caused by DNCB, the main antibody of allergic reaction of IgE in affected tissues The present invention was completed by confirming the anti-allergic effect by inhibiting production and confirming that the total thickness of the dermis, epithelium and skin is reduced.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 왕겨초 증류액을 유효성분으로 함유하는 알러지 질환의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of allergic diseases containing chaff herb distillate as an active ingredient.
또한, 본 발명은 왕겨초 증류액을 유효성분으로 함유하는 알러지 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.The present invention also provides a health functional food for the prevention and improvement of allergic diseases containing chaff distillate as an active ingredient.
본원에서 정의되는 왕겨초 증류액은 탄화기(DCH-600, 대원GSI)를 사용하여 제조한 것으로, 왕겨를 200℃ ~ 800℃, 바람직하게는 300℃ ~ 600℃에서, 10분 내지 200분, 바람직하게는 40분 내지 120분 동안 탄화 처리하는 제 1단계; 상기 탄화 처리 중에 배출되는 연기를 응축시켜 조왕겨초 증류액을 얻는 제 2단계; 상기 제 2단계의 조왕겨초 증류액을 감압하여 20℃ ~ 90℃, 바람직하게는 40℃ ~ 70℃의 저온에서 증류하는 제 3단계를 포함하는 공정을 통하여 본 발명의 왕겨초 증류액을 수득할 수 있다.Rice husk distillate, as defined herein, is prepared using a carbonizer (DCH-600, Daewon GSI), and the chaff is 200 to 800 ° C, preferably 300 to 600 ° C, for 10 minutes to 200 minutes, Preferably, the first step of carbonizing for 40 minutes to 120 minutes; A second step of condensing the smoke discharged during the carbonization process to obtain crude chaff herb distillate; Obtaining the chaff distillate of the present invention through a process comprising a third step of distilling the crude crude chaff distillate of the second step at a low temperature of 20 ℃ ~ 90 ℃, preferably 40 ℃ ~ 70 ℃ can do.
본원에서 정의되는 왕겨초 증류액의 유기물질 조성은 보통 페놀성분 분획이 20 ~ 80%, 바람직하게는 40 ~ 70%, 산성성분 분획이 5 ~ 45%, 바람직하게는 15 ~ 35%, 염기성 분획이 0.01 ~ 20%, 바람직하게는 0.5 ~ 10%, 중성성분 분획이 1 ~ 40%, 바람직하게는 10 ~ 30%의 범위로서, 상기의 유기물질 조성을 포함함을 특징으로 한다.The organic composition of the chaff distillate as defined herein is usually 20 to 80%, preferably 40 to 70%,
본원에서 정의되는 알러지 질환은 과민증, 알러지성 비염, 천식, 알러지성 결막염, 알러지성 피부염, 아토피성 피부염, 접촉성 피부염, 두드러기, 곤충 알러지, 식품알러지 또는 약품 알러지, 바람직하게는 알러지성 비염, 천식, 알러지성 피부염, 아토피성 피부염, 접촉성 피부염, 두드러기, 식품 알러지 또는 약품 알러지, 보다 바람직하게는 아토피성 피부염 또는 접촉성 피부염을 포함한다. Allergic diseases as defined herein include hypersensitivity, allergic rhinitis, asthma, allergic conjunctivitis, allergic dermatitis, atopic dermatitis, contact dermatitis, urticaria, insect allergy, food allergy or drug allergy, preferably allergic rhinitis, asthma , Allergic dermatitis, atopic dermatitis, contact dermatitis, urticaria, food allergy or drug allergy, more preferably atopic dermatitis or contact dermatitis.
이하 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명의 왕겨초 증류액은 하기와 같이 제조될 수 있다. Rice husk distillate of the present invention can be prepared as follows.
왕겨초 증류액은 탄화기(DCH-600, 대원GSI)를 사용하여 제조한 것으로, 왕겨 를 200℃ ~ 800℃, 바람직하게는 300℃ ~ 600℃에서, 10분 내지 200분, 바람직하게는 40분 내지 120분 동안 탄화 처리하는 제 1단계; 상기 탄화 처리 중에 배출되는 연기를 응축시켜 조왕겨초 증류액을 얻는 제 2단계; 상기 제 2단계의 조왕겨초 증류액을 감압하여 20℃ ~ 90℃, 바람직하게는 40℃ ~ 70℃의 저온에서 증류하는 제 3단계를 포함하는 공정을 통하여 본 발명의 왕겨초 증류액을 수득할 수 있다.The rice hull distillate was prepared using a carbonizer (DCH-600, Daewon GSI), and the rice husk was 200 to 800 ° C, preferably 300 to 600 ° C, 10 to 200 minutes, preferably 40 A first step of carbonizing for minutes to 120 minutes; A second step of condensing the smoke discharged during the carbonization process to obtain crude chaff herb distillate; Obtaining the chaff distillate of the present invention through a process comprising a third step of distilling the crude crude chaff distillate of the second step at a low temperature of 20 ℃ ~ 90 ℃, preferably 40 ℃ ~ 70 ℃ can do.
본 발명은 상기의 제조방법으로 얻어진 왕겨초 증류액을 유효성분으로 함유하는 알러지 질환의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.The present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of allergic diseases containing the chaff herb distillate obtained by the above production method as an active ingredient.
또한, 본 발명은 상기의 제조방법으로 얻어진 왕겨초 증류액을 유효성분으로 함유하는 알러지 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a health functional food for the prevention and improvement of allergic diseases containing chaff herb distillate obtained by the above production method as an active ingredient.
본 발명의 왕겨초 증류액을 함유하는 알러지 질환의 예방 및 치료를 위한 약학조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 왕겨초 증류액을 0.1 내지 50 중량% 포함한다.The pharmaceutical composition for the prevention and treatment of allergic diseases containing chaff herb distillate of the present invention comprises 0.1 to 50% by weight of the chaff herb distillate based on the total weight of the composition.
그러나 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니고, 환자의 상태 및 질환의 종류 및 진행 정도에 따라 변할 수 있다.However, the composition as described above is not necessarily limited thereto, and may vary according to the condition of the patient and the type and extent of the disease.
본 발명의 왕겨초 증류액을 함유하는 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition containing rice hull distillate of the present invention may further comprise suitable carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of pharmaceutical compositions.
본 발명에 따른 왕겨초 증류액을 함유하는 약학조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명의 왕겨초 증류액을 함유하는 조성물에 함유될 수 있는 담체, 부형제 및 희석 제로는 락토오즈(lactose), 덱스트로즈, 수크로스(sucrose), 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.Pharmaceutical compositions containing rice hull distillate according to the present invention, powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, oral formulations, external preparations, suppositories, and sterile injectable solutions, respectively, according to a conventional method. Formulated in the form of can be used. The carriers, excipients and diluents that may be included in the composition containing the chaff distillate of the present invention include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch , Acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil Can be mentioned. When formulated, diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrating agents, and surfactants are usually used. Solid form preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, which form at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose or lactose in the compound. Mixed with gelatin. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc are also used. Oral liquid preparations include suspensions, solvents, emulsions, and syrups, and may include various excipients, such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives, in addition to commonly used simple diluents such as water and liquid paraffin. . Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations, suppositories. As the non-aqueous solvent and suspending agent, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate and the like can be used. As the base of the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogelatin and the like can be used.
본 발명의 왕겨초 증류액의 사용량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라 질 수 있으나, 0.1 내지 100mg/kg으로, 바람직하게는 1 내지 10mg/kg을 일일 1회 내지 수회 투여할 수 있다. 또한 그 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. The amount of chaff distillate of the present invention may vary depending on the age, sex, and weight of the patient, but may be 0.1 to 100 mg / kg, preferably 1 to 10 mg / kg once or several times daily. The dosage may also be increased or decreased depending on the route of administration, the severity of the disease, sex, weight, age, and the like. Therefore, the above dosage does not limit the scope of the present invention in any aspect.
상기 약학조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내 주사에 의해 투여될 수 있다. The pharmaceutical composition may be administered to various mammals such as mice, mice, livestock, humans, and the like. All modes of administration can be expected, for example, by oral, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous, intrauterine dural or cerebrovascular injections.
본 발명은 왕겨초 증류액을 유효성분으로 함유하는 알러지 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다. 이를 첨가할 수 있는 식품으로는, 각종 식품류, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽제, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성 식품류 등이 있다.The present invention provides a dietary supplement for the prevention and improvement of allergic diseases containing chaff distillate as an active ingredient. Foods to which it may be added include various foods, powders, granules, tablets, capsules, syrups, beverages, gums, teas, vitamin complexes, and health functional foods.
본 발명의 상기 왕겨초 증류액 자체는 독성 및 부작용은 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용 시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다. The chaff distillate of the present invention is a drug that can be used with confidence even when taken for a long time for the purpose of prevention because there is little toxicity and side effects.
본 발명의 왕겨초 증류액은 알러지 질환의 예방 및 개선을 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 왕겨초 증류액의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 기능성 음료 조성물은 100㎖를 기준으로 0.02 내지 10g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다. Rice husk distillate of the present invention may be added to food or beverage for the purpose of preventing and improving allergic diseases. At this time, the amount of rice hull distillate in the food or beverage may be added to 0.01 to 15% by weight of the total food weight, the health functional beverage composition is based on 100ml in a ratio of 0.02 to 10g, preferably 0.3 to 1g Can be added.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 왕겨초 증류액을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며, 통상의 음 료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100㎖당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.The health functional beverage composition of the present invention is not particularly limited to other ingredients except for containing the chaff distillate as an essential ingredient in the indicated ratios, and various flavors or natural carbohydrates as additional ingredients as in the usual beverages. It may contain. Examples of the above-mentioned natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose and the like; And conventional sugars such as polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents other than those mentioned above, natural flavoring agents (tauumatin, stevia extract (for example, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used. The proportion of said natural carbohydrates is generally about 1-20 g, preferably about 5-12 g per 100 ml of the composition of the present invention.
상기 외에 본 발명의 왕겨초 증류액은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 추출물들은 천연 과일 쥬스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하지는 않지만 본 발명의 왕겨초 증류액 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the above, chaff distillate of the present invention is a variety of nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors such as synthetic and natural flavors, coloring and neutralizing agents (such as cheese, chocolate), pectic acid and salts thereof, Alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents used in carbonated beverages, and the like. In addition, the extracts of the present invention may contain pulp for the production of natural fruit juices and vegetable drinks. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not so critical but is generally selected from the range of 0 to about 20 parts by weight per 100 parts by weight of rice hull distillate of the present invention.
상기에서 설명한 바와 같이, 왕겨초 증류액은 DNCB에 의해 유발된 접촉성 피부염 알러지 질환 동물모델의 환부조직에서 알러지 반응의 주된 항체인 IgE의 생성 을 억제하는 효과를 보이고, DNCB에 의해 증가된 상피 및 진피, 피부 전체 두께에 대한 감소 효과를 나타내는 바, 알러지 질환의 예방 및 치료용 약학조성물 및 건강기능식품으로서 유용하게 이용될 수 있다.As described above, rice hull distillate has the effect of inhibiting the production of IgE, a major antibody of allergic reactions, in the affected tissues of DNCB-induced contact dermatitis allergic disease animal models, As it shows a reducing effect on the dermis and the overall thickness of the skin, it can be usefully used as a pharmaceutical composition and health functional food for the prevention and treatment of allergic diseases.
이하, 본 발명을 하기의 참고예, 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail by the following reference examples, examples and experimental examples.
단, 하기 실시예, 참고예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 이에 의해 한정되는 것은 아니다.However, the following Examples, Reference Examples and Experimental Examples are merely illustrative of the present invention, but the content of the present invention is not limited thereto.
실시예Example 1. One. 왕겨초Chaff 증류액의 제조 Preparation of Distillate
선산 미곡종합처리장(RPC)으로부터 제공받은 왕겨 400kg을 탄화기(DCH-600, 대원GSI)를 사용하여 직화식 탄화법에 의하여 왕겨초 증류액을 수득한 것으로, 왕겨를 300℃ ~ 600℃에서, 40분 내지 120분 동안 탄화 처리하는 제 1단계; 상기 탄화처리 중에 배출되는 연기를 응축시켜 조왕겨초 증류액을 얻는 제 2단계; 상기 제 2단계의 조왕겨초 증류액(80kg,20%)을 정제를 위해 감압하여 40℃ ~ 70℃의 저온에서 정제하는 제 3단계를 포함하는 공정을 통하여 본 발명의 왕겨초 증류액(이하, “DWC"라 함)을 50kg을 수득하였다. The rice husk distillate was obtained by direct carbonization using 400kg of rice husk provided by Sunsan Rice Grain Treatment Plant (RPC). A first step of carbonizing for minutes to 120 minutes; A second step of condensing the smoke discharged during the carbonization process to obtain crude bran herb distillate; The crude chaff herb distillate (80kg, 20%) of the second step under reduced pressure for purification, the chaff herb distillate of the present invention through a process comprising a third step of purifying at a low temperature of 40 ℃ ~ 70 ℃ (hereinafter 50 kg) was obtained.
실시예Example 2. 2. 왕겨초Chaff 증류액( Distillate ( DWCDWC )의 시료 제조(1)Sample preparation of (1)
왕겨초 증류액(DWC)을 식염수를 사용하여 1ml/9ml로 1/10 농도로 희석하여 만든 시료를 “DWC-1”이라 명명하고, 1ml/49ml로 1/50 농도로 희석하여 만든 시료를 “DWC-2”라 명명하고, 1ml/99ml로 1/100 농도로 희석하여 만든 시료를 “DWC-3”이라 명명하여 실험에 사용하였다. 대조군은 식염수를 사용하였다. A sample prepared by diluting rice husk distillate (DWC) to 1/10 concentration with 1 ml / 9 ml using saline solution is named “DWC-1” and diluted to 1/50 concentration with 1 ml / 49 ml. DWC-2 ”, and the sample made by diluting 1/100 concentration to 1ml / 99ml was named" DWC-3 "was used in the experiment. Saline was used as a control.
실시예Example 3. 3. 왕겨초Chaff 증류액( Distillate ( DWCDWC )의 시료 제조(2); Sample preparation (2); 제조예(CR)의Of manufacturing example (CR) 제조 Produce
왕겨초 증류액(DWC)을 포함하는 제품크림을 제조하여 실험에 사용하였다. 왕겨초 증류액을 함유하지 않은 크림인 제조예-1(이하 "CR-1"이라 명명함)과 왕겨초 증류액을 함유한 크림인 제조예-2(이하 "CR-2"이라 명명함)를 사용하여 실험하였다.Product cream containing rice hull distillate (DWC) was prepared and used in the experiment. Preparation Example 1 (hereinafter referred to as "CR-1") which is a cream containing no chaff distillate and Preparation Example-2 (hereinafter referred to as "CR-2") as a cream containing chaff distillate Experiment using.
3-1. 3-1. CRCR -1의 제조Manufacture of -1
3-2. 3-2. CRCR -2의 제조Manufacture of -2
실시예Example 4. 4. 왕겨초Chaff 증류액의 구성물질 분석결과 Analysis result of constituents in distillate
왕겨초 증류액은 왕겨를 탄화하여 그 증류액을 수득한 것으로, 이미 목판을 탄화하여 만든 시중 목초액과 동일한 원리로 만들어진 것이다.The rice husk distillate is obtained by carbonizing rice husk and obtaining the distillate. The rice husk distillate is made on the same principle as commercial wood vinegar prepared by carbonizing wood board.
따라서, 상기 실시예 1에서 얻은 왕겨초 증류액(DWC) 및 시중 목초액의 성분을 분석하기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.Therefore, in order to analyze the components of the rice husk distillate (DWC) and commercial wood vinegar obtained in Example 1, the following experiment was performed.
각 왕겨초 증류액(DWC)과 시중 목초액의 물질 분석은 GC (HP 5890 Ⅱ,Hewlett-Packard(Calo Alto California U.S.A, 칼럼 (5%-Phenyl) Methylpolysiloxane 코팅, 한국식품연구원) 분석법을 이용하여 실시되었다. Material analysis of each rice husk distillate (DWC) and commercial wood vinegar was carried out using GC (HP 5890 II, Hewlett-Packard (Calo Alto California USA, column (5% -Phenyl) Methylpolysiloxane coating, Korea Food Research Institute) .
실험결과, 하기 표에서 나타내는 바와 같이, 왕겨초 증류액과 시판 목초액에서 확인된 성분들의 함량을 비교분석한 결과, Experimental results, as shown in the following table, the comparative analysis of the contents of the components identified in the rice husk distillate and commercial wood vinegar,
산류로서 11종의 성분이 확인되었으며 양적으로는 아세트 산 (acetic acid), 프로피온 산(propionic acid) 및 이소 부틸르 산(iso-butyric acid)와 같은 휘발성 유기산이 많이 검출되었다. 휘발성 유기산은 목초액 pH에 직접적으로 영향을 미치는 성분들로서 이들의 함량이나 조성비는 시료에 따라 많은 차이를 나타내는데, 시판 목초액의 경우 아세트 산(acetic acid)의 함량이 프로피온 산(propionic acid)의 함량보다 높았으나, 왕겨초 증류액의 경우는 아세트 산(acetic acid)보다는 프로피온 산(propionic acid)의 함량이 높은 것을 특징으로 하였다. 이러한 차이는 사용 재료의 차이에 기인하는 것으로 판단된다. Eleven components were identified as acids, and volatile organic acids such as acetic acid, propionic acid and isobutyric acid were detected. Volatile organic acids are components that directly affect the pH of wood vinegar, and their contents and composition ratios vary greatly from sample to sample. In commercial wood vinegar, acetic acid content was higher than propionic acid content. However, rice hull distillate was characterized in that the content of propionic acid (propionic acid) higher than acetic acid (acetic acid). This difference is believed to be due to the difference in the materials used.
알데히드 및 케톤류로서는 12개 성분이 확인되었다. 알데히드 및 케톤류 역시 전반적으로 시판 목초액보다는 왕겨초 증류액에서 많이 함유되어 있었으며, 왕겨초 증류액에서는 간접탄화식보다 직화식 탄화과정에서 얻어지는 왕겨초 증류액에서 더 많이 함유되어 있었다.Twelve components were identified as aldehydes and ketones. Aldehydes and ketones were also generally contained in rice husk distillate rather than commercial wood vinegar, and rice hull distillate contained more of chaff herb obtained from direct carbonization than indirect carbonization.
퓨란 및 파이란류로서는 13개 성분이 확인되었으며, 이 성분들은 당류나 셀룰로즈(cellulose)를 고온에서 가열할 때 생성되는 대표적인 성분들로서 구수한 냄새와 당취 및 카라멜 냄새를 지니고 있어 식품 첨가제로서도 널리 사용되고 있는 성분들이다.13 kinds of furan and pyran are identified, and these are the components that are produced when heating saccharides or cellulose at high temperature, and they are widely used as food additives because they have a sweet smell, sugar and caramel smell. .
페놀류는 11개 성분이 확인되었으며, 페놀류 역시 시판 목초액보다는 왕겨초 증류액에서 전반적으로 함량이 높았으며, 간접탄화식보다 직화식 탄화에 의해 얻어진 증류액에서 함량이 높았다.Phenols were identified as 11 components, and phenols were generally higher in rice husk distillate than in commercial wood vinegar, and higher in distillates obtained by direct carbonization than indirect carbonization.
따라서 실험은 왕겨를 직화식 탄화에 의하여 얻어진 왕겨초 증류액을 이용하여 진행되었다.Therefore, the experiment was carried out using the rice husk distillate obtained by direct charcoal chaff.
이 분석 결과로서, 왕겨를 탄화하여 제조한 왕겨초 증류액과 일반 목재를 탄화하여 제조한 목초액을 비교해보면, 그 재료가 다를 뿐 아니라, 유사한 구성성분일지라도 각 성분들의 함량은 차이를 보임을 확인할 수 있었다.As a result of the analysis, comparing the rice husk distillate prepared by carbonizing rice husk with the wood vinegar prepared by carbonizing plain wood, the contents of each component were different even though the ingredients were similar. there was.
참고예Reference Example 1. 실험동물 준비 1. Preparation of experimental animals
6주령 된 NC/Nga 마우스와 ICR 마우스를 중앙실험동물(주)에서 공급받아 약 1주간 실험실 순화과정을 거친 후 사용하였다. 마우스용 케이지 (220 x 200 x 145 mm)에 2마리씩 수용하였다. 동물실험실의 환경은 온도 21~25℃, 상대습도 45~65%, 환기횟수 12 회/시간, 조명주기 12시간, 조도 150 - 300 lux로 조절되었다. 실험동물용 pellet형 고형사료인 Purina Rat Chow를 Nestle Purina PetCare Korea Ltd. (Seoul, Korea)로부터 공급받아 급여하였으며, 음수는 멸균정제수를 자유롭게 섭취하도록 하였다. Six-week-old NC / Nga mice and ICR mice were supplied from the Central Experimental Animal Co., Ltd. and used after undergoing laboratory purification for about one week. Two mice were housed in a cage for mice (220 × 200 × 145 mm). The environment of the animal laboratory was controlled at a temperature of 21-25 ° C., a relative humidity of 45-65%, a frequency of 12 ventilations / hour, a lighting cycle of 12 hours, and an illuminance of 150-300 lux. Purina Rat Chow, a pellet-type solid feed for laboratory animals, was introduced by Nestle Purina PetCare Korea Ltd. It was supplied from (Seoul, Korea) and fed, and the negative water was allowed to take sterile purified water freely.
참고예Reference Example 2. 2. 왕겨초Chaff 증류액 시료 처치 및 검체 처리 Distillate Sample Treatment and Sample Treatment
2.1 2.1 왕겨초Chaff 증류액 시료( Distillate Sample DWCDWC -1, -One, DWCDWC -2, -2, DWCDWC -3) 처치-3) kill
상기 실시예 2의 방법으로 수득한 왕겨초 증류액 시료(DWC-1, DWC-2, DWC-3)에 의한 알러지 반응 억제효과를 측정하기 위해서, 문헌에 따라 하기와 같이 실험을 수행하였다(Pokharel et al., Evid Based Complement Alternat Med ., 5, pp173-180, 2008).In order to measure the allergic reaction inhibitory effect by the chaff herb distillate samples (DWC-1, DWC-2, DWC-3) obtained by the method of Example 2, the experiment was carried out as follows according to the literature (Pokharel et al., Evid Based Complement Alternat Med ., 5 , pp 173-180, 2008).
참고예 1의 방법으로 사육한 NC/Nga 마우스와 대조군인 ICR 마우스를 제모제(민감성피부용 veet)를 충분히 사용하여 등 부위를 넓게 제모하고 24시간 후 올리브 오일과 아세톤을 3:1로 배합한 용액에 1%의 농도로 조제한 DNCB 150 ul를 취하여 4일 동안 매일 동일한 시간에 도포하여 피부염을 유발하였다. 이후 DNCB는 0.2%로 농도를 조정하여 150 ul 씩 취하여, 왕겨초 증류액 혹은 식염수(대조군)와 동시에 10주 동안 격일로 동일한 시간에 도포하였다. 10주 후, 실험 24시간 전부터 절식시키고 가벼운 에테르 마취상태에서 복개 후 심장에서 혈액을 채취하고, 간과 피부조직을 적출하여 중량을 측정한 후 냉동 보관하였다. 적출한 피부조직은 중량의 20배의 용액(PBS + 0.1% Tween20)을 넣고 2분 동안 호모게나이저(homogenizer)를 사용한 후 원심분리(12,000g, 10분)하여 상등액을 얻었다. 채취한 혈액은 원심분리(3,000g, 20분)하여 혈청을 얻었다. NC / Nga mice reared by the method of Reference Example 1 and ICR mice as a control group were sufficiently depilated using a depilatory agent (sensitive skin veet), and after 24 hours, a solution containing 3: 1 olive oil and acetone. 150 ul of DNCB prepared at a concentration of 1% was taken and applied at the same time every day for 4 days to induce dermatitis. Thereafter, the DNCB was adjusted to 0.2% in concentrations of 150 ul, and was applied at the same time every other week for 10 weeks simultaneously with rice hull distillate or saline (control). After 10 weeks, fasting for 24 hours before the experiment, the abdomen under light ether anesthesia, blood was collected from the heart, liver and skin tissue was removed, weighed and stored frozen. Extracted skin tissue was added 20 times the weight solution (PBS + 0.1% Tween20) using a homogenizer (homogenizer) for 2 minutes and centrifuged (12,000g, 10 minutes) to obtain a supernatant. The collected blood was centrifuged (3,000 g, 20 minutes) to obtain serum.
2.2 제조크림(2.2 Manufacturing Cream CRCR -1, -One, CRCR -2) 처치-2) kill
상기 실시예 3의 방법으로 제조된 왕겨초 증류액을 함유하지 않은 제조크림(CR-1)과 왕겨초 증류액을 함유한 제조크림(CR-2)에 의한 알러지 반응 억제효과를 측정하기 위해서, 상기 참고예 2-1에 기재된 동일한 방법으로 진행하되, 제품크림인 CR-1과 CR-2를 실험동물에 처치하여 수행하였다.In order to measure the allergic reaction inhibitory effect by the manufacturing cream (CR-1) containing no chaff herb distillate prepared by the method of Example 3 and the manufacturing cream (CR-2) containing the chaff herb distillate, Proceed in the same manner as described in Reference Example 2-1, but was performed by treating the experimental animals with CR-1 and CR-2, the product cream.
참고예Reference Example 3. 통계학적 분석 3. Statistical Analysis
각각의 실험결과에 대한 분산의 동질성을 비교하기 위해 Levene's test를 실시하고, 분산이 동질성을 갖는 경우 일원배치분산분석 (one-way analysis of variance, ANOVA)를 실시하여 유의성이 관찰되면 대조군과의 유의적인 차이가 있는 시험군을 알아내기 위해 Dunnett t-test를 실시하여 유의차가 5% 미만 (p<0.05)일 때 통계적 유의성이 있는 것으로 판정하였다.Levene's test was performed to compare the homogeneity of the variances for each experimental result.If the variances were homogeneous, one-way analysis of variance (ANOVA) was observed. Dunnett t- test was performed to identify the test group with statistical differences. It was determined that there was statistical significance when the difference was less than 5% ( p <0.05).
실험예Experimental Example 1. One. ImmunoglobulinImmunoglobulin E 억제효과 측정 E inhibition effect measurement
상기 참고예 2-1의 방법으로 수득한 피부조직과 혈액으로부터 얻은 각각의 샘플을 마우스 IgE ELISA KIT(ALPHA DIAHNOSTIC, USA)를 사용하여, 혈청 및 피부조직에서 염증반응의 매개자인 IgE의 변화를 측정하였다. 항-마우스 IgE 마이크로 웰 스트립 플레이트에 샘플(sample)을 100ul 넣은 후 1시간 동안 방치한 후 4회 세척하였다. 그리고 각각의 항-마우스 IgE-HRP conjugate를 100ul 씩 넣은 후 30분간 방치하고 5회 세척하였다. 100ul TMB 기질을 각각의 웰에 넣은 후 15분 동안 감광시킨 후 100ul의 정지 용액을 넣고 ELISA(Model MCC/340, Huntsvill, AL, USA) 450nm로 측정하였다.Using the mouse IgE ELISA KIT (ALPHA DIAHNOSTIC, USA), each sample obtained from the skin tissue and blood obtained by the method of Reference Example 2-1 was used to measure the change of IgE, a mediator of inflammatory response in serum and skin tissue. It was. 100 μl of sample was placed in an anti-mouse IgE micro well strip plate, and then washed 4 times after being left for 1 hour. Each anti-mouse IgE-HRP conjugate was added to 100ul and left for 30 minutes and washed five times. 100 ul TMB substrate was added to each well, and then photosensitive for 15 minutes, and then 100 ul of stop solution was added and measured by ELISA (Model MCC / 340, Huntsvill, AL, USA) 450 nm.
그 실험결과, 도 1 및 도 2에서 보여지는 바와 같이, 환부조직(도 1) 및 혈청(도 2) 모두에서 ICR 마우스에 비해 NC/Nga 마우스에서 유의성 있는 IgE의 증가를 확인하였다. 환부조직(도 1)에서 DNCB 처치에 의해 증가된 IgE가 왕겨초 증류액(DWC-1, DWC-2 및 DWC-3)에 의해 유의하게 감소하는 염증 완화 효과를 확인할 수 있었다. 그러나 혈청(도 2)에서는 DNCB 처치에 의해 증가된 IgE에 있어 왕겨초 증류액(DWC-1, DWC-2 및 DWC-3)에 의한 억제 효과는 관찰되지 않았다.As a result of the experiment, as shown in Figures 1 and 2, it was confirmed that significant increase in IgE in NC / Nga mice compared to ICR mice in both affected tissue (Fig. 1) and serum (Fig. 2). IgE increased by DNCB treatment in the affected tissues (Fig. 1) was confirmed to significantly reduce the inflammation by chaff distillate (DWC-1, DWC-2 and DWC-3). However, in the serum (FIG. 2), no inhibitory effect by chaff herb distillate (DWC-1, DWC-2 and DWC-3) was observed in IgE increased by DNCB treatment.
실험예Experimental Example 2. 간의 조직병리학적 변화 관찰 2. Observation of histopathological changes of liver
상기 참고예 2-1로부터 수득된 간의 일부를 샘플링하여 10% 중성포르말린에 고정시킨 다음 탈수 및 파라핀 포매를 실시하고, 3 ~ 4um의 longitudinal 절편을 제작하여 헤마톡실린-에오신(hematoxylin-eosin) 염색을 실시하고, 광학현미경 시야에서 자동영상분석장치(DMI-300 Image Processing; DMI, Korea)를 이용하여 이상 소견을 나타내는 간의 빈도를 군당 관찰하였다. A portion of the liver obtained from Reference Example 2-1 was sampled and fixed in 10% neutral formalin, followed by dehydration and paraffin embedding, and a longitudinal section of 3 to 4 μm was prepared to stain hematoxylin-eosin (hematoxylin-eosin). The frequency of liver showing abnormal findings was observed per group using an automatic image analysis device (DMI-300 Image Processing; DMI, Korea) in the optical microscope field of view.
DNCB의 장기 경구투여에 의해 간의 소엽 중심성 괴사가 유발된다고 알려져 있으나(Yamazaki et al., Ind Health., 43, pp308-319, 2005), 국소적인 도포에 의해서는 경미한 간 중량의 증가만이 유발되는 것으로 알려져 있다(Arts et al., Food Chem . Toxicol., 34, pp55-62, 1996). Long-term oral administration of DNCB is known to cause hepatic lobular central necrosis (Yamazaki et al., Ind) . Health ., 43 , pp308-319, 2005), it is known that only a slight increase in liver weight is caused by topical application (Arts et al., Food Chem . Toxicol ., 34, pp 55-62, 1996).
한편 본원에서는 간 실질세포의 괴사를 동반한 국소성 염증세포 침윤 소견이 정상 NC/Nga 마우스군, DWC-1 및 DWC-3 처치군에서 각각 20.00%, 33.33% 및 16.67% 로 관찰되었으나, 산발적으로 관찰된 이외에 별다른 이상 소견을 나타내지 않았으며, 이러한 간 실질세포의 괴사를 동반한 국소성 염증세포 침윤 소견은 정상 마우스에서 드물게 관찰되는 대표적인 우발적 조직소견 중 하나로 알려져 있어(Lee et al., J. Toxicol . Pub . Health., 22, pp117-126, 2006; Lee et al., Lab . Anim . Res., 521, pp299-305, 2005), 간에서 DNCB의 도포에 의해 조직병리학적 변화는 일어나지 않은 것으로 판단되며, 왕겨초 증류액(DWC-1, DWC-2, DWC-3)의 처치에 의해서도 간 독성은 일어나지 않는 것으로 관찰되었다.(도 3 및 표 5 참조)In the present study, local inflammatory cell infiltration with necrosis of hepatic parenchymal cells was observed 20.00%, 33.33% and 16.67% in normal NC / Nga mouse group, DWC-1 and DWC-3 treated group, respectively. There was no abnormal findings, and local inflammatory cell infiltration with necrosis of hepatic parenchymal cells was known as one of the rare cases of accidental histological findings in normal mice (Lee et al., J. Toxicol . Pub) . . Health, 22, pp117-126, 2006 ;..... Lee et al, Lab Anim Res, 521, pp299-305, 2005), histopathological changes in the liver by application of DNCB is expected did not happen , Hepatotoxicity was not observed even by treatment with rice hull distillate (DWC-1, DWC-2, DWC-3) (see Fig. 3 and Table 5).
실험예Experimental Example 3. 피부조직의 조직병리학적 변화 관찰 3. Observation of histopathological changes of skin tissue
상기 실시예 2의 방법으로 수득한 왕겨초 증류액(DWC-1, DWC-2, DWC-3)을 처치한 실험동물로부터 참고예 2-1의 방법으로 얻은 피부조직의 일부를 샘플링하여 10% 중성포르말린에 고정시킨 다음 탈수 및 파라핀 포매를 실시하고, 3 ~ 4um의 longitudinal 절편을 제작하여 헤마톡실린-에오신(hematoxylin-eosin) 염색을 실시하고, 상피에서 진피에 이르는 피부 전체의 두께, 피부 중 상피(Epidermis) 및 진피(Dermis)의 두께(um)를 100배 현미경 시야에서 자동영상분석장치(DMI-300 Image Processing; DMI, Korea)를 이용하여 각각 측정하였다.10% by sampling a portion of the skin tissue obtained by the method of Reference Example 2-1 from the experimental animal treated with the rice husk distillate (DWC-1, DWC-2, DWC-3) obtained by the method of Example 2 After fixation to neutral formalin, dehydration and paraffin embedding were performed, longitudinal sections of 3 to 4 μm were prepared, stained with hematoxylin-eosin, the thickness of the entire skin from the epithelium to the dermis, and the skin Epidermis and dermis thickness (um) were measured using an automatic image analysis device (DMI-300 Image Processing; DMI, Korea) at 100 times the microscope field.
DNCB는 지연형 접촉성 피부염을 일으키는 대표적인 물질로 본 실험에서는 염증세포의 침윤은 비교적 약하게 일어난 반면 현저한 상피층 (epidermis)의 비후로 인한 피부 두께의 증가를 보였다.DNCB is a representative agent of delayed contact dermatitis. In this experiment, the infiltration of inflammatory cells was relatively weak, whereas the skin thickness was increased due to the thickening of the epidermis.
한편 NC/Nga 마우스는 자발적인 피부염 유발 동물로 잘 알려져 있으며 (Shiohara et al., J. Dermatol . Sci., 36, pp1-9, 2004), 본 결과에서도 정상 NC/Nga 마우스의 피부상피 두께가 ICR 마우스에 비해 증가된 상태로 관찰되었으며, DNCB 처치에 의해 동일 주령의 ICR 마우스에 비해 더 현저한 피부 두께의 증가가 관찰되었다. ICR 마우스는 DNCB 처치에 의해 상피, 진피 및 피부 전체 두께가 각각 88.12, 12.78 및 23.74% 증가된 반면, NC/Nga 마우스에서는 각각 289.19, 47.96 및 31.24%의 증가를 나타내었다. NC / Nga mice are well known as spontaneous dermatitis-inducing animals (Shiohara et al., J. Dermatol . Sci., 36, pp1-9, 2004). An increased state was observed compared to mice, and a more significant increase in skin thickness was observed by DNCB treatment compared to ICR mice of the same age. ICR mice showed 88.12, 12.78 and 23.74% increase in epithelial, dermal and total skin thickness, respectively, by DNCB treatment, whereas NC / Nga mice showed 289.19, 47.96 and 31.24%, respectively.
실험 결과로서, 대조군의 식염수 처치는 DNCB 유발 접촉성 피부염에 별다른 영향을 미치지 않는 것으로 관찰되었으나, DWC-1 처치가 대조군 처치군에 비해 상피, 진피 및 피부 전체 두께가 각각 -43.65, -22.17 및 -19.07%의 감소 효과를 보였으며, DWC-2 처치에 의해 각각 -50.55, -25.91 및 -20.40%의 감소 효과를 보였으며, DWC-3 처치에 의해 각각 -55.99, -25.59 및 -23.29%의 감소 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다(도 4, 표 6 참조). 따라서 왕겨초 증류액의 DWC-1, DWC-2, DWC-3에서 모두 DNCB에 의해 유발된 접촉성 피부염을 효과적으로 억제함을 확인할 수 있었다.As a result of the experiment, the saline treatment of the control group was not found to have a significant effect on DNCB-induced contact dermatitis, but DWC-1 treatment showed -43.65, -22.17 and-total thickness of the epidermis, dermis and skin compared to the control treatment group, respectively. 19.07% reduction, -50.55, -25.91 and -20.40% reduction with DWC-2 treatment, -55.99, -25.59 and -23.29% reduction with DWC-3 treatment, respectively. It was confirmed that the effect was shown (see Fig. 4, Table 6). Therefore, it was confirmed that DWC-1, DWC-2, and DWC-3 of rice hull distillate effectively inhibited contact dermatitis caused by DNCB.
실험예Experimental Example 4. 4. CRCR -1, -One, CRCR -2의 -2 ImmunoglobulinImmunoglobulin E 억제효과 측정 E inhibition effect measurement
상기 실시예 3의 방법으로 제조된 왕겨초 증류액을 함유하지 않은 제품크림(CR-1)과 왕겨초 증류액을 함유한 제조크림(CR-2)을 처치한 실험동물로부터 상기 참고예 2-2의 방법으로 수득한 피부조직과 혈액에서 염증반응의 매개자인 IgE를 마우스 IgE ELISA KIT(ALPHA DIAHNOSTIC, USA)를 사용하여 측정하였다. 항-마우스 IgE 마이크로 웰 스트립 플레이트에 샘플(sample)을 100ul 넣은 후 1시간 동안 방치한 후 4회 세척하였다. 그리고 각각의 항-마우스 IgE-HRP conjugate를 100ul 씩 넣은 후 30분간 방치하고 5회 세척하였다. 100ul TMB 기질을 각각의 웰에 넣은 후 15분 동안 감광시킨 후 100ul의 정지 용액을 넣고 ELISA(Model MCC/340, Huntsvill, AL, USA) 450nm로 측정하였다.Reference Example 2- from the experimental animal treated with the product cream (CR-1) not containing the rice husk distillate prepared by the method of Example 3 and the manufacturing cream (CR-2) containing the rice hull distillate IgE, a mediator of inflammatory responses in skin tissue and blood obtained by the method of 2, was measured using mouse IgE ELISA KIT (ALPHA DIAHNOSTIC, USA). 100 μl of sample was placed in an anti-mouse IgE micro well strip plate, and then washed 4 times after being left for 1 hour. Each anti-mouse IgE-HRP conjugate was added to 100ul and left for 30 minutes and washed five times. 100 ul TMB substrate was added to each well, and then photosensitive for 15 minutes, and then 100 ul of stop solution was added and measured by ELISA (Model MCC / 340, Huntsvill, AL, USA) 450 nm.
그 실험결과, 도 5 및 도 6에서 보여지는 바와 같이, 환부조직(도 5) 및 혈청(도 6) 모두에서 ICR 마우스에 비해 NC/Nga 마우스에서 유의성 있는 IgE의 증가를 확인하였다. 그러나, 혈청(도 6)과 환부조직(도 5)에서 나타나는 바와 같이, DNCB에 의해 증가된 IgE가 제품크림(CR-1, CR-2)의 처치에 의한 유의한 감소 효과는 관찰되지 않았다.As a result of the experiment, as shown in Figures 5 and 6, it was confirmed that significant increase in IgE in NC / Nga mice compared to ICR mice in both affected tissue (Fig. 5) and serum (Fig. 6). However, as shown in serum (FIG. 6) and affected tissues (FIG. 5), no significant decrease in IgE by DNCB was observed with treatment of product creams (CR-1, CR-2).
실험예Experimental Example 5. 간에서 5. In the liver CRCR -1, -One, CRCR -2의 조직병리학적 변화 관찰Histopathological changes of -2
상기 실시예 3의 방법으로 제조된 왕겨초 증류액을 함유하지 않은 제품크림(CR-1)과 왕겨초 증류액을 함유한 제조크림(CR-2)을 참고예 2-2의 방법으로 처치한 실험동물의 간의 일부를 샘플링하여 10% 중성포르말린에 고정시킨 다음 탈수 및 파라핀 포매를 실시하고, 3 ~ 4um의 longitudial 절편을 제작하여 헤마토실린-에오신(hematoxylin-eosin) 염색을 실시하고, 광학현미경 시야에서 자동영상분석장치(DMI-300 Image Processing; DMI, Korea)를 이용하여 이상 소견을 나타내는 간의 빈도를 군당 관찰하였다. The product cream (CR-1) containing no chaff herb distillate prepared by the method of Example 3 and the manufacturing cream (CR-2) containing chaff distillate were treated by the method of Reference Example 2-2. A part of the liver of the experimental animal was sampled, fixed in 10% neutral formalin, dehydrated and paraffin embedded, and 3-4 μm longitudial sections were prepared to perform hematoxylin-eosin staining and optical microscopy. The frequency of livers with abnormal findings was observed per group using automatic image analysis (DMI-300 Image Processing; DMI, Korea).
본원에서는 간 실질세포의 괴사를 동반한 국소성 염증세포 침윤 소견이 정상 NC/Nga 마우스군, 제품크림-1(CR-1) 및 제품크림-2(CR-2) 군에서 각각 20.00% 또는 16.67% 로 관찰되었으나, 산발적으로 관찰된 이외에 별다른 이상 소견을 나타내지 않았으며, 이러한 국소성 염증세포 침윤 소견은 정상 마우스에서 드물게 관찰되는 우발적 소견 중 하나로 알려져 있어(Lee et al., J Toxicol Pub Health. 22, pp117-126, 2006; Lee et al., Lab Anim Res . 521, pp299-305, 2005), DNCB의 도포에 의해 간의 조직병리학적 변화는 일어나지 않은 것으로 판단되며, CR-1, CR-2 처치에 의해서도 간 독성은 일어나지 않는 것으로 관찰되었다.(도 7 및 표 7 참조)In this study, local inflammatory cell infiltration with necrosis of hepatic parenchymal cells was found to be 20.00% or 16.67% in normal NC / Nga mouse group, product cream-1 (CR-1) and product cream-2 (CR-2) groups, respectively. In spite of sporadic findings, no abnormalities were observed except sporadic findings, and these local inflammatory cell infiltrations were found to be one of the rare incidents observed in normal mice (Lee et al., J Toxicol). Pub Health . 22, pp 117-126, 2006; Lee et al., Lab Anim Res . 521, pp299-305, 2005), it was judged that the histopathological changes of the liver did not occur by the application of DNCB, and liver toxicity was not observed even by treatment with CR-1 and CR-2. 7)
실험예Experimental Example 6. 피부조직에서 6. In skin tissue CRCR -1, -One, CRCR -2의 조직병리학적 변화 관찰Histopathological changes of -2
상기 실시예 3의 방법으로 제조된 왕겨초 증류액을 함유하지 않은 제품크림(CR-1)과 왕겨초 증류액을 함유한 제조크림(CR-2)을 처치한 실험동물로부터 상기 참고예 2-2의 방법으로 수득한 피부조직의 일부를 샘플링하여 10% 중성포르말린에 고정시킨 다음 탈수 및 파라핀 포매를 실시하고, 3 ~ 4um의 longitudinal 절편을 제작하여 헤마톡실린-에오신(hematoxylin-eosin) 염색을 실시하고, 상피에서 진피에 이르는 피부 전체의 두께, 피부 중 상피(Epidermis) 및 진피(Dermis)의 두께(um)를 100배 현미경 시야에서 자동영상분석장치(DMI-300 Image Processing; DMI, Korea)를 이용하여 각각 측정하였다.Reference Example 2- from the experimental animal treated with the product cream (CR-1) not containing the rice husk distillate prepared by the method of Example 3 and the manufacturing cream (CR-2) containing the rice hull distillate A part of the skin tissue obtained by the method of 2 was sampled and fixed in 10% neutral formalin, followed by dehydration and paraffin embedding, and a longitudinal section of 3 to 4 μm was prepared to stain hematoxylin-eosin. The thickness of the entire skin from the epithelium to the dermis, the thickness of the epidermis and dermis in the skin (um) in a 100-fold microscope view (DMI-300 Image Processing; DMI, Korea) Each was measured using.
DNCB는 지연형 접촉성 피부염을 일으키는 대표적인 물질로 본 실험에서는 염증세포의 침윤은 비교적 약하게 일어난 반면 현저한 상피층 (epidermis)의 비후로 인한 피부 두께의 증가를 나타냈다.DNCB is a representative substance for delayed contact dermatitis. In this experiment, the infiltration of inflammatory cells was relatively weak, whereas the skin thickness was increased due to the thickening of the epidermis.
한편 NC/Nga 마우스는 자발적인 피부염 유발 동물로 잘 알려져 있으며 (Shiohara et al., J. Dermatol . Sci ., 36, pp1-9, 2004), 본 실험에서도 정상 NC/Nga 마우스의 피부상피 두께가 ICR 마우스에 비해 증가된 상태로 관찰되었으며, DNCB 처리에 의해 동일 주령의 ICR 마우스에 비해 더 현저한 피부 두께의 증가가 관찰되었다. ICR 마우스는 DNCB 처치에 의해 상피, 진피 및 피부 전체 두께가 각각 88.12, 12.78 및 23.74% 증가된 반면, NC/Nga 마우스에서는 각각 289.19, 47.96 및 31.24%의 증가를 나타내었다. NC / Nga mice are well known as spontaneous dermatitis-inducing animals (Shiohara et al., J. Dermatol . Sci ., 36 , pp1-9, 2004). An increased state was observed compared to mice, and a more significant increase in skin thickness was observed by DNCB treatment compared to ICR mice of the same age. ICR mice showed 88.12, 12.78 and 23.74% increase in epithelial, dermal and total skin thickness, respectively, by DNCB treatment, whereas NC / Nga mice showed 289.19, 47.96 and 31.24%, respectively.
대조군 처치는 DNCB 유발 접촉성 피부염에 별다른 영향을 미치지 않는 것으로 관찰되었으나, CR-1 처치가 대조군 처치에 비해 상피, 진피 및 피부 전체 두께가 각각 -53.00, -18.39 및 -13.66%의 감소 효과를 보였으며, CR-2 처치에 의해 각각 -58.13, -23.99 및 -18.19%의 감소 효과를 나타내었다(도 8, 표 8 참조). 따라서 왕겨초 증류액을 함유한 제조크림인 CR-2가 DNCB 유발 접촉성 피부염을 더 효과적으로 억제하는 것을 확인할 수 있었다.The control treatment did not significantly affect DNCB-induced contact dermatitis, but the CR-1 treatment showed a reduction of -53.00, -18.39, and -13.66% of epithelial, dermis and skin thickness, respectively, compared to the control treatment. CR-2 treatment showed -58.13, -23.99 and -18.19% reduction effects, respectively (see Figure 8, Table 8). Therefore, it was confirmed that CR-2, a preparation cream containing rice hull distillate, inhibits DNCB-induced contact dermatitis more effectively.
이러한 결과로 왕겨초 증류액(DWC)을 함유하는 시료(DWC-1, DWC-2, DWC-3) 및 제조크림(CR-2)이 알러지 반응의 주된 항체인 IgE의 생성을 환부조직에서 억제하고, 간의 조직병리학적인 변화를 유발하지 않으며, 알러지 유발로 인한 상피, 진피 및 피부의 전체 두께를 감소시키는 효과를 확인함으로써, 상기의 왕겨초 증류액(DWC)이 알러지 치료제 및 예방물질로서 가능성을 가지는 것으로 사료된다.As a result, samples containing rice husk distillate (DWC) (DWC-1, DWC-2, DWC-3) and manufactured cream (CR-2) inhibited the production of IgE, the main antibody for allergic reaction, in affected tissues And by confirming the effect of reducing the overall thickness of the epidermis, dermis and skin due to allergic induction without causing liver histopathological changes, the chaff distillate (DWC) has the potential as an allergy treatment and preventive substance. It is considered to have.
본 발명의 왕겨초 증류액(DWC)을 포함하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Although the formulation example of the composition containing the chaff distillate distillate (DWC) of the present invention will be described, the present invention is not intended to limit this, but is intended to explain in detail only.
제제예Formulation example 1. One. 산제의Powder 제조 Produce
왕겨초 증류액(DWC-3) 20 mg20 mg of rice hull distillate (DWC-3)
유당 100 mgLactose 100 mg
탈크 10 mgTalc 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.The above ingredients are mixed and filled in an airtight cloth to prepare a powder.
제제예Formulation example 2. 정제의 제조 2. Preparation of Tablets
왕겨초 증류액(DWC-3) 10 mg10 mg of rice hull distillate (DWC-3)
옥수수전분 100 mgCorn starch 100 mg
유당 100 mgLactose 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg2 mg magnesium stearate
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.After mixing the above components, tablets are prepared by tableting according to a conventional method for preparing tablets.
제제예Formulation example 3. 캅셀제의 제조 3. Manufacture of capsule
왕겨초 증류액(DWC-3) 10 mg10 mg of rice hull distillate (DWC-3)
결정성 셀룰로오스 3 mg3 mg of crystalline cellulose
락토오스 14.8 mgLactose 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mgMagnesium Stearate 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.According to a conventional capsule preparation method, the above ingredients are mixed and filled into gelatin capsules to prepare capsules.
제제예Formulation example 4. 주사제의 제조 4. Preparation of Injectables
왕겨초 증류액 (DWC-3) 10 mgRice husk distillate (DWC-3) 10 mg
만니톨 180 mgMannitol 180 mg
주사용 멸균 증류수 2974 mgSterile distilled water for injection 2974 mg
Na2HPO4 ,12H2O 26 mgNa 2 HPO 4 , 12H 2 O 26 mg
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.According to the conventional method for preparing an injection, the amount of the above ingredient is prepared per ampoule (2 ml).
제제예Formulation example 5. 5. 액제의Liquid 제조 Produce
왕겨초 증류액(DWC-3) 20 mg20 mg of rice hull distillate (DWC-3)
이성화당 10 g10 g of isomerized sugar
만니톨 5 g5 g of mannitol
정제수 적량Purified water
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.According to the conventional method of preparing a liquid solution, each component is added and dissolved in purified water, lemon flavor is added to the mixture, and then the above ingredients are mixed, purified water is added to adjust the total amount to 100 ml, and then filled in a brown bottle. The solution is prepared by sterilization.
제제예Formulation example 6. 건강 식품의 제조 6. Manufacture of healthy food
왕겨초 증류액 (DWC-3) 1000 ㎎Rice husk distillate (DWC-3) 1000 mg
비타민 혼합물 적량Vitamin mixture proper amount
비타민 A 아세테이트 70 ㎍70 μg of Vitamin A Acetate
비타민 E 1.0 ㎎Vitamin E 1.0 mg
비타민 B1 0.13 ㎎Vitamin B1 0.13 mg
비타민 B2 0.15 ㎎Vitamin B2 0.15 mg
비타민 B6 0.5 ㎎Vitamin B6 0.5 mg
비타민 B12 0.2 ㎍0.2 μg of vitamin B12
비타민 C 10 ㎎Vitamin C 10 mg
비오틴 10 ㎍10 μg biotin
니코틴산아미드 1.7 ㎎Nicotinic Acid 1.7 mg
엽산 50 ㎍50 μg folic acid
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎Calcium Pantothenate 0.5mg
무기질 혼합물 적량Mineral mixture
황산제1철 1.75 ㎎Ferrous Sulfate 1.75 mg
산화아연 0.82 ㎎Zinc Oxide 0.82 mg
탄산마그네슘 25.3 ㎎Magnesium carbonate 25.3 mg
제1인산칼륨 15 ㎎Potassium monophosphate 15 mg
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎Potassium Citrate 90 mg
탄산칼슘 100 ㎎Calcium Carbonate 100 mg
염화마그네슘 24.8 ㎎Magnesium chloride 24.8 mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강기능식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.Although the composition ratio of the above-mentioned vitamin and mineral mixtures is mixed with a component suitable for a health functional food in a preferred embodiment, the composition ratio may be arbitrarily modified, and the above components may be mixed according to a conventional health food manufacturing method. Next, the granules may be prepared and used for preparing a health food composition according to a conventional method.
제제예Formulation example 7. 건강 음료의 제조 7. Manufacture of health drinks
왕겨초 증류액 (DWC-3) 1000 ㎎Rice husk distillate (DWC-3) 1000 mg
구연산 1000 ㎎Citric acid 1000 mg
올리고당 100 g100 g oligosaccharides
매실농축액 2 gPlum concentrate 2 g
타우린 1 g1 g of taurine
정제수를 가하여 전체 900 ㎖Add 900 ml of purified water
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 L 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다. After mixing the above components according to the conventional healthy beverage production method, and stirred and heated at 85 ℃ for about 1 hour, the resulting solution is filtered and obtained in a sterilized 2 L container, sealed sterilization and then refrigerated and stored Used to prepare the healthy beverage composition of the invention.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.Although the composition ratio is a composition that is relatively suitable for the preferred beverage in a preferred embodiment, the compounding ratio may be arbitrarily modified according to regional and ethnic preferences such as demand hierarchy, demand country, and usage.
도 1은 DNCB 유발 접촉성 피부염 알러지 질환 모델의 피부에서 IgE 생성에 미치는 왕겨초 증류액(DWC-1, DWC-2, DWC-3)의 효과를 측정한 도이고,1 is a diagram measuring the effect of chaff distillate (DWC-1, DWC-2, DWC-3) on the production of IgE in the skin of the DNCB-induced contact dermatitis allergic disease model,
도 2는 DNCB 유발 접촉성 피부염 알러지 질환 모델의 혈청에서 IgE 생성에 미치는 왕겨초 증류액(DWC-1, DWC-2, DWC-3)의 효과를 측정한 도이고,2 is a diagram measuring the effect of chaff distillate (DWC-1, DWC-2, DWC-3) on the production of IgE in the serum of the DNCB induced contact dermatitis allergic disease model,
도 3은 접촉성 피부염 유발물질인 DNCB 및 왕겨초 증류액(DWC-1, DWC-2, DWC-3)의 처치에 의한 간의 조직병리학적인 변화를 관찰한 도이며(a: ICR-normal, b: ICR-DNCB, c 및 d: NC/Nga-normal, e: NC/Nga-DNCB, f: vehicle(NC/Nga-식염수), g 및 h: DWC-1, i 및 j: DWC-2, k: DWC-3), 3 is a diagram illustrating the histopathological changes of liver by treatment of DNCB and rice hull distillate (DWC-1, DWC-2, DWC-3), which are contact dermatitis causing agents (a: ICR-normal, b) : ICR-DNCB, c and d: NC / Nga-normal, e: NC / Nga-DNCB, f: vehicle (NC / Nga-saline), g and h: DWC-1, i and j: DWC-2, k: DWC-3),
도 4는 접촉성 피부염 유발물질인 DNCB 및 왕겨초 증류액(DWC-1, DWC-2, DWC-3)의 처치에 의한 피부조직의 두께의 변화를 측정한 도이며(a: ICR-normal, b: ICR-DNCB, c: NC/Nga-normal, d: NC/Nga-DNCB, e: vehicle(NC/Nga-식염수), f: DWC-1, g: DWC-2, h: DWC-3),Figure 4 is a measure of the change in the thickness of the skin tissue by treatment of DNCB and chaff herb distillate (DWC-1, DWC-2, DWC-3) that is a contact dermatitis causing agent (a: ICR-normal, b: ICR-DNCB, c: NC / Nga-normal, d: NC / Nga-DNCB, e: vehicle (NC / Nga-saline), f: DWC-1, g: DWC-2, h: DWC-3 ),
도 5는 DNCB 유발 접촉성 피부염 알러지 질환 모델의 피부에서 IgE 생성에 미치는 제품크림(CR-1, CR-2)의 효과를 측정한 도이고,5 is a diagram measuring the effect of the product cream (CR-1, CR-2) on the production of IgE in the skin of the DNCB induced contact dermatitis allergic disease model,
도 6은 DNCB 유발 접촉성 피부염 알러지 질환 모델의 혈청에서 IgE 생성에 미치는 제품크림(CR-1, CR-2)의 효과를 측정한 도이고,6 is a diagram measuring the effect of the product cream (CR-1, CR-2) on the production of IgE in the serum of the DNCB-induced contact dermatitis allergic disease model,
도 7은 접촉성 피부염 유발물질인 DNCB 및 제품크림(CR-1, CR-2)의 처치에 의한 간의 조직병리학적인 변화를 관찰한 도이며(a: ICR-normal, b: ICR-DNCB, c 및 d: NC/Nga-normal, e: NC/Nga-DNCB, f: vehicle(NC/Nga-식염수), g 및 h: CR-1, i and j: CR-2), 7 is a diagram illustrating the histopathological changes of the liver by treatment of DNCB and product creams (CR-1 and CR-2), which are the causes of contact dermatitis (a: ICR-normal, b: ICR-DNCB, c). And d: NC / Nga-normal, e: NC / Nga-DNCB, f: vehicle (NC / Nga-saline), g and h: CR-1, i and j: CR-2),
도 8는 접촉성 피부염 유발물질인 DNCB 및 제품크림(CR-1, CR-2)의 처치에 의한 피부조직의 두께의 변화를 측정한 도(a: ICR-normal, b: ICR-DNCB, c: NC/Nga-normal, d: NC/Nga-DNCB, e: vehicle(NC/Nga-식염수), f: CR-1, g: CR-2)이다.Figure 8 is a measure of the change in the thickness of the skin tissue by treatment of DNCB and product creams (CR-1, CR-2) that causes contact dermatitis (a: ICR-normal, b: ICR-DNCB, c : NC / Nga-normal, d: NC / Nga-DNCB, e: vehicle (NC / Nga-saline), f: CR-1, g: CR-2).
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