KR100861468B1 - 신규 바실러스 속 9-4 균주를 이용한 양파된장 - Google Patents

신규 바실러스 속 9-4 균주를 이용한 양파된장 Download PDF

Info

Publication number
KR100861468B1
KR100861468B1 KR1020060055819A KR20060055819A KR100861468B1 KR 100861468 B1 KR100861468 B1 KR 100861468B1 KR 1020060055819 A KR1020060055819 A KR 1020060055819A KR 20060055819 A KR20060055819 A KR 20060055819A KR 100861468 B1 KR100861468 B1 KR 100861468B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
bacillus
onion
strain
soybean
miso
Prior art date
Application number
KR1020060055819A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20070121143A (ko
Inventor
서원택
김용식
Original Assignee
진주산업대학교 산학협력단
창원대학교 산학협력단
김용식
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 진주산업대학교 산학협력단, 창원대학교 산학협력단, 김용식 filed Critical 진주산업대학교 산학협력단
Priority to KR1020060055819A priority Critical patent/KR100861468B1/ko
Publication of KR20070121143A publication Critical patent/KR20070121143A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR100861468B1 publication Critical patent/KR100861468B1/ko

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L11/00Pulses, i.e. fruits of leguminous plants, for production of food; Products from legumes; Preparation or treatment thereof
    • A23L11/50Fermented pulses or legumes; Fermentation of pulses or legumes based on the addition of microorganisms
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/127Antibiotics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00Function of food ingredients
    • A23V2200/30Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/3262Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on blood cholesterol
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/07Bacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Beans For Foods Or Fodder (AREA)

Abstract

본 발명은 식품위생 미생물에 대한 항균활성 및 혈전용해 활성을 지닌 바실러스 속. 9-4(Bacillus sp.9-4)균주를 이용한 양파 된장에 관한 것으로, 이를 더욱 상세하게 설명하면, 전통장류로부터 분리한 혈전용해 활성과 식중독 미생물에 대해 항균활성을 나타내는 신규 기능성 바실러스 속. 9-4(Bacillus sp. 9-4 : 수탁번호 KCTC 18114P, 생명공학연구소 유전자은행 기탁일자 2006년 5월 30일)균주 및 발효제로 사용하는 발효미생물로서 신규 바실러스 균주를 삶은 대두에 접종하여 생청국장 및 콩알메주를 제조하는 1차 단계와,
1차 단계에서 신규 바실러스 균주를 접종하여 제조된 생청국장에 삶은 대두와 양파 및 기타 부 원료를 이용하여 발효시킨 절충식된장양파된장의 제조와, 생청국장을 건조시킨 콩알메주를 사용하여, 간장을 담근 후 간장 가르기 부산물로 얻어지는 콩알메주에 삶은 양파와 기타 부 원료를 첨가하여 발효시킨 재래식양파된장에 관한 것으로, 된장 발효에서 다양한 효능을 갖는 양파를 적당량 첨가하여, 발효시킴으로서 양파 특유의 맛과 향 및 기능성이 가미된 것을 특징으로 하는 항균활성 및 혈전용해 활성을 지닌 바실러스 속 9-4 (Bacillus sp.9-4)균주를 이용한 양파 된장에 관한 것이다.
된장, 양파, 항균활성, 혈전용해능, 바실러스 속

Description

신규 바실러스 속 9-4 균주를 이용한 양파된장{Bacillus sp. 9-4 for preparing of onion doenjang thereby}
도 1은 본 발명인 신규 바실러스 속 9-4(Bacillus sp.9-4) 균주를 이용하여 양파된장을 제조하는 제조방법의 흐름도
본 발명은 항균활성 및 혈전용해 활성을 지닌 바실러스 속 9-4(Bacillus sp.9-4.) 균주를 이용한 양파 된장에 관한 것으로, 이를 더욱 상세하게 설명하면, 전통장류로부터 분리한 혈전용해 활성과 식중독 미생물에 대해 항균활성을 나타내는 신규 기능성 바실러스 속 9-4(Bacillus sp.9-4 :수탁번호 KCTC 18114P , 생명공학연구소 유전자은행 기탁일자 2006년 5월 30일)균주 및 발효제로 사용하는 발효미생물로서 신규 바실러스 균주를 삶은 대두에 접종하여 생청국장 및 콩알메주를 제조하는 1차 단계와,
1차 단계에서 신규 바실러스 균주를 접종하여 제조된 생청국장에 삶은 대두와 양파 및 기타 부 원료를 이용하여 발효시킨 절충식양파된장의 제조와, 생청국장을 건조시킨 콩알메주를 사용하여, 간장을 담근 후 간장 가르기 부산물로 얻어지는 콩알메주에 삶은 양파와 기타 부 원료를 첨가하여 발효시킨 재래식 양파된장에 관한 것으로, 된장 발효에서 다양한 효능을 갖는 양파를 적당량 첨가하여, 발효시킴으로서 양파 특유의 맛과 향 및 기능성이 가미된 것을 특징으로 하는 항균활성 및 혈전용해 활성을 지닌 바실러스 속 9-4(Bacillus sp.9-4) 균주를 이용한 양파 된장에 관한 것이다.
일반적으로, 된장이라 함은 대두, 쌀, 보리, 밀 또는 탈지대두 등을 주원료로 하여 식염, 종국을 섞어 제국하고 발효숙성시킨 것 또는 콩을 주원료로 하여 메주를 만들고 식염수에 담가 발효하고 여액을 분리하여 가공한 것을 말한다.
우리나라 전통 발효식품의 하나인 된장은 크게 간장제조 부산물로 만든 막된장(재래식된장), 메주로 만든 토장, 기타 유사된장(막장, 즙장, 담북장)으로 나눌 수 있다(발효식품학, 신광출판사, 2005년). 된장은 단백질 함유량이 높은 대두를 주성분으로 하므로 탄수화물을 주식으로 하는 식단에서 단백질을 보강하여주는 부식으로서의 비중이 큰 식품이며, 또한 된장은 면역증강 작용, 항당뇨 작용, 항암 작용, 콜레스테롤 저하작용 등이 밝혀져 있는 (기능성 식품학, 조영수 차재영 공저, 동아대학교 출판부, 171 페이지, 2005년) 기능성이 뛰어난 식품으로 건강을 추구하는 현대인에게 점차 관심이 증가되고 있다.
양파는 다량의 탄수화물 외에 쿼르세틴 등의 후라보노이드, 사이크로알린 등의 황 화합물과 같은 생리활성물질을 다량 함유하고 있어 항균활성 뿐만 아니라, 항암, 당뇨치료, 항혈전 효과, 고혈압예방효과 등의 생리활성이 보고되어 있어 건강을 위한 기능성 식품의 좋은 소재가 되어진다.
또한, 양파는 남부지방에서 대량 재배되고 있으며 대량 재배에 따른 출하량 조절 실패 등으로 인한 가격의 폭락과 짧은 저장기간으로 출하량의 조절 등에 어려움이 발생하여 가격변동이 심한 작물의 하나로 큰 문제점을 가지고 있어, 양파의 저장기술개발에 의한 출하량 조절 및 양파 이용증대 방법 개발이 절실하다.
한편 80년대에 들어서면서 급속한 경제 성장과 산업화 영향은 식품의 정보적 기능이 확대되고 식생활의 레저화, 국제화 시대에 따라 맛의 교류가 빠르게 이루어지고 다양한 식품이 가공 생산되고 있는 실정이다. 이에 건강 지향적 기능성식품으로서의 전통발효식품의 재인식된 된장제품의 수요가 급격히 증가되고 있는 실정이다.
따라서 기업적인 측면에서는 기존 장류시장에서의 된장 제품이 경쟁력이 있고 활성화되기 위해서는 소비자가 선호하는 새로운 형태의 기술개발이 절대적으로 필요한 실정이다.
한편, 웰빙 시대를 맞이하여 이러한 전통장류가 더욱더 발전하고 수요에 부응하기 위해서는 소비자의 취향과 기호에 맞게 변화된 제품이 개발되어야 할 것이며, 간편하고 즉석에서 조리할 수 있게 하여 젊은 세대에게 친숙하게 다가갈 수 있는 제품의 개발이 필요하다.
이러한 실정으로 인하여, 신규 미생물을 이용하여 양파와 함께 제조되어진 된장과 같은 부가가치가 높은 제품을 제조하기 위한 연구기술의 개발이 시급한 실정이다.
본 발명은 상기 설명한 바와 같은 종래 기술의 문제점을 더욱 효율적으로 해결하기 위하여 제공된 것으로서, 전통장류로부터 분리한 혈전용해 활성과 식중독 미생물에 대해 항균활성을 나타내는 신규 기능성 바실러스 속(Bacillus sp. 9-4) 균주 및 그를 발효미생물로 사용하여 제조하는 양파된장에 관한 것으로, 삶은 양파를 발효 초기에 적당량 첨가하여 발효를 진행시킴으로서 양파 특유의 냄새를 자연스럽게 제거시켜, 된장 본래의 관능적 특성을 감소시키지 않는 동시에 양파와 된장의 영양과 향미가 부여된 새로운 형태의 된장을 제조하는 기술뿐만 아니라, 항균활성 및 혈전용해 활성을 지닌 바실러스 속(Bacillus sp.9-4) 균주를 이용한 기능성 장류를 제공하고자 하는 것이다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여 전통장류로부터 분리한 혈전용해 활성과 식중독 미생물에 대해 항균활성을 나타내는 신규 기능성 바실러스 속(Bacillus sp.9-4 : 수탁번호 KCTC 18114P, 생명공학연구소 유전자은행 기탁일자 2006년 5월 30일)균주를 분리 동정하고, 된장 발효제로 사용하기 위하여, 분리 동정된 신규 바실러스 균주를 삶은 대두에 접종하여 생청국장 및 이를 건조시켜 콩알메주를 제조하는 1차 단계와, 1차 단계에서 신규 바실러스 균주를 접종하여 제조된 생청국장에 아스페르질루스 쌀 코지, 삶은 대두, 볶은 통밀가루, 볶은 쌀가루, 식염, 및 물을 사용하는 제조과정에 적당량의 삶은 양파를 가하고 치대어 발효시켜 절충식양파된장 제조와, 생청국장을 건조시킨 콩알메주를 사용하여, 간장을 담근 후 간장 가르기 공정의 부산물로 얻어지는 콩알메주에 삶은 양파와 기타 부 원료를 첨가하여 발 효시킨 재래식양파된장의 제조에 관한 것으로, 항균활성 및 혈전용해 활성을 지닌 바실러스 속(Bacillus sp.9-4) 균주를 이용한 양파 된장에 관한 것이다.
이하, 본 발명의 구성을 도 1에 나타낸 구체적인 방법과 실시예를 들어 상세히 설명하면,
도 1은 본 발명인 신규 바실러스 속 9-4(Bacillus sp.9-4) 균주를 이용하여 양파된장을 제조하는 제조방법의 흐름도를 나타낸 것으로, 기능성 바실러스 속 9-4(Bacillus sp.9-4)의 분리동정과 양파된장 제조단계로 나누어 설명되어 지며 다음과 같다.
[실시예 1] 기능성 바실러스 분리 선별 및 동정
전통장류로부터 분리한 혈전용해 활성과 식중독 미생물에 대해 항균활성을 나타내는 신규 기능성 바실러스 속(Bacillus sp. 9-4 : 수탁번호 KCTC 18114P , 생명공학연구소 기탁일자 2006년 5월 30일)균주를 분리 동정하고, 분리 동정된 신규 바실러스 균주를 된장 발효제로 사용하여 양파된장을 제조하게 되었으며, 기능성 바실러스 균주의 분리 선별 및 동정에 대하여는 다음과 같다.
1. 균주 순수분리 및 선별
기능성 장류발효 미생물을 분리하기 위하여 전국 각지로부터 수집한 전통장류를 멸균수로 적당한 배율로 10단 희석하여 와이피디 평판배지(yeast extract /L, peptone 5g/L, Dextrose 20 g/L 한천 1.5 g/L, pH 6.8)에 도말하여 30℃에서 48시간 항온 배양하여 다양한 바실러스 균주(Bacillus colony)를 순수분리 하였다.
순수하게 분리된 바실러스 균주(Bacillus colony)를 삶은 대두에 접종하고 39℃에서 48시간 항온 배양하여 관능적으로 가능한 무취이면서 다량의 점성을 생성하는 바실러스 균주를 선별하였다. 최종적으로 다량의 점성을 형성하며, 대두 발효 시 악취발생이 거의 없는 9-4 균주를 선별하였다. 선별균주는 와이피디 한천배지에 접종하고 30℃에서 48시간 배양한 후 20% 글리세롤(glycerol) 함유 와이피디 액체배지에 현탁시켜 -40℃에 냉동 보관하면서 필요 시 와이피디 평판배지에서 활성화하여 사용하였다.
2. 9-4 균주 동정
선별된 균주는 통상의 방법에 따라 균의 형태학적, 생리화학적 분석을 통하여 동정을 시도하였으며, 와이피디 한천 평판배지에서 9-4 균주를 도말하고 30℃에서 3일간 배양한 후, 집락의 크기는 직경 3~5 밀리미터 정도였으며 형태는 가장자리가 불규칙하며 안쪽으로 원형의 주름을 형성하는 특징을 나타내고 있었으며, 배지로 수용성 색소는 생산하지 않았다.
9-4 균주는 그램 양성 무포자 간균이었으며, 9-4 균주의 배양학적 특성을 정리하면 표 1과 같았다. 생육온도 범위는 10~50℃ 이었고, 30~40℃에서 최적온도 범위를 나타내었다. 생육 pH 범위는 4.5~9.5이었으며, pH 6~8 범위에서 가장 잘 자랐다. 생육 식염 가능 농도는 17.5% 정도로 비교적 내염성이 강한 특성을 하고 있었다.
에피아이(API) 50 키트를 사용하여 선별균주 9-4의 생화학적 특성을 살펴본 결과 표 2에서 보는 바와 같이 글리세롤(glycerol)을 포함하는 23 종의 탄소원을 자화할 수 있었다. 탄소원 자화 패턴의 data base 분석을 통하여 9-4 균주는 바실 러스 (Bacillus amyloliquefaciens)와 유사성이 68.8%로 가장 높았으며, 이 밖에 바실러스 (Bacillus licheniformis)와는 23.8%, 바실러스 섭티리스(Bacillus subtilis)와는 7.4% 순으로 유사성이 높았다.
세포의 지방산은 가스크로마토그래피로 지방산을 분리하고 미디(MIDI) 시스템으로 그 조성을 분석하여 표 3에 정리하였다.
표 3에서 보는 바와 같이, 9-4 균주의 세포 지방산은 분지 지방산인 안테이소(anteiso)-C15 :0이 38.66%로 가장 높았고 이소(iso)-C15 :0이 30.19% 이었다. 이밖에 선상의 포화지방산인 C16 :0과 분지 지방산인 이소(iso)-C16 :0,과 이소(iso)-C17 :0이 각각 8.78%, 8.07%, 및 6.70%로 그 함량이 낮은 수준에 있었다. 세포지방산 분석 data base로부터 9-4균주는 생화학적 분석결과와는 달리 Paenibacillus marcerans와 유사성이 가장 높았으며, 이밖에 Bacillus lentimorbus , Bacilllus pumilus , Bacillus amyloliquefaciens 순으로 유사성이 높은 결과가 얻어졌다.
표 1. 9-4 균주의 배양학적 특성
Figure 112006043731086-pat00001
표 2. 9-4 균주의 생화학적 특성(API 50 serials)
Figure 112006043731086-pat00002
표 3. 9-4 균주의 세포지방산 분석(MIDI)
Figure 112006043731086-pat00003
생화학적 특성 및 세포지방산 분석 등의 기법으로 분석한 결과 상이한 결과를 나타내고 있었으므로 9-4 균주를 정확히 동정하는 것이 불가능하였다. 보다 정확한 동정을 위하여 계통발생학적인 분석을 하였으며,
조 등의 방법(Cho 등, J. Microbiol . Biotechnol. 16, 92-101. 2006)에 따라 16S rDNA 분리하여 염기서열(표 4)을 진뱅크 자료(GeneBank database)로부터 얻은 또 다른 세균의 16S rDNA와 비교 분석한 결과 표 5와 같았다.
Figure 112006043731086-pat00004
표 5에서 보는 바와 같이, Bacillus amyloliquefaciens와 가장 유사하였으나 생리화학적 특성이 완전히 일치하지 않는 것을 확인 할 수 있어, 재래식된장으로부터 분리한 9-4는 바실러스 속, 9-4(Bacillus sp. 9-4)로 최종 동정하였다.
Figure 112006043731086-pat00005
3. 9-4 균주의 기능성 규명
선별된 균주의 기능성을 확인하기 위하여 혈전용해 활성과 대표적인 식품위생 미생물에 대한 항균활성을 검토하였다.
전용해 활성은 피브린(fibrin)을 기질로 사용하는 피브린플레이트(fibrin plate)법(Astrup and Mullertz, ACTA Physiol . Scand. 363, 250, 1952)에 준하여 측정하였다. 즉, 피브리노겐[fibrinogen(from bovine plasma. Sigma Co., USA)]이 0.4% 되도록 완충용액(160 mM boric acid와 40 mM NaCl을 함유하는 10mM sodium borate 완충용액)]에 녹인 후 10 ml를 직경 87 mm 페트리디쉬(petri dish)에 분주하고 20 mM, 트리스 염산버퍼(Tris-HCl buffer, pH8.0)에 용해시킨 트롬빈(thrombin, 100 NIH unit/ml) 용액 40 ㎕ 첨가하여 실온에서 30분 방치시켜 응고시켜 응고된 피브린플레이트(fibrin plate)를 제작하였다. 피브린플레이트(fibrin plate)에 10 ㎕의 바실러스(Bacillus )배양 여액을 적용시키고 37℃에서 6시간 반응시켜 용해된 면적을 측정하였다. 용해된 면적을 표준 혈전용해효소로 플라즈민[plasmin(Sigma Co., USA)] 1 unit를 사용하여 비교하였다. 혈전용해 조효소는 Bacillus 균주를 티에스비(BactoTM Tryptic Soy Broth(USA)) 40 ml가 들어 있는 250 ml 얼렌미어(Erlenmeyer flask)에 접종하고 30℃에서 150 rpm으로 진탕하면서 15시간 배양한 배양여액을 사용하였다.
9-4 균주의 혈전용해 활성을 실험실에서 보관 중인 바실러스 나토(Bacillus natto)와 비교한 결과 표 6와 같았다. 표 6에서 보는바와 같이 기존의 혈전용해 활성이 우수한 것으로 알려진 바실러스 나토(Bacillus natto (B. subtilis KCCM 12511))와 비교하여 약간 우수함을 알 수 있었다.
Figure 112006043731086-pat00006
항균활성을 확인하기 위해 식품위생 미생물로 사용된 공시균주는 대장균( Escherichia coli KCCM 11234), 대장균(Escherichia coli KCTC 1682), 살모넬라 엔테리카(Salmonella enterica subsp. enterica KCTC 12456), 살모넬라 티피머리움(Salmonella typhimurium KCTC 1925), 시겔라 푸렉시너리(Shigela flexineri KCTC 2008), 시겔라 손네이(Shigella sonnei KCTC 2518), 비브리오 블니피쿠스(Vibrio vulnificus KCTC2959), 바실러스 세레우스(Bacillus cereus KCTC 1012), 리스테리아 모노사이토제네스(Listeria monocytogenes KCTC 3569), 리스테리아 이바노비(Listeria ivanovii subsp. ivanovii KCTC 3444), 스타필로코커스 오레우스(Staphylococcus aureus subsp. aureus KCTC 1621) 및 스타필로코커스 에피더미스(Staphylococcus epidermidis KCTC 3958) 이었으며, 각각의 공시균주 배양용 평판배지 공시균주를 매립하여 항균활성 검토를 위한 평판배지를 조제하였다.
선별된 9-4균주는 티에스비 배지에서 30℃의 온도로 48시간 배양한 후 배양액을 직경 8 mm 종이판(paper disk)에 40 ㎕씩 분주하여 항균활성 측정용 평판배지에 위치시키고 30℃에서 48 - 72시간 항온 시켜 투명한 생육저지 영역 확인으로부터 항균활성 유무를 판별하였다.
표 7에서 보는바와 같이 9-4 균주는 다양한 식품위생 미생물에 대하여 항균활성을 나타내고 있었다.
Figure 112006043731086-pat00007
이상에서 보는바와 같이 저취 대두발효균주 9-4는 비교적 높은 혈전용해 활성과 다양한 식품위생 미생물에 대해 항균활성을 나타내는 등의 그 기능성이 우수한 균주였다.
[실시 예 2] 생청국장 및 콩알메주 제조 방법
대두 2Kg을 수세하고 실온에서 12시간 침지하여 30분간 절수하고 3시간 삶아 삶은 대두를 만들어 60℃ - 70℃ 냉각시키고 삶은 대두에서 미리 종배양한 9-4 균주 100 g을 접종하였다. 다시 39℃에서 36 - 48시간 발효하여 생 청국을 만들었다. 생 청국은 50℃의 열풍건조기에서 건조하여 콩알메주로 만들었다.
[실시 예 3] 절충식양파된장의 제조방법
1. 절충식양파된장의 제조방법
생청국 2 kg, 삶은 콩 4 kg, 아스페르질루스 쌀 코지 0.5 kg, 볶은 통밀가루 0.25 kg, 볶은 쌀가루 0.25 kg, 식염 1.2 kg, 및 물 1.8 kg의 절충식양파된장제조 기본조성에 대하여 12중량%의 식염을 포함하는 생 양파 또는 삶은 양파를 기본 조성에 대하여 10 - 30중량% 가하고 초퍼로 혼합하여 용기에 담아 20 - 30℃의 실온에서 60일간 발효시켜 절충식양파된장을 제조하였다. 생 양파를 첨가하는 경우에는 약 30일 경과하면서 악취가 발생하는 등의 부패가 일어나 더 이상 발효를 진행시키지 않고 폐기하였으며, 삶은 양파를 첨가하는 경우에는 60일간 발효 후 장류의 일반분석법(しょうゆ試驗法. 財團法人 日本醬油硏究所, 昭和 60年)에 따라 생균 수, 환원당, 적정산도, 총 질소, 및 가용성질소 함량을 분석한 결과 표 8과 같았다.
Figure 112006043731086-pat00008
2. 관능검사
삶은 양파를 첨가하여 60일간 숙성된 절충식양파된장을 시료로 사용하여 식품과학과 학생 10명을 패널로 하여 맛, 향, 색 및 전반적인 기호정도에 대하여 매우 좋다: 5점, 좋다: 4점, 보통이다: 3점, 나쁘다: 2점, 매우 나쁘다: 1점을 기준으로 하는 5점 만점의 기호도척도법을 이용한 관능검사 결과 표 9와 같았다.
생 양파를 사용한 절충식양파에서는 발효경과 30일이 지나면서 부패취가 발생하여 양파된장 가공적성이 부적격한 것으로 판단되어 관능검사에서 제외하였다. 전반적으로 색, 맛, 향이 대조실험에 비교하여 삶은 양파를 첨가하는 된장에서 높은 점수가 얻었으며, 삶은 양파를 20% 사용하는 경우에 가장 긍정적인 결과를 얻을 수 있었다.
Figure 112006043731086-pat00009
[실시 예 4] 재래식양파된장의 제조 방법
1. 재래식양파된장의 제조 방법
전통간장 제조 시 간장 가르기의 공정에서 발생하는 부산물인 메주덩이에 12중량%의 식염을 포함하는 삶은 양파를 10 - 30중량% 가하고 초퍼로 혼합하여 용기에 담아 20 - 30℃의 실온에서 60일간 발효시켜 재래식양파된장을 제조하였다. 실시 예 3에서와 같이 일반성분을 분석한 결과 표 10과 같았다.
Figure 112006043731086-pat00010
2. 관능검사
실 시예 3에서와 같이 관능검사를 실시한 결과 표 11과 같았다.
일반적으로 색, 맛, 향이 대조실험에 비교하여 삶은 양파를 첨가하는 된장에서 높은 점수가 얻었으며, 삶은 양파를 20% 사용하는 경우에 가장 높은 점수를 얻을 수 있었다.
Figure 112006043731086-pat00011
이상의 실시 예에서 제조된 양파된장은 삶은 양파를 첨가하지 않은 경우에 비해 삶은 양파를 10 - 30중량% 첨가하여 발효한 경우 맛과 향이 우수하였으며, 특히 20%를 첨가하는 경우 가장 높은 점수를 얻을 수 있었다. 생 양파를 첨가하는 경우는 양파 특유의 냄새뿐만 아니라 발효 도중 부패가 일어나는 등 문제점이 있는 것으로 확인되었다.
따라서, 본 발명인 상기 방법에 의해 제조된 양파된장을 통한 생리적 기능성이 검증된 양파된장은 소비자가 요구하는 품질의 고급화 및 다양성을 갖춘 장류제품으로 유용할 것이라 사료된다.
이상에서 본 발명은 기재된 구체예에 대해서만 상세히 설명되었지만 본 발명의 기술사상 범위 내에서 다양한 변형 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속함은 당연한 것이다.
상기 실시예 및 실험예를 통해 살펴본 바와 같이, 본 발명의 신규 기능성 바실러스 속 9-4균주를 사용하고, 삶은 양파를 첨가하여 발효시킴으로서 양파가 가지고 있는 맛과 유용한 성분이 자연스럽게 된장에 함유되도록 하여 관능적 성질과 항균활성 및 혈전용해증에 대하여 우수한 효능을 가진 기능성이 향상되게 제조된 양파된장에 대하여 우수한 효능을 검증한 것으로, 농수산물의 퓨전화를 통한 고기능성을 갖춘 고급화된 장류제품으로서 이러한 제품의 생산을 통한 고부가가치의 창출 및 장류산업계에서의 산업경쟁력 우의를 확보 등의 효과를 제공한다.
<110> Jinju National University Industry-Academia Cooperation Foundation CHANGWON NATIONAL UNIVERSITY Industry Academy Cooperation Corps <120> Bacillus sp. 9-4 for preparing of onion doenjang thereby <140> 10-2006-0055819 <141> 2006-06-21 <160> 1 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 1431 <212> DNA <213> Bacillus sp.9-4 <400> 1 cctatcatgc aagtcgagcg gacagatggg agcttgctcc ctgatgttag cggcggacgg 60 gtgagtaaca cgtgggtaac ctgcctgtaa gactgggata actccgggaa accggggcta 120 ataccggatg gttgtctgaa ccgcatggtt cagacataaa aggtggcttc ggctaccact 180 tacagatgga cccgcggcgc attagctagt tggtgaggta acggctcacc aaggcgacga 240 tgcgtagccg acctgagagg gtgatcggcc acactgggac tgagacacgg cccagactcc 300 tacgggaggc agcagtaggg aatcttccgc aatggacgaa agtctgacgg agcaacgccg 360 cgtgagtgat gaaggttttc ggatcgtaaa gctctgttgt tagggaagaa caagtgccgt 420 tcaaataggg cggcaccttg acggtaccta accagaaagc cacggctaac tacgtgccag 480 cagccgcggt aatacgtagg tggcaagcgt tgtccggaat tattgggcgt aaagggctcg 540 caggcggttt cttaagtctg atgtgaaagc ccccggctca accggggagg gtcattggaa 600 actggggaac ttgagtgcag aagaggagag tggaattcca cgtgtagcgg tgaaatgcgt 660 agagatgtgg aggaacacca gtggcgaagg cgactctctg gtctgtaact gacgctgagg 720 agcgaaagcg tggggagcga acaggattag ataccctggt agtccacgcc gtaaacgatg 780 agtgctaagt gttagggggt ttccgcccct tagtgctgca gctaacgcat taagcactcc 840 gcctggggag tacggtcgca agactgaaac tcaaaggaat tgacgggggc ccgcacaagc 900 ggtggagcat gtggtttaat tcgaagcaac gcgaagaacc ttaccaggtc ttgacatcct 960 ctgacaatcc tagagatagg acgtcccctt cgggggcaga gtgacaggtg gtgcatggtt 1020 gtcgtcagct cgtgtcgtga gatgttgggt taagtcccgc aacgagcgca acccttgatc 1080 ttagttgcca gcattcagtt gggcactcta aggtgactgc cggtgacaaa ccggaggaag 1140 gtggggatga cgtcaaatca tcatgcccct tatgacctgg gctacacacg tgctacaatg 1200 gacagaacaa agggcagcga aaccgcgagg ttaagccaat cccacaaatc tgttctcagt 1260 tcggatcgca gtctgcaact cgactgcgtg aagctggaat cgctagtaat cgcggatcag 1320 catgccgcgg tgaatacgtt cccgggcctt gtacacaccg cccgtcacac cacgagagtt 1380 tgtaaccacc ccgaagtcgg tgaggtaacc tttatggagc cagccgccga a 1431

Claims (4)

  1. 전통장류에서 분리한 바실러스 균주(Bacillus colony)로부터, 혈전용해 활성과 식중독 미생물에 대해 항균활성을 가진 것을 특징으로 하는 바실러스 속. 9-4 (Bacillus sp. 9-4 : 수탁번호 KCTC 18114P).
  2. 삭제
  3. 제1항에 기재된 바실러스 속. 9-4(Bacillus sp. 9-4 : 수탁번호 KCTC 18114P) 균주를 이용하여, 생청국장을 제조하고, 제조된 생청국장에 삶은 양파가 10~30중량% 되도록 가하여 절충식양파된장으로 제조되어짐을 특징으로 하는 바실러스 9-4균주(Bacillus sp. 9-4)를 이용한 양파된장.
  4. 제1항에 기재된 바실러스 속. 9-4(Bacillus sp. 9-4 : 수탁번호 KCTC 18114P) 균주를 이용하여, 콩알메주를 제조하고, 제조된 콩알메주를 사용하여 간장을 담근 후, 간장 가르기 공정에서 부산물로 얻어지는 콩알메주에 삶은 양파를 10~30중량% 되도록 가하여 재래식양파된장으로 제조되어짐을 특징으로 하는 바실러스 9-4균주(Bacillus sp. 9-4)를 이용한 양파된장.
KR1020060055819A 2006-06-21 2006-06-21 신규 바실러스 속 9-4 균주를 이용한 양파된장 KR100861468B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020060055819A KR100861468B1 (ko) 2006-06-21 2006-06-21 신규 바실러스 속 9-4 균주를 이용한 양파된장

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020060055819A KR100861468B1 (ko) 2006-06-21 2006-06-21 신규 바실러스 속 9-4 균주를 이용한 양파된장

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20070121143A KR20070121143A (ko) 2007-12-27
KR100861468B1 true KR100861468B1 (ko) 2008-10-02

Family

ID=39138584

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020060055819A KR100861468B1 (ko) 2006-06-21 2006-06-21 신규 바실러스 속 9-4 균주를 이용한 양파된장

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR100861468B1 (ko)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR19990072468A (ko) * 1998-02-06 1999-09-27 박석규 검정콩을이용한청국장및그제조방법
KR20030048975A (ko) * 2001-12-13 2003-06-25 삼성에버랜드 주식회사 저장성과 향미가 우수한 된장 및 이의 제조방법

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR19990072468A (ko) * 1998-02-06 1999-09-27 박석규 검정콩을이용한청국장및그제조방법
KR20030048975A (ko) * 2001-12-13 2003-06-25 삼성에버랜드 주식회사 저장성과 향미가 우수한 된장 및 이의 제조방법

Also Published As

Publication number Publication date
KR20070121143A (ko) 2007-12-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Mojsov New and future developments in microbial biotechnology and bioengineering
CN107849518B (zh) 植物内生细菌稻生芽孢杆菌以及使用其作为天然植物保护和植物增强的制剂
Lei et al. Degradation of cyanogenic glycosides by Lactobacillus plantarum strains from spontaneous cassava fermentation and other microorganisms
KR100864850B1 (ko) 혈전용해효소 및 점질물 생산력이 우수한 바실러스 서브틸리스 ha,이를 이용한 청국장 제조 방법 및 이에 의해 제조된 청국장
KR101919756B1 (ko) 신규한 미생물, 이를 포함하는 스타터 조성물 및 이로 발효된 발효물
KR102176920B1 (ko) 내염성 감마-글루타밀 트랜스펩티데이즈를 생산하는 신규한 호염성 바실러스 폴리퍼멘티쿠스 균주
KR101733967B1 (ko) 오르니틴을 함유하는 맥강 발효소재의 제조방법 및 그 제조방법에 의해 제조된 오르니틴을 함유하는 맥강 발효소재
CN105754895A (zh) 一株解淀粉芽孢杆菌及其应用
Sanni et al. Selection of starter cultures for the production of ugba, a fermented soup condiment
CN116855414B (zh) 一种贝莱斯芽孢杆菌及其在发酵豆制品中的应用
Mo et al. Isolation and characterization of Bacillus polyfermenticus isolated from Meju, Korean soybean fermentation starter
CN106119166B (zh) 一株瑞士乳酸菌及其应用
CN111040958B (zh) 具有多种生理功能活性的发酵产品的制备方法及其专用解淀粉芽孢杆菌
KR100861468B1 (ko) 신규 바실러스 속 9-4 균주를 이용한 양파된장
KR101926183B1 (ko) 안전성이 검증된 장류 발효 균주 및 이를 이용하여 제조된 장
JP2017209021A (ja) 新規な植物性乳酸菌
KR101684628B1 (ko) 비독성 신규 바실러스 서브틸리스 균주 및 이를 이용하여 발효시킨 장류
KR20050106303A (ko) 혈전용해능과 면역세포 활성기능이 우수한 바실러스 서브틸리스 chkj1339균주
JP2011041547A (ja) 新規な枯草菌株とその利用方法
KR100661707B1 (ko) 바실러스 서브틸리스 dji을 이용한 세균형 코오지 및 이를이용한 된장의 제조방법
JP2010246398A (ja) 新規抗菌性ペプチド
KR20160079388A (ko) 개량식 한식메주의 제조방법 및 이를 이용한 된장과 간장의 제조방법
KR100852984B1 (ko) 바실러스 속 씨에스 90 균주를 이용하여 제조된녹차죽염청국장 및 그의 제조방법
KR20080033664A (ko) 고효율 청국장 발효 균주 바실러스 서브틸리스 지24의 선별및 동정
KR102624205B1 (ko) 발효식품 제조용 락토바실러스 하비넨시스 브이에프

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
N231 Notification of change of applicant
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20120905

Year of fee payment: 5

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20130913

Year of fee payment: 6

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20140917

Year of fee payment: 7

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20150930

Year of fee payment: 8

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160920

Year of fee payment: 9

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20170926

Year of fee payment: 10

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20181024

Year of fee payment: 11

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20190923

Year of fee payment: 12