KR100848686B1 - A FERMENTED GINSENG COMPOSITION STRENGTHENED SIMULTANEOUSLY WITH γ-AMINOBUTYRIC ACID AND BIOCONVERSION SAPONIN BY LACTIC ACID BACTERIA - Google Patents

A FERMENTED GINSENG COMPOSITION STRENGTHENED SIMULTANEOUSLY WITH γ-AMINOBUTYRIC ACID AND BIOCONVERSION SAPONIN BY LACTIC ACID BACTERIA Download PDF

Info

Publication number
KR100848686B1
KR100848686B1 KR1020070043083A KR20070043083A KR100848686B1 KR 100848686 B1 KR100848686 B1 KR 100848686B1 KR 1020070043083 A KR1020070043083 A KR 1020070043083A KR 20070043083 A KR20070043083 A KR 20070043083A KR 100848686 B1 KR100848686 B1 KR 100848686B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
ginseng
bifidobacterium
ginsenoside
lactic acid
group
Prior art date
Application number
KR1020070043083A
Other languages
Korean (ko)
Other versions
KR20070052256A (en
Inventor
김동현
한명주
김상욱
Original Assignee
구안산업 주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 구안산업 주식회사 filed Critical 구안산업 주식회사
Priority to KR1020070043083A priority Critical patent/KR100848686B1/en
Publication of KR20070052256A publication Critical patent/KR20070052256A/en
Application granted granted Critical
Publication of KR100848686B1 publication Critical patent/KR100848686B1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/25Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
    • A61K36/258Panax (ginseng)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • A61K35/741Probiotics
    • A61K35/744Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20Pills, tablets, discs, rods
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate

Abstract

본 발명은 노인성 질환 예방 등 여러 생리활성 효과가 있는 감마-아미노부틸산과, 항암 및 항알러지 활성을 갖는 생물전환 사포닌, 즉 화합물 K, 진세노시드 Rh2, 진세노시드 Rk1, 및 진세노시드 Rh1으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 사포닌을 유산균 발효 기술을 이용하여 동시에 강화시킨 인삼 조성물, 그리고 인삼 또는 글루탐산 (또는 글루탐산염, 글루타민산) 첨가 인삼을 발효시키면서 감마-아미노부틸산 및 활성 사포닌의 함량을 증강시키는 방법에 관한 것으로, 식품 및 의약품 등에 이용할 수 있다. The present invention relates to gamma-aminobutyl acid having various physiological activities such as the prevention of senile diseases, and bioconverted saponins having anticancer and anti-allergic activities, that is, compound K, ginsenoside Rh2, ginsenoside Rk1, and ginsenoside Rh1. A method of enhancing the content of gamma-aminobutyric acid and active saponin while fermenting ginseng composition which simultaneously strengthens one or more saponins selected from the group consisting of lactic acid bacteria fermentation technology, and ginseng added with ginseng or glutamic acid (or glutamate, glutamic acid) The present invention relates to food, medicine, and the like.

인삼, 홍삼, 유산균, 발효, 사포닌, 화합물 K, 진세노시드 Rh2 Ginseng, Red ginseng, Lactobacillus, Fermentation, Saponin, Compound K, Ginsenoside Rh2

Description

유산균으로 감마-아미노부틸산과 생물전환 사포닌을 동시에 강화한 발효 인삼 조성물 {A FERMENTED GINSENG COMPOSITION STRENGTHENED SIMULTANEOUSLY WITH γ-AMINOBUTYRIC ACID AND BIOCONVERSION SAPONIN BY LACTIC ACID BACTERIA}Fermented ginseng composition which simultaneously enhanced gamma-aminobutyl acid and bioconverted saponin with lactic acid bacteria {A FERMENTED GINSENG COMPOSITION STRENGTHENED SIMULTANEOUSLY WITH γ-AMINOBUTYRIC ACID AND BIOCONVERSION SAPONIN BY LACTIC ACID BACTERIA}

본 발명은 노인성 질환 예방 등 여러 생리활성 효과가 있는 감마-아미노부틸산 (γ-aminobutyric acid, GABA)과, 항암 및 항알러지 활성을 갖는 생물전환 사포닌, 즉 화합물 K, 진세노시드 Rh2, 진세노시드 Rk1, 및 진세노시드 Rh1으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 사포닌을 유산균 발효 기술을 이용하여 동시에 강화한 인삼 조성물 및 상기 효과를 갖는 약학적 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 인삼 또는 글루탐산 (또는 글루탐산염, 글루타민산) 첨가 인삼을 발효시키면서 감마-아미노부틸산 및 활성 사포닌의 함량을 증강시키는 방법에 관한 것이다.The present invention relates to gamma-aminobutyric acid (GABA) having various physiologically active effects, such as the prevention of senile diseases, and bioconverted saponins having anticancer and anti-allergic activity, that is, compound K, ginsenoside Rh2, and ginsenosides. The present invention relates to a ginseng composition and a pharmaceutical composition having the above effect, wherein at least one saponin selected from the group consisting of seed Rk1 and ginsenoside Rh1 is simultaneously strengthened using a lactic acid bacterium fermentation technique. The present invention also relates to a method for enhancing the content of gamma-aminobutyl acid and active saponin while fermenting ginseng or glutamic acid (or glutamate, glutamic acid) added ginseng.

감마-아미노부틸산은 H2NCH2CH2COOH의 분자식을 가지고 있으며, 분자량이 103.12 인 아미노산의 유도체로, 뇌 등에 존재하는 신경전달물질의 하나이다. 감마-아미노부틸산은 뇌혈류 개선 및 뇌대사 증진 작용이 있으며, 정신안정, 뇌졸증, 머리외상 및 뇌동맥 휴유증에도 효과가 있고, 이 외에도 혈압저하 효과가 있어 고혈압 예방 효과도 있다 (Masashi 등, Nippon Nogeikagaku Kaishi, 61(11):1449~1451 (1987)). Gamma-aminobutyl acid has a molecular formula of H 2 NCH 2 CH 2 COOH, a derivative of an amino acid having a molecular weight of 103.12, and is one of neurotransmitters present in the brain and the like. Gamma-aminobutyric acid improves cerebral blood flow and enhances metabolism, and is effective in mental stability, stroke, head trauma, and cerebral artery restraint. In addition, it lowers blood pressure and prevents high blood pressure (Masashi et al., Nippon Nogeikagaku Kaishi). , 61 (11): 1449-1451 (1987)).

감마-아미노부틸산은 최근 의약품 또는 건강식품소재로 사용되고 있으며, 각종 야채, 과일, 쌀, 콩 같은 식물체에 널리 분포하는 것으로 알려져 있으나, 그 함량은 극히 낮아 생리활성 작용을 나타내지 못하는 것으로 알려져 있다. 그러나, 최근 일본에서 감마-아미노부틸산 함량을 높인 녹차, 쌀배아, 발아현미 등이 판매되고 있다. 감마-아미노부틸산 함량을 높이는 방법으로는 냉각 충격 (cold shock) 또는 기계적인 자극으로 콩잎의 감마-아미노부틸산의 함량을 20 ~ 40배 증가시키는 방법을 이용하였다. Gamma-aminobutyric acid has recently been used as a pharmaceutical or health food material and is widely known to be widely distributed in plants such as vegetables, fruits, rice, and soybeans, but its content is extremely low and does not show physiological activity. Recently, however, green tea, rice germ, germinated brown rice, etc., having a high gamma-aminobutyl acid content, have been sold in Japan. As a method of increasing the gamma-aminobutyl acid content, a method of increasing the content of gamma-aminobutyl acid in soybean leaves by 20-40 times by cold shock or mechanical stimulation was used.

일본에서 사용하고 있는 가바론 (GABARON) 차는 차잎 중 글루탐산 함량이 높은 차잎을 혐기적 처리 (이산화 탄소 처리)하여 GABA 함량을 높인 녹차 (Yusuke 등, Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi. 46(4):274∼277 (1999))와 혐기처리와 호기처리를 반복하여 GABA 함량을 높인 녹차 제품 (Yusuke 등, Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi. 46(7):462∼466 (1999))이 개발되었다. 국내에서도 녹차잎을 12 시간 정도 혐기처리하여 감마-아미노부틸산 함량을 증가시키는 방법이 개발되었다 (대한민국 특허공개 제 1999-0034313 호). GABARON tea used in Japan is a green tea (GAYRON, Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi. 46 (4): 274 ~) that has increased the GABA content by anaerobic treatment (carbon dioxide treatment) of tea leaves with high glutamic acid content. 277 (1999)) and green tea products with increased GABA content (Yusuke et al., Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi. 46 (7): 462-466 (1999)) were developed. In Korea, a method of increasing the gamma-aminobutyl acid content by anaerobic treatment of green tea leaves for about 12 hours has been developed (Korean Patent Publication No. 1999-0034313).

쌀에서도 GABA 함량을 높이기 위해 고압처리 방법 (Miwako 등, Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi. 46(5):329∼333 (1999))을, 물에 침지하는 방법(Takayo 등, J. Agric. Food Chem. 42:1122~1125 (1994))을 개발하였다.  In order to increase the GABA content in rice, a high pressure treatment method (Miwako et al., Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi. 46 (5): 329 to 333 (1999)), and a method of immersing in water (Takayo et al., J. Agric. Food Chem. 42: 1122-1125 (1994).

이외에도 대두에 이산화 질소 같은 기체로 혐기 처리하였을 때 GABA 함량을 높인 경우 (Mitsuaki 등, Nippon Shokuhin Kogyo Gakkaishi. 36(11):916~919 (1989)), 무잎을 혐기처리하여 GABA 함량을 증가시킨 경우 (John 등, Plant Physiol. 49:572∼578 (1972)) 등이 있으나, 인삼을 이용하여 GABA 함량을 증강시킨 예는 없다.In addition, when GABA content was increased by anaerobic treatment with gas such as nitrogen dioxide in soybean (Mitsuaki et al., Nippon Shokuhin Kogyo Gakkaishi. 36 (11): 916 ~ 919 (1989)), when GABA content was increased by anaerobic treatment of radish leaves. (John et al., Plant Physiol. 49: 572-578 (1972)), but there is no example of increasing the GABA content by using ginseng.

인삼은 식물 분류학상 오가과 인삼속에 속하는 다년생 숙근초로서 지구상에 약 11 종이 알려져 있으며, 대표적인 종의 예로는, 아시아 극동 지역 (북위 33 ~ 48 : 한국, 북만주, 러시아 일부)에 자생하며, 약효가 매우 우수한 고려 인삼 (Panax ginseng C.A.Meyer); 미국, 캐나다에서 자생 및 재배하고 있는 미국삼 (Panax quinquefolium L.); 중국 운남성 동남부로부터 광서성 서남부 지역에서 야생 또는 재배하고 있는 전칠삼 (Panax notoginseng F.H.Chen); 및, 일본, 중국 서남부, 네팔에 이르기까지 분포되어 있는 죽절삼 (Panax japonicus C.A.Meyer) 등이 있다.Ginseng is a perennial root of the genus Ginseng, which belongs to the genus Oga, according to the plant taxonomy. About 11 species of ginseng are known on the earth. For example, Ginseng is native to the Far East of Asia (North 33-48: Korea, North Manchuria, Russia) Excellent Goryeo ginseng ( Panax ginseng CAMeyer); American ginseng ( Panax quinquefolium L.) growing and growing in the United States and Canada; Panax notoginseng FHChen, wild or cultivated in southwestern Guangxi province from southeastern Yunnan Province of China; And Panax japonicus CAMeyer, which are distributed from Japan, southwest China, and Nepal.

인삼은 신농본초경에 상품으로 수재되어 있을 뿐만 아니라 예로부터 귀중한 보약으로 사용되어 오고 있다. 지금까지 많은 약리 실험을 통해 인삼은 스트레스에 대한 생체의 비특이적 저항성을 강화시키고 항산성 작용을 갖고 있음이 밝혀져 있다. 그 외에 고혈압의 개선, 인슐린 작용증강, 알록산 (ALLOXAN) 당뇨 마우스에서의 혈당강하효과, 흰 쥐의 간 RNA 합성, 단백질 합성, 당 및 지질대사 촉진효과, 항암효과 등이 있음이 밝혀졌다. Ginseng is not only stored as a commodity in the new agricultural plant, but has been used as a valuable medicine since ancient times. Many pharmacological experiments to date have revealed that ginseng strengthens the nonspecific resistance of the body to stress and has an acidic action. In addition, hypertension, insulin action enhancement, hypoglycemic effect in ALLOXAN diabetic mice, liver RNA synthesis in white rats, protein synthesis, sugar and lipid metabolism promoting effect, and anti-cancer effect.

상기 인삼은 주로 한국, 중국, 일본 등의 아시아 국가에서 생약의 형태로 정신 의학적 질병, 신경계의 질병 및 당뇨병 등의 여러 가지 질병에 대해 사용되어 왔으며, 상기 인삼의 주요 성분인 사포닌은 강장, 강정, 진정조형 및 항고혈압 등에 효과를 보이는 것으로 알려져 있다.The ginseng has been used for various diseases such as psychiatric diseases, diseases of the nervous system, and diabetes in the form of herbal medicine mainly in Asian countries such as Korea, China, Japan, and saponins, the main components of the ginseng, are tonic, gangjeong, It is known to have an effect on sedation molding and antihypertension.

현재 인삼의 사용은, 재배하여 채취한 상태 그대로의 수삼을 상온에서 건조시킨 백삼 또는 수삼을 98 ~ 100℃가열 처리하여 제조되는 홍삼, 또는 120 ~ 180℃에서 가열 처리하여 제조되는 선삼, 흑삼 등의 열처리 인삼의 형태로 사용되고 있다.Currently, the use of ginseng is red ginseng or ginseng, which is produced by heating white ginseng or ginseng, dried at room temperature, at a temperature of 98-100 ° C., or ginseng, black ginseng, which is prepared by heating at 120-180 ° C. It is used in the form of heat-treated ginseng.

한편, 인삼의 뿌리에는 약 4 ~ 10%의 인삼 사포닌 (한국산 인삼은 4 ~ 8%이고 미국삼은 4 ~ 10%임)이 함유되어 있는데, 상기 인삼 사포닌은 다양한 진세노시드들의 혼합물이며, 그 중 한국산에는 진세노시드 Rb1, Rc 및 Rg1의 함량이 비교적 높은 편이고 미국산에는 진세노시드 Rb1 및 Re의 함량이 비교적 높다.On the other hand, the root of ginseng contains about 4 to 10% of ginseng saponin (Korean ginseng is 4 to 8% and American ginseng is 4 to 10%). The ginseng saponin is a mixture of various ginsenosides, among which Ginsenosides Rb1, Rc and Rg1 are relatively high in Korea, while ginsenosides Rb1 and Re are relatively high in the United States.

인삼에 함유된 진세노시드 성분의 종류 및 그 약리학적 효능을 하기 표 1에 나타내었다.The types of ginsenoside components and their pharmacological efficacy contained in ginseng are shown in Table 1 below.

종류Kinds 효능efficacy 진세노시드-Rb1   Ginsenoside-Rb1 중추억제 및 정신안정, 중추성 섭식억제, 공격성 행동억제, 진통, 항경련, 항불안, 부신피질 자극홀몬과 코티코스테론 분비촉진, 콜레스테로 생합성촉진, 기억력 개선, 고코레스테롤과 중성지방 및 유리지방산의 저하, 신경세포생존촉진, 간상해 보호, 골수세포의 DNA, RNA, 단백질 및 지질합성 촉진, 아세칠콜린 방출촉진, 혈관 확장, 혈소판 응집억제, 지질과산화억제, 콜레스테롤 대사촉진, 항염증, 탐식기능활성화, 신장사구체 비대억제 등Central and mental stability, central feeding, aggression, analgesia, anticonvulsion, anti-anxiety, adrenal cortex stimulating hormone and corticosterone secretion, cholesterol biosynthesis, memory improvement, high cholesterol and triglycerides Lowering of fatty acids, promoting neuronal survival, protecting liver injury, promoting DNA, RNA, protein and lipid synthesis of bone marrow cells, promoting the release of acylcholine, vasodilation, inhibiting platelet aggregation, inhibiting lipid peroxidation, promoting cholesterol metabolism, anti-inflammatory, Activation of phagocytosis, inhibition of renal glomeruli 진세노시드-Rb2   Ginsenoside-Rb2 당 및 지방대사 촉진, 항당뇨 작용, 질소대사 평형유지, 단백질 및 지질합성촉진, 고콜레스테롤 저하 및 항동맥경화, 암독소 홀몬의 길항 작용, 평활근세포 증식억제, DNA, RNA, 부신피질자극홀몬 및 코티코스테론 분비촉진, 스트레스성 식욕감퇴개선, 종양혈관 신생억제, 항산화활성물질 생성촉진, 간조직의 ATP공급활성화, 면역조절, 콜레스테롤 대사촉진, 간세포증식 및 DNA합성 촉진, 혈소판 응집억제, 진통작용 등Promoting sugar and fat metabolism, antidiabetic action, maintaining nitrogen metabolism equilibrium, promoting protein and lipid synthesis, hypocholesterolemic and anti-arteriosclerosis, antagonism of cancer toxin hormone, inhibition of smooth muscle cell proliferation, DNA, RNA, corticosteroids and Promotes corticosterone secretion, improves stress appetite loss, suppresses tumor angiogenesis, promotes the production of antioxidant active substances, activates ATP supply of liver tissues, regulates cholesterol, promotes metabolism of cholesterol, promotes hepatocyte proliferation and DNA synthesis, suppresses platelet aggregation, and analgesic effect Etc 진세노시드-RcGinsenoside-Rc 간, 혈청콜레스테롤 및 RNA합성 촉진, 골수세포DNA, RNA, 단백질 및 지질합성 촉진, 진통작용, 코티코스테론 분비촉진, 프로스타사이클린 생합성 촉진, 신장사구체 비대억제 등Promotes liver, serum cholesterol and RNA synthesis, promotes bone marrow cell DNA, RNA, protein and lipid synthesis, analgesic activity, corticosteroid secretion, prostacyclin biosynthesis, renal glomeruli inhibition 진세노시드-RdGinsenoside-Rd 부신피질 자극홀몬 및 코티코스테론 분비촉진, 신장사구체비대억제 등Adrenal cortex stimulating hormone and corticosteroid secretion, renal glomeruli hypertrophy, etc. 진세노시드-Re Ginsenoside-Re 부신피질 자극홀몬 및 코티코스테론 분비촉진, 진통, 혈관 확장, 항 고온스트레스, 평활근 세포증식 억제, 골수세포 DNA, RNA, 단백질 및 지질합성 촉진, 간상해보호, 콜레스테롤 대사촉진 등Adrenal cortex stimulating hormone and corticosteroid secretion, analgesic, vasodilation, anti high temperature stress, smooth muscle cell proliferation inhibition, bone marrow cell DNA, RNA, protein and lipid synthesis promotion, liver injury protection, cholesterol metabolism promotion, etc. 진세노시드-Rg1  Ginsenoside-Rg1 면역기능 증강, 혈소판 응집억제, 항 트롬빈, 선용활성화, 기억 및 학습기능증진, 항피로, 항스트레스, 중추흥분, 혈관 확장, 항염증, 항신염 및 신혈류량 증대작용, 고온환경 및 내인성 발열물질 등 유해자극 방어작용, 스트레스성 서행동장해 개선, 신경세포 생존율 촉진, 간세포 증식과 DNA합성 촉진, 부신피질 자극홀몬 분비촉진, 콜레스테롤 대사촉진, 간장해 보호작용 등Immune function, platelet aggregation inhibition, antithrombin, good activation, memory and learning function, anti-fatigue, anti-stress, central excitement, vasodilation, anti-inflammatory, anti-nephritis and renal blood flow, high temperature environment and endogenous fever Protective actions against harmful stimuli, improvement of stress-induced slowdown, neuronal survival rate, hepatic cell proliferation and DNA synthesis, adrenal cortex stimulating hormone secretion, cholesterol metabolism, liver protection 진세노시드-Rh1Ginsenoside-Rh1 실험적 간상해 억제작용, 종양세포 분화촉진, 혈소판 응집억제, 선용활성화작용, 항염증효과, 항알러지효과 등Experimental anti-inflammatory effect, tumor cell differentiation promotion, platelet aggregation inhibition, glandular activation activity, anti-inflammatory effect, anti-allergic effect, etc. 진세노시드-Rh2 Ginsenoside-Rh2 암세포 증식억제, 암세포 재분화 유도촉진, 암세포 침윤억제, 종양증식 억제작용, 항암제의 항암활성 증대작용, 항알러지효과, 항염증 효과 등Inhibition of cancer cell proliferation, promotion of cancer cell regeneration, inhibition of cancer cell infiltration, inhibition of tumor growth, enhancement of anticancer activity of anticancer drugs, anti-allergic effect, anti-inflammatory effect, etc. 화합물 K Compound K 강력한 종양 혈관 신생 작용 및 암세포 전이 억제 작용, Ⅳ형 콜라게나아제 분비의 차단, 항-신생혈관형성 활성 및 혈소판 응집의 억제, 항알레르기 효과, 항알러지효과, 항염증 효과 등Potent tumor angiogenesis and cancer cell metastasis inhibition, type IV collagenase secretion, anti-angiogenic activity and platelet aggregation inhibition, anti-allergic effect, anti-allergic effect, anti-inflammatory effect

현재 알려진 바에 의하면, 인삼의 약리 효능을 나타내는 주성분인 진세노시드는 Rb1, Rb2 및 Rc의 사포닌들이다. +그러나, 실질적으로 항암 작용 또는 암세포의 암전이를 억제, 또는 항알르레기 작용에 관한 성분은 인삼에 극소량 함유되어 있는 화합물 K (20-O-β-D-글루코피라노실-20(S)-프로토파낙사디올), 진세노시드 Rh1 및 Rh2, 및 △20-진세노시드 Rh2 (진세노시드 Rk2와 진세노시드 Rh3의 혼합물)의 사포닌 성분인 것으로 알려져 있다. As is currently known, ginsenosides, the main constituents of the pharmacological efficacy of ginseng, are saponins of Rb1, Rb2 and Rc. However, the component K (20-O-β-D-glucopyranosyl-20 (S) -proto, which is substantially contained in ginseng, contains a component that substantially inhibits anticancer activity or cancer metastasis of cancer cells or antiallergic action. wave incident diol), ginsenoside Rh1 and Rh2 seed, and △ 20 - it is known that the saponin component of the seeding ginsenoside Rh2 (binary mixture of ginsenosides and ginsenoside seed Rk2 seed Rh3).

따라서, 인삼의 항암 작용, 항알레르기 작용 및 면역증강작용 등을 위한 사용을 위해서는, 상기 인삼에 전혀 함유되어 있지 않거나 극소량 함유되어 있는 사포닌인 화합물 K, 진세노시드 Rh1 및 Rh2, 및 △20-진세노시드 Rh2 의 사포닌 성분의 함량을 증가시켜 사용하는 것이 바람직하다. Therefore, for use for anticancer action, antiallergic action and immune enhancing action of ginseng, compounds K, ginsenosides Rh1 and Rh2, which are not contained in the ginseng at all or are contained in very small amounts, and Δ 20 -jin It is preferable to increase the content of the saponin component of the senoside Rh2.

유산균은 크게 락토바실러스, 비피도박테리움, 스타필로코커스, 로코노스톡 속 균주 등으로 분류하며, 발효형태에 따라 생성하는 유기산이 조금씩 다르나 공통적으로 젖산 (유산)을 생산한다. 유산균의 생리활성은 일반적으로 유해균의 증식 억제, 유당 불내성의 완화, 혈청 콜레스테롤의 저하작용, 항암작용, 면역작용, 설사 및 변비의 개선, 비타민 합성 등을 들 수 있다. 유산균 발효를 이용하는 종래의 기술로는 우유에 유산균을 접종하고 탈지분유를 첨가하여 유산균을 증식시킨 유산균 음료를 만드는 것이 보편화된 방법이다.Lactic acid bacteria are largely classified into Lactobacillus, Bifidobacterium, Staphylococcus, and Loconosstock strains, and the organic acids produced are slightly different depending on the fermentation type, but they produce lactic acid (lactic acid) in common. In general, the physiological activity of lactic acid bacteria includes inhibition of growth of harmful bacteria, alleviation of lactose intolerance, lowering of serum cholesterol, anticancer activity, immunity, diarrhea and constipation, and vitamin synthesis. Conventional techniques using lactic acid bacteria fermentation are commonly used to inoculate lactic acid bacteria in milk and add skim milk powder to make lactic acid bacteria beverages that have grown lactic acid bacteria.

유산균을 이용한 발효 식품 연구로는 쌀눈음료 (대한민국 특허출원 제 1996-042486 호), 과채발효엑기스가 함유된 호상 및 액상 대두유 유산균 발효유 제품 제조방법 (대한민국 특허출원 제 1997-01138 호), 스트렙토코커스 써머필러스와 비피도박테리아 롱검을 포함하는 경장(經腸)용 식이 조성물 (대한민국 특허출원 제 1998-0700579 호), 구기자를 이용한 요구르트의 제조 방법 (대한민국 특허출원 제 1997-0065382 호), 유산균 변이주를 이용한 우롱차 또는 홍차 발효 생균 음료의 제조 방법 (대한민국 특허 제 150394 호), 유산균발효밀감농축액의 제조방법 (대한민국 특허 제 218050 호), 마첨가에 의한 유산균 생육촉진 방법 (대한민국 특허 제 232907 호), 유산균을 함유하는 미숫가루 및 이의 제조 방법 (대한민국 특허공개 제 1997-0032448 호), 유산균을 이용한 현미호분 발효식품 제조 방법 (대한민국 특허공개 제 1997-0061120 호) 등이 있다. 그러나 인삼의 항암효과, 항알러지 효과 등의 생리활성이 높은 화합물 K, 진세노시드 Rh1, 진세노시드 Rh2, 및 진세노시드 Rk1으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 사포닌을 생산하면서, 동시에 GABA의 생산을 높이는 균주의 개발을 이용한 생리활성 강화 인삼 조성물의 제조가 가능하며, 이에 대해 지금까지는 보고된 것이 없다. Fermented food research using lactic acid bacteria includes rice eye drink (Korean Patent Application No. 1996-042486), method of manufacturing staple and liquid soybean oil lactic acid bacteria fermented milk products containing fruit fermented extract (Korean Patent Application No. 1997-01138), Streptococcus Summer Enteral dietary composition comprising Philus and Bifidobacterial long gum (Korean Patent Application No. 1998-0700579), Method of preparing yogurt using wolfberry (Korean Patent Application No. 1997-0065382), Lactobacillus strain Production method of oolong tea or black tea fermented probiotic beverage (Korean Patent No. 150394), Production method of lactic acid bacteria fermented concentrated concentrate (Korean Patent No. 218050), Lactic acid bacteria growth promotion method by adding additives (Korean Patent No. 232907), Lactic acid bacteria Rice Flour Containing Soluble Powder and Method for Manufacturing the Same (Korea Patent Publication No. 1997-0032448), Fermented Brown Rice Flour by Lactic Acid Bacteria And the like product manufacturing method (Republic of Korea Patent Publication No. 1997-0061120 call). However, while producing one or more saponins selected from the group consisting of compounds K, ginsenoside Rh1, ginsenoside Rh2, and ginsenoside Rk1, which have high physiological activities such as anti-cancer and anti-allergic effects of ginseng, It is possible to prepare a bioactive enhanced ginseng composition using the development of the height of the strain, which has not been reported so far.

그러나, 인삼을 이용한 GABA의 함량을 높이거나 GABA 함량의 증가와 동시에 화합물 K, 진세노시드 Rh2, 진세노시드 Rh1 또는 △20-진세노시드 Rh2 등과 같은 항암 또는 뇌허혈을 개선하는 인삼사포닌을 동시에 생산하는 것이 가능하므로 유산균으로 인삼을 발효하면서 화합물 K 및/또는 진세노시드 Rh2 및 GABA를 강화하는 발효 기술은 매우 유용하다고 할 수 있으며, 또한 노령화 시대에 대비한 식품으로 사용될 수 있을 것으로 예측할 수 있다. However, at the same time to increase the content of GABA or increase the content of GABA using ginseng and simultaneously produce ginseng saponins to improve anticancer or cerebral ischemia such as compound K, ginsenoside Rh2, ginsenoside Rh1 or △ 20 -ginsenoside Rh2 Since it is possible to ferment ginseng with lactic acid bacteria, fermentation technology for strengthening compound K and / or ginsenosides Rh2 and GABA can be said to be very useful, and can be used as food for the aging age.

이에, 본 발명자들 또한 인삼으로부터 GABA를 더욱 효율적으로 수득하는 연구를 수행한 결과, 유산균으로 발효시킴으로서 GABA의 함량의 증가함을 발견하고, 또한 동시에 화합물 K, 진세노시드 Rh1 및 진세노시드 Rh2, 및 △20-진세노시드 Rh2 의 사포닌 성분을 동시에 증가시키려는 많은 연구를 수행한 결과, 인삼을 유산균으로 발효시킴으로서 수득되는 인삼의 유산균 발효물에 GABA와 함께 화합물 K, 진세노시드 Rh1 및 진세노시드 Rh2, 및 △20-진세노시드 Rh2의 함량이 상당함을 발견하고 본 발명을 완성하기에 이르렀다. Accordingly, the present inventors also conducted a study to obtain GABA from ginseng more efficiently, and found that the content of GABA was increased by fermentation with lactic acid bacteria, and at the same time, the compound K, ginsenoside Rh1 and ginsenoside Rh2, and △ 20 - ginsenoside seed a result of the studies to increase the saponin component of Rh2 at the same time, the compounds with GABA in the lactic acid fermentation of ginseng obtained sikimeuroseo fermented ginseng as lactic acid K, ginsenoside seed Rh1 and ginsenoside seed Rh2, and △ 20 - found to be true is equivalent to the content of ginsenoside Rh2 oxide and completed the present invention.

따라서, 본 발명의 목적은 간장 보호, 고지혈증 또는 항산화 효능 등 새로운 생리활성을 갖는 인삼 또는 홍삼의 유산균 발효 조성물을 제공하는 것이다.Accordingly, it is an object of the present invention to provide a lactic acid bacterium fermentation composition of ginseng or red ginseng having new physiological activities such as liver protection, hyperlipidemia or antioxidant efficacy.

또한, 본 발명의 다른 목적은 상기 유산균 발효 조성물을 함유하는 요구르트 등의 식품을 제공하는 것이다.In addition, another object of the present invention is to provide a food such as yogurt containing the lactic acid bacteria fermentation composition.

또한, 본 발명의 또 다른 목적은 상기 유산균 발효 조성물을 수득하기 위해 사용되는 유산균을 제공하는 것이다. In addition, another object of the present invention is to provide a lactic acid bacteria used to obtain the lactic acid bacteria fermentation composition.

본 발명의 한 태양에서, 인삼을 유산균으로 발효시켜 감마-아미노부틸산의 함량을 증가시킨 조성물을 제공한다. In one aspect of the invention, ginseng is fermented with lactic acid bacteria to provide a composition wherein the content of gamma-aminobutyl acid is increased.

또한, 본 발명은 상기 감마-아미노부틸산과 함께, 화합물 K, △20-진세노시드 Rh2, 진세노시드 Rh1, 진세노시드 Rh2, 프록토파낙사디올 또는 프록토파낙사트리올을 포함하는 활성 사포닌의 함량을 증가시킨 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a compound K, Δ 20 -ginsenoside Rh2, ginsenoside Rh1, ginsenoside Rh2, protophanacanadiol or protopanaxatriol of the active saponin together with the gamma-aminobutyl acid Provided are compositions with increased content.

본 발명의 또 다른 태양에서, 상기 조성물은 간장 보호, 고지혈증 또는 항산화 효능을 갖는 조성물이다. In another aspect of the invention, the composition is a composition having hepatic protection, hyperlipidemia or antioxidant efficacy.

또한, 본 발명의 한 태양은 인삼에 글루탐산 또는 글루탐산염 1 ~ 5%를 첨가하고 유산균을 접종하여 1 시간 ~ 96시간 발효시켜 만든 조성물이다. In addition, one embodiment of the present invention is a composition made by adding 1 to 5% glutamic acid or glutamate to ginseng and inoculated with lactic acid bacteria to ferment for 1 to 96 hours.

본 발명의 또 다른 태양은 상기 조성물에서 홍삼을 사용하여 유산균으로 발효시킨 조성물이다. Another aspect of the invention is a composition fermented with lactic acid bacteria using red ginseng in the composition.

또한 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 건강식품, 갱년기 및 노인성 식품, 미용식품 등의 식품; 정제, 캡슐제 등의 의약품; 그리고 이들을 소재로 이용하는 가공가능한 관련 인삼 제품을 제공한다.In addition, the present invention is a food, such as health food, menopausal and senile foods, beauty foods comprising the composition; Medicines such as tablets and capsules; And it provides processed ginseng related products using them as a material.

본 발명에 사용될 수 있는 유산균으로는 인삼 사포닌을 인삼 사포닌을 대사시켜 생물전환체인 화합물 K 또는 진세노시드 Rh2를 생성시킬 수 있는 것이면 어느 것이나 가능하며, 바람직하게는 비피도박테리움 속 유산균, 좀 더 바람직하게는 비피도박테리움 인판티스, 비피도박테리움 비피둠, 락토바실러스 락티스, 클로스트리디움 부티리쿰, 비피도박테리움 K-103 (경희대 약대 김동현 교수실, Arch. Pharm. Res., 21, p 54~61, 1998 참조), 비피도박테리움 K-506 (경희대 약대 김동현 교수실, Arch. Pharm. Res., 21, p 54~61, 1998 참조) 비피도박테리움 K-513 (경희대 약대 김동현 교수실, Arch. Pharm. Res., 21, p 54~61, 1998 참조), 비피도박테리움 KK-1 (기탁번호: KCCM 10364), 비피도박테리움 KK-2 (기탁번호: KCCM 10365)의 유산균 중에서 선택된 하나 또는 이들의 혼합 균주를 사용할 수 있다. The lactic acid bacteria that can be used in the present invention can be any of those that can metabolize ginseng saponin to produce a bioconverter compound K or ginsenoside Rh2, preferably lactic acid bacteria of Bifidobacterium, more Preferably, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bipidum, Lactobacillus lactis, Clostridium butyricum, Bifidobacterium K-103 (Kim, Kyung Hee University, Dong-Hyun Kim, Arch. Pharm. Res., 21, p 54 ~ 61, 1998), B-Pidobacterium K-506 (Kim, Kyung-Hee University, Dong-Hyun Kim, Arch. Pharm.Res., 21, p 54-61, 1998) BP-Dobacterium K-513 (Kyung-Hee University, Kim Dong-Hyun) Prof. Arch. Pharm.Res., 21, p 54-61, 1998), Bifidobacterium KK-1 (Accession No .: KCCM 10364), Bifidobacterium KK-2 (Accession No .: KCCM 10365) One or a mixed strain thereof selected from the lactic acid bacteria can be used.

본 발명의 조성물은 통상의 방법에 따른 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 추가로 포함할 수 있다. The compositions of the present invention may further comprise suitable carriers, excipients and diluents according to conventional methods.

본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시 벤조에이트, 프로필히드록시 벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. Carriers, excipients and diluents that may be included in the compositions of the present invention include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, Methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxy benzoate, propylhydroxy benzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil.

본 발명의 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. The compositions of the present invention may be used in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols and the like, oral formulations, external preparations, suppositories, and sterile injectable solutions, respectively, according to conventional methods. .

본 발명의 조성물의 사용량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 0.1 내지 100 mg/kg의 양을 하루 1회 내지 수회 투여할 수 있다. 또한, 그 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. The amount of the composition of the present invention may vary depending on the age, sex, and weight of the patient, but the amount of 0.1 to 100 mg / kg may be administered once to several times a day. In addition, the dosage may be increased or decreased depending on the route of administration, degree of disease, sex, weight, age, and the like. Therefore, the above dosage does not limit the scope of the present invention in any aspect.

본 발명의 조성물은 상기와 같은 제형으로 간장 보호, 고지혈증 또는 항산화 효능을 갖는 약제, 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 인삼 발효 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들면 각종 건강식품, 갱년기 및 노인성 식품, 미용식품 등의 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제 등을 포함한다. 상기 조성물은 독성 및 부작용이 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다. 상기 식품에 첨가될 수 있는 조성물의 양은 일반적으로 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 식품 건 강 음료 조성물은 100 ml을 기준으로 0.02 ~ 10 g, 바람직하게는 0.3 ~ 1 g의 비율로 가할 수 있다. The composition of the present invention may be used in various forms such as drugs, foods and beverages having hepatoprotective, hyperlipidemic or antioxidant efficacy. Examples of the food to which the ginseng fermentation composition can be added include various foods such as various health foods, menopausal and senile foods, beauty foods, beverages, gums, teas, vitamin complexes, and the like. Since the composition has little toxicity and side effects, it is a drug that can be used safely even for long-term administration for the purpose of prevention. The amount of the composition that can be added to the food may generally be added in 0.01 to 15% by weight of the total food weight, the food dry beverage composition is 0.02 to 10 g, preferably 0.3 to 1 g based on 100 ml Can be added in proportion.

본 발명의 건강 음료 조성물의 액체 성분에는 특별한 제한점은 없으며, 통상의 음료와 같이 여러가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 포함할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예들로 모노사카라이드, 예를 들면 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들면 말토오스, 수크로오스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들면 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리스리톨 등의 당알콜을 포함한다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제 (타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들면 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등) 를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ml 당 일반적으로 약 1 ~ 20 g, 바람직하게는 약 5 ~ 12 g 이다. The liquid component of the health beverage composition of the present invention is not particularly limited, and may include various flavors or natural carbohydrates, etc. as additional ingredients, as in a conventional beverage. Examples of the natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose and the like; And conventional sugars such as polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, erythritol and the like. As flavoring agents other than those mentioned above, natural flavoring agents (tauumatin, stevia extract (e.g., Rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used. The proportion of said natural carbohydrate is generally about 1-20 g, preferably about 5-12 g per 100 ml of the composition of the present invention.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제 (치즈, 초콜렛 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안저화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만, 본 발명의 조성물 100 중량부 당 약 20 중량부 이하의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다. In addition to the above, the composition of the present invention includes various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavors such as synthetic flavors and natural flavors, colorants and enhancers (such as cheese, chocolate), pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, Organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents used in carbonated beverages, and the like. In addition, the composition of the present invention may include a natural fruit juice and a pulp for the production of fruit juice drinks and vegetable drinks. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not so critical, but is generally selected in the range of about 20 parts by weight or less per 100 parts by weight of the composition of the present invention.

본 발명은 다음의 실시예에 의거하여 더욱 상세히 설명되나, 본 발명이 이에 의해 제한되지는 않는다. The present invention is described in more detail based on the following examples, although the present invention is not limited thereto.

시험예 1. 감마-아미노부틸산 측정 Test Example 1 Determination of Gamma-Aminobutyl Acid

메틸알콜 400 ㎕가 들어 있는 튜브에 약 0.03 g의 유산균 발효물을 넣고 정확히 무게를 측정한 다음, 55℃를 유지하는 수욕 (water bath)에서 약 2 ~ 3시간 동안 메틸알콜을 휘발시켰다. 이렇게 제조한 시료에 70 mM LaCl3 1000 ㎕를 첨가한 후 잘 혼합, 교반한 다음 11,000 rpm에서 5분 동안 원심 분리하였다. 원심분리하면 감마-아미노부틸산이 들어있는 상등액을 얻을 수 있다. 1.0 M KOH 160 ㎕가 있는 또 다른 튜브에 원심분리한 상등액 800 ㎕를 첨가하여 잘 교반한 다음 11,000 rpm에서 5분 동안 다시 원심 분리하였다. 상등액 550 ㎕, 0.5 M K4P2O7 200 ㎕, 4 mM NADP+ 150 ㎕, 2.5 units GABASE/mL 50 ㎕를 일회용 큐벳(cuvette)에 차례로 넣고 잘 혼합한 후 340 nm에서 흡광도를 측정하였다. 흡광도를 측정한 다음 α-KG를 첨가하여 잘 혼합하여 한시간 후 340 nm에서 흡광도를 측정하여 감마-아미노부틸산 함량을 계산하였다. 이 시험예는 모든 실시예에서 수행한 감마-아미노부틸산 측정 방법에 사용하였으며, 시험예는 Guijin 등이 시험한 방법 (Guojin, Z. and Alan, W.B. The Rapid Determintion of γ-Aminobutyric Acid. Phytochemistry. 44(6):1007∼1009 (1997))에 준하여 시행한 것이다. About 0.03 g of lactic acid bacteria fermentate was added to a tube containing 400 μl of methyl alcohol and accurately weighed, and then methyl alcohol was volatilized for about 2 to 3 hours in a water bath maintained at 55 ° C. 1000 μl of 70 mM LaCl 3 was added to the sample thus prepared, followed by well mixing and stirring, followed by centrifugation at 11,000 rpm for 5 minutes. Centrifugation yields a supernatant containing gamma-aminobutyl acid. To another tube with 160 μl of 1.0 M KOH, 800 μl of the supernatant was centrifuged and stirred well, followed by centrifugation for 5 minutes at 11,000 rpm. 550 μl of the supernatant, 200 μl of 0.5 MK 4 P 2 O 7 , 150 μl of 4 mM NADP + 150 μl, and 50 units of 2.5 units GABASE / mL were placed in a disposable cuvette, mixed well, and absorbance was measured at 340 nm. The absorbance was measured and then mixed well with the addition of α-KG. After one hour, the absorbance was measured at 340 nm to calculate the gamma-aminobutyl acid content. This test example was used for the gamma-aminobutyl acid measurement method performed in all the examples, the test example was tested by Guijin et al. (Guojin, Z. and Alan, WB The Rapid Determintion of γ-Aminobutyric Acid.Phytochemistry. 44 (6): 1007-1009 (1997).

시험예 2. 사포닌 성분의 함량분석Test Example 2 Content Analysis of Saponin Components

인삼 및 발효인삼 동결건조물 1 g 씩을 취하여 메탄올 100 ㎖ 씩으로 3회 추출하고, 농축시킨 후에 물에 현탁시키고, 에테르 100 ㎖ 씩으로 3회 추출하였다. 이어서, 부탄올 100 ㎖ 씩으로 3회 추출한 후에 부탄올 분획을 농축시키고, 수득된 농축물을 메탄올에 용해시켜 TLC로 분석 (용매로는 CHCl3: MeOH:H2O = 65:35:10의 하층 용액, 발색시약으로는 MeOH 중의 5% 황산 용액, 검출기로는 Shimadzu TLC scanner CS-9301PC를 사용)하여 함량을 계산하였다. 성분함량의 함량은 인삼 중에 함유된 각 성분의 함량으로 계산하였다.1 g each of ginseng and fermented ginseng lyophilisate was extracted, extracted three times with 100 ml of methanol, concentrated, suspended in water, and extracted three times with 100 ml of ether. Then, after extracting three times with 100 mL of butanol, the butanol fraction was concentrated, and the obtained concentrate was dissolved in methanol and analyzed by TLC (as solvent, a lower layer solution of CHCl 3 : MeOH: H 2 O = 65:35:10, 5% sulfuric acid solution in MeOH and Shimadzu TLC scanner CS-9301PC were used as a coloring reagent. The content of ingredient was calculated by the content of each ingredient contained in ginseng.

실시예 1. 유산균으로 발효한 인삼의 감마-아미노부틸산 및 활성사포닌의 생성량Example 1 Production of Gamma-Aminobutyl Acid and Active Saponin of Ginseng Fermented with Lactic Acid Bacteria

수삼을 건조하여 70% 주정 (또는 물)으로 30 ~ 90℃, 바람직하게는 60℃에서 추출하여 얻은 인삼엑기스 (건조분말 3 g)을 물 100 ㎖에 현탁하고 시판되거나 새로 분리한 유산균 (습중량 10 mg ~ 3 g, 바람직하게는 1 g)으로 37℃에서 3시간 ~ 72시간, 바람직하게는 24시간 발효시키고 동결건조하여 분말을 얻는다. Ginseng extract (3 g dry powder) obtained by drying ginseng extracted at 30-90 ° C, preferably 60 ° C with 70% alcohol (or water), suspended in 100 ml of water and commercially available or newly isolated lactic acid bacteria (wet weight) 10 mg to 3 g, preferably 1 g) is fermented at 37 ° C. for 3 hours to 72 hours, preferably 24 hours and lyophilized to obtain a powder.

유산균 종류에 따른 발효 인삼의 GABA 생성 및 인삼사포닌의 생물 전환량Production of GABA and Bioconversion of Ginseng Saponin According to Lactic Acid Bacteria 인삼 발효 유산균Ginseng Fermented Lactic Acid Bacteria 함량 (%)content (%) GABAGABA G-Rb1G-Rb1 G-Rg3G-Rg3 C-KC-K G-Rh2G-Rh2 20G-Rh220 G-Rh2 None (발효하지 않은 인삼) Lactobacillus acidophillus L. bulgaricus B. breve K-110 B. longum H-1 B.infantis KCTC 3226 Str. faecalis Leuconstoc mesentroides None Lactobacillus acidophillus L. bulgaricus B. breve K-110 B. longum H-1 B.infantis KCTC 3226 Str. faecalis Leuconstoc mesentroides 0.02 0.03 0.03 0.04 0.03 0.05 0.03 0.030.02 0.03 0.03 0.04 0.03 0.05 0.03 0.03 1.22 0.89 0.92 0.65 0.12 0.34 0.65 0.871.22 0.89 0.92 0.65 0.12 0.34 0.65 0.87 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01 0 >0.01 >0.01 0.05 0.43 0.04 0.02 0.020> 0.01> 0.01 0.05 0.43 0.04 0.02 0.02 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 0.01 >0.01 >0.01 >0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01 0.01> 0.01> 0.01> 0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01

발효하지 않은 인삼과 비교해서 유산균으로 발효시킨 결과 GABA의 함량이 50 ~ 150% 증가하였으며 동시에 활성 사포닌이 증가하였고 특히 인삼에는 전혀 함유되어 있지 않았던 화합물 K가 상당량 증가하였다. Fermentation with lactic acid bacteria compared to the non-fermented ginseng resulted in an increase of 50-150% of GABA, an increase in active saponins, and a significant increase in compound K, which was not contained in ginseng.

실시예 2. 유산균으로 발효한 홍삼의 감마-아미노부틸산 및 활성사포닌의 생성량Example 2 Production of Gamma-Aminobutyl Acid and Active Saponin of Red Ginseng Fermented with Lactic Acid Bacteria

수삼을 90 ~ 100℃에서 찌고 건조하여 제조한 홍삼을 50 ~ 100% 주정 또는 물, 바람직하게는 70% 주정으로 30 ~ 90℃, 바람직하게는 60℃에서 추출하여 얻은 홍삼엑스 (건조분말 3 g)을 물 100 ㎖에 현탁하고 시판되거나 새로 분리한 유산균 습중량 10 mg ~ 3 g, 바람직하게는 1 g으로 37℃에서 3시간 ~ 72시간, 바람직하게는 24시간 발효시키고 동결건조하여 분말을 얻는다. Red ginseng prepared by steaming and drying the ginseng at 90 to 100 ° C, extracted from 50 to 100% alcohol or water, preferably 70% alcohol at 30 to 90 ° C, preferably 60 ° C (3 g dry powder) ) Is suspended in 100 ml of water and fermented and lyophilized at 37 ° C. for 3 hours to 72 hours, preferably 24 hours at a commercial or newly isolated lactic acid bacterium wet weight of 10 mg to 3 g, preferably 1 g. .

유산균 종류에 따른 발효 홍삼의 GABA 생성 및 인삼사포닌의 생물전환량 Production of GABA and Bioconversion of Ginseng Saponin by Fermented Red Ginseng 홍삼 발효 유산균Red ginseng fermented lactic acid bacteria 함량 (%)content (%) GABAGABA G-Rb1G-Rb1 G-Rg3G-Rg3 C-KC-K G-Rh2G-Rh2 20G-Rh220 G-Rh2 None (발효하지않은 인삼) Lactobacillus acidophillus L. bulgaricus B. breve K-110 B. longum H-1 B.infantis KCTC 3226 Str. faecalis Leuconstoc mesentroides None Ginseng Lactobacillus acidophillus L. bulgaricus B. breve K-110 B. longum H-1 B.infantis KCTC 3226 Str. faecalis Leuconstoc mesentroides 0.006 0.007 0.008 0.013 0.010 0.018 0.010 0.0090.006 0.007 0.008 0.013 0.010 0.018 0.010 0.009 0.35 0.21 0.19 0.11 0.06 0.09 0.21 0.180.35 0.21 0.19 0.11 0.06 0.09 0.21 0.18 1.4 0.89 0.92 0.49 0.32 0.59 0.91 1.011.4 0.89 0.92 0.49 0.32 0.59 0.91 1.01 >0.01 >0.01 >0.01 0.01 0.08 0.01 0.01 >0.01> 0.01> 0.01> 0.01 0.01 0.08 0.01 0.01> 0.01 >0.01 0.02 0.03 0.12 0.52 0.43 0.04 0.05> 0.01 0.02 0.03 0.12 0.52 0.43 0.04 0.05 >0.01 0.01 0.01 0.03 0.12 0.07 0.01 0.01> 0.01 0.01 0.01 0.03 0.12 0.07 0.01 0.01

발효하지 않은 홍삼과 비교해서 유산균으로 발효시킨 결과 GABA의 함량이 18 ~ 200% 증가하였으며, 동시에 활성 사포닌이 증가하였고, 특히 인삼에는 전혀 함유되어 있지 않았던 화합물 K와, 미량 함유하고 있던 진세노시드 Rh2, △20-진세노시드 Rh2가 상당량 증가하였다. Fermentation with lactic acid bacteria compared to unfermented red ginseng resulted in an increase in GABA content by 18-200%, and at the same time an increase in active saponins, especially compound K, which was not contained in ginseng, and ginsenoside Rh2 in trace amounts. , △ 20 - Gene were seeded ginsenoside Rh2 is increased a significant amount.

실시예 3. 유산균으로 발효한 글루탐산 함유 인삼의 감마-아미노부틸산 및 활성사포닌의 생성량Example 3 Production of Gamma-Aminobutyl Acid and Active Saponin of Glutamic Acid-Containing Ginseng Fermented with Lactic Acid Bacteria

수삼을 건조하여 70% 주정 (또는 물)으로 30 ~ 90℃, 바람직하게는 60℃에서 추출하여 얻은 인삼엑스 (건조분말 3 g) 및 1 그램의 글루탐산을 물 100 ㎖에 현탁하고 시판되거나 새로 분리한 유산균 습중량 10 mg ~ 3g, 바람직하게는 1 g으로 37℃에서 3시간 ~ 72시간, 바람직하게는 24시간 발효시키고 동결건조하여 분말을 얻는다. Ginseng extract (3 g of dry powder) and 1 gram of glutamic acid obtained by drying the ginseng at 30 to 90 ° C., preferably 60 ° C., with 70% alcohol (or water) are suspended in 100 ml of water and sold or newly separated. A lactic acid bacterium is fermented at a wet weight of 10 mg to 3 g, preferably 1 g at 37 ° C. for 3 hours to 72 hours, preferably 24 hours, and lyophilized to obtain a powder.

유산균 종류에 따른 글루탐산 함유 인삼의 GABA 생성 및 인삼사포닌의 생물전환량 GABA Production and Glutamic Acid Conversion of Ginseng Saponin by Glutamic Acid 인삼 발효 유산균Ginseng Fermented Lactic Acid Bacteria 함량 (%) content (%) GABAGABA G-Rb1G-Rb1 G-Rg3G-Rg3 C-KC-K G-Rh2G-Rh2 20G-Rh220 G-Rh2 None (발효하지않은 인삼) Lactobacillus acidophillus L. bulgaricus B. breve K-110 B. longum H-1 B.infantis KCTC 3226 Str. faecalis Leuconstoc mesentroides None Ginseng Lactobacillus acidophillus L. bulgaricus B. breve K-110 B. longum H-1 B.infantis KCTC 3226 Str. faecalis Leuconstoc mesentroides 0.02 0.08 0.07 0.12 0.09 0.18 0.19 0.110.02 0.08 0.07 0.12 0.09 0.18 0.19 0.11 1.22 0.95 0.12 0.55 0.12 0.52 0.65 0.971.22 0.95 0.12 0.55 0.12 0.52 0.65 0.97 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01 0 >0.01 >0.01 0.06 0.56 0.06 0.02 0.010> 0.01> 0.01 0.06 0.56 0.06 0.02 0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 0.01 >0.01 0.01 >0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01 0.01> 0.01 0.01> 0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01 >0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01> 0.01

발효하지 않은 인삼과 비교해서 글루탐산을 1% 첨가한 인삼을 유산균으로 발효시킨 결과 GABA의 함량이 300% ~ 850% 까지 증가하였으며, 동시에 활성 사포닌이 증가하였고, 특히 인삼에는 전혀 함유되어 있지 않았던 화합물 K 등이 상당량 증가하였다. Lactic acid bacteria fermented ginseng with 1% glutamic acid compared to untreated fermented ginseng increased GABA content from 300% to 850%, and at the same time increased active saponins, especially compound K, which was not contained at all. And back increased considerably.

실시예 4. 유산균으로 발효한 홍삼의 감마-아미노부틸산 및 활성사포닌의 생성량Example 4 Production of Gamma-Aminobutyl Acid and Active Saponin of Red Ginseng Fermented with Lactic Acid Bacteria

수삼을 90 ~ 100℃에서 찌고 건조하여 제조한 홍삼을 50-100% 주정 또는 물, 바람직하게는 70% 주정으로 30 ~ 90℃, 바람직하게는 60℃에서 추출하여 얻은 홍삼엑스 (건조분말 3 g) 및 글루탐산을 물 100 ㎖에 현탁하고 시판되거나 새로 분리한 유산균 (습중량 10 mg ~3 g, 바람직하게는 1 g)으로 37℃에서 3시간 ~ 72시간, 바람직하게는 24시간 발효시키고 동결건조하여 분말을 얻는다. Red ginseng prepared by steaming and drying ginseng at 90 to 100 ° C, extracted from 50-100% alcohol or water, preferably 70% alcohol, at 30 to 90 ° C, preferably 60 ° C (3 g dry powder) ) And glutamic acid are suspended in 100 ml of water and fermented at 37 ° C. for 3 hours to 72 hours, preferably 24 hours with commercially available or newly isolated lactic acid bacteria (wet weight 10 mg to 3 g, preferably 1 g). To obtain a powder.

유산균 종류에 따른 글루탐산 함유 발효 홍삼의 GABA 생성 및 인삼사포닌의 생물전환량 GABA Production of Glutamic Acid-Contained Red Ginseng and Bioconversion of Ginseng Saponin by Lactic Acid Bacteria 홍삼 발효 유산균Red ginseng fermented lactic acid bacteria 함량 (%)content (%) GABAGABA G-Rb1G-Rb1 G-Rg3G-Rg3 C-KC-K G-Rh2G-Rh2 20G-Rh220 G-Rh2 None (발효하지않은 인삼) Lactobacillus acidophillus L. bulgaricus B. breve K-110 B. longum H-1 B.infantis KCTC 3226 Str. faecalis Leuconstoc mesentroides None Ginseng Lactobacillus acidophillus L. bulgaricus B. breve K-110 B. longum H-1 B.infantis KCTC 3226 Str. faecalis Leuconstoc mesentroides 0.006 0.012 0.017 0.108 0.101 0.178 0.162 0.0950.006 0.012 0.017 0.108 0.101 0.178 0.162 0.095 0.35 0.29 0.21 0.15 0.05 0.11 0.19 0.180.35 0.29 0.21 0.15 0.05 0.11 0.19 0.18 1.4 0.101 0.95 0.51 0.32 0.49 0.89 1.011.4 0.101 0.95 0.51 0.32 0.49 0.89 1.01 >0.01 >0.01 >0.01 0.02 0.11 0.01 0.01 >0.01> 0.01> 0.01> 0.01 0.02 0.11 0.01 0.01> 0.01 >0.01 0.01 0.02 0.11 0.58 0.32 0.04 0.05> 0.01 0.01 0.02 0.11 0.58 0.32 0.04 0.05 >0.01 0.01 0.01 0.02 0.10 0.05 0.01 0.01> 0.01 0.01 0.01 0.02 0.10 0.05 0.01 0.01

발효하지 않은 홍삼과 비교해서 1% 글루탐산을 첨가한 인삼을 유산균으로 발효시킨 결과 GABA의 함량이 100 ~ 12,867% 증가하였으며, 동시에 활성 사포닌이 증가하였고, 특히 인삼에는 전혀 함유되어 있지 않았던 화합물 K와 미량 함유되어 있던 진세노시드 Rh2, △20-진세노시드 Rh2가 상당량 증가하였다. Lactic acid bacteria fermented ginseng with 1% glutamic acid to lactic acid bacteria compared with unfermented red ginseng increased GABA content by 100 to 12,867%, and at the same time increased active saponins, especially compounds K and traces not contained in ginseng. was added ginsenoside Rh2 increased seed significant amounts - that is contained ginsenoside Rh2 seed, △ 20.

실험예 1. 유산균 B. longum H-1으로 GABA 및 인삼사포닌 생물전환을 강화한 발효인삼의 간장 손상 보호 효과 Experimental Example 1. Protective effect of hepatic impairment of fermented ginseng supplemented with GABA and ginseng saponin bioconversion with B. longum H-1

흰쥐 (숫놈, 180 ~ 200 g) 1군을 6마리로 하여 100 g당 20% 사염화탄소 (올리브유로 희석)을 1 ㎖ 씩 경구투여하고, 30분 후에 인삼 또는 인삼발효물을 경구투여하였다. 사염화 탄소 투여 24시간 후에 심장 채혈하여 혈중 아스파테이트 아미노트랜스퍼라제 (AST), 및 알라닌 아미노트랜스퍼라제 (ALT) 활성을 측정하였다.Six groups of rats (male, 180-200 g) were administered orally with 1 ml of 20% carbon tetrachloride (diluted with olive oil) per 100 g, followed by oral administration of ginseng or ginseng fermented product after 30 minutes. 24 hours after administration of carbon tetrachloride, blood was drawn to measure blood aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) activity.

투여용량 (mg/kg)Dosage (mg / kg) 혈중 농도 (Karmen unit)Blood concentration (Karmen unit) ASTAST ALTALT NoneNone -- 609±19609 ± 19 203±235203 ± 235 사염화탄소 처리군Carbon tetrachloride treated group -- 2306±309# 2306 ± 309 # 1294±161# 1294 ± 161 # 사염화탄소 및 인삼처리군Carbon tetrachloride and ginseng treatment group 100 경구투여100 oral administration 1523±238* 1523 ± 238 * 825±132* 825 ± 132 * 사염화탄소 및 인삼발효처리군Carbon tetrachloride and ginseng fermentation group 100 경구투여100 oral administration 1154±281* 1154 ± 281 * 613±189* 613 ± 189 * 사염화탄소 및 글루탐산첨가 인삼 발효물 처리군Carbon tetrachloride and glutamic acid added ginseng fermented group 100 경구투여100 oral administration 1282±115* 1282 ± 115 * 712±167* 712 ± 167 * 사염화탄소 및 홍삼처리군Carbon tetrachloride and red ginseng treatment group 100 경구투여100 oral administration 1489±216* 1489 ± 216 * 712±99* 712 ± 99 * 사염화탄소 및 홍삼발효처리군Carbon tetrachloride and red ginseng fermentation group 100 경구투여100 oral administration 1221±145* 1221 ± 145 * 809±179* 809 ± 179 * 사염화탄소 및 글루탐산첨가 홍삼 발효물 처리군Carbon tetrachloride and glutamic acid added red ginseng fermented group 100 경구투여100 oral administration 1256±298* 1256 ± 298 * 735±319* 735 ± 319 * 사염화탄소 및 실리마린 처리군Carbon Tetrachloride And Silymarin Treatment Group 100 경구투여100 oral administration 1344±630* 1344 ± 630 * 816±235* 816 ± 235 *

각 값은 평균 ± 표준편차이다 (n=6). Each value is the mean ± standard deviation (n = 6).

# 정상군과 현저히 상이함 (p<0.05). # Significantly different from normal group (p <0.05).

* 대조군과 현저히 상이함 (p<0.05).* Significantly different from control (p <0.05).

사염화탄소로 흰쥐를 간손상시킨 결과 혈중 ALT, AST가 증가하였으나 인삼 및 홍삼 처리군에서 간손상을 개선하였다. 그러나, 인삼 또는 글루탐산을 첨가 인삼을 유산균으로 발효시킨 결과 인삼이나 홍삼에 비해 간장 보호효과가 더 증가하였다.Hepatic injury of rats with carbon tetrachloride increased blood ALT and AST, but hepatic damage was improved in the ginseng and red ginseng treatment groups. However, as a result of fermenting ginseng or glutamic acid-added ginseng with lactic acid bacteria, soy sauce protection effect was increased compared to ginseng or red ginseng.

실험예 2. 유산균 B. longum H-1으로 GABA 및 인삼사포닌 생물전환을 강화한 발효인삼의 항산화 효과Experimental Example 2. Antioxidative Effect of Fermented Ginseng Enhancement of GABA and Ginseng Saponin Bioconversion with B. longum H-1

DPPH (1,1-디페닐-2-피크릴히드라질)의 라디칼 소거효과Radical Scavenging Effect of DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)

60 M DPPH (EtOH 내) 500 ㎕에 검체 500 ㎕를 넣어 상온에서 30분 반응시킨 후 520 nm에서 흡광도를 측정하였다. 블랭크 (blank)로 DPPH 대신 EtOH를 사용하였으며 대조군으로는 시료 대신 물을 사용하였을 때를 100%로 하여 DPPH 라디칼 제거율을 구하였다. 대조약물로는 카페인산을 사용하였다.500 μl of the sample was added to 500 μl of 60 M DPPH (in EtOH) and reacted at room temperature for 30 minutes, and the absorbance was measured at 520 nm. EtOH was used instead of DPPH as a blank and 100% when water was used instead of the sample as a control to obtain DPPH radical removal rate. Caffeic acid was used as a control drug.

슈퍼옥시드 음이온 스케벤징 (scavenging) 효과 Superoxide Anion Scavenging Effect

0.05 M Na2CO3 (pH 10.2) 900 ㎕에 3 mM 크산틴 (Sigma 사), 3 mM EDTA (Sigma 사), 1.5 ㎍/㎖ BSA (Sigma 사), 0.75 mM NBT (Sigma 사) 50 ㎕씩을 각각 첨가하였다. 여기에 시료 50 ㎕와 0.1 ㎍/㎖ 크산틴 산화효소 50 ㎕를 가해 30분간 반응시킨 후 6 mM CuCl2를 넣어 반응을 정지시키고 560 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조약물로는 카페인산을 사용하였다. To 900 μl of 0.05 M Na 2 CO 3 (pH 10.2), 50 μl of 3 mM xanthine (Sigma), 3 mM EDTA (Sigma), 1.5 μg / ml BSA (Sigma), 0.75 mM NBT (Sigma) Each added. 50 μl of the sample and 50 μl of 0.1 μg / ml xanthine oxidase were added thereto, followed by reaction for 30 minutes. 6 mM CuCl 2 was added thereto to stop the reaction, and the absorbance was measured at 560 nm. Caffeic acid was used as a control drug.

인삼을 발효시켜 GABA 증강 및 인삼사포닌을 생물전환시킨 발효 인삼은 항산화 효과가 발효시키기 전에 비해 뚜렷이 우수한 항산화 효과를 나타내 노화방지, 항암효과, 뇌허혈, 항염증 등의 효과가 기대된다. Fermented ginseng, which has GABA enhancement and ginseng saponin bioconverted by fermenting ginseng, has anti-oxidant effect, anti-cancer effect, cerebral ischemia and anti-inflammatory effect.

50% 항산화 효과 저해활성 (㎍/ml)50% antioxidant effect inhibitory activity (㎍ / ml) DPPHDPPH 슈퍼옥시드 음이온 스케벤징Superoxide Anion Scavenging 카페인산 (대조약물)Caffeic acid (control) 0.40.4 0.80.8 인삼군Ginseng 125125 6161 인삼발효군Ginseng Fermentation Group 8989 4848 글루탐산 첨가인삼 발효물처리군Ginseng Fermented Ginseng Treatment Group 7171 2929 홍삼 처리군Red ginseng treatment group 9696 4040 홍삼 발효처리군Red ginseng fermentation group 7878 3535 글루탐산첨가 인삼 발효물 처리군 Glutamic Acid-Added Ginseng Fermentation Treatment Group 6868 2929

DPPH 법과 슈퍼옥시드 음이온 라디칼 스케벤징 효과 측정법으로 인삼 및 인삼 발효물의 항산화 효과를 측정한 결과 인삼 및 홍삼에 항산화 효과가 인정되었으나 발효시킨 결과 더 우수한 결과를 보였다. Antioxidant effect of ginseng and ginseng fermentation was recognized by DPPH method and superoxide anion radical sbenzing effect measurement method.

실험예 3. 유산균 B. longum H-1으로 GABA 및 인삼사포닌 생물전환을 강화한 발효인삼의 고지혈증 개선 효과 Experimental Example 3. Hyperlipidemic effect of fermented ginseng enhanced with GABA and ginseng saponin bioconversion with B. longum H-1

옥수수 오일 유도 고지혈증 생쥐의 혈중 지질 저하 효과 Blood Lipid Lowering Effects of Corn Oil-induced Hyperlipidemic Mice

실험방법 : 생쥐 (숫놈, 20 ~ 22 g) 1군을 10마리로 하여 인삼 또는 인삼 발효물을 경구투여하였고, 대조군에는 생리식염수를 대신 경구투여하였다. 2시간 후에 옥수수 오일 1 g/kg를 경구투여하고, 정상군에는 옥수수 오일 대신 생리식염수를 경구투여하였다. 옥수수 오일 투여 2시간 후에 에테르로 가볍게 마취하여 심장 채혈하여 트리글리세리드 (이하 "TG"라 함), 총 콜레스테롤 (이하 "TC"라 함), 및 저밀도 지질단백질 콜레스테롤 (이하 "LDL (low density lipoprotein)"이라 함)의 양을 아산제약 (주) 키트를 사용하여 측정하였다.Experimental Method: Ginseng or ginseng fermented product was orally administered to 10 rats (male, 20 to 22 g), and the control group was orally administered with saline instead. After 2 hours, 1 g / kg of corn oil was orally administered, and the normal group was orally administered with saline instead of corn oil. Two hours after corn oil administration, light anesthesia with ether was used to draw the heart to triglyceride (hereinafter referred to as "TG"), total cholesterol (hereinafter referred to as "TC"), and low density lipoprotein cholesterol (hereinafter referred to as "low density lipoprotein" (LDL). ) Was measured using Asan Pharmaceutical Co., Ltd. kit.

group 복용량 (mg/kg/day)Dose (mg / kg / day) TG 수준 (mg/dl)TG level (mg / dl) TC 수준 (mg/dl)TC level (mg / dl) LDL 수준 (mg/dl)LDL level (mg / dl) 정상군Normal -- 84±1284 ± 12 156±13156 ± 13 36±936 ± 9 옥수수 오일 투여 실험군Corn oil administration group -- 156±25# 156 ± 25 # 165±10165 ± 10 45±1345 ± 13 인삼군Ginseng 100100 112±16* 112 ± 16 * 148±10148 ± 10 49±1849 ± 18 인삼발효군Ginseng Fermentation Group 100100 89±19* 89 ± 19 * 161±19161 ± 19 35±1335 ± 13 글루탐산첨가 인삼발효물 처리군Glutamic Acid-Added Ginseng Fermentation Treatment Group 100100 82±22* 82 ± 22 * 148±18148 ± 18 36±1236 ± 12 홍삼 처리군Red ginseng treatment group 100100 107±22* 107 ± 22 * 149±12149 ± 12 45±8* 45 ± 8 * 홍삼 발효처리군Red ginseng fermentation group 100100 89±11* 89 ± 11 * 146±14146 ± 14 38±538 ± 5 글루탐산첨가 인삼발효물 처리군Glutamic Acid-Added Ginseng Fermentation Treatment Group 100100 82±22* 82 ± 22 * 139±22139 ± 22 39±11* 39 ± 11 * 제니칼 (Xenical)Xenical 1010 88±14* 88 ± 14 * 143±17143 ± 17 47±1347 ± 13

각 값은 평균 ± 표준편차이다 (n=10). Each value is the mean ± standard deviation (n = 10).

# 정상군과 현저히 상이함 (p<0.05). # Significantly different from normal group (p <0.05).

* 대조군과 현저히 상이함 (p<0.05).* Significantly different from control (p <0.05).

옥수수 오일로 생쥐에 고지혈증을 유발 시켜 혈중 지질 함량을 측정한 결과 트리글리세리드가 유의적으로 증가하였다. 그러나 인삼과 홍삼에서도 고지혈증 개선 효과가 인정되었으나 이를 유산균으로 발효시킨 인삼 발효조성물, 글루탐산첨가 인삼 발효물, 홍삼 발효물, 글루탐산 첨가 인삼발효물이 더 우수한 효과를 보였다. Triglycerides were significantly increased in corn lipids by inducing hyperlipidemia in mice. However, ginseng and red ginseng were recognized to improve hyperlipidemia, but the ginseng fermentation composition, glutamic acid added ginseng fermentation product, red ginseng fermentation product, and glutamic acid added ginseng fermentation product showed better effects.

트리톤 (Triton) WR-1339유도 고지혈증 생쥐에서 혈중 지질 저하 효과Blood Lipid Lowering Effect in Triton WR-1339 Induced Hyperlipidemic Mice

생쥐 1군을 10마리로 하여 인삼 또는 발효인삼을 1일 1회 5일간 경구투여하고 대조군에는 생리식염수를 투여하였다. 트리톤 투여 16시간 전부터 절식하고, 최종 검체 투여는 트리톤 WR-1339 주사 1시간 전에 하였다. 트리톤 WR-1339 250 mg/kg를 멸균한 증류수에 녹여 꼬리 정맥주사하고 정상군에는 트리톤 WR-1339 대신 생리식염수를 주사하고 18시간이 경과한 후 에테르로 가볍게 마취하여 심장 채혈하여 TG, TC, LDL-콜레스테롤의 양을 아산제약 (주) 키트를 사용하여 측정하였다. Ginseng or fermented ginseng was orally administered once a day for 5 days with 10 mice of 1 group, and physiological saline was administered to the control group. Fasting 16 hours prior to Triton administration and final sample administration 1 hour prior to Triton WR-1339 injection. Dissolve 250 mg / kg of Triton WR-1339 in sterile distilled water and inject the tail intravenously. In the normal group, physiological saline instead of Triton WR-1339 is injected. After 18 hours, light anesthesia with ether is used to draw the blood and TG, TC, LDL. -The amount of cholesterol was measured using Asan Pharmaceutical Co., Ltd. kit.

group 복용량 (mg/kg/day)Dose (mg / kg / day) TG 수준 (mg/dl)TG level (mg / dl) TC 수준 (mg/dl)TC level (mg / dl) LDL 수준 (mg/dl)LDL level (mg / dl) 정상군 Normal -- 79±1379 ± 13 162±9162 ± 9 43±1143 ± 11 트리톤 WR-1339 투여 실험군Triton WR-1339 administration experimental group -- 840±112# 840 ± 112 # 389±17# 389 ± 17 # 89±18# 89 ± 18 # 인삼군Ginseng 100100 621±91621 ± 91 276±15276 ± 15 61±5* 61 ± 5 * 인삼 발효군Ginseng Fermentation Group 100100 555±66* 555 ± 66 * 237±13* 237 ± 13 * 58±10* 58 ± 10 * 글루탐산첨가 인삼 발효물 처리군Glutamic Acid-Added Ginseng Fermentation Treatment Group 100100 525±113* 525 ± 113 * 246±22* 246 ± 22 * 49±25* 49 ± 25 * 홍삼 처리군Red ginseng treatment group 100100 614±126* 614 ± 126 * 266±25* 266 ± 25 * 67±16* 67 ± 16 * 홍삼 발효처리군Red ginseng fermentation group 100100 540±72* 540 ± 72 * 232±20232 ± 20 57±9* 57 ± 9 * 글루탐산첨가 인삼 발효물 처리군Glutamic Acid-Added Ginseng Fermentation Treatment Group 100100 592±89* 592 ± 89 * 229±22* 229 ± 22 * 52±12* 52 ± 12 * 로바스틴 (Lovastin)Lovastin 1010 559±94* 559 ± 94 * 287±76287 ± 76 57±11* 57 ± 11 *

각 값은 평균 ± 표준편차이다 (n=10). Each value is the mean ± standard deviation (n = 10).

# 정상군과 현저히 상이함 (p<0.05). # Significantly different from normal group (p <0.05).

* 대조군과 현저히 상이함 (p<0.05).* Significantly different from control (p <0.05).

트리톤 WR1336으로 생쥐에 고지혈증을 유발 시켜 혈중 지질 함량을 측정한 결과 TG와 TC와 LDL-콜레스테롤이 유의적으로 증가하였다. 그러나 인삼과 홍삼에서도 고지혈증 개선 효과가 인정되었으나 이를 유산균으로 발효시킨 인삼 발효조성물, 글루탐산첨가 인삼 발효물, 홍삼 발효물, 글루탐산 첨가 인삼발효물이 더 우수한 효과를 보였다. Triton WR1336 induced hyperlipidemia in mice and measured blood lipid levels, which significantly increased TG, TC, and LDL-cholesterol. However, ginseng and red ginseng were recognized to improve hyperlipidemia, but the ginseng fermentation composition, glutamic acid added ginseng fermentation product, red ginseng fermentation product, and glutamic acid added ginseng fermentation product showed better effects.

이상에서 설명한 바와 같이, 본 발명의 기술 구성을 통해 유산균을 이용하여 인삼 또는 글루탐산 함유 인삼을 발효하여 뇌대사 증진 작용 등 치매 예방효과가 있는 감마-아미노부틸산으로 전환시킴과 동시에 항산화 활성, 간장 보호효과, 항고지혈증 등의 효과를 갖은 유산균 발효 인삼 조성물을 만들 수 있다. 이러한 발명을 통하여 유산균 발효물은 유산균제로도 이용할 수 있을 뿐만 아니라, 건강식품, 갱년기 및 노인성 식품, 여성식품, 미용식품 소재와 기타 제품 등 다양하게 이용될 수 있다. As described above, the ginseng or glutamic acid-containing ginseng is fermented using lactic acid bacteria through the technical composition of the present invention to convert to gamma-aminobutyl acid having dementia-preventing effects such as brain metabolism enhancement effect and at the same time, antioxidant activity and liver protection. Lactic acid bacteria fermented ginseng composition having the effect, such as anti-hyperlipidemia can be made. Through this invention, lactic acid bacteria fermented products can be used not only as lactic acid bacteria, but also variously used, such as health food, menopausal and senile foods, women's food, beauty food materials and other products.

Claims (8)

비피도박테리움 인판티스, 비피도박테리움 비피둠, 락토바실러스 락티스, 클로스트리디움 부티리쿰, 비피도박테리움 K-103, 비피도박테리움 K-506, 비피도박테리움 K-513, 비피도박테리움 KK-1, 비피도박테리움 KK-2로 이루어진 군으로부터 선택되는 유산균으로 인삼을 발효시켜, 감마-아미노부틸산과 함께, 화합물 K, △20-진세노시드 Rh2, 진세노시드 Rh1, 진세노시드 Rh2, 프록토파낙사디올 및 프록토파낙사트리올로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 함량이 증가된 활성 사포닌을 유효성분으로 함유하는 고지혈증, 암, 뇌허혈 또는 염증의 예방 및 치료용 약학 조성물.Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Lactobacillus lactis, Clostridium butyricum, Bifidobacterium K-103, Bifidobacterium K-506, Bifidobacterium K-513, Bifi Ginseng was fermented with a lactic acid bacterium selected from the group consisting of Dobacterium KK-1 and Bifidobacterium KK-2, together with gamma-aminobutyl acid, Compound K, Δ 20 -ginsenoside Rh2, ginsenoside Rh1, A pharmaceutical composition for the prevention and treatment of hyperlipidemia, cancer, cerebral ischemia or inflammation, comprising ginsenosides Rh2, protophanacanadiol, and active saponins having an increased content of at least one selected from the group consisting of protophanacanatriol. 삭제delete 삭제delete 비피도박테리움 인판티스, 비피도박테리움 비피둠, 락토바실러스 락티스, 클로스트리디움 부티리쿰, 비피도박테리움 K-103, 비피도박테리움 K-506, 비피도박테리움 K-513, 비피도박테리움 KK-1, 비피도박테리움 KK-2로 이루어진 군으로부터 선택되는 유산균으로 홍삼을 발효시켜, 감마-아미노부틸산과 함께, 화합물 K, △20-진세노시드 Rh2, 진세노시드 Rh1, 진세노시드 Rh2, 프록토파낙사디올 및 프록토파낙사트리올로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 함량이 증가된 활성 사포닌을 유효성분으로 함유하는 고지혈증, 암, 뇌허혈 또는 염증의 예방 및 치료용 약학 조성물.Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Lactobacillus lactis, Clostridium butyricum, Bifidobacterium K-103, Bifidobacterium K-506, Bifidobacterium K-513, Bifi Fermented red ginseng with lactic acid bacteria selected from the group consisting of gambacterium KK-1 and Bifidobacterium KK-2, together with gamma-aminobutyl acid, compound K, Δ 20 -ginsenoside Rh2, ginsenoside Rh1, A pharmaceutical composition for the prevention and treatment of hyperlipidemia, cancer, cerebral ischemia or inflammation, comprising ginsenosides Rh2, protophanacanadiol, and active saponins having an increased content of at least one selected from the group consisting of protophanacanatriol. 삭제delete 삭제delete 비피도박테리움 인판티스, 비피도박테리움 비피둠, 락토바실러스 락티스, 클로스트리디움 부티리쿰, 비피도박테리움 K-103, 비피도박테리움 K-506, 비피도박테리움 K-513, 비피도박테리움 KK-1, 비피도박테리움 KK-2로 이루어진 군으로부터 선택되는 유산균으로 인삼을 발효시켜, 감마-아미노부틸산과 함께, 화합물 K, △20-진세노시드 Rh2, 진세노시드 Rh1, 진세노시드 Rh2, 프록토파낙사디올 및 프록토파낙사트리올로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 함량이 증가된 활성 사포닌을 유효성분으로 포함하는 건강식품.Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Lactobacillus lactis, Clostridium butyricum, Bifidobacterium K-103, Bifidobacterium K-506, Bifidobacterium K-513, Bifi Ginseng was fermented with a lactic acid bacterium selected from the group consisting of Dobacterium KK-1 and Bifidobacterium KK-2, together with gamma-aminobutyl acid, Compound K, Δ 20 -ginsenoside Rh2, ginsenoside Rh1, Health food comprising an active ingredient saponin of increased content of at least one selected from the group consisting of ginsenoside Rh2, protophanakanadiol and protophanakanatriol. 비피도박테리움 인판티스, 비피도박테리움 비피둠, 락토바실러스 락티스, 클로스트리디움 부티리쿰, 비피도박테리움 K-103, 비피도박테리움 K-506, 비피도박테리움 K-513, 비피도박테리움 KK-1, 비피도박테리움 KK-2로 이루어진 군으로부터 선택되는 유산균으로 인삼을 발효시켜, 감마-아미노부틸산과 함께, 화합물 K, △20-진세노시드 Rh2, 진세노시드 Rh1, 진세노시드 Rh2, 프록토파낙사디올 및 프록토파낙사트리올로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 함량이 증가된 활성 사포닌을 유효성분으로 포함하는, 간손상, 고지혈증, 암, 뇌허혈 또는 염증의 예방 및 치료를 위한 정제 또는 캡슐제인 의약품.Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Lactobacillus lactis, Clostridium butyricum, Bifidobacterium K-103, Bifidobacterium K-506, Bifidobacterium K-513, Bifi Ginseng was fermented with a lactic acid bacterium selected from the group consisting of Dobacterium KK-1 and Bifidobacterium KK-2, together with gamma-aminobutyl acid, Compound K, Δ 20 -ginsenoside Rh2, ginsenoside Rh1, Prevention and treatment of liver damage, hyperlipidemia, cancer, cerebral ischemia or inflammation, comprising as an active ingredient an active saponin with an increased content of at least one selected from the group consisting of ginsenoside Rh2, protophanacanadiol and protophanacanatriol Pharmaceutical products that are tablets or capsules for.
KR1020070043083A 2007-05-03 2007-05-03 A FERMENTED GINSENG COMPOSITION STRENGTHENED SIMULTANEOUSLY WITH γ-AMINOBUTYRIC ACID AND BIOCONVERSION SAPONIN BY LACTIC ACID BACTERIA KR100848686B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020070043083A KR100848686B1 (en) 2007-05-03 2007-05-03 A FERMENTED GINSENG COMPOSITION STRENGTHENED SIMULTANEOUSLY WITH γ-AMINOBUTYRIC ACID AND BIOCONVERSION SAPONIN BY LACTIC ACID BACTERIA

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020070043083A KR100848686B1 (en) 2007-05-03 2007-05-03 A FERMENTED GINSENG COMPOSITION STRENGTHENED SIMULTANEOUSLY WITH γ-AMINOBUTYRIC ACID AND BIOCONVERSION SAPONIN BY LACTIC ACID BACTERIA

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020050046204A Division KR20060124336A (en) 2005-05-31 2005-05-31 A FERMENTED GINSENG COMPOSITION STRENGTHENED SIMULTANEOUSLY WITH gamma;-AMINOBUTYRIC ACID AND BIOCONVERSION SAPONIN BY LACTIC ACID BACTERIA

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20070052256A KR20070052256A (en) 2007-05-21
KR100848686B1 true KR100848686B1 (en) 2008-07-28

Family

ID=38275019

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020070043083A KR100848686B1 (en) 2007-05-03 2007-05-03 A FERMENTED GINSENG COMPOSITION STRENGTHENED SIMULTANEOUSLY WITH γ-AMINOBUTYRIC ACID AND BIOCONVERSION SAPONIN BY LACTIC ACID BACTERIA

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR100848686B1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220036793A (en) * 2020-09-16 2022-03-23 주식회사 에치와이 Red ginseng fermented product fermented with Bifidobacterium long gum and Lactobacillus paracasei and Method for preparing the same
KR20220036794A (en) * 2020-09-16 2022-03-23 주식회사 에치와이 Composition for treating or improving inflammatory diseases comprising fermented red ginseng fermented with Bifidobacterium longum and Lactobacillus paracasei

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5204771B2 (en) * 2007-06-21 2013-06-05 長瀬産業株式会社 GABAergic neuron activator
CN107375374B (en) * 2017-08-21 2018-04-20 东方红(通化)生物医药股份有限公司 A kind of fermentation extraction method for the American ginseng extract that there is auxiliary to improve sleep effect

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20040049217A (en) * 2002-12-05 2004-06-11 홍림통산(주) Ginseng fermented by lactic acid bacterium, yoghurt containing the same, and lactic acid bacteria used in the preparation thereof
KR20050010599A (en) * 2003-07-21 2005-01-28 한국식품연구원 METHOD OF INCREASING OF THE AMOUNT OF γ-AMINOBUTYRIC ACID IN PLANTS AND UTILITY PRODUCTS INVOLVING THE PLANTS MADED THEREOF

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20040049217A (en) * 2002-12-05 2004-06-11 홍림통산(주) Ginseng fermented by lactic acid bacterium, yoghurt containing the same, and lactic acid bacteria used in the preparation thereof
KR20050010599A (en) * 2003-07-21 2005-01-28 한국식품연구원 METHOD OF INCREASING OF THE AMOUNT OF γ-AMINOBUTYRIC ACID IN PLANTS AND UTILITY PRODUCTS INVOLVING THE PLANTS MADED THEREOF

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220036793A (en) * 2020-09-16 2022-03-23 주식회사 에치와이 Red ginseng fermented product fermented with Bifidobacterium long gum and Lactobacillus paracasei and Method for preparing the same
KR20220036794A (en) * 2020-09-16 2022-03-23 주식회사 에치와이 Composition for treating or improving inflammatory diseases comprising fermented red ginseng fermented with Bifidobacterium longum and Lactobacillus paracasei
KR102482565B1 (en) * 2020-09-16 2022-12-29 주식회사 에치와이 Composition for treating or improving inflammatory diseases comprising fermented red ginseng fermented with Bifidobacterium longum and Lactobacillus paracasei
KR102482562B1 (en) 2020-09-16 2022-12-29 주식회사 에치와이 Red ginseng fermented product fermented with Bifidobacterium long gum and Lactobacillus paracasei and Method for preparing the same

Also Published As

Publication number Publication date
KR20070052256A (en) 2007-05-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100479803B1 (en) Composition containing an extract of specially treated ginseng for preventing brain cells and treating brain stroke
KR101374026B1 (en) Fermented ginseng containing bio-conversed ginsenoside metabolites increased by co-fermentation of fungi and lactic acid bacteria
KR101593618B1 (en) Composition for improving bioavailability of saponin
KR20170061959A (en) Preparation method of fermented ginseng and fermented black-red ginseng with active ginsenoside heightening rate absorption
CN105358168B (en) Composition having function of relieving premenstrual syndrome and dysmenorrhea
KR20200087900A (en) health food composition using pomegranate fermented by lactic acid bacteria and manufacturing method thereof
KR101709281B1 (en) Composition for Prevention or Treatment of Osteoporosis Comprising Herbal Extract and Fermentation Product thereof with Lactic acid Bacteria
KR100848686B1 (en) A FERMENTED GINSENG COMPOSITION STRENGTHENED SIMULTANEOUSLY WITH γ-AMINOBUTYRIC ACID AND BIOCONVERSION SAPONIN BY LACTIC ACID BACTERIA
US20180296615A1 (en) Pharmaceutical composition or functional health food for preventing and treating metabolic diseases, containing water extract of pleurotus eryngii var. ferulae (pf.) as active ingredient
KR101651082B1 (en) A Composition Comprising the Fermentate of Puerariae Radix extract for protecting liver damage
KR100555652B1 (en) Extract of processed Panax Species plant, process for preparing the same, and composition containing the same for preventing and treating cancer and allergy- mediated disease
KR20060000488A (en) Composition containing ginseng extract comprising saponin derivatives isolated from ginseng radix and ginseng for preventing and treating scratching diseases
KR100688425B1 (en) A COMPOSITION CONTAINING GENSENOSIDE Rh2 AS AN ACTIVE MATERIAL FOR PREVENTING BRAIN CELL
KR101750779B1 (en) Composition for anti-fatigue containing aglycone ppd and/or ppt
KR20200078171A (en) The manufacturing method of fermented red ginseng extracts enhanced with ginsenoside compound K, Rd and Rd3 using β-glucosidase and lactic acid bacteria
KR20110093477A (en) Antitumor composition comprising fermented red ginseng
KR100759772B1 (en) A COMPOSITION CONTAINING GENSENOSIDE Rh2 AS AN ACTIVE MATERIAL FOR PREVENTING BRAIN CELL
KR100919134B1 (en) Extract of antiobestic ginseng with anti-obesity effect comprising high concentration of less polar ginsenoid and method of preparing the same
KR20030080296A (en) Composition containing saponin fraction and derivatives isolated from ginseng radix for preventing and treating allergy-mediated disease
KR102167812B1 (en) Fermented product of sorghum-adzuki bean mixture for intestinal health and improvement effect of bowel
KR20060124336A (en) A FERMENTED GINSENG COMPOSITION STRENGTHENED SIMULTANEOUSLY WITH gamma;-AMINOBUTYRIC ACID AND BIOCONVERSION SAPONIN BY LACTIC ACID BACTERIA
KR20100008220A (en) Composition for preventing and treating colon cancer containing extract of mushroom and herb medicine
KR100533505B1 (en) Health supplement food containing saponin derivatives isolated from ginseng radix for preventing and treating allergy-mediated disease
KR100556683B1 (en) Composition containing an extract of processed Panax Species plant or saponin derivatives therefrom for preventing and treating a gastrointestinal disease
KR102337130B1 (en) Composition comprising fermented Oriental medicine herbs for preventing, improving or treating obesity, and method for preparing the same

Legal Events

Date Code Title Description
A107 Divisional application of patent
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E902 Notification of reason for refusal
N231 Notification of change of applicant
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20120720

Year of fee payment: 5

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20130722

Year of fee payment: 6

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20140721

Year of fee payment: 7

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20150721

Year of fee payment: 8

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160721

Year of fee payment: 9

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20170721

Year of fee payment: 10

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20180723

Year of fee payment: 11