KR100817351B1

KR100817351B1 - 염증성 장질환 치료용 조성물

Info

Publication number: KR100817351B1
Application number: KR1020057020211A
Authority: KR
Inventors: 레슬리 비. 피크포드; 크리스토퍼 알. 베빙톤; 져프리 티. 야란톤; 다비드 킹
Original assignee: 메다렉스, 인코포레이티드
Priority date: 2003-04-23
Filing date: 2004-04-23
Publication date: 2008-03-26
Also published as: NZ542866A; AU2004232362B2; KR20060015531A; CN100409897C; CN101318019B; MXPA05011409A; CN1777444A; CA2823468A1; WO2004093908A3; JP2006524703A; CA2522957A1; BRPI0410495A; HK1082200A1; WO2004093908A2; CN101318019A; IL171356A; AU2004232362A1; EP1631312B1; AU2004232362C1; US8828393B2

Abstract

본 발명은 셀리악 병, 크론 병, 및 궤양성 대장염을 포함하는 염증성 장질환(IBD)의 치료용 조성물 및 방법이 개시되어 있다. 조성물의 일례는 항-타입 1 인터페론 수용체 항체 길항체 및 이의 단편물과 같은 하나 이상의 항-타입 1 인터페론 길항체는 물론 타입 1 인터페론과 이의 수용체 (IFNAR)과의 작용을 저해하는 폴리펩타이드 및 작은 분자를 포함한다.

염증성 장질환(IBD), 항-타입 1 인터페론 수용체 항체 길항체, 항-타입 1 인터페론 길항체, 타입 1 인터페론, 수용체 (IFNAR)

Description

염증성 장질환 치료용 조성물 {COMPOSITIONS FOR THE THERAPY OF INFLAMMATORY BOWEL DISEASE}

[관련 출원에 대한 상호 참조]

본 출원은 2003년 4월 23일자로 출원된, 미국 일련 번호 60/465,155의 출원 일자의 유리함을 요구하며, 이의 전체 내용은 본 명세서에 참조문헌으로 기재되어 있다.

본 발명은 셀리악 병, 크론 병, 및 궤양성 대장염 (총체적으로 염증성 장질환, 또는 IBD로 칭함)의 치료에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 본 발명은 타입-1 인터페론의 길항체 및 그러한 길항체를 사용하여 IBD를 치료하는 방법에 관한 것이다.

셀리악 병, 크론 병, 및 궤양성 대장염 (총체적으로 염증성 장질환, 또는 IBD로 칭함)은 위장관의 만성적, 염증성 질환들이다. 임상적 특징은 이러한 두 가지 질환 사이에 다소 차이가 있지만, 둘 다는 복통, 설사(가끔 혈변), '장관외'의 확실한 가변적 증상군 (예를 들어, 관절염, uveitis, 피부 변화, 등), 및 소장 및 결장내의 염증성 세포 축적 (병리적 검사 또는 외과 표본에서 발견되는)을 특징으로 한다.

IBD는 아동 및 성인 둘 다에 영향을 끼치고, 두 가지 양상의 나이 분포도를 가진다 (하나는 20세 근처에서 두번째는 40세 근처에서 고점). IBD는 만성적인, 일생동안 나타나는 질환이고, 가끔 다른, 소위, "자가면역" 질환 (예, 류마티스 관절염, 유형 I 당뇨, 다발성 경화증, 등)과 함께 연합되어 나타난다. IBD 거의 전적으로 산업화된 사회에서 발견된다. 마요 클리닉 (Mayo Clinic)에서 나온 가장 최근의 데이터를 보면, 미국에서 인구 100,000명당 1건 꼴로 나타나며, 어떤 연구에서 나타난 데이터는 1000명당 1건 꼴로 나타난다고 되어 있다. 미국과 유럽에서 IBD의 발생율이 명백히 증가하고 있는 추세이고, 특히 크론 병이 그러하다. 이러한 증가의 배경은 현재 명확하지 않다. 그러한 것으로, 미국에서 IBD는 두번째로 가장 흔한 자가면역질환을 나타낸다 (류마티스 관절염 다음). 타입 1 인터페론류가 염증성 장질환을 앓고 있는 환자의 내장에서 검출된다. 예를 들어, 인터페론 알파가, 글루텐-민감성 장질환인 셀리악 병의 환자의 내장 점막 및 크론 병 환자의 점막고유층에서 과발현되는 것으로 보고되고 있다. 몬텔레온(Monteleone) 등, Gut 48: 425-429 (2001); Fais 등, J. 인터페론 Res. 14: 235-238 (1994). 이러한 환자의 조직에서 나타나는 타입 1 인터페론류의 생물학적 중요성은 설명된 바가 없다. 타입 1 인터페론류는 염증성 장질환을 가진 환자 개인의 혈행에서 설명된 바 없고, 있다고 하더라도, 인터페론 알파가 이러한 질환의 병인에 어떠한 역할을 했는지 분명치 않다.

타입 1 인터페론류 (즉, 인터페론 알파 및 베타) 다양한 면역반응 시스템에서 중요한 역할을 담당하는 다기증성 사이토카인이다. 타입 1 인터페론류의 비정상적 생산은 이식 거부, 및 류마티스 관절염, 전신성 홍반성 루퍼스, 및 인슐린 의존 성 당뇨와 같은 자가면역 질환을 포함하는 몇 가지 병인성 조건과 관련되어 있다. 타입 1 인터페론류의 생물학적 효과는 모든 타입 1 인터페론류와는 결합하지만 타입 2 인터페론, 인터페론-y에는 결합하지 않는 단일 세포-표면 수용체 (IFNAR)를 통해 매개된다. 타입 1 인터페론 수용체는 인체내 모든 유핵 세포상에서 다양한 수준으로 발현되고 있다. 이것은 IFNAR-1 및 IFNAR2로 명명되는 두 개의 폴리펩타이드 사슬로 구성되며, 이들은 인터페론 결합시 세포 내부에 신호를 전달할 수 있는 높은 친화성 수용체를 함께 구성한다.

인간 타입 1 인터페론 수용체의 IFNAR-1 사슬에 대한, 64G12로 명명된, 마우스 단일클론 항체는 사이토카인류가 그들의 수용체에 결합하는 것을 방해함으로써 타입 1 인터페론류의 활성을 차단하는 것으로 나타났다 (참조, 미국 특허 번호 제 5, 889, 151 호, 제 5, 886, 153 호, 제 5,731, 169 호, 제5, 861, 258 호, 5,919, 453, 및 6, 475, 983, 및 미국특허 출원 공개 번호 제 20020055492호, 이들 각각은 본 명세서에서 참조문헌으로 포함되어 있다). 영장류 이식 모델에서, 64G12는, 시클로스포린과 연계되었을 때, 피부 동종 이식 거부 및 이식편-대 숙주자 병(graft-versus host disease)의 예방에 현저한 장기 효능을 제공한다. Benizri 등, J. Interferon Cytokine Res. 18: 273 (1998).

IBD의 치료는 다양하다. 전형적으로, 일차 치료는 살리실염 유도체 (즉, 5-ASA)을 구강 또는 직장 투여하는 것이다. 비합병성 크론 병에서의 반응율은 약 40% 이다 (위약에서의 20%와 비교).

불리한 부작용에도 불구하고, 코르티코스테로이드는 좀더 난치병을 가진 환 자의 치료에 사용하는 보루로 남아 있다. 더욱 새로운 치료법에는 항 대사물 (예, 메토트렉세이트(methotrexate), 6-메캡도푸린) 및 면역조절체(immunomodulators) (예, 레디케이드(Remicade)-TNFa 수용체에 영향끼치는 혼성 인체 항체)을 사용하는 것이 있다.

이러한 질환의 치료법에 대한 상당한 연구에도 불구하고, 셀리악 병, 크론 병 및 궤양성 대장염은 효과적으로 치료하기 어려운 것으로 여전히 남아있다.

따라서, 그러한 염증성 장질환들을 치료하는 개선된 방법에 대한 필요성이 당해 분야에서 요구되어 왔다. 본 발명은 이러한 그리고 다른 관련 필요를 충족시킨다.

[발명의 요약]

본 발명은 예를 들어, 셀리악 병, 크론 병 및 궤양성 대장염을 포함하는 염증성 장질환을 치료하는 조성물 및 방법을 제공한다. 본 발명의 조성물은 하나 이상의 타입 1 인터페론 길항체, 예를 들어, 항-타입 1 인터페론 항체, 항-IFNAR 항체, 상술한 항체, 단백질, 및 작은 분자의 임의의 단편물을 포함한다. 특정 양태에서, 본 발명에 따른 길항체는 혼성화(chimeric), 영장류화, 인체화, 탈-면역화된 및/또는 인간 항체 또는 이의 수용체 결합 단편물일 수 있다. 다른 양태에서, 본 발명은 IBD의 환자에게 치료적으로 효과적인 양의 타입 1 인터페론 길항체를 투여하는 단계를 포함하는 치료 방법을 제공한다.

다른 양태에서, 치료 방법은 (a) IBD 환자에서, 견딜 수 있는 양의 타입 1 인터페론 길항체를 투여하고 및 (b) 그 환자에게 치료적으로 효과적인 양의 타입 1 인터페론 길항체를 투여하는 것을 포함한다.

따라서, 본 발명의 특정 양태에서, 예를 들어, 가용성 수용체 사슬 (즉. 가용성 IFNAR2)과 같은 타입 1 인터페론 리간드 결합을 방해하는 길항체가 제공된다. 다른 관련 양태에서, 경쟁적, 무경쟁적(non-competitive) 또는 비경쟁적 (uncompetitive) 저해에 의한 리간드 결합을 방해하는 방식으로 선택적으로 하나 이상의 타입 1 인터페론 항체에 결합하거나 또는 IFNAR 수용체 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편물을 제공한다. 다른 양태에 있어서, IFNAR 수용체에 의한 신호 전달을 방해하는 길항체를 제공한다. 다른 양태에 있어서, 타입 1 인터페론류의 하류(downstream) 효과를 길항하는 길항체를 제공한다.

본 발명의 치료 방법에 사용하는 데 적절한 항체 길항체는 예를 들어, 비-인간, 혼성화된, 영장류화된, 인간화된, 탈-면역화된 및/또는 완전한 인간 항체 또는 이의 항원 결합 단편물과 같은 단일 클론 항체를 포함한다. 항체 길항체는 순환시 항체, 또는 이의 항원 결합 단편물의 수명을 증가시키는, 예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜에 교차 결합 (즉. PEG화)과 같은 화학적 변형물을 더 포함할 수 있다.

바람직한 특정 양태에서, 상기 길항체는 64G12IFNAR-1로 명명된 쥐 단일클론 항체 및/또는 CPI-1697로 명명된, 조작된 인간 변이체에 의해 인식되는 항원성 에피토프에서 또는 근처에서 결합하는 항체이다.

64G12 단일클론 항체는 1992년 2월 26일자로 ECACC (European Collection of Animal Cell Cultures, 영국, 윌트셔 SP4 056, 포르톤 다운 살리버리 소재)에 기탁되었다.

본 발명의 다른 양태에서, 예를 들어, 면역억제제, 항- 염증제, 스테로이드, 면역조절제, 사이토카인, 및 종양괴사인자(Tumor Necrosis Factor; 염증성 사이토카인이라고도함)(이하 "TNF"라 약칭함.) 길항체와 같은 하나 이상의 추가 치료제를 포함한다.

면역억제제의 예는 아자티오프린, 메토트렉세이트, 시클로스포린, 타크롤리무스(Tacrolimus)(이하 "FK506"이라 약칭함.), 라파미신, 및 미오페놀레이트 모페틸을 포함한다. 항-염증제의 예는 5-아미노살리실산, 설파살라진 및 올살라진을 포함한다. 스테로이드류의 예는 코르티코스테로이드류, 글루코코르티코스테로이드류, 프레드니손, 프레드니솔론, 하이드로크로티손, 메틸프레드니솔론, 덱사메타손 및 아드레노코르티코트로픽 호르몬(Adrenocorticotropic hormone)(이하 "ACTH"라 약칭함.)을 포함한다. 면역조절제의 예는 디글리코리피드된, 디글리코리피드된 마이코박테리움 바캐)(deglycolipidated, deglycolipidated Mycobacterium vaccae)(이하 "PVAC"라 약칭함.), 항-종양괴사인자 수용체 상과 요소 5(Tumor Necrosis Factor receptor superfamily member 5)(이하 "항-CD40"이라 약칭함.) 리간드, 항-CD40, 나탈리주마브(natalizumab) (AntegrenTM), 항-맥관유착분자-1(Vascular Adhesion Molecule-1)(이하 "항-VCAM1"이라 약칭함.) 및 항-세포간유착분자-1(Intercellular Adhesion Molecule-1)(이하 "항-ICAM1"이라 약칭함.)을 포함한다. 사이토카인의 예는 인터류킨-10(Interleukin-10)(이하 "IL-10"이라 약칭함.)을 포함한다. TNF 길항체의 예는 인플리시마브(infliximab) (Remicade0), 에타너셉트(etanercept) (EnbrelOO), 아달리무마브(adalimumab) (Humira), 및 세르톨리주마브 패골(Certolizumab Pegol)(이하 "CDP870"이라 약칭함.)을 포함한다.

본 발명의 다른 양태에서, 예를 들어, 셀리악 병, 크론 병, 및 궤양성 대장염과 같은 염증성 장질환의 치료방법을 제공하는 바, 상기 방법은 염증성 장질환 환자에게, 전술한, 타입 1 인터페론 길항체의 치료적으로 유용한 양을 투여하는 것을 포함한다.

본 발명의 방법에 의해서, 상기 길항체는 적절한 생체 이용성을 보장하게 하는 임의의 적정 경로로 투여될 수 있다.

따라서, 특정 양태에서, 적절한 투여 경로는, 정맥내 볼루스, 정맥내 지연 볼루스 (slow bolus), 또는 관류. 다른 양태에서, 타입 1 인터페론 길항체는 피하, 근육 내, 경피성, 또는 피부내 주사를 통해 투여될 수 있다. 다른 양태에서, 예를 들어, 호흡을 통한, 또는 비강인두를 통한 점막 전달 또는 경구 투여를 통해 투여될 수 있다.

예를 들어, 항체 및/또는 이의 항원 결합 단편물과 같은 단백질 길항체를 사용하는 특정 양에서, 투여 경로는 피하내, 근육내 및/또는 정맥내일 수 있다. 정맥내 투여는 볼루스 주사 또는 지연 볼루스 주사 또는 관류와 같을 것일 수 있다.

다른 양태에서, 상기 길항체는 경피성, 피부내 및 점막적으로 전달될 수 있다.

투여량의 예는 0.1 내지 50 mg/kg 체중, 더욱 바람직하게는 0.5 내지 10 mg/kg 체중, 및 더더욱 바람직하게는 2 내지 5 mg/kg 체중이다. 특정 양태에서, 반복적으로 투여될 수 있다.

단백질 길항체를 사용하는 본 발명의 양태에서, 투약 빈도는 일일 일회 내지 월 일 회일 수 있고, 더욱 바람직하게는 매 주 이 회 내지 격 주 이 회, 및 더더욱 바람직하게는 매 주 약 일 회이다. 택일적으로, 상기 길항체는 적절하게 노출되기만 한다면, 약 생체내 반감기로 투약될 수 있다.

본 발명의 특정 양태에서, 상기 길항체는, 예를 들어, 전술한바와 같은 면역억제제, 항-염증제, 스테로이드, 면역조절제, 사이토카인, 및 TNF 길항체 와 같은 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있다.

본 발명의 다른 양태에서, 염증성 장질환 환자를 치료하는 방법을 제공하는 바, 상기 방법은 (a) 단백질-기재 타입 1 인터페론 길항체의 내성 투약량 (tolerizing dose) 을 투여하는 단계 및 (b) 상기 단백질-기재 타입 1 인터페론 길항체의 치료적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함한다. 이러한 방법들의 바람직한 양태에서, 상기 인터페론 길항체는 타입 1 인터페론 수용체 (IFNAR)에 대한 항체일 수 있다. 항-타입 1 인터페론 항체의 예로 혼성화, 영장류화된, 인체화된, 탈면역화된 및 인간 항체를 포함한다. 특정의 바람직한 항-IFNAR 항체는 예를 들어, 64G12로 명명된 쥐 단일클론 항체 및/또는 CPI-1697로 명명된, 조작된 인간 변이체와 같은, IFNAR-1에 결합하는 것을 포함한다.

단백질-기재 타입 1 인터페론 길항체의 내성 복용량의 바람직한 범위는 10 mg/kg 체중 내지 50 mg/kg 체중이다. 더욱 바람직한 내성 복용량의 범위는 20 mg/kg 체중 내지 40 mg/kg 체중이다. 내성 복용량의 더더욱 바람직한 범위는 20 내지 25 mg/kg 체중이다.

이러한 치료적 섭생법 내에서, 항-타입 1 인터페론의 치료적 유효량은 바람직하게는 0.1 내지 10 mg/kg 체중이다. 더욱 바람직한 치료적 유효량은 0.2 내지 5 mg/kg 체중이다. 더더욱 바람직한 치료적 유효량은 0.5 내지 2 mg/kg 체중이다. 다른 양태에서, 후속적인 치료 복용량 또는 복용물들은 상기 내성 복용량과 동일한 또는 상이한 조성일 수 있고 및/또는 상기 내성 복용량과 동일 또는 상이한 경로로 투여될 수 있다. 바람직하게는 상기 치료 복용물은 정맥내, 근육내 또는 피하내 투여된다.

본 발명은 일반적으로 염증성 장질환 (1BD), 특히 셀리악 병, 크론 병, 및 궤양성 대장염 치료용 조성물 및 이의 치료 방법의 용도에 관한 것이다. 후술하는 바와 같이, 본 발명의 예증적 조성물은 타입 I 인터페론 길항체, 특히 항-IFNAR 항체, 항-타입 I 인터페론 항체 및/또는 이의 항원 결합 단편물은 물론 타입 I 인터페론 길항체와 같이 기능하는 폴리펩티드 및 작은 분자를 포함한다. 작동에 있어서, 어는 특정 이론에 구애 됨 없이, 본 발명의 예증적 길항체는 리간드 결합을, 및/또는 인터페론-매개 신호 전달을 방해하고 방해하고 및/또는 경쟁한다. 바람직하게는, 본 발명의 타입 I 인터페론 길항체는 혈액 순환시긴 생체내 수명을 가지며, 그 결과, 연장된 치료 반응을 나타내는 데 효과적이다. 생체내 항체 수명을 연장하는 방법은, 예를 들어, 면역글로불린 Fc 융합물 과 같은 융합 단백질의 제작 또는 폴리에틸렌 글리콜로의 연결 (PEG화)를 포함한다.

본 발명은 하나 이상의 타입 I 인터페론 길항체를 전술한 바와 같이 IBD 치료에 사용하는 것을 포함하는 치료 방법을 제공한다. 일례의 방법은 타입 I 인터페론 길항체에 장기적인 반응(response)을 나타낸다. 더하여, 하나 이상의 타입 I 인터페론 길항체를, 치료 단백질에 대한 면역 반응를 방지하고 및/또는 최소화하는 내성 복용법으로 투여한 후 치료적 투여법을 후속적으로 시행하는 치료방법을 제공한다.

본 발명의 실제에 있어서, 상반적으로 특별히 언급되지 않는 한, 당해분야 내의 바이러스학, 면역학, 미생물학, 분자생물학, 및 재조합 DNA 기술의 통상적인 방법이 사용되며, 이들의 많은 부분이 하기의 예증에 설명된다. 그러한 기술들은 문헌에 상세히 설명되어 있다. 참조, 예를 들어, Sambrook, 등 Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd Edition, 1989); Maniatis 등 Molecular Cloning: A Laboratory Manual (1982); DNA Cloning: A Practical Approach, vol. I & II (D. Glover, ed.); Oligonucleotide Synthesis (N. Gait, ed., 1984); Nucleic Acid Hybridization (B. Hames & S. Higgins, eds., 1985); Transcription and Translation (B. Hames & S. Higgins, eds., 1984); Animal Cell Culture (R. Freshney, ed., 1986); Perbal, A Practical Guide to Molecular Cloning (1984). 상기, 또는 하기 본 명세서에서 언급된 모든 출판물, 특허 및 특허 출원서들은 전체적으로 참조문헌으로 포함된다.

본 명세서 및 첨부된 청구범위에서 사용되는 바, 단수 개념의 언어들은 내용상 명백히 다르게 지시하지 않는 한 복수의 개념을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

항체 타입 1 인터페론 길항체류

전술한 바와 같이, 본 발명은 일반적으로 타입 1 인터페론류의 길항체를 포함하는 조성물, 및 그러한 조성물을 염증성 장질환 (IBD), 특히 셀리악 병, 크론 병, 및 궤양성 대장염의 치료에 사용하는 치료 방법에 관한 것이다.

본 발명의 특정 양태에서, 타입 1 인터페론 길항체는 타입 1 인터페론 수용체에 결합하고 이럼으로써 이의 리간드 (즉, 인터페론 알파, 인터페론 베타 또는 인터페론 오메가)의 결합을 막는 항-IFNAR 항체 및/또는 이의 단편물을 포함한다. 택일적으로 또는 이에 더하여, 타입 1 인터페론 길항체는 타입 1 인터페론 (즉, 인터페론 알파, 인터페론 베타 또는 인터페론 오메가)에 결합하고 이럼으로써 그의 수용체 (즉. IFNAR)에 결합하는 것을 막는, 항-타입 1 인터페론 항체 및/또는 이의 단편물일 수 있다. 리간드 결합에 대하여 항체-매개 저해가 경쟁적, 무-경쟁적 또는 비경쟁적 양상으로 나타난다. 택일적으로, 항체-기재 길항체는 타입 1 인터페론 수용체를 통한 세포내 신호전달을 방해함으로써 작용한다.

따라서, 발명의 범위에, 혼성화, 영장류화, 위장된(위장된), 인체화, 탈면역화된 및 인간 항-IFNAR 및 항-타입 1 인터페론 항체 및/또는 이의 항원-결합 단편물이 포함된다. 따라서, 그리고, 더 개시되는 바와 같이, 본 발명의 항체는 전술한 임의의 항체의 부분, 변이체 및/또는 유도체를 포함한다.

항체, 또는 이의 항원-결합 단편물은, 그것이 IFNAR 또는 타입 1 인터페론에는 검출될 수 있을 정도로 (예를 들어, ELISA 분석내에서) 반응하지만, 타입 2 인터페론 수용체, 인터페론-y 또는 임의의 다른 에는 반응하지 않는다면, 타입 1 인터페론 수용체에 특이적으로 결합," "면역학적으로 결합" 및/또는 면역학적으로 반응하는 것으로 얘기된다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, "면역학적 결합"은 일반적으로 항체, 또는 이의 단편물과, 타입 1 인터페론 또는 상기 항체에 특이적인 수용체 간에 일어나는 형태의 비공유성 상호작용을 말한다. 면역적 결합 상호작용의 강도 또는 친화력은 상호작용의 분리상수 (Kd)로 표시될 수 있는 데, Kd가 작을수록 더 큰 친화력을 나타낸다. 선택된 항체의 면역적 결합 특성은 당해 분야에 공지된 방법을 사용하여 정량화될 수 있다. 그러한 한 가지 방법은 항원-결합 부위/항원 복합체 형성 및 분리 속도를 측정하는 것으로서, 그러한 속도는 복합체 상대방의 농도, 상호작용의 친화력, 및 양쪽 방향으로 상기 속도에 동일하게 영향을 끼치는 지리적 변수에 의존한다. 따라서, "온(on) 속도 상수" (Kon) 및 "오프 (off) 속도 상수" (Koff) 둘 다는 농도 및 결합 및 분리의 실제 속도를 계산함으로써 결정될 수 있다. Koff/Kon의 비율은 친화력과 연과되지 않은 모든 변수를 무시할 수 있고, 따라서 분리 상수 Kd와 동일하다. 참조, Davies 등, Annual Rev. Biochem. 59: 439-473 (1990).

항체의 "항원-결합 부위" 또는 "결합 부분"은 항원 결합에 참여하는 면역글로불린 분자의 부분을 말한다. 항원 결합 부위는 중사슬(H) 및 경사슬(L)의 N-말단 가변 ("V") 영역의 아미노산 잔기에 의해 형성된다. 중사슬 및 경사슬의 V 영역내에 있는 고도로 분지된 세 개 구역을 "초가변(hypervariable) 영역"으로 말하고, 이들은 "골격(framework) 영역" 또는 "FRs"로 알려진 좀 더 보존된 구역 측면 사이에 위치하고 있다. 따라서, 용어 "FR"은 면역글로불린에서의 초가변 영역 사이에 및 근체에서 자연적으로 발견되는 아미노 산 서열을 일컫는다. In 항체 분자에서, the 경 사슬의 세 개 초가변 영역 및 중사슬의 세 개 초가변 영역은 서로 상대적으로 삼차원적으로 위치하고 있어 항원-결합 표면을 형성한다. 항원-결합 표면은 결합된 항원의 삼차원적 표면에 상보적이고, 그래서, 각 중사슬 및 경사슬의 세 개 초가변 영역을 "상보성-결정 영역" 또는 "CDRs"로 칭한다. 항체는 당해 분양의 통상적인 기술을 지닌 자에게 공지된 다양한 방법으로 제조될 수 있다. 참조, 예를 들어, Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory (1988). 일반적으로, 항체는, 본 명세서에서 설명되는 바와 같은 단일클론 항체의 제조, 또는 항체 유전자를 적절한 박테리아 또는 포유동물 세포숙주에 형질전환하여 재조합 항체를 생산하는 것을 포함하는, 세포 배양 기술에 의해 생성될 수 있다.

하나의 기술에서, 타입 1 인터페론 수용체 또는 이의 일부를 포함하는 면역원을 먼저 다양한 포유동물 (예, 마우스, 래트, 토끼, 양, 햄스터, 염소 또는 인간 항체물로 형질전환된 마우스) 중 임의의 동물에 투여한다.

택일적으로, 면역원은 수용체를 포함하는 세포 또는 세포추출물, 수용체의 세포외 도메인 (천연 또는 재조합)을 포함할 수 있다. 타입 1 인터페론 수용체가 소혈청 알부민 또는 키홀 림펫 헤모시아닌 (KLH)과 같은 운반 단백질과 결합되어 있다면 우수한 면역반응을 이끌어 낼 수 있다. 면역원을 동물 숙주, 바람직하게는 하나 이상의 증폭 면역화를 포함하는 소정의 스케줄에 따라 투여되고, 및 그 동물에서 주기적으로 채혈한다.

완전한 및 불완전한 프로인트 보조제와 같은 하나 이상의 보조제를 사용하여 면역화를 수행할 수 있다. 다음, 타입 1 인터페론 수용체 특이성인 다중클론 항체를 항혈청으로부터, 예를 들어, 적절한 고형 지지체에 연결된 타입 1 인터페론 수용체 면역원성 영역을 사용한 친화성 크로마토 그래피로, 정제할 수 있다.

타입 1 인터페론 수용체에 특이성인 단일클론 항체를, 예를 들어, 퀄러(Kohler) 및 밀스타인(Milstein)의 기술 {Nature 256 (5517): 495-7 (1975)}, 및 이의 개선된 방법을 사용하여 제조할 수 있다. 요약하면, 이러한 방법들은 소정의 특이성 (즉, 관심의 강글리오시드와의 반응성)을 가지는 항체를 생성할 수 있는 불멸의 세포 라인을 제조하는 것을 포함한다. 그러한 세포 라인은 예를 들어, 전술한 바와 같이 면역화된 동물로부터 얻어진 비장세포로부터 생성될 수 있다. 다음, 비장 세포들을, 예를 들어, 마이엘로마 세포융합 파트너, 바람직하게는 면역화 동물과 동일계통인 것과 융합하여 불멸화될 수 있다. 다양한 융합 기술이 사용될 수 있다. 예를 들어, 비장세포 및 마이엘로마 세포를 비이온성 계면제로 수분 간 결합한 후, 마이엘로마 세포는 아니고, 하이브리드 세포 성장을 지지하는 선택 배지상에 저밀도로 깔아둔다. 바람직한 선택 기술은 HAT (하이포크산틴, 아미노프테린, 티민) 선택제를 사용한다. 충분한 시간, 통상 1 내지 2 주 후, 하이브리드물의 콜로니가 관측된다. 단일 콜로니를 선택하고 이의 배양 상등액을 타입 1 인터페론 수용체에 대항하는 결합 활성에 대하여 시험한다. 높은 반응성 및 특이성을 가지는 하이브리도마가 바람직하다.

하이브리도마 콜로니를 성장시키는 상등액으로부터 단일클론 항체를 분리할 수 있다. 또한, 하이브리도마 세포라인을 마우스와 같은 적절한 척추동물 숙주의 복강으로 투여하는 것과 같이 다양한 기술을 사용하여 효율을 높일 수 있다. 다음, 복수 또는 혈액으로부터 단일클론 항체를 수거할 수 있다. 통상적인 기술, 예를 들어, 크로마토그래피, 젤 투과, 침전, 및 추출과 같은 기술을 사용하여 오염물을 항체로부터 제거할 수 있다. 예를 들어, 친화성 크로마토그래피 단계에서 정제 과정중에 항-타입 1 인터페론 수용체를 사용할 수 있다.

항체 분자의 면역학적 결합 특성을 나타낼 수 있는 항원-결합 부위를 포함하는, 치료학적으로 유용한 많은 분자들이 당해 분야에 공지되어 있다. 단백질 분해 효소 파파인은 IgG 분자를 우선적으로(preferentially) 절단할 때 수 개의 단편물을 남기는데, 이것 중 두 개 ("Fab" 단 편물) 각각은 온전한 항원-결합 부위를 포함하는 공유결합성 헤테로다이머를 포함한다. 효소 펩신은 IgG 분자를 절단하여 수 개의 단편물을 제공하는 데, 이 중에는 양쪽 항원-결합 부위를 포함하는 "Fab'2" 단편물이 있다. "Fv" 단편물은 IgM, 및 드문 경우, IgG 또는 IgA 면역글로불린 분자를 우선적 단백질 분해 절단하여 생성될 수 있다. Fv, Fab 및 Fab'2 단편물들은 그러나 당해 분야에 공지된 재조합 기술을 사용하여 통상적으로 유도된다. Fv 단편물은 자연적 항체 분자의 항원 인식 및 결합 능력의 많은 것을 보유하고 있는 항원-결합 부위를 포함하는 비 공유결합성 VH :: VL 헤테로다이머를 포함한다. Inbar 등, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 69: 2659-2662 (1972); Hochman 등, Biochem 15: 2706-2710 (1976); 및 Ehrlich 등, Biochem 19: 4091-4096 (1980).

단일 사슬 Fy (WtsFvt) 항체는 공유결합적으로 연결된 VH :: VL 헤테로다이머로서 펩타이드-암호화 링커에 의해 연결된 VH- 및 VL-암호화 유전자를 포함하는 유전자 융합체로부터 발현된다. Huston 등, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 85d6): 5879-5883 (1988). 자연적으로 응집된-그러나 화학적으로는 분리된- 경 및 중 항-항-타입 1 인터페론 수용체 항체 사슬을 항체 V 영역으로부터 항원-결합 부위의 구조와 실질적으로 유사한 삼차원적 구조로 접혀지는 스파이 분자로 전환시키기 위한 화학적 구조들을 분간하는 데 많은 방법들이 사용되었다. 참조, 예를 들어, 미국 특허 번호 제 5,091, 513 호 및 제5,132, 405 호, Huston 등; 및 미국 특허 번호 제 4,946, 778호, Ladner 등.

전술한 각각의 분자들은 중사슬 및 경사슬 CDR 세트를 포함하고, 각각은 CDR들에 지지체를 제공하고 및 서로에 대하여 CDR 의 공간적 관계를 정의하는 중사슬 및 경사슬 FR 세트사이에 위치하고 있다. 여기에서 사용되는 바와 같이, 용어 "CDR 세트"는 중사슬 또는 경사슬 V 영역의 세 개의 초가변 영역을 뜻한다. 중사슬 또는 경사슬의 N-말단에 선행되어 있는, 이러한 영역은 각각 "CDR1" "CDR2" 및 "CDR3"으로 표시된다. 항원-결합 부위는, 그러므로, 중사슬 및 경사슬 V 영역 각각으로부터의 CDR 세트를 함유하는 여섯 CDR를 포함한다. 단일 CDR를 포함하는 타입 1 인터페론 길항체, (예, CDR1, CDR2 또는 CDR3) 여기서 "분자 인식 단위체로 칭한다. 많은 항원-항체 복합체를 결정학적 분석에 의하면, CDRs의 아미노산 잔기들은 결합된 항원과 넓은 접촉을 하고 있다는 것이 밝혀졌고, 대부분의 항원 접촉은 중사슬 CDR3과 한다. 따라서, 분자 인식 단위체는 일차적으로 항원-결합 부위의 특이성과 관련이 있다.

여기서 사용된 바와 같이, 용어 "FR 세트"는 중사슬 또는 경사슬 V 영역 의 CDR 세트의 CDR들의 뼈대를 구성하는 4 개의 측면(flanking) 아미노산 서열을 지칭한다. 특정 FR 잔기들은 결합 항원과 접촉할 수 있다; 그러나, FR들은 일차적으로 상기 V 영역을 항원-결합 부위로, 특히 CDRs 직접적으로 인접한FR 잔기로 폴딩하는 것에 대하여 관계한다. FR들 내에서, 특정 아미노산 잔기 및 특정 구조적 특징들은 매우 고도로 보존되어 있다. 이와 관련하여, 모든 V 영역 서열들은 약 90 아미노산 잔기들의 내부 다이설파이드 루프를 포함한다. 상기 V 영역들이 결합-부위로 접혀(폴드)질 때, CDR들은 항원-결합 표면을 형성하는 돌출 루프 모티프로서 나타난다. 일반적으로, CDR 루프가 특정 "정준 (canonical)" 구조-정확한 CDR 아미노산 서열에 관계없이-로 접혀진 형태에 영향을 끼치는 FR들의 보존된 구조 부위가 있다고 인식되고 있다. 또한 특정 FR 잔기들은 항체 중사슬 및 경사슬들의 상호작용을 안정화시키는 비공유성 내부 도메인 접촉에 참여하는 것으로 알려져 있다.

인간의 불변(constant) 도메인에 융합된, 관련된 비-인간 V-영역을 가지는 항체 (Winter 및 Milstein Nature 349: 293-299 (1991) ; Lobuglio 등 Proc. Nat. Acad. Sci. USA 86 : 4220-4224 (1989) ; Shaw 등 J Immunol. 138 : 4534-4538 (1987); 및 Brown 등 Cancer Res. 47: 3577-3583 (1987) ), 적절한 인간 항체 불변 도메인과 융합하기 건에 인간 지지 FR에 연결된 비-인간 CDR들 (Riechmann 등 Nature 332: 323-327 (1988) ; Verhoeyen 등 Science 239: 1534-1536 (1988); 및 Jones 등 Nature 321: 522-525 (1986)), 및 재조합적으로 위장된(위장된) 설치류 FR들에 의해 지지된 설치류 CDR들 (유럽 특허 공개 번호 519,596, 1992년 11월 23일 공개)을 위시한 비-인간 면역글로불린으로부터 유도된 항원-결합 부위를 포함하는 많은 "인체화" 항체 분자들이 알려져 있다. 이러한 "인체화된" 분자들은 인체에서 이러한 부분(moiety)의 치료적용의 기간 및 효율을 제한하는 비-인간 항인간 항체 분자들에 대한 원하지 않는 면역학적 반응을 최소화시키도록 고안된다.

본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "위장된(위장된) FR" 및 "재조합적으로 위장된FR"는, 예를 들어, 설치류 중사슬 또는 경사슬 V 영역으로부터의 FR 잔기를 인간FR 잔기들로 선택적으로 치환하여 모든 자연적인 FR 폴딩 구조를 실질적으로 보유하는 항원-결합 부위를 포함하는 이종발생 분자를 제공하는 것으로 지칭한다. 위장(Veneering) 기술은 항원-결합 부위의 리간드 결합 특성이 일차적으로 항원-결합 표면내의 중사슬 및 경사슬 CDR 세트의 구조 및 상대적 성질에 의해 일차적으로 결정된다는 것을 이해하는 바탕에서 이루어 진다. Davies 등 Ann. Rev. Biochem. 59: 439-473 (1990). 따라서, 항원 결합 특이성은 CDR 구조들, 이들 간의 상호작용, 및 이들과 V 영역 도메인의 나머지 부분과의 상호작용이 유지되어 있는 그러한 인체화 항체에서만 보존될 수 있다. 위장 기술을 사용하여, 면역체계에 의해 용이하게 만나는 외부 (예를 들어, 용매-접근용이성) FR 잔기를 선택적으로 인간 잔기와 치환하여 약한 면역원성, 또는 실질적으로 비-면역원성인 위장된 표면을 포함하는 하이브리드 분자를 제공한다.

위장 방법은 인간 항체 가변 도메인에 대하여, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 4th ed., (미국, Dept. of Health and Human Services, 미국 정부 인쇄국, 1987)에서 Kabat 등에 의해 만들어진, Kabat 데이터베이스에 대한 업데이트 버전, 및 다른 이용가능한 미국 및 외국 데이터베이스 (핵산 및 단백질 둘 다)의 이용가능한 서열 데이터를 사용한다. V 영역 아미노산들의 용매 접근용이성은 인간 및 쥐의 항체 단편물에 대한 공지된 삼차원 구조로부터 유추될 수 있다. 쥐의 항원-결합 부위를 위장하는 데 일반적으로 두 가지 단계가 있다. 먼저, 관심되는 항체 분자의 가변적 도메인의 FR을 상기 확인된 소스로부터 얻어진 인간 가변 도메인의 상응하는 FR 서열과 비교한다. 다음, 가장 유사한 인간 V 영역을 상응하는 쥐의 아미노산과 잔기 대 잔기로 비교한다. 인간 상응물과 다른, 쥐의 FR에서의 잔기는 당해 분야에 공지된 재조합 기술을 사용하여 인간 부분(moiety)에 존재하는 잔기로 치환한다. 잔기 교환은 적어도 부분적으로 노출된 (용매 접근용이한) 부분을 사용하여서만 수행되고 및 프롤린, 글리신 및 하전된 아미노산류와 같은, V 영역 도메인의 삼차 구조에 상당한 영향을 끼치는 아미노산 잔기를 교환에는 신중히 해야 한다.

이러한 방식으로, 결과된 "위장된" 쥐의 항원-결합 부위들은 따라서 쥐의 CDR 잔기들, 상기CDR에 실질적으로 인접한 잔기들, 매립된 또는 거의 매립된 (용매 불접근성)것으로 확인된 잔기들, 중사슬 및 경사슬 도메인 간의 비공유성 (예, 정전기적 및 소수성) 접촉에 참여하는 것으로 여겨지는 잔기들, 및 CDR 루프의 "정준" 삼차 구조에 영향을 끼치는 것으로 여겨지는 FR의 보존된 구조 영역으로부터의 잔기들을 보유하도록 고안된다. 다음 이러한 고안 기준을 사용하여 재조합 뉴클레오타이드 서열들을 제조하는 바, 이 서열들은 쥐의 항원-결합 부위의 중사슬 및 경사슬의 CDR을, 쥐의 항체 분자의 항원 특이성을 나타내는 재조합 인간 항체를 발현하기 위해 포유류 세포를 형질전환하는데 사용될 수 있는 인간-유사한 FR로 결합한다.

본 발명은 또한 바람직하게는 생체내 면역원성 또는 상기 개요된 바와 같이 또는 당해 분야에서 이용가능한 방법으로 제조된 항체를 감소시키는 것에 관한 것이다. 감소된 면역원성을 가지는 항체를 제조하는 한가지 방법의 실례는 Biovation (Aberdeen, 영국)에 의해 제공되는 DeElmunisation 방법론이다. 이와 같은 방법에 의해, MHC 클래스 II 결합 서열을 포함하는 인간 헬퍼T-세포 에피토프가 동정되고 및 치료 항체로부터 제거되어서, 상기 항체가 생체내로 투여될 때, 헬퍼 T-세포의 활성 및 분화를 최소화시킨다.

본 발명의 바람직한 항체는 여기서, CPI-1697로 칭하는 인체화된 항체이다. 이러한 항체는 H3로 칭하는 중사슬 및 Kl으로 칭하는 경사슬로 구성된다. H3 중사슬 및 Kl 경사슬 가변 영역의 아미노산 서열은 도 14A (서열 번호 : 1) 및 14B (서열 번호 : 2)에 나타나 있다. H3 중사슬은 콘센서스 인간 면역글로불린 중사슬 골격(framework) 서열상에 결합된, 쥐의 항-IFNAR-1 항체 64G12의 중사슬로부터 나온 CDR1, CDR2 및 CDR3 서열을 포함하는 반면, Kl 경사슬은 콘센서스 인간 면역글로불린 카파 경사슬 골격 서열에 결합된, 쥐의 항- IFNAR-1 항체 64G12의 경사슬로부터 나온CDR1, CDR2 및 CDR3 서열을 포함한다. CPI-1697 항체는 인간 IgG4 불변 영역을 포함한다.

본 발명에 사용하기 적합한 다른 항체-기재 IFNAR-1 길항체류는, 2003년 4월 23일자로 출원된, "인터페론 알파 수용체-1 (IFNAR-1) 에 대한 인체화 항체" 제목의 공동 소유의 미국 특허 출원서 일련 번호 60/465, 058에 상세히 설명되어 있고, 이의 전체 내용은 여기서 참조문헌으로 포함된다.

작은 분자 및 폴리펩타이드 타입 1 인터페론 길항체류

항체-기재 타입 1 인터페론 길항체류에 더하여, 본 발명은 또한 하나 이상의 작은 분자, 예를 들어, 타입 1 인터페론와 이의 수용체 (즉 IFNAR)와의 결합을 방해하는 그러한 작은 분자를 포함하는, 타입 1 인터페론 길항체류, 및 이의 조성물에 관한 것이다.

특정 양태에서, 유력한 작은 분자 길항체류의 조합적 라이브러리를 타입 1 인터페론 또는 타입 1 인터페론 수용체에 결합하는 능력에 대하여 스크린할 수 있다. 통상적으로는, 유용한 특성을 가진 신규한 화학적 실체는 특정의 바람직한 특성 또는 활성을 가지는 화학적 화합물 (소위 "리드 (lead) 화합물")을 동정함으로써, 예를 들어, 활성을 저해하고, 리드 화합물의 변이체를 창출하고, 및 그러한 변이 화합물의 특성 및 활성을 평가함으로써, 생성될 수 있다. 종종, 높은 효율 스크리닝 (HTS) 방법이 그러한 분석에 사용된다.

바람직한 일 양태에서, 높은 효율 스크리닝 방법은 많은 잠재적 치료 화합물 (후보 화합물)을 포함하는 라이브러리를 제공하는 것을 포함한다. 다음, 그러한 "조합적 화학 라이브러리"들을 하나 이상의 분석법으로 스크린하여 소정의 특징적 활성을 나타내는 그러한 라이브러리 구성원 (특정 화학종 및 아종)을 동정한다. 결과적으로 동정된 화합물은 통상적인 "리드화합물"로서 작용할 수 있거나 또는 그 자체를 잠재적 또는 실재적 IBD 치료제로서 사용될 수 있다.

조합적 화학적 라이브러리는 화학적 시약과 같은 많은 "빌딩 블록"을 조합함으로써, 화학적 합성 또는 생물학적 합성으로 생성된 다양한 화학적 화합물의 집합이다. 예를 들어, 폴리펩타이드 (즉, 뮤테인) 라이브러리와 같은 선형 조합적 화학적 라이브러리는 아미노산이라 불리우는 화학적 빌딩 블록의 세트를 주어진 화합물 길이에 대해 (즉, 폴리펩타이드 화합물에 있는 아미노산의 수) 가능한 모든 방법으로 조합함으로써 형성된다. 수 백만의 화학적 화합물은 화학적 빌딩 블록의 그러한 조합적 혼합을 통해 합성될 수 있다. Gallop 등, J. Med. Chem. 37 9: 1233-1251 (1994).

조합적 화학 라이브러리의 제조 및 스크리닝은 당해분야의 숙련자들에게는 공지되어 있다. 그러한 조합적(combinational) 화학 라이브러리는, 펩타이드 라이브러리 (참조, 예, 미국 특허 번호, 제 5,010, 175호, Furka, Pept. Prot. Res. 37: 487-493 (1991), Houghton 등, Nature, 354: 84-88 (1991)), 펩토이드류(peptoids) (PCT 공개 번호 WO91/19735), 암호화된 펩타이드류 (PCT 공개 번호 WO 93/20242호), 랜덤 바이오-올리고머(PCT 공개 WO 92/00091), 벤조디아제핀류(benzodiazepines) (미국 특허 번호 5, 288, 514), 다이버조먼류(diversomers) 예를 들어, 하이단토인류(hydantoins), 벤조디아핀류 및 디펩타이드류 (Hobbs 등 , Proc. Nat. Acad. Sci. USA 90: 6909-6913 (1993)), 비닐기함유(vinylogous) 폴리펩타이드류 (Hagihara 등, J. Amer. Chem. Soc. 114 : 6568 (1992)), 베타-D-글루코즈 골격을 가진 비펩타이드성 펩타이드유사체(peptidomimetics) (Hirschmann 등, J. Amer. Chem. Soc. 114: 9217-9218 (1992)), 작은 화합물 라이브러리의 유사 유기 종합체 (Chen 등, J. Amer. Chem. Soc. 116: 2661 (1994)), 올리고카바메이트 (Cho, 등, Science 261: 1303 (1993)), 및/또는 펩티딜 포스포네이트 (Campbell 등, J. Org. Chem. 59: 658 (1994)). 참조, Gordon 등, J. Med. Chem. 37 : 1385 (1994), 핵산 라이브러리 (참조, 예를 들어, Strategene, Corp.), 펩타이드 핵산 라이브러리 (참조, 예를 들어. , 미국 특허 5,539, 083), 항체 라이브러리 (참조, 예를 들어, Vaughn 등, Nature Biotechnology 14 3 : 309-314 (1996), 및 PCT/US96/10287), 탄수화물 라이브러리 (참조, 예를 들어, Liang 등, Science 274: 1520- 1522 (1996), 및 미국 특허 No. 5,593, 853), 및 작은 유기 분자 라이브러리 (참조, 예를 들어, 벤조디아제핀류, Baum, C&EN, Jan 18, page 33 (1993); 이소프레노이드류, 미국 특허 No. 5,569, 588 ; 티이졸리디논류 및 메타티아자논류, 미국 특허 No. 5,549, 974; 피롤리딘류, 미국 특허 Nos. 5,525, 735 및 5,519, 134; 모르폴리노 화합물, 미국 특허 No. 5,506, 337; 벤조디아제핀류, 미국 특허 No. 5, 288, 514; 등)을 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다.

조합적 라이브러리 제조용 기구는 상업적으로 이용가능하다 (참조, 예를 들어, 357 MPS, 390 MPS, Advanced Chem Tech, Louisville KY, Symphony, Rainin, Woburn, MA, 433A Applied Bio시스템s, Foster City, CA, 9050 Plus, Millipore, Bedford, MA).

많은 공지된 자동 기계장치적 시스템이 또한 용액 상 화학용으로 개발되어 있다. 이러한 시스템들은 다케다 케미컬 인더스터리스 엘티디 (Osaka, Japan)가 개발한 자동화된 합성 장치와 같은 자동화된 워크스테이션, 및 화학자에 의해 수행되는 수동 합성 동작을 닮은 로보트 팔을 이용하는 많은 로보트 시스템을 포함한다. (Zymate II, Zymark Corporation, Hopkinton, Mass.; Orca, Hewlett-Packard, Palo Alto, Calif.). 이러한 장치들은, 적절히 수정되면, 본 발명에 사용하기에 적합하다. 또한, 수 많은 조합적 라이브러리는 그 자체로 상업적으로 이용가능하다 (참조, 예를 들어, Comgenex, Princeton, N. J., Asinex, Moscow, Ru, Tripos, Inc., St. Louis, MO, ChemStar, Ltd, Moscow, RU, 3D Pharmaceuticals, Exton, PA, Martek Biosciences, Columbia, MD, 등).

인터페론-수용체 상호작용을 검출하기 위해, 배양된 인간 염증 세포 라인의 IFN-매개 저해와 같은, IFN-매개 신호 전달을 검출하는 분석법을 사용할 수 있다. 또한, 예를 들어, IFN-감지 유전자 프로모터로부터 발현된 리포터 유전자를 사용하여, 리포터 유전자 분석법을 이용할 수 있다. Lallemand 등, J. Leukocyte Biol. 60: 137-146 (1996). 적절한 리포터 유전자는 clude 루시퍼라제 및 녹색 형광 단백질을 암호화하고 있는 유전자를 포함한다. 단백질. 그러한 분석법에서, 리포터 유전자 발현은 IFN 활성에 의존하고, 및 IFN 길항체는 선택적으로 IFN-자극 유전자 발현을 저해한다.

특정 폴리펩타이드의 존재 여부, 양, 또는 다른 특징들을 구하기 위한 고효율 분석법은 당해 분야에 공지되어 있다. 유사하게, 결합 분석법 및 리포터 유전자 분석법들이 마찬가지로 공지되어 있다. 따라서, 예를 들어, 미국 특허 번호 제 5,559, 410 호는 단백질에 대한 고효율 스크리닝 방법을 개시하고 있고, 미국 특허 번호 제 5,585, 639 호는 핵산 결합에 대한 고효율 스크리닝 방법 (예를 들어, 열지어서), 미국 특허 번호 5,576, 220 및 5,541, 061 리간드/항체 결합에 대한 스크리닝을 하는 고효율 방법을 개시한다.

또한, 고효율 스크리닝 시스템들은 상업적으로 이용가능하다 (참조, 예를 들어, Zymark Corp., Hopkinton, MA; Air Technical Industries, Mentor, OH; Beckman Instruments, Inc. Fullerton, CA; Precision Systems, Inc., Natick, MA, 등). 이러한 시스템은 전형적으로 샘플 및 시약 피펫팅, 액체 분배, 시기적절한 배양, 및 분석에 적절한 검출기(들)의 마이크로플레이트 상에서의 최종 독출을 포함한 자동화 과정을 수행한다. 이러한 훌륭한 시스템은 고효율을 제공하고 신속하게 운전하는 것은 물론 고도의 유연성과 맞춤 실험을 제공한다.

그러한 시스템의 제작자들은 고효율 시스템에 대한 상세한 설명서를 제공한다. 따라서, 예를 들어, Zymark Corp.는 유전자 전사, 리간드 결합 등의 조절을 검출하기 위한 스크리닝 시스템을 설명하는 기술 설명서를 제공한다.

하나의 양태에 있어서, 조절자는 단백질, 종종 자연 발생 단백질 또는 자연 발생 단백질의 단편물이다. 따라서, 예를 들어, 단백질을 함유하는 세포성 추출물, 또는 단백질성 세포 추출물의 랜덤 또는 지향성이 있는 소화물을 사용할 수 있다. 이러한 방식으로, 단백질의 라이브러리를 본 발명의 방법에서 스크리닝하는 데 만들 수 있다. 이러한 양태에 특히 바람직한 것은 박테리아성, 곰팡이성, 바이러스성 및 포유동물성 단백질의 라이브러리이고, 포유동물성 단백질이 바람직하고, 인간 단백질이 특히 바람직하다. 특히 유용한 시험 화합물은 타겟이 속한 단백질의 군, 예를 들어 효소용 기질, 또는 리간드 및 수용체로 귀착된다. 바람직한 양태에서, 조절자은 약 5 내지 30 아미노산으로 구성된 펩타이드이고, 5 내지 20 아미노산이 바람직하고, 약 7 내지 15 아미노산이 특히 바람직하다. The 상기에서 개요된 바와 같이, 펩타이드들은 자연 발생 단백질들의 소화물, 랜덤 펩타이드, 또는 "편향된(biased)" 랜덤 펩타이드일 수 있다. "랜덤화" 이의 문법적 동의어는 핵산 또는 펩타이드가 각각 기본적으로 뉴클레오타이드 및 아미노산의 랜덤 서열로 구성되어 있는 것을 의미한다. 이러한 랜덤 펩타이드 (또는 핵산, 하기 논의되는) 들은 종종 화학적으로 합성되기 때문에, 이것들은 임의의 위치에서 임의의 뉴클레오타이드 또는 아미노산에 통합될 수 있다. 합성 과정은 랜덤화된 단백질 또는 핵산을 생성하여, 서열 길이에 대한 가능한 모든 또는 대부분의 조합을 형성하도록 고안될 수 있고, 따라서, 랜덤화된 후보 생활성 단백질 제제의 라이브러리를 형성할 수 있다.

하나의 양태에서, 상기 라이브러리는 완전이 랜덤화되어 있고, 임의의 위치에서 어떠한 서열 선호성 또는 상수가 없다. 바람직한 양태에서, 상기 라이브러리는 편향되어 있다. 즉, 서열내의 특정 위치는 일정하거나, 또는 제한된 수의 확률로부터 선택되어진다. 바람직한 양태에 있어서, the 뉴클레오타이드 또는 아미노산 잔기들은, 예를 들어, 소수성 아미노산, 친수성 잔기, 공간적으로 편향된 (작거나 크거나) 잔기의 일정한 군에서, 핵산 결합 도메인을 창출하는 방향으로, 가교용 시스테인을 창출하는 방향으로, SH-3 도메인용 프롤린을 창출하는 방향으로, 포스포릴화 부위용 세린, 스레오닌, 타이로신 또는 히스티딘을 창출하는 방향으로 랜덤화되어 있다.

타입 1 인터페론 길항체를 포함하는 조성물

추가적인 양태에 있어서, 본 발명은 세포 또는 동물에, 단독 또는 하나 이상의 다른 치료 약제와 함께 투여하기 위한 약학적으로 허용된 부형제를 함유한 본 명세서에서 개시된, 하나 이상의 타입 1 인터페론 길항체의 제형에 관한 것이다. 예를 들어, 관계되는 특정 치료 양생법에 따라서, 본 발명의 조성물은 예를 들어, 면역억제제, 항-염증제, 스테로이드, 면역조절제, 사이토카인, 및 TNF 길항체와 같은 하나 이상의 추가 치료제를 포함할 수 있다. 면역억제제 일례는 아자티오프린, 메토트렉세이트, 시클로스포린, FK506, 라파미신, 및 미오페놀레이트 모페틸을 포함한다. 항-염증제의 일례는 5-아미노살리실 산, 설파살라진 및 올살라진을 포함한다.

스테로이드 일례는 코르티코스테로이드류, 글루코코르티코스테로이드류, 프레드니손, 프레드니솔론, 하이드로코르티손, 메틸프레드니솔론, 덱사메타손, 및 ACTH을 포함한다.

면역조절제의 일례는 PVAC, 항-CD40 리간드, 항-CD40, 나탈리주마브 (Antegren), 항-VCAMl, 및 항-ICAM1을 포함한다. 사이토카인의 일례는 IL-10. TNF 길항체의 일례는 인플리시마브 (Remicade (E), 에타너셉트 (Enbrel (g), 아달리무마브 (HLUmiraTM), 및 CDP870을 포함한다.

필요하다면, 본 명세서에서 개시된 조성물은, 예를 들어, 다른 단백질 또는 폴리펩타이드, 또는 다양한 약학적으로 활성인 제제와 같은 다른 제제와 함께 투여될 수 있다는 것이 이해될 것이다. 사실, 타겟 세포 또는 숙주 조직과 접촉시 심각한 역작용을 야기하지 않는 다면, 포함될 수 있는 다른 성분에 대한 실질적인 한계는 없다. 상기 조성물은 따라서 특정의 경우 요구되는 대로, 다양한 다른 제제롸 함께 전달될 수 있다. 그러한 조성물들은 숙주 세포 또는 다른 생물학적 소스로부터 정제되거나, 또는 본 명세서에서 설명된 바와 같이 화학적으로 합성될 수 있다.

그러므로, 본 발명의 다른 관점에서, 본 명세서에서 설명된 하나 이상의 항체, 단백질 및/또는 작은 분자와 생리적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학적 조성물이 제공된다. 여기서 설명된 임의의 약학적 조성물은 본 발명의 폴리펩타이드의 약학적 허용 염을 포함할 수 있다는 것이 명백하다. 그러한 염은, 유기 염기 (예를 들어, 일차, 이차 및 삼차 아민류, 및 염기성 아미노산의 염) 및 무기 염기 (예를 들어, 소듐, 포타슘, 리튬, 암모늄, 칼슘 및 마그네슘 염)을 위시한 약학적으로 허용된 비독성 염기로부터 제조될 수 있다.

당해 분야의 숙련자에게 공지된 임의의 적합한 부형제가 본 발명의 조성물에 사용될 수 있고, 부형제의 유형은 통상 투여 형태에 의존하여 달라진다. 본 발명의 조성물은 예를 들어, 구강, 비강, 점막, 정맥내, 복강내, 및 근육내 투여를 포함하는 적절한 투여 방식에 따라, 제형된다.

약학적 조성물내에 사용되는 부형제는 생체 적합성이고, 또한 생분해성일 수 있다. 특정 양태에서, 상기 제형은 바람직하게는 상대적으로 일정한 수준의 활성 성분을 방출한다. 다른 양태에서, 그러나, 투여시 즉시 더 빠른 속도로 방출하는 것이 바람직할 수 있다. 그러한 조성물의 제형 공지된 기술을 사용하는 당해 분야의 기술자에게 공지되어 있다. 이와 관련하여 유용한 부형제 예는 폴리 (락타이드-co-글리콜라이드), 폴리아크릴레이트, 라텍스, 전분, 셀룰로오즈, 덱스트란 등의 미소입자를 포함한다. 다른 지연 방출 부형제의 예는 비액체성 친수성 핵심체(core) (예를 들어, 가교된 다당 또는 올리고당) 및, 선택적으로, 인지질과 같은 양쪽성 화합물을 포함하는 외부 층 (참고, 예를 들어, 미국 특허 No. 5,151, 254 및 PCT 공개 번호 WO 94/20078, WO/94/23701 및 WO 96/06638)을 포함하는 거대분자 생벡터 (supermolecular biovector)를 포함한다. 서방성 제형내에 포함된 활성 화합물의 양은 이식 부위, 방출 속도와 예상 기간, 및 치료 또는 예방되는 상태의 특성에 의존한다.

다른 예증적 양태에서, 생분해성 미소구 (예를 들어, 폴리락테이트 폴리글리콜레이트)를 본 발명의 조성물용 부형제로 사용한다. 적절한 생분해성 미소구는, 예를 들어, 미국 특허 Nos. 4,897, 268; 5,075, 109; 5, 928, 647; 5,811, 128; 5,820, 883; 5,853, 763; 5, 814, 344,5, 407,609 및 5,942, 252에 개시되어 있다. PCT 공개 번호 WO/99 40934, 및 본 명세서에서 인용된 참조 문헌에 설명된 바와 같은 개질된 간염 코어 단백질 부형제 시스템 또한 여러 적용물에 유용하다. 다른 예의 부형제/전달 시스템은 미국 특허 번호. 5, 928, 647에 개시된 바와 같은, 숙주에서 클래스 I-제한 세포독성 T 임파구 반응을 유도할 수 있는 입자-단백질 복합체를 포함하는 부형제를 사용한다.

본 발명의 약학적 조성물은 하나 이상의 완충제 (예를 들어, 중성 완충 식염수 또는 포스페이트 완충 식염수), 탄수화물류 (예를 들어, 글루코즈, 만노즈, 수크로즈 또는 덱스트란), 만니톨, 단백질, 폴리펩타이드, 또는 그리신과 같은 아미노산, 항산화제, 제균제, EDTA 또는 글루타치온과 같은 킬레이팅제, 보조제 (예를 들어, 수산화 알루미늄), 제형을 수령자의 혈액에 대해 등장액, 고장액 또는 약한 고장액으로 만드는 용질물, 현탁제, 농후제 및/또는 방부제를 더 포함할 수 있다. 선택적으로, 본 발명의 조성물은 동결건조물로 제형될 수 있다.

여기서 설명된 약학적 조성물은 봉합된 앰퓰 또는 병과 같은, 단일 투약 또는 다중 투약 용기에 담을 수 있다. 그러한 용기는 통상 사용시까지 제형물의 멸균상태 및 안정성을 유지하는 방식으로 밀봉된다. 일반적으로, 제형물은 유성 또는 수성 매체내의 현탁액, 용액 또는 유화액으로서 보관될 수 있다. 선택적으로, 약학적 조성물은 사용하기 직전에, 멸균액 부형제를 첨가하는 것만을 요구하는 동결건조 상태로 보관될 수 있다.

예를 들어, 경구, 정맥내, 비강내, 및 근육내 투여 및 제형을 포함하는, 여기서 설명된 특정 조성물을 다양한 치료 방법으로 사용하는 적절한 투약 및 치료 섭생법의 발달은 당해 분야에 공지되어 있고, 이의 일부는 예증의 목적으로 하기에서 간략하게 논의된다. 특정 적용물에 있어서, 본 명세서에서 개시된 약학적 조성물은 동물에 경구 투여를 통해 전달될 수 있다. 그러한 것으로서, 이러한 조성물은 불활성 희석제 또는 생체 동화될 수 있는 먹을 수 있는 부형제와 함께 제형화될 수 있고, 또는 경질- 또는 연질 젤라틴 캡슐로 봉함되거나, 또는 정제로 압축되거나, 또는 식품에 직접 포함될 수 있다. 활성 화합물은 또한, 약학 첨가제(excipients)와 혼합되고 및 섭생할 수 있는 정제, 부칼정제, 구내정(troche), 캡슐, 엘릭서(elixir), 현탁액, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 사용될 수 있다 (참조, 예를 들어, Mathiowitz 등, Nature 1997 Mar 27; 386 (6623): 410-4; Hwang 등, Crit Rev Ther Drug Carrier Syst 1998; 15 (3): 243-84 ; 미국 특허 5,641, 515; 미국 특허 5,580, 579 및 미국 특허 5,792, 451). 정제, 구내정, 알약, 캡슐 등은 또한 예를 들어, 검 트라가칸스, 아카시아, 옥수수 전분, 또는 젤라틴과 같은 결합제; 디칼슘 포스페이트와 같은 약학 첨가제; 옥수수 전분, 감자 전부, 알긴 산 등과 같은 붕해제; 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제; 및 수크로즈, 락토즈 또는 사카린과 같은 감미제 또는 페퍼민트, 동록유, 또는 버찌 향료와 같은 향미제와 같이, 다양한 임의의 첨가 성분을 포함할 수 있다. 투여 단위체 형태가 캡슐일 때, 전술한 유형의 물질외에, 액체 부형제를 더 포함할 수 있다. 다양한 다른 물질이 코팅막으로 주어지거나 투약 단위체의 물리적 형태를 개질하는데 사용될 수 있다. 예를 들어, 정제, 알약, 또는 캡슐은 셀락, 당 또는 둘 다로 코팅될 수 있다. 물론 임의의 투약 단위체 형태를 제조하는 데 사용된 임의의 물질은 약학적으로 순수하고 및 사용되는 양에서 실질적으로 비독성이어야 한다. 또한, 상기 활성 화합물을 서방 제조물 및 제형에 혼합될 수 있다.

통상, 이러한 제형은 적어도 약 0.1% 의 활성 화합물을 포함하는 바, 활성 성분(들)의 비율은 물론 변할 수 있고 편리하게는 전체 제형의 중량 또는 부피를 기준으로, 약 1 또는 2% 내지 약 60% 또는 70% 일 수 있다. 자연적으로, 각 치료학적으로 유용한 조성물내의 활성 화합물 양은 상기 화합물의 임의의 주어진 단위 투여량에서 적절한 투여가 이뤄지는 방식으로 정해질 수 있다.

용해성, 생체 이용가능성, 생물학적 수명, 투여 경로, 생산품 유통 기간은 물론 다른 약학적 고려사항은 그러한 약학적 제형을 제조하는 당해 분야의 기술자에게는 이해될 것이고, 그러한 것으로서, 다양한 투약 및 치료 섭생법이 바람직하다.

경구 투여를 위해, 본 발명의 조성물은 선택적으로 구강청정제, 치약, 부칼 정제, 경구 스프레이, 또는 설하 경구-투여 제형의 형태로 하나 이상의 약학 첨가제와 혼합될 수 있다.

선택적으로, 활성 성분은 소듐 보레이트, 글리세린 및 포타슘 비카보네이트를 포함하는 것과 같은 경구 용액에 포함되거나, 또는 치약에 분산되거나, 또는 물, 결합제, 마모제, 향미제, 포말제 및 흡습제를 포함할 수 있는 조성물에 치료적으로 유용한 양으로 첨가될 수 있다.

선택적으로, 상기 조성물은 혀 아래에 둘 수 있거나 입안에 용해될 수 있는 정제 또는 용액 형태로 만들어 질 수 있다.

특정 환경에서, 본 명세서에 개시된 약학적 조성물을 정맥내 또는 근육내로 전달하는 것이 바람직할 수 있다. 그러한 접근 방법은 당해분야 숙련자들에게 공지된 것이고, 이는 예를 들어, 미국 특허 5, 543, 158; 미국 특허 5,641,515 및 미국 특허 5,399,936에 더 상세히 설명되어 있다. 특정 양태에서, 자유 염기 또는 약학적 허용염으로서의 활성 화합물 용액을 하이드록시프로필셀룰로즈와 같은 계면활성제와 적절히 혼합된 물에서 제조될 수 있다. 분산액 또한 글리세롤, 액체 폴리에틸렌 글리콜, 및 이의 혼합물 및 오일에서 제조될 수 있다. 보관 및 사용의 일반적인 조건하에서, 이러한 제조물들은 일반적으로 미생물 성장을 방지하는 방부제를 포함한다.

주사투여용으로 적절한 약학적 형태의 예는 멸균 주사액 또는 분산액을 즉시 만들기 위한 멸균 수성용액 또는 분산엑 및 멸균 분말을 포함한다 (예를 들어, 참조 미국 특허 5,466,468). 모든 경우, 상기 형태는 멸균되어야되며, 및 용이하게 주사될 수 있을 정도로 유동성이 있어야 한다. 제조 및 보관 조건하에서 안정해야 하며, 박테리아 및 곰팡이와 같은 미생물의 오염 활동에 대하여 보존되어 있어야 한다. 부형제는, 예를 들어, 물, 에탄올, 폴리올 (예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등), 이의 적절한 혼합물, 및/또는 식물성 오일을 포함하는 용매 또는 분산액 매질일 수 있다. 예를 들어, 레시틴과 같은 코팅물을 사용함으로, 분산액의 경우 요구되는 입자 크기을 유지함으로써, 및/또는 계면활성제를 사용함으로써 적절한 유동성을 유지할 수 있다. 미생물 작용의 예방은 예를 들어, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르브 산, 치메로살 등과 같은 다양한 항바이러스 및 항진균성 제제로 달성될 수 있다. 많은 경우, 등장성 제제, 예를 들어, 설탕 또는 염화나트륨을 포함하는 것이 바람직하다. 주사가능한 조성물을 지연되게 흡수하는 것은 흡수 지연제제, 예를 들어, 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴을 조성물에 사용함으로써 달성될 수 있다.

하나의 양태에서, 상기 용액은 필요하다면 적절히 완충처리될 수 있고 및 상기 액체 희석제는 먼저 충분한 식염수 또는 글루코즈로 등장처리될 수 있다. 이러한 특정 수성용액은 특히 정맥내 및 근육내 투여에 적합하다. 이점과 관련하여, 사용될 수 있는 멸균 수성 매질은 현 내용에 비추어 당해 분야의 숙련자에게 공지되어 있다. 예를 들어, 하나의 투약물을 등장성 NaCl 용액1 ml 에 용해할 수 있고, 및 직접적 피하투여(hypodermoclysis) 액체 1000 ml에 첨가되거나 또는 제시된 관류부위에 주사할 수 있다 (참조 예를 들어, "Remington's Pharmaceutical Sciences" 15th Edition, 1035-1038 및 1570-1580 쪽).

처치될 대상물의 상태에 따라, 투약물에서 변형이 필수적으로 일어날 수 있다. 더욱이, 인체에 투여하기 위해, 제조물은 당연히 생물 기준의 FDA Office에 요구되는 멸균성, 발열원성, 및 일반적인 안정성과 순수성을 만족하여야 한다.

본 발명의 다른 양태에서, 상기 조성물은 중성 또는 염 형태로 제형될 수 있다. 약학적 허용염의 예로, 산 첨가 염류 (단백질의 자유 아미노 기로 형성된) 및 예를 들어, 염산 또는 인산과 같은 무기산, 또는 아세트산, 옥살산, 타르타르 산, 만델(mandelic)산과 같은 유기산으로 형성된 염류를 포함할 수 있다. 자유 카르복실 기로 형성된 염류는 또한 예를 들어, 소듐, 포타슘, 암모늄, 칼슘, 또는 수산화 철과 같은 무기 염기, 및 이소프로필아민, 트리메틸아민, 히스티딘, 프로카인등과 같은 유기 염기로부터 유도될 수 있다. 제형시, 용액을 투약 제형과 양립할 수 있는 방식으로 및 치료학적으로 유용한 그러한 양으로 투여될 수 있다.

부형제는 임의의 및 모든 용매, 분산액 매질, 운반체, 코팅물, 희석제, 항박테리아성 및 항진균성 제제, 등장성 및 흡수 지연 제제, 완충제, 부형제 용액, 현탁액, 콜로이드 등을 더 포함할 수 있다. 약학적 활성 물질에 그러한 매질 및 제제를 사용하는 것은 당해 분야에 공지되어 있다.

임의의 통상적인 매질 또는 제제가 활성 성분과 양립할 수 없는 경우를 제외하고는, 치료 조성물에 그를 사용하는 것 의도되는 것이다. 보조 활성 성분 또한 조성물에 첨가될 수 있다. 용어, "약학적 허용"은 인체에 투여시, 알레르기성 또는 유사한 불리한 반응을 야기하지 않는 분자적 실체 및 조성물을 지칭한다.

특정 양태에 있어서, 약학적 조성물은 비강내 스프레이, 흡입, 및/또는 다른 에어로졸 전달 운반체로 전달될 수 있다.

유전자, 핵산, 및 펩타이드 조성물을 비강 에어로졸 스프레이를 통해 폐로 직접 전달하는 방법은 예를 들어, 미국 특허 5,756, 353 및 미국 특허 5,804, 212에 설명되어 있다. 마찬가지로, 비강내 미세입자 수지 (Takenaga 등, J Controlled Release 1998 Mar 2; 52 (1-2): 81-7) 및 리조포스파티딜-글리세롤 화합물 (미국 특허 5,725, 871)을 사용하여 약을 전달하는 것은 약학적 분야에 공지되어 있다. 유사하게, 폴리테트라플루오로에틸렌 지지 매트릭스의 형태로 점막투과 약물을 전달하는 예가 미국 특허 5, 780, 045에 설명되어 있다.

특정 양태에서, 리포좀, 나노캡슐, 미세입자, 액상입자, 운반체 등을 본 발명의 조성물을 적절한 숙주 세포/유기체로 운반하는 데 사용한다. 특히 본 발명의 조성물은 액상 입자, 리포좀, 운반체, 나노구형체, 또는 나노입자 등에 캡슐화되어 운반제형화 될 수 있다. 선택적으로, 본 발명의 조성물은 공유결합적으로 또는 비-공유결합적으로 부형제 운반체의 표면에 결합될 수 있다.

유력한 약물 부형제로서 리포좀 및 리포좀-유사 제조물의 형성 및 사용은 일반적으로 당해 분야의 숙련자에게 공지되어 있다 (참조, 예를 들어, Lasic, Trends Biotechnol 1998 Ju1 ; 16 (7): 307-21; Takakura, Nippon Rinsho 1998 Mar; 56 (3): 691-5; Chandran 등, Indian J Exp Biol. 1997 Aug; 35 (8): 801-9; Margalit, Crit Rev Ther Drug Carrier Syst. 1995; 12 (2-3): 233-61; 미국 특허 5,567, 434; 미국 특허 5,552, 157; 미국 특허 5,565, 213; 미국 특허 5, 738, 868 및 미국 특허 5,795, 587, 각각은 전체적으로 참조문헌으로 포함되어 있다).

특정 양태에서, 리포좀은 수성 매질에서 분산되어 자연적으로 다중박판 동심 이중 운반체 (multilamellar vehicle (MLVs)로 별칭)를 형성하는 인지질로 형성된다.

선택적으로, 다른 양태에서, 본 발명은 본 발명의 조성물을 약학적 허용 나노캡슐 제형으로 제공한다. 나노캡슐은 일반적으로 화합물을 안정하고 재생산 가능한 방식으로 화합물을 내포하고 있다 (참조, 예를 들어, Quintanar-Guerrero 등, Drug Dev Ind Pharm 1998 Dec; 24 (12): 1113-28). 세포내에 과도한 중합성물질 존재로 인한 부작용을 피하고자, 생체내에서 분해될 수 있는 중합체를 사용하여 초미세 입자 (약 0.1 m크기)를 만들수 있다. 그러한 입자는, 예를 들어, Couvreur 등, Crit Rev Ther Drug Carrier Syst. 1988 ; 5 (1) : 1-20; zur Muhlen 등, Eur J Pharm Biopharm. 1998 Mar ; 45 (2): 149-55 ; Zambau : 등 J Controlled Release. 1998 Jan 2; 50 (1-3): 31-40; 및 미국 특허 5,145, 684에서 개시된 바와 같이 제조될 수 있다.

염증성 장질환 치료 방법

전술한 바와 같이, 본 발명은 또한, 예를 들어, 셀리악 병, 크론 병, 및 궤양성 대장염과 같은 염증성 장질환을 치료하는 방법을 제공하는 바, 상기 방법은 IBD 환자에게, 예를 들어, 전술한 바와 같은 항체-기재 타입 1 인터페론 길항체중 하나와 같은 타입 1 인터페론 길항체를 포함하는 조성물의 치료적으로 유용한 양을 투여하는 것을 포함한다. 다른 양태에서, 본 발명 또한 염증성 장질환의 치료 방법을 제공하는 바, 상기 방법은 IBD 환자에게, 내성 투약량의 타입 1 인터페론 길항체를 투여하는 단계 및 (b) 그 환자에게 치료적으로 유용한 양의 타입 1 인터페론 길항체를 투여하는 단계를 포함한다. 더욱이, 하나 이상의 타입 1 인터페론 길항체를 예를 들어, 면역억제제, 항-염증제, 스테로이드, 면역조절제, 사이토카인, 및 상술한 바와 같은 TNF 길항체와 같은 다른 치료제와 조합하여 투여하는 것이 바람직하다.

여기서 개시된 치료 조성물의 투여 경로 및 빈도는 물론 투여량은 개인마다 변하며, 표준 기술을 사용하여 용이히 확립될 수 있다. 본 발명의 방법에 의해, 상기 길항체는 임의의 적절한 전달 경로로 투여되어 적절한 생체이용성이 보장될 수 있다. 따라서, 특정 양태에서, 적절한 투여 경로는 정맥내 볼루스, 정맥내 지연 볼루스, 또는 관류를 포함한다. 다른 양태에서, 타입 1 인터페론 길항체의 투여는 피하, 근육내, 경피 또는 피부내 주사로 이뤄질 수 있다. 택일적으로, 투여는 예를 들어, 흡입 (예를 들어, 호흡으로)을 통해, 또는 비인강 또는 경구 투여를 통하는 것과 같은 점막 전달로 이뤄질 수 있다.

예를 들어, 항체 및/또는 이의 항원 결합 단편물과 같은 단백질 길항체를 사용하는 양태에서, 투여 경로는 피하, 근육내 및/또는 정맥내일 수 있다. 정맥내 투여는 볼루스 주사, 지연된 볼루스 주사, 또는 관류와 같은 것일 수 있다.

다른 양태에서, 단백질 길항체가 경피적으로, 피부내로, 및 점막으로 전달될 수 있다.

일반적으로, 적절한 투약 및 치료 섭생법은 치료적 혜택을 제공하기에 충분한 양으로 활성 화합물 (들)을 제공한다. 그러한 반응은 향상된 임상적 결과 (예를 들어, 복통; 혈변; 관절염, 포도막염, 및 피부 변화 등과 같은 장관외의 증상에서의 감소; 및 소장 및 결장내의 염증성 세포 축적)를 얻음으로 모니터될 수 있다.

치료법의 정확한 특성에 따라서, 본 명세서에 개시된 타입 1 인터페론 길항체의 적절한 양은 0.1 내지 50 mg/kg 체중, 더욱 바람직하게는 0.5 내지 10 mg/kg 체중, 및 더더욱 바람직하게는 2 및 5 mg/kg 체중일 수 있다.

특정 양태에서, 여러 번 반복 투약량으로 투여될 수 있다.

단백질 길항체를 사용하는 본 발명의 양태에서, 투약 빈도는 매일 일 회 내지 매월 일 회, 더욱 바람직하게는, 매주 이 회 내지 격주 이 회, 및 더더욱 바람직하게는 매주 약 일 회일 수 있다. 본 발명의 다른 양태는 염증성 장질환의 환자를 치료하는 방법을 제공하는 바, 상기 방법은 (a) 제 1 타입 1 인터페론 길항체가 단백질 길항체인 타입 1 인터페론 길항체를 내성 투약량으로 투여하는 단계 및 (b) 상기 타입 1 인터페론 길항체를 치료적 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다.

이러한 방법의 바람직한 양태에서, 상기 인터페론 길항체는 타입 1 인터페론 수용체 (IFNAR)에 대항하는 항체일 수 있다. 항-타입 1 인터페론 항체의 일례는 혼성화, 영장류화된, 인체화된, 탈면역화된 및 인간 항체를 포함한다. 특정의 바람직한 항-IFNAR 항체는 예를 들어, the 64G12로 명명된, 쥐의 단일클론 항체 및/또는 CPI-1697로 명명된 조작된 인간 변이체와 같은 IFNAR-1에 결합하는 것을 포함한다.

시초의 내성 투약량을 확립하기 위해, 항-타입 1 인터페론 항체는 인체 및 비인간 영장류에서 면역원성일 수 있다. 면역반응은 생물학적으로 중요하며, 그리고, 면역반응이 상기 항체가, 예를 들어, 혼성화, 영장류화 또는 인체화된 항체의 경우에서와 같이, 부분적으로 또는 주로 인간 면역글로불린 서열로 구성된다고 할 찌라도, 항체의 치료적 효능을 약화시킬 수 있다.

특정 바람직한 양태에서, 치료적 항체에 면역학적 내성이 생길 정도로 항체의 높은 개시 투약량이 투여된다.

상기 내성 투약량은 항-IFNAR 항체의 반복 투여에 대한 면역 글로불린(Immunoglobulin) G(이하 "IgG"라 약칭함.) 항체 반응의 유도를 방지하거나 감소시킬 수 있으면 충분하다.

제 1 타입 1 인터페론 길항체의 바람직한 내성 투약량 범위는 10 mg/kg 체중 내지 50 mg/kg 체중이다.

더욱 바람직한 내성 투약량 범위는 20 내지 40 mg/kg이다.

더더욱 바람직한 내성 투약량 범위는 20 내지 25 mg/kg이다.

이러한 치료법 내에서, 항-타입 1 인터페론의 치료적 유효량은 바람직하게는 0.1 내지 10 mg/kg 체중의 범위이다. 더욱 바람직한 치료적 유효량은 0.2 내지 5 mg/kg 체중 범위이다. 더더욱 바람직한 치료적 유효량은 0.5 내지 2 mg/kg 범위이다. 다른 양태에서, 상기 후속적인 치료량은 내성 투약량과 동일하거나 상이한 제형일 수 있고 및/또는 내성 투약량과 동일하거나 상이한 경로로 투여될 수 있다. 바람직하게는 치료량은 정맥내로, 근육내로, 또는 피하로 투여된다.

도 1A-lD 및 2A-2D는 IBD-질환의 CTT의 체중에 대한 CPI-1697의 효과를 나타내는 그래프이다. 도 IA-1D 국면 I 연구에 대한 결과를 나타낸다.

도 2A-2D 국면 II 연구에 대한 결과를 나타낸다. 각 동물의 퍼센트 변화는 투약 개시일인 Day 0에서의 체중을 기선으로 사용하여 계산하였다. 존속 동물들의 퍼센트 개체 및 그룹 평균 체중 변화 및 그룹 평균 체중이 그래프 표시되었다. 처리군 및 대조군에 대한 모든 시점에 대하여 통계 분석 (일방 ANOVA)을 실시하였다. **: 국면 I 연구의 55 주에서, 처리된 동물들은 대조군에 비해 통계적으로 유의한 체중 변화를 보였다 (p<0.01). 화살표 투약 스케줄을 나타낸다.

도 3A-3D 및 4A-4D 는 IBD-질환의 CTT의 설사 점수에 대한 CPI-1697의 효과를 나타내는 그래프이다. 도 3A-3D 는 국면 I 연구의 결과를 나타낸다.

도 4A-4D는 국면 II 연구의 결과를 나타낸다. 생존 동물의 주간별 평균 설사 점수 (5 주간의 평균)를 대조군 및 처리군에 대해 그래프 표시하였다. 기선으로서 투약개시 직후인 주간-1에서의 그룹 평균 주간 평균 설사 점수 및 퍼센트 그룹 평균 주간 설사 점수 변화를 그래프 표시하였다. 화살표는 투약 스케줄을 나타낸다.

도 5A-5D 및 6A-6D 는 IBD-질환의 CTT의 활성 점수에 대한 CPI-1697효과를 나타내는 그래프이다. 도 5A-5D 국면 I 연구의 결과를 나타낸다.

도 6A-6D 국면 II 연구의 결과를 나타낸다. 생존 동물의 호중구(세 개 생시험 시편의 평균) 침윤을 나타내는 활성 점수를 대조군 및 처리군에 대하여 그래프 표시하였다. 그룹 평균 활성 점수 및 퍼센트 그룹 평균 주간 활성 점수 변화를, 국면 I의 주간-1 및 국면 II의 주간-2 에서 및 기선으로서 투약 개시 전에 대하여, 또한 그래프 표시하였다. 화살표는 투약 스케줄을 나타낸다.

도 7A-7D 및 8A-8D는 IBD-질환의 CTT의 만성 점수에 대한 CPI-1697효과를 나타내는 그래프이다. 도 7A-7D 국면 I 연구의 결과를 나타낸다.

도 8A-8D 국면 II 연구의 결과를 나타낸다. 생존 동물의 소와(crypts) 손실 및 선형(glandular) 구조에서의 변경(세 개 생시험 시편의 평균)을 포함하는 결장 형태에 대한 영구 변화의 전도를 나타내는 만성 점수를 대조군 및 처리군에 대하여 그래프 표시하였다. 그룹 평균 활성 점수 및 퍼센트 그룹 평균 주간 만성 점수 변 화를, 국면 I의 주간-1 및 국면 II의 주간-2 에서 및 기선으로서 투약 개시 전에 대하여, 그래프 표시하였다. 화살표는 투약 스케줄을 나타낸다.

도 9A-9D 및 10A-lOD는 IBD-질환의 CTT의 과형성 점수에 대한 CPI-1697효과를 나타내는 그래프이다. 도 9A-9D 국면 I 연구의 결과를 나타낸다. 도 10A-10D 국면 II 연구의 결과를 나타낸다. 생존 동물의 세포성 및 간질상 조직 (세 개 생시험 시편 평균)을 포함하는 점막 조직 두께에서의 비정상적인 증가를 나타내는 과형성 점수가 대조군 및 처리군에 대하여 그래프 표시되었다. 그룹 평균 활성 점수 및 퍼센트 그룹 평균 주간 과형성 점수 변화를, 국면 I의 주간-1 및 국면 II의 주간-2 에서 및 기선으로서 투약 개시 전에 대하여, 그래프 표시하였다. 화살표는 투약 스케줄을 나타낸다.

도 11A-11B는 국면 I (도 11A) 및 국면 II (도 11B) 연구에서 개별 동물의 CPI-1697 약물 혈청 농도를 나타내는 그래프이다.

도 12A-12B 는 국면 I (도 12A) 및 국면 II (도 12B) 연구에서 CPI-1697 처리 동물의 상대적인 PAHA 반응 수준을 나타내는 막대 그래프이다.

도 13 는 국면 II 연구에서 개별 동물의 B세포상에서 표준화된 IFNAR-1 발현 수준을 나타내는 그래프이다. 다양한 시점에서의 개별 동물의 B 세포 상의 IFNAR-1 발현 수준은, IFNAR-1 수준이 대조군 동물상에서 상대적으로 안정하게 잔류한다는 가정하에서, 각 시점에서의 대조군 동물의 평균 IFNAR-1 수준에 의해 표준화되었다.

도 14A-14B (서열 번호S: 1-2)은 인체화된 항-IFNAR-1 항체 CPI-1697의 중사 슬 (H3) (도 14A) (서열 번호: 1) 및 경사슬 (K1) (도 14B) (서열 번호 : 2)의 아미노산 서열을 나타낸다. CDR은 밑줄이 그어져 있다.

하기 실시예는 본 발명을 설명하기 위해 제시되며, 제한하기 위한 것이 아니다.

실시예: 염증성 장질환 치료용으로 사용되는 IFNAR-1 길항체의 용도

아메리카 대륙의 영장류인 코튼탑(cotton-top) 타마린(CTT, Sa71, guinus oedips)에서의 특발성 대장염은 당해 분야에서 인간의 염증성 장질환 (IBD)의 모델로 인정된다. 병을 앓고 있는 동물은 궤양성 대장염과 유사한 병인론을 보이며, 결장에서 관찰되는 조직학적 변화가 유사하고, 인간 및 CTT에서 공통적인 후유증은 결장암이다. CTT에서의 대장염은 대장염 상태에서 및 결장암으로 인한 것 둘 다에서, 이환율 및 사망률과 연관이 있다. 대장염은 완화되지만 증상이 반복적으로 발생하는 것을 특징으로 한다. 병의 주기는, 개인적 차가 있지만, 일반적으로 4주간 지속된다. 임상적 증상은 혈변을 동반한 설사 및, 소화불량 및 소화흡수불량을 포함한다. 조직학적으로, 이 병은 호중구가 대장의 점막 상피로 침윤하여, 병의 진행 단계를 진단하게 하는, 내장 소와(intestinal crypts)의 형태가 점진적으로 악화된다. 이러한 원인은 아직 알려지지 않았지만, 식이 및 감염원이 작용을 하여 상태를 더 악화시키는 것으로 추정된다.

마우스 64G12 항체, CPI-1697, (IgG4k)의 조작된 인체화 형태가 개발되었는 데, 이것은 IFNAR-1와 결합하고 유사한 에피토프와의 결합에 64G12과 경쟁한다. CPI-1697를 사용하여 CTT에서의 특발성 대장염을 하기와 같이 치료하였다. 본 연구를 시작할 때, 대장염의 이력을 기준으로 및 설사 및 체중감소를 포함하는 임상적 증상을 보이는 실험한 적이 없는 동물을 선택하였다. 동물에 결장 생체 검사를 실시하여 실험 개시 2 주 내에 결장에서 염증이 나타나는 것을 확인하였다. 모든 연구 동물은 확립된 정량분석 체계에 따라 활성, 과형성(hyperplasia) 및 만성에 대한0-4 (0=정상 조직)의 범위에서 2의 양성 조직학적 대장염 점수를 가졌다. Madara 등, Gastroenterology 88 : 13-19 (1985)). 유동 혈구계산(flow cytometry)에 의한 연구 전에, 동물들을 채취된 말초 혈액 백혈구 상에 피코에리트린(phycoerythrin)-결합 CPI-1697을 사용하여 IFNAR-1 수준에 대하여 예비 스크린하였다. CPI-1697을 멸균-여과하였고 및 운반 용액(Dulbecco's Na PBS (멸균, USP)에서 20 mg/mL로 제조하였다

두 가지 연속 상으로 실험을 실시하였다. 첫 번째 실험에서 (국면 I), 대장염을 앓고 있는 동물 5마리를 지연된 정맥내 관류로 CPI-1697 20 mg/kg의 초기 투약량으로 처리한 후, 4 주간에 걸쳐 매주 두 번씩 7번의 10 mg/kg 투약량을 투여하였다. 5 마리의 대조군 동물에게는 동일한 투약 스케줄에 따라 동일한 용량의 운반 용액 (Dulbecco's Na PBS)을 투여하였다. 두 번째 실험에서 (국면 II), 6마리 동물에 CPI-1697를 동일한 초기 정맥내 투약량 (20 mg/kg)으로 처리한 후, 8주간 동안 매주 2회씩 근육내 투여 (10 mg/kg)하였다.

5 마리의 대조군 동물에 동일한 스케줄에 따라 운반 용액을 투여하였다. 양 쪽 상에서, 동물들은 체중 (매주 2 회), 설사에 대해 관찰하고 및 정기적으로 결장 생검사 시편을 검사하여 조직학적 등급을 매겼다.

국면 I에서, 동물들을 처리하는 동안, 다음, 처리 기간 후 6주간 동안, 및 국면 II에서 처리 종결후 4 주간 평가하였다. 모든 동물들을 또한 국면 I 및 II에 대한 처리 후 각각 51주 및 27주에서 체중 및 결장 조직에 대하여 후속적 조치를 더하였다. 설사에 대해서, 0이 정상적인 변을 나타내고 5는 매우 묽은 설사를 나타내는 표준화된 0-5 단계에 기초하여 매주 적어도 5번씩 등급을 매기고 점수를 부여하였다. 정맥혈 샘플을 정기적으로 취하여 영장류 항-인간 항체 면역반응 (PAHA) 분석하였다. 결장 시험편을 처리 및 후속처리 기간 동안 정기적으로 세 군데 (결장의 끝에서 1,3 및 6cm 떨어진 곳) 취하고 조직을 포르말린에 고정하고, 절편한 후 헤마톡실린과 에오신으로 염색하여 조직 평가를 실시하였다.

상기 절편들을, 상기 치료 그룹에 대해 전혀 모르는 노련한 조직병리학자에게 보여 등급을 매겼다. 등급 시스템은, 0 (정상) 에서부터 4 (중증)까지로, 하기와 같은 3 개의 독립적 기준을 사용하였다 (Madara 등, 1985). 첫 번째 변수는 "활성"이었다-침윤한 호중구 수, 두 번째는 "만성"이었고-소와의 손실, 및 대장염의 과정동안 특징적으로 서서히 커지는 선형 조직에서의 변형을 포함하는 결장 형태의 영구 변형 정도, 및 세 번째는 "과형성이었다-세포성 및 간질성 조직을 포함하는 점막 조직 두께에서의 이상적 증가. 각 시점에서, 각각 3 가지 변수에 대하여 3 개의 생체검사 수준으로부터 평균적인 조직검사 점수를 결정하였다.

국면 I 및 국면 II에 대한 체중은 각각 도1A-lD 및 2A-2D에 도시하였다. 국면 I 및 국면 II 에 대한 설사 점수가 도 3A-3D 및 4A-4D에 각각 도시되었다. 국면 I 및 국면 II에 대한 활성점수가 도 5A-5D 및 6A-6D에 각각 도시되었다. 국면 I 및 국면 II에 대한 "만성" 점수가 도 7A-7D 및 8A-8D에 각각 도시되었다. 국면 I 및 국면 II에 대한 과형성 점수가 도 9A-9D 및 10A-10D에 각각 도시되었다.

상 I의 대조군에 있는 한마리 동물 (#25285)을 궤양성 대장염 또는 치료법과 관계없는 서혜부 탈장의 치료기간 동안 안락사시켰다. 상 I의 치료군 중 어느 동물도 죽지 않았다. 국면 II에 있어서, 대조군 및 치료군 둘 다 처리 기간중 한마리가 죽었다. 살아남은 동물들 중, 국면 I 및 국면 II 둘 다에서, 연구 기간 내내, 치료군이 대조군보다 더 큰 체중 증가가 나타났다 (도 1A-lD 및 2A-2D). 체중 증가는 투약 기간 종료후 4 내지 6주간 뚜렷이 나타났다. 가장 흥미로운 것은, 국면 I 연구에서 투약 기간 후 51주까지 및 국면 II 연구에서는27 또는 43주까지 동물에 대하여 장기간 추적한 결과 처리된 동물일 대조군 동물보다 더 큰 체중 퍼센트 증가를 보였다는 것이다. 특히, 국면 I 처리된 동물들은 대조군보다 통계적으로 유의한 체중 퍼센트 증가를 보였다 (p<0.01). 양호한 체중 증가를 보이는 처리군에서의 세 마리 동물들 (#4199, 12300, 52099)은 연구 개시시 20달 아래의 나이였고 체중증가가 어린 동물들의 정상적인 성장으로 인한 것일 수 있다.

CTT의 설사 점수에 대한 CPI-1697 처리 효과가 도 3A-3D 및 4A-4D에 요약되어 있다. 매주 평균 설사 점수는 국면 II연구 기간동안 치료된 군에서는 향상되었지만 (점수 감소), 대조군은 향상되지 않았다 (도 4A-4D).

치료 개시시, 설사 점수가 곧바로 개선되었고 국면 II 연구에서 치료 중단후 개선된 것이 지속되었다. 국면 I 연구에서, 설사 점수 개선이 치료에 대해서 명맥히 나타나지 않았다 (도 3A-3D).

CTT의 결장에서 호중구 침윤을 나타내는 "활성" 점수에 대한 CPI-1697 치료 효과가 도 5A-5D 및 6A-6D에 요약되어 있다. 국면 I 연구에서 (도 5A-5D), 대조군 및 처리군 둘 다는 연구 개시후 바로 호중구 침윤 감소를 보인다. 처리군은 0 주에서 8주의 기간동안 호중구 침윤이 증가하였고 및 8 주 에서 10주까지 실질적으로 호중구 침윤이 감소하였다. 반대로, 대조군은 0주 에서 10주에 걸쳐 약간 호중구 침윤이 감소하였다. 그러나, 55 주까지, 처리군은 대조군보다 약간 적은 호중구 침윤을 나타냈다. 국면 II 연구에서 (도 6A-6D), 처리군은 12 주 연구기간에 걸쳐 호중구 침윤이 감소하였고(군 평균) 35 주까지 더 감소한 반면 대조군은 감소를 보이지 않았다.

CTT에서 소와 손실 및 선형 구조의 변형을 포함하는 결장 형태에 대한 영구적 변화 정도를 나타내는 만성 점수에 대한 CPI-1697 처리효과가 도 7A-7D 및 8A-8D에 요약되어 있다. 국면 I 연구에서 (도 7A-7D), 대조군 및 처리군 둘 다는 치료 개시후 바로 결장 형태가 개선되었지만, 그러한 개선이 지속되지는 않았다. 처리군은 결장 형태에 있어서 대조군보다 더 추가적인 유익한 효과가 없었다. 국면 II 연구에서 (도 8A-8D), 처리군은 투약 개시 2주후에 대조군과 정확히 상반되게, 결장 형태가 개선되었다. 더욱이 처리군은 12주에 비하여 32주의 장기간에 걸쳐 대조군보다 결장형태가 개선되었다.

CTT의 세포성 및 간질성 조직을 포함하는 점막 조직 두께에서의 비정상적 증 가를 나타내는 "과형성" 점수에 대한 CPI-1697 처리 효과가 도 9A-9D 및 10A-lOD에 요약되어 있다. 국면 I 연구에서 (도 9A-9D), 결장 형태 변화와 유사하게, 대조군 및 처리군은 처리 개시후 바로 점막 조직 두께가 감소하였지만, 그러한 개선은 지속되지 않았다. 점막 조직 두께에 대하여, 처리군은 대조군에 비하여 더 이상 추가적인 유익한 효과가 없었다. 국면 II 연구에서 (도 10A-10D), 처리군은 12주의 연구 기간에 걸쳐 점막 조직 두께에 있어서 대조군과 유사한 변화를 보였다. 그러한, 장기간 후속관찰 결과 처리군은 대조군에 비해 35주까지 점막 조직 두께가 감소하였다.

각 동물로부터 채취한 혈청 샘플을 ELISA 분석하여 인간 IgG4를 검출함으로써 약물 (CPI-1697 항-IFNAR-1 항체) 농도에 대하여, 및 영장류-항-인간-항체 (PAHA) 반응에 대하여 분석하였다. 도 11A-11B에 나타난 바와 같이, 치료 상을 통틀어, 약50-270 ng/ml의 혈장농도가 유지되었고, 대부분의 동물에서 PAHA 농도가 낮거나 검출되지 않았다 (도 12A-12B).

비록 모든 동물들이 체중기준으로 동일한 투약량을 받았지만, 어떤 동물들은 3배까지 더 높은 CPI-1697 혈류 농도를 보였다. CPI-1697 농도의 이러한 범위는 이전의 영장류 연구에서 IFNAR-1을 시험관에서 차단하는데 효과적이라는 것이 증명되었다. 상 I의 두마리 동물(#8494 및 #52099)들은 검출될 수 있는 PAHA 반응을 발전시켰고, 및 국면 II의 동물 중 어느 것에서 검출될 수 있는 PAHA 반응이 관찰되지 않았다 (도 12A-12B). 이러한 결과들은 의 높은 초기 투약량을 포함하는 투약법이 이러한 단백질 (인간 항체)에 유의할 만한 면역 반응으로 이끌지 못한다는 것을 제 시하고 있다. 그러한 두 마리 동물들 또한 낮은 약물 농도를 보인다 (도 11A-11B).

백혈구 세포상에서 IFNAR-1 농도를 흐름 혈구계산법(flow cytometry)으로 분석하고, 및 국면 II 연구에서 표준화된 수용체 농도를 도 13에 요약하였다. FACS 분석이 최적화되지 않아서 국면 I 연구에서 수용체 농도가 얻어지지 않았다.

인터페론 수용체 차단이 비록 완전하진 않지만, 처리 동물에서 여러 가지 수준으로 이뤄졌다. 더 높은 혈청CPI-1697 농도를 가지는 동물이 더 양호한 수용체 차단을 나타냈다.

요약하면, 국면 I 및 국면 II 연구에서, 대장염을 앓고 있는 타마린에 대하여 CPI-1697 처리하면 대조군보다 체중증가를 나타낸다. 더 긴 CPI-1697 처리기간의 국면 II 연구에서, 설사 점수 및, "활성","만성" 및 과형성을 포함한 조직병리학 점수에서 더 양호한 개선을 보였다.

국면 II연구에서, 긍정적 임상 반응과 더 높은 CPI-1697의 혈류농도 사이에 상관관계가 있었다. 또한, PAHA 반응 결여와 개선된 임상 점수간에 긍정적인 상관관계가 있었다. 그러한 상관관계들은 국면 I 연구에서는 발견되지 않았다. 이러한 상관관계는 연구의 샘플 수가 작기 때문에 통계적인 방법에 의해서는 시험될 수 없었다. 전체적인 이러한 결과들은 IFNAR-1에 대한 인체화된 항체로 처리하면 대장염증상의 CTT에 임상 개선이 나타나는 것을 가르킨다. 효과는, 장기간 후속 관찰 연구에서 나타난 바와 같이, 급성보다는 만성에 주효하고 치료상을 넘어서 유지되는 것으로 나타난다. 국면 II 연구에서 장기 치료는 단기간 치료보다 더 강력한 효과를 보인다. CPI-1697에, 시간적으로 및 혈장농도적으로 둘 다 노출을 증가시키면 더 큰 반응과 연관이 있었다.

전술한 바와 같이, 본 발명의 특정 양태 등이 예증의 목적으로 설명되었지만, 다양한 변경이 본 발명의 사상 및 범위를 이탈하지 않고 만들어질 수 있음이 이해될 것이다. 따라서, 본 발명은 첨부된 청구범위에서와 같은 것을 제외하고는 제한되지 아니한다.

서열목록 전자파일 첨부

Claims

(a) 항-타입 1 인터페론 수용체 항체의 치료적으로 유효한 양, 및 (b) 약학적 허용 부형제(Carrier)를 포함하는 염증성 장질환 치료용 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 염증성 장질환은,

셀리악 병, 크론 병, 또는 궤양성 대장염으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 조성물.
삭제
제 1항에 있어서, 상기 항-타입 1 인터페론 수용체 항체는,

폴리에틸렌 글리콜에 접합되고 및 면역글로불린 Fc 부위에 융합된 것으로 구성되는 군으로부터 선택되는 화학적 변형체를 더 포함하는, 조성물.
삭제
제 1항에 있어서, 상기 항체는,

비-인간 항체, 혼성(chimeric) 항체, 인체화된 항체, 및 인간 항체로 구성되는 군으로부터 선택되는, 조성물.
제 6항에 있어서, 상기 비-인간 항체는,

64G12인, 조성물.
제 6항에 있어서, 상기 인간 항체는,

CPI-1697인, 조성물.
제 1항에 있어서,

면역억제제, 항-염증제, 스테로이드, 면역조절제, 사이토카인, 및 종양괴사인자(Tumor Necrosis Factor)(TNF) 길항체로 구성되는 군으로부터 선택되는 치료제를 더 포함하는, 조성물.
제 9항에 있어서, 상기 면역억제제는,

아자티오프린, 메토트렉세이트, 시클로스포린, 타크롤리무스(Tacrolimus) (FK506), 라파미신, 및 미오페놀레이트 모페틸로 구성되는 군으로부터 선택되는, 조성물.
제 9항에 있어서, 상기 항-염증제는,

5-아미노살리실 산, 설파살라진, 및 올살라진으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 조성물.
제 9항에 있어서, 상기 스테로이드는,

코르티코스테로이드류, 글루코코르티코스테로이드류, 프레드니손, 프레드니솔론, 하이드로코르티손, 메틸프레드니솔론, 덱사메타손, 및 아드레노코르티코트로픽 호르몬(Adrenocorticotropic hormone)(ACTH)으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 조성물.
제 9항에 있어서, 상기 면역조절제는,

디글리코리피드된, 디글리코리피드된 마이코박테리움 바캐 (deglycolipidated, deglycolipidated Mycobacterium vcacce)(PVAC), 항-종양괴사인자 수용체 상과 요소 5(항-CD40) 리간드, 항-종양괴사인자 수용체 상과 요소 5 (항-CD40), 나탈리주마브, 항-맥관유착분자-1(항-VCAM1) 및 항-세포간유착분자-1(항-ICAM1)로 구성되는 군으로부터 선택되는, 조성물.
제 9항에 있어서, 상기 사이토카인은,

인터류킨-10(IL-10)인, 조성물.
제 9항에 있어서, 상기 종양괴사인자(TNF) 길항체는,

인플리시마브, 에타너셉트, 아달리무마브, 및 세르톨리주마브 패골(Certolizumab Pegol)(CDP870)로 구성되는 군으로부터 선택되는, 조성물.
염증성 장질환 환자를 치료하기 위한 약제 제조에 사용되는 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
삭제
제 16항에 있어서, 상기 약제는,

정맥내 볼루스, 정맥내 지연성 볼루스, 및 관류로 구성되는 군으로부터 선택되는 경로로 투여될 수 있는, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
제 16항에 있어서, 상기 약제는,

피하, 근육내, 경피, 피부내, 및 정맥내로 구성되는 군으로부터 선택되는 경로로 투여될 수 있는, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
삭제
제 16항에 있어서, 상기 약제는,

0.1 mg/kg 체중 내지 50 mg/kg 체중 범위의 투약량으로 투여될 수 있는, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
제 21항에 있어서, 상기 약제는,

0.5 mg/kg 체중 내지 10 mg/kg 체중 범위의 투약량으로 투여될 수 있는, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
제 22항에 있어서, 상기 약제는,

2 mg/kg 체중 내지 5 mg/kg 체중 범위의 투약량으로 투여될 수 있는, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
제 16항에 있어서, 상기 약제는,

매일 일 회 내지 매달 일 회의 빈도 수로 투여될 수 있는, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
제 24항에 있어서, 상기 약제는,

매주 2 회 내지 격주 2회의 빈도 수로 투여될 수 있는, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
제 24항에 있어서, 상기 약제는,

매주 일 회의 빈도 수로 투여될 수 있는, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
제 16항에 있어서,

면역억제제, 항-염증제, 스테로이드, 면역조절제, 사이토카인 및 종양괴사인자(TNF) 길항체로 구성되는 군으로부터 선택되는 제 2 치료제가 더 투여될 수 있는, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
염증성 장질환 환자를 치료하기 위한 제 1 및 제 2 약제 제조에 사용되는 항-타입 1 인터페론 수용체 항체 및 항- 타입 1 인터페론 항체를 포함하는 조성물에 있어서,

상기 제 1 약제는 상기 항-타입 1 인터페론 수용체 항체가 상기 환자에게 제 1 시점에서 내성투약량 내에서 투여되는 것을 포함하고,

상기 제 2 약제는 상기 항- 타입 1 인터페론 항체가 상기 환자에게 제2시점에서 치료적 유효량 내에서 투여되는것을 포함하는, 조성물.
제 28항에 있어서,

상기 항-타입 1 인터페론 수용체 항체는 항-인터페론 알파-수용체(항-IFNAR) 항체인, 조성물.
삭제
제 28항에 있어서, 상기 제 1 약제는,

상기 항-타입 1 인터페론 수용체 항체의 반복 투여에 대한 면역 글로불린 G(IgG) 항체 반응 유도를 방지 또는 감소시키기에 충분한 상기 항-타입 1 인터페론 수용체 항체의 양을 포함하는, 조성물.
제 28항에 있어서,

상기 항-타입 1 인터페론 수용체 항체의 양은 10 mg/kg 체중 내지 50 mg/kg 체중 범위인, 조성물.
제 32항에 있어서,

상기 항-타입 1 인터페론 수용체 항체의 양은 20 mg/kg 체중 내지 40 mg/kg 체중 범위인, 조성물.
제 33항에 있어서,

상기 항-타입 1 인터페론 수용체 항체의 양은 20 mg/kg 체중 내지 25 mg/kg 체중 범위인, 조성물
제 28항에 있어서, 상기 항-타입 1 인터페론 항체는,

0.1 mg/kg 체중 내지 10 mg/kg 체중 범위 내에서 투여될 수 있는, 조성물.
제 35항에 있어서, 상기 항-타입 1 인터페론 항체는,

0.2 mg/kg 체중 내지 5 mg/kg 체중 범위 내에서 투여될 수 있는, 조성물.
제 36항에 있어서, 상기 항-타입 1 인터페론 항체는,

0.5 mg/kg 체중 내지 2 mg/kg 체중의 범위 내에서 투여될 수 있는, 조성물.
제 16항에 있어서, 상기 염증성 장질환은,

셀리악 병인, 항-타입1 인터페론 수용체 항체.
제 16항에 있어서, 상기 염증성 장질환은,

크론 병인, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
제 16항에 있어서, 상기 염증성 장질환은,

궤양성 대장염인, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
제 16항에 있어서, 상기 약제는,

점막 전달 경로로 투여될 수 있는, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
제 16항에 있어서, 상기 약제는,

흡입으로 투여될 수 있는, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
제 16항에 있어서, 상기 약제는,

비인강으로 투여될 수 있는, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.
제 16항에 있어서, 상기 약제는,

경구로 투여될 수 있는, 항-타입 1 인터페론 수용체 항체.