KR100772334B1

KR100772334B1 - 빈랑자 추출물을 함유하는 피부 주름 개선 및 피부 미백의 이중기능성 화장료 조성물

Info

Publication number: KR100772334B1
Application number: KR1020057018563A
Authority: KR
Inventors: 이건국; 이광식
Original assignee: 주식회사 코리아나화장품
Priority date: 2005-09-30
Filing date: 2003-04-11
Publication date: 2007-11-01
Also published as: KR20050114269A

Abstract

본 발명은 빈랑자 (Areca catechu seed)와 감초 (Glycyrrhiza glabra)의 혼합 추출물을 함유하는 섬유아세포 및 각질형성세포의 증식 촉진용 조성물 및 상기 추출물을 포함하는 피부 미백 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

빈랑자 추출물을 함유하는 피부 주름 개선 및 피부 미백의 이중기능성 화장료 조성물{COSMETICAL COMPOSITION HAVING DOUBLE FUNCTION OF IMPROVING WRINKLE AND WHITENING THE SKIN WITH ARECA CATECHU SEED EXTRACT}

본 발명은 섬유아세포 및 각질형성세포 촉진용 조성물과 피부 미백 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이며, 보다 구체적으로는 빈랑자 추출물 (Areca catechu seed extract)과 감초 추출물 (Glycyrrhiza glabra extract)을 함유하는 섬유아세포 및 각질형성세포의 증식 촉진용 조성물 및 상기 추출물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

인체를 이루고 있는 가장 큰 기관인 피부는 외부로부터 피부 안쪽의 다양한 기관을 보호하는 기능과 내부의 수분 및 유용성분이 밖으로 유출되는 것을 막아주는 장벽기능, 온도조절기능, 배설기능, 호흡 기능 등 다양한 생리적 기능을 담당하고 있는 아주 중요한 기관이다.

그러나, 나이가 들면서 표피, 진피 및 피하조직의 두께가 얇아져 피부 장벽 기능이 저하되고 피부의 수분함량의 급격한 감소로 피부가 건조해지는 등 피부의 생리적 기능이 저하되고, 이로 인한 다양한 변화가 오면서 노화된다.

노화에 따른 피부의 생리적 변화로는 (a) 피부의 구성성분인 표피, 진피 및 피하조직의 두께가 얇아지는 현상; (b) 피부장벽의 기능을 맡고 있는 지질막 (lipid barrier)의 지질 조성과 함량이 변화하면서 그 기능이 급격하게 저하됨으로써 피부의 수분함량이 떨어지고 피부가 건조해지는 현상; 및 (c) 기미, 주근깨, 색소 침착 및 다양한 피부 병변이 유발되는 현상 등이 있다.

특히, 자외선량의 증가와 대기오염 및 현대인의 과도한 피로와 스트레스 등으로 인해 생성되는 반응성이 높은 활성 산소와 자유 라디칼은 생체성분 (예, 단백질, 핵산, 세포막 지질 등)을 산화시키거나 변성시킴으로써, 피부노화의 주원인으로 작용한다. 따라서, 피부노화에 따른 주름형성, 피부탄력 감소, 색소침착, 기미, 주근깨 및 건조 등을 예방 및 치료하기 위한 화장료 분야의 연구들이 행해져 왔다.

일본 특허공개 평5-246838호에는 콜라겐 합성에 의한 피부 주름의 개선 방법이 소개되어 있는데, 이에 의하면 나이가 들면서 콜라겐 및 엘라스틴이 분해됨으로서 피부조직의 주름형성이 증가하게 된다.

피부에서 엘라스틴 섬유는 콜라겐 섬유와 더불어 진피 (epidermis) 안쪽에서 가교 결합을 형성한다. 나이가 들어감에 따라 엘라스틴 분해 효소인 엘라스타제의 작용으로 피부의 탄력이 급격히 저하되고, 함몰 (sagging)이 생긴다. 또한, 조직학적으로는, 나이가 들어감에 따라 염증 세포의 침윤이 증가하며, 엘라스틴 섬유의 결핍과 응집, 콜라겐 섬유의 감소를 보여주며, 생화학적으로는 엘라스타제의 활성도가 현격히 감소한다. 엘라스타제는 엘라스틴을 분해할 수 있는 지금까지 알려진 유일한 효소이며, 이러한 활성 또는 생성의 저해는 피부 노화를 근본적으로 줄여 줄 수 있는 방법이 된다.

피부 노화를 지연시키기 위하여, 종래에는 화장료 조성물에 보습제, 항염증제, 엘라스틴 및 콜라겐 가교 결합이 파괴되어 있는 조직에 영양 및 첨가제 등을 포함시켯다. 그러나, 이러한 조성물은 근본적으로 노화를 지연시키는데는 한계가 있다. 따라서, 엘라스틴 및 콜라겐의 분해를 근본적으로 저해시키는 저해제가 요구되고 있는 실정이다.

본 발명자들은 피부 노화 방지에 사용되는 종래의 제제들의 한계를 극복하기 위해 노력한 결과, 생약 등으로 사용되어 오던 자연의 천연물인 빈랑자 추출물이 엘라스타제의 현저한 저해효과, 자유 라디칼 소거효과 등의 안정성이 뛰어날 뿐만 아니라 여러 가지 유익한 약효 성분들을 함유하고 있어 노화 방지 효과가 있음을 보고한 바 있다 (대한민국 특허 출원 :1997-78817, 1999-0056924 및 Int . J. Cosmet. Sci ., 21:275-294(1999)).

사람의 피부색은 크게 멜라닌의 양, 헤모글로빈, 카로틴 등에 의해 결정되는데, 이중에서 멜라닌이 가장 중요한 역할을 한다. 멜라닌은 사람의 피부색을 결정할 뿐 아니라 자외선 흡수 작용 및 자유 라디칼 스캐빈져 (scavenger)의 역할을 하지만, 외부의 환경변화 (예, 자외선의 과량 노출, 대기오염, 정신적 스트레스 등)에 의해 과다하게 피부내 생성되면 피부내에서 색소침착현상이 일어나게 되어 피부색이 검게되거나 기미, 주근깨 등의 원인이 된다.

멜라닌 합성 과정을 살펴보면 다음과 같다: 먼저, 멜라노사이트에서, 티로신 을 기질로 하여 티로시나아제라는 효소가 도파퀴논 (DOPA quinone)을 생성시키며, 도파퀴논으로부터 자동산화 반응과 효소 반응을 거쳐 공중합체인 멜라닌이 생성된다. 이렇게 생성된 멜라닌은 멜라노좀을 통해 각질형성세포로 옮겨지게 되고 각질형성세포에서 28일간의 각화 과정을 거치면서 피부표면으로 나오게 된다. 그러나 이 과정에서 멜라닌 생성을 촉진하는 요인에 의해서 멜라닌이 과량 생성되고, 각화에 의해 멜라닌이 완전히 없어지지 않으면 색소침착(Pigmentation) 현상이 나타나게 된다. 따라서, 이러한 색소 침착 현상을 막아주기 위해서는 멜라닌 생성 과정에서의 일부 과정을 조절해 줌으로써 가능하다.

멜라닌 합성을 저해하는 기작은 여러 형태가 있다. 대표적인 합성 저해 과정은 멜라닌 합성의 중요한 효소인 티로시나아제를 저해하는 것이다. 코직산(kojic acid)과 같은 킬레이터 (chelator)가 있으며, 알부틴 (Arbutin)과 같은 기질 유사물질이 티로시나아제에 대한 활성을 저해하는 것으로 밝혀졌다. 또한 상백피 추출물 및 감초 추출물이 이러한 저해 활성을 나타내는 것으로 보고되었다 (Jpn J. Dermatol. 102:679-689(1992)). 그러나, 상술한 피부 미백 원료들은 안정성이 낮아, 효과가 오래 지속되지 못하는 단점을 가지고 있어 제품의 적용 범위가 매우 좁다.

본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 인용문헌 및 특허 문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 문헌 및 특허의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.

본 발명의 요약

본 발명자들은 주름 개선 및 피부-미백의 이중 기능성을 갖는 조성물을 개발하고자 예의 연구 노력한 결과, 빈랑자 및 감초의 혼합 추출물을 이용하는 경우 상기 이중 기능이 나타날 뿐만 아니라 각각의 성분의 고유한 효과가 단독으로 이용할 때 보다 상승적으로 증가함을 확인하였다. 또한, 상기 혼합 추출물을 적절한 형태로 제형화하는 경우, 효과의 개선 및 안정성을 달성할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 목적은 섬유아세포 및 각질형성세포의 증식용 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적은 인테그린 합성 증진용 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 주름 개선 및 미백의 이중 기능성 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명 및 청구범위에 의해 보다 명확하게 된다.

본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 빈랑자 추출물 및 감초 추출물을 유효성분으로 포함하는, 섬유아세포 및 각질형성세포의 증식용 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명자들은 한의약의 원료로 이용되는 빈랑자 및 감초의 추출 혼합물이 피부 주름의 개선에 관여하는 섬유아세포 및 각질형성세포의 증식을 촉진한다는 것을 발견하였다.

본 발명에서 이용되는 빈랑자 (Areca catechu seed)는 중국 남부, 대만 및 말레이시아 등에 광범위하게 분포하며 재배된다. 빈랑자는 동양에서 소화불량, 변비 및 복통을 치료하는데 의학적으로 사용되었다 (일본특허공개 평 5-320037). 또한, 빈랑자는 본 발명자들에 의해 엘라스타제 저해 및 자유 라디칼 소거 효과를 통해 피부 노화를 억제시켜줄 수 있는 것으로 증명되었다 (참조, 대한민국 특허 출원: 1997-78817, 1999-56924; 및 Int . J. Cosmet . Sci ., 21:275-294(1999)).

본 발명에서 이용되는 감초 (Glycyrrhiza glabra)는 콩과 다년생 초본 식물로서, 항염증 활성, 항알레르기 활성, 항균 활성 및 피부-미백 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에서, 빈랑자 추출물 및 감초 추출물은 하기의 다양한 추출 용매로부터 얻어진다: (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), (c) 상기 저급 알코올과 물의 혼합용매, (d) 아세톤, (e) 에틸 아세테이트, (f) 클로로포름, (g) 1,3-부틸렌글리콜 및 (h) 부틸 아세테이트. 한편, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 빈랑자 추출물 및 감초 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.

또한, 빈랑자 추출물 및 감초 추출물은 당업계의 주지의 방법을 이용해 정제될 수 있다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등도 본 발명의 빈랑자 추출물 및 감초 추출물을 제조하는데 이용될 수 있다. 또한, 기체 크로마토그래피, 헤드 스페이스 기체 크로마토그래피, 액체 크로마토그래피, 고속 액체 크로마토그래피 및 박층 크로마토그래피도 본 발명에 사용될 수 있다.

본 발명의 빈랑자 추출물 및 감초 추출물은 동결 건조 및 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.

빈랑자 추출물 및 감초 추출물 각각은 피부 주름의 개선 및 피부 탄력의 증대에 있어 중요한 역할을 하는 것으로 알려진 섬유아세포 및 각질형성세포의 증식을 증진시킬 수 있다. 빈랑자 및 감초의 혼합 추출물이 섬유아세포 및 각질형성세포의 증식에 있어서 상승적 효과를 나타내는 것으로 확인되었다. 섬유아세포 및 각질형성세포의 증식은 피부 주름을 개선하고 피부 탄력을 증대시키는 중요한 단백질인 콜라겐, 인테그린 및 라미닌의 생합성에 밀접하게 관련되어 있다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 빈랑자 추출물을 유효성분으로 포함하는, 섬유아세포의 인테그린 합성 증진용 조성물을 제공한다.

인테그린은 세포 사이의 결합력을 증진시켜 세포 상호간의 신호전달 및 세포 활성을 촉진시키는 결합 단백질이다. 본 발명의 빈랑자 추출물은 섬유아세포의 인테그린의 생합성을 촉진하는데 있어서 매우 성공적이다. 따라서, 본 발명의 빈랑자 추출물이 피부의 상태를 결정하는 데 중요한 섬유아세포에 작용을 하는 경우, 증가된 인테그린에 의해 섬유아세포의 활성이 증가되어, 피부 주름의 개선을 가져올 수 있다.

본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 (a) 유효성분으로서 빈랑자 추출물 및 감초 추출물; 및 (b) 화장품학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 피부 주름 개선 및 미백의 이중 기능성 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명자들의 연구 결과에 따르면, 본 발명의 화장료 조성물에서 빈랑자 추출물은 감초 추출물의 티로시나아제 활성 억제 효과 및 멜라노사이트에서의 멜라닌 합성 억제 효과를 상승적으로 증가시키는 기능을 한다. 따라서, 본 발명의 조성물에 의해 달성되는 피부-미백 효과는 감초 추출물을 단독으로 이용하는 경우보다 상승적으로 증가하며, 이러한 점은 본 발명의 특징 중 하나이다.

또한, 상술한 바와 같이, 빈랑자 추출물의 인테그린 생합성을 증가시키는 활성은, 본 발명의 조성물이 주름 개선 효과를 나타내도록 한다.

더불어, 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 빈랑자 및 감초의 혼합 추출물은 섬유아세포 및 각질형성세포의 증식을 증진하는 작용을 하며, 이러한 세포 증식을 증진하는 작용은 본 발명의 화장료 조성물이 주름 개선 효과를 나타내도록 한다.

따라서, 본 발명의 화장료 조성물은 다음과 같은 신규하고 비자명한 결과를 달성할 수 있다: (a) 빈랑자 또는 감초 추출물 단독 사용시와 비교하여, 혼합 사용시 그 고유의 효과 (피부 주름 개선 또는 피부-미백)가 상승적으로 증가한다는 것; (b) 빈랑자 추출물이 섬유아세포에서 인테그린의 생합성을 증가시킨다는 것; (c) 빈랑자 및 감초의 혼합 추출물은 섬유아세포 및 각질형성세포의 증식을 증진하는 작용을 한다는 것; 그리고 (d) 화장료 조성물에 함유된 감초 추출물의 불안정성이 빈랑자 추출물의 도움으로 해결될 수 있다는 것.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 빈랑자 추출물 및 감초 추출물의 함량은 화장료 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 각각 0.001-1.0 중량%이며, 보다 바람직하게는 각각 0.002-0.5 중량%이다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 빈랑자 및 감초의 혼합 추출물은 소낭 구조 내에 함유되어 있다. 본 명세서에서 소낭 구조는 리포좀, 니오좀 (niosome), 바이오좀 (biosome) 및 파마코좀 (pharmacosome)을 포함하는 개념이다. 가장 바람직하게는, 본 발명의 피부 적용에 적합한 담체는 바이오좀이다.

가장 적합한 담체인, 바이오좀은 상기 두 유효성분 (감초 추출물 및 빈랑자 추출물)의 안정화 및 피부 침투도를 개선하며, 이에 의해 피부 주름 개선 및 피부-미백 효과를 크게 증가시키고, 가시적 임상결과에 필요한 사용기간을 크게 단축시킨다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 바이오좀의 함량은 화장료 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 0.05-20 중량%이며, 보다 바람직하게는 0.1-10.0 중량%이다.

본 발명에서 이용되는 바이오좀 담체는 당업계에 공지된 통상적인 방법을 이용하여 제조할 수 있다. 바람직하게는 비이온성 계면활성제를 이용하여 제조되며, 상기 비이온성 계면활성제는 폴리옥시에틸렌 알킬에테르, 폴리옥시에틸렌 콜레스테릴에테르, 폴리옥시에틸렌 솔비탄에스테르, 폴리글리세릴 알킬에스테르, 폴리옥시에틸렌 알킬에스테르 및 슈가 디에스테르이다. 상기 비이온 계면활성제의 적합한 함량은 바이오좀의 총 중량을 기준으로 하여 10-50 중량%이고, 바람직하게는 30-40 중량%이다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 비이온성 계면활성제는 이의 베이스로 PEG-5-소이 스테롤 및 콜레스테릴 올리에이트를 함께 사용한다.

아울러, 상기 비이온 계면활성제만 가지고는 피부의 지질이 갖고 있는 역할을 기대할 수 없기 때문에, 바이오좀을 제조하기 위한 조성물은 글리세린 (Glycerin) 골격에 세라마이드를 결합시킨 것을 추가로 첨가하는 것이 바람직하다. 글리세린 골격에 결합시킨 세라마이드는 양쪽친매성을 띄며, 이로 인해 세포막의 천연 지질과 유사한 특징을 갖게 된다. 세라마이드의 함량은 바이오좀 총 중량을 기준으로 하여 0.1-10 중량%, 바람직하게는 2.0-6.0 중량%이다.

상기 세라마이드는, 바람직하게는 세라마이드 3 또는 다음 화학식 (I)로 표시되는 유사 세라마이드이다:

(I)

상기 식에서, X가

인 경우, Z는 -OH이고, Y는 -OH,

또는

이며; Y가

인 경우, Z는 -OH이고, X는 -OH,

또는

이며; Z가

인 경우, Y는 -OH이고, X는 -OH,

또는

이며; 그리고 상기 R은 포화 또는 불포화 직쇄 또는 분쇄 지방족 탄화수소기를 나타내며; 치환된 경우에는 1개 이상의 수산기 (-OH)를 갖는다.

보다 바람직하게는, 상기 화학식 (I)로 표시되는 유사 세라마이드는 다음 화학식 (Ⅱ), (Ⅲ) 또는 (Ⅳ)의 화합물이다:

(Ⅱ);

(Ⅲ); 또는

(IV),

상기 화학식에서, X'은 H 또는 -OH이고; X"은 -OH,

또는

이며; Y'은 -OH,

또는

이고; Y"은 H 또는 -OH이며; Z'은 -OH,

또는

이고; Z"은 H 또는 -OH이며; n은 0 또는 1 내지 47의 정수이다.

상술한 유사 세라마이드의 구체예 및 제조 방법은 PCT/KR02/00314에 개시되어 있으며, 참조로서 본원에 포함된다. 상기 유사 세라마이드는 천연 세라마이드와 동일한 기능한 발휘하면서도, 용해도가 크기 때문에, 화장료 조성물에 대한 적용성이 우수하고 소비용으로 합성할 수 장점이 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 바이오좀의 제조시 모노글리세롤, 다이글리세롤 및 트리글리세롤 등의 보조유화제를 추가로 포함한다. 가장 바람직하게는 다이글리세롤이 이용된다. 보조 유화제의 함량은 바이오좀 총 중량을 기준으로 하여, 바람직하게는 1-15 중량%, 더욱 바람직하게는 2-10 중량%이다.

바이오좀을 제조하기 위한 조성물은, 바람직하게는 콜레스테릴 노나노에이트, 콜레스테릴 스테아레이트, 콜레스테릴 이소스테아레이트 및 콜레스테릴 이소스테아릴카보네이트 등의 콜레스테릴 알킬에스테르를 포함한다.

본 발명의 빈랑자 추출물 및 감초 추출물은 바이오좀의 총 중량을 기준으로 하여 0.1-10 중량%로 바이오좀 내에 함유된다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 빈랑자 추출물 및 감초 추출물 (또는 빈랑자 추출물 및 감초 추출물을 함유하는 바이오좀)이외에 담체 뿐만 아니라 보조 성분을 포함할 수 있다.

보조 성분의 비-제한적인 예로는 보존제, 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 향료 또는 상기 성분의 혼합물을 포함한다.

본 발명의 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 연고, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 사용될 때에는 유연 화장수 (스킨 로션), 수렴 화장수, 영양 화장수 (밀크로션), 영양 크림, 맛사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 훼이셜 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용가능한 담체는, 제형의 타입에 따라 다양하다. 예를 들어, 본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 상기 성분의 혼합물이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트, 폴리아미드 파우더 및 상기 성분의 혼합물이 이용될 수 있다. 특히 스프레이인 경우에는, 추가로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜, 목화씨유, 땅콩유, 옥수수씨유, 올리브유, 캐스터 오일 및 참깨씨유 등의 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르 또는 상기 성분의 혼합물이 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 및 트라칸트 또는 상기 성분의 혼합물이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는, 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리윰 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬 아미도 베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체, 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 또는 상기 성분의 혼합물이 이용될 수 있다.

하기 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.

제조예 1: 바이오좀의 제조방법

본 발명에 사용된 바이오좀은 비이온성 계면활성제, 보조유화제, 콜레스테롤, 콜레스테롤 에스테르 및 소이 스테롤을 혼합 사용하여 고압 유화시켜, 폐쇄된 이중층 구조를 가진 바이오좀을 완성하는 방법으로 제조하였다. 이 폐쇄된 이중층 구조안에 본 발명의 유효성분인 빈랑자 추출물 및 감초 추출물을 함유시킴으로써, 효과적으로 안정화하고 유효성분의 효과를 극대화할 수 있었다.

비이온성 계면활성제의 베이스로서 40 중량%의 폴리옥시에틸렌 알킬에테르, 25 중량%의 PEG-5-소이 스테롤 및 콜레스테릴 올리에이트, 글리세린에 3.0 중량%의 세라마이드 3이 결합한 것, 보조유화제로서 5.0 중량%의 디글리세롤, 콜레스테릴 스테아레이트 및 잔여량의 증류수를 가열시키고, 75℃에서 혼합하였다. 그리고 난 후, 빈랑자 추출물 및 감초 추출물 각각을 3 중량%로 상기 혼합물에 첨가한 뒤, 1,000 bar의 고압하에서 유화시켜, 100 nm 입자 크기를 가진 바이오좀을 제조하였다.

제조예 2: 빈랑자 추출물의 제조방법

빈랑자 (Seeds of Areca catechu)를 정제수로 세척하고 건조시켰다. 건조한 빈랑자 1 kg을 70% 에탄올 5 ℓ에 넣고 4-40℃에서 5일간 추출하였다. 이어, 추출액을 300 메쉬 여과포로 여과하고, 5-10℃에서 7-10일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 페이퍼 No. 5로 여과하였다. 여과액을 회전 감압 증발기로 건조하여 빈랑자 추출물 파우더를 얻었다. 빈랑자 추출물 파우더 100 g을 물과 1,3-부틸렌글리콜을 동량으로 한 용액 1 ℓ에 용해하여 빈랑자 추출물을 얻었다.

하기의 실시예 및 비교실시예에 기재된 빈랑자 추출물의 함량은 파우더의 농도로 나타낸 것이다.

제조예 3: 감초 추출물의 제조방법

감초 (Glycyrrhiza glabra)를 정제수로 세척하고 건조하였다. 건조한 감초 1 kg을 70% 에탄올 5 ℓ에 넣고 4-40℃에서 5일간 추출하였다. 이어, 추출액을 300 메쉬 여과포로 여과하고, 5-10℃에서 7-10일간 방치하여 숙성시킨 후, 와트만 필터 페이퍼 No. 5로 여과하였다. 여과액을 회전 감압 증발기로 건조하여 감초 추출물 파우더를 얻었다.

실시예 및 비교실시예

배합성분	실시예	비교실시예 1	비교실시예 2
바이오좀^*	10.0	-	-
빈랑자 추출물	-	0.5	-
감초 추출물	-	0.5	-
세토스테아릴알콜	2.0	2.0	2.0
유동파라핀	3.0	3.0	3.0
델타-토코페롤	0.2	0.2	0.2
글리세릴 스테아레이트	1.5	1.5	1.5
폴리솔베이트60	1.2	1.2	1.2
솔비탄 세스퀴올레이트	0.5	0.5	0.5
스쿠알란	5.0	5.0	5.0
싸이크로메치콘	3.0	3.0	3.0
마이크로크리스탈린	0.7	0.7	0.7
트리옥타노인	5.0	5.0	5.0
BHT	0.05	0.05	0.05
1,3-부틸렌글리콜	2.0	2.0	2.0
농글리세린	4.0	4.0	4.0
EDTA-2Na	0.05	0.05	0.05
산탄검	0.1	0.1	0.1
토코페릴 아세테이트	0.2	0.2	0.2
향, 방부제	0.3	0.3	0.3
증류수	to 100	to 100	to 100

*는 빈랑자 추출물 3 중량% 및 감초 추출물 3 중량%를 포함하고 있다. 상기 표의 숫자는 조성물의 총 중량에 기초한 중량%로서 배합성분의 양을 나타낸다.

실험예 1: 티로시나아제 활성 억제능 분석

감초 추출물, 빈랑자 추출물 및 이들의 혼합물에 대한 티로시나아제 활성 억제능 시험을 실시하였다.

티로시나아제는 버섯에서 분리 및 정제된 것으로 SIGMA사에서 구입하여 사용하였다. 기질인 티로신은 0.05 M 인산나트륨 완충용액 (pH 6.8)에 녹여 0.1 ㎎/㎖ 용액으로 만들어 사용하였다.

상기 각 추출물 (파우더 형태로 있음)을 1,3-부틸렌 글리콜에 고농도로 용해시키고, 다시 완충용액에 희석하여 적당한 농도로 조절하여, 추출물을 같은 양으로 혼합하여 시료액으로 만들어 사용하였다.

티로신 용액 (0.5 ㎖)을 시험관에 넣고 여기에 혼합 추출물 (0.5 ㎖)을 가하였다. 상기 시험관을 37℃ 항온기에서 10분간 방치한 후, 200 U/㎖ 티로시나아제 (0.5 ㎖)를 넣고, 37℃에서 10분간 반응시켰다. 이때 대조군으로서, 혼합 추출물 대신 빈랑자 추출물 또는 감초 추출물(0.5 ㎖)만을 넣었다. 이 반응액이 든 시험관을 얼음위에 놓아 급냉시켜 반응을 중지시켰다. 분광광도계로 파장 475㎚에서 흡광도를 측정하였다.

각 추출물의 티로시나아제 활성의 저해 효과는 하기의 공식으로 구했다:

티로시나아제 활성 저해율(%) = 100-[(각 추출물의 흡광도/대조군 흡광도) × 100]

실험 결과는 하기의 표 2에 나타나 있다.

농도 (㎍/㎖)	티로시나아제 활성 제해율 (%)
농도 (㎍/㎖)	감초 추출물	빈랑자 추출물	감초 추출물(50%) +빈랑자 추출물(50%)
10	15.8	4.4	30.1
20	27.5	7.2	37.5
50	36.8	14.6	59.5
100	44.4	18.8	81.9
200	62.2	22.3	97.3

상기 표 2에서 확인할 수 있듯이, 감초 추출물의 티로시나아제 활성 억제 효과는 빈랑자 추출물을 함께 함유함으로서 그 효과가 상승적으로 더욱 증가하였다. 빈랑자 추출물이 감초 추출물의 티로시나아제 활성 억제 효과를 촉진시킬 수 있는 결과는 신규하고 놀라운 것이었다. 따라서, 본 발명의 빈랑자 및 감초의 혼합 추출물을 적은 농도로 제형에 혼합하더라도, 감초 추출물 등의 피부-미백용 통상적 성분과 비교해 티로시나아제 활성의 억제, 즉 피부-미백 효과를 달성할 수 있음을 알 수 있다.

실험예 2: 멜라노사이트(Melanocyte)에서 멜라닌 생성에 대한 저해 효과 분석

멜라노사이트는 마우스 유래 B-16 멜라노마 세포주 (ATCC CRL 6323)를 구입하여 사용하였다. 멜라노마 세포주를 4.5 g/ℓ 포도당, 10% 우태아 혈청 및 1% 페니실린-스트렙토마이신이 함유된 DMEM 배지에 접종하여, 50 ㎖ T-플라스크에 37℃에서 배양하였다. 5% CO₂ 조건하에서 24시간 배양한 후, 0.02% EDTA가 함유된 0.05% 트립신(Trypsin)을 처리하여 세포를 분리한 후, 추가로 48시간 동안 배양하였다. 이때 세포수는 5.76 × 10⁶ 세포/플라스크이다. 여기에 상기 혼합 추출물을 DMEM에 적당 농도로 희석시켜, 배양된 멜라노마 세포에 처리하여 37℃에서 5일간 배양하였다.

배양 후, 배지를 모두 제거하고, 0.02% EDTA와 0.05% 트립신을 함유한 PBS을 1㎖ 처리하여 세포를 분리시킨 후, 5분간 원심 분리하여 세포만을 수집하였다. 수집된 세포에 트리클로로아세트산을 처리하여, 교반하고, 원심분리하였다. 침전된 멜라닌을 PBS로 세척하고, 1 N NaOH를 처리하여 멜라닌을 용해시켰다. 475 nm에서 흡광도를 측정하였다. 멜라닌 농도는 합성 멜라닌 (시그마사)의 표준 농도 곡선으로부터 결정하였다. 실험 결과는 표 3에 나타나 있다.

추출물 농도 (㎍/㎖)	멜라닌 생성 억제율(%)
추출물 농도 (㎍/㎖)	감초 추출물	혼합추출물 감초 추출물(50%) +빈랑자 추출물(50%)
10	16.8	27.4
20	21.2	31.4
50	29.8	43.7
100	32.1	54.2

상기 표 3에 기재된 바와 같이, 감초 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과는 빈랑자 추출물과 혼합함으로써, 그 정도가 상승적으로 증가하였다. 빈랑자 추출물이 감초 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과를 향상시킬 수 있는 결과는 신규하고 놀라운 것이었다. 이러한 결과는 실험예 1에서의 결과와 일치하는 것이다.

실험예 3: 엘라스타제 활성 저해 효과 분석

이 분석을 하기 위해, 돼지 췌장 엘라스타제를 시그마 (Sigma)사로부터 구입한 Succ-Ala-Ala-Ala-p-니트로아닐린(nitroaniline)을 함유하는 기질 용액 1㎖를 시험관에 첨가하여, 포타슘 포스페이트 완충용액과 증류수를 가하였다. 에탄올에 적당농도로 함유시킨 0.2 ㎖의 빈랑자 추출물 시료액을 반응액에 넣은 뒤, 10 ㎕의 엘라스타제 용액을 첨가하여 37℃에서 10분 동안 반응시켰다. 분비된 p-니트로아닐린을 검출하기 위해 410 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 대조군은 각 추출물 대신 증류수만을 넣었다. 엘라스타제 활성의 저해율은 다음의 공식으로 구했다:

엘라스타제 활성의 저해율(%) = [ 1 - (추출물-처리군의 엘라스타제 활성도/대조군의 엘라스타제 활성도) ] × 100

구분	추출물의 최종 농도 (㎍/㎖)	엘라스타제 활성의 저해율(%)
대조군	1,000 100	0 0
빈랑자 추출물	1,000 100	100 68

상기 표 4에서 확인할 수 있듯이, 빈랑자 추출물은 고농도에서 엘라스타제의 활성을 거의 100% 억제하였다.

실험예 4: 세포증식에 대한 효과 분석

실험예 4-1: 케라티노사이트의 증식에 대한 효과

인체 정상 각질형성세포 (Human normal Keratinocyte)를 96-웰 마이크로플레이트 (96-well microplate)의 각 웰에 1×10⁴ 세포가 되도록 접종하여, DMEM에서 24시간 배양하였다. 배양 후 상기 마이크로플레이트의 배지를, 디메틸설폭시드(DMSO:Dimethyl sulfoxide)에 빈랑자 추출물과 감초 추출물이 혼합된 추출물을 250 ㎍/㎖ 포함하는 무혈청 DMEM으로 교체하고 용해시키고, 24시간 더 배양하였다. MTT 용액[3-(4,5-Dimethyl-thiazole-2-yl) 2,5-diphenyl tetrazolium bromide : 5 ㎎/㎖] 10 ㎕씩 각 웰에 첨가하고 4시간 방치 후, 배지 부분을 버렸다. 각 웰당 100 ㎕의 DMSO 용액을 가하여 20분간 교반한 후, 마이크로플레이트 측정기로 570 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 실험 결과는 하기 표 5에 요약되어 있으며, 그 값들은 3회 독립시험의 평균값이다. 세포 증식 효과는 다음 공식에 의해 산출되었다:

세포 증식 효과(%) = [(추출물 처리군의 흡광도 - 대조군의 흡광도)/ 대조군의 흡광도] × 100

혼합 추출물의 농도 (㎍/㎖)	세포 증식 효과(%)
0	-
10	8.3
50	17.5
100	31.8
200	66.3
500	78.5

상기 표 5에 기재된 바와 같이, 감초 및 빈랑자의 혼합 추출물은 각질형성세포의 증식을 농도-의존적으로 증가시킨다. 따라서, 상기 혼합 추출물이 피부 주름 개선에 매우 효과적임을 알 수 있었다.

실험예 4-2: 섬유아세포의 증식에 대한 효과

인체 정상 섬유아세포를 96웰 마이크로 플레이트의 각 웰에 1×10⁴ 세포가 되도록 접종하여, DMEM에서 24시간 배양하였다. 배양 후 상기 마이크로플레이트의 배지를, DMSO에 빈랑자와 감초의 혼합 추출물을 250 ㎍/㎖ 포함하는 무혈청 DMEM으로 교체하고, 24시간 더 배양하였다. MTT 용액[3-(4,5-Dimethyl-thiazole-2-yl) 2,5-diphenyl tetrazolium bromide : 5 ㎎/㎖] 10 ㎕씩 각 웰에 첨가하고 4시간 방치 후, 배지 부분을 버렸다. 각 웰당 100 ㎕의 DMSO를 가하여 20분간 교반한 후, 마이크로플레이트 측정기로 570 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 실험 결과는 하기 표 6에 요약되어 있으며, 그 값들은 3회 독립시험의 평균값이다. 세포 증식 효과는 상기 공식에 의해 산출되었다.

추출물	세포 증식 효과(%)
빈랑자 추출물	28.7
감초 추출물	18.2
빈랑자 추출물(50%) + 감초 추출물 (50%)	60.1

표 6에서 보는 바와 같이, 빈랑자 추출물과 감초 추출물 각각은 피부의 주름개선 및 피부 탄력 증진에 있어 중요한 역할을 하는 것으로 알려진 섬유아세포의 증식 효과를 상승시킬 수 있었다. 또한, 상기 혼합 추출물은 세포 증식 효과의 상승을 가져왔다. 섬유아세포의 증식은 피부 주름의 개선 및 피부 탄력의 증진에 있어 중요한 단백질인 콜라겐, 엘라스틴, 인테그린 및 라미닌의 생합성 증가와 매우 밀접한 관계를 가지고 있다.

실험예 5: 인테그린 생합성 효과 분석

인체 정상 섬유아세포를 96웰 마이크로 플레이트의 각 웰에 2×10⁴ 세포가 되도록 접종하여, DMEM에서 24시간 배양하였다. 배양 후 상기 마이크로플레이트의 배지를, DMSO에 빈랑자 추출물 100 ㎍/㎖ 포함하는 무혈청 DMEM으로 교체하고, 72시간 더 배양하였다. 배양 후 각 웰의 인테그린의 함량은 ELISA 방법으로 분석하였다. 실험결과는 표 7에 나타나 있다.

샘플	인테그린 생합성의 증진 효과 (%)
대조군	0
빈랑자 추출물 (100 ㎍/㎖)	19.47

상기 표 7에서 보는 바와 같이, 본 발명의 빈랑자 추출물은 섬유아세포와 세포사이의 결합력을 증진시켜 세포 상호간의 정보 전달 및 세포 활성을 촉진시키는 결합 단백질인 인테그린의 생합성을 촉진시켰다.

실험예 6: 혼합 추출물을 함유하는 바이오좀의 피부 침투 효과 분석

피부 등가물 (Dermal Equivalent)을 3 μm 다공성 폴라카보네이트 재질로된 막(Membrane)에 의해 안쪽과 바깥쪽이 구분된 플레이트의 안쪽에 넣었다. 피부 등가물은 다음 과정에 의해 제조하였다: 인체 정상 섬유아세포 1 × 10⁵ 세포/㎖를 콜라겐 수용액 3 ㎎/㎖ : 5 × DMEM : 2.2% 소듐 바이카보네이트와 200 mM HEPES 완충용액이 포함된 0.05 N 수산화나트륨이 7:2:1로 혼합된 배지에 접종하여, 5% CO₂조건하에서 37℃에서 7일 동안 배양해 피부 등가물을 수득하였다.

이어, 배양된 섬유아세포를 함유하는 피부 등가물 표면 위에, 표피 각질형성세포 1 × 10⁵ 세포/㎖를 접종한 뒤, EGF와 BPE가 함유된 K-SFM 배지를 안쪽과 바깥쪽에 넣고 7일 동안 배양하였다. 그 후, 플레이트 안쪽의 배지를 버려 공기가 배양세포의 표면에 접촉되도록 하였다. 10% FBS가 함유된 K-SFM과 EGF가 들어 있지 않는 DMEM이 동량으로 혼합된 배지를 바깥쪽에 넣어, 2주간 배양하여 다층의 표피와 진피가 형성된 인공피부를 얻었다. 상기 인공피부 조직위에 본 발명의 실시예와 비교예의 화장료 조성물을 적용하여, 4시간 배양하였다. 그 후, 10% FBS가 함유된 K-SFM과 EGF가 들어 있지 않은 DMEM이 동량으로 혼합된 배지에서, 인공피부의 표피와 진피를 침투하여 통과된 추출물의 양을 HPLC로 분석하였다. 실험 결과는 하기 표 8에 나타내었다.

추출물의 종류	배지 중의 추출물의 양 (㎍/㎖)
추출물의 종류	실시예	비교실시예 1
빈랑자 추출물	650	56
감초 추출물	726	69

상기 표 8에서 보는 바와 같이, 본 발명의 빈랑자 추출물과 감초추출물을 안정화한 바이오좀은 비교실시예 1에 비해 피부침투 효과가 약 10배 이상 우수함을 알 수 있었다. 이는 본 발명의 바이오좀의 평균입자 크기가 약 100 nm로 아주 작아 피부침투가 용이하기 때문이다. 이와 같은 향상된 피부 침투성은 하기의 실험예 7 및 8에서 증명된 개선된 피부탄력 개선의 임상 효과를 초래하는 원인이다.

실험예 7: 피부 탄력의 효과 분석

본 발명의 빈랑자 추출물과 감초 추출물을 안정화한 바이오좀을 함유하는 화장료 조성물에 대한 피부탄력 개선 임상효과를 측정하였다.

온도 24-26℃, 습도 75% 조건하에서, 건강한 여성 30명(평균연령 36.3세)를 3 그룹으로 나누고, A 그룹에는 실시예의 화장료 조성물을, B 그룹에는 비교실시예 1의 화장료 조성물을, C 그룹에는 비교실시예 2의 화장료 조성물을 눈가를 중심으로 12주간 적용하였다. 그 후, 피부탄력 측정기 (Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다. 실험 결과는 피부탄력 측정기 SEM 575의 △R8(R8(12주) - R8(0주)) 값으로 표시하였다. R8 값은 피부 점탄성 (Viscoelasticity)의 성질을 나타낸다.

샘플	피부 탄력 효과
실시예	0.52
비교실시예 1	0.29
비교실시예 2	0.08

표 9의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 바이오좀을 함유한 실시예의 피부탄력은 비교실시예 1에 비해 79.3% 증가했다. 아울러 본 발명의 빈랑자 추출물과 감초추출물을 모두 함유한 비교실시예 1도 피부 탄력을 매우 효과적으로 증진시켰다.

실험예 8: 피부-미백 효과의 분석

30세 이상의 여성 30명을 2 그룹으로 나누었다. A 그룹에는 바이오좀 (실시예)을 함유하는 제형을, B 그룹에는 비교 실시예 1의 제형을 적용하였다. 1일 1회씩 눈가 및 눈밑을 중심으로 0.2 mg씩 12주간 도포하였다. 적용하고 난 뒤, 항-섀도 (anti-shadow) 효과를 측정하였다. 크로마메타 (Minolta CR300)를 이용하여 피부색의 변화(ΔL)를 측정하였다. 여기서 L값은 색의 밝기의 정도를 표시하는데, 0 (검정색)부터 10 (흰색)까지의 등급으로 구분된다. 또한, 복수의 숙련자에 의한 객관적 육안 관찰과 피검자에 의한 주관적 육안관찰을 실시하였다. 육안관찰은 하기 7등급으로 분류하여 평가하였다: -3, 매우 악화; -2, 악화; -1, 약간 악화; 0, 변화 없음; +1, 약간 개선; +2, 개선; 및 +3: 매우 개선.

피검자	피부색의 밝기 변화(ΔL)		숙련자의 객관적 평가		피검자의 주관적 평가
피검자	A	B	A	B	A	B
1	5.1	1.9	1	1	1	0
2	5.6	1.0	3	0	3	0
3	3.2	1.8	1	-1	2	0
4	7.1	0.3	2	0	3	0
5	7.4	2.1	3	1	2	2
6	5.2	-0.5	1	0	2	0
7	5.5	1.6	3	1	3	1
8	8.8	2.2	3	1	3	2
9	2.9	0.7	2	1	1	0
10	5.2	-1.0	2	0	1	1
평균	5.6	1.01	2.1	0.4	2.1	0.6

상기 표 10에서 알 수 있는 바와 같이, 빈랑자 추출물 및 감초 추출물을 안정화한 본 발명의 바이오좀을 도포한 A 그룹의 ΔL값은 5.6 (P＜0.01)이며, B 그룹의 ΔL값은 1.01 (P＞0.05)이었다. 따라서, 빈랑자 추출물 및 감초 추출물을 안정화한 바이오좀이 피부톤을 매우 효과적으로 희고 밝게 개선시켜 줌을 알 수 있다.

숙련자에 의한 객관적 육안 평가에서, A 그룹은 2.1(P＜0.01), B 그룹은 0.4 (P＞0.05)로 나타났고, 피검자에 의한 주관적 육안 평가에서, A 그룹은 2.1(P＜0.01), B그룹은 0.6(P＞0.05)로 나타났다.

이상의 결과를 종합하여 볼 때, 빈랑자 추출물 및 감초 추출물을 안정화한 본 발명의 바이오좀이 신뢰성 있게 피부색이 희고, 밝은 효과를 보임을 알 수 있다.

실험예 9: 제형의 안정성 실험

표 1의 실시예 및 비교실시예 1의 제형을 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관하였다. 또한, 상기 제형을 4℃로 일정하게 유지되는 완전히 차광된 냉장고 내에서 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관하였다. 보관 후 제형의 분리 정도 및 변색 정도를 비교 측정하였다. 이때 제품 분리 및 변색 정도를 다음의 6등급으로 분류하여 평가하였다: 0: 변화 없음; 1: 극히 조금 분리(변색); 2: 조금 분리(변색); 3: 조금 심하게 분리(변색); 4: 심하게 분리(변색); 및 5: 극히 심하게 분리(변색).

온도	시험물질 변색 (분리) 정도
온도	실시예	비교실시예 1
45℃	0	2.0
4℃	0	0

상기 표 11에서 보는 바와 같이, 본 발명의 바이오좀 (실시예)을 함유하는 크림 제형은 변색 및 분리현상이 전혀 없어 안정한 제형임을 알 수 있었다. 비교실시예 1은 45℃에서 약간의 분리 및 변색이 일어났다.

실험예 10: 피부 안전성 실험

피검자 30명 (평균연령 27.5세 , 연령분포 19세-35세)을 2 그룹으로 나누어 헤이스 테스트 챔버 (Haye's Test Chamber)를 이용하여 피부 첩포시험 (Patch Test)을 실시하였다. 단, 건선(Psoriasis), 습진(Eczema) 및 기타 피부병변 보유자나 임신, 수유부 및 피임제, 항히스타민제 등을 복용하고 있는 사람은 본 실험에서 제외하였다.

시험부위를 70% 에탄올로 닦아낸 뒤 건조시킨 다음, 상기 표 1의 제형을 각각 15 g씩 챔버에 적하시켰다. A 그룹에는 본 발명의 바이오좀 (실시예)을 함유하는 제형을, B 그룹에는 비교실시예 1을 함유하는 제형을 도포시켰다. 24시간 동안 도포하여 첩포를 제거한 후에, 마킹펜으로 시험부위를 표시하여 각각 24시간, 48시간 후에 시험부위를 관찰하였다. 피부반응은 하기 표 12의 국제접촉피부염연구회 (International Contact Dermatitis Research Group:ICDRG)의 규정에 따라 판정하였다. 실험결과는 하기 표 13에 나타내었다.

기호	판정기준	평가	평균 스코어
± + ++ +++ -	불확실하거나 경미한 반응 및 홍반 홍반 + 경화 홍반 + 경화 + 물집 홍반 + 경화 + 수포 음성	미소자극 경자극 중자극 강자극 무자극	0-0.9 1.0-2.9 3.0-4.9 5.0 이상 0

패치 부착후 경과시간	실시예	비교실시예 1
24시간	0	0.2
48시간	0	0

상기 표 13에서 보는 바와 같이, 빈랑자 추출물과 감초 추출물을 안정화한 바이오좀을 함유한 실시예의 제형은 자극을 보이지 않아 피부에 안전한 제형임을 알 수 있었다. 또한, 비교실시예 1의 제형도 천연 식물추출물의 피부안전성의 장점을 그대로 실험 결과에 나타내었다.

제형예

이하 상기한 시험예들의 결과를 근거로 하여 빈랑자 추출물과 감초 추출물을 안정화한 바이오좀을 함유하는 화장료를 조성하여 제시한다. 그러나, 본 발명의 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.

제형예 1: 유연화장수(스킨로션)

배합성분	중량부(%)
바이오좀	1.0
1,3-부틸렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
올레일 알코올	0.1
폴리솔베이트 20	0.5
에탄올	15.0
벤조페논-9	0.05
향, 방부제	0.3
정제수	to 100

제형예 2: 영양화장수( 밀크로션 )

배합성분	중량부(%)
바이오좀	3.0
프로필렌 글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올 아민	1.2
토코페릴 아세테이트	3.0
유동 파라핀	5.0
스쿠알란	3.0
마카다미아너트 오일	2.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄 세스퀴올레이트	1.0
카르복시비닐 폴리머	1.0
BHT	0.01
EDTA-2Na	0.01
향, 방부제	0.3
정제수	to 100

제형예 3: 영양크림

배합성분	중량부(%)
바이오좀	10.0
세토스테아릴 알콜	2.0
글리세릴 스테아레이트	1.5
트리옥타노인	5.0
폴리솔베이트 60	1.2
솔비탄 스테아레이트	0.5
스쿠알란	5.0
유동 파라핀	3.0
싸이클로메치콘	3.0
BHT	0.05
델타-토코페롤	0.2
농글리세린	4.0
1,3-부틸렌글리콜	2.0
산탄검	0.1
EDTA-2Na	0.05
향, 방부제	0.3
정제수	to 100

제형예 4: 마사지 크림

배합성분	중량부(%)
바이오좀	1.0
프로필렌 글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올 아민	0.5
왁스	2.0
토코페릴 아세테이트	0.1
폴리솔베이트 60	3.0
솔비탄 세스퀴올레이트	2.5
세테아릴 알콜	2.0
유동 파라핀	30.0
카르복시비닐 폴리머	0.5
향, 방부제	0.4
정제수	to 100

제형예 5: 팩

배합성분	중량부(%)
바이오좀	2.0
프로필렌 글리콜	2.0
글리세린	4.0
카르복시비닐 폴리머	0.3
에탄올	7.0
PEG-40 히드로게네이티드 캐스터 오일	0.8
트리에탄올 아민	0.3
BHT	0.01
EDTA-2Na	0.01
향, 방부제	0.4
정제수	to 100

본 발명의 빈랑자 및 감초의 혼합 추출물은 섬유아세포 및 각질형성세포의 증식에 있어서 상승적 효과를 나타내며, 이를 통해 피부 주름을 개선하고 피부 탄력을 증대시키며, 피부 미백 효과도 뛰어나다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

빈랑자 추출물 및 감초 추출물을 유효성분으로 포함하는, 피부 주름 개선 및 피부 미백의 이중 기능성 화장료 조성물.
(a) 유효성분으로서 빈랑자 추출물 및 감초 추출물; 및 (b) 화장품학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 피부 주름 개선 및 피부 미백의 이중 기능성 화장료 조성물.
제 1 항 또는 2 항에 있어서, 상기 빈랑자 추출물 및 감초 추출물 각각의 함량은 상기 화장료 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 0.001-1.0 중량%인 것을 특징으로 하는, 피부 주름 개선 및 피부 미백의 이중 기능성 화장료 조성물.
제 1 항 또는 2 항에 있어서, 상기 빈랑자 추출물 및 감초 추출물은 바이오좀 내에 함유되어 있는 것을 특징으로 하는, 피부 주름 개선 및 피부 미백의 이중 기능성 화장료 조성물.
제 4 항에 있어서, 상기 바이오좀의 함량은 상기 화장료 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 0.05-20 중량%인 것을 특징으로 하는, 피부 주름 개선 및 피부 미백의 이중 기능성 화장료 조성물.
제 4 항에 있어서, 상기 빈랑자 추출물 및 상기 감초 추출물은 상기 바이오좀 총 중량을 기준으로 하여 0.01-5.0 중량%로 배합됨을 특징으로 하는, 피부 주름 개선 및 피부 미백의 이중 기능성 화장료 조성물.
제 4 항에 있어서, 상기 바이오좀은 비이온성 계면활성제 및 글리세린에 결합한 세라마이드를 이용해 제조된 것을 특징으로 하는, 피부 주름 개선 및 피부 미백의 이중 기능성 화장료 조성물.
제 7 항에 있어서, 상기 세라마이드는 다음 화학식 (I)로 표시되는 유사 세라마이드인 것을 특징으로 하는, 피부 주름 개선 및 피부 미백의 이중 기능성 화장료 조성물:

(I)

상기 식에서, X가
인 경우, Z는 -OH이고, Y는 -OH,
또는
이며; Y가
인 경우, Z는 -OH이고, X는 -OH,
또는
이며; Z가
인 경우, Y는 -OH이고, X는 -OH,
또는
이며; 그리고 상기 R은 포화 또는 불포화의 직쇄 또는 분쇄 지방족 탄화수소기를 나타내며; 치환된 경우에는 R은 1개 이상의 수산기 (-OH)를 갖는다.
제 8 항에 있어서, 상기 유사 세라마이드는 다음 화학식 (Ⅱ), (Ⅲ) 또는 (Ⅳ)로 표시되는 화합물인 것을 특징으로 하는, 피부 주름 개선 및 피부 미백의 이중 기능성 화장료 조성물:

(II);

(III); 또는

(IV),

상기 화학식에서, X'은 H 또는 -OH이고; X"은 -OH,
또는
이며; Y'은 -OH,
또는
이고; Y"은 H 또는 -OH이며; Z'은 -OH,
또는
이고; Z"은 H 또는 -OH이며; n은 0 또는 1 내지 47의 정수이다.
제 1 항 또는 2 항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 연고, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는, 피부 주름 개선 및 피부 미백의 이중 기능성 화장료 조성물.