상기와 같은 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따른 점박이응애용 살충 조성물은, 용매를 이용하여 치자에 함유된 성분을 추출하여 얻어진 치자 추출용액이 포함된 조성물로서 점박이응애용 살충제로 사용되는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명에 따른 점박이응애용 살충 조성물은, 용매를 이용하여 치자에 함유된 성분을 추출하여 얻어진 치자 추출용액이 포함된 조성물로서 점박이응애용 살충제로 사용되는 것을 특징으로 한다.
또한 본 발명에 따른 점박이응애용 살충 조성물은, 상기 치자 추출용액은 용매를 이용하여 분획되고 그 분획용액이 점박이응애용 살충제로 사용되는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명에 따른 점박이응애용 살충 조성물은, 상기 치자 추출용액에는 용매를 이용하여 마늘에 함유된 성분을 추출하여 얻어진 마늘 추출용액과 용매를 이용하여 자리공 뿌리에 함유된 성분을 추출하여 얻어진 자리공 추출용액 중 어느 하나 또는 모두가 소정 량으로 첨가되는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명에 따른 점박이응애용 살충 조성물은, 상기 치자 추출용액에는 보조제로서 소정 량의 화이트 카본(White carbon)이 첨가되는 것을 특징으로 한다.
이하에서는 본 발명에 따른 실시예를 참조하여 본 발명에 따른 점박이응애용 살충 조성물을 보다 상세하게 설명하기로 한다.
<실시예1>
1. 치자 추출용액 및 분획물의 제조
(가) 하기의 흐름도를 참조하면 치자 10Kg을 메탄올(MeOH) 100L에 24시간 침지시켜 추출용액을 수득하고, 수득된 추출용액을 진공상태에서 Whatman 용지 No. 1로 필터링한 다음 45℃ 진공상태에서 농축된 치차 추출용액 810g을 얻었다.
Gardenia fructus(10 Kg)
↓
Extracted with MeOH for 24 hrs
↓
Filtered with filter paper(Whatman # 1) under vacuum condition
↓
Filtrate↓Concentrated at 45℃ under vacuum condition
↓
Methanol extract (810g)
(나) 상기 (가)의 과정을 거쳐 수득된 치자 추출용액을 물 5L에 분산시켜 헥산(n-Hexane), 클로로포름(CHCl3), 에틸아세테이트(EtOAc), 부탄올(Bt-OH) 등의 유기용매를 사용하여 용매의 극성을 점차로 높여 가면서 살충성을 가지는 획분을 분리하였다.
2. 치자 추출용액의 분획물의 점박이응애에 대한 살비율 시험
(가) 점박이응애 살충활성 검정은 leaf disk법을 사용하였고 암컷성충의 살비효과는 강낭콩을 2Cm X 2Cm로 잘라 물에 적신 탈지면이 깔린 샤레에 놓고 그 위에 점박이응애 암컷 성충을 30마리씩 접종한 후 30분정도 정착시킨 다음 추출물별로 샤레에서 25cm거리에서 hand spray로 5초 동안 spray한 후 음건시켰다.
(나) 처리한 샤레는 상온에 보관하면서 24시간, 48시간, 72시간 후에 살비율을 조사하였다. 생사 판별은 해부 현미경하에서 붓끝으로 충체를 접촉하여 몸길이 정도를 이동하지 못한 개체를 죽은 것으로 간주하였다.
(다) 성충 살비율에 대한 결과는 분산분석과 Duncan의 다중검정(SAS Institute, 1998)으로 비교하였다.
3. 치자 추출용액의 분획물의 점박이응애에 대한 기피시험
(가) 추출물에 대한 기피시험은 탈지면을 깐 샤레(φ 9cm)에 두 개의 강낭콩 엽절편(2×2cm)을 놓고 한쪽은 약제를 살포하고 다른 쪽은 살포하지 않았다.
(나) 그 다음 점박이응애의 왕래가 자유롭게 두 잎을 붙여 놓고 중앙부위에 점박이응애 성충을 30마리 놓은 후 24시간 후에 서식하고 있는 점박이응애 수를 조사하였다.
4. 치자 주요 생리활성 성분의 점박이응애에 대한 살비율 시험 및 기피시험
(가) 시판되고 있는 치자의 생리활성 성분인 CROCIN, 물 추출 GENIPIN(H2O), 에탄올 추출 GENIPIN(EtOH), GENIPOSIDE, CROCETIN에 대한 살비율 시험 및 기피시험을 상기 2의 과정 및 3의 과정에서와 같은 방법으로 수행하였다.
5. 결과 및 분석
표 1은 치자 추출용액의 용매 분획물의 점박이응애에 대한 살충효과를 정리한 것이다. 표 1을 참조하면, 헥산 층 분획물의 점박이응애에 대한 살충율이 높게 나타났다.
획분 |
살충율(%) |
24시간 후 |
48시간 후 |
72시간 후 |
헥산 층 |
64.4 |
67.6 |
70.5 |
클로로포름 층 |
39.8 |
55.0 |
54.0 |
에틸아세테이트 층 |
21.0 |
24.6 |
26.0 |
부탄올 층 |
37.5 |
40.5 |
43.1 |
수층 |
23.7 |
39.1 |
45.0 |
표 2는 치자의 주요 생리활성 성분의 점박이응애에 대한 살충효과를 정리한 것이다. 표 2를 참조하면 주요 생리활성 물질 중 Genipin 에탄올 추출물이 가장 높은 살충활성을 나타내었다.
성분 |
살충율(%) |
24시간 후 |
48시간 후 |
72시간 후 |
CROCIN |
12.2 |
19.9 |
28.8 |
GENIPIN(H2O) |
5.59 |
13.3 |
18.8 |
GENIPIN(Et-OH) |
51.0 |
77.7 |
83.3 |
GENIPOSIDE |
39.9 |
54.4 |
61.1 |
CROCETIN |
21.1 |
45.6 |
55.7 |
<실시예2>
1. 재료 및 방법.
상기 <실시예1>의 1과정에서 얻은 치자 추출용액에 보존제로서 시판되고 있는 Boric acid, White carbon, Bentonite, Kaolin을 0.1중량% 첨가한 시험구와 치자 추출용액 단독 및 각 보조제 단독의 점박이응애에 대한 대한 살비율 시험을 <실시예1>의 3과정과 같은 방법으로 실시하였다.
2. 결과 및 분석
표 3은 보조제를 첨가한 치자 추출용액의 살비율을 정리한 것이다. 표 3을 참조하면 치자 추출용액에 Boric acid, White carbon, Bentonite, Kaolin의 시판 보존제를 첨가하여 상승효과를 검정한 결과 White carbon 첨가구가 타 첨가구에 비하여 상대적으로 높은 상승효과를 나타내었다.
처리예 |
살비율(%) |
24시간 후 |
48시간 후 |
72시간 후 |
치자추출물 + Boric acid |
62.6 |
75.3 |
79.8 |
치자추출물 + White carbon |
71.3 |
75.9 |
81.9 |
치자추출물 + Bentonite |
66.5 |
74.7 |
78.9 |
치자추출물 + Kaolin |
64.3 |
69.3 |
74.8 |
치자 단독 처리 |
59.8 |
63.3 |
67.5 |
Boric acid 단독 처리 |
9.5 |
0 |
0 |
White carbon 단독처리 |
11.3 |
0 |
0 |
Bentonite 단독처리 |
17.0 |
0 |
0 |
Kaolin 단독처리 |
15.8 |
0 |
0 |
<실시예3>
1. 재료 및 방법.
상기 <실시예1>의 1과정에서 얻은 치자 추출용액에 마늘 추출용액을 1:1의 조성비로 첨가한 조성물, 치자 추출용액 단독 조성물, 마늘 추출용액 단독 조성물, 치자 추출용액에 마늘 추출용액을 1:1의 조성비로 첨가하고 보존제를 0.1중량% 첨가한 조성물 및 보존제 단독 조성물 각각을 물로 10%, 50%, 100%로 희석한 용액 각각의 점박이응애에 대한 살비율 시험과 기피시험을 각각 <실시예1>의 3과정과 4과정과 같은 방법으로 실시하였다.
2. 결과 및 분석
표 4는 치자 추출용액에 마늘 추출용액을 첨가한 조성물 등에 대한 살충효과를 정리한 것이고, 표 5는 치자 추출용액에 마늘 추출용액을 첨가한 조성물 등에 대한 기피효과를 정리한 것이다. 표 4 및 표 5를 참조하면 치자 추출용액을 단독으로 사용하였을 때보다 치자 추출용액에 마늘 추출용액 첨가하여 형성된 혼합 조성물을 사용하였을 때 보다 높은 살충효과를 나타났다.
처리 예 |
희석농도(배) |
살비율(%) |
24시간 후 |
48시간 후 |
72시간 후 |
치자추출물 단독 |
10 |
70.0 |
76.7 |
83.3 |
50 |
65.5 |
81.3 |
84.4 |
100 |
10.3 |
65.5 |
65.5 |
마늘추출물 단독 |
10 |
70.0 |
80.0 |
86.7 |
50 |
50.0 |
57.1 |
53.6 |
100 |
63.3 |
67.9 |
71.4 |
치자추출물 +마늘추출물 (1:1 혼합) |
10 |
96.4 |
96.4 |
96.4 |
50 |
73.1 |
80.8 |
92.9 |
100 |
78.6 |
85.7 |
92.9 |
치자추출물 +마늘추출물 (1:1 혼합) + 보존제(0.1중량%) |
10 |
95.8 |
95.8 |
96.4 |
50 |
68.0 |
90.5 |
92.9 |
100 |
66.7 |
86.2 |
90.5 |
보존제 단독 |
10 |
79.3 |
86.2 |
86.2 |
50 |
70.0 |
73.3 |
73.3 |
100 |
52.0 |
68.0 |
84.0 |
처리 예 |
희석농도(배) |
기피율(%) |
24시간 후 |
48시간 후 |
72시간 후 |
치자추출물 단독 |
10 |
12.5 |
-6.3 |
17.2 |
50 |
44.8 |
-10.3 |
-11.1 |
100 |
46.7 |
0 |
46.7 |
마늘추출물 단독 |
10 |
33.3 |
10.3 |
-3.2 |
50 |
28.6 |
28.6 |
-14.3 |
100 |
60.0 |
53.3 |
0 |
치자추출물 +마늘추출물 (1:1 혼합) |
10 |
33.3 |
-28.6 |
-33.3 |
50 |
30.0 |
20.0 |
20.0 |
100 |
-61.3 |
0 |
0 |
치자추출물 +마늘추출물 (1:1 혼합) + 보존제(0.1중량%) |
10 |
66.7 |
20.0 |
33.3 |
50 |
60.0 |
-20.0 |
44.0 |
100 |
-13.0 |
13.0 |
21.7 |
보존제 단독 |
10 |
48.1 |
-9.1 |
-9.1 |
50 |
-51.7 |
10.3 |
4.0 |
100 |
37.9 |
10.3 |
10.3 |
<실시예3>
1. 재료 및 방법.
상기 <실시예1>의 1과정에서 얻은 치자 추출용액 25중량%에 마늘 추출용액 25% 및 자리공뿌리 추출용액 20중량%를 첨가하고 Boric acid 또는 White carbon을 첨가한 경우와 기타 대조구 각각의 점박이응애에 대한 살비율 시험을 각각 <실시예1>의 3과정과 같은 방법으로 실시하였다.
2. 결과 및 분석
표 6은 치자 추출용액에 마늘 추출용액, 자리공뿌리 추출용액 및 보존제가 첨가된 조성물 등에 대한 살충효과를 정리한 것이다. 표 6을 참조하면, 치자 추출용액에 마늘 추출용액, 자리공뿌리 추출용액 및 White carbon을 보조제로 첨가한 시험구에서 98.9%의 높은 살충효과를 나타내었다. 또한 이들 혼합 추출용액 조성물의 경우 24시간부터 72시간까지 일정한 살충효과를 나타내어 그 안정성이 확보되는 것으로 나타났다.
처리 예 |
살비율(%) |
24시간 후 |
48시간 후 |
72시간 후 |
치자추출물 +마늘추출물 +Boric acid |
84.4 |
91.1 |
92.2 |
치자추출물 +마늘추출물 +White carbon |
88.9 |
93.3 |
93.3 |
치자추출물 +마늘추출물 +자리공추출물 |
95.6 |
95.6 |
95.6 |
치자추출물 +마늘추출물 +자리공추출물 + Boric acid |
96.7 |
96.7 |
96.7 |
치자추출물 +마늘추출물 +자리공추출물 + White carbon |
98.9 |
98.9 |
98.9 |