상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 (A) 지베레린 A1, A3, A4, A
7 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 지베레린을 디메틸설폭사이드(Dimethyl sulfoxide), 디메틸 포름아미드(Dimethyl formamide), 테트라하이드로퓨란(Tetrahydrofuran) 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매에 용해시켜 지베레린 용액을 제조하는 단계; (B) 상기 지베레린 용액을 라노린(Lanolin), 라노린 유도체, 페트로라탐(Petrolatum), 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 액상의 도포물질과 균일하게 혼합하는 단계; 및 (C) 상기 지베레린 용액과 도포물질의 혼합물을 정량으로 용기에 충진시키는 충진 단계를 포함하는 지베레린 도포제 제조방법을 제공한다.
본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 지베레린 도포제를 제공한다.
본 발명은 또한, 지베레린 A1, A3, A4, A7 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 지베레린 0.1 내지 10 중량%를 유효성분으로 포함하고, 특수 용매로 디메틸설폭사이드(Dimethyl sulfoxide, DMSO), 디메틸 포름아미드(Dimethyl formamide, DMF), 테트라하이드로퓨란(Tetrahydrofuran, THF) 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매 0.2 내지 30 중량%와 특수 도포물질로 라노린(Lanolin), 라노린 유도체, 페트로라탐(Petrolatum), 및 이들의 혼합물로 이 루어진 군으로부터 선택된 액상의 도포물질 잔부를 부성분으로 포함하는 지베레린 도포제 조성물을 제공한다.
이하 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 발명의 지베레린 도포제는 식물생장이나 숙기촉진에 부작용이 없는 특수한 용매를 저량으로 사용하여 용해된 지베레린을 라노린(Lanolin : CAS No. : 8006-54-0), 라노린 유도체, 페트로라탐(Petrolatum : CAS No. : 8009-03-8) 또는 이들의 혼합물과 같은 도포물질에 용해시키거나 균일하게 유화시켜 제조되는 것을 특징으로 한다.
본 발명자는 DMSO, DMF 또는 THF를 지베레린 용매로 사용할 경우, 상온에서 지베레린 도포제의 물성 중 특히, 녹는 온도에 큰 변화 없이 이들 용매를 사용하지 않은 도포제보다 도포가 용이하거나 비등하며 또 약해가 없다는 사실을 발견하고 본 발명을 완성하기에 이르렀다.
본 발명의 지베레린 도포제 제조방법을 보다 상세히 설명하면, 먼저 (A) 지베레린 A1, A3, A4, A7 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 지베레린을 디메틸설폭사이드(Dimethyl sulfoxide), 디메틸 포름아미드(Dimethyl formamide), 테트라하이드로퓨란(Tetrahydrofuran) 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매에 용해시켜 지베레린 용액을 제조한다. 또한, 상기 용매로 메틸 아세톤(Methyl acetone)도 사용가능하다.
상기 지베레린 A1, A3, A4, A7 또는 이들의 혼합물은 특히 과실의 생육촉진에 큰 영향을 미치며 특히, 신고배의 경우 지베레린 A4(CAS No: 468-44-0) 또는 A
4+7 이 바람직하다.
이러한 지베레린의 함량은 지베레린 도포제 중 0.1 중량% 내지 10 중량%가 바람직하고, 특히 신고배의 경우 0.21 중량% 내지 6 중량%가 더욱 바람직하고, 다른 배의 경우 0.31 중량% 내지 6 중량%가 바람직하다. 상기 지베레린의 함량이 0.1 중량% 미만이면 특히 배의 경우, 배의 비대 및 숙기촉진의 효과를 달성할 수가 없고, 10 중량%를 초과하면 배의 비대 및 숙기촉진의 효과가 지베레린의 함량에 단순비례하여 증가하지 않아 경제적이지 못하다는 문제점이 있다.
본 발명의 지베레린 도포제에 사용되는 용매는 디메틸설폭사이드(Dimethyl sulfoxide, DMSO), 디메틸 포름아미드(Dimethyl formamide, DMF), 테트라하이드로퓨란(Tetrahydrofuran, THF) 또는 이들의 혼합물 등이 바람직하다. 상기 용매 중 DMSO 는 특히 사람이나 가축에 대하여 독성이 매우 낮은 물질로서 본 발명의 지베레린 도포제 중 용매로 가장 바람직하게 사용될 수 있다. 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 누구나 상기 용매를 혼합할 경우 최적의 성분과 함량을 선택할 수 있을 것이다.
이러한 용매의 함량은 지베레린 도포제 중 0.2 중량% 내지 30 중량%가 바람직하다. 용매의 함량이 0.2 중량% 미만이면 지베레린이 균일하게 분포될 수 없다는 문제점이 있고, 30 중량%를 초과하면 실제 도포제 제조시 그 점도가 낮아 흘러 내릴 수 있어 적용상의 문제점이 있어 바람직하지 않다.
지베레린 용액을 제조한 다음 (B) 상기 지베레린 용액을 라노린(Lanolin), 라노린 유도체, 페트로라탐(Petrolatum), 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 액상의 도포물질과 균일하게 혼합하는 혼합공정을 수행한다. 또한 상기 도포물질로 폴리에틸렌 글리콜 에테르(Polyethylene glycol ether)도 사용가능하리라 생각된다. 이때 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 누구나 상기 도포물질을 두 가지 이상 혼합할 경우 최적의 성분과 함량을 선택할 수 있을 것이다.
앞서 제조한 지베레린 용액을 액상의 라노린(Lanolin), 라노린 유도체, 페트로라탐, 또는 이들의 혼합물 등에 혼합한 후 상온으로 온도를 낮추면 식물에 도포하기 쉬운 연고와 같은 페이스트(paste) 상태가 된다.
이때 상기 라노린 유도체로는 라노린 왁스(Lanolin wax), 아세틸레이티드 라노린(Acetylated lanolin), 하이드록실레이티드 라노린(Hydroxylated lanolin), 이소프로필 라놀레이트(Isopropyl lanolate), 하이드로지네이티드 라노린(Hydrogenated lanolin) 등이 바람직하게 사용될 수 있다.
지베레린 용액을 액상의 도포물질과 균일하게 혼합한 다음 (C) 상기 지베레린 용액과 도포물질의 혼합물을 액상상태에서 용기에 충진시킨다. 이때 상기 혼합물이 페이스트 상태로 유지되게 하기 위하여 용기를 밀봉하는 것이 바람직하다.
본 발명은 또한 상기 방법으로 제조된 지베레린 도포제를 제공한다. 이 도포제가 실제 배의 생육촉진을 위하여 사용될 경우 도포 시기는 배의 만개 후 20 일 내지 50 일 사이가 바람직하다.
또한, 상기 방법으로 제조된 지베레린 도포제가 실제 배의 생육촉진을 위하여 사용될 경우, 그 사용량은 배 과경당 10 mg 내지 75 mg 이 바람직하고, 신고배의 경우 20 mg 내지 40 mg 이 더욱 바람직하고, 신고배 이외의 배의 경우 10 mg 내지 25 mg 이 더욱 바람직하다. 상기 도포제의 사용량이 배 과경당 10 mg 미만이면 도포된 약제의 양이 너무 적어 과경에 약제를 고르게 도포할 수 없어 기형과가 생길 수가 있고, 사용량이 75 mg 을 초과하면 도포된 약제의 약액이 흘러내려 오히려 약해를 유발시키고 고르게 도포되지 않아 기형과가 생길 수 있다는 문제점이 있다.
본 발명은 또한 지베레린 0.1 내지 10 중량%를 유효성분으로 포함하고, 특수 용매 0.2 내지 30 중량%와 특수 도포물질 잔부를 부성분으로 포함하는 지베레린 도포제 조성물을 제공한다.
이상 살펴본 바와 같이, 본 발명의 지베레린 도포제는 약해를 유발하지 않는 특수 용매를 부성분으로 포함하고 있어 지베레린의 분포가 균일하고, 제조하기가 용이하며 에틸알코올이나 유화제를 포함하고 있지 않아 부작용이 적으며, 숙기촉진, 과실비대, 숙기지연, 생장촉진, 개화촉진, 가지유인 등 여러 종류의 생장조절에 효과가 있고 농작물 및 산림작물의 생산성을 높이고 품질을 높이며, 농작물의 조기 수확으로 농민의 수익을 증대시키는 효과가 있고 또한, 현재 우리나라에서 널리 사용되고 있는 수입 지베레린 도포제를 국내에서 직접 제조할 수 있어 수입대체 효과도 있다.
이하 본 발명의 실험예를 살펴본다.
(실험예 1)
도포물질 처리시 배의 비대효과
하기 표 1 은 지베레린 A4+7 2.4 중량%를 도포물질에 직접 혼합용해시켜 신고배 과경에 과일당 25 mg 을 처리한 결과와 지베레린이나 라노린 등 도포물질을 전혀 처리하지 않은 결과를 함께 나타낸다.
처리 |
처리시 횡경(A)2)(mm) |
55일 후 횡경(B)2)(mm) |
생장량 (B-A) |
단위생장량 (B-A)/A |
약해3)
|
지베레린+라노린 |
21.2 |
64.1 |
42.9 |
2.02 |
0 |
지베레린+페트로라탐 |
21.4 |
57.9 |
36.5 |
1.70 |
0 |
지베레린+라노린+페트로라탐 |
20.9 |
57.8 |
36.9 |
1.76 |
0 |
라노린 |
20.2 |
51.9 |
31.7 |
1.56 |
0 |
무처리 |
20.8 |
51.5 |
30.8 |
1.48 |
0 |
1) 지베레린 A4+7을 2.4 중량%로 도포물질에 혼합시켜 용해시킨 후 신고배에 과경당 25 mg 만개 35일 후 도포처리
2) 반복구당 8 과일씩 3 반복으로 처리한 과일의 횡경 평균치, 도포제 처리 55 일 후의 측정치임.
3) 약해는 약액이 흘러내려 과실 표피를 태우는 정도를 0 에서 5 까지로 약해가 0 이란 약해가 없음을 뜻하고, 약해가 5 란 약액이 흘러내려 꼭지 부분이 모두 타서 부패가 된 상태.
상기 표 1 에 나타난 바와 같이, 도포물질 라노린은 신고배 과실비대에 부작용이 없었다. 도포물질로는 라노린에 지베레린을 용해한 도포제를 처리한 경우 배의 비대효과가 페트로라탐에 지베레린을 용해한 도포제보다 더 우수하고, 또 라노 린과 페트로라탐을 1:1 로 처리한 경우보다 라노린을 단독으로 처리한 경우 배의 비대효과가 더 우수함을 알 수 있었다.
(실험예 2)
도포물질, 라노린 유도체들의 효능 비교
1)
하기 표 2 는 용매 없이 지베레린 A4 1.6 중량%를 라노린 유도체들에 혼합용해한 후 과경당 20 mg 도포한 결과를 나타낸다.
처리 |
횡경(mm)2)
|
약해3)
|
이소프로필 라노에이트 |
102.5 |
0 |
하이드로지네이티드 라노린 |
102.8 |
0 |
라노린 왁스 |
104.1 |
0 |
라노린 |
103.1 |
0 |
무처리 |
92.6 |
0 |
1) 지베레린 A4를 1.6 중량%로 도포물질에 혼합하여 용해시킨 후 신고배에 과경당 20 mg 씩 만개 42 일 후에 도포처리.
2) 반복구당 8 과일씩 6 반복으로 처리한 과일 횡경의 평균치로 처리 92 일 후의 평균치임.
상기 표 2에 나타난 바와 같이, 라노린 유도체들은 라노린과 거의 대등한 과일비대효과를 나타냄을 알 수 있었다.
(실험예 3)
용매를 이용하여 지베레린을 라노린에 분포시킨 경우 도포제의 물리상태
하기 표 3 은 지베레린을 용매에 분포시킨 결과에 따른 도포제의 물리상태를 나타낸다.
용매 |
용매 함량 (중량%) |
지베레린 함량 (중량%) |
지베레린 분포상태 (55 ℃) |
물리상태 (25 ℃) |
DMSO |
5 |
GA4+7 2.6 |
유화상태 |
페이스트 |
DMSO |
5 |
GA41.6 |
유화상태 |
페이스트 |
DMSO |
5 |
0 |
용액상태 |
페이스트 |
DMF |
5 |
GA4+7 2.5 |
용액상태 |
페이스트 |
THF |
5 |
GA4+7 2.5 |
용액상태 |
페이스트 |
본 발명에 사용되는 도포물질은 지베레린을 96 시간 안에 1% 용해시킬 수 있으나 더 이상 용해시키기가 쉽지가 않다. 그러나 상기 표 3 에 나타난 바와 같이, 용매를 사용하면 다량의 지베레린을 쉽게 도포물질과 혼합시킬 수 있고 도포제의 물리성은 페이스트 상태로 크게 변하지 않음을 알 수 있었다.
(실험예 4)
DMSO 를 용매로 이용하여 제조된 지베레린 도포제의 균일성
용매 |
용매함량 |
시료 |
GA4+7
1)
분석치(중량%) |
DMSO |
3.3 중량% |
1 |
2.62 |
2 |
2.67 |
3 |
2.64 |
4 |
2.66 |
5 |
2.67 |
평균 |
2.65 |
표준편차 |
0.022 |
1) 지베레린 A4+7 도포제 300 g 을 제조 후 임의로 5 개의 시료를 채취하여 HPLC 로 지베레린 함량을 분석하였음.
상기 표 4 에 나타난 바와 같이, 지베레린을 용매에 용해시켜 도포제를 제조 하면 지베레린이 도포물질인 라노린에 균일하게 분포됨을 알 수 있었다. 표준편차가 0.022% 란 샘풀들의 95% 가 지베레린이 균일하게 분포된 정도가 98.4%로 이는 HPLC 분석오차 ± 2% 안에 있으므로 통계적으로 균일하다고 할 수 있다.
(실험예 5)
본 발명 도포제의 과실비대 효과
1) 하기 표 5 는 본 발명의 방법과 종래의 방법의 방법으로 제조된 지베레린 도포제를 과경 당 25 mg 씩 신고배에 처리한 경우의 과실비대효과를 나타낸다.
제조방법 |
지베레린 함량 |
횡경(mm) |
약해 |
1 |
GA4 1.6 중량% |
104.3 |
0 |
2 |
GA4 1.6 중량% |
103.1 |
0 |
3 |
GA4 1.6 중량% |
103.6 |
0 |
4 |
0 |
94.5 |
0 |
5 |
0 |
92.6 |
0 |
제조방법 1: 지베레린 A4 1.6 중량%로 소량의 DMSO 에 용해(도포제에서의 DMSO 함량: 5 중량%)한 후 55 ℃의 라노린 93.4 중량%에 유화시켜 제조하였음.
제조방법 2: 지베레린 A4 를 미세하게 분쇄한 후 1.6 중량%의 함량으로 55 ℃의 라노린에 혼합하여 72 시간 용해 후 페이스트 제조하였음.
제조방법 3: 지베레린 A4 를 3.2 중량%로 에틸알코올에 용해(도포제에서 에틸알코올 함량: 15 중량%)한 후 55 ℃의 라노린에 혼합하여 지베레린 용액을 라노린에 용해시킨 후 다시 55 ℃ 라노린으로 지베레린 A4 가 1.6 중량%가 되도록 희석한 후 72 시간 동안 에틸알코올을 증발시켜 제조하였음.
제조방법 4: 제조방법 1에서 지베레린 없이 DMSO 5 중량%를 라노린에 용해 후 페이스트로 제조하였음.
제조방법 5: 지베레린 및 용매 무처리군임
2) 하기 표 6 는 본 발명의 방법과 종래의 방법의 방법으로 제조된 지베레린 도포제를 과경 당 50 mg 씩 신고배에 처리한 경우의 과실비대효과를 나타낸다.
제조방법 |
지베레린 함량 |
단위/생장량(mm/일×10㎝) |
무게(g/개) |
6 |
GA4+7 2.6 중량% |
2.59 |
706.6 |
7 |
GA4+7 2.46 중량% |
2.56 |
693.9 |
8 |
GA4+7 2.5 중량% |
2.47 |
712.8 |
9 |
0 |
1.57 |
473.2 |
10 |
0 |
1.42 |
450.4 |
11 |
0 |
1.50 |
448.3 |
12 |
0 |
1.40 |
444.4 |
제조방법 6: 지베레린 A4+7 2.6 중량%로 338g의 DMSO에 용해(도포제에서의 DMSO 함량: 4.5 중량%)한 후 55℃의 7.5 kg의 라노린에 유화시켜 제조하였음.
제조방법 7: 272 mg의 92.5% GA4+7(GA4+7 2.46 중량%)을 0.36 g의 DMF(도포제에서의 DMF 함량: 3.6 중량%)에 녹인 후 55℃의 라노린 9.5 g을 첨가하여 혼합한 후 모든 성분들이 녹은 후 도포제로 제조하였음.
제조방법 8: 272 mg의 92.5% GA4+7(GA4+7 2.5 중량%)을 0.5 g의 THF(도포제에서의 THF 함량: 5 중량%)에 녹인 후 55℃의 라노린 9.3 g을 첨가하여 혼합한 후 모든 성분들이 서로 완전히 용해된 후 도포제로 제조하였음.
제조방법 9: GA4+7 없이 DMSO가 5 중량%가 되게 55℃의 라노린에 용해한 후 도포제로 제조하였음.
제조방법 10: GA4+7 없이 DMF가 5 중량%가 되게 55℃의 라노린에 용해한 후 도포제로 제조하였음.
제조방법 11: GA4+7 없이 THF가 5 중량%가 되게 55℃의 라노린에 용해한 후 도포제로 제조하였음.
제조방법 12: 지베레린 및 용매 무처리군임
상기 제조방법 1에서와 같이, DMSO 를 용매로 사용하고 라노린을 도포물질로 하여 제조된 지베레린 도포제의 신고배에 대한 비대효과는 다른 방법으로 제조된 지베레린 도포제들에 비하여 더 우수하거나 비등하였다(표 5 및 표 6 참조). 또 라노린에 DMSO 5 중량%로 제조된 도포제 베이스 물질은 무처리에 비하여 우수하거나 비등하였으므로 DMSO 나 라노린은 사용되어진 양과 농도에서 배의 숙기촉진 및 과실비대에 부작용이 없다.