KR100556683B1

KR100556683B1 - 약효가 증강된 파낙스속 식물의 가공 추출물 및 상기추출물로부터 분리된 사포닌 유도체를 함유하는 위장관질환의 예방 및 치료를 위한 조성물

Info

Publication number: KR100556683B1
Application number: KR1020020085955A
Authority: KR
Inventors: 김동현; 배은아; 한명주; 추민경; 박은경; 박정일
Original assignee: 주식회사 진생사이언스
Priority date: 2002-04-08
Filing date: 2002-12-28
Publication date: 2006-03-07
Also published as: KR20030080999A

Abstract

본 발명은 약효가 증강된 파낙스(Panax)속 식물의 가공 추출물을 함유한 위장관 관련 질환의 예방 및 치료를 위한 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 의한 파낙스속 식물의 가공 추출물 및 분획물 및 화합물들은 위장관 질환의 원인균인 헬리코박터 증식 억제 효과뿐만 아니라 H⁺/K⁺ATPase 에 대한 억제효과를 나타내므로 위장관 관련 질환의 예방 및 치료에 유용한 약제 및 건강기능성식품으로 이용할 수 있다.

파낙스(Panax)속, 위장관 질환, 추출물, 조성물, 약제, 건강기능성식품.

Description

약효가 증강된 파낙스속 식물의 가공 추출물 및 상기 추출물로부터 분리된 사포닌 유도체를 함유하는 위장관 질환의 예방 및 치료를 위한 조성물 {Composition containing an extract of processed Panax Species plant or saponin derivatives therefrom for preventing and treating a gastrointestinal disease}

본 발명은 위장관 질환의 예방 및 치료에 효과적인 파낙스속 식물의 가공 추출물을 함유한 조성물에 관한 것이다.

파낙스(Panax)속 식물은 식물 분류학상 오가과(Araliaceae)에 속하는 다년생 숙근초로서 지구상에 십여 종이 알려져 있으며, 대표적인 종으로 (1) 고려 인삼(Panax ginseng)은 아시아 극동 지역(북위 33 ~ 48°한국, 북만주, 러시아 일부)에 자생하고 약효가 매우 우수하며, (2) 미국삼(Panax quinquefolia)은 미국, 캐나다에 자생 및 재배하며, (3) 전칠삼(삼칠, Panax notoginseng)은 중국 운남성 동남부로부터 광서성 서남부 지역에서 야생 또는 재배하며, (4) 죽절삼(Panax japonica)은 일본, 중국 서남부, 네팔에 이르기까지 분포하며, (5) 삼엽삼 (Panax trifolia)은 북미 동부에 분포하며, (6) 히말라야삼 (Panax pseudoginseng)은 네팔에 분포하며, (7) 베트남삼 (Panax vietnamensis)은 베트남에 분포한다. (고려삼의 이해, 9쪽, 고려인삼학회, 1995년; Advances in Ginseng Research, 127-137쪽, 고려인삼학회, 1998). 기타 파낙스속 식물로는 파낙스 엘레가티오르(Panax elegatior), 파낙스 완지아누스(Panax wangianus), 파낙스 비핀라티푸스(Panax bipinratifidus) 등이 있다.

이러한 파낙스속 식물은 다양한 생리활성을 갖고 있기 때문에 약재로 사용되는 것이 많다. 특히 고려인삼(P. ginseng)은 예로부터 귀중한 보약으로 사용되어 오고 있다.

지금까지 많은 약리실험을 통해 인삼은 스트레스에 대한 생체의 비특이적 저항성을 강화시키고 우리 몸의 항상성유지 작용을 갖고 있음이 밝혀졌다. 그 외에 고혈압의 개선, 인슐린 작용증강, 당뇨마우스에서의 혈당강하효과, 흰쥐의 간 RNA 합성, 단백질 합성, 당 및 지질대사 촉진효과, 항암효과 등이 있음이 밝혀졌다. 실제 인삼은 강장, 강정, 진정, 조혈 및 항고혈압 등에 효과를 보이는 것으로 알려져 있다 (고려삼의 이해, 고려인삼학회, 1995년). 한편, 미국삼(또는 화기삼)은 고려인삼의 대체품으로 비교적 근래에 들어 고려인삼과 비슷한 용도로 사용되고 있다.

이러한 파낙스속 식물에서 가장 중요한 성분은 사포닌이다. 파낙스속 식물에 들어 있는 사포닌 성분은 다른 식물의 사포닌과는 다른 담마란(Dammarane) 골격에 1-4개의 당이 결합되어 있다. 특히 고려인삼에는 30여종의 사포닌 성분이 알려져 있는데 이 중 함량이 높은 것은 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd, Rg1, Re 등이다. 이러한 사포닌 성분들은 다양한 약효를 나타내는데 그 구조에 따라 약효의 종류와 강도가 매우 다르다.

최근 들어 인삼을 가공하여 인삼의 약효나 유용성을 변화시키려는 노력이 시도되고 있다. 특히 이러한 가공공정에서 사포닌의 구조가 변하여 그 약효가 변화될 수 있다.

예를 들면, 대한민국 특허공고 제 2000-058997호(2000. 10. 6)에는 황산 또는 염산을 이용하여 흡수되기 쉬운 산당화 인삼을 만드는 제조방법이 개시되어 있다.

또한 대한민국 특허공고 제 1996-017670호 (1996. 5. 23)에는 약효가 증강된 가공인삼을 제조하기 위하여 인삼을 높은 온도에서 가공하여 종전 인삼과는 달리 진세노사이드 Rg3와 Rg5가 다량 함유된 인삼 조성물을 제조하는 방법이 개시되어 있다.

상술한 종래기술은 인삼을 산처리 또는 열처리하여 저분자화된 인삼조성물 또는 진세노시드 Rg3과 Rg5가 다량 함유된 인삼을 제조하는 방법에 관한 것으로 특정한 사포닌의 대사산물을 다량 얻기 위한 방법은 아니다.

한편, 대한민국 특허공고 제 1996-004217호(1996. 2. 22)에서는 장내세균을 이용하여 인삼의 사포닌을 이용하여 화합물 K를 중심으로 한 대사체들을 대량 생산할 수 있는 제조방법을 개시하고 있다.

대한민국 특허공고 제1980-004291호 (유산균 인삼음료의 제조방법)(1980. 11. 08)에서는 인삼의 고유 향기 성분을 분리하고 효소 분해하여 유기 질소 농도가 0.2 ~ 0.8%, 포도당의 생성 함유량이 유산균 발효에 적합한 3% 이상이 되었을 때, 유기산으로 pH 3.8 ~ 4.8로 조절한 후, 불용성 고분자 단백질과 섬유질을 제거하고 용출액에 유산균을 배양시킨 다음, 이에 인삼 고유의 향기 성분을 첨가하는 방법이 개시되어 있다.

대한민국 특허공고 제1988-012502호(인삼을 이용한 활성 유산균 음료수 제조방법)(1988. 09. 28)에는 인삼을 처리한 생즙이나 추출물에 또는 인삼을 증자 처리하거나 증자 처리된 이화물에 효소를 작용시키고 이어서 유산균을 배양시킨 후 탈지 우유, 탈지 분유, 탄산수, 비타민류를 첨가 혼합하여 영양가가 높은 인삼 유산균의 탄산수성 음료수와 빙과류를 제조하는 방법이 개시되어 있다.

대한민국 특허공고 제 1996-23750호(1996. 06. 26)에는 마쇄시켜 0.1 ∼ 0.6 cm 미립상으로 형성시킨 인삼 또는 수삼을 0.001 ∼ 2.39 중량% 첨가하는 공정 및 추가로 물, 비타민, 당류, 유기산류, 과실류, 곡류, 채소류로 구성된 군으로부터 선택된 1종 또는 2종 이상의 성분을 첨가하는 공정을 포함하는 인삼 또는 수삼을 함유하는 발효유 조성물의 제조 방법이 개시되어 있다.

상술한 방법들은 기존의 발효유 혹은 유산균 음료 등에 인삼 향기 성분을 추가하거나 인삼 가루 등을 추가함으로써 인삼 성분이 가미된 조성물을 얻을 수 있었다.

그러나, 상기 인삼 함유 조성물들은 단순히 인삼 성분을 첨가한 음료용 조성물에 불과하거나 인삼 사포닌의 대사체 화합물(compound K, IH-901)을 대량 생산하 도록 하는 방법만을 개시하고 있을 뿐이다.

본 발명자는 파낙스속 식물을 가열처리 또는 산처리한 후 연속하여 유산균 또는 장내세균 처리와 같은 특수처리를 통하여 제조된 파낙스속 식물 추출물이 위장관 관련질환에 치료효과가 탁월함을 발견하고 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 헬리코박터 피로리균 증식 억제효과 및 H⁺/K⁺ ATPase 억제효과가 탁월하게 향상된 가공처리 파낙스속 식물 추출물을 함유하는 위장관 관련질환의 예방 및 치료용 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적에 따라, 본 발명은 헬리코박터 피로리균 증식 억제효과 및 H⁺/K⁺ ATPase 억제효과를 갖는 가공처리된 파낙스(Panax) 속 식물 추출물을 함유하는 위장관 관련 질환의 예방 및 치료용 조성물을 제공하는 것이다.

상기 추출물은 구성 사포닌의 성분비 수치((진세노사이드 Rk2, Rh3, PPD 및 DHPPD의 함량 합)/(진세노사이드 Rg3, Rg5 및 Rk1의 함량 합))가 0.1 이상, 바람직하게는 0.2 이상, 더욱 바람직하게는 0.5 이상인 파낙스속 식물의 추출물이다.

상기에서 PPD는 (20S)-프로토파낙사디올(protopanaxadiol) 및 (20R)-프로토파낙사디올, DHPPD는 20(21)-디히드로프로토파낙사디올(dehydroprotopanaxadiol) 및 20(22)-디히드로프로토파낙사디올을 포함하는 의미이다.

또한 상기 추출물은 파낙스속 식물 원재료를 산처리, 가열처리 또는 이들의 조합을 통하여 얻어진 추출액에 유산균 또는 장내세균을 연속 처리함을 특징으로 하는 특수 가공처리된 파낙스속 식물 추출물이다.

본 발명의 파낙스속 식물 원재료는 그 제한이 없으나, 구체적으로는 담마란 계열(Dammarane type) 사포닌을 함유하고 있는 파낙스속 식물인 고려인삼 (Panax ginseng), 미국삼 (Panax quinquefolia), 전칠삼 (Panax notoginseng), 죽절삼 (Panax japonica), 삼엽삼 (Panax trifolia), 히말라야삼 (Panax pseudoginseng), 베트남삼 (Panax vietnamensis), 또는 파낙스 엘레가티오르(Panax elegatior), 파낙스 완지아누스(Panax wangianus), 파낙스 비핀라티피두스(Panax bipinratifidus), 파낙스 안구스티폴리움(Panax angustifolium) 등이 가능하며, 그 뿌리, 줄기, 잎, 뇌두, 꽃, 열매 및 이들의 조직 배양물 등 담마란 골격을 갖는 사포닌 성분을 함유하고 있는 파낙스속 식물이 모두 원재료로서 가능하며, 상기한 원재료는 파낙스속 식물 및 파낙스속 식물 가공품 및 부산물 등을 포함하며, 바람직하게는 수삼, 홍삼, 백삼, 미삼, 인삼잎, 인삼 엑기스 및 분말 형태의 인삼을 포함한다.

또한 본 발명은 상기 가공처리된 파낙스속 식물 추출물로부터 분리된 사포닌 유도체를 유효성분으로 하는 위장관 관련 질환의 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.

상기 사포닌 유도체는 파낙시트리올, 파낙시돌, 파낙시놀, 진세노시드 Rc, 진세노시드 Rb1, Rb2, 20(R)-진세노시드 Rh2, 20(R)-프로토파낙사디올 , 20(S)-진 세노시드 Rh2, 20(S)-프로토파낙사디올, 20(S)-진세노시드 Rh1, 20(S)-프로토파낙사트리올 등을 포함한다.

이하 구체적으로, 본 발명의 특수 가공 처리된 파낙스속 식물 추출물의 제조공정을 설명하면 하기와 같다.

(1) 산처리 공정

파낙스속 식물 원재료에 약 1 내지 50배 중량/부피의 0.01 내지 50%, 바람직하게는 0.1 내지 10%의 산성분, 바람직하게는 초산, 구연산, 젖산 또는 산미를 갖는 식품(예: 오미자 등)을 가하여 20 내지 80℃, 바람직하게는 40 내지 70℃의 배양온도에서, 1시간 내지 2일간, 바람직하게는 3시간 내지 12시간 배양한다.

이 배양물을 정제분리하기 위하여 선택적으로 이 배양물에 유기용매, 바람직하게는 부탄올, 메탄올, 에테르, 에틸아세테이트로부터 선택된 유기용매를 가하여 추출하는 용매 추출법을 통하여 추출하고 이 추출액을 염기로 중화시켜 화학적 산처리된 파낙스속 식물 추출액을 제조한다.

상기한 파낙스속 식물 원재료는 파낙스속 식물, 파낙스속 식물의 가공품 및 부산물 등을 포함하며, 바람직하게는 고려인삼 (Panax ginseng), 미국삼 (Panax quinquefolia), 전칠삼 (Panax notoginseng), 죽절삼 (Panax japonica), 삼엽삼 (Panax trifolia), 히말라야삼 (Panax pseudoginseng), 또는 베트남삼 (Panax vietnamensis), 또는 파낙스 엘레가티오르(Panax elegatior), 파낙스 완지아누스(Panax wangianus), 파낙스 비핀라티피두스(Panax bipinratifidus), 파낙스 안구스티폴리움(Panax angustifolium)의 뿌리, 줄기, 잎, 꽃, 열매, 뇌두, 이들의 조직 배양물, 또는 이들의 추출물을 포함한다.

(2) 가열처리 공정

본 발명에서 파낙스속 식물의 고온 가열처리는 110 내지 180℃에서 0.5 내지 20시간, 바람직하게는 110 내지 140℃에서 2 내지 5시간 동안 수행한다. 가열시간은 가열온도에 따라 달라지는데 낮은 온도에서는 오랜 시간 동안 가열해야만 하며 높은 온도에서는 비교적 짧은 시간만 가열하여도 된다. 이때 가열은 뜨거운 공기나 수증기, 질소, 헬륨, 이산화탄소, 산소 또는 이들의 혼합기체를 이용하여 수행하며, 효율을 높이기 위하여 가열멸균기와 같은 밀폐된 용기내에서 행하는 것이 바람직하다. 필요에 따라 용기내에 소량의 물을 넣어주거나, 파낙스속 식물 자체를 물에 침지시켜 밀폐된 용기에서 가열하는 것이 바람직할 수도 있다. 가열처리된 파낙스속 식물을 물, 메탄올, 에탄올, 또는 이들의 혼합용매로 추출하여 열처리 추출물을 얻는다. 필요에 따라 이 추출물은 더 정제할 수 있다. 즉, 추출물에 부탄올, 에틸아세테이트, 에탄올과 같은 유기용매를 넣고 추출하여 부분 정제된 열처리 추출물을 얻을 수 있다.

(3) 생물 전환 공정(Bioconversion Process)

상기 (1)의 산처리 또는 (2)의 가열처리에 의하여 얻은 파낙스속 식물 추출액에 유산균 또는 장내 세균을 가하여 8시간 내지 8일, 바람직하게는 24시간 내지 3일 동안, 20 내지 50℃, 바람직하게는 25 내지 40℃의 배양온도에서 배양하여 균주 처리된 파낙스속 식물 추출액을 얻는다.

이와 같은 목적으로 사용될 수 있는 유산균으로는 사포닌을 대사시켜 생물 전환체인 화합물 K 나 진세노이드 Rh2을 생성시킬 수 있는 것이면 가능하고, 진세노사이드 Rg3, Rg5, Rk1을 대사시켜 진세노사이드 Rh2, Rh3, Rk2, 프로토파낙사디올 (PPD), 20-디히드로프로토파낙사디올(DHPPD)을 생성시킬 수 있는 것이면 어느 것이나 가능하며, 바람직하게는 클로스트리디움 부티리쿰 (Clostridium butyricum), 비피도박테리움 (Bifidobacterium)속 유산균 또는 락토바실러스(Lactobacillus)속 유산균, 좀더 바람직하게는 비피도박테리움 인판티스(Bifidobacterium infantis), 비피도박테리움 비피둠 (Bifidobacterium bifidum), 락토바실러스 락티스(Lactobacillus lactis), 클로스트리디움 부티리쿰(Clostridium butyricum), 비피도박테리움 K-103, 비피도박테리움 K-506, 비피도박테리움 K-513, 비피도박테리움 K-525(Arch. Pharm. Res., 21, p54-61, 1988) 유산균, 비피도 박테리움 KK-1(기탁번호 : KCCM 10364), 비피도박테리움 KK-2 (기탁번호 : KCCM 10365) 중에서 선택된 하나 또는 이들의 혼합 균주를 사용할 수 있다.

이와 같은 목적으로 사용될 수 있는 장내 세균도 사포닌을 대사시켜 생물전환체인 화합물 K 나 진세노이드 Rh2을 생성시킬 수 있는 것이면 가능하고, 역시 파낙스속 식물 사포닌 중, 진세노사이드 Rg3, Rg5, Rk1을 대사시켜 진세노사이드 Rh2, Rh3, Rk2, 프로토파낙사디올, 20-디히드로프로토파낙사디올을 생성시킬 수 있는 것이면 어느 것이나 가능하며, 바람직하게는 박테리오이드 (Bacterioides)속, 푸소박테리움 (Fusobacterium)속, 유박테리움 (Eubacterium)속 장내 세균, 좀더 바람직하게는 박테리오이드 JY-6 (Biol. Pharm. Bull., 23, pp1481-1485, 2000), 박테리오이데스 스테르코리스 (Bacterioides stercoris), 푸소박테리움 K-60 (Biol. Pharm. Bull., 23, pp1481-1485, 2000), 유박테리움 L-8 (Biol. Pharm. Bull., 23, pp1481-1485, 2000), 또는 이들의 혼합균주를 사용하는 것도 가능하다.

하기 단계 (4) 내지 (6) 공정들은 최종 파낙스속 식물제품의 형태에 따라 선택적으로 적용할 수 있다.

(4) 상기 (3)단계의 파낙스속 식물 추출액을 그대로 감압농축, 동결건조, 또는 분무건조시키는 과정.

(5) 상기 (3) 단계의 파낙스속 식물 추출액을 원심분리하여 추출물 내에 있는 불순물 및 침전물을 제거한 후, 상징액을 감압농축, 동결건조, 또는 분무건조시 키는 과정.

(6) 상기 (4) 또는 (5) 단계의 파낙스속 식물 추출액에 포함된 유효활성성분만을 추출하기 위해 적절한 용매로 추출하는 추출공정(Extraction Process)으로서, 적절한 용매로는 물, 메탄올 및 에탄올 등과 같은 저급알콜 용액을 사용할 수 있고, 초임계 추출법과 같은 특수한 추출법을 사용하여 유효성분을 분리할 수도 있는데, 이어서 동결건조법에 의한 건조공정(Drying Process) 및 가공음료나 가공식품을 제조하기 위한 교반과정(Agitation Process) 또는 희석공정(Dilution Process)을 추가로 수행할 수 있다.

상기 과정을 통하여 원재료에 함유된 화합물인 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd 등이 산처리 또는 열처리 과정에 의하여 진세노사이드 Rg3, Rg5, Rk1으로 전환되며, 계속적인 유산균 또는 장내세균처리에 의하여 이들 사포닌 구조의 3번 위치의 당이 떨어져 나가 진세노사이드 Rk2, Rh2, Rh3, PPD (protopanaxadiol), DHPPD (20-dehydro-protopanaxadiol)로 전환되어 실질적으로 구성 사포닌(진세노사이드 Rk2 + Rh3 + PPD + DHPPD) /(진세노사이드 Rg3 + Rg5 + Rk1)의 비율이 0.1 이상인 파낙스속 식물추출물을 생성하게 된다.

본 발명의 사포닌 분획물 및 사포닌 유도체들은 상기한 인삼 또는 가공인삼 추출물을 통상의 사포닌 분획물 및 사포닌 유도체 분리 공정을 통하여 얻을 수 있는데, 예를 들어, 본 발명의 사포닌 유도체들은 상기한 인삼 또는 가공 인삼 추출물을 증류수에 현탁한 후, 이를 부탄올, 아세톤 등과 같은 극성 용매로 추출하여 극성 용매 가용부를 얻고 이를 통상의 실리카겔 컬럼크로마토그래법을 수행하여 프 로토파낙사디올(protopanaxadiol)계 진세노시드 (ginsenoside) Rg1, Rf 및 Re 및 프로토파낙사트리올(protopanaxatriol)계 진세노시드 (ginsenoside) Rc, Rb1 및 Rb2를 분리한다.

또한 본 발명은 상기한 제조공정에 의해 생성된 특수 가공처리된 파낙스속 식물 추출물 및 분획물 및 화합물들을 함유하는, 시중에서 가공 가능한 모든 관련 파낙스속 식물 제품을 제공한다.

상기 사포닌 유도체는 파낙시트리올, 파낙시돌, 파낙시놀, 진세노시드 Rc, 진세노시드 Rb1, Rb2, 20(R)-진세노시드 Rh2, 20(R)-프로토파낙사디올, 20(S)-진세노시드 Rh2, 20(S)-프로토파낙사디올, 20(S)-진세노시드 Rh1, 20(S)-프로토파낙사트리올 등을 포함한다.

상기 가공 가능한 관련 파낙스속 식물 제품에는 파낙스속 식물 건조 분말, 엑기스제, 앰플 제제, 차류, 정제, 캡슐제, 액제, 연고제 등을 포함한다.

본 발명의 특수 가공 처리된 파낙스속 식물 추출물 및 사포닌 분획물 및 사포닌 유도체들은 헬리코박터 피로리 증식 억제효과 실험 및 H⁺/K⁺ ATPase 효소 활성억제효과 실험에서 종래의 미가공된 파낙스속 식물 또는 산처리 공정이나 가열처리만 거친 파낙스속 식물 추출물보다 탁월하게 향상된 효능을 나타내었다.

이에 따라, 본 발명은 상기한 제조공정으로 특수 가공 처리된 파낙스속 식물 추출물 및 사포닌 분획물과 사포닌 유도체를 포함하는 위장관 질환 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.

구체적으로 상기 위장관 질환에는 위염, 위궤양, 십이지장염, 십이지장궤양, 위암 등과 같은 질환들을 포함하며, 헬리코박터 피로리 균에 의해 유발되는 질환들도 또한 포함한다.

추가적으로, 본 발명의 가공 처리된 파낙스속 식물 추출물 및 사포닌 분획물과 사포닌 유도체를 포함하는 위장관 질환 예방 및 치료용 약학조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 0.02 내지 90 중량%로 포함한다.

본 발명의 파낙스속 식물 추출물 및 분획물 및 화합물들을 포함하는 조성물은 통상의 방법에 따른 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.

본 발명의 파낙스속 식물 추출물 및 분획물 및 화합물들을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리쓰리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.

본 발명에 따른 파낙스속 식물 추출물 및 분획물 및 화합물들을 포함하는 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.

본 발명의 파낙스속 식물 추출물 및 분획물 및 화합물들의 사용량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 0.1 내지 100mg/㎏의 양을 1일 1회 내 지 수회 투여할 수 있다. 또한 그 파낙스속 식물 추출물의 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 파낙스속 식물 추출물 및 분획물 및 화합물들을 포함하는 조성물은 상기와 같은 제형으로 위장관 관련 질환의 예방 및 치료를 위한 약제, 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 파낙스속 식물 추출물 및 분획물 및 화합물들을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등이 있다.

본 발명의 파낙스속 식물 추출물 및 분획물 및 화합물들 자체는 독성 및 부작용은 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있다.

본 발명의 상기 파낙스속 식물 추출물 및 분획물 및 화합물들은 위장관 관련 질환의 예방을 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 상기 파낙스속 식물 추출물 및 분획물 및 화합물들의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02∼5 g, 바람직하게는 0.3∼1g의 비율로 가할 수 있다.

본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 추출물 및 분획물 및 화합물들을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이 드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 1 ∼ 20g, 바람직하게는 약 5 ∼ 12g이다.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

본 발명은 다음의 실시예에 의거하여 더욱 상세히 설명되나, 본 발명이 이에 의해 제한되지는 않는다.

비교예 1. 미가공처리 파낙스속 식물 추출물의 제조

고려인삼, 화기삼, 전칠 각각 20 g을 세절하여 60% 에탄올을 가하여 3시간 동안 환류 추출한 다음, 이를 감압농축하여 고려인삼, 화기삼, 전칠 추출물을 각각 4.5g, 4.0g, 3.7g씩 얻었다.

비교예 2. 산처리 파낙스속 식물 추출물의 제조

고려인삼, 화기삼, 전칠 각각 20g을 세절하여 0.1% 젖산을 함유한 물 1000 ㎖를 가하고 60℃에서 5시간 배양하고 이 배양물을 부탄올로 추출하여 산처리 고려인삼, 화기삼, 전칠 추출물을 각각 2.5g, 2.8g, 3.2g씩 얻었다.

비교예 3. 가열처리 파낙스속 식물 추출물의 제조

고려인삼, 화기삼, 전칠 각각 100g을 130℃에서 2시간 수증기로 가열처리한 다음 여기에 60% 에탄올을 가하여 3시간 동안 환류추출하였다. 추출물을 감압농축하여 가열처리한 고려인삼, 화기삼, 전칠 추출물을 각각 42g, 35g, 37g씩 얻었다.

실시예 1. 가공처리 파낙스속 식물추출물의 제조

상기 [비교예 3]에서 제조한 가열처리 파낙스속 식물추출물을 원재료로서 각각 1 g 해당량을 물 20㎖에 녹인 후 푸소박테리움 K-60 100mg (습식중량)을 가하여 37℃에서 72시간 배양시킨 후 배양물을 원심분리하고 상징액을 감압농축 및 건조하여 가공처리 파낙스속 식물추출물을 각각 550㎎, 530㎎, 430㎎씩 제조하였다.

실시예 2. 가공처리 파낙스속 식물추출물의 제조

상기 [비교예 3]에서 제조한 가열처리 파낙스속 식물추출물을 원재료로서 각 각 1 g 해당량을 물 20㎖에 녹인 후 유산균인 비피도박테리움 K-506 (김동현 외, Arch. Pharm. Res., 21, pp54-61, 1988) 50mg 및 비피도박테리움 K-103(김동현 외, Arch. Pharm. Res., 21, pp54-61, 1988) 50mg, 비피도박테리움 KK-1 (기탁번호 : KCCM 10364) 및 비피도박테리움 KK-2 (기탁번호 : KCCM 10365) 각각 50mg(습식중량)을 가하여 37℃에서 72시간 배양시킨 후, 배양물을 원심분리하고 상징액을 감압농축하여 가공처리 파낙스속 식물추출물을 각각 580㎎, 450㎎, 410㎎씩 제조하였다.

실시예 3. 가공처리 파낙스속 식물 추출물의 제조

상기 [비교예 2]에서 제조한 파낙스속 식물추출물을 원재료로서 각각 1 g 해당량을 물 20㎖에 녹인 후 박테리오이드 JY-6 50mg, 유박테리움 L-8 50 mg, 박테리오이데스 스테르코리스 50 mg(습식중량)을 넣어 37℃에서 2일간 배양한 후, 용액을 원심분리하고 상징액을 감압농축하여 가공처리된 고려인삼, 화기삼, 전칠 추출물을 각각 580㎎, 630㎎, 450㎎씩 얻었다.

실시예 4. 가공처리 고려인삼 추출물의 제조

[비교예 2]에서 얻은 고려인삼 추출물을 원재료로서 1 g 해당량을 물 20 ㎖에 녹인 후 유산균인 비피도박테리움 K-506 (Arch. Pharm. Res., 21, pp54-61, 1988) 50 mg 및 비피도박테리움 K-103(Arch. Pharm. Res., 21, pp54-61, 1988) 50 mg(습식중량)을 가하여 37℃에서 72시간 배양시켰다. 이 액을 원심분리한 후, 상징 액을 감압농축하여 가공처리된 인삼추출물을 430㎎ 얻었다.

실시예 5. 가공 처리 고려인삼 추출물의 제조

상기 [비교예 1]에서 얻은 고려인삼 추출물을 원재료로서 1 g 해당량을 취하여 1% 구연산을 함유한 물 20㎖를 가하고 60℃에서 5시간 배양한 다음, 수산화나트륨 또는 칼슘 글루콘산으로 중화(pH 6.8-7.0)하고 원심분리하여 상징액을 취하였다. 여기에 비피도박테리움 K-506 50 mg, 비피도박테리움 KK-2 50 mg(습식중량)을 넣어 37℃에서 2일간 배양한 후, 배양액을 원심분리하고 상징액을 감압농축하여 가공처리된 인삼추출물 350 mg을 얻었다.

실시예 6. 가공 처리 고려인삼잎 추출물의 제조예

세절한 건조 인삼의 잎 1 g을 메탄올로 환류추출한 다음 용매를 감압농축하여 제거하고 남은 잔사를 물에 현탁시킨 다음, 에테르 용매로 추출하고, 남은 수층을 부탄올로 추출한 후 부탄올층을 감압농축하여 부탄올 가용성 분획을 얻었다. 이 분획을 130℃에서 3시간 가열한 다음 물 20㎖에 녹이고 여기에 사람의 신선한 장내 세균총 (경희대 약대 김동현 교수실, Biol. Pharm. Bull., 25, pp58-61, 2002) 100 mg(습식중량)을 넣어 37℃에서 2일간 배양한 후 원심분리하여 상징액을 취하였다. 이 액을 수포화 부탄올 50 ㎖로 추출한 후 감압농축 및 건조하여 가공처리된 고려인삼잎 추출물 100 mg을 얻었다.

실시예 7. 인삼 사포닌 분획물의 제조예(1)

경동시장에서 구입한 6 년근 백삼 1kg을 세절하고 이를 5ℓ의 메탄올이 들어 있는 플라스크에 넣고 2일간 냉침하여 얻은 메탄올 추출액을 감압농축하여 50g의 메탄올 추출물을 얻었다. 이를 1ℓ의 물에 현탁하고 에테르 2ℓ를 가하여 5회 추출한 후, 이를 감압 농축 및 건조하여 20g의 건조된 사포닌 분획물(1)을 얻었다.

실시예 8. 인삼 사포닌 분획물의 제조예(2)

경동시장에서 구입한 6 년근 백삼 1kg을 세절하고 이를 5ℓ의 메탄올이 들어 있는 플라스크에 넣고 2일간 냉침하여 얻은 메탄올 추출액을 감압농축하여 50g의 메탄올 추출물을 얻었다. 이를 1ℓ의 물에 현탁하고 부탄올을 2ℓ를 가하여 5회 추출한 후, 이를 감압 농축 및 건조하여 25g의 건조된 사포닌 분획물(2)을 얻었다.

실시예 9. 인삼 사포닌 유도체의 분리예(1)

실시예 6에서 얻은 사포닌 분획물 25g을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피법(5x60cm, 전개용매, CHCl₃:MeOH:H₂0=63:35:10→1:1:1 농도구배)을 다나가 등의 방법 (Tanaka, N., O. et al., Chem. Pharm. Bull., 20, pp1212-1216, 1972)에 따라 수행하여 프로토파낙사디올계 사포닌 진세노시드 Rc 600mg, 진세노시드 Rb1 1200mg, Rb2 500mg을 얻었다.

상기로부터 얻어진 진세노시드 Rb1, Rb2, Rc 1g씩을 10% 초산용액에 넣고 37 ℃에서 2시간 동안 배양한 후, n-부탄올로 추출하고 감압농축한 후, 이를 실리카겔 컬럼 크로마토그래피법(5x60cm, 전개용매, CHCl₃:MeOH:H₂0=10:3:1→1:1:1 농도구배)을 수행하여 진세노시드 Rg3 0.3g을 얻었다. 이것을 물에 대한 용해도에 따라 20(S)-진세노시드 Rg3 및 20(R)-진세노시드 Rg3을 분리하였다. 이 화합물 100mg 씩을 0.1ℓ의 GAM(일본 Nissui 제약) 배지에서 박테로이드 JY-6(경희대 약대 김동현 교수실, Biol. Pharm. Bull., 23, pp1481-1485, 2000)를 미리 배양하여 얻은 균체와 37℃에서 24시간 배양하여 에틸아세테이트로 추출하여 20(R)-진세노시드 Rh2, 20(R)-프로토파낙사디올, 20(S)-진세노시드 Rh2, 20(S)-프로토파낙사디올을 분리하였다. 또한 진세노시드 Rf, Re 또는 Rg1 각 100mg을 각각 0.1ℓ의 GAM(General anaerobic broth, 일본 니쓰이사) 배지에서 박테로이드 JY-6 (경희대 약대 김동현 교수실, Biol. Pharm. Bull., 23, pp1481-1485, 2000)를 미리 배양하여 얻은 균체와 37℃에서 24시간 배양하고 에틸아세테이트로 추출하여 20(S)-진세노시드 Rh1, 20(S)-프로토파낙사트리올을 분리하였다.

실험예 1. 함량분석 실험

상기 비교예 1, 2, 3 및 실시예 1, 2, 3에서 얻은 추출물을 원식물로서 각각 500 mg에 해당하는 양을 취하여 물에 현탁시킨 후, 부탄올로 추출하였다. 부탄올층을 감압농축한 후, 남은 잔사를 5㎖의 메탄올에 녹이고 이 용액을 멤브레인(membrane) 여과하여 HPLC에 주입하였다. 이때 HPLC의 조건은 문헌(Kwon 등, J. Chromatography A, 921, pp335-339, 2001)에 기재된 측정 방법을 약간 변형하여 다음과 같이 시행하였으며, 하기 [표 1]에 분석 결과를 정리하였다.

[측정 조건]

컬럼: LiChrosorb RP-18

용매: A = H₂O, B = CH₃CN 기울기 용리

0 분 (B 15%); 10 분 (B 34.5%); 25분 (B 47.5%);

40분 (B 80%); 50분 (B 100%)

유속: 1 ㎖/분

검출기: 증기화광산란검출기 (ELSD)

가공방법에 따른 사포닌 성분의 상대함량의 변화

	시료	Rk2+Rh3	PPD¹⁾	DHPPD²⁾	Rg3	Rg5+Rk1	비율³⁾
비교예 1	고려인삼	-	-	-	-	-
	화기삼	-	-	-	-	-
	전칠	-	-	-	-	-
비교예 2	고려인삼	-	-	-	28	10	-
	화기삼	-	-	-	32	12	-
	전칠	-	-	-	25	8	-
비교예 3	고려인삼	-	-	-	34	47	-
	화기삼	-	-	-	25	42	-
	전칠	-	-	-	22	35	-
실시예 1	고려인삼	14	5	1	13	20	0.61
	화기삼	10	3	2	10	17	0.56
	전칠	9	2	3	8	12	0.70
실시예 2	고려인삼	12	8	3	11	20	0.74
	화기삼	10	5	3	10	22	0.56
	전칠	7	3	2	6	14	0.60
실시예 3	고려인삼	2	2	1	13	5	0.28
	화기삼	3	2	1	15	4	0.32
	전칠	2	1	1	14	3	0.23
1) PPD: 프로토파낙사디올(protopanaxadiol) 2) DHPPD: 20-디히드로프로토파낙사디올(dehydroprotopanaxadiol) 3) 비율 : (Rk2+Rh3+PPD+DHPPD)/(Rg3+Rg5+Rk1) 의 비율 ** 농도는 전체 사포닌 피크 면적에 대한 개개 피크의 비율로 표시하였음.

실험 결과, [비교예 1]의 시료에서는 진세노사이드 Rg3, Rg5, Rk1, Rk2, Rh3, PPD, DHPPD 와 같은 비극성 사포닌 성분이 전혀 검출되지 않았는데 이는 이러한 성분이 원래 미가공 인삼에는 함유되어 있지 않는 물질이기 때문이다. [비교예 2]에서 얻은 파낙스속 식물은 주로 진세노사이드 Rg3의 함량이 높음을 알 수 있었다. [비교예 3]에서 얻은 파낙스속 식물에는 주로 진세노사이드 Rg3, Rg5, Rk1의 함량이 높고, 진세노사이드 Rk2, Rh3, PPD, DHPPD는 검출되지 않거나 그 함량이 매우 미미한 반면, 실시예 1, 2, 3에서 얻은 본 발명의 추출물은 진세노사이드 Rk2, Rh3, PPD, DHPPD 의 함량이 증가하였음을 알 수 있었다.

실험예 2. 헬리코박터 피로리 증식억제효과 실험

본 발명의 가공처리된 파낙스속 식물의 추출물과 그 사포닌 분획물 및 사포닌 유도체들의 헬리코박터 피로리균에 대한 증식억제 효과를 실험하기 위하여 Bae, E. A. 등의 문헌(Bae, E.-A. et al; Planta Med., 65, 442-443, 1999)에 기재된 실험을 응용하여 하기와 같은 실험과정을 수행하였다.

6종류의 헬리코박터 균주들, 즉, ATCC 43504, NCTC 11637, NCTC 11638, Clinical 82516, Clinical 82548, Clinical 4 균주들을 7% 가열 불활성화 말혈청(Heat inactivated horese serum)을 가한 부루셀라 한천(Brucella agar) 배지에 이식하고 37℃에서 미호기적 조건(5% 산소, 15% 이산화탄소, 80% 질소)으로 3일간 배양한 후, 개개의 균주가 자라 나온 플레이트에 2㎖의 생리식염수를 가하여 균주를 집균하고 이중 0.5㎖를 10% FBS(Fetal Bovine Serum)를 가한 부루셀라 브로쓰(Brucella Broth) 20㎖에 이식하여 미호기적 조건(5% 산소, 15% 이산화탄소, 80% 질소)으로 3일간 배양한 후, DMSO를 10%가 되게 가하고 -70℃에 보관하여 실험균주로 사용하였다. 7% 가열 불활성화 말혈청을 가한 부루셀라 한천 6.3㎖에 10㎎/㎖로 농도를 맞춘 시료 0.7㎖를 가하여 잘 혼합한 후, 시료의 최종농도가 1㎎/㎖이 되도록 배지를 완성하고 헬리코박터 균주들을 이식하여 37℃에서 미호기적 조건(5% 산소, 15% 이산화탄소, 80% 질소)으로 3일간 배양한 후, 균주의 증식정도를 관찰하였다. 시료인 비교예 1 의 미가공 파낙스속 식물 추출물, 비교예 2의 산처리한 파낙스속 식물 추출물, 비교예 3의 가열처리한 파낙스속 식물 추출물, 실시예 1 내지 3 의 가열 및 미생물 처리 파낙스속 식물 추출물, 실시예 7의 사포닌 분획물, 실시예 9에서 분리된 인삼 사포닌 유도체들을 부루셀라 한천(Brucella Agar)배지에 가하여 헬리코박터 균주의 증식 억제 효과를 측정하고 억제효과가 뛰어난 화합물들에 대해서는 헬리코박터 균주의 증식억제효과를 관찰하여 MIC(최소발육저지농도)를 산출하여 표 2 와 같은 실험 결과를 얻었다.

실험 결과, 실시예 1 내지 실시예 3의 가공처리한 파낙스속 식물 추출물이 가장 우수한 헬리코박터 피로리균에 대한 증식 억제효과를 나타냈으며, 인삼 사포닌 유도체 중에서는 20(S)-프로토파낙사디올이 강한 헬리코박터 균주 증식억제효과를 나타내었으며, 파낙사트리올 및 프로토파낙사디올의 MIC치는 모두 50㎍/㎖으로 나타났다.

헬리코박터 피로리균에 대한 증식억제효과 (MIC, 단위 ㎍/㎖)

대상시료		MIC(㎍/㎖)
대상시료		ATCC 43504	NCTC 11637	NCTC 11638	Clinical 82516	Clinical 82548	Clinical 4
비교예 1	고려인삼	>1000	>1000	>1000	>1000	>1000	>1000
	화기삼	>1000	>1000	>1000	>1000	>1000	>1000
	전칠	>1000	>1000	>1000	>1000	>1000	>1000
비교예 2	고려인삼	700	750	650	700	800	900
	화기삼	750	850	700	700	700	900
	전칠	750	900	800	800	700	900
비교예 3	고려인삼	400	550	500	580	500	600
	화기삼	500	450	550	650	620	670
	전칠	550	550	600	700	610	650
실시예 1	고려인삼	120	150	100	150	110	170
	화기삼	150	150	150	150	120	150
	전칠	170	150	120	180	180	150
실시예 2	고려인삼	150	150	180	200	150	180
	화기삼	170	150	200	200	200	200
	전칠	200	230	230	230	250	250
실시예 3	고려인삼	200	190	250	300	280	300
	화기삼	250	230	200	250	250	300
	전칠	250	250	230	300	280	280
진세노시드 Rb1		>100	>100	>100	>100	>100	>100
진세노시드 Rb2		>100	>100	>100	>100	>100	>100
진세노시드 Rc		>100	>100	>100	>100	>100	>100
20(S)-진세노시드 Rg3		190	235	220	240	260	270
20(R)-진세노시드 Rg3		210	240	230	240	250	260
20(S)-진세노시드 Rh2		120	150	110	130	120	120
20(R)-진세노시드 Rh2		120	130	120	130	120	125
20(S)-프로토파낙사디올		50	50	50	50	50	50
20(R)-프로토파낙사디올		50	50	50	100	100	50
화합물 K		>100	>100	>100	>100	>100	>100
진세노시드 Rh1		>100	>100	>100	>100	>100	>100
프로토파낙사트리올		100	100	100	100	100	100

실험예 2: H+/K+-ATPase 활성억제효과 실험

본 발명의 가공한 파낙스속 식물 추출물로부터 분리된 사포닌 유도체들의 H+/K+-ATPase 효소에 대한 억제 효과를 실험하기 위하여 배 등의 문헌(Bae, E.A. et al; Biol. Pharm. Bull., 25, pp58-63, 2002)에 기재된 실험을 응용하여 하기와 같은 실험과정을 수행하였다.

하룻밤 절식시킨 스프라그-도올리(Sprague-Dawley) 웅성 흰쥐 (200g, 대한동물)를 에테르로 마취시킨 후, 위를 절개하여 분리한 후 이 절개된 위조직으로부터 H+/K+-ATPase 효소를 사코마니 등의 방법(Sacoomani. et al.; Biochem. Biophys. Acta, 912, pp63-73, 1987)에 따라 먼저 위장관을 긁어내어 10mM 이미다졸 완충액(pH 7.4)을 넣어 초음파처리(Ultrasonicator XL, Heat System사, 미국)하고, 4℃에서 1000rpm 으로 30분간 원심분리(한일 HMR 210IV 고속원심분리기)하여 얻은 상등액 (단백질양 1㎎/㎖)을 효소로 이용하였다. 이 효소액 0.1㎖, 10mM 이미다졸 완충액 (pH 7.4) 0.2㎖ , 검체를 넣어 반응액을 0.5㎖로 하여 37℃에서 30분간 예비배양하였다. 이후 여기에 반응액 (4mM MgCl, 10mM ATP, 80mM 이미다졸 완충액(pH 7.4) 및 10mM KCl)을 넣어 15분간 반응시키고, 24% TCA(trichloroacetic acid)를 넣어 반응을 정지하고 이 상등액에 포스포몰리브데이트-말라키트 그린 복합체 ( phosphomolybdate-malachite green complex) (van Veldhoven et al.; Anal. Biochem., 161, pp45-48, 1987)를 넣어 발색된 흡광도를 측정하였다.

실험 결과, 하기 표 3에 나타난 바와 같이 실시예 1, 2, 및 3의 가공한 파낙스속 식물 추출물의 경우 H⁺/K⁺-ATPase 효소에 대한 50% 억제농도가 0.7 내지 2.1 mg/㎖으로 나타났고, 20(S)-진세노시드 Rh2, 20(R)-진세노시드 Rh2, 20(S)-진세노시드 Rg3, 20(R)-진세노시드 Rg3의 위의 H⁺/K⁺-ATPase 효소에 대한 50% 억제농도가 각각 0.5, 0.5, 0.6, 0.7 mg/㎖으로 나타났으며, 양성 대조군으로서 오메프라졸 ( 종근당)시료를 사용하였다.

위의 H⁺/K⁺ ATPase 효소에 대한 억제효과 (IC₅₀, 단위 ㎎/㎖ )

대상 시료		IC₅₀ (㎎/㎖)
비교예 1	고려인삼	>5
	화기삼	>5
	전칠	>5
비교예 2	고려인삼	4.2
	화기삼	4.6
	전칠	4.7
비교예 3	고려인삼	3.9
	화기삼	4.1
	전칠	4.5
실시예 1	고려인삼	0.7
	화기삼	0.8
	전칠	0.8
실시예 2	고려인삼	0.9
	화기삼	1.1
	전칠	1.5
실시예 3	고려인삼	1.4
	화기삼	1.8
	전칠	2.1
진세노시드 Rb1		>1
진세노시드 Rb2		>1
진세노시드 Rc		>1
20(S)-진세노시드 Rg3		0.6
20(R)-진세노시드 Rg3		0.7
20(S)-진세노시드 Rh2		0.5
20(R)-진세노시드 Rh2		0.5
20(S)-프로토파낙사디올		>1
진세노시드 Rh1		>1
화합물 K		>1
오메프라졸		0.02

이상과 같은 결과를 종합하여 볼 때, 파낙스속 식물에 화학적 처리 및 생물학적 처리를 수행하면 헬리코박터 균주의 성장을 억제할 뿐만 아니라 위의 H⁺/K⁺- ATPase 효소 저해 활성이 우수하여 위장관 질환의 예방 및 치료효과가 증강된 약효를 나타내므로 보다 우수한 품질의 파낙스속 식물함유 의약품이나 건강기능성식품을 제조하는데 효과적일 수 있다는 것이 확인되었다.

실험예 5. 급성독성 실험

1. 경구투여

ICR계 마우스와 스프라그 도올리(Sprague Dawley, 대구효창사이언스)를 각각 10마리씩 4군으로 나누어 본 발명의 실시예 1의 추출물을 각각 500, 725, 1000 및 5000 mg/kg의 용량으로 경구투여한 후 2주간 독성여부를 관찰한 결과 4군 모두에서 사망한 예가 한 마리도 없었고 외견상 대조군과 별다른 증상을 찾아볼 수 없었다.

2. 복강투여

ICR계 마우스(25±5 g)와 스프라그-도올리(Sprague Dawley) (대구효창사이언스)를 각각 10마리씩 4군으로 나누어 본 발명의 실시예 1의 추출물을 각각 25, 250, 500 및 725 mg/kg의 용량으로 복강투여한 후 24시간 동안 독성여부를 관찰한 결과 4군 모두에서 사망한 예가 한 마리도 없었고 외견상 대조군과 별다른 증상을 찾아볼 수 없었다.

이상의 결과에서 본 발명의 추출물은 급성독성이 거의 없음이 확인되었다.

하기에 상기 약학조성물의 제제예를 설명하나, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.

제제예 1. 산제의 제조

약전 제제총칙중 산제의 제조방법에 따라 1 포당 하기의 성분 함량으로 제조한다.

실시예 1 건조분말 ........................... 50 mg

유당 ..........................................100 mg

탈크 ......................................... 10 mg

제제예 2. 정제의 제조

약전 제제총칙중 정제의 제조방법에 따라 1정 당 하기의 성분 함량으로 제조한다.

실시예 1 건조분말 ............................50 mg

옥수수전분 .................................. 100 mg

유당 .........................................100 mg

스테아린산 마그네슘 ..........................2 mg

제제예 3. 캅셀제의 제조

약전 제제총칙중 캅셀제의 제조방법에 따라 1 캅셀당 하기의 성분 함량으로 제조한다.

실시예 1 건조분말 .............................. 50 mg

옥수수전분 ......................................100 mg

유당 ........................................... 100 mg

스테아린산 마그네슘 .............................2 mg

제제예 4. 주사제의 제조

약전 제제총칙중 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 하기의 성분 함량으로 제조한다.

실시예 1 건조분말 ..................................50 mg

주사용 멸균 증류수 .................................적량

pH 조절제 ..........................................적량

제제예 5. 액제의 제조

약전 제제총칙중 액제의 제조방법에 따라 액제 100㎖당 하기의 성분 함량으로 제조한다.

실시예 1 건조분말 ...................................50 mg

이성화당 ............................................10 g

만니톨 ..............................................5 g

정제수 .............................................적량

또한 하기와 같은 방법으로 건강음료를 제조한다.

실시예 1 건조분말 0.1∼80%, 설탕 5~10%, 구연산 0.05~0.3%, 캬라멜 0.005~0.02%, 비타민C 0.1~1%의 첨가물을 혼합하고 여기에 79~94%의 정제수를 섞어서 시럽을 만들고, 상기 시럽을 85~98℃에서 20~180초간 살균하여 냉각수와 1 : 4의 비율로 혼합한 다음 탄산가스를 0.5~0.82%를 주입하여서 되는 특수 가공처리된 파낙스속 식물 건조추출물을 함유하는 탄산음료를 제조한다.

액상과당 (0.5%), 올리고당 (2%), 설탕 (2%), 식염 (0.5%), 물 (75%)와 같은 부재료와 실시예 1 건조분말을 균질하게 배합하여 순간살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 건강음료를 제조한다.

제제예 6. 건강 기능성 식품의 제조

실시예 1의 추출물 ................1000 ㎎

비타민 혼합물 .....................적량

비타민 A 아세테이트 ...............70 ㎍

비타민 E ..........................1.0 ㎎

비타민 B1 .........................0.13 ㎎

비타민 B2 .........................0.15 ㎎

비타민 B6 .........................0.5 ㎎

비타민 B12 ........................0.2 ㎍

비타민 C ..........................10 ㎎

비오틴 ............................10 ㎍

니코틴산아미드 ....................1.7 ㎎

엽산 ..............................50 ㎍

판토텐산 칼슘 .....................0.5 ㎎

무기질 혼합물 .....................적량

황산제1철 .........................1.75 ㎎

산화아연 ..........................0.82 ㎎

탄산마그네슘 ......................25.3 ㎎

제1인산칼륨 .......................15 ㎎

제2인산칼슘 .......................55 ㎎

구연산칼륨 ........................90 ㎎

탄산칼슘 ..........................100 ㎎

염화마그네슘 ......................24.8 ㎎

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강기능성식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강기능성식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.

제제예 7. 건강 기능성 음료의 제조

실시예 1의 추출물 ....................1000 ㎎

구연산 ...............................1000 ㎎

올리고당 .............................100 g

매실농축액 ...........................2 g

타우린 ...............................1 g

정제수를 가하여 ......................전체 900 ㎖

통상의 건강기능성음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강기능성음료 조성물 제조에 사용한다.

상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

가열처리와 산처리와 같은 이화학적 처리 및 유산균, 장내세균 배양과 같은 생물학적 처리공정을 거친 특수 가공 처리된 파낙스속 식물 추출물을 포함하는 조성물은, 헬리코박터 피로리균의 증식을 억제하며 H+/K+ ATPase 활성을 효과적으로 억제시키므로, 위장관 관련질환의 예방 및 치료제로서 유용하게 사용될 수 있다.

Claims

담마란 계열 사포닌을 함유하고 있는 고려인삼(Panax ginseng) 또는 미국삼(Panax quinquefolia) 원재료의 뿌리를 산처리, 110 내지 180 ℃의 고온가열처리 또는 이들의 조합을 통하여 가공처리된 추출액에 유산균 또는 장내세균을 연속 처리하는 제조공정으로 제조된 파낙스속 식물 추출물을 유효성분으로 하고 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 헬리코박터 피로리 균에 의해 유발되는 위장관 질환 예방 및 치료용 약학조성물.
제 1항에 있어서, 상기 산처리는 고려인삼(Panax ginseng) 또는 미국삼(Panax quinquefolia) 원재료 또는 추출물에 1 내지 50 배 중량/부피의 0.01 내지 50%의 구연산 또는 젖산을 가하여 20 내지 80℃의 배양 온도에서, 1 시간 내지 2일간 배양하는 것인 조성물.
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제 1항에 있어서, 상기 고려인삼(Panax ginseng) 또는 미국삼(Panax quinquefolia) 추출물은 산처리 또는 가열처리하고 비피도박테리움 K-506, 비피도박테리움 K-103, 비피도박테리움 KK-1, 비피도박테리움 KK-2, 박테리오이드 JY-6, 푸소박테리움 K-60, 유박테리움 L-8, 박테리오이데스 스테르코리스 및 이들의 혼합균주로부터 이루어진 그룹에서 선택되는 균주를 가하여 8시간 내지 8일, 20 내지 50℃의 배양온도에서 배양하여 생물학적인 균주처리하에 얻어지는 것을 특징으로 하는 약학조성물.
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20(R)-진세노시드 Rh2, 20(R)-프로토파낙사디올, 20(S)-진세노시드 Rh2, 20(S)-프로토파낙사디올, 20(S)-프로토파낙사트리올로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 사포닌 유도체를 유효성분으로 하는 헬리코박터 피로리 균에 의해 유발되는 위장관 질환의 예방 및 치료를 위한 약학조성물.
제 1항 또는 제 16항에 있어서, 상기 위장관 질환은 위염, 위궤양, 십이지장염, 십이지장궤양을 포함하는 조성물.
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제 1항 또는 제 16항에 있어서, 고려인삼(Panax ginseng) 또는 미국산(Panax quinquefolia) 추출물 및 사포닌 유도체들이 조성물 총 중량에 대하여 0.02 내지 90 중량%로 포함하는 조성물.
제 1항 또는 제 16항에 있어서, 약학적으로 사용되는 제제 형태가 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 액제, 주사제 중에서 선택된 어느 하나인 약학 조성물.
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