KR100526626B1

KR100526626B1 - 인삼잎 알콜 추출물을 함유하는 당뇨병 치료제

Info

Publication number: KR100526626B1
Application number: KR10-2003-0003517A
Authority: KR
Inventors: 밝훈; 권오령; 송시환; 백지영; 이병대; 김환묵
Original assignee: 박훈
Priority date: 2003-01-18
Filing date: 2003-01-18
Publication date: 2005-11-08
Also published as: KR20040066453A

Abstract

본 발명은 인삼잎 알콜 추출물을 함유하는 당뇨병 치료제에 관한 것이다. 본 발명의 인삼잎 추출물은 알파-글루코시다제 활성을 저해하고, 경구투여시 혈당 강하 효과가 뛰어나며, 뿌리에 비해 가격이 저렴하기 때문에 상기 인삼잎 추출물을 이용하여 제조한 치료제는 당뇨병의 치료 또는 예방에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

인삼잎 알콜 추출물을 함유하는 당뇨병 치료제 {Anti-diabetic drug containing alcohol extract of Panax ginseng leaves}

본 발명은 인삼잎 추출물을 함유하는 당뇨병 치료제에 관한 것이다.

당뇨병은 인슐린의존성 소아형(제1형)과 인슐린비의존성 성인형(제2형) 당뇨병으로 크게 나뉘고, 인슐린비의존성 성인형 당뇨병이 전체의 90%∼95%를 차지한다. 우리나라에는 약 420만명이 당뇨병 환자로 전 인구의 약 10%에 이르며, 세계적으로도 10% 정도가 당뇨병에 걸린 것으로 알려져 있다.

당뇨병은 상당히 오래전부터 알려진 질환이며 병인에 관한 수많은 연구가 있었음에도 불구하고 원인이 다양하기 때문에 당뇨병의 근본적인 원인을 찾지 못하여 적당한 치료를 하지 못하고 있다. 또한, 현재 사용중인 성인형 당뇨병 치료제 중에는 어떤 약물도 단일요법만으로는 효율적으로 혈당조절이 되지 않기 때문에 다른 작용 기전을 가진 약물과 병용함으로써 당뇨병 치료에 사용되고 있다. 따라서, 새로운 당뇨병 치료제의 개발을 위해서는 당뇨병의 기전해석을 통한 약물개발의 신규 약물의 개발이 필요하며, 또한 기지의 작용점을 조절할 수 있는 신규 물질의 발굴이 필요하다.

이에, 성인형 당뇨병의 작용점이 6가지로 분류되며 작용점에 따라 화학적 제노믹스(genomics)를 이용한 성인형 당뇨병 치료제를 개발하고 있다(지대윤 등, 과기처, 화학적 제노믹스를 이용한 성인형 당뇨병 치료제 개발, 2001). 성인형 당뇨병의 작용점별 치료제의 주요 기능은 하기 표 1과 같다.

작용점에 따른 제2형(성인형) 당뇨병의 치료제와 기능 분석

작용점	치료제의 종류	치료제의 기능
탄수화물 흡수 억제제	α-글루코시다제 억제제	위의 공복상태를 지연시켜서 식후 고혈당 증상을 완화
인슐린 분비 강화제	비-설포닐유레아DP-IV 억제제글루카곤-유사 펩타이드 1 아날로그글루카곤 수용체 안타고니스트	인슐린 분비의 새로운 작용점을 활용하여 경구 혈당 강화제 설포닐유레아계의 단점을 보완
인슐린 활성 강화제	PPARν아고니스트PTP-1B 억제제GSK-3 억제제PKB 억제제	인슐린 신호전달을 활성화인슐린 저항성과 관련된 지방조직의 분화 억제탄수화물/지방대사에 관련 유전자의 활성도 증가
지방산 산화 저해제	CPT-1 억제제아실카르니틴 전환효소 억제제글리코겐 포스포실라제 억제제피루베이트 탈수소화효소 키나제 억제제	지방조직 대신 포도당을 소비하도록 유도
반응 조절제	G-6-포스페이트 억제제프룩토스-1, 6-비스-포스파타제 억제제글리코겐 포스포실라제 억제제	간의 포도당 생산 교란/억제
항비만제	UCP1-3 아고니스트소장 리파제 억제제NPY5 안타고니스트멜라토코틴 4 수용체 아고니스트렙틴 수용체 아고니스트CCKa 수용체 아고니스트D2 수용체 아고니스트5-HT. 비아드레날린 재흡수 억제제β3 아드레노셉터 아고니스트	성인형 당뇨병의 주요 병인 중의 하나인 인슐린 저항성과 직접적으로 관련이 있는 지방조직의 합성 및 신생을 저하

인삼(Panax ginseng)은 아시아 동북 산간에 자생하는 다년생 초본 식물로서 두릅나무과 또는 오갈피과의 삼속(genus Panax)으로 분류된다. 삼(Panax) 속에는 북미지역에서 자생하는 미국삼(P. quinquefolium L.) 및 삼엽삼(P. trifolius), 중국 운남성 지방의 삼칠삼(P. notoginseng (Burk.) F.H. Chen), 히말라야삼(P. peudo-ginseng Wall. subsp. himalaicus Hara) 및 그 변종 그리고, 일본의 죽절삼(P. japonicus C.A.Mayer) 및 그 변종 등이 있다고 알려져 있다. 이들은 뿌리, 줄기 및 잎의 형태 등에서 확연한 차이를 나타내며, 성분 조성에 있어서도 매우 차이가 있어서, 약재로서의 용도도 다르게 인식되고 있다.

인삼의 약효성분에 대한 과학적 연구는 19세기 후반부터 시작하여 유기화학, 특히 천연물화학의 발전에 따라 여러 종류의 약효성분이 분리되고 있으며 그들 중 많은 것의 화학구조가 밝혀졌다. 그중에서 가장 먼저 연구된 유효성분군으로는 진세노사이드(ginsenoside)라고 불리는 인삼 사포닌(saponin)을 들 수 있는데 사포닌은 주로 담마란(dammarane)계 비배당체와 각각 다른 수의 몇가지 당류로 구성된 트리테르펜 글리코시드(triterpene glycosides)로서 근부 및 지상부에서 40여 종류가 밝혀져 있다.

진세노사이드의 경우 뿌리보다 잎에 훨씬 더 많이 존재하며, 인삼잎에는 뿌리에는 없는 인삼잎 특이적인 진세노사이드가 존재한다고 알려져 있다(Yahara et al., Chem. Pharm. Bull., 1979, 27, 88). 현재까지는 인삼 뿌리 및 줄기를 포함한 경엽 사포닌에 대한 효능 연구만이 수행되어 있을 뿐, 인삼잎 사포닌에 대한 효능 연구는 극히적다. 마우스 신경정신 약리작용 연구에서 사리풀(Hyocyamus niger) 알카로이드에 의하여 학습기억장애가 유발된 랫트에 인삼 경엽 사포닌 200 ㎎/㎏을 투여한 후 집단 또는 격리/단독 사육한 결과, 랫트의 자발 운동량이 현저히 증가되어 학습기억 장애 개선 효과가 있음이 확인되었다(Ni X. H. et al., J. Traditronal Medicines, 1995, 12, 118). 또한, 나트륨 바비츄레이트에 의한 수면시간이나 20분 이내의 연속공격시간 등에서 인삼 경엽 사포닌은 뿌리 사포닌과는 달리 양적 유의차 없이 중추신경에 대한 흥분 작용을 보였으며(Ni X., H. et al., Chinese Traditional and Herbal Drugs, 1999, 30, 193), 인삼 경엽 사포닌(50∼200 ㎎/㎏, 경구투여)을 투여한 후 고가 십자 미로 실험을 한 결과, 개방통로의 연속정지 시간이 길어지고 왕복횟수도 증가하여 항초조(anti-axiety) 효과를 나타내었다(Ni X.H. et al., Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2001, 32, 238).

고려인삼은 항당뇨 약으로 예로부터 한방에서 사용되어 왔으며, 현대 의학적으로도 당뇨병에 대한 효능이 확인되었다. 예를 들면, 인삼으로부터 분리한 혈당강하성분(DPG 3-2)을 이용한 동물실험을 통해 상기 성분이 인슐린 분비 촉진 기능을 가지고 있음을 확인하였으며(기무라, 제 3회 국제인삼심포지움, 1980), 당뇨병 환자에게 홍삼을 투여한 임상 실험 결과, 환자에 따라 혈당량이 저하되고 인슐린 치료환자에 있어서 투여량 감소조절이 가능했으며, 특히 자각증상인 현기증, 어깨결림, 흉부압박감, 갈증, 전신 권태감, 머리가 무거운 증상 등이 크게 개선되었다(조준승 등, 고려인삼학회-고려인삼의이해, 1995, 20).

상기에서 살펴본 바와 같이, 인삼뿌리가 항당뇨 효과가 있다고 밝혀져 인삼뿌리의 소비가 촉진되고 있지만, 현재까지 인삼잎에 대한 항당뇨에 대한 연구는 전무한 실정이다. 따라서, 현재까지는 인삼잎에 대한 연구가 시작에 불과하지만 연구가 활성화 된다면 인삼잎이 뿌리보다 값이 싸기 때문에 유용한 생리활성 물질의 분리 및 정제에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 기대된다.

이에, 본 발명자들은 뿌리보다 값이 싸고 손쉽게 구할 수 있는 인삼잎으로부터 유효성분인 사포닌을 다량 함유하는 추출물을 분리하는 방법에 대해 특허출원한 바 있고(대한민국 특허출원 제 2002-61268호), 이를 이용하여 연구하던 중 상기 인삼잎 추출물이 항당뇨 효과가 있음을 확인하여 당뇨 치료제 및 항당뇨 기능성 식품으로 사용될 수 있음을 밝힘으로써 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 인삼잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 치료제 또는 항당뇨 기능성 식품을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 인삼잎의 알콜 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 치료제를 제공한다.

또한, 본 발명은 인삼잎의 알콜 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 기능성 식품을 제공한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 인삼잎의 알콜 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 치료제를 제공한다.

본 발명의 인삼잎의 알콜 추출물은

1) 인삼잎에 알콜을 첨가하여 인삼잎 조추출물을 제조하는 단계;

2) 단계 1에서 제조한 인삼잎 조추출물을 흡착수지를 이용하여 인삼잎 특유의 색소 및 지질층을 제거하여 총사포닌이 함유된 분획을 제조하는 단계를 통해 제조된다.

상기에서 알콜은 에탄올인 것이 바람직하다. 또한 에탄올은 60 내지 95% 에탄올인 것이 더욱 바람직하고, 80% 에탄올인 것이 가장 바람직하다. 또한, 인삼잎 알콜 추출물을 제조하기 위해 본 발명의 바람직한 실시예에서는 80% 에탄올을 사용하였지만, 추출물을 제조하는 단계에 따라 에탄올의 농도를 달리하여 사용할 수 있다.

상기에서 흡착수지로는 앰버라이트 XAD 레진(Amberlite XAD resin), 다우엑스 레진(Dowex resin), 수페라이트 DAX 레진(Supelite DAX resin), 다이아이온 HP-20 레진(Diaion HP-20 resin), AB-8 레진 또는 기타 이온교환수지를 사용하는 것이 바람직하고, 대공극 이온 교환 폴리머인 다이아이온 HP-20 레진 또는 AB-8 레진을 사용하는 것이 더욱 바람직하다.

본 발명의 인삼잎의 알콜 추출물은 알파-글리코시다제 저해활성이 있고, 세포에서의 포도당의 잔류기간을 연장해 공복 상태를 저해하며, 혈당강하 작용이 있다. 본 발명의 바람직한 실시예에서는 인삼잎의 알콜 추출물이 알파-글리코시다제를 저해하는 활성이 뛰어남을 확인하였으며(도 1 참조), 마우스에 투여하였을 때 혈당을 강하하는 효과가 있음을 확인하였다(표 3 참조). 상기에서 사용한 알콜 추출물은 본 발명자들이 대한민국 특허출원 제 2002-61268호를 통해 특허출원한 바 있는 "인삼잎에서 식품원료용으로 조사포닌을 제조하는 방법"에 따라 제조된 것을 사용하였다.

따라서, 본 발명의 인삼잎 추출물은 항당뇨 효과가 뛰어나 당뇨병의 치료 및 예방에 효과적으로 사용될 수 있음을 확인하였다. 이에 본 발명은 항당뇨 효과가 뛰어나 인삼잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 치료제를 제공한다.

즉, 본 발명의 인삼잎 추출물은 실제 임상투여 시에 여러 가지 제형으로 경구 투여가 가능하며 일반적인 의약품제제의 형태로 사용될 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 인삼잎 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 또는 드링크제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.

당뇨병 치료제에는 인삼잎 알콜 추출물을 30 내지 60 중량%로 첨가하는 것이 바람직하다.

인삼잎 알콜 추출물의 유효용량은 50∼300 mg/kg이고, 바람직하기로는 50∼200 mg/kg이며, 하루 3∼6회 투여될 수 있다.

또한, 본 발명은 인삼잎의 알콜 추출물을 함유하는 항당뇨 기능성 식품을 제공한다.

본 발명의 인삼잎 알콜 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 인삼잎 알콜 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에는 본 발명의 인삼잎 추출물이 원료에 대하여 0.1 내지 3 중량%, 바람직하게는 0.2 내지 1 중량%의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있음은 확실하다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 드링크제, 육류, 소세지, 빵류, 스넥류, 과자류, 떡류, 면류, 껌류, 캔디류, 쵸콜렛류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 스프류, 음료수, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 기능성 식품을 모두 포함한다. 본 발명의 바람직한 실시예에서는 인삼잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 무설탕 탄산 음료, 무설탕 츄잉껌, 비스켓, 무설탕 캔디, 무설탕 쵸콜렛, 국수, 라면, 떡 및 빵을 제조할 수 있다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1> 인삼잎의 채취, 선별 및 건조

본 발명자들은 경기도 여주의 인삼경작지에서 겨울철 월동상태에 있는 인삼줄기에 잔존하는 인삼잎을 채취하여 온실에서 자연건조하여 남아있는 수분을 제거하였다. 이 중 겨울철 색깔별 인삼잎 조사포닌 함량측정을 위하여 일부는 4가지 색의 잎, 즉 연초록색, 노란색, 황토색 및 검은색 잎으로 분류하여 따로 조사하였다. 상기과정을 거친 인삼잎은 10∼30 메쉬 정도의 크기로 마쇄시킨 후 본 실험인 6 ㎏의 인삼잎을 80% 에탄올에서 추출하였다.

<실시예 2> 인삼잎 알콜 추출물의 제조

인삼잎 알콜 추출물을 제조하기 위하여, 본 발명자들은 상기 실시예 1의 시료를 80% 에탄올에 침지시켜 3일간 냉암보관하였으며, 3일 후 진공감압여과를 실시하여 그 여액을 다시 진공상태에서 감압농축하였다. 여과를 하고 남은 잔사는 다시 80% 에탄올에 같은 방식으로 냉암침지 시켰으며 처음의 여액과 2차 추출 결과로 나온 여액을 합쳐서 감압농축하여 진한 갈색과 녹색이 섞여있는 80% 에탄올 조추출물을 얻었다. 건조 마쇄된 인삼잎 6 ㎏을 추출·여과·농축시켜 나온 80% 에탄올 조추출물의 수득률은 27.6%이고, 양으로는 1.65 ㎏이었다.

또한, 겨울철 색깔별 인삼잎 조사포닌 함량 비교조사를 하기 위하여, 실시예 1의 시료를 80% 에탄올에 침지시켜 상기예와 같이 추출·여과·농축하였으며, 그 결과 연초록색, 노란색, 황토색, 검은색의 순서로 각각의 수득률은 27.6, 30.4, 28.8, 27.8%였다.

<실시예 3> 인삼잎 알콜 추출물을 이용한 총사포닌이 함유된 분획의 제조

본 발명자들은 상기 실시예 2의 과정을 거친 인삼잎 조추출물에 대하여 다이아이온(Mitsubishi Chemicals Co. Ltd.) 흡착 및 용출시키는 방식으로 시료를 정제하였다. 상기와 같은 방식을 사용하게 된 이유는 종래까지의 인삼제품은 일반적으로 실시예 2와 같은 추출만으로 인삼 추출물을 제조하였기 때문에 인삼내에 함유되어 있는 총사포닌의 양은 극히 미진하였기 때문이다. 이에 본 발명에서는 인삼잎을 사용하여 총사포닌을 대량으로 얻기 위하여 상기 다이아이온 HP-20 레진을 사용하였다.

구체적으로, 상기 실시예 2에서 에탄올을 사용하여 얻은 인삼잎 조추출물 1.65 ㎏을 2차 증류수로 녹인 후 증류수로 다이아이온 HP-20 레진을 채운 컬럼에 흘려주어 조추출물 내에 잔존하는 색소 및 지질 층을 제거하였다. 제거가 될 만큼의 충분한 증류수를 흘린 후 에탄올을 다시 부어 레진내에 흡착되어 있는 인삼성분들을 용출시킨 후 감압농축시켜 최종산물을 얻었다. 상기 최종산물은 동결건조하여 진한 베이지색의 분말 1 ㎏을 제조하였다. 컬럼을 통과할때에 대략적으로 80% 에탄올 조추출물에서 35∼40% 정도의 색소가 제거되었음을 확인하였다(대한민국 특허출원 제 2002-61268호 참조). 본 발명자들은 상기 최종산물을 'GILSAF(ginseng leaf high saponin fraction)'라 명명하였다.

<실시예 4> 인삼잎 알콜 추출물의 α-글루코시다제 저해 활성

인삼잎 추출물을 이용하여 항당뇨 효과를 확인하기 위해 α-글루코시다제 저해 활성을 측정하였다. 구체적으로, 상기 실시예 1 내지 실시예 3에 의해 제조된 GILSAF를 일정 농도로 희석하여 1, 3, 10, 30 또는 100 ㎍/㎖의 GILSAF 30 ㎖, 완충용액(0.1 M 포스페이트 버퍼, pH 7.2) 250 ㎕, 기질(5 mM p-나이트로페닐-α-D-글루코피라노사이드, pH 7.0) 250 ㎕ 및 4.75 unit/㎖의 α-글루코시다제(Sigma) 10 ㎕를 고루 혼합시킨 후 37℃ 수로상에서 30분간 반응시켰다. NaOH를 넣어 pH 10.4로 맞춘 0.4 M 글리신 용액 2 ㎖을 상기 반응물에 가해 반응을 정지시킨 후 405 nm에서 흡광도를 측정하였다.

그 결과, GILSAF는 3 ㎍/㎖ 농도에서 α-글루코시다제의 활성을 유의성 있게 저해하기 시작하였으며, 100 ㎍/㎖ 농도에서는 α-글루코시다제의 활성을 약 80% 정도 저해하였다(도 1). α-글루코시다제 저해제는 표 1에서 보는 바와 같이 탄수화물 흡수 억제제에 속하는 유일한 치료제로 그 기능은 장에서 혈액내로의 당의 흡수를 억제하고, 공복을 지연시킴으로써 식후 고혈당 증상을 완화시키는 것이다. 따라서, GILSAF는 강한 α-글루코시다제 저해 활성을 나타냄으로써 당뇨병 치료제 또는 항당뇨 기능성 식품 제조에 활용할 수 있음을 알 수 있다.

<실시예 5> 인삼잎 알콜 추출물의 세포내 포도당 잔류량 억제능 분석

GILSAF가 항당뇨 효과가 있는지 확인하기 위해 세포내 포도당 잔류량을 억제하는 능력을 분석하였다. 구체적으로, CaCo2 세포(ATCC)를 10% FBS가 포함된 DMEM 배지에서 37℃, 5% CO₂, 95% AIR의 조건으로 배양한 후, 세포 농도를 3 ×10⁵세포수/㎖이 되게 배양하여 세포 배양액에 GILSAF를 0.1 ㎍/㎖, 1 ㎍/㎖ 또는 10 ㎍/㎖의 농도로 처리하였다. 상기 처리후 세포를 24시간 동안 배양 한 후 0.1% BSA가 들어간 포스페이트 완충용액(Krels-Ringe Phosphate Hepes buffer)(150 mM NaCl, 5 mM KCl, 2.9 mM Na₂HPO_4,1.25 mM MgSO_4,1.2 mM CaCl_2,10 mM Hepes, 0.1% BSA)을 이용하여 3회 세척하였다. 세척후 반응액([¹⁴C] 글루코스 0.5 μci/㎖, 글루코스가 없는 DMEM, 0.1% BSA, pH7.4) 1 ㎖을 넣어 세포안으로 반응액들이 들어가게 하기 위해 37℃ 수조에서 2.5분 동안 처리하였다. 상기 처리후 반응액을 제거하고 세포를 1 ㎖의 빙냉 포스페이트 완충용액으로 세척한 후, 250 ㎕의 1N NaOH를 넣어 60℃에서 10분간 세포를 파괴시키고 250 ㎕의 1 N HCl을 넣어 중화하였다. 5 ㎖ 바이알에 상기 반응시킨 세포 균질액(Cell homogenate)을 옮겨 넣은 뒤 5 ㎖(10% v/v)의 칵테일 용액(Aquasol-2, Packard)을 가하여 세포내에 잔류하는 ¹⁴C 글루코스를 액체섬광 측정기(Liquid scintillation counter)(Perkin Elmer Life Science, Wallac)로 측정한 뒤 5 ㎖ 바이알에 칵테일 용액만 넣어서 측정한 것을 블랭크(blank)로 하여 세포내에 잔류하는 ¹⁴C 글루코스의 양을 정량하였다.

그 결과, 세포에 처리한 GILSAF의 농도가 증가함에 따라 장내세포에서의 포도당 잔류량이 감소되는 경향을 보였으나 농도 증가에 따른 감소의 유의차가 없기 때문에 장내 세포에서의 포도당 잔류량에는 영향을 주지 않음을 알 수 있으며, 따라서 장내 세포가 과량의 포도당을 혈액내로 이동하는데는 특별한 영향을 주지 않음을 알 수 있었다(표 2).

용량(㎍/㎖)	CPM
블랭크(blank)	22 ±3.2
대조군(Vehicle)	15536 ±1404
0.1	18291 ±1946
1	15735 ±1222
10	15687 ±1168

<실시예 6> 인삼잎 알콜 추출물의 혈당 강하 작용

ICR 마우스(대한바이오링크)를 24시간 절식시킨 뒤 GILSAF를 100 mg/kg 또는 300 mg/kg의 농도로 경구투여하여 90분 뒤부터 15분, 30분 및 60분째에 혈당을 측정하였다.

그 결과, GILSAF의 투여로 인해 혈당이 저하되었으며, 저하정도는 투여된 GILSAF의 농도 의존적이었다(표 3). 상기 결과로부터, GILSAF가 당뇨병 치료제 및 항당뇨 기능성 식품의 제조에 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다.

투여농도	혈당량(mg/㎗)
투여농도	0 분	15 분	30 분	60 분
대조군(VH)	163.6 ±18.7	383.4 ±40.9	294.0 ±41.2	254.8 ±67.7
100 ㎎/㎏	146.2 ±16.4	352.4 ±42.2	280.4 ±46.5	221.2 ±25.2
300 ㎎/㎏	142.6 ±18.9	306.4 ±35.7	228.4 ±31.6	221.6 ±25.1

상기 실시예 4 내지 실시예 6에서 살펴본 바와 같이 인삼잎으로부터 분리한 인삼잎 사포닌 고함유 분획(GILSAF)은 항당뇨 효과가 뛰어나기 때문에, 상기 실시예 1 내지 실시예 3의 방법에 의해 제조한 인삼잎의 알콜 추출물을 사용하여 하기에 나타난 바와 같이 당뇨병 치료제 또는 항당뇨 기능성 식품을 제조할 수 있다.

<제조예 1> 인삼잎 추출물을 함유하는 당뇨병 치료제의 제조

본 발명의 인삼잎 추출물을 유효성분으로 하는 약학적 조성물은 경구로 투여될 수 있으며, 하기에 나타난 바와 같이 경구용 제형으로 정제 및 시럽제를 제조할 수 있다.

<1-1> 시럽제의 제조

본 발명의 인삼잎 추출물 및 약학적으로 허용되는 그의 염을 유효성분 2%(중량/부피)로 함유하는 시럽은 다음과 같은 방법으로 제조한다.

인삼잎 추출물의 산부가염, 사카린, 당을 온수 80 g에 용해시킨다. 이 용액을 냉각시킨 후, 여기에 글리세린, 사카린, 향미료, 에탄올, 소르브산 및 증류수로 이루어진 용액을 제조하여 혼합한다. 이 혼합물에 물을 첨가하여 100 ㎖이 되게 한다(표 4).

성분	함량
인삼잎 추출물	2 g
사카린	0.8 g
당	23.4 g
올리고당	8.0 g
향미료	0.04 g
에탄올	4.0 g
소르브산	0.4 g
증류수	정량

<1-2> 정제의 제조

유효성분 인삼잎 추출물이 100 ㎎ 함유된 정제는 다음과 같은 방법으로 제조한다.

인삼잎 추출물 250 g을 락토오스 175.9 g, 감자전분 180 g 및 콜로이드성 규산 32 g과 혼합한다. 이 혼합물에 10% 젤라틴 용액을 첨가시킨 후, 분쇄해서 14 메쉬체를 통과시킨다. 이것을 건조시키고 여기에 감자전분 160 g, 활석 50 g 및 스테아린산 마그네슘 5 g을 첨가해서 얻은 혼합물을 정제로 만든다(표 5).

성분	함량
인삼잎 추출물	300 g
락토오스	125.9 g
감자전분	130 g
콜로이드성 규산	32 g
젤라틴용액	10 %
감자전분	160 g
활석	50 g
스테아르산 마그네슘	5 g

<제조예 2> 인삼잎 추출물을 함유하는 항당뇨 기능성 식품의 제조

본 발명자들은 인삼잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 기능성 식품으로 상기 인삼잎 추출물을 식품첨가물로 사용해 무설탕 탄산 음료, 무설탕 츄잉껌, 비스켓, 무설탕 캔디, 무설탕 쵸콜렛, 국수, 라면, 떡 및 빵을 하기와 같이 제조할 수 있다.

<2-1> 무설탕 탄산 음료의 제조

하기 표 6의 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 무설탕 탄산음료를 제조한다.

조성	함량
자일리톨	500 g
구연산	5 g
향료	5 g
액체 탄산가스	50 g
물	4,240 g
인삼잎 추출물	10 g
강력 감미료 및 색소	190 g

<2-2> 무설탕 츄잉껌의 제조

하기 표 7의 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 무설탕 츄잉껌을 제조한다.

조성	함량
껌베이스	230 g
D-소르비톨	400 g
자일리톨	120 g
마나톨	30 g
연화제	3 g
향료	10 g
유화제	3 g
산미료	6 g
인삼잎 추출물	5 g
강력 감미료 및 색소	0.02 g

<2-3> 비스켓의 제조

하기 표 8의 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 비스켓을 제조한다.

조성	함량
박력 1급	88 ㎏
중력 1급	76.4 ㎏
정백당	16.5 ㎏
식염	2.5 ㎏
포도당	2.7 ㎏
팜쇼트닝	40.5 ㎏
암모	5.3 ㎏
중조	0.6 ㎏
중아황산나트륨	0.55 ㎏
쌀가루	5 ㎏
비타민 B1	0.003 ㎏
비타민 B2	0.003 ㎏
밀크향	0.16 ㎏
물	71.1 ㎏
전지분유	4 ㎏
대용분유	1 ㎏
제일인산칼슘	0.1 ㎏
살포염	1 ㎏
분무유	25 ㎏
인삼잎 추출물	1 ㎏

<2-4> 무설탕 캔디의 제조

하기 표 9의 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 무설탕 캔디를 제조한다.

조성	함량
D-소르비톨	288 g
구연산	3 g
과일향료	0.3 g
인삼잎 추출물	6 g
강력 감미료 및 색소	8.7 g

<2-5> 무설탕 쵸콜렛의 제조

하기 표 10의 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 무설탕 쵸콜렛을 제조한다.

조성	함량
D-소르비톨	700 g
코코아매스	360 g
무당분유류	540 g
레시틴 및 유화제	10 g
향료	9 g
정제가공유	300 g
인삼잎 추출물	5 g
강력 감미료	80 g

<2-6> 국수 및 라면의 제조

하기 표 11의 조성 및 함량으로 하여 회전이 빠르고 견고한 반죽기를 사용하여 혼합물 2 ㎏과 반죽액 1.2 ㎏을 혼합하여 10~15분간 교반하여 조성물을 완성한다. 이렇게 완성된 조성물은 압출 성형기로 면발의 형태로 압출 성형하고, 압출성형기에 의하여 면발이 성형되면, 스팀으로 증숙해 1차 김을 뺀 후 냉동 동결 건조기를 사용하여 건조시킴으로써 건국수를 제조한다. 자연 건조시키면 모양이 제대로 만들어지지 않고 부러지거나 딱딱해 삶아지지 않지만, 냉동 동결 건조시키면 모양이 그대로 살고 잘 삶아 질 뿐만 아니라, 국수가 부드러우면서 식감이 좋고 원래 성분이 그대로 유지된다.

라면은 건국수와 사용하는 재료와 성형 공정이 동일하고, 다만 압축 성형기의 금형만 달라질 뿐이다. 라면은 성형 후 식용유에 튀기거나, 증숙후 1차 김을 뺀후 바로 동결 냉동 건조하여 포장한다.

조성		함량
혼합물	쌀가루	40 중량%
	밀단백질	30 중량%
	밀가루	15 중량%
	전분	10 중량%
	서목태 가루	5 중량%
반죽액	물	94 중량%
반죽액	인삼잎 추출물	6 중량%

<2-7> 떡의 제조

하기 표 12의 조성 및 함량으로 하여 혼합물 2 ㎏과 반죽액 1 ㎏을 혼합하여 10~15분간 교반하여 스팀으로 증숙함으로써 조성물을 완성한다. 이렇게 완성된 조성물을 절편 또는 가래떡 성형기에 넣고 압출성형 함으로써 떡을 만든다.

조성		함량
혼합물	쌀가루	60 중량%
	밀단백질	30 중량%
	서목태가루	7 중량%
	설탕	2 중량%
반죽액	물	94 중량%
	인삼잎 추출물	6 중량%
	정제염	미량

<2-8> 빵의 제조

하기 표 13의 조성 및 함량으로 하여 혼합물 2 ㎏과 반죽액 900 g을 혼합하여 20분간 교반한 후 35℃~40℃에서 30분 발효함으로써 조성물을 완성한다. 이것을 일정한 형태로 성형하여 가마솥에 찐다.

조성		함량
혼합물	쌀가루	30 중량%
	밀단백질	30 중량%
	밀가루	30 중량%
	서목태가루	8 중량%
	오리고당	2 중량%
반죽액	물	95 중량%
	인삼잎 추출물	5 중량%
	정제염,파우다,이스트	미량

상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 인삼잎 알콜 추출물은 혈당 강하 능력이 뛰어나기 때문에 이를 이용하여 제조한 당뇨병 치료제 및 항당뇨 기능성 식품은 당뇨병의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 인삼잎으로부터 분리한 사포닌을 다량 함유한 분획(GILSAF)의 알파 글루코시다제 저해 활성을 나타낸 그래프이다.

Claims

인삼잎의 알콜 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 치료제.
제 1항에 있어서, 인삼잎의 알콜 추출물은

1) 인삼잎에 알콜을 첨가하여 인삼잎 조추출물을 제조하는 단계;

2) 단계 1에서 제조한 인삼잎 조추출물을 흡착수지를 이용하여 인삼잎 특유의 색소 및 지질층을 제거해 총사포닌이 함유된 분획을 제조하는 단계를 통해 제조되는 것을 특징으로 하는 당뇨병 치료제.
제 2항에 있어서, 상기 알콜은 80% 에탄올인 것을 특징으로 하는 당뇨병 치료제.
제 1항에 있어서, 인삼잎의 알콜 추출물은 30 내지 60 중량%로 첨가되는 것을 특징으로 하는 당뇨병 치료제.
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