KR100448552B1 - 산삼 배양근 추출물을 함유하는 간 섬유화 치료용 조성물 - Google Patents

산삼 배양근 추출물을 함유하는 간 섬유화 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 간 섬유화 치료용 산삼배양근 추출물에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 간 섬유화에 효과가 있는 산삼 배양근의 추출물에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, 고가의 산삼을 사용하지 않고 인공적으로 배양된 산삼배양근의 추출물을 사용함으로서 경제적이고 효과가 좋은 간 섬유화 치료용 조성물을 제공하는 효과가 있다.

Description

산삼 배양근 추출물을 함유하는 간 섬유화 치료용 조성물{Compositons Containg Extract of Incubated Wild Ginseng Root for Treatment of Hepatic Fibrosis}
본 발명은 산삼 배양근 추출물을 함유하는 간기능 개선 및 간질환 치료용 조성물에 관한 것이다.
산삼(Panax schinsengNESS)은 인삼과 같은Panax과의 다년생 초본성 식물로서 한국, 중국, 러시아에 분포하고 있는 야생식물이다. 산삼은 명약으로서 과거로부터 우리 조상들에 의해 대단히 귀한 약제로 사용되어 왔고 동의보감에 그 약리 기능이 잘 알려져 있다. 산삼의 적응증이나 효용은 인삼과 비슷하나 약효과가 월등하다. 산삼의 약효성분과 약리적 효능을 탐구하기 위하여 광범위한 연구가 계속되고 있으며 지금까지 과학적으로 밝혀진 대표적 효능으로는 신체 조절 기능의 항상성 유지 작용이라 할 수 있으며 이러한 작용에 근거하여 항피로 및 항스트레스 작용, 항당뇨작용, 혈압조절 작용, 항암작용, 동맥경화 및 고혈압의 예방, 두뇌기능 강화, 위장기능 강화, 면역기능 강화, 항 바이러스 작용 등이 보고되고 있다. 또한 체내의 기능이 지나치게 항진된 경우에는 이를 저하 시켜주고 과도하게 저하된 경우에는 오히려 항진시켜줌으로써 생체를 정상으로 유지 시켜주는 작용 즉, 적응소의 역할을 할 뿐 아니라 큰 부작용도 없는 것으로 알려져 있다.
이와 같이 산삼은 신비의 명약으로 널리 사용되어 왔으나 자연 상태에서 채취되는 양이 매우 적고, 고가이기 때문에 일반인이 쉽게 구입하여 이용하기에는 곤란하다. 이러한 이유로 최근 장뇌산삼(산삼씨를 인위적으로 파종하여 기른 산삼)을 재배하여 약재로 이용하는 경우도 많이 있으며 일부는 자연산삼으로 속여 판매하는 경우도 있다.
따라서 이러한 고가의 산삼을 대량 생산 하기 위한 방법으로 식물 조직 배양 연구가 이루어져 왔으며 천연 약용 산삼의 뿌리 조직을 배양하여 부정형의세포괴인 캘러스를 얻고 이를 각종 영양 배지 및 환경 조건하에서 대량 배양하여 천연 약용 인삼과 동일한 유효 성분을 다량으로 함유한 산삼 배양근의 제조 방법에 관한 연구가 많이 행해지고 있으며, 여러 가지 배양 방법들이 알려져 있다. 최근에는 이러한 방법으로 인공적으로 배양된 배양근이 시판되어 많은 호평을 받고 있다.
그러나 산삼 배양근의 여러 약리작용에 관해서는 상기와 같이 많이 알려져있으나, 아직까지 산삼 배양근의 간 질환 관련 효과에 관한 것은 알려진 바가 없었다.
이에 본 발명자들은, 자연산 산삼 (수령 약 50년)의 뿌리를 이용하여 메론에서 분리된Agrobacterium에 감염시켜 뿌리털을 유도한 후 배양하여 수득된 산삼 배양근의 추출물이 간 섬유화 치유 효과를 가진다는 것을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 목적은 산삼배양근 추출물을 함유하는 간 질환 치료용 또는 간기능 개선용 조성물을 제공하는데 있다.
도 1은 삼각플라스크의 액체상태에서 배양되고 있는 모상근의 모습이다.
도 2는 간 섬유화 실험 후 마우스의 간 조직을 sirius red 염색으로 콜라겐 염색한 사진이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 산삼 배양근의 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 간 섬유화 치료용 조성물을 제공한다.
상기 추출물은 산삼배양근을 101℃-200℃에서 1-24시간 동안 가압 추출한 것임을 특징으로 할 수 있다.
상기 산삼배양근은 자연산 산삼의 뿌리를 메론에서 분리한Agrobacterium에 감염시켜 뿌리털을 유도한 후 배양한 모상근 또는 자연산 산삼의 뿌리를 조직배양으로 배양한 부정근인 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명은 또한, 산삼 배양근의 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 간 섬유화 개선용 식품을 제공한다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
특히, 하기 실시예에서는 산삼배양근을 고온 가압 조건에서 추출한 추출물을 사용하여 간 보호 및 간 섬유화 치료 활성을 측정하였지만, 산삼배양근을 유기용매 등으로 추출한 추출물도 유사한 활성을 나타낼 것은 당 업계에 있어서 자명할 것이다.
또한, 하기 실시예에의 산삼배양근은 자연산 산삼의 뿌리를 메론에서 분리한 아그로박테리움(Agrobacterium)에 감염시켜 뿌리털을 유도한 후 배양한 모상근을 사용하였으나, 통상의 조직배양에서 획득한 부정근을 사용하여도 유사한 활성을 가지는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1. 산삼 모상근의 배양
산삼의 소독
50년생 자연산 산삼의 뿌리로부터 주근계만 남기고 2-4차근을 모두 제거하였다. 주근의 뿌리에 붙은 흙을 포함한 여러 종류의 이물질을 0.1%의 락스액에서 부드러운 솔로로 잘 세척한 후 70% 에탄올로 3분, 2% NaOCl에 20분 정도 표면살균한 후 멸균된 증류수로 3회 수세하였다. 표면살균된 산삼의 주근은 횡방향으로 두께 2mm의 간격으로 절단한 후 표피세포를 절단하여 유관속 조직이 포함된 직육면체의 조각으로 재료를 만들었다. 무균조작 처리가 완료된 산삼조직은 LS배지(표 1)에 7일간 무균 배양하였다. 7일 후 무균배양된 산삼조직을 관찰하여 오염된 조직은 제거하고, 오염이 발견되지 않은 조직만을 최종 재료로 사용하였다.
LS 배지의 조성
배지 성분 mg/L 배지 성분 mg/L
KNO3 1900 KI 0.83
NH4NO3 1650 Na2MoO4. 2H2O 0.25
CaCl22H2O 440 FeSO4. 7H2O 27.8
MgSO4. 7H2O 370 Na2. EDTA 37.3
KH2PO4 170 Thiamine-HCl 0.4
MnSO4. 4H2O 22.3 Myo-Inositol 100
ZnSO4. 4 H2O 8.6 Sucrose 30,000
H3BO3 6.2 Agar 7,000
아그로박테리움(Agrobacterium) 감염
멜론에서 분리된 아그로박테리움 A13균주를 LB배지에 넣고 28℃, 24시간 배양한 후 배양된 균주를 다시 배양하여 OD600값이 0.5-1.0까지 증식시킨 후 이용하였다. 상기의 7일간 배양된 산삼 조직을 A13균주에 5분간 침적하였다. 그 후 생장조절 물질이 포함되지 않은 1/2-1/4 LS배지에 A13균주를 감염시킨 산삼 조직을 배양하였다. 배양은 28℃, 암조건에서 3-7일간 행하였다. 그 후 A13균주를 산삼 조직에서 제거하기 위해 Carrbenicillin이 250-500 mg/l 포함된 멸균수에서 조직을 3회 5분간 세척하고 Carrbenicillin이 250 mg/l 포함된 1/2 LS배지(한천 0.8% 함유된 고체배지)에 배양하였다. 배양은 25℃, 암조건에서 2달간 배양되고, 배양용기는 10 × 2 ㎝ 일회용 플라스틱 용기에 배양하였으며, 이때 분주한 배지는 pH 5.5-6.0로 조정한 다음 120℃에서 15 분간 멸균하였다.
모상근 유도
1/2 LS배지에서 2달간 배양된 각각의 산삼조직으로부터 발생된 모상근을 각 조직으로부터 모양에 따라서 분리하고, 고체 LS배지에 각각의 모상근을 배양하였다. 배양은 25℃, 1500lux의 명조건에서 수행하였다.
모상근의 선발 및 대량증식조건 확립
LS고체배지에서 증식되고 있는 각각의 모상근 조직으로부터 증식속도가 가장 빠르고 균일한 형태로 증식되고 있는 모상근을 이용하였다. 사용되는 배지는 1/2-1/4 LS액체배지에 IBA(Indole-3-butyric acid) 2mg/ℓ을 첨가한 후 pH 5.0-6.0으로 조절하고 멸균하여 배양액으로 사용하였다. 액체 배양의 경우 배양 용기는 250 mL 삼각플라스크를 이용하여 2주 간격으로 계대배양했으며 삼각 플라스크의 경우는 용기 당 약 500 ㎎의 모상근을 배양하였다. 모상근의 대량생산을 위한 액체배양은 배양액을 포함한 모든 조건은 상기의 삼각플라스크 배양과 동일하지만, 배양용기만 35L의 생물반응기를 이용하였다. 모든 배양은 25℃, 1500lux의 명조건에서 배양하였다.
모상근의 유도
A13 균주에서 감염된 산삼 조직은 배양 40일부터 모상근의 유도가 관찰되기 시작했으며, 50일에는 거의 모든 조직에서 모상근이 유도되었다. 각각의 모상근은 외형적 특성에 따라서 각각 15계통(SAN1-15)을 선발하였다{모상근의 색깔(흰색, 노랑색, 포도색), 증식속도, 모상근의 굵기, 분지의 모양 등). 이러한 각각의 모상근은 동일한 LS고체배지에 배양하여 후대에도 동일하게 증식하는 것을 확인하였다.
모상근의 대량증식조건 확립
선발된 모상근 중에서 가장 빠르고 균일하게 증식하는 SAN13 계통을 1/2-1/4 LS액체배지에 배양한 결과, 배양 1개월 후 SAN13 모상근은 IBA 2mg/ℓ를 포함한 1/2 LS액체배지 실험구에서 가장 증식이 좋았고 초기 배양물에 비해서 15배정도 증식되었다(도 1). 이것은 천연물 무첨가에 비해서는 약 5배의 생육 촉진효과를 보여준 것이다. 이러한 배양법을 35L의 대량용기에 적용한 결과 삼각플라스크에서 배양한 결과와 거의 동일한 증식 결과를 보여주었다.
산삼배양근 추출에 사용할 산삼배양근은 먼저 1/2 LS 액체배지에 IBA 2mg/ℓ, 설탕 3%를 넣고, pH 5.5로 조절한 후 121℃, 20분간 멸균한 20L의 배양액에 계대배양된 모상근 100g(신선중)을 무균적 방법으로 치상하여 배양하였다. 배양은 1500lux의 25℃명조건에서 수행하였다. 30일간 배양한 후 증식된 모상근을 수확하였다. 배양 30일 후 1/2 LS배지에서 약 2kg 정도 증식된 산삼 모상근을 수확하였다.
실시예 2. 산삼배양근으로부터 산삼배양근 추출물 추출
실시예 1에서 수확된 모상근을 흐르는 물에 가볍게 세척하여 물기를 제거하였다. 모상근을 금속형 망사 용기에 넣고, 망사용기는 스텐레스형 용기에 재차 넣은 후 오토클레이브에서 고온, 가압처리에 의해 모상근 추출물을 분리하였다. 이때 오토클레이브의 조건은 101℃-200℃에서 1-24시간으로 조절하였다. 산삼배양근 20kg에서 약 1L의 추출물을 얻었으며, 이를 감압 건조 시켜 산삼배양근 추출물 고형분을 얻었다. 이 추출물을 증류수에 녹여, 3mg/mouse 또는 20mg/mouse 의 양으로 효능실험에 사용하였다.
대조군으로 사용한 silymarin은 엉겅퀴에서 분리되어, 간장 질환 치료 및 보호제로 상용화되고 있는 약품으로서 증류수에 녹인 후 25mg 또는 50mg/kg 농도로 사용하였다.
실시예 3. 산삼배양근 용액의 간보호 효능 확인
간보호 효능 확인은 마우스에 산삼배양근 추출물과 표준시약인 silymarin을 경구투여하여 확인하였다. 사용한 마우스 종은 Balb/c 10W 수컷으로 40마리를 대상으로 실험하였으며, 사용한 산삼배양근 추출물은 마우스 당 3mg 씩 투여하였고, silymarin은 25mg/kg농도로 투여하여 효과를 조사하였다.
약물 투여(산삼배양근 추출물, silymarin) 전과 투여 후 일정기간 동안 심장 채혈을 통하여 각 마우스 한 마리 당 100㎕의 혈액을 채취하여 Reitman-Frankel 방법을 사용하여 혈중 GOT와 GPT를 측정하였다.
약물 투여 전인 0 일째에는 채혈을 통해 시료투여 전의 정상 상태의 혈중 GOT와 GPT 농도의 확인하였으며, 1, 2 및 3 일째 각각 약물을 투여하고, 3 일째 채혈하여 혈중 GOT와 GPT 농도를 확인하였다.
약물투여 4 일째되는 날에는 간 독성 물질인 사염화탄소(CCl4)를 투여하고 5, 7 및 9 일째되는 날 CCl4투여에 의한 간 독성 효과의 저해효과를 혈중 GOT와 GPT농도를 측정하여 비교분석하였다.
CCl4투여 후 5일에는 2그룹 모두 GOT와 GPT에서 모두 유사한 효소활성을 보였으나, 회복과정 3 일 후에서는 silymarin 이 가장 우수한 성적을 보였고, 산삼 용액의 투여 군에서도 유의 범위 내에서 효력을 나타냈다 (표 2).
산삼배양근 추출물의 간보호 활성
CCl4투여전 CCl4투여후1일 CCl4투여후3일 CCl4투여후5일
GOT GPT GOT GPT GOT GPT GOT GPT
미처리 0.044 0.009 0.117 0.144 0.099 0.111 0.064 0.045
0.049 0.005 0.116 0.140 0.091 0.101 0.057 0.041
0.065 0.012 0.121 0.139 0.100 0.109 0.061 0.058
0.052 0.011 0.099 0.139 0.089 0.121 0.059 0.051
0.058 0.005 0.100 0.135 0.082 0.121 0.061 0.036
0.039 0.010 0.120 0.149 0.101 0.116 0.067 0.041
0.042 0.017 0.116 0.148 0.109 0.101 0.055 0.039
0.047 0.006 0.111 0.152 0.099 0.099 0.056 0.044
0.045 0.008 0.117 0.143 0.087 0.130 0.059 0.049
0.045 0.008 0.116 0.145 0.089 0.102 0.063 0.036
평균 0.049 0.010 0.113 0.143 0.095 0.110 0.060 0.044
silymarin 0.051 0.009 0.111 0.147 0.065 0.060 마우스 사망
0.049 0.005 0.121 0.130 0.068 0.066 0.059 0.040
0.068 0.012 0.121 0.137 0.071 0.064 0.064 0.036
0.050 0.011 0.114 0.136 0.073 0.059 0.049 0.039
0.049 0.005 0.105 0.141 0.055 0.072 0.060 0.049
0.044 0.010 마우스 사망
0.039 0.017 0.100 0.138 0.067 0.070 0.057 0.039
0.049 0.006 0.121 0.151 0.060 0.079 0.055 0.034
0.050 0.008 0.116 0.139 0.077 0.069 0.048 0.046
0.062 0.008 0.116 0.144 0.059 0.087 0.059 0.049
평균 0.051 0.009 0.114 0.140 0.066 0.070 0.056 0.042
산삼배양근 추출물 0.044 0.012 0.099 0.130 0.075 0.088 0.052 0.038
0.039 0.004 0.125 0.139 0.088 0.089 0.069 0.044
0.071 0.010 0.127 0.157 마우스 사망
0.048 0.008 0.119 0.140 0.099 0.079 0.040 0.041
0.039 0.008 0.100 0.139 0.079 0.090 0.059 0.044
0.049 0.007 0.126 0.137 0.087 0.079 0.056 0.070
0.035 0.009 0.111 0.147 0.076 0.076 0.070 0.037
0.047 0.006 0.119 0.139 0.080 0.099 0.052 0.043
0.048 0.007 0.119 0.149 0.069 0.079 0.050 0.048
0.047 0.014 0.121 0.150 0.078 0.087 0.049 0.050
평균 0.046 0.009 0.117 0.143 0.081 0.085 0.055 0.046
실시예 4. 간염 치유효능 분석
산삼배양근 추출물의 소량 (3mg/마우스) 투여 시
Balb/c 10W 수컷 마우스를 사용하여 약물 투여 전인 0일째에 심장채혈하여 GOT와 GPT 활성을 측정한 후 사염화탄소(CCl4)를 투여하여 간염을 유도한 후 4일동안 산삼배양근 추출물과 silymarin을 각각 투여하고 5일째 채혈하여 GOT와 GPT 활성을 측정하였다.
대조군과 비교 시 산삼 용액 (3 mg/mouse)에서 약간의 간염 치유효능을 나타내는 것을 확인할 수 있었다 (표 3).
산삼배양근 추출물(3mg/mouse)의 간염치유 활성
CCl4투여전 CCl4투여후 4일
GOT GPT GOT GPT
Control 0.054 0.021 0.085 0.099
0.050 0.027 0.088 0.091
0.049 0.025 0.072 0.090
0.062 0.031 0.066 0.101
0.049 0.020 0.069 0.088
0.061 0.026 마우스 사망
0.053 0.019 0.082 0.111
평균 0.054 0.024 0.077 0.097
silymarin 0.057 0.027 0.065 0.065
0.044 0.024 0.061 0.092
0.052 0.039 0.077 0.077
0.069 0.033 0.069 0.071
0.039 0.029 0.060 0.080
0.055 0.021 0.087 0.088
0.059 0.011 0.060 0.076
평균 0.054 0.026 0.068 0.078
산삼배양근추출물(3mg/M) 0.050 0.020 0.075 0.083
0.049 0.027 0.071 0.087
0.050 0.031 0.070 0.089
0.059 0.021 0.074 0.091
0.055 0.022 0.080 0.080
0.031 0.014 0.076 0.088
0.057 0.021 0.083 0.085
평균 0.050 0.022 0.076 0.086
고농도 약물 투여시
산삼배양근 추출물을 마우스 한 마리당 20mg, silymarin을 50mg/kg농도로 투여하여 간염치유활성을 살펴보았다.
산삼배양근 추출물의 1회 투여량을 3mg/mouse에서 20mg/mouse로 증가하여 투여하였을 때, silymarin 투여 군에 비하여 약효는 떨어지나 3mg/mouse에 비해 더 나은 효과가 있는 것을 확인할 수 있었다 (표 4).
산삼배양근 추출물(20mg/mouse)의 간염치유 활성
CCl4투여전 CCl4투여후(4일)
GOT GPT GOT GPT
미처리군 0.044 0.011 0.066 0.099
0.031 0.020 0.058 0.083
0.028 0.009 0.059 0.091
0.027 0.020 0.090 0.090
0.034 0.017 0.082 0.121
0.029 0.010 0.057 0.071
0.049 0.011 마우스 사망
0.044 0.017 0.071 0.088
0.038 0.016 0.048 0.116
0.029 0.020 0.065 0.099
평균 0.035 0.015 0.066 0.095
Silymarin 투여군(50mg/kg) 0.039 0.021 0.048 0.063
0.041 0.027 0.055 0.068
0.020 0.017 0.038 0.079
0.039 0.019 0.053 0.080
0.037 0.017 0.047 0.055
0.033 0.018 0.044 0.072
0.047 0.021 0.065 0.060
0.048 0.020 0.040 0.061
0.032 0.007 마우스 사망
0.035 0.011 0.052 0.063
평균 0.037 0.018 0.049 0.067
산삼배양근 추출물 (20mg/mouse) 0.037 0.013 마우스 사망
0.033 0.017 0.059 0.094
0.030 0.022 0.071 0.081
0.031 0.019 0.050 0.079
0.039 0.009 0.049 0.083
0.041 0.027 0.063 0.060
0.036 0.016 0.049 0.077
0.037 0.014 마우스 사망
0.030 0.014 0.056 0.076
0.037 0.017 0.052 0.080
평균 0.035 0.016 0.056 0.079
실시예 5. 간 섬유화 치유 효능 분석
Balb/c 10W마우스 수컷 40마리에 간 독성 물질인 사염화탄소(CCl4) 4주간 투여하여 간 섬유화를 유도하였으며, 5주째에 산삼배양근 추출물과 silymarin용액을 6일간 경구투여 한 후 7일째 치상하여 간 조직 샘플을 제작하여 sirius red 염색으로 조직 중의 콜라겐을 염색하여 관찰하고, 조직 중의 콜라겐을 정량하여 간 섬유화 치유정도를 확인하였고, 액틴의 양은 웨스턴블럿을 실시하여 감광필름의 감광도를 비교하여 확인하였다.
산삼배양근 추출물과 silymarin 용액의 농도는 첫 번째 실험에서 각각 3mg/mouse와 25mg/kg의 농도로 사용하였으며, 두 번째 실험에서는 각각 20mg/mouse와 50mg/kg의 농도로 사용하여 실험하였다.
실험 결과 간섬유화에 있어서는 sylimarin은 치유효과를 나타내지 못했으나, 산삼배양근 추출물은 콜라겐과 알파-SM-actin의 양이 비 처리군에 비해 감소하는 것으로 나타나 산삼배양근 추출물이 간 섬유화를 치유하는 효과가 있는 것으로 나타났다 (표 5, 표 6).
표 5는 사염화탄소를 처리하지 않은 정상 마우스의 액틴(0.3)과 콜라겐(0.0021(㎍/mg 총단백질))양을 나타내고 있다. 4주간 사염화탄소를 처리하여 간 섬유화를 유도한 마우스의 경우 정상 마우스에 비해 간 섬유의 성분인 액틴(1.9)과 콜라겐(0.0112(㎍/mg 총단백질))양이 많이 증가한 것을 알 수 있었으며, 산삼배양근 추출물을 처리하였을때는 액틴과 콜라겐이 1.5와 0.0103(㎍/mg 총단백질)으로 감소함을 보여 산삼배양근 추출물이 마우스의 간섬유화를 치유하는 데 뛰어난 효과를 보인다는 것을 확인할 수 있었다.
또한 콜라겐 염색에 의한 마우스 간조직의 섬유화를 살펴보았을 때에도 대조군에 비해 산삼배양근 추출물을 투여 하였을때 간섬유화가 줄어든 것을 확인할 수 있었다 (도 2).
사염화탄소 미투여 마우스의 간 섬유화도 측정 결과
CCl4미투여 정상마우스
알파-SM-actin(비 감광도) Collagen(㎍/mg 총단백질)
CCl4투여전정상 마우스 +/- 0.0025
+/- 0.0028
+ 0.0019
+ 0.0020
+/- 0.0028
+/- 0.0014
+/- 0.0011
+/- 0.0028
+/- 0.0022
+ 0.0017
평균 0.3 0.0021
산삼배양근 추출물의 간섬유화 치유효과
약물 투여전(CCl4-4회투여) 약물 투여후
알파-SM-actin(비 감광도) Collagen(㎍/mg 총단백질) 알파-SM-actin(비 감광도) Collagen(㎍/mg 총단백질)
미처리군 ++ 0.0137 마우스 사망
+++ 0.0129 ++ 0.0116
++ 0.0122 ++ 0.0117
마우스 사망 + 0.0103
++ 0.0148 +++ 0.0173
+/- 0.0138 + 0.0095
++ 0.0126 ++ 0.0101
+++ 0.0130 ++ 0.0099
+ 0.0098 ++ 0.0101
++ 0.0106 +/- 0.0096
평균 1.9 0.0126 1.7 0.0112
silymarin(25mg/kg) 마우스 사망
+ 0.0138
++ 0.0129
+ 0.0132
++ 0.0111
++ 0.0101
+++ 0.0069
++ 0.0129
++ 0.0099
+ 0.0119
평균 1.6 0.0114
산삼배양근추출물(3mg/mouse) + 0.0098
++ 0.0078
++ 0.0090
+ 0.0132
+ 0.0121
+ 0.0089
++ 0.0095
+ 0.0114
++ 0.0096
++ 0.0121
평균 1.5 0.0103
산삼배양근 추출물을 고농도(20mg/mouse)로 처리하였을 때는 사염화탄소로 섬유화를 유도 후 약물을 투여하지 않은 마우스의 액틴과 콜라겐이 각각 1.6과 0.0116(㎍/mg 총단백질)인데 비해, 산삼배양근 추출액을 20mg/mouse의 농도로 투여하였을 때는 액틴이 1.1, 콜라겐이 0.0095(㎍/mg 총단백질)로 고농도에서 보다 더 높은 간섬유화 치유 효능이 나타났으며, silymarin 처리군의 경우에는 농도를 높여서 투여하여도 액틴과 콜라겐 양에 차이가 없어, 간 섬유화 치유 효과가 없는 것으로 나타났다 (표 7, 표 8).
사염화탄소 미투여 마우스의 간 섬유화도 측정 결과
CCl4미투여 정상마우스
알파-SM-actin(비 감광도) Collagen(㎍/mg 총단백질)
CCl4투여전정상 마우스 +/- 0.0019
+/- 0.0021
+ 0.0020
+ 0.0017
++ 0.0031
+/- 0.0019
+/- 0.0016
+ 0.0022
+/- 0.0026
+/- 0.0015
평균 0.5 0.0022
산삼배양근의 간 섬유화 치유효과
약물 투여전(CCl4-4회투여-4주) 약물 투여후(5주)
알파-SM-actin(비 감광도) Collagen(㎍/mg 총단백질) 알파-SM-actin(비 감광도) Collagen(㎍/mg 총단백질)
미처리군 +++ 0.0127 ++ 0.0119
++ 0.0149 ++ 0.0121
++ 0.0133 +/- 0.0099
++ 0.0098 ++ 0.0138
++ 0.0123 + 0.0126
++ 0.0151 ++ 0.0147
+ 0.0132 ++ 0.0106
++ 0.0131 + 0.0102
+ 0.0123 ++ 0.0099
+++ 0.0126 ++ 0.0103
평균 2.0 0.0129 1.6 0.0116
silymarin(50mg/kg) 마우스 사망
++ 0.0103
+ 0.0131
+++ 0.0129
+ 0.0127
+ 0.0100
+ 0.0103
+ 0.0117
++ 0.0101
+ 0.0120
평균 1.3 0.0114
산삼배양근 추출물(20mg/mouse) ++ 0.0131
마우스 사망
+/- 0.0058
++ 0.0127
+ 0.0101
+ 0.0078
마우스 사망
++ 0.0086
+ 0.0077
++ 0.0100
평균 1.1 0.0095
본 발명은 산삼 배양근의 유기용매 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 간 섬유화 치료 또는 간기능 개선용 조성물을 제공하는 효과가 있다.
본 발명에 따르면, 고가의 산삼을 사용하지 않고 인공적으로 배양된 산삼 배양근의 추출물을 사용함으로서 경제성이 뛰어날 뿐 아니라, 특히 본발명에 따른 산삼 배양근 추출물은 간 섬유화 치유효과가 매우 뛰어나, 관련 치료제나 건강 식품으로 유용하다.

Claims (6)

  1. 산삼 배양근 추출물을 유효량 함유하는 것을 특징으로 하는 간 섬유화 치료용 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서, 상기 추출물은 산삼배양근을 101℃-200℃에서 1-24시간 동안 가압 추출한 것임을 특징으로 하는 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 산삼 배양근은 자연산 산삼의 뿌리를 메론에서 분리한 아그로박테리움(Agrobacterium)에 감염시켜 뿌리털을 유도한 후 배양한 모상근 또는 자연산 산삼의 뿌리를 조직배양으로 배양한 부정근인 것을 특징으로 하는 조성물.
  6. 삭제
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