KR100366608B1 - 형질전환 식물체로부터 생산된 재조합 인간 파필로마바이러스 백신 - Google Patents
형질전환 식물체로부터 생산된 재조합 인간 파필로마바이러스 백신 Download PDFInfo
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Abstract
Description
증폭 대상유전자 | 시발체 | 서열 |
HPV-18 L1 | 정방향 | 5' ACCTCGAGCTCGGATGTGCCTGTATACA 3' |
역방향 | 5' ACACACCCGGGTTACTTCCTGGCACGTA 3' | |
HPV-18 L2 | 정방향 | 5' TGAGCTCAAAGTATGGTATCCCACCGTGCCGCA 3' |
역방향 | 5' CCCGGGAGGTGGAAGATATACGGTATTGTC 3' | |
HPV-16 L1 | 정방향 | 5' GAGCTCCACAATATACAATTATTGCTGATG 3' |
역방향 | 5' CCCGGGTCAACATACATACAATACTTACAGC 3' | |
HPV-16 L2 | 정방향 | 5' GAGCTCACTTAACAATGCGACACCACAAACG 3' |
역방향 | 5' CCCGGGACAGGAGGCAAGTAGACAGTGGC 3' |
Claims (20)
- HPV-16 L1 유전자, HPV-16 L2 유전자, HPV-18 L1 유전자 및 HPV-18 L2 유전자로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 유전자를 포함하며, 상기 유전자로부터 인간 파필로마 바이러스 유사입자를 생산하는 형질전환 식물체.
- 삭제
- 1) 인간 파필로마 바이러스 유사입자를 생산할 수 있는 HPV-16 L1 유전자, HPV-16 L2 유전자, HPV-18 L1 유전자 및 HPV-18 L2 유전자로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 유전자가 식물 특이적 발현을 조절하는 프로모터에 의해 전사조절 되도록 상기 프로모터에 연결되고, 이에 더하여 선별 표지 유전자를 포함하는 발현 플라스미드를 제조하는 단계;2) 상기 발현 플라스미드를 식물 조직에 도입하는 단계;3) 상기 발현 플라스미드가 도입된 식물 조직을 선별하고, 이로부터 캘러스를 유도하는 단계;4) 뿌리 유도 배지에서 상기 캘러스로부터 뿌리를 유도한 후, 토양 순화를 거쳐 식물체로 재분화시키는 단계; 및5) 상기 재분화된 형질전환 식물체로부터 인간 파필로마 바이러스 유사입자를 회수하는 단계를 포함하는 HPV 유사입자의 제조방법.
- 삭제
- 제 3항에 있어서, 단계 1의 프로모터는 양배추 모자이크 바이러스 35S 프로모터 (CaMV 35S promoter)인 것을 특징으로 하는 HPV 유사입자의 제조방법.
- 제 3항에 있어서, 단계 1의 선별 표지 유전자는 카나마이신 저항성 유전자인 것을 특징으로 하는 HPV 유사입자의 제조방법.
- 제 3항에 있어서, 단계 1의 발현 플라스미드는 도 3의 개열지도로 표시되는 pUS-L 플라스미드인 것을 특징으로 하는 HPV 유사입자의 제조방법.
- 제 3항에 있어서, 단계 2는 HPV-16 L1 유전자, HPV-16 L2 유전자, HPV-18 L1 유전자 및 HPV-18 L2 유전자로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 유전자를 포함하는 재조합 이원 벡터 (recombinant binary vector) 또는 코인테그레이션 벡터로 아그로박테리움을 형질전환하고, 형질전환된 아그로박테리움을 식물 조직과 공동 배양하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 8항에 있어서, 아그로 박테리움은 아그로 박테리움 튜마파시엔스 (Agrobacterium tumafaciens) 또는 아그로 박테리움 라이조게네스 (Agrobacterium rhyzogenes)인 것을 특징으로 하는 HPV 유사입자의 제조방법.
- 제 8항에 있어서, 형질전환은 마이크로 입자 총 형질전환법에 의하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 HPV 유사입자의 제조방법.
- 제 8항에 있어서, 형질전환은 폴리에틸렌 글리콜 침전법에 의하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 HPV 유사입자의 제조방법.
- 제 8항에 있어서, 형질전환은 전기충격법에 의해 이루어지는 것을 특징으로 하는 HPV 유사입자의 제조방법.
- 제 8항에 있어서, 상기 HPV-16 L1 유전자, HPV-16 L2 유전자, HPV-18 L1 유전자 및 HPV-18 L2 유전자로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 유전자를 포함하는 재조합 이원 벡터는 pUS-L인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 3항에 있어서, 상기 식물은 토마토, 상치, 배추, 바나나, 감자, 벼, 무, 클로렐라를 포함하는 먹을 수 있는 식용 식물인 것을 특징으로 하는 HPV 유사입자의 제조방법.
- 제 3항에 있어서, 단계 4의 뿌리 유도 배지에 NAA, IAA 및 겜보그 비타민 액으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 식물 생장 촉진제를 첨가하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 3항의 방법으로 제조된 HPV 유사입자를 유효성분으로 하는 자궁 경부암 치료 또는 예방용 백신.
- 제 16항에 있어서, HPV 유사입자는 형질전환 식물체 자체 또는 그 일부나 과육, 종자 또는 추출물의 형태로 존재하는 것을 특징으로 하는 자궁 경부암 치료 또는 예방용 백신.
- 제 16항에 있어서, 면역을 위해 경구용 또는 식용으로 섭취되는 것을 특징으로 하는 자궁 경부암 치료 또는 예방용 백신.
- 제 16항에 있어서, HPV 유사입자는 형질전환 식물체의 추출물을 포함하는 식품의 형태로 섭취되는 것을 특징으로 하는 자궁 경부암 치료 또는 예방용 백신.
- 제 16항에 있어서, 주사용, 스프레이용 또는 피부 팻취용 조성물의 형태로 투여되는 것을 특징으로 하는 자궁 경부암 치료 또는 예방용 백신.
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