KR100222633B1 - Lhrh 길항제 및 중간체 - Google Patents

Abstract

본 발명은 하기 일반식(I)의 LHRH 길항제에 관한 것이다.

상기 식에서,

X는 아실기이고,

X₁은 D-Nal 이고,

X₂는 D-(4-Cl)-Phe,

X₃은 D-(3)-Pal,

X₆은 D-Cit 또는 D-Neu이고,

X₈은 L-Arg 또는 L-Neu이고, X₆및 X₈기 중 적어도 하나가 Neu이고,

X₁₀은 D-Ala-NH₂이고,

Neu는 하기 일반식(XII)의 기이다.

본 발명은 일반식(I)의 화합물 및 통상적인 보조제 및 부형제를 함유하는 제제를 포함한다. 이 제제는 전립선암, 자궁내막증 및 산아 제한의 경우에 사용한다.

Description

[발명의 명칭]

LHRH 길항제 및 중간체

[발명의 상세한 설명]

본 발명은 특히 LHRH(황체 형성 호르몬 분비 호르몬) 길항제인 펩티드 화합물, 그의 제조 방법 및 의약으로서의 용도와, 추가로 측쇄에 질소를 갖는 아미노산 및 그의 제조 방법에 관한 것이다.

황체 형성 호르몬 분비 호르몬 pyroGlu¹-His²-Trp³-Ser⁴-Tyr⁵-Gly⁶-Leu⁷-Arg⁸-Pro⁹-Gly¹⁰-NH₂는 포유류의 시상하부에서 생산된다. 이 호르몬은 뇌하수체에서 황체 형성 호르몬(LH) 및 난포 자극 호르몬(FSH)의 분비를 자극한다. 난포 자극 호르몬은 생식기관에서 안드로겐과 에스트로겐의 생산을 조절한다.

LHRH 또는 합성 작동약의 1회량 투여로 스테로이드 호르몬(예, 테스토스테론)의 생성을 증가시킬 수 있다. 그러나, 장기 투여는 호르몬 생성을 감소시킬 수 있다. 이 효과는 종종 호르몬 의존성 종양(전립선암) 치료에 이용되어 왔다.

이 치료에 수반되는 효과는 억제된 호르몬의 초기 자극이다. 이 효과는 호르몬 의존성 종양의 과도 종양 성장(종양 재발)을 유도하며, LHRH 길항제를 사용하여 방지될 수 있다. 카르텐(Kcarten)등(Endocrine Rev. 7, 44, 1986) 및 두타(Dutta)(Drugs of the Future 13, 761, 1988)는 LHRH 길항제의 개발을 기재하였다.

그러나, 6- 및 8-위치에 염기성 아미노산을 갖는 유효 LHRH 길항제들은 바람직하지 못하게 다량의 히스타민을 분비시킨다. 따라서, 히스타민의 분비를 줄이기 위해 다양한 노력들이 기울어져 왔다. 유럽 공개 특허 제097,031호는 6-위치의 아르기닌 유도체를 기재하고 있다. 유럽 공개 특허 제0,277,829호는 6- 및 8-위치의 염기성 아미노산 유도체를 개시하고 있다. 유럽 공개 특허 제0,299,402호는 아주 소량의 히스타민을 분비하는 6-위치의 시트룰린과 8-위치의 아르기닌의 조합을 기재하고 있다.

놀라웁게도, 본 발명의 발명자들은 6- 및 8-위치를 ω-질소가 치환된 리신 유도체로 교환시킴으로써 히스타민 분비의 감소 효과를 증가시킬 수 있음을 발견하였다.

본 발명은 하기 일반식(I)의 펩티드 화합물을 제공한다.

상기 식에서,

X는 나프토일, 나프틸아세틸, 나프틸프로피오닐, 벤조일 또는 탄소 원자수 1 내지 7의 아실기이고,

X₁은 D-(1)-Nal, D-(2)-Nal, D-Phe, D-(4-Y)-Phe, D-(3)-Qal 또는 직접 결합이고, 여기서, Y는 F, Br 또는 Cl이며,

X₂는 D-Phe, D-(4-Y)-Phe 또는 직접 결합이고, 여기서, Y는 상기 정의한 바와 동일하며,

X₃은 D-Trp, D-Phe, D-(4-Y)-Phe, D-(3)-Pal, D-(2)-Nal 또는 직접 결합이고, 여기서, Y는 상기 X₁에서 정의한 바와 동일하며,

X₆은 D-Cit, D-Hci, D-Orn, D-Lys 또는 D-Neu이고,

X₈은 L-Orn, L-Arg, L-Lys 또는 L-Neu이고, X₆및 X₈기 중 적어도 하나는 Neu이며,

X₁₀은 D-Ala-NH₂, Gly-NH₂, 아자글리신, -NHEt 또는 -NH(CO)NH₂이고,

Neu는 하기 일반식(II)

(식 중, Z는

R₁은 수소 원자 또는 C₁-C₄알킬기이고,

R₂는 수소 원자, C₁-C₄알킬기 또는 아미노기이고,

n은 1 내지 8이고,

m은 Z가 -(CH₂)-, -CO- 또는 -CH(OH)-기 중 어느 하나인 경우 1 내지 3이거나, 또는 Z가 -O-, -S-, -SO-, -SO₂, -NR₁- 또는 -N(CO)R₂-기인 경우 2 및 3이고,

p는 1 내지 3임)의 기이거나, 또는

Neu는 하기 일반식(III)

(식 중, n은 1 내지 8임)의 기이거나, 또는

Neu는 하기 일반식(IV)

(식 중, W는

n은 1 내지 8의 정수임)의 기이다.

본 명세서는 다소의 약어를 사용하고 있으며, 이하 그 의미를 설명한다. 여기에는 IUPAC-IUB 위원회가 정한 생화학적 명명을 위한 규칙이 적용되었다.(Biochemistry 11 : 1726(1972) 및 Biochem. J. 219 : 345(1984)참조).

또한, 다음 약어 및 그의 조합을 사용하였다.

Ape : 2-아미노-펜탄산

Ahx : 2-아미노-헥산산

Ahp : 2-아미노-헵탄산

Aoc : 2-아미노-옥탄산

Ano : 2-아미노-노난산

Mor : 모르폴린-4-일-

Pip : 피페리딘-1-일-

Pyr : 피롤리딘-1-일-

Tht : 테트라히드로-1,4 -티아진-4-일-

Mpz : 4-메틸-피페라진 -1-일-

Pon : 4-피페리돈 -1-일-

Hpi : 4-히드록시-피페리딘 -1-일-

Aps : 4-아자-펜타메틸렌술폰 -4-일-

(1)-Nal : 3-(나프트-1-일)-알라닌

(2)-Nal : 3-(나프트-2-일)-알라닌

(3)-Pal : 3-(3-피리딜)-알라닌

(3)-Qal : 3-(퀴놀-3-일)-알라닌

Hci : 호모시트룰린

lIm : 이미다졸-1-일-

4Tr : 1,3,4-트리아졸 -4-일-

1Tr : 1,3,4-트리아졸 -1-일-

1Py : 피라졸-1-일-

Cpz : 4-카르바모일 -피페라진-1-일-

Cpa : 4-클로로-페닐알라닌

따라서, 예를 들면 Aoc(Mor)=6-모르폴린 -4-일-2-아미노 -옥탄산, Ape(Pip)=5 -피페리딘-4-일-2 -아미노-펜탄산 및 Ahx(1Im)=6-(이미다졸-1-일) -2-아미노 헥산산이다.

펩티드류는 단지 LHRH와 비교하여 변화된 아미노산과 그의 위치 만을 표시하는 약식 형태로 나타낸다. 따라서, 예를 들면 pyroGIu¹-His²-Trp³-Ser⁴-Tyr⁵-Gly⁶-Leu⁷-Arg⁸-Pro⁹-Gly¹⁰-NH₂는[D-Nal⁶, D-Ala¹⁰]LHRH가 된다.

본 명세서에서 알킬기는 직쇄형 또는 분지쇄형의 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, sec-부틸, 이소부틸, tert-부틸, 펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸, 헥실, 이소헥실, 헵틸, 이소헵틸을 의미한다.

본 발명에 따른 펩티드 화합물의 장점은 약리작용이 매우 크고 히스타민 분비 형태의 부작용을 아주 작게 유지시킨다는 점이다.

Neu가 하기 일반식(IX)

(식 중, Z₁은기 또는

직접 결합이고, n₁은 3 내지 6임)의 기인 펩티드 화합물이 유용하다.

바람직한 펩티드 화합물은 Neu가 하기 일반식(X)

(식 중, n₁은 3 내지 6임)의 기인 화합물이다.

더욱 바람직한 펩티드 화합물은 Neu가 하기 기인 화합물이다.

가장 바람직한 펩티드 화합물은 Neu가 X₆또는 X₈인 화합물이다.

다른 유용한 실시태양은 Neu가 하기 일반식(XIII)

의 기인 펩티드 화합물이다.

다른 유용한 실시태양은 Neu가 하기 일반식(XIV)

의 기인 펩티드 화합물이다.

H- 및 J-위치 이외에, 다른 가변적 위치도 변화될 수 있다. 따라서, 펩티드 화합물은 X가 에타노일기이고, X₁이 D-Nal이고, X₂가 D-Cap이고, X₃이 D-Pal이고, X₁₀이 D-Ala-NH₂인 화합물이 바람직하다.

다른 바람직한 실시태양은 X₆- 및 (또는) X₈-위치에 Ahx(Hpi), Ahx(Aps), Ahx(Mpz), Aoc(Mor), Ahx(1Py), Ape(Mor), Ape(Pyr) 또는 Ape(Tht)기 중 하나 이상을 갖는 화합물이다.

가장 바람직한 펩티드 화합물은 Ac-D-Nal-D-Cpa-D-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Ahx(Mor)-Pro-D-Ala-NH₂이다.

추가로, 본 발명은 또한 본 발명에 의한 펩티드 화합물 중의 구조 요소로서 생성되는 아미노산 유도체를 포함한다.

이러한 아미노산 유도체는 하기 일반식(XVII)의 기에 속한다.

상기 식에서, W는 하기 식

(식 중, Z는

R₁은 수소 원자 또는 C₁-C₄알킬기이고,

R₂는 수소 원자, C₁-C₄알킬기 또는 아미노기이고,

n은 1 내지 8이고,

H은 Z가 -(CH₂)-, -CO- 또는 -CH(OH)-기 중 어느 하나인 경우 1 내지 3이거나, 또는 Z가 -O-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR₁- 또는 -N(CO)R₂-기인 경우 2 및 3이고,

p는 1 내지 3임)의 기이고,

R₃은 H, 보호기 또는 펩티드 사슬의 펩티드 결합의 일부로서의 카르보닐기이고,

R₃'은 H 또는 C₁-C₃알킬기이고,

R₄는 O-R₄' 또는 펩티드 사슬의 펩티드 결합의 일부로서의 아미노기이고,

R₄'은 H 또는 보호기이거나, 또는

W는

R₃, R₃' 및 R₄는 상기 정의한 바와 동일하다.

보호기는 문헌(Houben-Weyl(1974년) Georg Thieme Verlag, 제4판)에 기재되어 있다. 이 문헌은 내용의 일부로서 보호기의 명부를 게재하고 있다.

바람직한 아미노산 유도체는 하기 일반식(XVIII)

(식 중, Z₁은

n₁은 3 내지 6이고,

R₃및 R₄는 상기 정의한 바와 동일함)을 갖는 아미노산 유도체이다.

더욱 바람직한 아미노산 유도체는 하기 일반식(XIX)

(식 중, n₁은 3 내지 6이고, R₃및 R₄는 상기 정의한 바와 같음)의 아미노산 유도체이다.

가장 바람직한 아미노산 유도체는 하기 일반식(XX)

(식 중, R₃및 R₄는 상기 정의한 바와 같음)의 아미노산 유도체이다.

다른 실시태양은 하기 일반식(XXII)

(식 중, R₃및 R₄는 상기 정의한 바와 같음)의 본 발명에 따른 아미노산 유도체가 있다.

펩티드 화합물의 용도 :

a) 본 발명은 1종 이상의 일반식(I)의 화합물 및 통상적인 보조제 및 부형제를 함유하는 제제를 포함한다. 또한, 본 발명은 질병 치료용 제약 조성물을 포함하며, 이 조성물은 일반식(I)의 펩티드 화합물과, 추가로 약리학적으로 허용되는 염 및(또는) 약리학적으로 허용되는 부형제를 함유한다.

본 발명에 의한 펩티드 화합물, 그의 염 및 제약학적으로 무해한 부형제 및 첨가제와의 혼합물은 효과적이고 장기 지속되는 LHRH-길항 작용을 갖는다.

펩티드 화합물은 전립선의 양성 확장 및 전립선암의 치료에 사용된다. 그러므로, 테스토스테론-감소 효능을 시험한다. 이 목적을 위해서는 일반적으로 배란 억제를 유도하는 것보다 명백히 높은 투여량의 길항제가 필요하다. 본 발명에서 사용된 시험 방법에서는 무손상의 성숙한 수컷 쥐에 시험하고자 하는 물질을 1회 피하처리하였다. 24시간 후 혈청 테스토스테론 농도에 대한 효과를 방사면역학적으로 측정하였다(비어만 캄파니(Biermann Company)사의 킷트).

실시예 13(6.1)의 물질은 0.5 내지 5mg/kg(체중)의 투여량 범위에서 대조용에 비해 80 내지 97의 혈청 테스토스테론 농도 억제를 유도하였다. 또한, 0.25mg/kg(체중)의 투여량에서는 26의 억제율이 관찰되었다.

테스토스테론 농도값의 감소이외에 히스타민 분비가 중요하다. 그리하여, 전형적으로 히스타민이 분비된 경우에도 시험 투여량(0.1 내지 5mg/kg(체중), 피하 투여)에서 안면 및(또는) 사지(四脂) 상에서 부종성 변화가 전혀 없었다. 이는 여러 경우에 있어서 생체내 시험이 마스트젤(Mastzell)시험 보다 훨씬 더 적절하다는데 원인이 있다. 그럼에도 불구하고, 마스트젤 시험도 또한 실시예 13의 펩티드 화합물을 사용할 경우, 히스타민 분비의 ED₅₀이 0.01mg/ml에서 성취되지 않는 것으로 나타났다.

LHRH 길항제의 작용에 대한 다른 시험 방법은

i) 쥐에서 LHRH에 의해 유발된 FSH- 및 LH-분비의 억제.(VILCHEZ-MARTINEZ, J.A. 등(1975) Endocrinology,96,1130) 및

ii) 방사 면역 분석 시험에 의해 시험되는 살포된 조기 뇌하수체 세포 배양물에 의한 LH- 및 FSH-분비의 억제(VALE등(1972) Endocrinology 91:562)이다.

앞에서 설명된 본 발명의 펩티드 화합물의 작용은 그로부터 유도된 다음과 같은 다수의 용도를 제공한다.

aa) 전립선의 양성 확장의 치료,

bb) 양 성에 있어서 증가된 생식선 호르몬 생성에 의해 유발된 질병, 특히 전립선암의 치료,

cc) 자궁내막증의 치료,

dd) 여아의 산아 제한,

ee) 배란 억제 또는 배란의 감속,

ff) 배란의 동기화,

hh) 발정 억제,

ii) 자성 동물의 성장 촉진,

kk) 월경 유도,

ll) 초기 3개월내 조기 중절,

mm) 유방의 낭포 치료,

nn) 다낭포 난소 증후군(스타인레벤탈; Stein-Leventhal)의 치료,

oo) 남아의 산아 제한,

pp) 육생산 응성 동물의 기능적 거세 및

qq) 폐경기 증상의 억제.

특히, 전립선암 및 자궁내막증의 치료가 바람직하다.

실제로, 유효량의 일반식(I)의 펩티드 화합물 또는 유효량의 일반식(I)의 펩티드 화합물 및 부형제 및(또는) 첨가제를 함유하는 혼합물을 상기와 같은 치료를 요하는 사람 또는 동물에 투여한다. 펩티드 화합물 또는 그 혼합물은 다양한 방법에 의해 투여할 수 있으며, 후자는 경구, 정맥내, 피하, 근육내, 자궁내, 직장 또는 비강으로 투여할 수 있다. 대응하는 투여 방법은 투여 형태 및 투여량에 의해 결정된다. 용도에 따라서 유효 성분을 서서히 방출하는 데포트제 형태, 삽입제 또는 갈렌제제 형태가 사용될 수 있다.

사람의 전립선암의 치료(고 투여량으로 치료)에 있어서는 1 내지 10mg/ℓ인, 바람직하기로는 2 내지 4 mg/ℓ인의 범위의 1일 투여량을 투여한다.

정확한 투여량 및 투여 형태는 일반식(I)의 펩티드 화합물, 투여 방법(혈류의 경로), 및 치료 질병의 유형 및 심도에 따라 개별적으로 달라진다.

b) 본 발명은 추가로 aa) 내지 qq) 중 한 항목에 유용한 일반식(I)의 펩티드 화합물의 용도를 포함한다. 본 발명은 또한 aa) 내지 qq) 중 한 항목에 따른 치료학적 용도를 위한 의약의 제조에 있어서 일반식(I)의 펩티드 화합물의 용도를 포함하고 있다. 또한, 본 발명은 이와 같은 용도를 필요로 하는 사람 및 포유동물에 있어서 aa) 내지 qq) 중 한 항목에 따른 사용 방법에 관한 것이며, 상기 용도는 사람 및 포유동물에 있어서 약리학적으로 안정하고 유효한 양의 일반식(I)의 펩티드 화합물의 투여를 포함한다.

c) 본 발명은 바람직하기로는 전립선암의 치료에 있어서의 일반식(I)의 펩티드 화합물의 용도를 포함한다. 또한, 본 발명은 전립선암 치료용 의약의 제조에 있어서의 일반식(I)의 펩티드 화합물의 용도를 포함한다. 또한, 본 발명은 이와 같은 치료를 요하는 사람 및 포유 동물의 전립선암 치료 방법에 관한 것이며, 이 치료는 사람 및 포유동물에 있어서의 약리학적으로 안정하고 유효한 양의 일반식(I)의 펩티드 화합물의 투여를 포함한다.

d) 본 발명은 바람직하기로는 자궁내막증의 치료에 있어서 일반식(I)의 펩티드 화합물의 용도를 포함한다. 본 발명은 또한 자궁내막증 치료용 의약의 제조에 있어서 일반식(I)의 펩티드 화합물의 용도를 포함한다. 또한, 본 발명은 이와 같은 치료를 요하는 사람 및 포유동물의 자궁내막증의 치료 방법에 관한 것이고, 이 치료는 사람 및 포유동물에 있어서의 약리학적으로 안정하고 유효한 양의 일반식(I)의 펩티드 화합물의 투여를 포함한다.

e) 바람직하기로는 본 발명을 산아 제한에 있어서 일반식(I)의 펩티드 화합물의 용도를 포함한다. 본 발명은 또한 산아 제한용 의약의 제조에 있어서의 일반식(I)의 펩티드 화합물의 용도를 포함한다. 본 발명은 또한 이와 같은 치료를 요하는 사람 및 포유동물의 산아 제한 방법에 관한 것이며, 이 치료는 사람 및 포유동물에 있어서의 약리학적으로 안정하고 유효한 양의 펩티드 화합물의 투여를 포함한다.

3-아미노 -헥사히드로-2 -아제피논을 염기 존재하에 하기 일반식(XXVI)

(식 중, R₈은 하기 정의한 바와 동일함)의 아릴술포닐산 염화물과 반응시키고, 형성된 하기 일반식(XXVII)

(식 중, R₈은 하기 정의한 바와 동일함)의 3-아릴술폰아미도헥사히드로-2 -아제피논을 무기산으로 분절시켜 하기 일반식(XXVIII)

의 N⁶-비치환 N²-아릴술포닐 유도체를 얻고, 이를 임의로, N-알킬화 또는 N-아실화시켜 하기 일반식(XXIX)

(식 중, R₉및 R₁₀은 하기 R₆및 R₇의 정의와 동일하되, 여기서, 치환체 R₉및 R₁₀중 적어도 하나는 수소가 아니고, R₈은 하기 정의한 바와 동일함)의 N⁶-아릴 술포닐리신 유도체를 얻고, 이를 임의로 암모니아 중의 나트륨과 반응시켜 하기 일반식(XXX)

(식 중, R₉및 R₁₀은 상기 정의한 바와 동일함)의 N⁶-치환 리신 유도체로 전환시키는 것을 특징으로 하는 하기 일반식(XXIV)의 N⁶-치환 리신 유도체의 제조 방법에 관한 것이다.

상기 식에서,

R₅는 수소 원자 또는 하기 일반식(XXV)

(식 중, R₈은 수소 원자 또는 메틸기임)의 아릴술포닐기를 나타내고,

R₆및 R₇은 서로 동일하거나 상이한 것으로서 2개 이하의 수소 원자이고(이거나), 3개 이하의 산소 원자, 질소 원자 또는 황 원자에 의해 임의로 단속되고(단속되거나) 2개 이하의 히드록시기, 시아노기 및(또는) 옥소기에 의해 치환되고 12개 이하의 탄소 원자를 갖는 2개 이하의 탄화수소기를 의미한다.

본 발명은 추가로 N⁶-벤질옥시카르보닐-N²-토실-리신 및 N⁶,N⁶-디메틸-N²-토실-리신을 제외한 R₈, R₉및 R₁₀이 상기 정의한 바와 동일한 의미를 갖는 일반식(XXIX)의 N⁶-치환 N²-아릴술포닐 유도체에 관한 것이다.

본 발명에 의한 방법은 양호한 수율을 얻으면서 간단한 방법으로 일반식(XXX)의 상기 N⁶-치환 리신 유도체를 합성시킬 수 있다. 본 발명의 방법은 보편적으로 사용될 수 있으며 고 순도로 일반식(XXX)의 광학 활성 리신 유도체를 합성시키기에 적당하다.

본 발명에 의한 방법의 최초 화합물은 라세미체로서 및 광학적 대장체의 형태로 상업적으로 구입할 수 있는 3-아미노 -헥사히드로-2 -아제피논(=α-아미노 -ξ-카프롤락탐)이다. 이 락탐은 염기 존재하에 당 업계에 통상의 지식을 가진 자에게 공지된 조건 하에서 일반식(XXVI)의 아릴술포닐산 염화물(벤젠술폰산 염화물 또는 바람직하기로는 p-톨루엔술폰산 염화물)과 반응시킨다.(Methoden der Organischen Chemie(Methods of Organic Chemistry)(Houben-Weyl); Georg Thieme Verlag, DE-Stuttgart; 제4판, 제XV/1권, 1974, 제223페이지). 예를 들면, 적당한 방법은 수산화나트륨 용액 존재하의 수성 상 중의 락탐과 과량의 염화 아릴 술포닐의 반응이다.

따라서, 놀라운 방법으로 무기 산에 의해 일반식(XXVIII)의 대응하는 N²-아릴술포닐 리신 유도체를 분절시켜 거의 정량적으로 대응하는 일반식(XXVII)의 3-아릴술폰아미도 -헥사히드로-2 -아제피논을 얻는다. 적당한 무기 산은 예를 들면, 12중량이하의 수성 염산이다. 반응은 끓는 용액에서 수행하는 것이 적당하다.

이 반응에 광학 활성 3-아릴술폰아미도 -2-아제피논이 사용될 경우, 대응하는 광학 활성 N²-아릴술포닐 리신 유도체가 생성된다.

일반식(XXVII)의 N²-아릴술포닐 리신 유도체는 이미 공지되어 있다. 그러나, 이 유도체는 일반식(XXX)의 N⁶-치환 리신 유도체의 합성에는 사용되지 않았으나, 일반식(XXVII)의 3-아릴술폰아미도헥사히드로- 2-아제피논의 제조(J. Chem. Soc., 1957, 4830-4) 또는 광학 활성 L-2 -피페리딜 카르복실산(L-피페콜산; Bull. Chem. Soc. Japan. 48, 1975, 1341-2)의 제조에는 사용되었다.

일반식(XXIX)의 N²-아릴술포닐 리신 유도체는 N-알킬화시키거나 또는 N-아실화시킴으로써 일반식(XXIX)의 대응하는 N²-아릴술포닐 리신 유도체로 전환시킬 수 있다.

당 업계의 통상의 지식을 가진 자들에게는 N⁶-치환 N²-아릴술포닐 리신 유도체가 치환체 R₆및 R₇로서 가장 가변적인 기를 함유할 수 있음이 명백하다.

따라서, 예를 들면 치환체 R₆은 수소 원자일 수 있다. 치환체 R₇은 3개 이하의 산소 원자, 질소 원자 또는 황 원자에 의해 임의로 단속되고(단속되거나) 2개 이하의 히드록시기 및(또는) 옥시기에 의해 치환된 탄소 원자수 12개 이하의 탄화수소기 일 수 있다. 이 탄화수소기는 치환 또는 비치환될 수 있을 뿐만 아니라 알리시클릭, 시클릭 또는 혼합 시클릭일 수 있다. 시클릭 또는 혼합 시클릭알리시클릭 탄화수소는 비방향족, 방향족 및(또는) 헤테로시클릭 고리계일 수 있거나 또는 이를 함유할 수 있다.

산소 원자에 의해 단속된 탄화수소로는 예를 들면 에테르기(예를 들면, 메톡시기, tert-부틸옥시기 또는 벤질옥시기)를 함유한 것들이 있다. 이와 같은 에테르는 임의로 히드록시기를 함유하는 물질을 합성하는데 사용할 수 있다. 산소 원자에 의해 단속된 다른 탄화수소는 예를 들면 푸란 고리, 테트라히드로푸란 고리, 피란 고리 또는 1,3-디옥솔란 고리를 함유한 것들이 있다. 이는 임의로 카르보닐기를 함유하는 물질을 합성하는데 사용할 수 있다.

옥소기에 의해 치환된 탄화수소기로는 예를 들면 카르보닐기에 의해 리신의 N⁶-아미노기, 즉 아미드에 결합된 것들이 있다. 한편, 이와 같은 탄화수소는 또한 아미드기 또는 카르보닐옥시기를 함유하는 것들이다.

질소 원자에 의해 단속된 탄화수소로는 예를 들면 디메틸아미노기, 피롤리노기(Houben-Weyl, 제4판, 제XVII권, 1974, 제293페이지) 또는 디벤질아미노기 등의 디알킬아미노기를 함유하는 것들이다.

이런 유형의 기에는 또한 N-헤테로사이클을 함유하는 방향족 N-헤테로사이클 또는 탄화수소가 있다.

황 원자에 의해 단속된 탄화수소기로는 예를 들면 티오에테르 및 티오펜 고리를 함유하는 탄화수소이다.

한편, 일반식(XXIX)의 N⁶-치환 N⁶-아릴술포닐 리신 유도체는 또한 D₉및 R₁₀치환체로서 2개의 상기 유기 기를 가질 수 있다 이들 기는 서로 동일하거나 또는 상이할 수 있다. 추가로, 2개의 기 R₉및 R₁₀은 모든 산소 원자, 질소 원자 또는 황 원자에 의해 임의로 단속되고(단속되거나) 히드록시기 및(또는) 옥소기에 의해 치환된 탄화수소기를 의미할 수 있으며, 따라서 질소 원자와 함께, 일부분이 상기 방법으로 다시 치환될 수 있는 5- 내지 7-원의 헤테로사이클을 형성할 수도 있다.

일반식(XXIX)의 N⁶-치환 N²-아릴술포닐 리신 유도체는 예를 들면 하기 일반식(XXXI)

(식 중, R₈은 상기 정의한 바와 동일하고, 각각의 경우 두 Ra기는 4개 이하의 탄소 원자를 갖는 알킬기를 나타낸다)의 화합물이다. 이들 화합물은 예를 들면 일반식(XXVIII)의 N⁶-치환 화합물로부터 공지된 조건(Houben-Weyl, 제4판, 제XI/1권, 1957, 제24페이지 ff) 하에서 브롬화 알킬 또는 요오드화 알킬과의 반응에 의해 제조될 수 있다. 일반식(XXXI)(Ra=CH₃)의 N,N-디메틸 화합물을 제조하는 것이 바람직할 경우, 이는 N⁶-비치환 화합물을 포름알데히드 및 촉매적으로 활성화된 수소 또는 포름산 존재하의 포름알데히드로 환원적으로 알킬화시킴으로써 유리하게 수행될 수 있다(Houben-Weyl, 제4판, 제XI/2권, 1958, 제330페이지 및 331페이지).

추가로, 일반식(XXIX)의 N⁶-치환 N²-아릴술포닐 리신 유도체로는 하기 일반식(XXXII)의 화합물이 있다.

상기 식에서,

R₈은 상기 정의한 바와 동일하고,

R₁₁및 R₁₂는 동일하거나 또는 상이한 것으로서 수소 원자, 시아노기, 4개 이하의 탄소 원자를 갖는 1 내지 3개의 알킬기 또는 4개 이하의 탄소 원자를 갖는 1 내지 3개의 알콕시기에 의해 임의로 치환된 6개 이하의 탄소 원자를 갖는 알킬기, 페닐기 또는 피리딜기를 의미하며, Zn은 탄소-탄소 결합, 메틸렌기, 산소 원자 또는 황 원자를 나타낸다.

이와 같은 화합물로는 예를 들면 6번 위치가 피롤리디노기, 3-피리디닐 -피롤리디노기, 피페리디노기, 모르폴리노기, 3-시아노모르폴리노기 또는 1,4-테트라히드로티아지노기로 치환된 화합물이 있다.

이들 화합물은 하기 일반식(XXXIII)

(식 중, R₁₁, R₁₂및 Zn은 상기 정의한 바와 동일함)의 대응하는 디카르보닐 화합물 및 N⁶-비치환 N²-아릴술포닐 리신 유도체를 금속 수소화물, 수소화붕소나트륨 또는 유리하기로는 수소화시아노붕소 나트륨과 반응시켜 환원적 알킬화시킴으로써 제조될 수 있다.(Synthesis 1975, 135-146; J. Amer. Chem. 29, 1986, 1225-1230, J. Org. Chem. 28, 1963, 3259-3261).

따라서, 이 환원적 알킬화는 예를 들면 수소화시아노붕소 나트륨을 실온에서 극성, 바람직하기로는 함수성 불활성 용매(예, 헥산메틸인산 트리아미드, 아세토니트릴 등) 또는 pH 6 내지 8의 물 자체 중의 성분들에 작용시킴으로써 수행될 수 있다.

또한, 유용한 일반식(XXIX)의 N⁶-치환 N²-아릴술포닐 리신 유도체는 하기 일반식(XXXIV)의 화합물이다.

상기 식에서,

R₈은 상기 정의한 바와 동일하고,

R₁₃및 R₁₄는 모두 -CH기와 함께 5- 및(또는) 6-원 이소시클릭 고리계를 형성하거나, 또는

R₁₃은 탄소 원자수 4 이하의 알킬기 1 내지 3개 또는 탄소 원자수 4 이하의 알콕시기 1 내지 3개에 의해 임의로 치환된 탄소 원자수 6 이하의 알킬기, 페닐기 또는 피리딜기이고, R₁₄는 R₁₃과 동일하거나 또는 수소 원자이다.

이와 같은 화합물로는 예를 들면 6-위치가 알킬아미노기(예, 메틸아미노기, 에틸아미노기, 프로필아미노기, 이소프로필아미노기, 부틸아미노기, tert-부틸아미노기), 시클로알킬아미노기(예, 시클로펜틸아미노기), 2-아다만틸아미노기 또는 1-페닐에틸아미노기로 치환된 일반식(XXXIV)의 화합물이 있다.

또한, 이 화합물들은 하기 일반식(XXXV)

(식 중, R₁₃및 R₁₄는 상기 정의한 바와 동일함)의 대응하는 카르보닐 화합물 및 N⁶-비치환 N²-아릴술포닐 리신 유도체를 상기 정의한 바와 동일한 조건하에 금속 수소화물, 예를 들면 수소화붕소나트륨 또는 수소화시아노붕소나트륨, 또는 촉매적으로 활성화된 수소와 환원성 알킬화 반응시킴으로써 제조될 수 있다.

이 반응은 예를 들면 실온에서 에틸 아세테이트와 같은 극성 용매 중에서 상기 성분들을 수소화붕소나트륨과 반응시킴으로써 수행될 수 있다.

최종적으로, 일반식(XXIV)의 N⁶-치환 N²-아릴술포닐 리신 유도체로서는 N⁶-아실화된 하기 일반식(XXXVI)

(식 중, R₈은 상기 정의한 바와 동일하고, R₁₅는 탄소 원자수 12 이하의 카르복실산기 R₁₅COOH임)의 화합물이 있다.

상기 R₁₅기로는 예를 들면 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, 부틸기 또는 tert-부틸기, 시클로펜틸기 또는 시클로헥실기와 같은 탄소 원자수 6 이하의 알킬기, 시클로펜틸메틸기 또는 2-시클로프로필에틸기와 같은 시클로알킬알킬기 또는 히드록시기, 탄소 원자수 4 이하의 1 내지 3개의 알콕시기에 의해 임의로 치환된 페닐기, 1- 또는 2-나프틸기 또는 피리딜기가 있다.

상기 아미드는 당 업계에 통상의 지식을 가진자들에게 공지된 방법(Houben-Weyl, 제XV/1, 1974)에 의해 예를 들면 산 염화물 또는 산 무수물과 같은 대응하는 카르복실산의 반응 유도체로부터 합성된다.

술폰산기는 일반식(XXIX)의 N⁶-치환 N²-아릴술포닐 리신 유도체로부터 분절될 수 있다. 이는 끓는 암모니아 중의 나트륨과의 반응에 의해 적절히 수행되며(Houben-Weyl, 제XV/1권, 1974, 제228페이지 ff), 일반식(XXX)의 6-치환 리신 유도체는 양호한 수율 및 양호한 광학적 순도로 성취된다.

이는 단지 철저한 조건에서만 성취될 수 있고 부반응이 거의 없는 N-토실 차폐가 비교적 어렵게 제거되기 때문에 다른 기들에 있어서는 되도록이면 ω-아미노 또는 구아니도의 기능을 블로킹하는데 보호기를 사용하지 않는 것으로 일반적으로 공지되어 있기 때문에 당 업계에 숙련된 자들에게는 놀라운 일이다.

추가로, 본 발명은 N-α-보호 ω-아미노- α-아미노산을 환원제 존재하에 디알데히드와 반응시킨 후 보호기를 제거시키는 본 발명에 의한 아미노산 유도체의 제조 방법을 포함한다.

본 발명은 또한

(a) 아미노기 및 측쇄의 임의의 관능기가 보호기를 갖고 있는 커플링된 아미노산 유도체의 카르복실 말단을 커플링된 아미노산 유도체 또는 커플링된 펩티드 단편의 유리 아미노 말단과 축합제 존재하에 반응시키고,

(b) 이어서, 커플링된 α-아미노산 유도체의 α-아미노기를 제거시키고,

임의로, 상기 두 단계 후 합성된 펩티드 사슬에 다른 아미노산 유도체를 커플링시키고, 고체상법의 경우에는 최종 아미노산 커플링 후 고체 상으로부터 펩티드 화합물을 제거시키는, 공지된 아미노산 유도체 및 본 발명에 의한 1종 이상의 아미노산 유도체를 사용하고 아미노산 유도체를 균일상법으로 축합시키거나 또는 고체 상법에 따라 축합시켜 본 발명에 의한 펩티드 화합물을 제조하는 방법을 포함한다.

이하 실시태양을 사용하여 본 발명에 의한 방법을 더욱 상세히 설명한다.

[펩티드의 일반적인 합성]

본 발명의 펩티드는 펩티드 합성 분야의 현장 전문가들에게 공지된 기술에 의해 제조될 수 있다. 다수의 이럴 기술의 요약은 고체상법에 대한 문헌[제이. 엠. 스튜어트(J. M, STEWART) 및 제이. 디. 영(J. D. YOUNG), 샌프란시스코, 1969, 제이. 메이엔호퍼(J. MEIENHOFER), Hormonal Proteins and Peptides, 제2권, 제46페이지, Academic Press(뉴욕 소재), 1973] 및 액체상법에 대한 문헌[이. 쉬로더(E. SCHRODER) 및 케이. 루브케(K. Lubke), The Peptides, 제1권, Academic Press(뉴욕 소재), 1965]에서 볼 수 있다. 합성 공정은 유럽 공개 특허 제0,097,031호에 기재되어 있다.

상기 유럽 공개 특허 공보의 일반적인 공정은 본 명세서에 기재된 본 발명에 의한 펩티드의 합성에 유사하게 적용될 수 있다.

구체적으로, 본 발명의 펩티드는 다음과 같이 제조될 수 있다.

펩티드는 기재된 방법에 따라 FMOC-D-Ala를 사용하여 개시한 후 ACT 합성 장치 상의 NH₂약 0.5m당량/g을 함유하는 벤즈히드릴아민 수지에서의 공정에 의해 합성된다.

커플링은 다음과 같은 다이어그램 A에 따라 수행된다.

[다이어그램 A]

[시약]

1. FMOC-아미노산(2 내지 3 밀리몰/g(수지)),

2. 사용된 아미노산을 기초로 계산하여 4 당량의 히드록시벤조트리아졸-수화물,

3. 4 당량의 BOP 시약,

4. 4 당량의 디이소프로필에틸아민.

용매로서는 N,N-디메틸포름아미드를 사용한다. 커플링 시간은 약 30분이다.

블로킹 제거는 다이어그램 B에 따라 수행한다.

[다이어그램 B]

5. 디메틸포름아미드로 수세(2회),

6. 디메틸포름아미드 중의 20피페리딘, 3분내 3회,

7. 디메틸포름아미드로 수세(2회),

개략적으로, α-아미노기를 보호하기 위해 FMOC를 사용한다. Ser의 히드록시기 및 Tyr의 페놀계 히드록시기에 대한 보호기로서 tBu를 사용한다. Arg의 구아니도 관능기를 보호하기 위해 Mtr기를 사용한다.

보호 펩티드 수지를 제거시키고 이를 보호되지 않은 상태로 되게 하기 위해 1시간 이상의 기간에 걸쳐 트리플루오로아세트산으로 처리한다. 트리플루오로아세트산을 비용해된 수지로부터 분리시키고 진공 중에서 증발시켜 건조한다. 공지된 방법에 따라 예비 HPLC에 의해 잔류물로부터 목적하는 펩티드를 순수한 형태로 단리시킨다.

[실시예]

[1.1. 5-(1-아자-시클로알크-1-일)-2-아세트아미도-2-에톡시키르보닐-펜탄산 에틸에스테르의 제조]

[전체적인 설명]

먼저 벤젠 10ml와 메톡시화 나트륨 1 밀리몰을 아세트아미도말론에스테르 5.0g(23밀리몰)에 첨가하였다. 이어서, 아크롤레인 23밀리몰을 30분에 걸쳐 적하시키고 외부를 빙수로 냉각시키되 반응 온도를 +35를 초과하지 않게 하였다.

60분 이상 교반시키고(온도를 약 +10로 증가시키고) 아세트산으로 pH를 7로 조정(지시약 종이를 적시어 확인)하였다. 반응 용액을 진공 중에서 증발시켜 농축하여 유상 잔류물을 메탄올 20ml 중에 용해시켰다(4Å 분자체로 건조시킴).

빙수 및 아자시클로알칸 23 밀리몰로 다시 냉각시키고, 아세트산 나트륨 46밀리몰, 분자체(4Å) 2.5g 및 최종적으로 수소화시아노붕소 나트륨 46밀리몰을 계속적으로 첨가시켰다. 기체 생성이 완료된 후, +20에서 16시간 동안 교반시켰다. 탄산나트륨 수용액으로 pH 10으로 조정하고 에틸 아세테이트 100 ml로 3회 추출시키고 유기상을 합하고 염화나트륨 포화 용액으로 추출시키고 황산나트륨 상에서 건조시키고 여액을 증발시켜 농축하였다.

[1.2. 3종의 특정 펜탄산 에틸 에스테르의 제조]

[실시예 1]

5-(모르폴린 -4-일) -2-아세트아미도 -2-에톡시-카르보닐 -펜탄산 에틸 에스테르의 제조 :

아세트아미도말론에스테르 21.7g을 출발 물질로 하여 조 생성물 34.5g을 얻었고, 실리카겔 크로마토그래피(디클로로메탄 : 메탄 = 95:5; v/v) 후, 순수 생성물 12.8g(오일)을 얻었다.

[실시예 2]

5-(피롤리딘-1-일) -2-아세트아미도-2 -에톡시카르보닐-펜탄산 에틸 에스테르의 제조 :

아세트아미도말론에스테르 5.0g을 출발 물질로 하여 조 생성물 6.6g을 얻고, 이를 추가 정제없이 다음 반응에 사용하였다.

[실시예 3]

5-(티오모르폴린-4-일) -2-아세트아미도-2 -에톡시카르보닐-펜탄산 에틸 에스테르의 제조 :

아세트아미도말론에스테르 5.0g을 출발 물질로 하여 조 생성물 7.5g을 얻었으며 실리카겔 크로마토그래피(디클로로메탄 : 메탄올 = 95:5; v/v)후 순수 생성물을 얻었다.

[2. 6-브로모-2 -아세트아미도-2-에톡시카르보닐 -헥산산 에틸 에스테르의 제조]

[실시예 4]

아세트아미도말론에스테르 86.9g, 1,4-디브로모부탄 215.9g, 트리에틸-벤질 -암모늄-클로라이드 4g, 탄산 칼륨 82.8g 및 아세토니트릴 400ml의 혼합물을 24시간 동안 환류시켰다. 비용해 성분들을 셀라이트에 여과시켜 제거하고, 여액을 진공 중 증발시켜 농축시키고 잔류물을 물을 각각 500ml씩 3회 사용하여 진공 중에서 증발시켜 농축하였다. 잔류물을 디에틸 에테르 500ml로 분해시키고 +5에서 철야 방치시켰다. 비용해 성분들로부터의 여액을 진공 중에서 증발시켜 농축하였다. 잔류물을 실라카겔 상에서 크로마토그래피(tert-부틸 -메틸 에테르: 헥산=7:3; v/v)로 정제시켰다. 순수 생성물 64g을 얻었다. 융점. 61-62.

[3.1. 6-(1-아자-시클로알크-1-일)-2-아세트아미도-2-에톡시카르보닐-헥산 에틸 에스테르의 제조]

[전체적인 설명]

6-브로모-2-아세트아미도-2-에톡시카르보닐-헥산산 에틸 에스테르(참고, 실시예 4) 352mg을 디에틸 에테르 2ml 중의 아자-시클로알칸 2ml의 용액에 첨가하고 20에서 12시간 동안 교반시켰다. 반응 용액을 진공 중에서 증발시켜 농축하고 잔류물을 물 10ml와 혼합시켰다. 에틸 아세테이트(각각 10 ml×3회)로 추출시킨 후, 유기상을 합하고, 황산 나트륨 상에서 건조시켰다. 여액을 진공 중 증발시켜 농축하였다.

[3.2. 몇가지 특정 헥산 에틸 에스테르의 제조]

[실시예 5]

6-(모르폴린-4-일)-2-아세트아미도-2-에톡시-카르보닐-헥산산 에틸 에스테르의 제조 :

6-브로모-2-아세트아미도-2-에톡시카르보닐-헥산산 에틸 에스테르 70g을 출발 물질로 하여 모르폴린과 반응시키고 실리카겔 상에서 크로마토그래피(디클로로메탄, 메탄올/구배 : 0 내지 10메탄올 ; v/v) 시킨 후 순수 생성물 35g을 얻었다. 융점 : 58-59.

[실시예 6]

6-(피롤리딘-1-일)-2-아세트아미도-2-에톡시카르보닐-헥산산 에틸 에스테르의 제조 :

6-브로모-2-아세트아미도-2-에톡시카르보닐-헥산산 에틸 에스테르 352mg을 출발 물질로 하여 피롤리딘과 반응시키고 실리카겔 크로마토그래피(디클로로메탄 : 메탄올 = 7:3; v/v)시킨 후 순수 생성물 251mg을 얻었다. 융점 : 79-81.

[실시예 7]

6-(1-메틸-피페라진-4-일)-2-아세트아미도-2-에톡시카르보닐-헥산산 에틸 에스테르의 제조 :

6-브로모-2-아세트아미도-2-에톡시카르보닐-헥산산 에틸 에스테르 352mg을 출발 물질로 하여 1-메틸 -피페라진과 반응시키고 실리카겔 상에서 크로마토그래피(디클로로메탄 : 메탄 = 7:3; v/v)시킨 후 순수 생성물을 얻었다.

[실시예 8]

6-(피페리딘-1-일)-2-아세트아미도-2-에톡시-카르보닐-헥산산 에틸 에스테르의 제조 :

6-브로모-2-아세트아미도-2-에톡시카르보닐-헥산산 에틸 에스테르 352mg을 출발 물질로 하여 피페리딘과 반응시키고 실리카겔 상에서 크로마토그래피(디클로로메탄 : 메탄올 = 7:3; v/v)시킨 후, 순수 생성물 148mg을 얻었다. 융점 : 73-75.

[실시예 9]

6-(이미다졸)-2-아세트아미도-2-에톡시카르보닐-헥산산 에틸 에스테르의 제조 :

6-브로모-2-아세트아미도-2-에톡시카르보닐-헥산산 에틸 에스테르 352mg을 출발 물질로 하여 이미다졸과 반응시키고 실리카겔 상에서 크로마토그래피(디클로로메탄, 메탄올/구배 : 0 내지 10메탄올; v/v)시킨 후, 순수 생성물을 얻었다.

[실시예 10]

6-(피라졸)-2-아세트아미도-2-에톡시카르보닐-헥산산 에틸 에스테르의 제조 :

6-브로모-2-아세트아미도-2-에톡시카르보닐-헥산산 에틸 에스테르 352mg을 출발 물질로 하여 피라졸과 반응시키고 실리카겔 상에서 크로마토그래피(디클로로메탄 : 메탄올 = 7:3; v/v)시킨 후 순수 생성물을 얻었다.

[4. (S)-6-(티오모르폴린-1,1-디옥시드-4-일)-2-아미노-헥산산의 제조(실시예 12) :]

4.1. (S)-6-아미노-2-벤질옥시카르보닐아미노-헥산산 벤질 에스테르(Z-Lys-OBzl)의 제조 :

공지된 방법(예를 들면, E. Wunsch, in : "Methoden der Organischen Chemie(Methods of Organic Chemistry)", 제XV/1권 : "Synthese von Peptiden [Synthesis of Peptides]" (Georg Thieme Verlag, 1974), B. Bezas, L. Zeivas; J. Am. Chem. Soc. 83, 719(1961))에 따라 표제의 화합물을 제조하였다.

4.2. (S)-6-(티오모르폴린-1,1-디옥시드-4-일)-2-벤질옥시카르보닐아미노-헥산산 벤질 에스테르 :

Z-Lys-OBzl 5.6g을 메탄올 750ml와 디클로로메탄 750ml의 혼합물 중에 용해시켰다. 디비닐 술폰 1.8g을 첨가시킨 후 +20에서 6시간 교반시켰다. 용매를 진공 중에서 증류시켜 제거하고 잔류물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피(0 내지 10에틸 아세테이트/tert-부틸-메틸 에테르 구배)시켜 정제하였다. 수율 : 1.8g(오일).

4.3. (S)-6-(티오모르폴린-1,1-디옥시드-4-일)-2-아미노-헥산산

공지된 방법(예를 들면, E. Wunsch, in : "Methoden der Organischen Chemie, 제XV/1권 : Synthese von Peptiden" (Georg Thieme Verlag, 1974))에 따라 보호기의 제거를 수행시켰다.

5. (1-아자-시클로알크-1-일)-2-아세트아미도-2-에톡시카르보닐-펜탄산- 또는 헥산산 에틸 에스테르의 대응하는 비보호 α-아미노산으로의 전환.

제조 방법에 대응하는 에난티오머 혼합물로서 존재하는 상기 전구체를 먼저 화학자들에게 공지된 방법에 따라(1-아자-시클로알크-1-일)-2-아세트아미도-2-카르복시-펜탄산- 또는 -헥산산 에틸 에스테르르로 부분적으로 비누화시키고, 이어서 (1-아자-시클로알킬 -1-일)-2 -아세트아미도-펜탄산 또는 헥산산으로 탈카르복실화 시켰다. 효소적 라세미체 분리 후 전체적인 가수분해로 에난티오머-순수 아미노산을 얻었다.

이 방법은 예를 들면 하기 문헌에 기재되어 있다.

씨. 케이. 아코스타(C. K. Acosta) 등의 J, Chem. Research(M) 11, 914-934(1991).

케이. 폴커스(K. Folkers) 등의 Int. J. Pept. Prot. Res. 24, 197-200(1984).

6. 펩티드의 제조

고체상 기술 또는 표준 용해 기술에 따라 펩티드를 제조할 수 있다.

고체상 기술은 문헌(예를 들면, 제이. 엠. 스튜어드(J. M. STEWARD) 및 제이. 디. 영(J. D. YOUNG), Solid Phase Peptide Synthesis, Pierce Chem. Company, Rockford, Ill, 1984)에 기재되어 있으며, 용해 기술은 문헌(예를 들면, Methoden der Organischen Chemie(HOUBEN/WEYL), 제15권/제1호 및 제2호, E. WUNSCH(편집자), Thieme Verlag Stuttgart, 1974)에 기재되어 있다.

상기 모든 합성법의 공통적인 특징은 α-아미노산기가 선택적으로 방출될 수 있도록 하기 위한 α-아미노기 및 임의로 존재하는 반응성 측쇄의 블로킹이다. 이 방법은 활성화 및 N-보호 아미노산의 카르복실기와 제2아미노산의 유리 α-아미노기와의 선택적 반응을 제공한다. 커플링 완료 후, α-아미노 보호기를 분리시킬 수 있으며 그 다음 커플링을 수행할 수 있다. 고체상 합성의 경우는 C-말단 카르복실기를 캐리어 수지에 결합시키며, 이를 용해법을 사용하여 적당한 기로 보호시킬 수 있다. 양 방법을 사용하면 개별 아미노산 대신에 적당한 펩티드 단편을 사용할 수도 있다. 양 방법에 따라 보호 또는 부분적으로 보호된 측쇄 관능기를 갖는 폴리펩티드를 얻는다. 보호기의 분리 후 HPLC에 의해 목적하는 펩티드를 순수하게 얻을 수 있다.

[실시예 13 내지 15]

펩티드 화합물의 예로서 앞에서 기재한 제조 방법에 따라 제조한 3종의 데카펩티드를 기재하였다. 3종의 데카펩티드의 성질을 표의 형식으로 기재하였다. 약어에 대한 설명은 실시예 15 다음에 기재되어 있다.

[실시예 13]

FAB-MS 분자 피크 m/e 1472.6(+H). 계산된 분자량 : 1473.1

실시예 13의 펩티드 화합물은 바람직한 실시태양이었다.

[실시예 14]

FAB-MS 분자 피크 m/e 1471.9(+H). 계산된 분자량 : 1472.2

[실시예 15]

FAB-MS 분자 피크 m/e 1513.8(+H), 계산된 분자량 : 1514.2

a) ASA = 가수분해물의 아미노산 분석.

가수분해 조건 : 6M HCl 용액, 110, 24시간.

b) RAC = 목적하지 않은 에난티오머 부분().

에이취. 프랭크(H. Frank), 지. 제이. 니콜슨(G, J. Nicholson) 및 이. 바이엘(E. Bayer)의 J. Chromatogr. Science 15, 174(1977)에 따른 측정.

c) 시험된 Cit- 및 Ahx(Mor) 유도체는 동일한 가스 크로마토그래피 체류 시간을 나타냈기 때문에 측정이 불가능하였다.

d) D-Ahx(Mor) : L-Ahx(Mor)의 비율은 1:1이었다.

7. N⁶-치환 리신 유도체의 제조

[실시예 16]

D-3-토실아미도헥사히드로-2-아제피논의 제조

D-3-아미노-헥사히드로-2-아제피논 18g을 물 180ml 중에 용해시키고 미세하게 과립화된 수산화나트륨 5.6g 및 염화 토실 29.5g과 혼합시켰다. 현탁액을 격렬히 교반시켰다. pH가 감소되자마자 수산화나트륨으로 pH를 9로 조정하였다.

혼합물을 철야 교반시키고, 분리된 생성물을 여과하여 제거시키고 물로 세척하고 결정화시키거나 또는 가온된 메탄올로부터 분해시켰다. 융점이 213인 D-3-토실아미노-헥사히드-2-아제피논 25.5g을 얻었다.

[실시예 17]

N²-토실-D-리신-히드로클로라이드의 제조

12염산 1.2l 중의 D-3 -토실아미도헥사히드로-2 -아제피논 14.8g의 현탁액을 투명한 용액이 생성될 때까지 1.5 내지 2시간 동안 환류시켰다. 이어서, 용액을 진공 중에서 증발시켜 건조하였다. 잔류물을 가온된 헥산/이소프로판올로 분해시키고, 백색 결정을 흡인시켜 여액을 증발시켜 다소 농축시키고 추가 결정화를 위해 -20로 되게하였다. 융점이 189인 D-3-토실-D-리신-히드로클로라이드 15.1g을 얻었다.

[실시예 18]

2,2'-옥시비스-(아세트알데히드)의 제조

1,4-안히드로메소 -에리타이트 25g을 물 400ml 중에 용해시켰다. 이어서, 고체 과요오드산나트륨 41.1g을 빙냉시킨 생성 용액에 첨가시키고, 혼합물을 철야 교반시키고 고체 중 탄산나트륨으로 pH를 7.4로 조정하였다. 아세토니트릴 400ml를 혼합시키고, 무기 염을 여과시켜 제거하고 2,2'-옥시비스(아세트알데히드) 용액을 얻었다.

[실시예 19]

N²-토실-6-(모르폴린-1-일)-2-D-아미노헥산산의 제조

N²-토실-D-리신 37.8g을 3회 증류시킨 물 22 l 중에 용해시키고, 용액을 중탄산나트륨으로 pH를 7.4로 조정하였다. 이어서, 수소화시아노붕소 나트륨을 첨가하고 순수하게 2,2'-옥시-비스(아세트알데히드) 용액을 제조하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12일 보관 한 후 진공 중에서 분할하여 증발시켜 농축하였다. 잔류물을 고 진공 중에서 건조시키고 무수 메탄올/디클로로 메탄(1+1) 중에 용해시키고, 무기 염을 여과시켜 제거하고, 얻은 조생성물을 용출제로서 메탄올/디클로로메탄(1+1)을 사용하여 실리카겔 칼럼 상에서 개략적으로 크로마토그래피시켰다.

조 생성물로서 120에서 분해가 시작되는 N²-토실-6 -(모르폴린-1-일)-2 -D-아미노헥산산 25.6g을 얻었다.

[실시예 20]

6-(모르폴린-1-일)-2-D-아미노헥산산의 제조

-70에서, N²-토실-6 -(모르폴린-1-일)-2 -D-아미노헥산 16.8g을 액체 암모니아 500ml(수산 칼륨 상에서 건조시킴) 중에 용해시킨 후 -40내지 33에서 진한 푸른색이 생성될 때까지 소량의 나트륨 입자와 3분 이상 혼합시켰다. 이어서, 몇 방울의 아세트산을 첨가하여 용액을 탈색시키고 암모니아를 철야 증발시켰다. 얻은 잔류물을 고 진공 중에서 암모니아 잔류물을 제거하고, 이를 3회 증류시킨 물에 용해시키고 묽은 염산으로 pH를 4로 조정하였다. 아미노산을 강한 산성 이온 교환기 중에 흡수시키고, 이를 칼럼에서 3염산 및 물로 세척하고 화합물을 3N 수성 암모니아로 용출시켰다. 용매를 진공, 이어서 고진공 중에서 흡인 여과시켜, 6-(모르폴린-1 -일)-2-D -아미노헥산산 8.7g을 얻고, 이를 소량의 메탄올/디클로로메탄 중에 분해시켰다.

융점 = 325초과.

에난티오머 : 100초과.

[실시예 21]

N⁶-이소프로필 -N²-토실-D-리신의 제조

N-토실-D -리신-히드로클로라이드 2g을 빙초산 5ml, 무수 아세트산 나트륨 1.5g, 물 10ml 및 아세톤 5ml와 혼합시켰다. 이어서, 충분한 빙초산을 교반하면서 첨가하여 투명한 용액이 생성되었다. 혼합물을 0로 냉각시키고 수소화붕소나트륨 2g을 교반시키면서 소량씩 첨가하였다. 이어서, 아세톤 5ml를 다시 첨가하고, 다시 수소화붕소 나트륨 총 2g을 소량씩 첨가하였다.

얻은 현탁액을 진공, 이어서 고진공에서 증발시켜 농축하고, 잔류물을 가온된 메탄올 중에 용해시켰다. 10로 냉각시켰을 때 N⁶-이소프로필- N²-토실-D -리신 1.2g이 결정화되었다.

융점이 251인 백색 침상물이 얻어졌다.

모액을 결정화시켜 추가량의 화합물을 얻을 수 있었다.

[실시예 22]

N⁶-이소프로필 -D-리신의 제조

7.5. 의 실시예 조건하에서 N⁶-이소프로필 -N²-토실-D-리신 342mg을 반응시켰다. 융점이 224인 N⁶-이소프로필 -D-리신 170mg을 얻었다.

에난티오머: 98.6초과.

Claims (9)

1. 하기 일반식(I)의 펩티드 화합물

   상기 식에서, X는 나프토일, 나프틸아세틸, 나프틸프로피오닐, 벤조일 또는 탄소 원자수 1 내지 7의 아실기이고, X₁은 D-(1)-Nal, D-(2)-Nal, D-Phe, D-(4-Y)-Phe, D-(3)-Qal 또는 직접 결합이고, 여기서, Y는 F, Br 또는 Cl이며, X₂는 D-Phe, D-(4-Y)-Phe 또는 직접 결합이고, 여기서, Y는 상기 정의한 바와 동일하며, X₃은 D-Trp, D-Phe, D-(4-Y)-Phe, D-(3)-Pal, D-(2)-Nal 또는 직접 결합이고, 여기서, Y는 상기 X₁에서 정의한 바와 동일하며, X₆은 D-Cit, D-Hci, D-Orn, D-Lys 또는 D-Neu이고, X₈은 L-Orn, L-Arg, L-Lys 또는 L-Neu이고, X₆및 X₈기 중 적어도 하나는 Neu이며, X₁₀은 D-A₁₃-NH₂, Gly-NH₂, 아자글리신, -NHEt 또는 -NH(CO)NH₂이고, Neu는 하기 일반식(II) :

   (식 중, Z는

   R₁은 수소 원자 또는 C₁-C₄알킬기이고, R₂는 수소 원자, C₁-C₄알킬기 또는 아미노기이고, n은 1 내지 8이고, m은 Z가 -(CH₂)-, -CO- 또는 -CH(OH)-기 중 어느 하나인 경우 1 내지 3이거나, 또는 Z가 -O-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR₁-, 또는 -N(CO)R₂-기인 경우 2 및 3이고, p는 1 내지 3임)의 기이거나, 또는 Neu는 하기 일반식(III) :

   (식 중, n은 1 내지 8임)의 기이거나, 또는 Neu는 하기 일반식(IV) :

   (식 중, W는

   n은 1 내지 8의 정수임)의 기이다.
2. 제1항에 있어서, Neu가 하기 일반식(IX) :

   (식 중, Z₁은

   결합이고, n₁은 3 내지 6임)의 기인 펩티드 화합물.
3. 제2항에 있어서, Neu가 하기 일반식(X) :

   (식 중, n₁은 3 내지 6임)의 기인 펩티드 화합물.
4. 제3항에 있어서, Neu가

   기인 펩티드 화합물.
5. 제4항에 있어서, Neu가 X₆또는 X₈인 펩티드 화합물.
6. 제1항에 있어서, Neu가 하기 식(XIII) :

   의 기인 펩티드 화합물.
7. 제1항에 있어서, Neu가 하기 식(XIV) :

   의 기인 펩티드 화합물.
8. 제1항 내지 7항 중 어느 한 항에 있어서, X가 에타노일기이고, X₁이 D-Nal이고, X₂가 D-Cpa이고, X₃이 D-Pal이고, X₁₀이 D-Ala-NH₂인 펩티드 화합물.
9. 1종 이상의 일반식(I)의 화합물 및 통상적인 보조제 및 부형제를 함유하는, LHRH-길항 작용에 의해 억제될 수 있는 질환 또는 호르몬-의존성 상태를 치료하기 위한 제제.