KR0184341B1 - Micro-organism producing non-reducing sugar - Google Patents

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Abstract

본 발명은 말토오스로부터 트레할로오스를 생성하는 신규한 아시네토박터로피(Acinetobacter lwoffii) S8 균주에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 말토오스 용액을 본 발명의 신규한 아시네토박터 로피 S8 균주의 파쇄액과 혼합하여 트레할로오스를 제조하는 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a novel strain of Acinetobacter lwoffii S8 which produces trehalose from maltose. The present invention also relates to a method for preparing trehalose by mixing a maltose solution with a disruption solution of a novel strain of Asn Bacteriophy S8 of the present invention.

Description

비환원성 당을 생성하는 미생물Microorganisms that generate non-reducing sugars

트레할로오스는 미생물, 곰팡이, 효모, 식물, 곤충, 동물 등의 여러 생물체에 광범위하게 존재하는 천연물질로서 강한 보습성과 화학적 안정성 때문에 생약제재, 의약품, 식품 등의 첨가제로 주목받고 있으나 트레할로오스의 생산 가격이높아 경제성이 없으므로 의약, 식품등의 첨가제로 사용하기는 아직 이른 한편, 트레할로오스 생산 공정에서 가장 중요시되는 점은 트레할로오스 생성 효소를 함유하고 있는 균주를 확보하는 것이며, 이러한 관점에서, 본 발명에서, 본 발명의 목적은 트레할로오스를 생산하는 신규한 미생물을 개발하는데 있다. 또한, 본 발명의 목적은 그러한 미생물을 이용하여 경제적으로 유리한 트레할로오스를 생산하는 개선된 방법을 개발하는데 있다.Trehalose is a natural substance widely present in various organisms such as microorganisms, fungi, yeast, plants, insects, animals and the like. As a strong moisturizing and chemical stability, it is attracting attention as an additive for herbal medicines, medicines and foods. Since the production cost of oats is high, owing to the lack of economic efficiency, it is not yet used as an additive for medicines and foods, but the most important thing in the trehalose production process is to secure a strain containing a trehalose-producing enzyme In view of this, in the present invention, the object of the present invention is to develop a novel microorganism producing trehalose. It is also an object of the present invention to develop an improved method of producing economically advantageous trehalose using such microorganisms.

트레할로오스(α-D-글로코피라노실-α-D-글루코피라노사이드)는 글루코오스 2개 분자가 α-1, 1 결합을 형성한 비 환원성 당으로서 세균, 효모, 곰팡이, 버섯, 곤충등 자연계에 광범위하게 존재하는 천연물이다. 트레할로오스는 생체내에서 저장 에너지원 (Elbein 등 : Adv. Carbohydr. Chem. Biochem., 1974, 30, 227-256), 세포막의 구성 성분 (Winder 등 : Biochem. Biophys. Acta, 1964, 90, 442-444), 내 삼투성 물질로서의 기능을 갖는다. 트레할로오스의 생체내 기능 중 내 삼투성이 그의 이용 가치 때문에 많은 관심이 모아지고 있다. 효모와 대장균등에서 세포외 염류가 축적되어 삼투압이 증가되며 수분이 고갈되는 상태에 트레할로오스 합성이 유도되어 세포가 고 염류의 농도에 저항성을 갖도록한다 (Giaever 등 : J. Bac., 1988, 170, 2841-2849, Lillie 등 : J. Bac., 1980, 143, 1384-1394). 특히 사막에 사는 식물인 Seaginella lepidophylla는 일년 내내 사막의 건조한 기후를 버티고 우기에 소량 내리는 비에 다시 소생하는 것으로 알려져있다. Seaginella lepidophylla가 사막의 건조한 기후에 말라죽지 않고 견딜 수 있는 능력은 이 식물에 많이 함유되어 있는 트레할로오스 때문으로 트레할로오스는 세포막의 외부를 둘러싸서 세포의 탈수를 방지하여 세포가 말라죽지 않게 한다. 트레할로오스의 강한 보습 효과와 안정성, 즉 트레할로오스는 비환원성 당이므로 아미노산이나 단백질 등과 같은 아미노기를 가진 물질과 아미노-카보닐 반응을 일으키지 않으므로 아미노산을 함유한 물질을 손상시키지 않기때문에 트레할로오스가 생약재재나 식품, 의약품의 안정성을 높이는 첨가제로 주목받고 있다. 트레할로오스는 단일 항체 제재 등에 첨가하여 건조시켰을 때, 단일 항체의 안정성을 증가시키며, 이외에도 항체나 효소, 적혈구, 탄수화물 등의 안정성을 크게 높이며, 또한 트레할로오스는 식품에 첨가하면 건조시 방향 성분의 잔류량이 증가하므로 트레할로오스를 사용하면, 커피등 여러 건조 식품의 품질을 향상시킬 수 있다. 그러나 아직 트레할로오스는 첨가제로 사용하기는 아직 이르다. 트레할로오스가 안정제로 작용하려면 10-30% 가량 함유되어야 하는데, 아직까지 트레할로오스의 가격이 높아 경제성이 없으므로 트레할로오스의 생산비를 낮추기 위한 방법이 요망되고 있다. 종래의 트레할로오스 생산 방법은 효모를 이용하는 방법(1, Yoshikwa 등 : Biosci. Biotech. Biochem., 1994, 58, 1226-1230)과 트레할로오스-6-포스페이트 포스파타제(trehalose-6-phosphate phosphatase)와 트레할로오스-6-포스페이트 포스포릴라제(trehalose-6-phosphate phosphorylase)(2, Killick 등 : Arch. Biochem. Biopys., 1979, 196, 121-133)를 사용하는 방법, 말토올리고실 트레할로오스 신타제(maltooligosyl trehalose synthase (MTSase))와 말토올리고실 트레할로오스 트레할로하드롤라제 (maltooligosyl trehalose trehalohydrolase (MTHase))를 사용하는 방법(3, Nishimoto등, 1995, Biosci. Biotech. Biochem., 59, 2189-2190), 트레할로오스 신타제에의해 말토오스로부터 직접 한 단계의 효소 반응에 의한 트레할로오스를 합성하는 방법(4, Biosci. Biotech. Biochem., 1995, 59, 2189-2190)등이 알려져 있다. (1)의 방법은 효모 균체내에 트레할로오스의 함유량이 낮으며, 이를 추출, 정제하는 공정이 복잡하여, 생산 방법으로 적절치 못하며, (2)의 방법은 효소 기질로 사용되는 UDP-글루코오스와 UDP-글루코오스-6-포스페이트의 값이 비싸며, 효소 반응이 가역적이므로 대량 생산에 적합하지 못하다. (3)과 (4)의 방법이 대량 생산을 위한 생산법으로 모색되고 있는데, 이러한 생산 공정에서 가장 중요시되는 점은 균주의 확보이며, 이렇게 확보된 균주는 그 자체로 생산용 균주로 사용될 수 있으며, 유전공학적 방법에 의한 생산성 향상을 위한 유전자원으로도 활용될 수 있다.Trehalose (? -D-glucopyranosyl-? -D-glucopyranoside) is a non-reducing sugar in which two molecules of glucose form? -1,1 bond, and is a bacterium, yeast, mold, mushroom, It is a natural product that exists extensively in nature such as insects. Biochem. Biophys. Acta, 1964, 90 (1986)), the constituents of cell membranes (Winder et al., Biochem. Biophys. , 442-444), and functions as an osmotic material. Among the in vivo functions of trehalose, there is a lot of interest because of its use value of the osmosis. In the yeast, E. coli, etc., extracellular salts accumulate to increase the osmotic pressure and cause the trehalose synthesis to be induced in the dehydrated state so that the cells are resistant to the high salt concentration (Giaever et al., J. Bac., 1988, 170, 2841-2849, Lillie et al., J. Bac., 1980, 143, 1384-1394). In particular, Seaginella lepidophylla, a desert plant, is said to resurface in a rainy season with a dry climate in the desert throughout the year. The ability of Seaginella lepidophylla to withstand the dry climate of the desert can be tolerated by trehalose, which is abundant in these plants. Trehalose surrounds the cell membrane and prevents cell dehydration, Do not. Trehalose is a non-reducing sugar, it does not cause an amino-carbonyl reaction with a substance having an amino group such as an amino acid or a protein, so it does not damage an amino acid-containing substance, Halos has attracted attention as an additive to enhance the stability of herbal medicines, foods and medicines. When trehalose is added to a monoclonal antibody or the like, it increases the stability of the monoclonal antibody. In addition, the stability of antibodies, enzymes, red blood cells, carbohydrates and the like is greatly enhanced. When trehalose is added to foods, Since the residual amount of the direction component is increased, the quality of various dry food such as coffee can be improved by using trehalose. However, trehalose has not yet been used as an additive. In order for trehalose to act as a stabilizer, about 10-30% of trehalose should be contained. However, since trehalose is high in price, it is not economical, and a method for lowering the production cost of trehalose is desired. Conventional trehalose production methods include a method using yeast (Yoshikwa et al., Biosci. Biotech. Biochem., 1994, 58, 1226-1230) and trehalose-6-phosphate phosphatase and trehalose-6-phosphate phosphorylase (2, Killick, Arch. Biochem. Biopys., 1979, 196, 121-133) A method using maltooligosyl trehalose synthase (MTSase) and maltooligosyl trehalose trehalohydrolase (MTHase) (3, Nishimoto et al., 1995, Biosci. Biotech. Biochem., 59, 2189-2190), a method for synthesizing trehalose by a single step of an enzymatic reaction directly from maltose by trehalose synthase (4, Biosci. Biotech. Biochem., 1995, 59, 2189-2190). (1) has a low content of trehalose in the yeast cells, and the extraction and purification processes thereof are complicated, which is not suitable for the production method. In the method (2), UDP-glucose Since the value of UDP-glucose-6-phosphate is high and the enzyme reaction is reversible, it is not suitable for mass production. (3) and (4) have been sought as a production method for mass production. The most important point in such a production process is securing the strain, and the thus obtained strain can be used as a strain for production itself , And can be used as a genetic resource for productivity improvement by genetic engineering methods.

본 발명자들은 말토오스로부터 간단한 생합성 경로를 통해 트레할로오스를 대량생산하는데 이용될 수 있는 적합한 미생물을 분리하고, 이 균주를 이용하여 의약품이나 식품등의 첨가제로 이용할 수 있을 정도의 경제적으로 트레할로오스를 대량생산하는 방법을 개발하는데 많은 노력을 기울여 왔다.The present inventors have succeeded in isolating a suitable microorganism which can be used for the mass production of trehalose from maltose through a simple biosynthetic pathway and using the strain as an additive for medicines and foods, Much effort has been devoted to developing methods for mass production of oats.

제1도는 말토오스 용액에 본 발명에 따른 미생물 아시네토박터 로피 S8의 세포 파쇄액을 첨가하여 반응시킨 뒤 반응액의 당들을 얇은박 크로마토그래피(TLC)로 분석한 결과의 사진이다. M 및 T는 각각 말토오스 및 트레할로오스를 나타낸다.FIG. 1 is a photograph of the results of analysis of sugar in the reaction solution by thin-layer chromatography (TLC) after adding the cell lysate of microorganism Ashinobacteriolactus S8 according to the present invention to maltose solution and reacting. M and T represent maltose and trehalose, respectively.

제2도는 말토오스 용액에 본 발명에 따른 미생물의 세포 파쇄액을 첨가하여 반응시킨 뒤 반응액 시료 (제2a도) 및 표준 트레할로오스 시료 (제2b도)의 당을 기체 크로마토그래피 (GC)로 분석한 결과의 그래프이다. Tre는 트레할로오스를 나타낸다.2 shows the results of gas chromatography (GC) of a reaction solution sample (FIG. 2a) and a standard trehalose sample (FIG. 2b) after adding a cell lysate of a microorganism according to the present invention to a maltose solution, As shown in FIG. Tre represents trehalose.

제3도는 표준 트레할로오스 시료 (제3a도), 말토오스 용액에 본 발명에 따른 미생물의 세포 파쇄액을 첨가하여 반응종료 직후의 시료 (제3b도), 및 말토오스 용액에 본 발명에 따른 미생물의 세포 파쇄액을 첨가하여 반응종료 후의 반응액에 트레할레이즈를 첨가한 시료 (제3c도)의 당을 액체 고속 크로마토그래피 (HPLC)로 분석한 결과의 그래프이다. Tre, Mal 및 Glu는 트레할로오스, 말토오스 및 글루코오스를 나타낸다.FIG. 3 is a schematic view showing a sample (FIG. 3b) immediately after completion of the reaction by adding a cell lysate of a microorganism according to the present invention to a standard trehalose sample (FIG. 3a) and a maltose solution and a microorganism (3c) obtained by adding trehalase to the reaction solution after the completion of the reaction by the addition of a cell lysate of the cell lysate of the present invention. Tre, Mal and Glu represent trehalose, maltose and glucose.

제4도는 본 발명에 따른 미생물의 16000배 전자현미경 관찰 사진이다.FIG. 4 is a 16000-magnification electron micrograph of the microorganism according to the present invention.

제5도는 본 발명에 따른 미생물의 8500배 전자현미경 관찰 사진이다.FIG. 5 is an 8500-fold electron microscope photograph of the microorganism according to the present invention.

본 발명은 말토오스를 트레할로오스로 전환시키는 능력이 있는 신규한 미생물에 관한 것이다.The present invention relates to a novel microorganism capable of converting maltose into trehalose.

본 발명자들은 트레할로오스 생합성 효소(trehalose synthase)에 의해 말토오스로부터 트레할로오스를 생산하는 미생물을 토양에서 분리 동정하였으며, 이의 미생물은 형태학적 및 생리학적 특성상 아시네토박터 로피(Acinetobater lwoffii)종으로 밝혀졌으며, 이는 아직 어느 곳에서도 말토오스를 트레할로오스로 전환시킬 수 있는 능력이 있는 미생물로 보고된 바 없다. 본 발명자들은 이 미생물을 아시네토박터 로피 S8로 명명하고, 1996년 11월 19일자로 한국 종균협회에 기탁하고 수탁번호 KFCC-10927을 부여받았다.The present inventors isolated and identified a microorganism producing trehalose from maltose by a trehalose synthase in soil, and the microorganism was identified as Acinetobater lwoffii species in terms of morphological and physiological characteristics , Which has not been reported anywhere yet as a microorganism capable of converting maltose into trehalose. The present inventors named this microorganism as Asnithobacterium rosy S8 and deposited it on Nov. 19, 1996 with the Korean Society of Bacterial Kidney and received the accession number KFCC-10927.

지금까지 보고된 미생물은 말토오스를 트레할로오스로 전환 시키는 과정 중에 부생성물로서 글루코오스를 생성하는 반면에 본 발명에서 분리된 미생물은 트레할로오스 이외의 다른 부생성물을 생산하지 않는다는 장점을 갖는다.The microorganisms reported so far have the advantage that the microorganisms isolated in the present invention do not produce any byproducts other than trehalose while producing glucose as a byproduct during the conversion of maltose to trehalose.

이런 관점에서, 본 발명은 상기한 본 발명의 미생물 아시네토박터 로피 S8의 세포 파쇄액을 말토오스용액과 혼합하여 트레할로오스를 제조하는 방법에 관한 것이다.In view of the above, the present invention relates to a method for producing trehalose by mixing the cell lysate of the microorganism Asnithobacter roff S8 of the present invention with a maltose solution.

본 발명의 미생물을 분리 및 동정한 과정을 이하 실시예를 통해 상세히 기술한다.The process of isolating and identifying the microorganism of the present invention will be described in detail in the following examples.

[실시예 1][Example 1]

미생물 스크리닝Microbial Screening

토양에서 분리한 미생물 한 백금이를 LB 배양액 (이스트 익스트랙트 : 0.5%, 박토 트립톤 : 1.0%, 소금 : 0.5%)이 50ml 들어 있는 500ml 삼각 플라스크에 접종하여 28℃에서 2일간 배양하였다. 4℃, 8000 rpm에서 5분간 원심 분리하여 균체를 회수한 다음 생리 식염수로 세척하고 10 ml의 인산 완충 용액(10 mM, pH 7.0)에 현탁하였다. 초음파 파쇄기를 사용하여 균체를 파쇄한 다음 원심 분리(1200 rpm, 4℃,20분)하여 균체파쇄물을 침전시킨 다음 상등액을 조효소액으로 사용하였다. 조효소액의 단백질 농도는 브래드포드법에 의하여 결정하였다. 단백질 100 ㎍, 100 mM 말토오스 20 ㎕ 및 100 mM 인산완충 용액 (pH 7.0) 10 ㎕를 잘 섞은 다음 최종 부피가 100 ㎕가 되도록 증류수를 가한후 30℃에서 20시간 반응시켰다. 반응액 중에 존재하는 당을 TLC, HPLC 및 GC 로 분석하였다.One platinum microbe isolated from the soil was inoculated into a 500 ml Erlenmeyer flask containing 50 ml of LB culture medium (East extract: 0.5%, bactotryptone: 1.0%, salt: 0.5%) and cultured at 28 ° C for 2 days. The cells were recovered by centrifugation at 4 ° C and 8000 rpm for 5 minutes, washed with physiological saline and suspended in 10 ml of phosphate buffer (10 mM, pH 7.0). The cells were disrupted by using an ultrasonic shredder and centrifuged (1200 rpm, 4 ° C, 20 minutes) to precipitate the cell lysate. The supernatant was used as a crude enzyme solution. The protein concentration of crude enzyme solution was determined by the Bradford method. 100 μg of protein, 20 μl of 100 mM maltose, and 10 μl of 100 mM phosphate buffer solution (pH 7.0) were mixed well, and distilled water was added to a final volume of 100 μl, followed by reaction at 30 ° C for 20 hours. The sugars present in the reaction solution were analyzed by TLC, HPLC and GC.

[실시예 2][Example 2]

TLC에 의한 트레할로오스 분석Analysis of trehalose by TLC

반응이 끝난 반응 혼합액 5㎕를 Kieselgel 60 TLC판 (머크사, 독일)에 점적한 다음 n-부탄올-피리딘-물 (7 :3 :1)의 용매가 들어 있는 용기에 넣어 시료를 전개한 후 메틸알콜 속에 들어 있는 20% 황산 용액을 분무한 다음 110℃에서 10분간 건조시켜 시료 속의 당들을 확인하였다. 1000개 가량의 토양 미생물을 조사한 결과 이중 2개의 미생물이 말토오스를 트레할로오스로 전환시키는 능력이 있음이 확인되었다. 도1에서 보면 반응 초기 시료에서는 트레할로오스가 존재하지 않으나 반응 종료 후의 시료에서는 트레할로오스 표준 시료와 같은 위치에서 당이 검출되었다.After 5 μl of the reaction mixture was added to a Kieselgel 60 TLC plate (Merck, Germany), the mixture was placed in a container containing n-butanol-pyridine-water (7: 3: 1) The 20% sulfuric acid solution in alcohol was sprayed and dried at 110 ° C for 10 minutes to identify sugars in the sample. A survey of about 1,000 soil microorganisms showed that two of the microorganisms had the ability to convert maltose to trehalose. In FIG. 1, no trehalose was present in the initial sample of the reaction but a sugar was detected at the same position as the trehalose standard sample in the sample after the reaction.

[실시예 3][Example 3]

기체 크로마토그래피에 의한 트레할로오스 분석Analysis of trehalose by gas chromatography

반응이 끝난 혼합액 10 ㎕를 감압 건조기를 완전히 말린 뒤 이를 디메틸포름아미드 20㎕에 용해시킨 다음 1% 크리메틸클로로실란을 함유한 비스(트리메틸)트리플로로아세트아미드를 동 부피를 가하여 트리메틸실란 유도체를 만들었다. 이중 1㎕를 취하여 GC 분석에 사용하였다. 도2에서 보는 바와 같이 표준 트레할로오스 시료와 같은 시간에서 반응액의 피크가 관찰되었다.10 μl of the reaction mixture was completely dried in a vacuum dryer, and dissolved in 20 μl of dimethylformamide. Bis (trimethyl) trifluoroacetamide containing 1% of chloromethylchlorosilane was added to the volume to give a trimethylsilane derivative made. 1 μl of this was taken and used for GC analysis. As shown in FIG. 2, a peak of the reaction solution was observed at the same time as the standard trehalose sample.

[실시예 4][Example 4]

HPLC에 의한 트레할로오스의 분석Analysis of trehalose by HPLC

반응이 끝난 혼합액의 절반을 취하여 동 부피의 페놀을 처리하여 단백질을 제거한 다음 HPLC 분석용 시료로 사용하였다. 시료 용액은 표준 트레할로오스와 같은 시간에서 피크를 보이는 것이 관찰되었다. 한편 반응이 끝난 혼합액의 나머지 절반을 100℃에서 10분간 가열 처리하여 효소 활성을 정지시킨 다음 여기에 α-1, 1-트레할로오스에 특이적으로 작용하는 트레할레이즈 (시그마)를 처리하여 37℃에서 2시간 반응시켰다. 반응 종료 후 동 부피의 페놀 용액을 가하여 단백질을 제거한 다음 HPLC 분석을 실시한 결과 표준 트레할로오스와 같은 시간에서 관찰되는 피크가 없어지는 것이 관찰되었다.Half of the reaction mixture was treated with the same volume of phenol to remove proteins and used as a sample for HPLC analysis. The sample solution was observed to show a peak at the same time as the standard trehalose. On the other hand, the other half of the reaction mixture was heat-treated at 100 ° C for 10 minutes to stop the enzyme activity, and treated with trehalase (sigma) specifically acting on α-1, 1-trehalose Followed by reaction at 37 ° C for 2 hours. After completion of the reaction, a phenol solution of the same volume was added to remove the protein, followed by HPLC analysis. As a result, it was observed that the peak observed at the same time as the standard trehalose disappears.

TLC, GC, HPLC 분석 결과로부터 본 발명자들이 분리 동정한 균주는 말토오스를 트레할로오스로 전환시킬 수 있는 능력이 있음이 확인되었다.From the results of TLC, GC and HPLC analysis, it was confirmed that the strain isolated and identified by the present inventors has an ability to convert maltose to trehalose.

[실시예 5][Example 5]

말토오스를 트레할로오스로 전환시킬 수 있는 미생물의 동정Identification of microorganisms capable of converting maltose into trehalose

본 발명에서 분리한 토양 미생물의 형태를 전자 현미경으로 관찰하였으며, 그 결과 미생물은 간균이고 편모를 갖고 있으며, 0/F 테스트 결과 호기성이고, 그램 염색시 음성 반응을 보인다. 이 미생물의 생리학적 특징에 의한 분리 동정 결과가 표 1에 요약되어 있다. 이상의 성질에 의거하여 문헌 (Bergay's Manual of Systemic Bacteriology, 1984)을 참고로 하여 이미 문헌과 특허에 발표된 미생물과 비교하여 보았다. 그 결과 본 발명에서 분리한 균의 특성이 99%가 아세네토박터 로피 종으로 밝혀졌으나, 아시네토박터 속 균주는 비운동성(non-motile)인 것으로 알려져 있는 한편 본 발명의 균주는 편모를 갖고 있음으로 비발효성 그램음성 바실러스 (Nonfermenting Gram-Negative Bacillus)일 가능성도 배제할 수는 없다.The morphology of the soil microorganisms isolated in the present invention was observed with an electron microscope. As a result, the microorganism was bacterium and had flagella, and it was aerobic with 0 / F test and showed a negative reaction upon Gram stain. Table 1 summarizes the results of isolation and identification by physiological characteristics of this microorganism. Based on the above-described properties, reference was made to microorganisms already published in literature and patents with reference to Bergay's Manual of Systemic Bacteriology (1984). As a result, 99% of the strains isolated in the present invention were found to be aseptic bacteriophage species, while the strains belonging to the genus Asineto bacterium were known to be non-motile, while the strains of the present invention had flagella It is not possible to exclude the possibility of nonfermenting Gram-Negative Bacillus.

본 발명의 미생물 아시네토박터 로피 S8은 말토오스로부터 트레할로오스를 생성하는 능력을 갖고 있을 뿐만아니라 말토오스를 트레할로오스로 전환시키는 과정 중에 글루코오스와 같은 부생성물을 생성하지 않고 오로지 트레할로오스만을 생성한다는 이점을 지니고 있다. 따라서, 이와 같은 특성을 지닌 미생물을 이용했을 때 트레할로오스를 경제적인 가격으로 대량생산할 수 있다.The microorganism of the present invention is not only capable of producing trehalose from maltose but also capable of producing trehalose only in the process of converting maltose into trehalose without producing a side product such as glucose, And the like. Therefore, trehalose can be mass-produced at an economical price when microorganisms having such characteristics are used.

Claims (6)

말토오스로부터 트레할로오스를 생성하는 아시네토박터 로피 S8 균주(KFCC-10927).Ashinobacterium Sf8 strain (KFCC-10927) which produces trehalose from maltose. 제1항에 있어서, 부산물로서 글루코오스를 생성하지 않는 균주.The strain according to claim 1, which does not produce glucose as a by-product. 제1항 또는 2항에 있어서, 편모를 1개 지닌 균주.The strain according to claim 1 or 2, having a single flagella. 제1항 또는 2항에 있어서, 그람 음성인 균주.The strain according to claim 1 or 2, wherein the strain is gram-negative. 제1항 또는 2항에 있어서, 호기성인 균주.The aerobic strain according to claim 1 or 2, 말토오스 용액을 제1항에 따른 균주의 파쇄액과 혼합하여 트레할로오스를 제조하는 방법.A method for producing trehalose by mixing a maltose solution with a disruption solution of the strain according to claim 1.
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