KR0154496B1 - 액상 생체고분자 겔을 이용한 미생물 농약의 제조 방법 - Google Patents

액상 생체고분자 겔을 이용한 미생물 농약의 제조 방법

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Abstract

본 발명은 미생물이 이용할 수 있는 생체 고분자를 포함하는 천연 물질, 그로부터 추출된 미생물이 이용할 수 있는 생체 고분자 및 그들의 유도체를 물과 혼합하여 고온에서 겔 상태로 만들고; 상기 겔을 저온으로 냉각시키고; 하나 이상의 길항 미생물을 상기 겔과 혼합하는 단계들을 포함하는 액상 생체고분자 겔내에 캡슐화된 미생물 농약의 제조 방법 및 그에 의해 제조된 미생물 농약에 관한 것이다.

Description

액상 생체고분자 겔을 이용한 미생물 농약의 제조 방법
본 발명은 액상 생체고분자 겔을 이용한 미생물 농약의 제조 방법에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 다양한 길항 미생물을 액상의 천연 생체고분자 겔내에 캡슐화하는 간단하고 경제적인 방법 및 상기 방법에 의해 제조된 미생물 농약에 관한 것이다.
농약용 독성 화학물질에 대한 강화된 규제 및 상기 독성 화학 물질의 사용에 의한 환경오염에 대한 관심으로 인해 최근 수년동안 농화학 산업계에서는 생물 농약의 필요성이 고조되어 왔다.
생물 농약은 그들의 환경적 안전성, 방제할 목적 병원균 또는 해충에 대한 특이성으로 인해 기존 유기합성 농약에 대한 대체물 또는 보충물로서 흥미를 끈다. 생물 농약의 제조에 일반적으로 사용되는 생물학적 방제 인자는 세균, 효모, 진균류, 바이러스 및 독소들이 포함되며, 이들을 이용하여 저렴하고 안전한 생물살충제, 생물살균제, 생물제초 제 및 식물 성장 조절제 등을 제조할 수 있다.
생물 농약의 주요 문제점은 높은 생산 경비 및 경작지에 적용시 햇빛, 건조, 열, 자외선, 우식(rain-wash)과 같은 다양한 환경 조건에 대해 불안정하거나 민감하다는 것이다.
최근의 캡슐화 기술은 환경에 의한 손상으로부터의 보호 및 활성성분의 서방성을 제공함으로써 유기합성 농약 분야에 있어 중대한 역할을 해왔다. 그렇지만 유기합성 농약에 사용된 대부분의 캡슐화 기술은 생물농약에 대해서는 유용하지 않은데, 그 이유는 생물농약이 매우 민감한 미생물 또는 생물 활성 인자를 포함하기 때문이다.
화학 합성 고분자 매트릭스 내로 효소 및 유기합성 농약을 캡슐화하는 것은 광범위하게 연구되어 왔다. 그렇지만, 그 기술들은 환경적 안전성, 경제성, 생물학적 인자 보호능력, 점착성, 수분 보유능 등의 생물농약에 대한 여러 가지 필요조건을 충족시킬 수 없기 때문에 생물 농약에 거의 사용될 수 없다.
예를 들어, 유럽특허 제 0,320,483 호에서 베이커(Baker)등은 바실러스 터링지엔시스(Bacillus thuringiensis) 등의 미생물을 갭슐화하기 위한 폴리비닐 피롤리돈과 같은 화학 합성 고분자의 용도를 개시하고 있는데, 상기 기술은 화학 합성 고분자에 의한 환경 오염 문제 및 높은 생산비로 인해 실용적이지 못하다.
이에 반해, 바이오캡슐화 기술은 생물학적 방제 인자를 캡슐화하기 위해 천연 고분자 매트릭스를 사용하는 것으로, 이 분야에서의 연구 활동은 바로 최근에야 늘어나기 시작했다.
미합중국 특허 제 4,647,537 호에서 시게미쯔(H. Shigemitsu)는 카라지난(carrageenan) 고분자 매트릭스 내에 식물병 억제 미생물을 캡슐화하는 시도를 개시하고 있으나, 이 기술은 카라지난의 높은 가격으로 인해 실용적이지 못하다.
미합중국 특허 제 4,724,147 호에서 모리스(J.J. Morris) 및 미합중국 특허 제 4,668,512 호에서 루이스(J.A. Lewis)는 진균 제초제로서 사용될 진균을 캡슐화하기 위한 알긴산염 펠릿의 사용을 개시하고 있다.
이 기술은 생물제초제의 들판 적용에 있어서 약간의 효용을 가지나 실용화하기엔 너무 많은 비용이 들 뿐만 아니라 수분 보유능이 낮으며 엽상 사용에 적용하기에는 점착성이 그리 크지 않은 단점이 있다.
또한, 미합중국 특허 제 4,859,377 호에서 샤샤(B.S. Shasha) 및 던클(R.S. Dunkle)은 미리 젤라틴화된 전분 분말을 사용한 곤충 병원체의 전분 캡슐화 방법을 개시하고 있다. 이 방법은 비교적 싼 재료의 천연 고분자를 사용하며 제조 공정도 꽤 간단하지만, 값이 비싼 미리 젤라틴화된 전분 분말만을 캡슐화 물질로 사용하여, 점착성이 부족하며 겔매트릭스내에 탄수화물원만을 포함하므로 미생물의 성장 및 중시에 불충분하고 멸균되지 않은 재료를 사용하므로 오염의 위험성이 크다는 단점을 가지고 있다.
상술한 선행 기술들은 모두 건조 미생물 농약을 제조하는 방법을 개시하고 있으나 일부 미생물, 예를 들어, 포자를 형성하지 않는 세균 또는 선충류는 건조 과정에 매우 민감하여 건조 과정중 많은 세포들이 죽는다. 동결건조 공정과 같은 몇몇 기술들은 유용하지만 비용이 많이 들고 건조공정 자체도 많은 에너지를 필요로 하는 비용이 많이 드는 공정이다.
따라서, 특히 민감한 미생물을 위해서 또는 생물농약 생산비용을 절감하기 위해서 액상 제제 기술이 연구되고 있다. 상기 액상 제제 기술은 길항 미생물을 멸균 천연 생체고분자 겔내에 고정화시킨 것을 포함하며 생체고분자 겔내에 고정화시킨 미생물을 생물 농약으로 사용한다.
본 발명자들은 건조에 민감한 미생물들을 이용한 생물농약을 제조하기위해 연구를 계속한 결과, 미생물 농약을 건조시키지 않고 습윤 상태로 유지할 때 더 우수한 살충 효과를 나타냄을 발견하여 건조에 민감한 미생물을 액상 생체고분자 내에 활성 상태로 캡슐화하는 본 발명의 방법을 완성하게 되었다.
본 발명의 목적은 건조에 민감한 미생물의 바이오캡슐화를 위한 액상 생체고분자 겔을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 액상 생체고분자 겔을 이용한 간단한고 경제적인 생물 농약의 제조 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 방법에 의해 생분해가 가능하고 환경적으로 안전한 미생물 농약을 제공하는 것이다.
이하 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 발명은 액상 생체고분자 내에 건조에 민감한 미생물을 캡슐화한 미생물 농약의 제조 방법 및 상기 방법에 의해 제조된 미생물 농약을 제공한다.
본 발명의 제조 방법은 미생물이 이용할 수 있는 생체 고분자를 포함하는 천연 물질, 그로부터 추출된 미생물이 이용할 수 있는 생체 고분자 및 그들의 유도체를 고온에서 겔 또는 페이스트 상태로 만들고; 상기 겔 또는 페이스트를 저온으로 냉각시키고; 하나 이상의 길항 미생물을 생체 고분자 겔과 혼합하여 캡슐화하는 단계들을 포함한다.
본 발명에서 언급된 길항 미생물 이라는 용어는 방제 대상에 대해 선택적으로 독성을 갖거나 방제 대상을 사멸시키는 특정 생물활성 화합물, 예를 들어 항생물질을 생산하여 방출함으로써, 또는 억제적 또는 경쟁적 기작에 의해 방제대상을 사멸시킴으로써 해충, 식물 병원체 또는 잡초와 같은 방제 대상을 제거하는 미생물을 의미한다.
본 발명에서 사용된 캡슐화라는 용어는 길항 미생물을 액상 천연 생체고분자물질을 사용하여 제조된 천연겔 매트릭스 내에 가두는 것을 의미한다.
본 발명에서 사용된 농약이라는 용어는 제초제, 살충제, 살진균제, 살조제, 살균제, 살선충제 등을 포함한다.
본 발명에서 사용된 미생물이라는 용어는 곤충을 사멸시키는 바이러스, 그람-음성 및 그람-양성 세균, 방선균, 진균, 효모, 원생동물, 조류 및 그들의 포자 등을 포함하여 넓은 범위의 미생물을 포함한다.
본 발명에 사용될 수 있는 예시적인 길항 미생물로는 바실러스 서브틸리스 아종 크릭티엔시스(Bacillus subtilis subsp. Krictiensis) ATCC 55078 및 55079, 슈도모나스 피로시니아(Pseudomonas pyrocinia) ATCC 15958, 슈도모나스 플루오레센스(Pseudomonas fluorescence) ATCC 27663, 글리오클라디움 비렌스(Gliocladium virens) ATCC 52045, 트리코더마 리세이(Trichoderma reesei) ATCC 28217, 트리코더마 하지아넘(Trichoderma harzianum) ATCC 52198, 트리코더마 비리데(Trichoderma viride) ATCC 52440 및 스트렙토마이세스 카카오이 아종아소엔시스(Streptomyces cacaoi subsp. asoensis) ATCC 19093 과 같은 식물 병원체 억제 미생물; 바실러스 터링지엔시스(Bacillus thuringiensis) KCTC 0107BP 및 KCTC 0108BP, 뷰레비아 바씨아나(Beauveria bassiana) ATCC 26851, 48585 및 48023, 히르수텔라 톰소니이(Hirsutella thomsonii) ATCC 24874, 메타리쥼 플라보비리데(Metarhizium flavoviride) ATCC 32969 및 베르트실리움 레카니이(Vertcillium lecanii) ATCC 46578 과 같은 살충성 미생물: 및
콜레토트리컴 글로에오스포리오이데스 특품종 주씨아에아스(Colletotrichum gloeosporioides f. sp. jussiaeas) ATCC 52634 와 같은 잡초-방제 미생물이 포함된다.
본 발명의 방법에서는 또한 미생물이 이용할 수 있는 고분자를 포함하는 천연 물질, 그로부터 추출된 미생물이 이용할 수 있는 고분자 및 그들의 유도체로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 천연 고분자로 이루어진 생체고분자를 사용한다.
상기 고분자는 쌀, 밀, 옥수수, 보리, 조, 수수, 기장, 메밀과 같은 곡류; 감자와 같은 괴경류; 고구마 및 카사바와 같은 괴근류; 그로부터 추출된 전분 및 그의 부산물을 포함하며; 한천, 젤라틴, 펙틴산, 키토산, 카복시메틸 셀룰로즈, 천연 왁스, 천연 고무질 및 그들의 부산물을 더 포함할 수 있다.
상술한 생체고분자는 효과적인 농약 전달 시스템에 대한 통상의 요구를 충족시킬 뿐 아니라 하기와 같은 추가의 잇점들을 가진다;
첫째, 상기 고분자는 길항 미생물에 대해 대사성 영양물질로서 작용함으로써 상기 미생물의 성장 및 증식과 생활성 물질의 생산에 이바지한다.
둘째, 농약 성분의 전달은 자연적인 과정을 통해 이루어진다.
즉, 길항 미생물이 천연 생체고분자를 섭취하고 이를 대사하여 생물활성 물질의 지연 방출 시스템이 이루어진다.
셋째, 천연 고분자는 겔 상태로 가공되면 전달할 표적에 대한 점착성이 매우 증가하여 그에 의해 전달되는 미생물 농약이 다양한 전달 표적, 또는 토양과 같은 환경 및 식물 등에 효과적으로 전달될 수 있다.
넷째, 미생물 뿐만 아니라 생체 고분자도 자연 환경으로부터 유래된 것이므로 이들을 이용한 미생물 농약은 근본적으로 환경오염의 우려가 없다.
다섯째, 사용된 생체 고분자는 주로 풍부하게 이용할 수 있는 값싼 천연 산물이며, 따라서 본 발명의 미생물 농약을 낮은 비용으로 생산할 수 있다.
길항 미생물은 적어도 증식가능한 양으로, 그러나 고분자가 그의 기능을 다하지 못할 정도로 과량이 되지 않게 미리 가공된 겔 상태의 생체고분자에 가해야 한다. 따라서, 사용된 미생물 및 생체고분자에 따라, 미생물 농약 1g당 바람직하게는 약 104내지 1014개의 세포, 더욱 바람직하게는 106내지 1010개의 세포가 양호한 생물 농약 활성을 나타낸다.
생체 고분자 물질은 80℃ 내지 121℃ 의 온도에서 10 내지 60분 동안 끓이거나 찐 후 분쇄하여 겔로 만들 수 있다. 상기 끓임, 찜 또는 가열을 바람직하게는 멸균 온도, 예를 들어, 121℃에서 수행함으로써 천연 고분자 내에서 발견되는 오염 미생물의 성장 가능성을 제거한다.
이어서, 10℃ 내지 50℃로 냉각시킨 겔을 하나 이상의 상기 길항 미생물과 혼합한다. 이단계에서는 길항 미생물을 포함하는 배양액 또는 상기 배양액으로부터 분리된 세포 및/또는 포자를 제조된 겔과 직접 혼합할 수도 있다.
연속 공정에서는, 길항 미생물을 액상 배양하고 세포 및/또는 포자를 분히한다. 한편, 오염 또는 낭비 문제를 감소시키거나 피하기 위해, 가공된 천연 생체고분자를 폐배양액과 혼합하고 가열하여 겔 매트릭스를 제조한다. 겔 매트릭스를 냉각시켜 길항 미생물을 생체고분자 매트릭스 내에 고정화시킨다.
본 발명의 미생물 농약은 자외선 손상으로부터 세포를 보호하기 위한 자외선 차단제, 미생물의 성장 및 증식, 또는 생물활성 물질의 생산을 촉진하기 위한 영양 보충물, 및/또는 캡슐화 과정중 미생물을 보호하기 위한 미생물 안정화제와 같은 하나 이상의 첨가제를 더 포함할 수 있다. 대표적인 자외선 차단제는 콩고 레드(congo red), 리그노설페이트(lignosulfate) 및 파라아미노 벤조산을 포함한다. 대표적인 미생물 안정화제는 글리세롤, 탈지분유, 우유, 분유 및 동·식물성유를 포함한다. 영양 보충물은 섬유소 분말, 콩가루, 면실박, 다양한 동물 또는 식물 펩톤, 우유, 탈지 분유, 키틴분말, 퇴비 분말, 밀기울, 옥수수 추출물, 효모 추출물, 당밀, 글류코즈, 슈크로즈, 덱스트린 및 옥수수 추출물, 효모 추출물, 당밀, 글루코즈, 슈크로즈, 덱스트린 및 옥수수 시럽과 같은 다양한 탄소 및 질소원; 철, 망간, 아연 및 코발트와 같은 미량 원소; 토양; 토양 추출물 및 미생물의 생존성을 증가시키는데 유익한 다른 물질들을 포함한다. 또한, 천연 생체고분자의 특성을 개선할 수 있는 다른 물질들도 농약에 포함시킬 수 있다.
상기 첨가제들은 미생물 세포와 겔 매트릭스를 혼합하기 전에 또는 혼합과 동시에 가할 수 있다. 그렇지만, 미생물과 첨가제를 미리 혼합하는 것이 바람직하다.
생체고분자 겔내에 캡슐화된 미생물 농약은 직접 토양 또는 식물에 적용할 수 있으며, 필요에 따라서 물 또는 액체 배지로 희석하여 사용할 수도 있다. 상기 미생물 농약은 그의 우수한 점착성으로 인해 성장중인 작물 또는 저장 또는 운반중인 그들의 산물에 적용할 수 있으며, 병원균을 방지하기 위해 뿌리 근처 또는 벤 자리에 적용할 수 있다.
또한, 본 발명의 생체 고분자 겔로 캡슐화된 미생물 농약을 사용하여 종자를 피복할 수도 있으며, 이렇게 피복된 종자는 병원균으로부터 보호되고, 따라서, 그들의 발아 효율도 증가할 수 있다.
또한, 식물 종자는 종자의 발아를 촉진하는 본 발명의 다른 미생물 농약으로 피복될 수 있다. 특히, 질소-고정 미생물, 예를 들어, 리조비움(Rhizobium sp.)으로 피복된 천연 농약으로 추가 처리된 종자는 후자의 미생물로부터 영양분을 구하는 잇점을 가진다.
생체 고분자겔의 캡슐화된 미생물 농약의 적용후 일어날 수 있는 일련의 사건들, 예를 들어, 토양 또는 식물에 대한 농약의 적용→길항 미생물의 성장 및 증식→생물 활성 물질의 생산→살충 작용에서 천연 생체고분자는 또한 길항 미생물에 대한 보호제 및 영양소로서 작용하고, 따라서, 미생물의 성장과 증식 및 생물활성 물질의 생산을 촉진한다.
본 발명의 미생물 농약은 그의 우수한 점착성으로 인해 토양 및 작물에 직접 적용할 수 있고, 따라서, 그의 길항 작용은 오랫동안 계속될 수 있다. 또한, 미생물 뿐만 아니라 천연 생체고분자도 자연 환경 으로부터 유래된 것이므로 이들을 이용한 미생물 농약은 근본적으로 천연의 것이며 환경오염의 우려가 없다. 더욱이, 천연 생체고분자는 단순한 과정에 따라 매우 싼 물질로부터 제조되므로 본 발명은 매우 경제적 이다.
이하, 하기 실시예에 의해 본 발명을 더욱 상세히 설명하지만, 하기 실시예들은 본 발명을 더욱 상세히 설명하기 위한 것일 뿐 본 발명의 범위가 이에 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1]
강력한 항진균 항생제를 생산하는 바실러스 서브틸리스 아종 크릭티엔시스 ATCC 55079를 멸균 배지(소이톤 1%, 효모 추출물 0.5%, NaCl 1%, 글루코즈 1%, pH 7.0)에서 30℃로 30시간 동안 진탕배양하였다. 고속 원심분리(8000rpm, 10분, Sorvall GS03 rotor)를 이용하여 멸균 상태하에 세포를 회수하였다.
감자 전분 30g, 옥수수 분말 30g, 대두 분말 60g 및 젤라틴 10g을 1000ml의 물에 넣고 끓여 생체고분자 겔을 제조한 후, 이를 121℃에서 20분 동안 오토클레이브하고 실온으로 냉각시켰다.
1012개의 바실러스 서브틸리스 세포 또는 포자를 130g(건조 중량 기준)의 생체고분자 겔과 혼합하여 세포 또는 포자를 캡슐화하였다.
생체 고분자 겔내에 캡슐화된 바실러스 서브틸리스 세포/포자를 물로 1000배 희석하여 평균 온도 22℃(고온 30℃, 저온 15℃), 평균 상대습도 80%의 기후조건을 갖는 경작지의 케일에 잎 표면이 완전히 젖을 때까지 분무하였다.
대조용으로서, 바실러스 서브틸리스 세포/포자만을 물로 1000배 희석하여 상기와 동일한 조건하에 케일의 잎 표면에 분무하였다.
21일의 시험 기간 동안, 생존하는 바실러스 서브틸리스 균주를 분리하기 위해 분무 후 0시간, 7일, 14일 및 21일에 각각 케일 잎을 채취하고, 채취된 케일 잎을 멸균 증류수로 세척한 후 영양 한천 배지에 깔았다. 이를 30℃에서 하룻밤 동안 배양한 후 배지상에 자란 바실러스 서브틸리스 균총의 수를 확인하고 그 결과를 표 1에 나타내었다.
상기 표 1에서 알수 있는 바와 같이, 생체고분자 겔 매트릭스에 캡슐화된 바실러스 서브틸리스는 경작지 조건에서 캡슐화되지 않은 바실러스 서브틸리스보다 10배 내지 100배 더 많이 생존하였다.
[실시예 2]
인시류(鱗翅類) 곤충의 유충을 죽이는 내독소를 생산하는 바 실러스 터링지엔시스 KCTC 0107BP를 멸균 배지(소이톤 1%, 효모 추출물 0.5%, NaCl 1%, 글루코즈 1%, pH 7.0)에서 30℃로 2일간 진탕배양한 후, 고속 원심분리(8000rpm, 10분, Sorvall GS-3 rotor)를 이용하여 세포를 회수하였다.
감자 전분 60g, 젤라틴 10g, 대두 분말 60g을 1000ml의 물과 함께 끓여 생체고분자 겔을 제조하고, 121℃에서 20분 동안 오토클레이브한 후 실온으로 냉각시켰다. 1012개의 바실러스 터링지엔시스 세포/포자를 130g(건조 중량 기준)의 생체고분자 겔 매트릭스와 혼합하여 세포/포자를 캡슐화 하였다.
생체고분자 겔 매트릭스에 캡슐화된 바실러스 터링지엔시스 세포/포자를 물로 1000배 희석한 후 경작지의 케일에 잎 표면이 완전히 젖을 때까지 분무하였다. 대조군으로서, 캡슐화하지 않은 바실러스 터링지엔시스 세포/포자를 물로 1000배 희석한 후 케일의 잎 표면에 분무 하였다.
21일의 시험 기간 동안, 분무후 1일, 3일, 7일, 14일 및 21일에 각각 케일 잎을 채취하고, 채취된 케일 잎을 채취하고, 채취된 케일 잎을 직경 2cm의 원반으로 절단 하여 2개의 원반을 10마리의 배추좀나방(diamond-back moth) 유충(제3령)에게 먹인 후, 48시간 동안 그들의 치사율을 조사하였다.
상기 표 2에서 알 수 있는 바와 같이, 생체고분자 겔 매트릭스내에 캡슐화된 바실러스 터링지엔시스 세포/포자는 3주 동안 배추 좀 나방 유충을 죽일 수 있었으나 캡슐화하지 않은 바실러스 터링지엔시스는 경작지 조건하에서 단지 2일 동안만 활성을 나타내었다.
지금까지 본 발명을 상기의 특정 실시예에 의해 상세히 설명하였지만, 본 발명의 진의 또는 범위에서 벗어나지 않고 본 발며에 대한 특정 변화 및 변형이 이루어질 수 있음은 당 기술분야의 숙련가들에게는 자명할 것이다.

Claims (9)

  1. 미생물이 이용할 수 있는 생체고분자를 포함하는 곡류, 콩류, 괴경류, 괴근류 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹에서 선택된 천연물질, 이로부터 추출된 생체고분자 또는 이의 유도체를 물과 혼합한 후 80 내지 121℃에서 겔 상태로 만들고; 나) 상기 겔을 10 내지 50℃로 냉각시킨 후; 다) 하나 이상의 길항 미생물을 상기 겔과 혼합하는 단계를 포함하는, 액상 생체고분자 겔내에 캡슐화된 미생물 농약의 제조 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 생체고분자 전분, 단백질 또는 그의 부산물임을 특징으로 하는 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 길항 미생물이 곤충을 죽이는 바이러스, 그람-음성 및 그람-양성 세균, 방선균, 진균, 효모, 원생동물, 조류 또는 이들의 포자인 것을 특징으로 하는 방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 가)단계에서 상기 생체고분자를 물과 혼합한 후 80~121℃에서 10~60분 동안 가열하는 방법.
  5. 제1항에 있어서, 상기 다)단계에서 자외선 차단제, 영양 보충물 및/또는 미생물 안정화제를 상기 혼합물에 추가하는 방법.
  6. 제5항에 있어서, 상기 자외선 차단제, 영양 보충물 및/또는 미생물 안정화제를 길항 미생물과 미리 혼합하는 방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 다)단계에서 길항 미생물을 미생물 농약 1g당 104~1014세포 또는 포자의 농도로 가하는 방법.
  8. 제7항에 있어서, 상기 다)단계에서 길항 미생물을 미생물 농약 1g당 106~1010세포 또는 포자의 농도로 가하는 방법.
  9. 제1항 내지 제8항중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된 미생물 농약.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR101254104B1 (ko) * 2011-04-14 2013-04-12 경북대학교 산학협력단 포투랍두스 템페라타 m1021(수탁번호:kacc91627p)동결건조 방법 및 동결 건조 분말.

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KR101254104B1 (ko) * 2011-04-14 2013-04-12 경북대학교 산학협력단 포투랍두스 템페라타 m1021(수탁번호:kacc91627p)동결건조 방법 및 동결 건조 분말.

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