JPWO2022250055A5 - ナノ粒子体、およびその製造方法 - Google Patents
ナノ粒子体、およびその製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2022250055A5 JPWO2022250055A5 JP2023523489A JP2023523489A JPWO2022250055A5 JP WO2022250055 A5 JPWO2022250055 A5 JP WO2022250055A5 JP 2023523489 A JP2023523489 A JP 2023523489A JP 2023523489 A JP2023523489 A JP 2023523489A JP WO2022250055 A5 JPWO2022250055 A5 JP WO2022250055A5
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- nanoparticle
- group
- nanoparticle body
- body according
- polymer
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 title claims description 165
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 92
- 239000002082 metal nanoparticle Substances 0.000 claims description 82
- 229920005597 polymer membrane Polymers 0.000 claims description 55
- 229920006254 polymer film Polymers 0.000 claims description 48
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 claims description 36
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 claims description 21
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims description 19
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims description 19
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 18
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 15
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 claims description 15
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 claims description 14
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 14
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O ammonium group Chemical group [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 13
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 12
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims description 10
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 6
- 230000005284 excitation Effects 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000012921 fluorescence analysis Methods 0.000 claims description 4
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 4
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 claims description 4
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000004332 silver Substances 0.000 claims description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 4
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 claims description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 24
- 239000010408 film Substances 0.000 description 22
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 11
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 11
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 10
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 10
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 8
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 125000006615 aromatic heterocyclic group Chemical group 0.000 description 6
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 6
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 6
- 238000001878 scanning electron micrograph Methods 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 5
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 5
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 5
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 5
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 4
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 4
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 4
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 4
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 description 4
- -1 imidazoyl groups Chemical group 0.000 description 4
- 125000006574 non-aromatic ring group Chemical group 0.000 description 4
- 229920001281 polyalkylene Polymers 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- QTVBGVZVUCIFAH-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-[2-[2-[2-[2-[3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoylamino]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCOCCOCCOCCOCCNC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 QTVBGVZVUCIFAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N Silver ion Chemical compound [Ag+] FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 239000002923 metal particle Substances 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 2
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 229910052809 inorganic oxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- CHEANNSDVJOIBS-MHZLTWQESA-N (3s)-3-cyclopropyl-3-[3-[[3-(5,5-dimethylcyclopenten-1-yl)-4-(2-fluoro-5-methoxyphenyl)phenyl]methoxy]phenyl]propanoic acid Chemical compound COC1=CC=C(F)C(C=2C(=CC(COC=3C=C(C=CC=3)[C@@H](CC(O)=O)C3CC3)=CC=2)C=2C(CCC=2)(C)C)=C1 CHEANNSDVJOIBS-MHZLTWQESA-N 0.000 description 1
- VXNZUUAINFGPBY-UHFFFAOYSA-N 1-Butene Chemical group CCC=C VXNZUUAINFGPBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WEJVZSAYICGDCK-UHFFFAOYSA-N Alexa Fluor 430 Chemical compound CC[NH+](CC)CC.CC1(C)C=C(CS([O-])(=O)=O)C2=CC=3C(C(F)(F)F)=CC(=O)OC=3C=C2N1CCCCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O WEJVZSAYICGDCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ROFVEXUMMXZLPA-UHFFFAOYSA-N Bipyridyl Chemical group N1=CC=CC=C1C1=CC=CC=N1 ROFVEXUMMXZLPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000805 Polyaspartic acid Polymers 0.000 description 1
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 description 1
- 241000722270 Regulus Species 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 235000010724 Wisteria floribunda Nutrition 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 1
- 125000005619 boric acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- DHCWLIOIJZJFJE-UHFFFAOYSA-L dichlororuthenium Chemical compound Cl[Ru]Cl DHCWLIOIJZJFJE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N nitrate group Chemical group [N+](=O)([O-])[O-] NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 description 1
- 108010064470 polyaspartate Proteins 0.000 description 1
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 1
- YAYGSLOSTXKUBW-UHFFFAOYSA-N ruthenium(2+) Chemical compound [Ru+2] YAYGSLOSTXKUBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000542 sulfonic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid group Chemical group S(O)(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
Images
Description
本発明はかかる課題に鑑みて為されたものである。すなわち、本発明は、金属粒子表面上に安定的に固定された薄膜を形成することで、検出安定性により優れるナノ粒子体を提供することを主たる目的とする。より具体的には、本発明の主たる目的は、被験物質を確実に捕捉し、蛍光物質の消光を十分に抑制し、かつ複合体における金属粒子間距離を減少させて、検出感度により優れるナノ粒子体を提供することにある。
［作用機序］
本実施形態に係るナノ粒子体は、検出安定性により優れる。特定の理論に拘束されるわけではないが、その理由は以下のように推測される。本実施形態に係るナノ粒子体は、金属ナノ粒子と、金属ナノ粒子の表面を被覆する高分子膜とを含んで成り、高分子膜は、金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位、正帯電性基、および疎水性基からなる群より選択された少なくとも１つを含む。よって、高分子膜は、金属ナノ粒子の表面と比較的強い結合を形成するため、金属ナノ粒子の表面に安定的に固定される。これにより、高分子膜の金属ナノ粒子表面からの剥離等が防止され、ひいては「金属ナノ粒子表面の露出」、および高分子膜の剥離等に伴う「特異結合物質の脱離」が抑制され、検出感度の低下が抑制される。さらに、高分子膜は、高分子を含んで構成されているため、シリカ層に比べ、化学修飾しやすい。これにより、シリカ層に比べ膜厚を小さくして、複合体における金属粒子間距離を減少させることができる。よって、検出感度を向上させることができる。以上から、本実施形態に係るナノ粒子体は、検出安定性により優れると考えられる。
本実施形態に係るナノ粒子体は、検出安定性により優れる。特定の理論に拘束されるわけではないが、その理由は以下のように推測される。本実施形態に係るナノ粒子体は、金属ナノ粒子と、金属ナノ粒子の表面を被覆する高分子膜とを含んで成り、高分子膜は、金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位、正帯電性基、および疎水性基からなる群より選択された少なくとも１つを含む。よって、高分子膜は、金属ナノ粒子の表面と比較的強い結合を形成するため、金属ナノ粒子の表面に安定的に固定される。これにより、高分子膜の金属ナノ粒子表面からの剥離等が防止され、ひいては「金属ナノ粒子表面の露出」、および高分子膜の剥離等に伴う「特異結合物質の脱離」が抑制され、検出感度の低下が抑制される。さらに、高分子膜は、高分子を含んで構成されているため、シリカ層に比べ、化学修飾しやすい。これにより、シリカ層に比べ膜厚を小さくして、複合体における金属粒子間距離を減少させることができる。よって、検出感度を向上させることができる。以上から、本実施形態に係るナノ粒子体は、検出安定性により優れると考えられる。
図２を参照して、高分子膜３を説明する。図２は、図１のＡ部拡大図であり、ナノ粒子体１の高分子膜３と金属ナノ粒子２の表面との界面付近の拡大断面図である。高分子膜３は、金属ナノ粒子２の表面との間に硫黄原子を介した結合部位３ａ、正帯電性基３ｂ、および疎水性基３ｃからなる群より選択される少なくとも１つを含む。より具体的には、高分子膜３は、金属ナノ粒子２の表面との間に硫黄原子を介した結合部位３ａと、正帯電性基３ｂとしての第１級アンモニウム基（－ＮＨ ３
＋）と、疎水性基３ｃとを含む。結合部位３ａは、硫黄原子を介して金属ナノ粒子２の表面と高分子膜３との間を結合する。正帯電性基３ｂは、負帯電性の金属ナノ粒子２の表面との間に静電結合（イオン結合）ｂを形成する。疎水性基３ｃは、金属ナノ粒子２の表面と疎水結合ｃを形成する。
－正帯電性基－
正帯電性基は、金属ナノ粒子２の表面と強い静電結合を形成する。正帯電性基は、本明細書において、１価以上の価数を有し、完全に正に電離した基である。高分子膜３を構成する高分子に含まれる複数の正帯電性基３ｂを考慮した場合、正帯電性基３ｂは、下記の数式（１）：
［式（１）中、ｐＫａは高分子膜３を構成する高分子３Ａに含まれる電気的に中性な基であって、正に帯電すれば、正帯電性基（より具体的には、第１級アンモニウム基（－ＮＨ ３
＋）等）３ｂとなり得る基（以下、電気的中性基とも称する）（より具体的には、第１アミノ基（－ＮＨ２）等）のｐＫａを示し、ｐＨは被験物質を検出する環境（より具体的には、検体等）のｐＨを示し、Ｂは高分子３Ａに含まれる電気的中性基を示し、ＢＨ ＋ は高分子３Ａに含まれる正帯電性基３ｂを示す］
で表されるｐＫａが７以上である基をいう。つまり、正帯電性基３ｂは、高分子膜３を構成する高分子３Ａの電気的中性基および正帯電性基３ｂとが被験物質を検出する環境（例えば、ｐＨおおよそ６～８の検体）中で、下記の化学平衡式（２）：
で表される平衡状態を形成している場合であって、正帯電性基の濃度（［ＢＨ＋］）が電気的中性基の濃度（［Ｂ］）に比べ１０倍以上大きい基をいう。
正帯電性基は、金属ナノ粒子２の表面と強い静電結合を形成する。正帯電性基は、本明細書において、１価以上の価数を有し、完全に正に電離した基である。高分子膜３を構成する高分子に含まれる複数の正帯電性基３ｂを考慮した場合、正帯電性基３ｂは、下記の数式（１）：
で表されるｐＫａが７以上である基をいう。つまり、正帯電性基３ｂは、高分子膜３を構成する高分子３Ａの電気的中性基および正帯電性基３ｂとが被験物質を検出する環境（例えば、ｐＨおおよそ６～８の検体）中で、下記の化学平衡式（２）：
芳香族環状基としては、例えば、芳香族炭素環基、および芳香族複素環基が挙げられる。芳香族炭素環基は、芳香族複素環を含まず、環員原子がすべて炭素原子である芳香族環を含む基である。芳香族炭素環基としては、例えば、アリール基（より具体的には、フェニル基等）およびアリールアルキル基（より具体的には、ベンジル基等）が挙げられる。芳香族複素環基は、環員原子の少なくとも１つがヘテロ原子（より具体的には、酸素原子、硫黄原子および窒素原子等）である芳香族環を含む基である。芳香族複素環基としては、例えば、含窒素芳香族複素環基（より具体的には、イミダゾイル基およびピリジル基（ピリジニル基）等）、含硫黄芳香族複素環基、含酸素芳香族複素環基が挙げられる。
脂肪族環状基は、芳香族環を含まず、非芳香族環からなる環状基を含む基である。脂肪族環状基としては、例えば、脂肪族炭素環基および脂肪族複素環基が挙げられる。脂肪族炭素環基は、環員原子がすべて炭素原子である非芳香族環を含む基であり、例えば、シクロアルキル基が挙げられる。脂肪族複素環基は、環員原子の少なくとも１つがヘテロ原子である非芳香族環を含む基である。
脂肪族鎖状基は、芳香族環および非芳香族環を含まない鎖状（より具体的には、直鎖状および分岐鎖状）の基である。脂肪族鎖状基としては、例えば、脂肪族炭素鎖基（より具体的には、アルキル基およびアルキレン基等）および脂肪族ヘテロ鎖基が挙げられる。
ナノ抗体は、例えば、ＶＨＨ（variable domain of heavy chain antibody）抗体、Ｆａｂ（Fragment Antigen Binding）抗体およびそれらの変異体である。ＶＨＨ抗体は、単一ドメイン抗体である。変異体は、抗原に対する特異結合性を有する範囲内で、アミノ酸配列の一部を組み換えた抗体または置換基を導入した抗体である。ナノ抗体は、好ましくはＶＨＨ抗体である。ナノ抗体がＶＨＨ抗体であると、ＶＨＨ抗体は比較的体積が小さいため、複合体における２つの金属ナノ粒子２間の距離（離隔距離）を狭め、近接場をより効率的に形成し、蛍光強度をさらに増大させることができる。
（溶媒）
溶媒には、ナノ粒子体に加えてポリアニオン系高分子が含まれる。溶媒は、例えば、水性溶媒を含む。水性溶媒は、少なくとも水（より具体的には、純水）を含んで成る。水性溶媒としては、例えば、水（純水）、水と有機溶媒とを含む混合溶媒、および塩成分が溶解している溶媒（より具体的には、緩衝液等）である。前記有機溶媒は、水と混和する有機溶媒であり、例えば、アルコール（より具体的には、メタノール、エタノールおよびプロパノール等）、ならびにテトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド、およびジメチルスルホキシドからなる群より選択される少なくとも１種である。
溶媒には、ナノ粒子体に加えてポリアニオン系高分子が含まれる。溶媒は、例えば、水性溶媒を含む。水性溶媒は、少なくとも水（より具体的には、純水）を含んで成る。水性溶媒としては、例えば、水（純水）、水と有機溶媒とを含む混合溶媒、および塩成分が溶解している溶媒（より具体的には、緩衝液等）である。前記有機溶媒は、水と混和する有機溶媒であり、例えば、アルコール（より具体的には、メタノール、エタノールおよびプロパノール等）、ならびにテトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド、およびジメチルスルホキシドからなる群より選択される少なくとも１種である。
リンカーは、例えば、ポリアルキレンエーテル鎖、およびアルキル鎖からなる群より選択される少なくとも１種を含む。ポリアルキレンエーテル鎖およびアルキル鎖は、リンカー部の一部であってもよく、全てであってもよい。ポリアルキレンエーテル鎖としては、例えば、ポリアルキレンオキシ基（より具体的には、ポリエチレンオキシ基等）である。アルキル鎖としては、例えば、アルキレン基（より具体的には、ｎ－プロピレン基、ｎ－ブチレン基等）である。
本実施形態では、金属ナノ粒子１２，２２の表面を被覆する膜が高分子膜１３，２３であるため、蛍光強度を増大させることができる。その理由は以下のように推測される。金属ナノ粒子１２，２２の表面を被覆する膜が高分子膜１３，２３であり、高分子膜１３，２３は、無機酸化物を含む無機膜に比べ、比較的高い柔軟性を有する。このため、複合体４０において、高分子膜１３，２３が収縮することができ、これにより２つの金属ナノ粒子１２，２２が高分子膜の膜厚２つ分（高分子膜１３の膜厚＋高分子膜２３の膜厚）に相当する距離よりも近接することが可能となる。つまり、金属ナノ粒子１２，２２の表面を被覆する膜が高分子膜１３，２３であるため、離隔距離Ｌは、高分子膜の膜厚２つ分未満となり得る。これにより、プラズモン増強効果が得やすく、蛍光強度がより増大する。なお、本明細書において、「高分子膜の膜厚２つ分」における高分子膜の膜厚とは、離隔距離の対象となる収縮した部分の高分子膜１３，２３の膜厚ではなく、離隔対象とならない収縮していない部分の高分子膜１３，２３の膜厚（例えば、後述する図１５のＴ １ ）である。
（製造例２）
製造例１の銀ナノ粒子（ｎａｎｏｃｏｍｐｏｓｉｘ製「ＡＧＣＢ８０－１Ｍ」，直径８０ｎｍ，ＯＤ４５５＝０．１）の分散液１ｍＬを金ナノ粒子（ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ製「７５３６１０－２５ｍｌ」，直径２０ｎｍ，ＯＤ５２０＝０．１）の分散液１ｍＬに変更した以外は製造例１と同様にして高分子膜３で被覆された金ナノ粒子２の分散液（以下、被覆金ナノ粒子分散液とも称する）を調製した。高分子膜３は、金ナノ粒子２の表面に硫黄原子を介した結合部位３ａ、正帯電性基（第１級アンモニウム基）３ｂ、および疎水性基（ピリジル基（ピリジニル基））３ｃを有する。得られた金ナノ粒子２のＳＥＭ画像（倍率５００，０００倍）を作成し、金ナノ粒子２の表面が高分子膜３によって連続的に被覆されていることが確認された。また、ＳＥＭ画像から金ナノ粒子２の高分子膜の膜厚は、８．６４ｎｍ（期待値Ｍ）±０．５８ｎｍ（標準偏差σ，測定数ｎ＝６）であり、膜厚のばらつき（σ／Ｍ）は４．３６％であった（図９（ｂ）参照）。
製造例１の銀ナノ粒子（ｎａｎｏｃｏｍｐｏｓｉｘ製「ＡＧＣＢ８０－１Ｍ」，直径８０ｎｍ，ＯＤ４５５＝０．１）の分散液１ｍＬを金ナノ粒子（ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ製「７５３６１０－２５ｍｌ」，直径２０ｎｍ，ＯＤ５２０＝０．１）の分散液１ｍＬに変更した以外は製造例１と同様にして高分子膜３で被覆された金ナノ粒子２の分散液（以下、被覆金ナノ粒子分散液とも称する）を調製した。高分子膜３は、金ナノ粒子２の表面に硫黄原子を介した結合部位３ａ、正帯電性基（第１級アンモニウム基）３ｂ、および疎水性基（ピリジル基（ピリジニル基））３ｃを有する。得られた金ナノ粒子２のＳＥＭ画像（倍率５００，０００倍）を作成し、金ナノ粒子２の表面が高分子膜３によって連続的に被覆されていることが確認された。また、ＳＥＭ画像から金ナノ粒子２の高分子膜の膜厚は、８．６４ｎｍ（期待値Ｍ）±０．５８ｎｍ（標準偏差σ，測定数ｎ＝６）であり、膜厚のばらつき（σ／Ｍ）は４．３６％であった（図９（ｂ）参照）。
図１１（ａ）～（ｂ）に示すように、銀ナノ粒子（粒子径８０ｎｍ）および金ナノ粒子（粒子径２０ｎｍ）のゼータ電位は、いずれもマイナス電位にピークを有し、そのゼータ電位の度数分布全体がマイナス電位の範囲にほぼおさまる形状を有していた。このため、高分子膜３で被覆されていない金属ナノ粒子２の表面は、負帯電していることが確認された。
図１０（ａ）～（ｂ）に示すように、高分子膜３でその表面が被覆された、銀ナノ粒子（粒子径８０ｎｍ）および金ナノ粒子（粒子径２０ｎｍ）のゼータ電位は、いずれもプラス電位にピークを有し、そのゼータ電位の度数分布全体がプラス電位の範囲にほぼおさまる形状を有していた。このため、高分子膜３で被覆された金属ナノ粒子２の表面（すなわち、高分子膜３の表面）は、正帯電していることが確認された。
図１０～図１１の結果から、金属ナノ粒子２の表面と、高分子膜３とは対となる帯電性を有することが確認された。よって、高分子膜３で被覆された金属ナノ粒子２では、金属ナノ粒子２の表面と高分子膜３とが静電結合を形成することが強く示唆された。
図１０（ａ）～（ｂ）に示すように、高分子膜３でその表面が被覆された、銀ナノ粒子（粒子径８０ｎｍ）および金ナノ粒子（粒子径２０ｎｍ）のゼータ電位は、いずれもプラス電位にピークを有し、そのゼータ電位の度数分布全体がプラス電位の範囲にほぼおさまる形状を有していた。このため、高分子膜３で被覆された金属ナノ粒子２の表面（すなわち、高分子膜３の表面）は、正帯電していることが確認された。
図１０～図１１の結果から、金属ナノ粒子２の表面と、高分子膜３とは対となる帯電性を有することが確認された。よって、高分子膜３で被覆された金属ナノ粒子２では、金属ナノ粒子２の表面と高分子膜３とが静電結合を形成することが強く示唆された。
（蛍光物質－被覆金属ナノ粒子混合系）
蛍光物質１６，２６としての塩化トリス（２，２’－ビピリジル）ルテニウム（ＩＩ）六水和物（Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)Chloride Hexsahydrate）（東京化成工業株式会社 Ｔ１６５５））のジメチルスルホキシド溶液（濃度１０ｍｇ／ｍｌ）５μＬに、製造例２の被覆金ナノ粒子分散液を添加して混合し混合液を調製した。混合液をマイクロプレートに入れた。測定容器を蛍光光度計（ＴＥＣＡＮジャパン株式会社製「ｉｎｆｉｎｉｔｅ Ｍ２００ ＰＲＯ」）に配置して、蛍光スペクトルを測定した。測定条件は、励起光の波長４３０ｎｍ、検出波長４７０～７００ｎｍであった。被覆金ナノ粒子分散液の添加量（６０μＬ，１２０μＬ，１８０μＬ，および２４０μＬ）を変化させて、蛍光スペクトルを測定した。その結果を図１２（ａ）に示す。
蛍光物質１６，２６としての塩化トリス（２，２’－ビピリジル）ルテニウム（ＩＩ）六水和物（Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)Chloride Hexsahydrate）（東京化成工業株式会社 Ｔ１６５５））のジメチルスルホキシド溶液（濃度１０ｍｇ／ｍｌ）５μＬに、製造例２の被覆金ナノ粒子分散液を添加して混合し混合液を調製した。混合液をマイクロプレートに入れた。測定容器を蛍光光度計（ＴＥＣＡＮジャパン株式会社製「ｉｎｆｉｎｉｔｅ Ｍ２００ ＰＲＯ」）に配置して、蛍光スペクトルを測定した。測定条件は、励起光の波長４３０ｎｍ、検出波長４７０～７００ｎｍであった。被覆金ナノ粒子分散液の添加量（６０μＬ，１２０μＬ，１８０μＬ，および２４０μＬ）を変化させて、蛍光スペクトルを測定した。その結果を図１２（ａ）に示す。
（蛍光物質－非被覆金属ナノ粒子混合系）
製造例２の被覆金ナノ粒子分散液を金ナノ粒子（ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ社製「７５３６１０－２５ｍｌ」，直径２０ｎｍ，ＯＤ５２０＝０．１）の分散液（以下、非被覆金ナノ粒子分散液とも称する）に変更した以外は同様にして、蛍光物質－高分子膜で被覆されていない金ナノ粒子混合系（以下、蛍光物質－非被覆金属ナノ粒子混合系とも称する）の蛍光スペクトルを測定した。測定結果を図１２（ｂ）に示す。
製造例２の被覆金ナノ粒子分散液を金ナノ粒子（ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ社製「７５３６１０－２５ｍｌ」，直径２０ｎｍ，ＯＤ５２０＝０．１）の分散液（以下、非被覆金ナノ粒子分散液とも称する）に変更した以外は同様にして、蛍光物質－高分子膜で被覆されていない金ナノ粒子混合系（以下、蛍光物質－非被覆金属ナノ粒子混合系とも称する）の蛍光スペクトルを測定した。測定結果を図１２（ｂ）に示す。
（蛍光標識ＶＨＨ抗体への架橋剤の結合）
次いで、蛍光物質標識ＶＨＨ抗体にＮＨＳ－ビピリジルジスルフィド架橋剤としての３－（２－ピリジルジチオ）プロピオンアミド－ＰＥＧ４－ＮＨＳ（東京化成工業株式会社製「ＮＨＳ－ＰＥＧ４－ＳＰＤＰ」）をモル比で８倍当量加え、室温および１時間の条件で小型回転培養機（タイテック株式会社製「ＲＴ－３０ｍｉｎｉ」）を用いて攪拌し、混合した。その結果、蛍光物質およびＳＰＤＰリンカーが結合したＶＨＨ抗体（以下、ＳＰＤＰリンカーが結合した蛍光標識ＶＨＨ抗体とも称する）を得た。
次いで、蛍光物質標識ＶＨＨ抗体にＮＨＳ－ビピリジルジスルフィド架橋剤としての３－（２－ピリジルジチオ）プロピオンアミド－ＰＥＧ４－ＮＨＳ（東京化成工業株式会社製「ＮＨＳ－ＰＥＧ４－ＳＰＤＰ」）をモル比で８倍当量加え、室温および１時間の条件で小型回転培養機（タイテック株式会社製「ＲＴ－３０ｍｉｎｉ」）を用いて攪拌し、混合した。その結果、蛍光物質およびＳＰＤＰリンカーが結合したＶＨＨ抗体（以下、ＳＰＤＰリンカーが結合した蛍光標識ＶＨＨ抗体とも称する）を得た。
［表面プラズモン励起増強蛍光分光免疫測定法による被験物質の検出］
得られたナノ粒子体のリン酸塩緩衝溶液に被験物質としてのＣ Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＡＤＶＹ ＣＨＥＭＩＣＡＬ社製「００－ＡＧＮ－ＡＰ－ＣＲＰ－００」）（以下、ＣＲＰ抗原とも称する）を添加し、室温および５分の条件で、小型回転培養機（タイテック株式会社製「ＲＴ－３０ｍiｎi」）を用いて攪拌して、サンドイッチ型の複合体を含む測定試料（ＯＤ４５５＝０．４）を調製した。また、被験物質を添加しなかったこと以外は測定試料と同様にしてブランク試料を調製した。
得られたナノ粒子体のリン酸塩緩衝溶液に被験物質としてのＣ Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＡＤＶＹ ＣＨＥＭＩＣＡＬ社製「００－ＡＧＮ－ＡＰ－ＣＲＰ－００」）（以下、ＣＲＰ抗原とも称する）を添加し、室温および５分の条件で、小型回転培養機（タイテック株式会社製「ＲＴ－３０ｍiｎi」）を用いて攪拌して、サンドイッチ型の複合体を含む測定試料（ＯＤ４５５＝０．４）を調製した。また、被験物質を添加しなかったこと以外は測定試料と同様にしてブランク試料を調製した。
－蛍光物質－
蛍光物質をＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４３０ ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ， ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ ｅｓｔｅｒ（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製「Ａ１０１６９」）から［化４］の化学式：
で表されるＮＨＳ標識Ｒｕ錯体誘導体（東京化成工業株式会社製「Ｒｕｔｈｅｎｉｕｍ(ＩＩ）ｔｒｉｓ（Ｂｉｐｙｒｉｄｙｌ）－Ｃ５－ＮＨＳ ｅｓｔｅｒ」）に変更した。
蛍光物質をＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４３０ ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ， ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ ｅｓｔｅｒ（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製「Ａ１０１６９」）から［化４］の化学式：
－架橋剤－
蛍光標識ＶＨＨ抗体への架橋剤（ＮＨＳ－ビピリジルジスルフィド架橋剤）を３－（２－ピリジルジチオ）プロピオンアミド－ＰＥＧ４－ＮＨＳ（東京化成工業株式会社製「ＮＨＳ－ＰＥＧ４－ＳＰＤＰ」）から３－（２－ピリジルジチオ）プロピオンアミド－ＰＥＧ４－ＮＨＳ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣ社製 製品番号「２６１２８」、「ＮＨＳ－ＰＥＧ４－ＳＰＤＰ」）に変更した。
蛍光標識ＶＨＨ抗体への架橋剤（ＮＨＳ－ビピリジルジスルフィド架橋剤）を３－（２－ピリジルジチオ）プロピオンアミド－ＰＥＧ４－ＮＨＳ（東京化成工業株式会社製「ＮＨＳ－ＰＥＧ４－ＳＰＤＰ」）から３－（２－ピリジルジチオ）プロピオンアミド－ＰＥＧ４－ＮＨＳ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣ社製 製品番号「２６１２８」、「ＮＨＳ－ＰＥＧ４－ＳＰＤＰ」）に変更した。
（複合体の調製）
実施例２のナノ粒子体のリン酸緩衝液に被験物質としてのＣ Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＡＤＶＹ ＣＨＥＭＩＣＡＬ社製「００－ＡＧＮ－ＡＰ－ＣＲＰ－００」）を添加し、室温および５分の条件で小型回転培養機（タイテック株式会社製「ＲＴ－３０ｍiｎi」）を用いて攪拌して、サンドイッチ型の複合体を含む測定試料を調製した。実施例２のナノ粒子体は、上述のように、金属ナノ粒子の表面を被覆する高分子膜を有していた。この高分子膜を構成する高分子は、その側鎖の末端に正帯電性基としての第１級アンモニウム基と、疎水性基としてのピリジル基と、金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位とを有していた。
実施例２のナノ粒子体のリン酸緩衝液に被験物質としてのＣ Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＡＤＶＹ ＣＨＥＭＩＣＡＬ社製「００－ＡＧＮ－ＡＰ－ＣＲＰ－００」）を添加し、室温および５分の条件で小型回転培養機（タイテック株式会社製「ＲＴ－３０ｍiｎi」）を用いて攪拌して、サンドイッチ型の複合体を含む測定試料を調製した。実施例２のナノ粒子体は、上述のように、金属ナノ粒子の表面を被覆する高分子膜を有していた。この高分子膜を構成する高分子は、その側鎖の末端に正帯電性基としての第１級アンモニウム基と、疎水性基としてのピリジル基と、金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位とを有していた。
（ＳＥＭ画像の撮像）
走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテク製「Ｒｅｇｕｌｕｓ８２２０」）を用いて、得られた実施例２の測定試料中の複合体のＳＥＭ画像（倍率１００Ｋ倍）を撮像した。図１５に、実施例２のナノ粒子体を用いて調製した複合体のＳＥＭ画像を示す。図１５に示すように得られたＳＥＭ画像において、複合体におけるナノ粒子体の金属ナノ粒子間の離隔距離Ｌ １ と、前記ナノ粒子体の金属ナノ粒子体間以外の高分子膜の厚みＴ １ とを測定し、比較した。なお、高分子膜の厚みＴ １ は、離隔距離の対象ではない収縮していない部分の高分子膜の厚みであった。
その結果、離隔距離Ｌ １ は、高分子膜の厚み２つ分に相当する厚み（Ｔ １ ×２）よりも小さかった。このため、実施例２のナノ粒子体組成物で調製した複合体では、高分子膜が収縮し、複合体の２つの金属ナノ粒子が高分子膜の厚み２つ分（Ｔ １ ×２）に相当する離隔距離よりも近接していることが分かった。これにより、プラズモン増強効果がさらに得られ、蛍光強度がさらに増大していることが強く示唆された。
走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテク製「Ｒｅｇｕｌｕｓ８２２０」）を用いて、得られた実施例２の測定試料中の複合体のＳＥＭ画像（倍率１００Ｋ倍）を撮像した。図１５に、実施例２のナノ粒子体を用いて調製した複合体のＳＥＭ画像を示す。図１５に示すように得られたＳＥＭ画像において、複合体におけるナノ粒子体の金属ナノ粒子間の離隔距離Ｌ １ と、前記ナノ粒子体の金属ナノ粒子体間以外の高分子膜の厚みＴ １ とを測定し、比較した。なお、高分子膜の厚みＴ １ は、離隔距離の対象ではない収縮していない部分の高分子膜の厚みであった。
その結果、離隔距離Ｌ １ は、高分子膜の厚み２つ分に相当する厚み（Ｔ １ ×２）よりも小さかった。このため、実施例２のナノ粒子体組成物で調製した複合体では、高分子膜が収縮し、複合体の２つの金属ナノ粒子が高分子膜の厚み２つ分（Ｔ １ ×２）に相当する離隔距離よりも近接していることが分かった。これにより、プラズモン増強効果がさらに得られ、蛍光強度がさらに増大していることが強く示唆された。
図２１（ａ）～（ｂ）に示すように、サイズの度数分布は、洗浄処理回０回では１００ｎｍ付近に１つのピークを有する形状であり、洗浄処理回数２回（２回洗浄処理組成物）では１００ｎｍより大きい領域にピークを有し、ブロード化した形状であった。このように洗浄処理によって度数分布のピークがサイズのより大きい側にシフトし、かつ度数分布がブロード化した結果から、０回、２回と洗浄処理回数が増加するにつれて、サイズが増加した測定対象物が生じたものと考えられる。つまり、図２３（ａ）、図２３（ｂ）、図２３（ｃ）および図２３（ｄ）に示すように、溶媒（より具体的には、純水）による洗浄処理によって、ナノ粒子体を取り囲むポリアニオン系高分子の数が徐々に減少することで、会合体間の静電的斥力が作用しにくくなり、ナノ粒子体同士が凝集して凝集体が生成し、そのサイズが徐々に増加していることを強く示唆している（参照：図２３（ａ）から図２３（ｄ）に変化）。なお、図２３では、ナノ粒子体における特異結合物質および蛍光物質を便宜上、省略している。
［高分子膜の収縮性］
（複合体の調製）
作製したナノ粒子体組成物の分散液３５μＬに対してリン酸緩衝液（富士フイルム和光純薬株式会社製「ＰＢＳ－Ｔ」）６５μＬおよび被験物質としてのＣ Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＡＤＶＹ ＣＨＥＭＩＣＡＬ社製「００－ＡＧＮ－ＡＰ－ＣＲＰ－００」）（以下、ＣＲＰ抗原とも称する）を添加し、室温および５分の条件で小型回転培養機（タイテック株式会社製「ＲＴ－３０ｍiｎi」）を用いて攪拌して、サンドイッチ型の複合体を含む測定試料を調製した。
（複合体の調製）
作製したナノ粒子体組成物の分散液３５μＬに対してリン酸緩衝液（富士フイルム和光純薬株式会社製「ＰＢＳ－Ｔ」）６５μＬおよび被験物質としてのＣ Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＡＤＶＹ ＣＨＥＭＩＣＡＬ社製「００－ＡＧＮ－ＡＰ－ＣＲＰ－００」）（以下、ＣＲＰ抗原とも称する）を添加し、室温および５分の条件で小型回転培養機（タイテック株式会社製「ＲＴ－３０ｍiｎi」）を用いて攪拌して、サンドイッチ型の複合体を含む測定試料を調製した。
本発明に係る実施形態はまた、以下の態様を含む。
［１］
金属ナノ粒子と、該金属ナノ粒子の表面を被覆する高分子膜と、該高分子膜の表面に結合された、検体中の被験物質と特異的に結合するナノサイズの特異結合物質とを含んで成り、
前記高分子膜が、前記金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位、正帯電性基、および疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つを含む、ナノ粒子体。
［２］
前記高分子膜を構成する高分子が、その側鎖に前記結合部位、前記正帯電性基、および前記疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つを含む、［１］に記載のナノ粒子体。
［３］
前記高分子膜が、前記硫黄原子を介した前記結合部位を少なくとも含む、［１］または［２］に記載のナノ粒子体。
［４］
前記高分子膜が、前記正帯電性基を少なくとも含む、［１］～［３］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［５］
前記正帯電性基は、第１級アンモニウム基、第２級アンモニウム基、第３級アンモニウム基、第４級アンモニウム基およびグアニジル基（－ＮＨＣ（＝ＮＨ ２ ＋ ）ＮＨ ２ ）からなる群より選択される少なくとも１種である、［４］に記載のナノ粒子体。
［６］
前記高分子膜が、前記疎水性基を少なくとも含む、［１］～［５］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［７］
前記疎水性基は、芳香族環状基、脂肪族環状基、および脂肪族鎖状基からなる群より選択される少なくとも１種である、［６］に記載のナノ粒子体。
［８］
前記高分子膜を構成する高分子が、側鎖としてジスルフィド結合を含む部位を有する、［１］～［７］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［９］
前記ジスルフィド結合を含む部位が前記正帯電性基を有する、［３］または［４］に従属する［８］に記載のナノ粒子体。
［１０］
前記ジスルフィド結合を含む部位が前記疎水性基を有する、［５］または［６］に従属する［８］に記載のナノ粒子体。
［１１］
前記高分子膜の膜厚は、１ｎｍ～１０ｎｍである、［１］～［１０］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１２］
プラズモン励起蛍光分析に用いるナノ粒子体である、［１］～［１１］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１３］
前記特異結合物質がナノ抗体である、［１］～［１２］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１４］
前記特異結合物質がＶＨＨ抗体である、［１］～［１３］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１５］
前記金属ナノ粒子が金または銀を含んで成る、［１］～［１４］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１６］
前記高分子膜の表面および前記特異結合物質の少なくとも一方に、蛍光物質が標識されている、［１］～［１５］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１７］
前記ナノ粒子体として第１ナノ粒子体と第２ナノ粒子体とが含まれ、
前記第１ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第１金属ナノ粒子と、前記高分子膜としての第１高分子膜と、前記特異結合物質としての第１特異結合物質とを含み、
前記第２ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第２金属ナノ粒子と、前記高分子膜としての第２高分子膜と、前記特異結合物質としての第２特異結合物質とを含み、
蛍光物質は、前記第１高分子膜および前記第２高分子膜、ならびに前記第１特異結合物質および前記第２特異結合物質のうちの少なくとも１つに標識されている、［１］～［１６］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１８］
前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体とが前記被験物質を介して結合された複合体を形成する、［１７］に記載のナノ粒子体。
［１９］
前記被験物質が、血液、血漿、尿、または唾液である前記検体に由来する被験物質である、［１８］に記載のナノ粒子体。
［２０］
前記複合体において、前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体との間に前記蛍光物質が位置づけられている、［１８］または［１９］に記載のナノ粒子体。
［１］
金属ナノ粒子と、該金属ナノ粒子の表面を被覆する高分子膜と、該高分子膜の表面に結合された、検体中の被験物質と特異的に結合するナノサイズの特異結合物質とを含んで成り、
前記高分子膜が、前記金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位、正帯電性基、および疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つを含む、ナノ粒子体。
［２］
前記高分子膜を構成する高分子が、その側鎖に前記結合部位、前記正帯電性基、および前記疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つを含む、［１］に記載のナノ粒子体。
［３］
前記高分子膜が、前記硫黄原子を介した前記結合部位を少なくとも含む、［１］または［２］に記載のナノ粒子体。
［４］
前記高分子膜が、前記正帯電性基を少なくとも含む、［１］～［３］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［５］
前記正帯電性基は、第１級アンモニウム基、第２級アンモニウム基、第３級アンモニウム基、第４級アンモニウム基およびグアニジル基（－ＮＨＣ（＝ＮＨ ２ ＋ ）ＮＨ ２ ）からなる群より選択される少なくとも１種である、［４］に記載のナノ粒子体。
［６］
前記高分子膜が、前記疎水性基を少なくとも含む、［１］～［５］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［７］
前記疎水性基は、芳香族環状基、脂肪族環状基、および脂肪族鎖状基からなる群より選択される少なくとも１種である、［６］に記載のナノ粒子体。
［８］
前記高分子膜を構成する高分子が、側鎖としてジスルフィド結合を含む部位を有する、［１］～［７］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［９］
前記ジスルフィド結合を含む部位が前記正帯電性基を有する、［３］または［４］に従属する［８］に記載のナノ粒子体。
［１０］
前記ジスルフィド結合を含む部位が前記疎水性基を有する、［５］または［６］に従属する［８］に記載のナノ粒子体。
［１１］
前記高分子膜の膜厚は、１ｎｍ～１０ｎｍである、［１］～［１０］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１２］
プラズモン励起蛍光分析に用いるナノ粒子体である、［１］～［１１］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１３］
前記特異結合物質がナノ抗体である、［１］～［１２］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１４］
前記特異結合物質がＶＨＨ抗体である、［１］～［１３］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１５］
前記金属ナノ粒子が金または銀を含んで成る、［１］～［１４］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１６］
前記高分子膜の表面および前記特異結合物質の少なくとも一方に、蛍光物質が標識されている、［１］～［１５］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１７］
前記ナノ粒子体として第１ナノ粒子体と第２ナノ粒子体とが含まれ、
前記第１ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第１金属ナノ粒子と、前記高分子膜としての第１高分子膜と、前記特異結合物質としての第１特異結合物質とを含み、
前記第２ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第２金属ナノ粒子と、前記高分子膜としての第２高分子膜と、前記特異結合物質としての第２特異結合物質とを含み、
蛍光物質は、前記第１高分子膜および前記第２高分子膜、ならびに前記第１特異結合物質および前記第２特異結合物質のうちの少なくとも１つに標識されている、［１］～［１６］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１８］
前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体とが前記被験物質を介して結合された複合体を形成する、［１７］に記載のナノ粒子体。
［１９］
前記被験物質が、血液、血漿、尿、または唾液である前記検体に由来する被験物質である、［１８］に記載のナノ粒子体。
［２０］
前記複合体において、前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体との間に前記蛍光物質が位置づけられている、［１８］または［１９］に記載のナノ粒子体。
本発明に係る実施形態はまた、以下の態様を含む。
［１］
金属ナノ粒子と、該金属ナノ粒子の表面を被覆する高分子膜と、蛍光物質とを含んで成り、
前記蛍光物質は、前記金属ナノ粒子の表面に標識されており、
前記高分子膜が前記金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位を含む、ナノ粒子体。
［２］
前記高分子膜を構成する高分子が、その側鎖に前記結合部位を含む、［１］に記載のナノ粒子体。
［３］
前記蛍光物質は、前記金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位を含む、［１］または［２］に記載のナノ粒子体。
［４］
前記高分子膜に結合された、検体中の被験物質と特異的に結合する特異結合物質をさらに含んで成る、［１］～［３］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［５］
前記高分子膜が、正帯電性基および疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つをさらに含む、［１］～［４］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［６］
前記高分子膜を構成する高分子が、その側鎖に前記正帯電性基および前記疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つをさらに含む、［５］に記載のナノ粒子体。
［７］
前記高分子膜が、前記正帯電性基を少なくとも含み、
前記正帯電性基は、第１級アンモニウム基、第２級アンモニウム基、第３級アンモニウム基、第４級アンモニウム基およびグアニジル基（－ＮＨＣ（＝ＮＨ ２ ＋ ）ＮＨ ２ ）からなる群より選択される少なくとも１種である、［５］に記載のナノ粒子体。
［８］
前記高分子膜が、前記疎水性基を少なくとも含み、
前記疎水性基は、芳香族環状基、脂肪族環状基および脂肪族鎖状基からなる群より選択される少なくとも１種である、［５］に記載のナノ粒子体。
［９］
前記高分子膜の膜厚は、１ｎｍ～１０ｎｍである、［１］～［８］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１０］
プラズモン励起蛍光分析に用いるナノ粒子体である、［１］～［９］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１１］
前記特異結合物質が、ナノ抗体、リガンド、酵素および核酸鎖からなる群より選択される少なくとも１つである、［４］に従属する［５］～［１０］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１２］
前記特異結合物質が、ＶＨＨ抗体、断片化抗体およびそれらの変異体からなる群より選択される少なくとも１つのナノ抗体である、［４］に従属する［５］～［１１］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１３］
前記金属ナノ粒子が金または銀を含んで成る、［１］～［１２］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１４］
前記ナノ粒子体として第１ナノ粒子体と第２ナノ粒子体とが含まれ、
前記第１ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第１金属ナノ粒子と、前記高分子膜としての第１高分子膜とを含み、
前記第２ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第２金属ナノ粒子と、前記高分子膜としての第２高分子膜とを含み、
前記蛍光物質は、前記第１金属ナノ粒子の表面および前記第２金属ナノ粒子の表面の少なくとも１つに標識されている、［１］～［１３］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１５］
前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体とが被験物質を介して結合された複合体を形成する、［１４］に記載のナノ粒子体。
［１６］
前記被験物質が、血液、血漿、尿、または唾液である検体に由来する被験物質である、［１５］に記載のナノ粒子体。
［１７］
前記複合体において、前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体との間に少なくとも前記蛍光物質が位置づけられている、［１５］または［１６］に記載のナノ粒子体。
［１８］
蛍光物質がジスルフィド結合を介して結合する高分子と、金属ナノ粒子とを混合して、前記蛍光物質を前記金属ナノ粒子の表面に標識しつつ、かつ前記金属ナノ粒子の表面に高分子膜を形成する工程を含んで成る、ナノ粒子体の製造方法。
［１］
金属ナノ粒子と、該金属ナノ粒子の表面を被覆する高分子膜と、蛍光物質とを含んで成り、
前記蛍光物質は、前記金属ナノ粒子の表面に標識されており、
前記高分子膜が前記金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位を含む、ナノ粒子体。
［２］
前記高分子膜を構成する高分子が、その側鎖に前記結合部位を含む、［１］に記載のナノ粒子体。
［３］
前記蛍光物質は、前記金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位を含む、［１］または［２］に記載のナノ粒子体。
［４］
前記高分子膜に結合された、検体中の被験物質と特異的に結合する特異結合物質をさらに含んで成る、［１］～［３］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［５］
前記高分子膜が、正帯電性基および疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つをさらに含む、［１］～［４］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［６］
前記高分子膜を構成する高分子が、その側鎖に前記正帯電性基および前記疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つをさらに含む、［５］に記載のナノ粒子体。
［７］
前記高分子膜が、前記正帯電性基を少なくとも含み、
前記正帯電性基は、第１級アンモニウム基、第２級アンモニウム基、第３級アンモニウム基、第４級アンモニウム基およびグアニジル基（－ＮＨＣ（＝ＮＨ ２ ＋ ）ＮＨ ２ ）からなる群より選択される少なくとも１種である、［５］に記載のナノ粒子体。
［８］
前記高分子膜が、前記疎水性基を少なくとも含み、
前記疎水性基は、芳香族環状基、脂肪族環状基および脂肪族鎖状基からなる群より選択される少なくとも１種である、［５］に記載のナノ粒子体。
［９］
前記高分子膜の膜厚は、１ｎｍ～１０ｎｍである、［１］～［８］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１０］
プラズモン励起蛍光分析に用いるナノ粒子体である、［１］～［９］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１１］
前記特異結合物質が、ナノ抗体、リガンド、酵素および核酸鎖からなる群より選択される少なくとも１つである、［４］に従属する［５］～［１０］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１２］
前記特異結合物質が、ＶＨＨ抗体、断片化抗体およびそれらの変異体からなる群より選択される少なくとも１つのナノ抗体である、［４］に従属する［５］～［１１］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１３］
前記金属ナノ粒子が金または銀を含んで成る、［１］～［１２］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１４］
前記ナノ粒子体として第１ナノ粒子体と第２ナノ粒子体とが含まれ、
前記第１ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第１金属ナノ粒子と、前記高分子膜としての第１高分子膜とを含み、
前記第２ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第２金属ナノ粒子と、前記高分子膜としての第２高分子膜とを含み、
前記蛍光物質は、前記第１金属ナノ粒子の表面および前記第２金属ナノ粒子の表面の少なくとも１つに標識されている、［１］～［１３］のいずれか１つに記載のナノ粒子体。
［１５］
前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体とが被験物質を介して結合された複合体を形成する、［１４］に記載のナノ粒子体。
［１６］
前記被験物質が、血液、血漿、尿、または唾液である検体に由来する被験物質である、［１５］に記載のナノ粒子体。
［１７］
前記複合体において、前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体との間に少なくとも前記蛍光物質が位置づけられている、［１５］または［１６］に記載のナノ粒子体。
［１８］
蛍光物質がジスルフィド結合を介して結合する高分子と、金属ナノ粒子とを混合して、前記蛍光物質を前記金属ナノ粒子の表面に標識しつつ、かつ前記金属ナノ粒子の表面に高分子膜を形成する工程を含んで成る、ナノ粒子体の製造方法。
本発明に係る実施形態はまた、以下の態様を含む。
［１］
ナノ粒子体と、該ナノ粒子体を含む溶媒とを含んで成るナノ粒子体組成物であって、
前記ナノ粒子体は、金属ナノ粒子と、該金属ナノ粒子の表面を被覆する被覆膜と、該被覆膜の表面または前記金属ナノ粒子の表面に結合し、検体中の被験物質と特異的に結合する特異結合物質とを有し、
前記溶媒には、前記ナノ粒子体に加えてポリアニオン系高分子が含まれる、ナノ粒子体組成物。
［２］
前記ポリアニオン系高分子は、カルボン酸塩基、硫酸塩基、スルホン酸塩基、硝酸塩基、リン酸塩基、およびホウ酸塩基からなる群より選択される少なくとも１種のアニオン性基を有する、［１］に記載のナノ粒子体組成物。
［３］
前記ポリアニオン系高分子は、ポリグルタミン酸、ヘパリン、ポリアスパラギン酸、ポリアクリル酸およびそれらの塩、ならびにＤＮＡからなる群より選択される少なくとも１種である、［１］または［２］に記載のナノ粒子体組成物。
［４］
前記被覆膜は、
無機酸化物を含む無機膜、または
前記金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位、正帯電性基、および疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つを含む高分子膜
である、［１］～［３］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［５］
前記被覆膜は前記高分子膜であり、
前記高分子膜を構成する高分子は、側鎖の末端に前記硫黄原子を介した結合部位、前記正帯電性基、および前記疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つを有する、［４］に記載のナノ粒子体組成物。
［６］
前記特異結合物質はナノ抗体である、［１］～［５］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［７］
前記特異結合物質は、ポリアルキレンエーテル鎖、およびアルキル鎖からなる群より選択される少なくとも１種で架橋されている、［１］～［６］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［８］
前記ナノ粒子体の個々の粒子体を取り囲むように、前記ポリアニオン系高分子が存在する、［１］～［７］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［９］
前記溶媒は水性溶媒を含む、［１］～［８］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［１０］
前記ポリアニオン系高分子と、前記ナノ粒子体との会合体を含む、［１］～［９］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［１１］
プラズモン励起蛍光分析に用いるナノ粒子体である、［１］～［１０］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［１２］
前記金属ナノ粒子が金または銀を含んで成る、［１］～［１１］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［１３］
前記被覆膜の表面および前記特異結合物質の少なくとも一方に、蛍光物質が標識されている、［１］～［１２］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［１４］
前記ナノ粒子体として第１ナノ粒子体と第２ナノ粒子体とが含まれ、
前記第１ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第１金属ナノ粒子と、前記被覆膜としての第１被覆膜と、前記特異結合物質としての第１特異結合物質とを含み、
前記第２ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第２金属ナノ粒子と、前記被覆膜としての第２被覆膜と、前記特異結合物質としての第２特異結合物質とを含み、
蛍光物質は、前記第１被覆膜および前記第２被覆膜、ならびに前記第１特異結合物質および前記第２特異結合物質の少なくとも１つに標識されている、［１］～［１３］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［１５］
前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体とが前記被験物質を介して結合された複合体を形成する、［１４］に記載のナノ粒子体組成物。
［１６］
前記複合体において、前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体との間に前記蛍光物質が位置づけられている、［１５］に記載のナノ粒子体組成物。
［１７］
前記被験物質が、血液、血漿、尿、または唾液に由来する被験物質である、［１］～［１６］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［１］
ナノ粒子体と、該ナノ粒子体を含む溶媒とを含んで成るナノ粒子体組成物であって、
前記ナノ粒子体は、金属ナノ粒子と、該金属ナノ粒子の表面を被覆する被覆膜と、該被覆膜の表面または前記金属ナノ粒子の表面に結合し、検体中の被験物質と特異的に結合する特異結合物質とを有し、
前記溶媒には、前記ナノ粒子体に加えてポリアニオン系高分子が含まれる、ナノ粒子体組成物。
［２］
前記ポリアニオン系高分子は、カルボン酸塩基、硫酸塩基、スルホン酸塩基、硝酸塩基、リン酸塩基、およびホウ酸塩基からなる群より選択される少なくとも１種のアニオン性基を有する、［１］に記載のナノ粒子体組成物。
［３］
前記ポリアニオン系高分子は、ポリグルタミン酸、ヘパリン、ポリアスパラギン酸、ポリアクリル酸およびそれらの塩、ならびにＤＮＡからなる群より選択される少なくとも１種である、［１］または［２］に記載のナノ粒子体組成物。
［４］
前記被覆膜は、
無機酸化物を含む無機膜、または
前記金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位、正帯電性基、および疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つを含む高分子膜
である、［１］～［３］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［５］
前記被覆膜は前記高分子膜であり、
前記高分子膜を構成する高分子は、側鎖の末端に前記硫黄原子を介した結合部位、前記正帯電性基、および前記疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つを有する、［４］に記載のナノ粒子体組成物。
［６］
前記特異結合物質はナノ抗体である、［１］～［５］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［７］
前記特異結合物質は、ポリアルキレンエーテル鎖、およびアルキル鎖からなる群より選択される少なくとも１種で架橋されている、［１］～［６］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［８］
前記ナノ粒子体の個々の粒子体を取り囲むように、前記ポリアニオン系高分子が存在する、［１］～［７］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［９］
前記溶媒は水性溶媒を含む、［１］～［８］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［１０］
前記ポリアニオン系高分子と、前記ナノ粒子体との会合体を含む、［１］～［９］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［１１］
プラズモン励起蛍光分析に用いるナノ粒子体である、［１］～［１０］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［１２］
前記金属ナノ粒子が金または銀を含んで成る、［１］～［１１］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［１３］
前記被覆膜の表面および前記特異結合物質の少なくとも一方に、蛍光物質が標識されている、［１］～［１２］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［１４］
前記ナノ粒子体として第１ナノ粒子体と第２ナノ粒子体とが含まれ、
前記第１ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第１金属ナノ粒子と、前記被覆膜としての第１被覆膜と、前記特異結合物質としての第１特異結合物質とを含み、
前記第２ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第２金属ナノ粒子と、前記被覆膜としての第２被覆膜と、前記特異結合物質としての第２特異結合物質とを含み、
蛍光物質は、前記第１被覆膜および前記第２被覆膜、ならびに前記第１特異結合物質および前記第２特異結合物質の少なくとも１つに標識されている、［１］～［１３］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
［１５］
前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体とが前記被験物質を介して結合された複合体を形成する、［１４］に記載のナノ粒子体組成物。
［１６］
前記複合体において、前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体との間に前記蛍光物質が位置づけられている、［１５］に記載のナノ粒子体組成物。
［１７］
前記被験物質が、血液、血漿、尿、または唾液に由来する被験物質である、［１］～［１６］のいずれか１つに記載のナノ粒子体組成物。
Claims (23)
- 金属ナノ粒子と、該金属ナノ粒子の表面を被覆する高分子膜と、該高分子膜の表面に結合された、検体中の被験物質と特異的に結合するナノサイズの特異結合物質とを含んで成る、ナノ粒子体。
- 前記高分子膜が、前記金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位、正帯電性基、および疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つを含む、請求項１に記載のナノ粒子体。
- さらに、蛍光物質を含んで成り、
前記蛍光物質は、前記金属ナノ粒子の表面、前記高分子膜の表面および前記特異結合物質からなる群より選択される少なくともいずれかに標識されている、請求項２に記載のナノ粒子体。 - 前記蛍光物質は、前記金属ナノ粒子の表面に標識されており、
前記蛍光物質は、前記金属ナノ粒子の表面との間に硫黄原子を介した結合部位を含む、請求項３に記載のナノ粒子体。 - 前記高分子膜を構成する高分子が、その側鎖に前記結合部位、前記正帯電性基、および前記疎水性基からなる群より選択される少なくとも１つを含む、請求項２または３に記載のナノ粒子体。
- 前記高分子膜が、前記硫黄原子を介した前記結合部位を少なくとも含む、請求項２または３に記載のナノ粒子体。
- 前記高分子膜が、前記正帯電性基を少なくとも含む、請求項２または３に記載のナノ粒子体。
- 前記正帯電性基は、第１級アンモニウム基、第２級アンモニウム基、第３級アンモニウム基、第４級アンモニウム基およびグアニジル基（－ＮＨＣ（＝ＮＨ２ ＋）ＮＨ２）からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項７に記載のナノ粒子体。
- 前記高分子膜が、前記疎水性基を少なくとも含む、請求項２または３に記載のナノ粒子体。
- 前記疎水性基は、芳香族環状基、脂肪族環状基、および脂肪族鎖状基からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項９に記載のナノ粒子体。
- 前記高分子膜を構成する高分子が、側鎖としてジスルフィド結合を含む部位を有する、請求項２または３に記載のナノ粒子体。
- 前記高分子膜を構成する高分子が、側鎖としてジスルフィド結合を含む部位を有し、
前記ジスルフィド結合を含む部位が前記正帯電性基を有する、請求項７に記載のナノ粒子体。 - 前記高分子膜を構成する高分子が、側鎖としてジスルフィド結合を含む部位を有し、
前記ジスルフィド結合を含む部位が前記疎水性基を有する、請求項９に記載のナノ粒子体。 - 前記高分子膜の膜厚は、１ｎｍ～１０ｎｍである、請求項２または３に記載のナノ粒子体。
- プラズモン励起蛍光分析に用いるナノ粒子体である、請求項２または３に記載のナノ粒子体。
- 前記特異結合物質が、ナノ抗体、リガンド、酵素および核酸鎖からなる群より選択される少なくとも１つである、請求項２または３に記載のナノ粒子体。
- 前記特異結合物質が、ＶＨＨ抗体、断片化抗体およびそれらの変異体からなる群より選択される少なくとも１つのナノ抗体である、請求項２または３に記載のナノ粒子体。
- 前記金属ナノ粒子が金または銀を含んで成る、請求項２または３に記載のナノ粒子体。
- 前記ナノ粒子体として第１ナノ粒子体と第２ナノ粒子体とが含まれ、
前記第１ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第１金属ナノ粒子と、前記高分子膜としての第１高分子膜と、前記特異結合物質としての第１特異結合物質とを含み、
前記第２ナノ粒子体は、前記金属ナノ粒子としての第２金属ナノ粒子と、前記高分子膜としての第２高分子膜と、前記特異結合物質としての第２特異結合物質とを含み、
蛍光物質は、前記第１金属ナノ粒子の表面および前記第２金属ナノ粒子の表面、前記第１高分子膜および前記第２高分子膜、ならびに前記第１特異結合物質および前記第２特異結合物質のうちの少なくとも１つに標識されている、請求項２または３に記載のナノ粒子体。 - 前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体とが前記被験物質を介して結合された複合体を形成する、請求項１９に記載のナノ粒子体。
- 前記被験物質が、血液、血漿、尿、または唾液である前記検体に由来する被験物質である、請求項１９に記載のナノ粒子体。
- 蛍光物質をさらに含んで成り、
前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体とが前記被験物質を介して結合された複合体において、前記第１ナノ粒子体と前記第２ナノ粒子体との間に前記蛍光物質が位置づけられている、請求項１９に記載のナノ粒子体。 - 蛍光物質がジスルフィド結合を介して結合する高分子と、金属ナノ粒子とを混合して、前記蛍光物質を前記金属ナノ粒子の表面に標識しつつ、かつ前記金属ナノ粒子の表面に高分子膜を形成する工程を含んで成る、ナノ粒子体の製造方法。
Applications Claiming Priority (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2021089468 | 2021-05-27 | ||
| JP2021089524 | 2021-05-27 | ||
| JP2021147949 | 2021-09-10 | ||
| JP2022014218 | 2022-02-01 | ||
| JP2022014357 | 2022-02-01 | ||
| JP2022014361 | 2022-02-01 | ||
| PCT/JP2022/021270 WO2022250055A1 (ja) | 2021-05-27 | 2022-05-24 | ナノ粒子体、その製造方法およびナノ粒子体を含むナノ粒子体組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPWO2022250055A1 JPWO2022250055A1 (ja) | 2022-12-01 |
| JPWO2022250055A5 true JPWO2022250055A5 (ja) | 2024-03-05 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Li et al. | A “turn-on” fluorescent receptor for detecting tyrosine phosphopeptide using the surface imprinting procedure and the epitope approach | |
| JP4665762B2 (ja) | 非特異吸着を抑制した基材表面 | |
| Wang et al. | Functional biointerfaces based on mixed zwitterionic self-assembled monolayers for biosensing applications | |
| Van Andel et al. | Highly specific binding on antifouling zwitterionic polymer-coated microbeads as measured by flow cytometry | |
| WO2022250055A1 (ja) | ナノ粒子体、その製造方法およびナノ粒子体を含むナノ粒子体組成物 | |
| US10598658B2 (en) | Reduced graphene oxide-based biosensor and use thereof | |
| Bagbi et al. | Immunosensor based on nanocomposite of nanostructured zirconium oxide and gelatin-A | |
| Sathish et al. | Air plasma-enhanced covalent functionalization of poly (methyl methacrylate): high-throughput protein immobilization for miniaturized bioassays | |
| Han et al. | Zwitterion and oligo (ethylene glycol) synergy minimizes nonspecific binding of compact quantum dots | |
| Piletsky et al. | A novel assay format as an alternative to ELISA: MINA test for biotin | |
| Dembele et al. | Zwitterionic silane copolymer for ultra-stable and bright biomolecular probes based on fluorescent quantum dot nanoclusters | |
| Riley et al. | Short-chained oligo (ethylene oxide)-functionalized gold nanoparticles: realization of significant protein resistance | |
| Markov et al. | Controlled engineering of oxide surfaces for bioelectronics applications using organic mixed monolayers | |
| JP2003329686A (ja) | 発光性微粒子 | |
| Behera et al. | Ligand exchange on MoS2 nanosheets: applications in array-based sensing and drug delivery | |
| US11261204B2 (en) | Composition for substrate surface modification and method using the same | |
| WO2020113361A1 (zh) | 一种功能化黑磷/金复合材料及其应用 | |
| JPWO2022250055A5 (ja) | ナノ粒子体、およびその製造方法 | |
| US20240288431A1 (en) | Functionalized nanoparticles | |
| Charlton et al. | TIRF microscopy as a screening method for non-specific binding on surfaces | |
| EP4220160A1 (en) | Base material for manufacturing sensor for analyzing detection object, sensor for analyzing detection object, and method for analyzing detection object | |
| Chaudhary et al. | Hierarchical structure of molybdenum disulfide-reduced graphene oxide nanocomposite for the development of a highly efficient serotonin biosensing platform | |
| WO2023234034A1 (ja) | 被覆金属基材およびその製造方法、被覆金属基材を含む複合体、ならびに被覆金属基材を製造するための高分子 | |
| WO2023243490A1 (ja) | ナノ粒子体、ナノ粒子体を含む複合体、ならびにナノ粒子体に含まれる高分子膜の形成方法 | |
| Le et al. | Compact quantum dots for quantitative cytology |