JPWO2020232276A5

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Publication number: JPWO2020232276A5
Application number: JP2021568011A
Authority: JP
Publication date: 2023-05-22

Description

等価物
当業者は、日常的な実験作業のみを使用して、本明細書に記載される本発明の具体的な実施形態の多くの均等物を認識するか、または確認できるであろう。本発明の範囲は、上記の記載を限定することを意図しないが、むしろ以下の特許請求の範囲に記述されるとおりである。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）にメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を封入するプロセスであって、
（ａ）脂質溶液中の１つ以上の脂質を、ｍＲＮＡ溶液中の１つ以上のｍＲＮＡと混合して、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）形成溶液中の前記ＬＮＰ（ｍＲＮＡ－ＬＮＰ）内に封入されたｍＲＮＡを形成するステップと、
（ｂ）前記ＬＮＰ形成溶液を医薬品製剤溶液と交換して、医薬品製剤溶液中にｍＲＮＡ－ＬＮＰを提供するステップと、
（ｃ）前記医薬品製剤溶液中で前記ｍＲＮＡ－ＬＮＰを加熱するステップと、を含み、
ステップ（ｃ）から生じる前記ｍＲＮＡ－ＬＮＰの封入効率が、ステップ（ｂ）から生じる前記ｍＲＮＡ－ＬＮＰの前記封入効率よりも大きい、プロセス。
（項目２）
ステップ（ａ）において、前記１つ以上の脂質が、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上のヘルパー脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含む、項目１に記載のプロセス。
（項目３）
前記脂質が、１つ以上のコレステロール脂質（例えば、コレステロール）をさらに含む、項目２に記載のプロセス。
（項目４）
ステップ（ａ）において、前記１つ以上のカチオン性脂質が、ｃＫＫ－Ｅ１２、ＯＦ－０２、Ｃ１２－２００、ＭＣ３、ＤＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｉｎｋＣ２ＤＭＡ、ＩＣＥ（イミダゾール系）、ＨＧＴ５０００、ＨＧＴ５００１、ＨＧＴ４００１、ＨＧＴ４００２、ＨＧＴ４００３、ＨＧＴ４００４、ＨＧＴ４００５、ＤＯＤＡＣ、ＤＤＡＢ、ＤＭＲＩＥ、ＤＯＳＰＡ、ＤＯＧＳ、ＤＯＤＡＰ、ＤＯＤＭＡおよびＤＭＤＭＡ、ＤＯＤＡＣ、ＤＬｅｎＤＭＡ、ＤＭＲＩＥ、ＣＬｉｎＤＭＡ、ＣｐＬｉｎＤＭＡ、ＤＭＯＢＡ、ＤＯｃａｒｂＤＡＰ、ＤＬｉｎＤＡＰ、ＤＬｉｎｃａｒｂＤＡＰ、ＤＬｉｎＣＤＡＰ、ＫＬｉｎ－Ｋ－ＤＭＡ、ＤＬｉｎ－Ｋ－ＸＴＣ２－ＤＭＡ、３－（４－（ビス（２－ヒドロキシドデシル）アミノ）ブチル）－６－（４－（（２－ヒドロキシドデシル）（２－ヒドロキシウンデシル）アミノ）ブチル）－１，４－ジオキサン－２，５－ジオン（標的２３）、３－（５－（ビス（２－ヒドロキシドデシル）アミノ）ペンタン－２－イル）－６－（５－（（２－ヒドロキシドデシル）（２－ヒドロキシウンデシル）アミノ）ペンタン－２－イル）－１，４－ジオキサン－２，５－ジオン（標的２４）、Ｎ１ＧＬ、Ｎ２ＧＬ、Ｖ１ＧＬおよびそれらの組み合わせから選択される、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目５）
ステップ（ａ）において、前記１つ以上のヘルパー脂質が、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、パルミトイルオレオイル－ホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、ジオレオイル－ホスファチジルエタノールアミン４－（Ｎ－マレイミドメチル）－シクロヘキサン－ｌ－カルボキシレート（ＤＯＰＥ－ｍａｌ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスホエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジステアロイル－ホスファチジル－エタノールアミン（ＤＳＰＥ）、１，２－ジエルコイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＥＰＥ）、１６－Ｏ－モノメチルＰＥ、１６－Ｏ－ジメチルＰＥ、１８－１－トランスＰＥ、ｌ－ステアロイル－２－オレオイル－ホスファチジエタノールアミン（ＳＯＰＥ）、またはそれらの組み合わせから選択される、項目２～４のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目６）
ステップ（ａ）において、前記１つ以上のＰＥＧ修飾脂質が、Ｃ _６－Ｃ _２０長のアルキル鎖を有する脂質に共有結合した、長さ最大２ｋＤａ、最大３ｋＤａ、最大４ｋＤａまたは最大５ｋＤａのポリエチレングリコール鎖を含む、項目１に記載のプロセス。
（項目７）
前記脂質溶液の脂質成分が、
（ａ）カチオン性脂質、
（ｂ）ヘルパー脂質、
（ｃ）コレステロール系脂質、および
（ｄ）ＰＥＧ修飾脂質からなる、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目８）
前記カチオン性脂質対ヘルパー脂質対コレステロール系脂質対ＰＥＧ修飾脂質のモル比が、約２０～５０：２５～３５：２０～５０：１～５である、項目８に記載のプロセス。
（項目９）
前記脂質溶液の脂質成分が、
（ａ）カチオン性脂質、
（ｂ）ヘルパー脂質、
（ｃ）ＰＥＧ修飾脂質からなる、項目１～６のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目１０）
前記カチオン性脂質が、コレステロール系またはイミダゾール系カチオン性脂質である、項目９に記載のプロセス。
（項目１１）
前記カチオン性脂質対ヘルパー脂質対コレステロール系脂質対ＰＥＧ修飾脂質のモル比が、約５５～６５：３０～４０：１～１５である、項目９または１０に記載のプロセス。
（項目１２）
前記ｍＲＮＡが、タンパク質またはペプチドをコードする、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目１３）
ステップ（ｃ）において、前記医薬品製剤溶液が、熱源からの熱を前記溶液に印加することによって加熱され、前記溶液が、周囲温度よりも高い温度で１０～２０分間維持される、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目１４）
前記周囲温度よりも高い温度が、約６０～７０℃である、項目１３に記載のプロセス。
（項目１５）
ステップ（ｃ）後の前記封入効率が、ステップ（ｂ）後の前記封入効率を超える少なくとも５％以上を提供する、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目１６）
ステップ（ｃ）後の前記封入効率が、ステップ（ｂ）後の前記封入効率から少なくとも１０％以上改善される、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目１７）
ステップ（ａ）において、前記脂質溶液が、エタノールに溶解された脂質を含む、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目１８）
ステップ（ａ）において、前記ｍＲＮＡ溶液が、クエン酸緩衝液に溶解されたｍＲＮＡを含む、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目１９）
前記医薬品製剤溶液が、凍結保護剤を含む薬学的に許容可能な賦形剤を含む水溶液である、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目２０）
前記医薬品製剤溶液が、糖を含む水溶液である、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目２１）
前記糖が、トレハロース、スクロース、マンノース、ラクトース、およびマンニトールのうちの１つ以上からなる群から選択される、項目２０に記載のプロセス。
（項目２２）
前記糖が、トレハロースを含む、項目２１に記載のプロセス。
（項目２３）
ステップ（ｂ）において、前記医薬品製剤溶液が、約１０重量対体積％のトレハロースを含む水溶液である、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目２４）
エタノールおよびクエン酸塩の両方が、前記医薬品製剤溶液に存在しない、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目２５）
前記脂質溶液がエタノールを含み、前記ｍＲＮＡ溶液がクエン酸塩を含み、エタノールおよびクエン酸塩の両方が前記医薬品製剤溶液に存在しない、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目２６）
前記ｍＲＮＡ溶液が、ｐＨ５．０未満のｐＨを有する、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。
（項目２７）
前記医薬品製剤溶液が、ｐＨ５．０～ｐＨ７．０のｐＨを有する、先行項目のいずれか一項に記載のプロセス。

Claims

脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）にメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を封入するプロセスであって、
（ａ）脂質溶液中の１つ以上の脂質を、ｍＲＮＡ溶液中の１つ以上のｍＲＮＡと混合して、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）形成溶液中の前記ＬＮＰ（ｍＲＮＡ－ＬＮＰ）内に封入されたｍＲＮＡを形成するステップと、
（ｂ）前記ＬＮＰ形成溶液を医薬品製剤溶液と交換して、医薬品製剤溶液中にｍＲＮＡ－ＬＮＰを提供するステップと、
（ｃ）前記医薬品製剤溶液中で前記ｍＲＮＡ－ＬＮＰを加熱するステップと、を含み、
ステップ（ｃ）から生じる前記ｍＲＮＡ－ＬＮＰの封入効率が、ステップ（ｂ）から生じる前記ｍＲＮＡ－ＬＮＰの前記封入効率よりも大きい、プロセス。
ステップ（ａ）において、前記１つ以上の脂質が、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上のヘルパー脂質、および１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含む、請求項１に記載のプロセス。
前記脂質が、１つ以上のコレステロール脂質（例えば、コレステロール）をさらに含む、請求項２に記載のプロセス。
ステップ（ａ）において、前記１つ以上のカチオン性脂質が、ｃＫＫ－Ｅ１２、ＯＦ－０２、Ｃ１２－２００、ＭＣ３、ＤＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｉｎｋＣ２ＤＭＡ、ＩＣＥ（イミダゾール系）、ＨＧＴ５０００、ＨＧＴ５００１、ＨＧＴ４００１、ＨＧＴ４００２、ＨＧＴ４００３、ＨＧＴ４００４、ＨＧＴ４００５、ＤＯＤＡＣ、ＤＤＡＢ、ＤＭＲＩＥ、ＤＯＳＰＡ、ＤＯＧＳ、ＤＯＤＡＰ、ＤＯＤＭＡおよびＤＭＤＭＡ、ＤＯＤＡＣ、ＤＬｅｎＤＭＡ、ＤＭＲＩＥ、ＣＬｉｎＤＭＡ、ＣｐＬｉｎＤＭＡ、ＤＭＯＢＡ、ＤＯｃａｒｂＤＡＰ、ＤＬｉｎＤＡＰ、ＤＬｉｎｃａｒｂＤＡＰ、ＤＬｉｎＣＤＡＰ、ＫＬｉｎ－Ｋ－ＤＭＡ、ＤＬｉｎ－Ｋ－ＸＴＣ２－ＤＭＡ、３－（４－（ビス（２－ヒドロキシドデシル）アミノ）ブチル）－６－（４－（（２－ヒドロキシドデシル）（２－ヒドロキシウンデシル）アミノ）ブチル）－１，４－ジオキサン－２，５－ジオン（標的２３）、３－（５－（ビス（２－ヒドロキシドデシル）アミノ）ペンタン－２－イル）－６－（５－（（２－ヒドロキシドデシル）（２－ヒドロキシウンデシル）アミノ）ペンタン－２－イル）－１，４－ジオキサン－２，５－ジオン（標的２４）、Ｎ１ＧＬ、Ｎ２ＧＬ、Ｖ１ＧＬおよびそれらの組み合わせから選択される、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
ステップ（ａ）において、前記１つ以上のヘルパー脂質が、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、パルミトイルオレオイル－ホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、ジオレオイル－ホスファチジルエタノールアミン４－（Ｎ－マレイミドメチル）－シクロヘキサン－ｌ－カルボキシレート（ＤＯＰＥ－ｍａｌ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスホエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジステアロイル－ホスファチジル－エタノールアミン（ＤＳＰＥ）、１，２－ジエルコイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＥＰＥ）、１６－Ｏ－モノメチルＰＥ、１６－Ｏ－ジメチルＰＥ、１８－１－トランスＰＥ、ｌ－ステアロイル－２－オレオイル－ホスファチジエタノールアミン（ＳＯＰＥ）、またはそれらの組み合わせから選択される、請求項２～４のいずれか一項に記載のプロセス。
ステップ（ａ）において、前記１つ以上のＰＥＧ修飾脂質が、Ｃ_６－Ｃ_２０長のアルキル鎖を有する脂質に共有結合した、長さ最大２ｋＤａ、最大３ｋＤａ、最大４ｋＤａまたは最大５ｋＤａのポリエチレングリコール鎖を含む、請求項１に記載のプロセス。
前記脂質溶液の脂質成分が、
（ａ）カチオン性脂質、
（ｂ）ヘルパー脂質、
（ｃ）コレステロール系脂質、および
（ｄ）ＰＥＧ修飾脂質からなる、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
前記カチオン性脂質対ヘルパー脂質対コレステロール系脂質対ＰＥＧ修飾脂質のモル比が、約２０～５０：２５～３５：２０～５０：１～５である、請求項８に記載のプロセス。
前記脂質溶液の脂質成分が、
（ａ）カチオン性脂質、
（ｂ）ヘルパー脂質、
（ｃ）ＰＥＧ修飾脂質からなる、請求項１～６のいずれか一項に記載のプロセス。
前記カチオン性脂質が、コレステロール系またはイミダゾール系カチオン性脂質である、請求項９に記載のプロセス。
前記カチオン性脂質対ヘルパー脂質対ＰＥＧ修飾脂質のモル比が、約５５～６５：３０～４０：１～１５である、請求項９または１０に記載のプロセス。
前記ｍＲＮＡが、タンパク質またはペプチドをコードする、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
ステップ（ｃ）において、前記医薬品製剤溶液が、熱源からの熱を前記溶液に印加することによって加熱され、前記溶液が、周囲温度よりも高い温度で１０～２０分間維持される、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
前記周囲温度よりも高い温度が、約６０～７０℃である、請求項１３に記載のプロセス。
ステップ（ｃ）後の前記封入効率が、ステップ（ｂ）後の前記封入効率を超える少なくとも５％以上を提供する、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
ステップ（ｃ）後の前記封入効率が、ステップ（ｂ）後の前記封入効率から少なくとも１０％以上改善される、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
ステップ（ａ）において、前記脂質溶液が、エタノールに溶解された脂質を含む、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
ステップ（ａ）において、前記ｍＲＮＡ溶液が、クエン酸緩衝液に溶解されたｍＲＮＡを含む、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
前記医薬品製剤溶液が、凍結保護剤を含む薬学的に許容可能な賦形剤を含む水溶液である、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
前記医薬品製剤溶液が、糖を含む水溶液である、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
前記糖が、トレハロース、スクロース、マンノース、ラクトース、およびマンニトールのうちの１つ以上からなる群から選択される、請求項２０に記載のプロセス。
前記糖が、トレハロースを含む、請求項２１に記載のプロセス。
ステップ（ｂ）において、前記医薬品製剤溶液が、約１０重量対体積％のトレハロースを含む水溶液である、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
エタノールおよびクエン酸塩の両方が、前記医薬品製剤溶液に存在しない、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
前記脂質溶液がエタノールを含み、前記ｍＲＮＡ溶液がクエン酸塩を含み、エタノールおよびクエン酸塩の両方が前記医薬品製剤溶液に存在しない、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
前記ｍＲＮＡ溶液が、ｐＨ５．０未満のｐＨを有する、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
前記医薬品製剤溶液が、ｐＨ５．０～ｐＨ７．０のｐＨを有する、先行請求項のいずれか一項に記載のプロセス。
ｍＲＮＡを封入している脂質ナノ粒子の組成物であって、ｍＲＮＡが、請求項１に記載のプロセスに従って前記脂質ナノ粒子内に封入されている、組成物。
組成物が必要とする対象に投与された場合の、インビボタンパク質生成のための前記組成物の製造における、ｍＲＮＡを封入している脂質ナノ粒子の使用であって、前記ｍＲＮＡが、目的の１つ以上のタンパク質またはペプチドをコードし、ｍＲＮＡを封入している前記脂質ナノ粒子が、請求項１に記載のプロセスによって産生される、使用。
インビボタンパク質生成のためのｍＲＮＡを対象に送達するための、請求項１に記載のプロセスによって生成される、ｍＲＮＡを封入している脂質ナノ粒子の組成物であって、前記ｍＲＮＡが、目的の１つ以上のタンパク質またはペプチドをコードする、組成物。